CHIMIE GENERAL I FARMACEUTIC

TEHNOLOGIA, ANALIZA I STANDARDIZAREA SOLUIEI IZOFURAL 0,05% 1 Livia Unc , !O"#a S$av%&, 1'"a(i)i& 'a"ica, *Diana G &an(a, *'i+&%" ,&i-aca&i 1 Centrul tiinific n domeniul Medicamentului, LASCM 2 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic, 3 La oratorul !nfecii intra"#italiceti S ))a&. !$ohidrafural i" re"earched %ith the #ur#o"e to create the rational #harmaceutical form for concrete "ituation" &"olution' and ela oration of (A) for thi" medicinal form* +here %a" ela orated the o#timal com#o"ition of "olution, method" of anal,"i" and "tandardi$ation of it* +here %a" made a re"earch on the "ta ilit, and determination of "torage term* R%/ )a$ !$ohidrafuralul e"te cercetat #entru crearea unor forme farmaceutice raionale #entru "ituaii concrete &"oluie' i ela orarea )A( #entru ace"te forme medicamentoa"e* S-au ela orat com#o$iia o#timal a "oluiei, metodele de anali$ i "tandardi$are #entru acea"ta* S-a cercetat "ta ilitatea i "-a determinat termenul de .ala ilitate* In$&+( c%&% A"t$i e"te greu de conce#ut tera#ia antiinfecioa" fr utili$area unui numr im#onant de remedii anti acteriene* )e.ine foarte im#ortant lrgirea "#ectrului tratamentului medicamento" a olilor infecioa"e, deoarece multitudinea remediilor exi"tente, de"tul de efecti.e n #re$ent nu "unt "cutite de diferite reacii ad.er"e* )eri.aii /-nitrofuranului nu con"tituie o exce#ie* 0n ultimile decenii a "#orit intere"ul fa de ace"t gru# de medicamente* (e-am #ro#u" ela orarea unei forme farmaceutice cu coninut de !$ohidrafural &!12'* 3"te cuno"cut fa#tul, c determinarea calitii medicamentelor nu e"te #o"i il fr "tudierea com#lex a #ro#rietilor "u "tanelor, ela orarea unor metode de anali$ i "tandardi$are "en"i ile, exacte, ra#ide i "#ecifice* Se #ro#une utili$area !$ohidrafuralului "u form de "oluie de u$ extern ca remediu anti acterian n diferite "tri #atologice* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% Cercetrile "-au efectuat #e trei "erii de "u "tan* 4entru ela orarea metodelor fi$icichimice de anali$ a fo"t utili$at "#ectrofotometru 56-6!S 74er8in 3lmer9 Lam da-:;, fotocolorimetrul C2C-3* R%/ "$a$% <eieind din #articularitile farmacologice, a fo"t "electat concentraia de #rinci#iu acti. de a$= ;,;/ >* Ace"te concentraii a"igur exercitarea efectului* )eoarece !12 nu "e di$ol. n a#, n calitate de "ol.eni "-au utili$at 43?-:;; i #ro#ilenglicol* 0n urma cercetrilor "-a con"tatat, c formula ela orat e"te o#timal i core"#unde exigenelor 2< @ #entru "oluii &ta elul 1'*
A fo"t ela orat tehnologia de fa ricaie a "oluiei !$ohidrafural ;,;/>* Schema fluxului tehnologic e"te #re$entat n figura 1*

Se m"oar cu cilindrul gradat .olumele calculate de #olietilenglicol, #ro#ilenglicol i a# #urificat* !$ohidrafuralul "e triturea$ la moAar, a#oi "e adaug #olietilenglicolul n #oriuni mici la o ame"tecare continu, #Bn cBnd "e o ine o "u"#en"ie fin i omogen* Su"#en"ia o inut "e trece cantitati. ntr-un .a" dotat cu malaxor, unde "e adaug cantitile calculate de #ro#ilenglicol i a# #urificat* Soluia "e ame"tec ine #Bn la o inerea unui ame"tec omogen* 1:

Tabelul 1
Formula de fabricaie a soluiei Izohidrafural 0,05%

1 2 3 :

D%n )i&%a )a$%&i%i 5&i)% !$ohidrafural 43?- :;; 4ro#ilenglicol A# #urificat TOTAL

Can$i$a$%a ;,;/ g H; ml 2; ml #n la 1;; ml 100,0 )"

4rodu"ul farmaceutic e"te utili$at n calitate de remediu antimicro ian de u$ extern* Soluia !$ohidrafural ;,;/> e"te form farmaceutic original* (u e"te de"cri" n 2armaco#eele altor ri* La ela orarea )+( #entru forma farmaceutic "-a inut cont de cerinele 2armaco#eei de Stat ed* @!, a 2armaco#eei <omBne i alte acte normati.e, care reglementea$ ordinea ela orrii )+( #entru forme medicamentoa"e * D%-c&i%&%a #re#aratului e"te a#reciat n a$a cercetrii a"#ectului exterior a trei "erii, o inute conform #roce"ului tehnologic de"cri" anterior* 4ro ele anali$ate au #re$entat un lichide tran"#arente, de culoare gal en, fr miro", uleioa"e la #i#it, ."coa"e* I(%n$i1ica&%a #re#aratului "-a #etrecut #rin prin metode chimice #entru gru#ele funcionale "#ecifice &ta elul 2'* Tabelul 2 Rezultatele reaciilor de identificare a Izohidrafuralului n soluie R%a#%n$ Sol*(aC1 ;,1 M )imetilformamid (itro#ru"id de "odiu <eacti.ul (ee"ler 6anadat de amoniu 4erhidrol i (aC1 3;> 5H6 " "e determin #rin metoda #oteniometric* 6aloarile #1-ului fiind inclu"e ntre .alorile D,; - E,;* D%n-i$a$%a "e determin conform #re.ederilor 2< !@*C*3, #*FED fiind de la ;,E/; #Bn la 1,2 gGml* Uni1+&)i$a$%a v+" ) " i de "oluie "-a determinat conform cerinelor CC+ H:-:F2-E/ I)e.ieri admi"i ile de la .olumul nominal #entru #re#aratele medicamentoa"e indu"triale* 4entru (+/a&% e"te ela orat metoda "#ectrofotometric n 6!S n a$a reaciei de culoare cu "oluia de (aC1 de ;,1M* 1; ml "oluie de anali$at "e trec cantitati. ntr-un alon cotat cu ca#acitatea de 2/ ml, la care "e adaug 1; ml a# #urificat i ;,1 g clorur de "odiu* Ame"tecul 1/ E1%c$ <ou-oranA ?al en-cafeniu <ou-ntunecat 4reci#itat cafeniu <ou tre#tat trece n al a"tru-.er$ui )ecolorarea "oluiei S%n-i2i"i$a$%a,3#4)" 1;; 1;; 3;; 2;; 2;; 2;;

o inut "e ncl$ete #e aia de a# #n la di"#ariia cri"talelor clorurii de "odiu* )u# care "e aduce #n la cot cu a# #urificat &"oluia A'* La ;,/ ml "oluie A "e adaug D,/ ml a# #urificat i 2 ml "oluie de hidroxid de "odiu de ;,1 molGl* )u# 2; min "e m"oar a "or ana ace"tei "oluiei la :1; J 2 nm, la "#ectrofotometru n cu. cu gro"imea 1cm*

1H

4regtirea "#aiilor de #roducere i a utilaAului

CBntrirea !$ohidrafuralului M"urarea .olumului nece"ar de #olietilenglicol

!ncor#orarea i$ohidrafuralului n #olietilenglicol "u form de "u"#en"ie

M"urarea .olumului nece"ar de #ro#ilenglicol i a# #urificat

Ame"tecarea "u"#en"iei cu #ro#ilenglicol i a# #urificat

Controlul calitii

S#larea i u"carea flacoanelor

Condiionarea "oluiei n flacoane

)o#uri, c#cele, etichete

3tanarea i nchiderea flacoanelor* 3tichetarea*

Cutii de carton, etichete

Am alarea flacoanelor n cutii colecti.e

,RODUS FINIT Controlul calitii

)e#o$itare n carantin )e#o$itare #rodu" finit

Figura 1. Schema fluxului tehnologic de preparare a soluiei Izohidrafural 0,05% 4aralel "e determin a "or ana "oluiei "tandarde de !12*

1D

Soluie de referin a "er.it ame"tecul din E ml a# #urificat i 2 ml "oluie de hidroxid de "odiu de ;,1 molGl* Coninutul i$ohidrafuralului n "u "tan "-a calculat conform formulei= A1 K a K ;,/K 2/K 1; @ L ----------------------------- , n care A2 K ma 2/;K 1;K 1; K ;,/ X - cantitatea de izohidrafural n proba de analizat (%); 1 - ab!orban"a !olu"iei probe; 2 # ab!orban"a !olu"iei !tandard $%F; a - ma!a de !ub!tan"& !tandard $%F; ma - ma!a de !ub!tan"& analizat& $%F 'repararea !olu"iei !tandarde de $%F ;,;/g &ma" exact' "tandard de !12 "e di$ol. n 1/; ml a# #urificat ntr-un alon cotat de 2/; ml, la care "e adaug 2 g de clorur de "odiu, i "e ncl$ete #n la fier ere #Bn la di$ol.area "u "tanei* )u# rcirei "e aduce #Bn la cot cu acelai "ol.ent &"ol* A'* La ;,/ ml "oluie A "e adaug D,/ ml a# #urificat i 2 ml "oluie de hidroxid de "odiu de ;,1 molGl* )u# 2; min "e m"oar a "or ana ace"tei "oluiei la :1; J 2 nm, la "#ectrofotometru n cu. cu gro"imea 1cm* Coninutul de !12 n #ro a anali$at tre uie " fie cel #uin ;,;:E > i cel mult ;,;/H >* 4entru cercetarea "ta ilitii i termenului de .ala ilitate a Soluiei !$ohidrafural ;,;/> "a #etrecut #"trarea ex#erimental #rin metoda 7)egradrii accelerate9 la tem#eraturi de :; ;C i H;;C* +ermenul de .ala ilitate "ta ilit e"te 2 ani* C+nc" /ii 1* S-a "ta ilit com#onena o#timal a "oluiei !$ohidrafural ;,;/>* +ehnologia de"cri" a "tat la a$a ela orrii regulamentului tehnologic #entru #roducerea "oluiei* 2* S-a efectuat anali$a i "tandardi$area formei farmaceutice #rin ela orarea documentelor analitice de normare a calitii* 7i2"i+#&a1i% 1* Fa&)ac+5%%a R+)8n9, (d. a X-a) (ditura medical&) *ucure+ti)2,,,; 2* Fa&)ac+5%%a E &+5%an9, 3d* a !6-a, 2;;2* 3* Fa&)ac+5%a (% S$a$, ed* @!, 6*1 i 2, 1FED, 1FEF*

TEHNOLOGIA I DETERMINAREA DIS,ONI7ILITII FARMACEUTICE ,ENTRU UNGUENTELE CU IZOHIDRAFURAL 1 ! Livia Unc , Nic+"a% Ci+2an , C&i-$ina Ci+2an , *'i+&%" ,&i-aca&i, 1O:ana ';-"+ <= 1 Centrul tiinific n domeniul Medicamentului, LASCM 2 Catedra +ehnologia medicamentelor 3 La oratorul !nfecii intra"#italiceti S ))a&. T<% $%c<n+"+#. an( 5<a&)ac% $ica" avai"a2i"i$. (%$%&)ina$i+n +1 i/+<i(&a1 &a" n# %n$ !$ohidrafural i" re"earched %ith #ur#o"e to create the rational #harmaceutical form for external a##lication &unguent'* +he eha.iour of acti.e "u "tance in different com#o"ition" of auxiliar, "u "tance" for unguent #re#aration %a" re"earched* +here %a" ela orated the o#timal com#o"ition and the #harmaceutical a.aila ilit, of thi" form %a" re"earched* R%/ )a$ 1E

!$ohidrafuralul e"te cercetat #entru crearea unor forme farmaceutice raionale #entru u$ extern &unguent'* S-a "tudiat com#ortamentul #rinci#iului acti. n diferite formule de exci#ieni #entru #re#ararea unguentului* A fo"t ela orat com#o$iia o#timal i "tudiat di"#oni ilitatea farmaceutic a ace"tei forme farmaceutice* In$&+( c%&% 0n #atologia uman infeciile "e#tico-#urulente, #ro.ocate de di.er"e microorgani"me #atogene, att gram-negati.e, ct i gram-#o$iti.e, ocu# un loc a#arte* 3le "e deo"e e"c #rin incidena nalt i con"ecine gra.e, care duc direct "au indirect la maAorarea ru"c a .alorii tratamentului #recum i a #agu ei economice morale i "ociale* +otodat, tratamentul infeciilor "e#tico-#urulente con"tituie o #ro lem dificil, cau$at de achi$iionarea re$i"tenii agenilor cau$ali fa de anti iotice cu utili$are larg n #ractica medical i #reurile nalte a remediilor anti acteriene im#ortate* Anume din ace"te con"iderente e"te foarte actual o inerea unor noi cla"e de com#ui organici, cu aciune enefic a"u#ra organi"mului* !$ohidafuralul &!12' e"te un deri.at de /nitrofuran, caracteri$at #rintr-un ir de a.antaAe, ca= "ta ilitate ndelungatM manife"tarea ra#id a aciuniiM li#"a #ro#rietilor iritante, cancerigene, em riotoxiceM acti.itate anti acterian naltM toxicitate de H-D ori mai Aoa" decBt nitrofuralul* 4oate fi utili$at ca remediu anti acterian n diferite "tri #atologice* (e-am #ro#u" ela orarea unei forme farmaceutice de u$ extern cu coninut de !$ohidrafural* 2orma medicamentoa" "emi"olid N unguent N "e utili$ea$ #e larg #entru tratarea olilor dermatologice, chirurgicale, n o "tretic i ginecologie, oftalmologie, #roctologie datorit eficacitii i comoditii a#licrii, #recum i unei iodi"#oni iliti acce#ta ile a #rinci#iului acti.* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% Cercetrile "-au efectuat #e trei "erii de "u "tan acti. !$ohidrafural, fiind utili$ai diferii exci#ieni i "u "tane auxiliare, cum ar fi= 4olietilenglicol, 6a"elina, Alcool "tearic, 4ro#ilenglicol, ?licerina, +%een E;, Lauril"ulfatul de "odiu, Alcool cetilic* 4entru cercetarea di"#oni ilitii farmaceutice "-a utili$at a#aratul #entru determinarea .ite$ei de cedare a #rinci#iului acti. #rin metoda de diali$ I Sol.ote"t N M9, "#ectrofotometru 56-6!S 74er8in 3lmer9 Lam da-:;, fotocolorimetrul C2C-3, Mem ran Mili#ore ;,22Om, )imetilformamid ca mediu de di$ol.are* R%/ "$a$% Acti.itatea anti acterian nalt a !$ohidrafuralului #ermite utili$area unor concentraii de"tul de mici de #rinci#iu acti. n forma farmaceutic* 0n "co#ul formulrii unguentului a fo"t "tudiat concentraia ;,1>, care a"igur o di"#oni ilitate un i exercitarea efectului farmacologic maxim* ?ama larg de exci#ieni ofer #o"i ilitatea utili$rii lor raionale, n "co#ul diriArii .ite$ei i inten"itii efectului n funcie de "co#ul tera#eutic urmrit* !$ohidrafurarul re#re$int o #ul ere maro, #ul.erulent, in"olu il n a#* din care cau$ "-au #recutat unguentele de ti# "u"#en"ie cu utili$area de exci#ieni i emulgatori core"#un$tori* 4entru a "electa formula o#timal a unguentului !12, a fo"t ncor#orat n exci#ieni de natur diferit* S-au cercetat #atru com#o$iii ce conin a$e de unguent de ti# emul"ie 5GA i AG5* 4entru formulare n com#o$iia exci#ientului com#lex "-au utili$at= 'olietilenglicol, care #re$int o "u "tan onctuoa", la.a il, care nu irit #ielea, #o"ed o un ca#acitate de ntindere i aderen fa de #iele, e"te indiferent din #unct de .edere fi$iologic i nu e"te in.adat de microorgani"me #o"endnd chiar aciune actericid* 43?urile #ot "u "titui gr"imile i i-au g"it a larg a#licare n dermatologie, deoarece "unt neiritante #entru #iele, au o un ca#acitate de ntindere fr a influena acti.itatea glandelor "udori#are i "e acee, nu o truea$ #orii #ielii*

1F

-a!elina, care #re$int o ma" al "au al -gl uie e"te omogen, onctuoa" la #i#it, filant, tran"lucid = 3xci#ientul "e caracteri$ea$ #rin "ta ilitate i con"er.a ilitate indefinit, inerie chimic fa de agentii oxidaiM tera#eutic .a"elina nu #re$int afinitate fa de gr"imea e#idermului* lcool !tearic N com#u" organic "olid de culoare al , fr miro", in"olu il n a#, "olu il n alcool, care #o"ed #ro#rieti emoliente i datorit ace"tui fa#t are loc #otenarea aciunea "u "tanei acti.e* lcool cetilic N 1exadecanol N Com#u" organic "olid de culoare al , fr miro", in"olu il n a#, "olu il n alcool* 4o"ed #ro#rieti emoliente datorit ace"tui fa#t are loc #otenarea aciunii "u "tanei acti.e* 'ropilenglicol # lichid incolor, ."co", higro"co#ic, cu gu"t dulce, .olatil i foarte "ta il, mi"ci il cu a#a, acetona* 3"te un un "ol.ent #entru "u "tanele medicamentoa"e* Are o higro"co#icitate "u#erioar glicerinei, reinind a"tfel a#a, #ro#rietate #e care nu i-o modific la .ariaii de umiditate ale mediului, #roteAnd a"tfel unguentul* .licerina N lichid ."co", incolor, fr miro", "olu il n a#, alcool, in"olu il n gr"imi, cu gu"t dulce, higro"co#ic, utili$at #e larg n formulrile farmaceutice* La adugarea glicerinei n unguent are loc m untira ela"ticitii ace"tuia* T/een 0, N lichid cu nuan #al, cu diferit grad de ."co$itate, ine "olu ili n a#* Se utili$ea$ n formele medicamentoa"e ca emulgator, "ta ili$ator i diluant* 1auril!ulfatul de !odiu N #ul ere al , fr miro" "#ecific, "olu il n a#* 3"te o "u "tan ten"ioacti.* Se utili$ea$ n #ractica farmaceutic ca agent de umectare #entru m untirea calitilor tehnologice i tera#eutice a diferitelor #re#arate* Are #ro#rieti de "ta ili$ator, emulgatorM are un rol im#ortant la difu$ia mem ranar a #ielei i mucoa"elor, reduce tim#ul de de$agregare a com#onentelor unguentului* 3xci#ienii de ti# 5GA "int uor de a#licat, cedea$ ra#id "u "tana acti. i n unele ca$uri fa.ori$ea$ #enetrarea* 0n #lu", "e nde#rtea$ uor #rin "#lare i de aceea "e mai nume"c a$e la.a ile* Pa$ele emul"i.e de ti#ul AG5 au o con"i"tenl un, ce a"igur caliti a.an"ate de intindere i aderare de e"uturi* 3le conin o fa$ a#oa" ncor#orat in fa$a gra", datorit #ro#rietilor emul"i.e ale emulgatorilor* 4o"ed ca#acitate de #enetrare tran"e#idermic i cedare a "u "tanelor medicamentoa"e, incor#orare redu", de aceea "e utili$ea$ ca exci#ieni #entru unguentele cu aciune #rotectoare i de "u#rafa* 4entru "electarea formulei o#timale a unguentelor cu !12 "-au #re#arat urmtoarele #re"cri#ii= !nguent pe baz" emulsi#" !$% (r*1 = !$ohidrofural ;,1g 4olietilenglicol :;; - 1E,3g Alcool "tearinic N 31,2g ?licerin N 2D,/g Lauril"ulfat de "odiu- F,12 A# #urificat N 13,Dml (r*2 = !$ohidrofural ;,1g 6a"elin al N 2/,;g Alcool "tearilic N 2/,;g 4ro#ilenglicol N 12,;g Lauril"ulfat de "odiu- 1,;g A# #urificat - 3D ml !nguent pe baz" emulsi#" %$! (r*3 = !$ohidrofural ;,1g +%een E; - 1;,;g Alcool cetilic N 2/,;g 6a"elin - :/,;g 5lei de .a"elin N 2;,;g A# #urificat 3/,; ml (r*: = !$ohidrofural ;,1g +%een E; - D,;g Alcool cetilic - 1D,;g 6a"elin al - 2/,;g ?licerin N 1/,;g A# #urificat -3H,;ml

2;

+ehnologia unguentului emul!ie cu !$ohidrofural &Com#* (r*1'*

2orma medicamentoa" "emi"olid #re"cri" #re$int un unguent emul"ie cu coninut de i$ohidrofural, greu "olu il n a#, exci#ieni hidrofili 4olietilenglicol :;;, "u "tan ten"ioacti. Lauril "ulfat de "odiu, emulgatori alcool "tearinic, glicerina*

0ntr-o #atentul de #orelan "e introduce 31,2g de alcool "tearinic, care "e to#ete la aia de a# la tem#eratura // ; N /E ; C, a#oi "e adaug F,12g lauril"ulfat de "odiu i "e ame"tec minuio", du# care "e adaug 1E,3g de 43? :;;, 2D,/g glicerin "u agitare continu* )u# emul"ionare,ame"tecul "e rcete #Bn la tem#eratura :;; N :/; C* ;,1g !$ohidrafural "e triturea$ la moAar cu 3-/ #icturi de a# #urificat fier Bnd* La "u "tana triturat din moAar "e adaug n 2- 3 re#ri$e re"tul a#ei #urificate*
Soluia "u "tanei medicamentoa"e "e incor#orea$ n a$a de unguent to#it i "e omogeni$ea$* Ame"tecul "e trece n reci#ient din "ticl ntunecat cu ca#acitatea 1;;g*

+ehnologia unguentului emul!ie cu !$ohidrofural &Com#* (r*2'* 2orma medicamentoa" #re$int un unguent-emul"ie cu coninut de i$ohidrafural, exci#ieni hidrofo i .a"elin al , "u "tan ten"ioacti. Lauril "ulfat de "odiu, emulgatori alcool "tearinic, #ro#ilenglicol* 0ntr-o #atentul de #orelan "e ntroduce 2/g de alcool "tearinic care "e to#ete la aia de a# la tem#eratura // ; N /E ; C, a#oi "e adaug 2/g .a"elin al , 1g lauril "ulfat de "odiu i "e ame"tec minuio", du# care "e adaug #ro#ilenglicol "u agitare continu* )u# emul"ionare, ame"tecul "e rcete #n la tem#eratura de :;; N :/; C* ;,1g !$ohidrafural "e triturea$ la moAar cu 3-/ #icturi de a# #urificat fier nd* La "u "tana triturat din moAar "e adaug n 2- 3 re#ri$e re"tul a#ei #urificate* Soluia "u "tanei medicamentoa"e "e adaug la a$a de unguent to#it i "e omogeni$ea$* Ame"tecul "e trece n reci#ient din "ticl ntunecat cu ca#acitatea 1;;g* +ehnologia unguentului emul!ie cu !$ohidrofural &Com#* (r*3'* 2orma medicamentoa" #re$int un unguent-emul"ie cu coninut de i$ohidrafural, exci#ieni hidrofo i .a"elin, ulei de .a"elin, emulgatori alcool cetilic, t%een E;* 0ntrNo #atentul de #orelan "e ntroduce 2/g de alcool cetilic care "e to#ete la aia de a# la tem#eratura /; ; N // ; C, a#oi "e adaug :/g .a"elin al , 2;g de ulei de .a"elin i "e ame"tec minuio", du# care "e adaug t%een E; "u agitare continu* )u# emul"ionare, ame"tecul "e rcete #Bn la tem#eratura :;; N :/; C* ;,1g !$ohidrafural "e triturea$ la moAar cu 3-/ #icturi de a# #urificat fier Bnd* La "u "tana triturat "e adaug la re"tul a#ei #urificate* La a$a de unguent to#it "e adaug "oluia "u "tanei medicamentoa"e i "e omogeni$ea$* Ame"tecul "e trece n reci#ient din "ticl ntunecat cu ca#acitatea 1;;g* +ehnologia unguentului emul!ie cu !$ohidrofural &Com#* (r*:'* 2orma medicamentoa" #re$int un unguent-emul"ie cu coninut de i$ohidrafural, exci#ieni hidrofo i .a"elin al , emulgatori alcool cetilic, t%een E;, glicerin* ;,1g !$ohidrafural "e triturea$ la moAar cu 3-/ #icturi de a# #urificat fier nd* La "u "tana triturat "e adaug re"tul a#ei #urificate* La a$a de unguent to#it "e adaug "oluia "u "tanei medicamentoa"e "e omogeni$ea$* Ame"tecul "e trece n reci#ient din "ticl ntunecat cu ca#acitatea 1;;g* Schema fluxului tehnologic de fa ricare a unguentelor cu !12 ;,1> e"te #re$entat n 2igura 1 * 4rodu"ul farmaceutic #oate fi utili$at n calitate de remediu anti acterian n diferite "tri #atologice* 3"te ine cuno"cut fa#tul c di"#oni ilitatea farmaceutic a "u "tanei medicamentoa"e din di.er"e forme e"te influenat n mare m"ur i de natura exci#ientului* 4entru a#recierea com#o$iiei o#timale i a exci#ienilor, care ar #ermite o inerea unui unguent cu aciune tera#eutic eficace i efecte "ecundare minime "-a reali$at cedarea !12 din

formele ela orate iar a#oi "-a determinat .alorile di"#oni ilitii farmaceutice, con"tanta .ite$ei de di$ol.are i tim#ul de nAumtire n formele medicamentoa"e #re#arate* Pregtirea spaiului de producere i a utilajului

Obinerea bazei de unguent

Pregtirea substanei medicamentoase

Emulsionarea excipientului

Pregtirea recipientelor

Incorporarea substanei medicamentoase n excipient

Omogenizare
Standardizare

Etichetare i ambalare

Produs finit

Figura 1. Schema fluxului tehnologic de fabricaie a unguentelor cu I&F 3.aluarea di"#oni ilitii unguentelor cu !12 ;,1> a a.ut ca +2i%c$iv - determinarea influenei a$ei de unguent &emul"ie 5GAM AG5' i a modului de incor#orare a i$ohidrafuralului a"u#ra eli errii ace"tuia in 2itro. 4entru do$area !12 n "co#ul e.alurii di"#oni ilitii farmaceutice din unguente "-a utili$at metoda "#ectrofotometric n 6!S* +ehnica de lucru= #e : tu uri de diali$ "e a#lic mem rana Mili#ore #e una din de"chideri i "e fixea$* Se introduce n fiecare tu cBte 1 g de unguent cu griA #entru a e.ita ulele de aer* Se fixea$ .a"ele de difu$ie #e un "tati. cu aAutorul clemelor de fixare* +u urile "e introduc n .a"ele de "ticl n care "e adaug /; ml dimetilformamid, co orBndu-le cu 1 cm "u ni.elul lichidului* La inter.ale egale de tim# #e #arcur"ul a F; min "e iau #ro e a cBte / ml din fiecare .a"* Se m"oar a "or ana "oluiei la "#ectrofotometru, folo"ind ca "oluie de control dimetilformamid* <e$ultatele do$rii !12 n diali$at "unt indicate n tabelul 1 +i figura 2. Tabelul 1 'alorile concentraiilor I&F n funcie de timpul dializei

C, %

0.12 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0 15 30 45 60 90

t, m in

C, % I comp. C, % II comp C, % III comp C, % IV comp

(odelul )* Ti)5 ", C% )in 1/ ;,;:1E 3; ;,;:EH :/ ;,;/F: H; ;,;/D: F; ;, ;HEF

(odelul )+ C% ;,;:2: ;,;/HE ;,;H13 ;,;HE3 ;,;HFD

(odelul ), C% ;,;1H3 ;,;/;E ;,;H3D ;,;D;E ;,;D12

(odelul )C% ;,;2/: ;,;::E ;,;HE1 ;,;EDH ;,;FH2

Figura 2. .raficul ced"rii principiului acti# din unguente n funcie de timp )u# cum "e o "er. din re$ultatele ex#u"e n ta elul 1i din figura 2, cedarea maxim are loc din com#o$iia (r :* +im#ul de nAumtire "au #erioada de "emielimenare a #re#aratului, notat con.enional #rin tQ, e"te tim#ul eliminrii din organi"m a unei Aumti din do$a admini"trat i a "or it i care core"#unde tim#ului de reducere de dou ori a concentraiei #la"matice a #re#aratului* Cunoaterea tim#ul de nAumtire e"te im#ortant #entru "ta ilirea inter.alelor dintre admini"trri, determinarea tim#ului n care concentraia #re#aratului n "Bnge la "u"#endarea tratamentului "cade la $ero, con"tatarea in"talrii unei concentraii con"tante a #re#aratului n fluxul "anguin la admini"trarea re#etat a ace"tuia* S-a calculat con"tanta .ite$ei de di$ol.are i tim#ul de nAumtire #entru toate com#o$iiile "tudiate* 6alorile o inute "unt redate n tabelul 2. Tabelul 2 'a"+&i"% c+n-$an$%i vi$%/%i (% (i/+"va&% 0i a $i)5 " i (% -%)i(ia"i/9 a IHF (in n# %n$% Denumirea Comp. r ! Comp. r $ Comp. r * Comp. r , K "# $%&' ( !&)$ "# $%+, ( !&)$ "# !%-, ( !&)$ "# $%'' ( !&)$ T **.' min $-.$ min *+%. min $'%& min

)in ta el e"te reliefat fa#tul, c cele mai nalte .alori ale con"tantei .ite$ei de di$ol.are "unt caracteri"tice #entru unguentul cu com#o$iia (r* : &alcool cetilic, .a"elin, glicerin, t%een E;'* 4entru aceiai com#o$iie e"te i cea mai "curt #erioad de nAumtire &2H minute'* C+nc" /ii 1= Ca re$ultat al ncor#orrii !12 n exci#ieni de natur diferit "-au cercetat #atru com#o$iii, ce conin a$e de unguent de ti# emul"ie 5GA i AG5* <e$ultatele cercetrilor au #ermi" "electarea com#o$iiei o#time a unguentului cu !12* != 3.aluarea di"#oni ilitii farmaceutice a com#o$iiilor ela orate denot cedarea maxim a #rinci#iului acti. din com#o$iia #atru, #entru care #oate fi ela orat documentaia analitic de normare a calitii* 7i2"i+#&a1i% 1= Purgot ?*, Purgot R*L*, Methode" !n"trumentale" dSAnal,"e ChimiTue et A##lication" Methode" chromatogra#hiTue", electro#hore"e" et methode" "#ectrale", 3dition" Medicale" !nternationale", 2;;:*

!= ?recu !* Structura cri"talin i iodi"#oni ilitatea "u "tanelor medicamentoa"e* Pucureti* N 1FE:* *= Leucu S*3*- Piofarmacie i farmacocinetic N 3ditura )idactic, CluA-(a#oca, 2;;2*

ELA7ORAREA METODEI S,ECTROFOTOMETRICE DE DOZARE A METIFERONULUI I &i% Ti<+n, Livia Unc , '"a(i)i& 'a"ica, O:ana ';-"+ <, R+)an Ci+2an La oratorul Anali$, Standardi$are i Controlul medicamentului, C)M S ))a&. T<% %"a2+&a$i+n +1 -5%c$&+5<+$<+)%$&ic )%$<+( 1+& > an$i$a$iv% (%$%&)ina$i+n +1 )%$i1%&+n +he ne% com#onent from i$otioureic deri.ati.e N Metiferon i" re"earched* +he 56 "#ectro#hotometric method of Tualitati.e and Tuantitati.e determination for thi" "u "tance %a" ela orated* +here %ere re"#ected all control #arameter"= linearit,, "electi.it,, exactitude and #reci"ion* +hi" method ha" een included in #roAect of A() for thi" #harmaceutical #roduct* R%/ )a$ 3"te cercetat un nou com#u" din gru#ul deri.ailor i$otioureici - Metiferonul* A fo"t ela orat metoda "#ectrofotometric de identificare i do$are #entru acea"t "u "tan* S-au re"#ectat #arametrii de control= linearitatea, "electi.itatea, exactitatea i #reci$ia* Acea"t metod a fo"t inclu" n #roiectul )A( #entru ace"t #rodu" farmaceutic* In$&+( c%&% Metiferonul e"te un deri.at i$otioureic cu coninut de fo"for, cu aciune .a"ocon"trictoare, #o"ed un efect antihi#oten"i. marcat n condiii o inuite i acti.itate antihi#oten"i. nalt #e fundalul de aciune al U1 N adreno locantelor* S#re deo"e ire de "im#atomimetice nu "timulea$ "i"temul "im#atic, nu #ro.oac tahicardie, nu modific echili rul acido- a$ic i electrolitic i nu cau$ea$ hi#oten"iune "ecundar* 5tili$area lui e"te raional atBt #entru #re.enirea "cderii #re"iunii arteriale cBt i #entru nlturarea dereglrilor hemodinamicii "i"temice* 0m#reun cu ceilali deri.ai din ace"t gru#, metiferonul #oate fi utili$at cu "ucce" n tera#ia antihi#oten"i. de urgen* 3la orarea metodelor de anali$ calitati. i cantitati. .a #ermite "tandardi$area ace"tei "u "tane i ntocmirea documentelor analitice de normare a calitii* S#ectrofotometria de a "or ie n ultra.iolet i .i$i il &56-6!S' e"te con"iderat ca una din metodele cla"ice de anali$ a medicamentelor, dei im#ortana ei nu "-a diminuat n tim#* Mai mult chiar, #rin cu#larea ei cu alte metode de anali$, domeniile de a#licaii ale "#ectrofotometriei continu " crea"c, #o#ularitatea ei "e ex#lic n #rimul rBnd #rin fa#tul, c e"te o tehnic de anali$ "im#l, ra#id i relati. ieftin, iar numrul im#untor de lucrri de "#ecialitate din ultimii ani demon"trea$ intere"ul cercettorilor fa de acea"t metod* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% A fo"t cercetat "u "tana Metiferon en gro!! &trei "erii de #rodu"'* 4entru ela orarea metodei "#ectrofotometrice de anali$ a fo"t utili$at "#ectrofotometrul Agilent +echnologie" F/;;*

R%/ "$a$% S#ectrofotometria de a "or ie n ultra.iolet &56' "-a utili$at #entru identificarea Metiferonului "u "tan* Au fo"t determinate "#ectrele 56 a "oluiilor a#oa"e n regiunea 1F;-32; nm* S#ectrul o inut e"te artat n figura 1*
0.80

0.7

0.6

0.5

0.4

)
0.3

0.2

0.1

0.00

190.0

200

220

240

260 nm

280

300

320

330.0

Figura 1. Spectrul !' de absorbie al soluiei apoase (etiferon +0 /g$ml S-a examinat #o"i ilitatea folo"irii ace"tei metode "#ecifice #entru do$area Metiferonului n "u "tan* Soluia etalon a fo"t #re#arat din Metiferon recri"tali$at con"ecuti. din a# idi"tilat* A fo"t o inut Metiferon cu #uritate FF,ED>, #re$entBndu-"e du# u"care ca i o ma" cri"talin acicular, cu #unctul de to#ire de 1:;,H;C* 4uritatea "-a "ta ilit #rin cromatografie de lichide de nalt #re"iune* Soluia etalon "-a #re#arat cu concentraia 2; VgGml n a# idi"tilat* +ehnica de #re#arare= ,)1 g 0imetilfosfit1 S1metilizotiuroniu (3etiferon !ub!tan"& !tandard) !e trec ntr-un balon cotat cu capacitatea de 1,, ml) !e dizol2& n 4, ml ap& purificat&) !e completeaz& 2olumul !olu"iei cu acela+i !ol2ent p5n& la cot& +i !e omogenizeaz&. 1 ml !olu"ie ob"inut& !e trec ntr-un balon cotat cu capacitatea de 4, ml) !e completeaz& 2olumul !olu"iei p5n& la cot& cu ap& purificat& +i !e omogenizeaz&* S-a o inut "#ectrul n domeniul 1F;-3;; nm, referin fiind a#a idi"tilat* 4e "#ectru "e o "er. dou maxime de a "or ie, n regiunea 1FD-2;3 nm i 21F-221 nm* <eieind din fa#tul, c la 2;; nm a "or lumina mai multe "u "tane, inclu"i. i im#uritile, a fo"t alea" n calitate de lungime de und analitic WL221nm* 4entru "ta ilirea inter.alului de concentraii n care "e re"#ect legea a "or anei "-a con"truit diagrama de etalonare* 4entru acea"ta ntr-un alon cotat de /; ml "-a #re#arat "oluia etalon de a$ din ;,;/;; J;,;;;1g Metiferon de dou ori recri"tali$at i a# idi"tilat #Bn la cot* Soluiile etalon de lucru "-au #re#arat #rin diluarea "oluiei de a$ ntr-o regre"ie #tratic* Sau o inut a"tfel H "oluii cu concentraiile de 1,:F31M 3,;31M H,1E/M 12,:1;M 2/,;:1M /;,1;D OgGml* S-au o inut "#ectrele de a "or ie ale ace"tor "oluii* S-a urmrit .ariaia lungimii de und la a "or ana maxim i .aloarea maximelor de a "or an &figura 2'* 0n urma determinrilor "-a con"tatat limita de detecie ;,3D;;J ;,;2 OgGmlM eroarea relati. a determinrilor .aria$ de la J;,31> la concentraii :; OgGml, #Bn la J3> la concentraia 1,/H2/ OgGml* Sen"i ilitatea metodei e"te de ;,3 OgGml, iar domeniul de liniaritate e"te cu#rin" ntre concentraiile de 3 i /; OgGml* A "or ana "#ecific molar la 2; ;C e"te de A>cmL 2/; Xua*GcmY* 0n a$a cercetrilor efectuate a fo"t ela orat tehnica de do$are "#ectrofotometric a Metiferonului = ;,;/g &ma" exact' Metiferon "e #la"ea$ ntr-un alon cotat de /; ml, "e adaug 2; ml a# #urificat i "e ncl$ete #e aia de a# #Bn la "olu ili$area com#let a

"u "tanei, a#oi "e aduce #Bn la cot cu acelai "ol.ent &"oluia A'* 1ml "oluie A "e diluea$ cu a# #urificat ntr-un alon cotat de /; ml &"oluia P'*
A 0,4

0,3498 0,3 0,2 0,1 0 0,0125 1,4931 3,031 6,185 12,41 25,041 50,107 0,1401 0,0698 0,2114 0,2699

C, g/ml

Figura 2. 2urba de etalonare a soluiei apoase de (etiferon Se citete a "or ana "oluiei P la "#ectrofotometru, la lungimea de und 221 nm, n cu.a cu gro"imea "tratului 1; mm, utili$Bnd n calitate de "oluie de com#en"are a#a #urificat* 4aralel "e citete a "or ana "oluiei etalon cu concentraia 2; VgGml n a# idi"tilat* Coninutul Metiferonului n "u "tan "-a calculat conform formulei= A: ? )+ ? 1 ? 50 ? 50? 100 A: ? )+ ? 50 @ A 666666666666666666666666666666666 A 66666666666666666 , A+ ? ): ? 100 ? 50? 1 A+ ? ): 6n care7 8 # ab!orban"a !olu"iei prob& de analizat; o # ab!orban"a !olu"iei etalon de 3etiferon; mo # ma!a probei de 3etiferon utilizat& la prepararea !olu"iei etalon) g; m8 # ma!a probei de analizat) g; Coninutul de 0imetilfosfit1 S1metilizotiuroniu (Metiferon' n #re#arat tre uie " fie cel #uin FF,; > i cel mult 1;1,; >* S-a determinat "electi.itatea metodei de do$are #rin anali$a unei #ro e martor* La lungimea de und de 221 nm core"#un$toare determinrii 0imetilfosfit1 S1metilizotiuroniului, #ro a martor a condu" la o .aloare a a "or anei de ;,;;1* 4reci$ia metodei de do$are "e a#recia$ #rin coordonarea re$ultatelor mai multor "erii de determinri re#etate, efectuate #e aceiai #ro "au #e mai multe eantioane #rele.ate dintr-o #ro mic omogen* )in #unct de .edere cantitati., #reci$ia "e ex#rim n general #rin a aterea "tandard i a aterea relati. "tandard* 0n ca$ul metodei de do$are a 0imetilfosfit1 S1metilizotiuroniu "-au anali$at trei #ro e inde#endente, #entru fiecare din ace"tea efectuBndu-"e cBte cinci determinri conform metodei de"cri"e la do$are* S-a determinat .aloarea medie glo al N FF,FD>M a aterea relati. glo al e"te ;,;3H>M a aterea relati. "tandard &<S)' e"te ;,;H>* Condiia de admi"i ilitate #re.ede, c o metod #oate " fie con"iderat re#roducti. dac <S)Z2* )u# cum "e o "er., acea"t condiie e"te nde#linit, aa dar metoda e"te #reci" &ta elul 1'* C+nc" /ii 1* S-au "ta ilit condiiile o#time de identificare i do$are a Metiferonului #rin metoda "#ectrofotometric* Metoda e"te exact i re#roducti il, erorile fiind n limitele admi"e de exigenele controlului medicamentelor #entru "u "tana acti.* 2* Metoda "#ectrofotometric ela orat e"te inclu" n #roiectul )A( #entru Metiferon en gro!! la com#artimentele Iidentificare9 i Ido$are9*

Tabelul 1 Eva" a&%a -$a$i-$ic9 a &%/ "$a$%"+& (+/9&ii 0imetilfosfit1 S1metilizotiuroniului ;n - 2-$anB9 S%&ia @% FF,FF FF,FE FF,F/ 1;;,;1 FF,FH FF,EF FF,F1 FF,F; 1;;,;2 1;;,;3 FF,FD 1;;,;/ 1;;,;: FF,F1 FF,ED @ T S S! S: CD E:, %

;1;;

FF,FE

2,DE

;,;2:

;,;;;/E

;,;11

;,;3

;,;:;

;2;;

FF,F/

2,DE

;,;HF

;,;;:D/

;,;31

;,;F;

;,;F2

;,;:; FF,FD 2,DE ;,;3/ ;,;;12/ ;,;1H ;,;:: Media ;,;H

;3;;

7i2"i+#&a1i% 1* 7a"a%-c C=, Metode "#ectrofotometrice a#licate n controlul medicamentelor, (ditura medical&) *ucure+ti)199:; 2* Fa&)ac+5%%a R+)8n9, (d. a X-a) (ditura medical&) *ucure+ti)2,,,; 3* Fa&)ac+5%%a E &+5%an9, (d. a $--a) 2,,2. :* L= Unc , ' ='a"ica, '=G<icav;i, 3la orarea metodei "#ectrofotometrice de do$are #entru difetur i #rofetur, nale +tiin"ifice a ;<3F =>icolae Te!temi"anu?) @hi+in&u) 2,,1.

UTILIZAREA CROMATOGRAFIEI ,E STRAT SU7IRE FN ANALIZA METIFERONULUI ! I &i% Ti<+n, 1Livia Unc , 1'"a(i)i& 'a"ica, *'ic$+& G<icav;i, 1O"#a S v+&c<ina= 1 Centrul tiinific n domeniul Medicamentului, LASCM 2 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic, 3 Catedra 2armacologie i 2armacologie clinic S ))a&. T<% -% +1 $<% $<in "a.%& c<&+)a$+#&a5<. in ana".-i- +1 )%$i1%&+n +he thin la,er chromatogra#h, method for identification and "#ecificall, im#uritie" determination in "u "tance Metiferon %a" ela orated* +he chromatogra#hic "e#aration %a" reali$ed in the "ol.ent" ","tem i"o#ro#,l alcohol N chloroform Nammoniac concentrate &:=E=1'* +he ela orated method %a" included in M2+ #roAect of Metiferon en gro!!. R%/ )a$ A fo"t ela orat metoda cromatografic n "trat "u ire de "or ent #entru identificarea i determinarea im#uritilor "#ecifice n "u "tana Metiferon* Se#ararea cromatografic "-a reali$at n "i"temul de "ol.eni alcool i$o#ro#ilic- cloroform- amoniac concentrat &:=E=1'* Metoda ela orat a fo"t inclu" n #roiectul M2+ #entru Metiferon en gro!!.

In$&+( c%&% Pa$at #e folo"irea #roce"elor de ad"or ie i re#artiie n condiii dinamice, metoda cromatografic #o"ed o eficien nalt la "e#ararea ame"tecurilor de "u "tane medicamentoa"e cu o "tructur i #ro#rieti a#ro#iate, la identificarea lor i determinarea cantitati.* )e aceea acea"t metod e"te folo"it #e larg n anali$a farmaceutic* Cromatografia #e "trat "u ire &CSS', cea mai r"#Bndit metod #lanar, e"te o metod "en"i il, reali$at #e un "trat fin de fa$ "taionar* Selectarea "ol.entului "au a ame"tecului de "ol.eni #entru de.elo#are e"te o eta# de im#ortan maAor n ela orarea tehnicii de cromatografiere i e"te n corelare direct cu #ro#rietile fi$ico-chimice ale "u "tanei anali$ate* Metiferonul e"te o "u "tan nou din gru#ul deri.ailor i$otioureici cu coninut de fo"for, cu #ro#rieti .a"ocon"trictoare, #o"ed un efect antihi#oten"i., marcat n condiii o inuite i acti.itate antihi#oten"i. nalt #e fundalul de aciune al U1 N adreno locantelor* S#re deo"e ire de "im#atomimetice nu "timulea$ "i"temul "im#atic, nu #ro.oac tahicardie, nu modific echili rul acido- a$ic i electrolitic, nu cau$ea$ hi#oten"iune "ecundar, are aciune calmant, reduce tem#eratura cor#oral i nece"arul de oxigen de ctre organi"m* 5tili$area lui e"te raional #entru #re.enirea "cderii #re"iunii arteriale, dereglrilor hemodinamicii "i"temice, echili rului acido- a$ic i regimului de oxigenare a organi"mului, #entru acordarea a"i"tenei de urgen n hi#oten"iunea arterial acut de gene$ di.er"* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% S-a utili$at "u "tana acti. )imetilfo"fit- S-metili$otiuroniu, uree i tiouree, acce#tate "#re utili$are n "co# medicinal* <eacti.i i "ol.eni #re#arai n core"#undere cu #re.ederile 2armaco#eei <omBne, ed* @M #lci cromatografice Silicagel ?22/: i Silufol 56-2/:* R%/ "$a$% 0n calitate de im#uriti "#ecifice n )imetilfo"fit- S-metili$otiuroniu e"te #o"i il #re$ena ureei i merca#tanilor &#rodu"e de degradare' i tioureei &#rodu" iniial de "inte$', fa#t confirmat i #rin cercetrile ulterioare= )&+ 3 4 44 7 1 2 &, 5 S 5 2 6 )&+ 3 5 8 932 &, : 0imetilfosfit S1metilizotiuroniu )a3& &+3 3 44 &+) 5 23 5 )&+ 7 2 &, 5 S& 7 )a3 5 8932 &, : Se#ararea cromatografic a Metiferonului i a im#uritilor #o"i ile "e efectuea$ #e un ame"tec model, care con"t din "oluie a#oa" 1;> Metiferon i "oluii ;,1> uree i tiouree* 0n #roce"ul ela orrii metodei au fo"t cercetate "i"teme de de.elo#are cu caracter acid, neutru i a$ic* La folo"irea "i"temelor acide mo ilitatea "u "tanei de a$ era mic, "#oturile erau "la #ronunate* 0n mediu neutru de a"emenea a#reau "#oturi "la conturate* 0n "i"temele de de.elo#are cu caracter a$ic au fo"t o inute .alori ridicate ale <f-ului atBt ale "u "tanei de a$, cBt i a im#uritilor #o"i ile* &ta elul 1*' 4entru lucru a fo"t alea" "i"tema de "ol.eni alcool i$o#ro#ilic-cloroform- "oluie concentrat de amoniac n ra#orturile :=E=1* Cromatograma a fo"t #ri.it n lumin 56 cu lungimea de und 2/: nm, a#oi "-a #ul.eri$at cu "oluia de #-dimetil-amino en$aldehid* Acea"t "i"tem de "ol.eni a fo"t inclu" n #roiectul M2+ #entru 7Metiferon9 i 7Soluie Metiferon 1;> #entru inAecii9* 'repararea !olu"iei 1,% 3etiferon7 1g de "u "tan &ma" exact' "e di$ol. n 1; ml a# #urificat* 'repararea !olu"iei ,)1% tiouree7;,;/g tiouree &ma" exact' "e #la"ea$ n alon cotat de /; ml, "e di$ol. i "e aduce #Bn la cot cu a# #urificat* Tabelul 1

Aezultatele cromatografiei n !trat !ub"ire n diferite !i!teme de de2elopare <f (r* Si"tema de de.elo#are <f uree "u <ftio"t* ure de e a$ ;,:/ ;,D; ;,2/ ;,:F ;,/1 ;,H; ;,/2 0,>5 ;,;F ;,1; ;,:D ;,ED ;,:E ;,:F ;,EH 0,,5 ;,H2 ;,/H ;,D: ;,1D Adnotare

1* 2* 3* :* /* ;

D* E* F* 1;*

Alcool etilic FH> Alcool etilic-a# #urificat &1=1' Amoniac-cloroform-#ro#anol &1=H=:' Amoniac-cloroform-#ro#anol-2 &3=1=H' Amoniac-cloroform-#ro#anol-2 &/=1=2' %moniac conc 5 alcool izopropilic 1cloroform1 1 9*<-<=: Amoniac-metilenclorur#ro#anol-2 &1=E=:' Amoniac-metilenclorur#ro#anol-2 &3=1=2' Alcool etilic-aceton &1=1' +rietilamin-cloroform#ro#anol-2 &3=1=2'

;,2D ;,:: ;,2; ;,3; ;,:F 0,+ ;,/2 ;,;E ;,31 ;,:3

"#oturi m#rtiate "#oturi m#rtiate .alori a#ro#iate ale <f .alori a#ro#iate ale <f .alori a#ro#iate ale <f Spoturi bine conturate Mo ilitate redu" #entru "u "tan Mo ilitate redu" #entru "u "tan "#oturi m#rtiate "#oturi m#rtiate

'repararea !olu"iei ,)1% uree7 ;,;/g uree &ma" exact' "e #la"ea$ n alon cotat de /ml, "e di$ol. i "e aduce #Bn la cot cu a# #urificat* 'repararea ame!tecului model7 2,/g Metiferon, cBte ;,;2/g uree i tiouree "e #la"ea$ n alon cotat de 2/ ml, "e di$ol. i "e aduce #Bn la cot cu a# #urificat* 'repararea !olu"iei p-dimetilaminobenzaldehid&7 ;,/g #-dimetilamino en$aldehid "e di$ol. n / ml acid clorhidric diluat i "e ame"tec cu 2; ml i$o#ro#anol* Soluia "e folo"ete #roa"#t #re#arat* 4entru a#recierea "emicantitati. a coninutului de im#uriti, cromatografierea a fo"t #etrecut n #re$ena martorilor* +ehnica de lucru ela orat d #o"i ilitatea de a determina ureia n limitele ;,;/-1> i tiouree n limite ;,2-1>* Tehnica de lucru7 4e linia de "tart a #lcii cromatografice 7Silufol 56 2/:9 "au Silicagel ?22/: "e a#lic cu micro"eringa cBte ;,;;/ ml ame"tec model, "oluii ;,1> tiouree i uree i "oluie Metiferon 1;>* 4laca "e u"uc la aer i "e de.elo#ea$ n "i"temul de "ol.eni alcool i$o#ro#ilic- cloroform - "oluie concentrat de amoniac &:=E=1'* )u# ce frontul de "ol.eni migrea$ circa 1;cm de la linia de "tart, cromatograma "e "coate, "e u"uc la aer 1/ min i "e examinea$ la lumina 56 la lungimea de und 2/: nm* 4e cromatogram tre uie " fie dou "#oturi, core"#un$toare Metiferonului "u "tan i Metiferonului din ame"tecul model* 4entru a ne con.inge de li#"a im#uritilor, #laca "e re.elea$ cu "oluie #dimetiamino en$aldehid i "e ncl$ete tim# de 1/ minute la H;;* S#oturile de uree i tiouree "e colorea$ n gal en* <e$ultatele o inute "unt #re$entate n cromatograma din figura 1* @ontrolul utilit&"ii !i!temului cromatografic. Si"temul cromatografic "e con"ider util dac nde#linete urmtoarele condiii= la examinarea n lumin 56 "e o "er. o "e#arare de"luit a "#oturilor de difetur i tioureeM

#e cromatogramele "oluiilor de uree i tiouree "#oturile "e de"lue"c clar*

, 2 # !olu"ie de uree; >ot&7 1 # ame!tec model; B # !olu"ie tiouree; C # !olu"ie 3etiferon

2igura 1* Cromatograma Metiferonului n #re$ena ame"tecului model, ureei i tioureei n "i"temul de de.elo#are alcool i$o#ro#ilic - cloroform- amoniac &:=E= 1' C+nc" /ii Metoda cromatografiei #e "trat "u ire #ermite determinarea #re$enei im#uritilor #o"i ile n "u "tana Metiferon= a ureei n limitele ;,;/-1,2> i a tioureei n limite ;,2-1>* +ehnica de lucru ela orat a fo"t inclu" n #roiectul M2+ #entru Metiferon en gro!!* 7i2"i+#&a1i% 1* 2armaco#eea <omBn, 3d* a @-a, 3ditura medical, Pucureti,2;;;M 2* 2armaco#eea 3uro#ean, 3d* a !6-a, 2;;2* 3* 2armaco#ea de Stat, ed* @!, 6*1 i 2, 1FED, 1FEF* :* La$r M*, La$r )oina* Controlul medicamentelor*- Litografia*-!ai*-1FE;*- 3DD 4 * /* Li.iu <oman, Mariu" PoAi, <o ert Sndule"cu* 6alidarea metodelor de anali$ n control*- PucuretiM 3ditura medical* N 1FFE*-/ED 4*

IDENTIFICAREA METIFERONULUI ,RIN METODE CHIMICE I FIZICO6 CHIMICE I &i% Ti<+n, Livia Unc , '"a(i)i& 'a"ica, L ()i"a Fa2ian, O:ana 'i-"+ < Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic S ))a&. T<% c<%)ica" an( 5<.-ic+6c<%)ica" )%$<+(- +1 i(%n$i1ica$i+n +1 )%$i1%&+n +he ne% chemical com#onent from i$otioureic deri.ati.e grou# %ith #ho"#hor content i" re"earched* +he ela orated method" for identification %ill e included in normati.e anal,tical document" of Tualit, of thi" "u "tance* R%/ )a$ 3"te cercetat un nou com#u" chimic din gru#ul deri.ailor i$otioureici cu coninut de fo"for* Metodele de identificare ela orate .or fi inclu"e n documentele analitice de normare a calitii #entru acea"t "u "tan* In$&+( c%&%

Medicamentele au intrat cu a#lom n .iaa noa"tr cotidian, ucurBndu-"e de acelai "tatut ca i hainele, $iarele, alimentele, adic au de.enit indi"#en"a ile* Anual #e ma#amond a#ar circa 12;; de .arieti de com#ui noi, n ciuda fa#tului, c an"a unei noi "u "tane chimice de a fi finali$at ntr-un nou medicament de "inte$ e"te de ordinul 1=E;;;* Acea"t cifr n", e"te de#arte de a "e "ta ili$a, "e .or nregi"tra n deceniile urmtoare a"cen"iuni i mai "#ectaculoa"e* (umai n domeniul #atologilor cardio-.a"culare, care deine to#ul de frunte n "tati"tica mor iditii mondiale "e cuno"c #e"te /;;;; X3Y* )e.ine #rimordial lrgirea "#ectrului tratamentului medicamento" a maladiilor cardio.a"culare, deoarece .arietatea remediilor exi"tente n #re$ent nu "unt "cutite de diferite reacii ad.er"e* )eri.aii i$otioureici "unt un gru# de "u "tane, ce #o"ed aciune farmacologic .a"ocon"trictoare, hi#erten"i. #ronunat i de lung durat, datorit influenei directe a"u#ra mu"culaturii netede a #eretelui .a"cular* )in irul com#uilor i$otioureici deAa au fo"t .alorificate unele "u "tane* Metiferonul &)imetilfo"fit S-metili$otiuroniu' e"te o "u "tan nou, original din ace"t gru#, cu aciune .a"ocon"trictoare mu"culotro# direct* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% 4entru anali$a "#ectral au fo"t utili$ate "#ectrofotometre 56-6!S 74er8in 3lmer9 Lam da-:; i Agilent +echnologie" F/-;;* S#ectrele !< au fo"t determinate la "#ectrofotometrul 72+G!<-:1;;+,#eA9* La identificarea #rin metode chimice au fo"t utili$ai reageni i "ol.eni n core"#undere cu cerinele 2armaco#eei 3uro#ene* R%/ "$a$% )eterminarea identitii "u "tanelor #oate fi efectuat #rin metode fi$ice, chimice i fi$ico-chimice* <eaciile chimice, folo"ite n anali$a farmaceutic tre uie " fie "uccedate de un efect analitic= cderea de #reci#itat "au di$ol.area ace"tuia, a#ariia coloraiei "au "chim area ei, formarea com#uilor cu miro" "#ecific etc* La ela orarea reaciilor de identificare #entru metiferon au fo"t luate n con"ideraie #re$ena n molecul a gru#elor funcionale "#ecifice, a anionului fo"fat* 0n molecula metiferonului e"te #re$ent gru#a aminic alifatic, care condiionea$ reacia #o$iti. cu ninhidrina. La ncl$ire a#are o coloraie roie-.iolet* Sen"i ilitatea reaciei e"te de 2;; VgGml* Tehnica de lucru7 1g "u "tan "e di$ol. n 1; ml a# #urificat (!olu"ia )* La 2ml !olu"ie "e adaug 1ml "oluie hidroxid de "odiu 1molGl i 2ml "oluie ninhidrin* S-a determinat, c metiferonul formea$ cu ionii metalelor &Cd 2[, \n2[, Co2[, Cu2[' com#ui com#leci colorai* Mai "#ecific "-a do.edit a fi reacia cu ionul de cobalt n mediu bazic - n re$ultat a#are o coloraie .erde nchi"* Sen"i ilitatea reaciei "-a do.edit a fi 1;; VgGml* Tehnica de lucru7 La 2 ml !olu"ie "e adaug ;,/ ml "oluie hidroxid de "odiu 1molGl, ;,/ ml "oluie clorur de co alt* 4re$ena n molecula metiferonului a ionului fo"fat condiionea$ reacia cu molibdat de amoniu du# minerali$are - n re$ultat cade un #reci#itat gal en* Sen"i ilitatea reaciei e"te de 3;; VgGml* Tehnica de lucru= 1g "u "tan "e #la"ea$ n e#ru et, "e adaug 1ml acid "ulfuric concentrat i "e ncl$ete #Bn la fier ere* Soluia "e rcete, "e adaug 1; ml a# #urificat, 1 ml "oluie de moli dat de amoniu* 3"te cuno"cut fa#tul, c com#uii i$otiouronici "e de"com#un la interaciune cu a$ele i formea$ tioli* La tratarea metiferonului cu a$ a#are un miro" "#ecific de metilmercaptan. Tehnica de lucru= 2 ml !olu"ie "e ncl$e"c cu 1ml "oluie de hidroxid de "odiu 1molGl, "e #erce#e miro" "#ecificM #re$ena metilmerca#tanului "e demon"trea$ i du# reacia #o$iti. la introducerea n e#ru et a unei hBrtii de filtru m i ate cu acetat de #lum &hBrtia "e ngl enete'* 4 2[ [ S2-LL4 S]

Metiferonul interacionea$ cu acidul #icric, formBnd #icrai de culoare gal en* Tehnica de lucru7 La 3 ml !olu"ie "e adaug 2 ml "oluie ;,/> acid #icric N cade un #reci#itat gal en* 4re$ena gru#rii i$otiuronice n molecula "u "tanei #oate fi demon"trat la interaciunea #re#aratului cu nitropru!iat de !odiu +i fericianur& de pota!iu n mediu bazic N n re$ultat a#are o coloraie roie* Sen"i ilitatea reaciei e"te de 2;; VgGml* Tehnica de lucru= la 1 ml !olu"ie "e adaug cBte 1ml "oluie de 1;> hidroxid de "odiu, "oluie nitro#ru"iat de "odiu i 1ml "oluie fericianur de #ota"iu, "e mai adaug 3 ml a# #urificat= a#are o coloraie roie* Metiferonul #oate fi identificat i #rin metode fi$ico-chimice* CercetBnd "#ectrele lor 56 i !<, #ro#unem ace"te metode #entru identificare* S#ectrofotometria 56 e"te n #re$ent una din metodele e"eniale ale anali$ei farmaceutice* 4entru identificarea Metiferonului au fo"t determinate "#ectrele 56 a "oluiilor a#oa"e n regiunea 1F;-32;nm* S#ectrul o inut e"te #re$entat n figura 1=
0.80

0.7

0.6

0.5

0.4

)
0.3

0.2

0.1

0.00

190.0

200

220

240

260 nm

280

300

320

330.0

Figura 1. Spectrul !' de absorbie al soluiei apoase (etiferon +0 /g$ml )in figur "e .ede, c Metiferonul #o"ed o and inten" de a "or ie cu maxim n regiunea 2;1-2;2 nm* Acea"ta #oate fi ex#licat #rin tran"feruri ^_^` i n _^` ale moleculelor din "tarea normal ntr-o "tare excitat* A doua and de a "or ie are un maxim n regiunea 221-222 nm* Minimele "e o "er. re"#ecti. la 21D J2 nm* Au fo"t calculate mrimile unor caracteri"tice o#tice a en$ilor electronice de a "or ie* )atele o inute "unt ex#u"e n ta elul 1* 2olo"ind "#ectrul 56 de a "or ie a Metiferonului, #recum i caracteri"ticile o#tice, #utem identifica cu "iguran acea"t "u "tan* Tabelul 1 ("rimile caracteristicelor optice a benzilor electronice de absorbie C+nc = S 2-$anBa G)a: n) H)a: c)61 A)a: C)a: "+# C)a: A%4 1c) VgGml 0imetilfosfit1 S1 metilizotiuroniu 1IJ 50505 0,KL1 I5M! *,IJ1 *K0,* !0 221 :/;:/ ;,/;; H:/D 3,E1; 2/;,;

0n ultimele decenii "#ectro"co#ia !< a de.enit metoda de a$ n cercetrile chimice i farmaceutice, cu aAutorul creia #ot fi re$ol.ate cu "ucce" #ro lemele identificrii, anali$ei cantitati.e i efectuat conclu$ia de"#re "tructura moleculelor de "u "tane* S#ectrul !< a fo"t determinat n regiunea :;;-:;;; cm-1 #rin com#rimare cu romur de #ota"iu*

!nter#retarea "#ectrelor !< a Metiferonului "-a efectuat n a$a datelor i liografice X:, /Y* S#ectrul !< al Metiferonului e"te redat n figura 2* 4entru caracteri"tica en$ilor de a "or ie a fo"t alea" regiunea 1D;;-:;; cm -, adic aa numita $ona 7am#rentelor degetale9* Aici caracterul "#ectrului "e "chim chiar i la de.ieri nen"emnate n "tructur* Metiferonul are o caracteri"tic "#ectral indi.idual* 0n regiunea 1:;;-1:/; cm-1 a#are o a "or ie #uternic, cau$at de de.ieri de .alen N(1 2[ i in regiunea 33;;-3;;; cm-1 "unt de.ieri deformate a gru#ei - (1 - * La 1H:;-1HF; cm-1 "e o "er. clar de.ieri deformate a gru#elor C L ( -* 4re$ena en$ilor de a "or ie la //;/E; cm-1 e"te legat de .i raiile de .alen ale gru#ei C-S* Pen$ile de inten"itate medie de la 22;;-23;; cm-1, "e datorea$ .i raiilor de deformare a gru#ei NC1 3* 0n regiunea 1;;;11;; cm-1de a"emenea a#ar en$i de a "or ie #entru #o$iia de la ca#ete a gru#ei C13* 4o$iia frec.enelor caracteri"tice n "#ectrul !< al Metiferonului e"te redat n ta elul 2* <e$ultatele anali$ei "#ectrelor !< ale Metiferonului demon"trea$ "tructura ace"tei "u "tane, #recum i #o"i ilitatea utili$rii "#ectro"co#iei !< #entru identificare*

2igura 2* Spectrul IR de absorbie al (etiferonului +a elul 2 Frec2en"ele caracteri!tice a 3etiferonului n !pectrul $A )a:i)%, ca /a$% (% #& 5%"%, c)61 S 2-$anBa M%$i1%&+n ,AON ,6OH 115061!50N1050N NH!O N NH 1L0061L50, **006*000 6 CH* -C13 100061100N 22;;-23;; C6S,CAN 55065J0N 1ML061MI0

C+nc" /ii 1* A fo"t cercetat "#ectrul 56 de a "or ie a Metiferonului, "-a artat "#ecificul lui i #o"i ilitatea folo"irii #entru identificare* 2* A fo"t cercetat "#ectrul !< de a "or ie a Metiferonului, e.ideniind en$i de a "or ie, care

3* 1* 2* 3* :* /*

deo"e e"c Metiferonul de alte "u "tane i #ermit folo"irea lor #entru demon"trarea "tructurii i identificarea "u "tanei* <eaciile chimice de identificare #o"ed o "en"i ilitate nalt i #un n e.iden gru#ele funcionale "#ecifice metiferomului* 7i2"i+#&a1i% 2armaco#ea 3uro#ean, ed* 3<), 2;;1* Li.iu <oman, Mariu" PoAi, <o ert Sndule"cu, 6alidarea metodelor de anali$ i control, 3ditura medical, 1FFE,2E3#* Sim#"on ?*, aon"tantiono" A*, +hera#eutic drug monitoring* ?eneral Corre"#ondence, $nternal 3edicine Dournal, 2;;:, 3:=1-2 #* D2 5ncu L*, 6alica 6*, Che#tanaru \* Anali$a "#ectral a difeturului i #rofeturului GG <eali$rile farmacologiei naionale n #erioada anilor 1FD1-2;;1* - Chiinu*- 2;;1*- 4* 2;E21;* bcdefghi j*k*, lmnopqidghi r*s*, kqeqmtngh u*u* m vc* weinxmm gnmyez 3-niceti y ygq{fm m|gdmpcgtm{* }mtde| m fgqenpq{cti{ ydcpndpci :-iqnmqdmg- m :iqnmqypq~gtmqnicit N 3 N gqgh GG*go*mfmm* N 1FEF* N */F*

TEHNOLOGIA I ANALIZA SOLUIEI INPECTA7ILE METIFERON 10% I &i% Ti<+n, !Nic+"a% Ci+2an , 1Livia Unc , 1'"a(i)i& 'a"ica, *'ic$+& G<icav;i 1 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic, 2 Catedra +ehnologia medicamentelor 3 Catedra 2armacologie i 2armacologie clinic

S ))a&. T<% $%c<n+"+#. an( -$an(a&(i/a$i+n +1 inQ%c$a2"% -+" $i+n )%$i1%&+n 10% Metiferon &)imetil#ho"#hit S-metili$otiuronium' i" re"earched %ith #ur#o"e to create the rational #harmaceutical form for intra.enou" admini"tration &inAection "olution' and ela oration of (A) for thi" medicinal form* +here %a" ela orated the o#timal com#o"ition of inAection "olution, the technolog, of #re#aration and the method" of anal,"i"* R%/ )a$ Metiferonul &)imetil#ho"#hit S-metili$otiuroniu' e"te cercetat #entru crearea unei forme farmaceutice raionale #entru admini"trare intra.enoa" &"oluie inAecta il' i ela orarea )A( #entru acea"t form medicamentoa"* S-a ela orat com#o$iia o#timal a "oluiei inAecta ile, tehnologia de #re#arare, #recum i metodele de anali$ ale ace"teia* In$&+( c%&% 5na din #reocu#rile maAore ale medicinii moderne e"te #unerea n .aloare a unor noi "u "tane chimice cu o aciune enefic a"u#ra organi"mului uman* )eri.aii i$otioureici au de.enit inta multor cercetri, deoarece con"tituie un gru# de "u "tane ce #o"ed aciune .a"ocon"trictoare i hi#erten"i. #ronunat de lung durat datorit influenei directe a"u#ra mu"culaturii netede a #eretelui .a"cular* +otodat a fo"t remarcat i aciunea analge$ic i "edati. a deri.ailor i$otioureici* Metiferonul &)imetilfo"fit S-metili$otiuroniu' e"te o "u "tan original din ace"t gru#, ce difer du# mecani"mul de aciune i du# alte #ro#rieti de #re#aratele antihi#oten"i.e cuno"cute i utili$ate deAa n #ractica medical* Acea"t "u "tan exercit i aciune .a"ocon"trictoare mu"culotro# direct* (e-am #ro#u" dre#t "co# ela orarea unei forme farmaceutice inAecta ile cu coninut de Metiferon* 3xigenele "#orite fa de calitatea medicamentelor nece"it "tudierea com#lex a #ro#rietilor "u "tanelor, ela orarea unor metode de anali$ exacte, ra#ide i "#ecifice* Ma$%&ia"% 0i )%$+(%

S-a utili$at "u "tana acti. )imetilfo"fit S-metili$otiuroniuM "u "tane auxiliare, acce#tate "#re utili$are n "co# medicinal* 0n ela orarea metodelor de anali$ au fo"t utili$ate "#ectrofotometre 56-6!S 74er8in 3lmer9 Lam da-:; i Agilent +echnologie" F/-;;* S#ectrele !< au fo"t determinate la "#ectrofotometrul 72+G!<-:1;;+,#eA9* La identificarea i do$area #rin metode chimice au fo"t utili$ai reageni i "ol.eni n core"#undere cu cerinele 2armaco#eei 3uro#ene* R%/ "$a$% )eoarece Metiferonul e"te un remediu antihi#oten"i., recomandat #entru ntre uinare n "trile de hi#oten"iune arterial de diferit gene$, #re#onderent n tera#ia de urgen, a fo"t ela orat forma farmaceutic #arenteral <olu"ie 3etiferon 1,% pentru inEec"ii. Au fo"t #recutate cerinele fa de calitate, care "tau la a$a ela orrii M2+ #entru acea"t form farmaceutic* +ehnologia #re#arrii <olu"iei 3etiferon 1,% pentru inEec"ii a fo"t ela orat n conformitate cu cerinele 2armaco#eei <omBne ed* @ i a 2armaco#eei 3uro#ene* 4rin cercetri #re.enti.e "-a con"tatat, c Metiferonul #o"ed o "ta ilitate mai nalt n mediu "la acid i acid, #e cBnd "oluia de Metiferon de 1;> are #1-ul cu#rin" ntre /,; i H,;* )in ace"t moti., metiferonul n "oluie nece"it "ta ili$ator #entru aAu"tarea #1-ului* Au fo"t cercetai mai muli "ta ili$atori de #1, ca re$ultat, n calitate de "ta ili$ator e"te recomandat ame"tecul de acid citric "i citrat de "odiu #Bn la o inerea unei "oluii cu #1-ul 3,;-3,/* Cercetrile #re.enti.e au mai demon"tratat, c n #roce"ul "terili$rii termice a#are un miro" #uternic de merca#tani &metilmerca#tan', n re$ultatul de"com#unerii metiferonului* Ace"t fa#t a fo"t confirmat i #rin metode cromatografice &cromatografia #e "trat "u ire du# a#ariia unui "#ot adugtor de uree i 14LC du# a#ariia unui #ic "u#limentar'* C metod efecti. de "terili$are, folo"it n tehnologia farmaceutic, e"te "terili$area filtrant* A fo"t alea" acea"t metod, care a"igur un ni.el nalt de "terili$are i n acelai tim# nu are loc de"com#unerea "u "tanei* 0n a$a cercetrilor efectuate, #ro#unem urmtoarea com#onena o#tim a formei farmaceuticeR M%$i1%&+n S&%ca"c "a$ 5%n$& - 2-$anB9 -ca$9T Aci( ci$&ic Ci$&a$ (% -+(i A59 5%n$& inQ%cBii 6100# 6L# 6J# 6 58n9 "a 1 "i$&

Tehnologia prepar&rii !olu"iei 3etiferon 1,% pentru inEec"ii. inBnd cont de com#onena formei farmaceutice i coninutul de "u "tan &recalculat #entru 1;;> "u "tan u"cat', "-a calculat cantitatea de "u "tan, nece"ar #entru #re#ararea "oluiei* 4re#ararea "oluiei "e efectuea$ la .olum, dar com#onentele "unt ex#rimate n uniti de ma"* A"tfel, la 1;;g "u "tan Metiferon ntr-un alon cotat de un litru "-au adugat exci#ienii cBntrii &acid citric-:g i citrat de "odiu E g'* Ace"te cantiti de exci#ieni au fo"t calculate, #entru a form un tam#on fo"fat cu "co#ul meninerii #1-ului la .alorile "ta ilite n limitele 3,;-3,/* Su "tana medicamentoa" i exci#ienii cBntrii "e di$ol. n a# #entru inAecii* )i$ol.area "e #etrece la rece* S-a adugat Aumtate din cantitatea nece"ara de a# #entru inAecii #entru a di$ol.a #re#aratul i exci#ienii* )u# di$ol.are "e aduce .olumul "oluiei #Bn la 1;;; ml cu a# #entru inAecii* Soluia o inut a fo"t controlat conform cerinelor #roiectului M2+ #entru <olu"ie 3etiferon 1,% pentru inEec"ii. Soluia, core"#un$toare cerinelor )A(, a fo"t "u#u" filtrrii "terile #rin mem ran Mili#ore cu diametrul #orilor ;,22 Vm la dou in"talaii de ti# 5S2-2F3-D, unite liniar cu aAutorul a dou filtre & M2A-A-2 i M2A-A-1'* Soluia filtrat "-a do$at n fiole "terile a cBte 1 ml din "ticl neutr (S-3 conform CS+ H:-2-:E/-E/ n a#aratul cu .id #entru um#lerea fiolelor* 0nlturarea "oluiei din ca#ilare "-a efectuat de a"emenea "u .id* Sudarea "-a #etrecut la maina de "udat de ti# :32 <-M* 2iltrarea, nfiolarea i "udarea fiolelor "-a efectuat n

condiii a"e#tice* S-a .erificat etanietatea fiolelor #rin "cufundare n "oluie de al a"tru de metilen "u #re"iune* A#oi fiolele au fo"t "#late, u"cate i controlate la li#"a #articulelor n "u"#en"ie* Au fo"t #re#arate trei "erii de <olu"ie 3etiferon 1,% pentru inEec"ii &1;;1, 2;;2, 3;;3'* 0n a$a cercetrilor efectuate a fo"t ela orat #roiectul regulamentului tehnologic de de fa ricare a Soluiei Metiferon 1;> #entru inAecii conform "chemei fluxului tehnologic #re$entat n figura 1* La ela orarea metodelor de anali$ #entru "oluia inAecta il de Metiferon "-a inut cont de #ro#rietile fi$ico-chimice ale #rinci#iului acti. &metiferon "u "tan', #recum i a exci#ienilor &acid citric i citrat de "odiu'* )e"crierea #re#aratului e"te a#reciat n a$a cercetrii a"#ectului exterior a trei "erii, o inute conform #roce"ului tehnologic de"cri" mai "u"* 4ro ele anali$ate au #re$entat "oluii incolore i tran"#arente cu miro" "#ecific*
materii prepararea apei 9n scop injectabil

Pregtirea recipienilor i accesoriilor/ )splare% uscare/ )dopuri% recipiente

pregtirea spaiului de producie i a utilajelor

prime0 1E234E5O aC36 C3253C C32572 6E SO638

dizol:are sterilizare filtrare clarifiant controlul calitii

43;2575E sterilizant

umplere

9nchidere

controlul calitii

grupare

ambalare

marcare

depozitare

Figura 1. Schema fluxului tehnologic de preparare a soluiei (etiferon *0% A"#ectul "oluiei "-a determinat n conformitate cu cerinele farmaco#eei 3uro#ene N "oluia tre uie " fie tran"#arent i incolor* 4entru identificarea metiferonului n "oluie #ot fi utili$ate reaciile cu ninhidrina &#une n e.iden #re$ena gru#ei aminice alifatice #rimare', cu "rurile de co alt &formarea com#u"ului com#lex colorat'* Metiferonul n "oluie #oate fi identificat i du# "#ectrul de a "or ie n 56, care "e nregi"trea$ du# diluarea "oluiei #Bn la concentraia 2; VgGml N ace"tea tre uie " fie identic cu "#ectrul "u "tanei "tandard N n inter.alul lungimilor de und de la 2;; nm #Bn la 2E; nm " #re$inte maxim de a "or ie la 221J2nm i minim de a "or ie la 21DJ2nm &dimetilfo"fit S - metili$otiuroniu'*

5H6 " "e determin #rin metoda #oteniometric* 6aloarea medie #entru toate "eriile "-a ncadrat n inter.alul B),-B)4. La determinarea 5a&$ic "%"+& ;n - -5%n-i% -6a &)9&i$ ca "oluia " fie li#"it de inclu$iuni mecanice .i$i ile= Uni1+&)i$a$%a v+" ) " i "oluiei "-a determinat conform cerinelor CC+ H:-:F2-E/ I)e.ieri admi"i ile de la .olumul nominal #entru #re#aratele medicamentoa"e indu"triale9* S$%&i"i$a$%a "-a determinat conform cerinelor 2S, ed @!, 62, #*1ED* 4re#aratul tre uie " fie "teril* I)5 &i$9Bi"% -$&9in% "e determin #rin metoda @romatografiei n !trat !ub"ire &23ur*'* 4entru lucru a fo"t ale" "i"temul de "ol.eni alcool i$o#ro#ilic N cloroform N "oluie concentrat de amoniac n ra#orturile :=E= 1, "u "tana manife"t .alori o#timale ale <f-ului i o "e#arare un a im#uritilor #o"i ile* Cromatograma a fo"t #ri.it n lumin 56 cu lungimea de und 2/: nm, a#oi "-a #ul.eri$at cu "oluia de #-dimetilamino en$aldehid* 4entru (+/a&% "unt #ro#u"e dou metode &"#ectrofotometric i neutrali$are n mediu anhidru'* )o$area "oluiei de Metiferon #rin metoda de neutrali$area n mediu anhidru 4entru alegerea "ol.enilor, folo"ii n metoda de neutrali$are n mediu anhidru am efectuat titrarea #oteniometric a metiferonului n ame"tec de anhidrid acetic i acid acetic glacial &1=1', acid acetic glacial, acid formic &cod 11A'* )in figur "e .ede, c "altul maxim de #otenial n #unctul de echi.alen re.ine #entru acidul acetic glacial &figura 2'*
FE , mV

J00 K00 M00 500 L00 *00 !00 100 0 1 ! * L 5 M K J I 10 11 1! 1* 1L 15

V, ml
!c !c"t gl!c#!n$i%& !c !ci% !c"tic gl!ci!l !c 'o&mic

Figura + 2urba titr"rii poteniometrice a metiferonului n diferii sol#eni )o$area "-a #etrecut mai ntBi #e un ame"tec model de Metiferon-"u "tan #entru a confirma "electi.itatea metodei, a#oi a fo"t ela orat tehnica do$rii n mediu anhidru= 2 ml "oluie Metiferon 1; > "au #la"at ntr-un alon de titrare* Soluia "-a .a#ori$at la "ec #e aia de a# tim# de 1/-2; min* <e$iduul o inut "-a di$ol.at in 2; ml acid acetic glacial, "-au adugat :/ #icturi de .iolet cri"talin i "-a titrat cu "oluie ;,1molGl acid #ercloric #Bn la coloraia .erdeal "truie* 4aralel "-a efectuat #ro a control* )eterminrile au fo"t re#etate de : ori i re$ultatele au fo"t e.aluate "tati"tic*&+a elul 1'* )u# cum "e o "er. din ta el, eroarea relati. a metodei nu de#ete ;,3/>* S-a "tudiat #o"i ilitatea utili$rii metodei "#ectrofotometrice, ela orate #entru do$area metiferonului "u "tan, i #entru do$area "oluiei inAecta ile* )u# aAu"tare fa de un ame"tec model, "e #ro#une urmtoarea tehnic de lucru= 1 ml "oluie "e diluea$ cu a# #urificat ntruun alon cotat #Bn la 1;; ml &"oluia A'* 2 ml de "oluie A "e diluea$ cu a# #urificat ntr-un alon cotat #Bn la 1;; ml &"oluia P'* Se m"oar a "or ana "oluiei P la 221nm la "#ectrofotometru n cu. cu gro"imea 1 cm, folo"ind ca lichid de com#en"are a#a #urificat* Tabelul 1

Aezultatele doz&rii 3etiferonului n <olu"ie 3etiferon 1,% pentru inEec"ii prin metoda de neutralizare n mediu anhidru 6olumul #rele.at, ml 2 2 2 2 S-au luat #entru anali$ &g' ;,2 ;,2 ;,2 ;,2 S-au calculat &g' ;,1FDH ;,1FE2 ;,1FE2 ;,2;;H S-au calculat &>' FE,E; FF,1; FF,1; 1;;,3 Caracteri"tica metrologic @LFF,32 S2L;,::2/ SxL;,332 xL1,;H L1,;H ALFF,32J1,;H>

4aralel "e m"oar a "or ana "oluiei "tandard de metiferon &Sol* P'* Coninutul de Metiferon n "oluie "e calculea$ conform formulei= Ax221 a" 1 1;;1;; Ax221 ae 2 CL L ) n care A"221 6x 12 /;/; A"221 6c c221 # ab!orban"a !olu"iei analizate; !221 # ab!orban"a !olu"iei !tandard; a! # ma!a !u!b!tan"ei !tandard) g; -8 # 2olumul !olu"iei analizate) ml. Coninutul de Metiferon n 1 ml "oluie tre uie " fie ;,;F;-;,11;g* 'repararea !olu"iei !tandard7 ;,;/g "u "tan &metiferon "tandard' "e di$ol. cu a# #urificat n alon cotat de /; ml &"ol* A'* 1 ml "oluie A "e diluea$ cu acelai "ol.ent n alon cotat de /; ml &"ol* P'* )eterminrile "-au efectuat #entru 3 "erii de forma medicamentoa" i au fo"t re#etate de : ori, a#oi re$ultatele au fo"t e.aluate "tati"tic*&+a elul 2' Tabelul 2 Aezultatele doz&rii 3etiferonului n <olu"ia 3etiferon 1,% pentru inEec"ii 6olumul #rele.at, ml 1 1 1 1 S-au luat #entru anali$ &g' ;,1 ;,1 ;,1 ;,1 S-au calculat &gGml' ;,;FFE ;,;FFE ;,1;;1 ;,;FFE S-au calculat &>' FF,E; FF,E; 1;;,;H FF,E; Caracteri"tica metrologic @LFF,F/ S2L;,;1/ SxL;,;H xL;,1F2 L1,1 ALFF,F/J;,1F2>

3roarea relati. a determinrii "#ectrofotometrice nu de#ete ;,2 > , ceea ce e"te n concordan cu re$ultatele o inute #entru ame"tecul model i denot o exactitate "#orit a metodei* C+nc" /ii 1* A fo"t ela orat formula o#tim i tehnologia #re#arrii Soluiei Metiferon 1;> #entru inAecii, care a "tat la a$a ntocmirii #roiectului regulamentului tehnologic #entru #re#ararea Soluiei Metiferon 1;> #entru inAecii* 2* Au fo"t ela orate metodele de anali$ #entru "oluia de Metiferon 1;>, care "unt inclu"e n

#roiectul M2+ #entru Soluie Metiferon 1;> #entru inAecii* 7i2"i+#&a1i% 1* Cha"t 2*, Cho#ineau R*= ?uide #ratiTue de" "olution" inAecta le" et interaction contenu, 1ere edition, Ma""on, 4ari", 1FF/* 2* 2armaco#eea <omBn, (d. a X-a) (ditura medical&) *ucure+ti)2,,,; 3* 2armaco#eea 3uro#ean, (d. a $--a) 2,,2.

STANDARDIZAREA SU,OZITOARELOR 'AGINALE URA'ISETV Livia Unc , An(&%i ,"%0ca, !Na$a"ia Da)a-c<in, 1O:ana 'i-"+ <, !Livi M+vi"9 1 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic 2 Agenia Medicamentelor S ))a&.

Standardi$ation of .aginal "u##o$itorie" I<a.i"et9 )ietil#ho"fat S-etili$otiuroniu i" re"earched for creation of the rational #harmaceutical form" and their ()+ ela oration* +he o#timal com#o"ition of "u##o"itorie" %ith thi" com#onent, the method" of anal,"i" and "tandardi$ation %ere ela orated* +he "ta ilit, and the term of .ala ilit, %ere re"earched* R%/ )a$ )ietil#ho"fat S-etili$otiuroniu e"te cercetat cu "co#ul crerii formelor farmaceutice raionale i ela orarea )+( #entru ele* A fo"t ela orat com#onena o#timal a "u#o$itoarelor cu ace"t com#u", metodele de anali$ i "tandardi$are, a fo"t cercetat "ta ilitatea i determinat termenul de .ala ilitate* In$&+( c%&% Sunt cuno"cute #ro#rietile farmacologice ale deri.ailor i$otioureici, care "unt o cla" de com#ui cu un efect hi#erten"i. remarca il, cu aciune hi#oglicemic, antiaritmicM reduc con"umul de oxigen de cBtre organi"m, micorea$ tem#eratura cor#oral, mrete re$i"tena organi"mului fa de aciunea toxic a hi#er aroxiei, #o"ed efect hi#erten"i. #e fonul admini"trarii ganglio locantelor i adreno locantelor* 5n re#re$entant din ace"t gru# e"te i dietilfo"fat S-etili$otiuroniu &difeturul', care #o"ed #ro#rieti .a"ocon"trictoare, efect antihi#oten"i. marcat n condiii o inuite i acti.itate antihi#oten"i.e nalt #e fundalul de aciune al U1- adreno locantelor* 5tili$area ace"tui #re#arat e"te raional #entru #re.enirea "cderii #re"iunii arteriale a dereglrilor hemodinamicii "i"temice, echili rului acido- a$ic i regimului de oxigenare a organi"mului, deci, #entru acordarea a"i"tenei de urgen n hi#oten"iunea arterial acut de gene$ di.er"* +otodat e"te demon"trat, c dietilfo"fat S-etili$otiuroniu crete tonu"ul #atului .a"cular care "e #etrece #e fondul excluderii factorului de a$ .a"odilatator - al oxidului nitric* 0n ace"t fel, com#uii i$otioureici cu aciune non-adrenergic de"chid o larg #er"#ecti. de a#licare n #ractica reglrii tonu"ului .a"cular, inclu"i. n modificrile homeo"ta$iei circulatorii locale uterine, fcBnd #o"i il e.idenierea factorilor care alterea$ a#ortul de "Bnge "#re uterul afectat de miom* 0n ace"t a"#ect, ela orarea unei noi forme farmaceutice cu a#licare uterin N "u#o$itoare .aginale N #ermite utili$area ace"tui #re#arat n coriAarea indicilor hemodinamici regionali i m untirea metodelor de tratament al miomului uterin* )ietilfo"fat S-etiltiuroniu "u form de "u#o$itoare .aginale I<a.i"et9 "e #ro#une #entru utili$are n tratamentul miomului uterin, a"ociat cu hemoragii uterine* Su#o$itoarele .aginale I<a.i"et9 manife"t o #o"i ilitate real de a#licare cu nalt randament tera#eutic n #ractica tratamentului con"er.ati. al miomului uterin i com#licaiilor lui, determinat n fond de limitarea fluxului regional*

S-a ela orat formula o#timal a "u#o$itoarelor .aginale ,,<a.i"et9 cu coninut de )ietilfo"fatul S-etiltiuroniu ;,1 g, inBnd cont de aciunea "#ecific a "u "tanei acti.e de a$ i de #ro#rietile fi$ico-chimice ale ace"teia* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% Su#o$itoare .aginale I<a.i"et9 ;,1 g, "eriile ;1G2;*1;*;HM ;2G2;*1;*;HM ;3G2;*1;*;HM A#arat #entru determinarea tim#ului de fu$iune I3r%e8a 4M 39 A#arat #entru determinarea .ite$ei de cedare a #rinci#iului acti. #rin metoda de diali$ I Sol.ote"t N M9 "#ectrofotometru 56-6!S 74er8in 3lmer9 Lam da-:;M R%/ "$a$% )e"crierea #re#aratului e"te a#reciat n a$a cercetrii a"#ectului exterior a trei "erii, o inute conform #roce"ului tehnologic de"cri" #entru "u#o$itoare .aginale* 4ro ele anali$ate au #re$entat "u#o$itoare de form cilindro-conic cu a"#ect omogen, de culoare al * 0n "eciune tran".er"al ma" omogen* Se admite #re$ena unei ca.iti de aer, a unei #oro$iti #e axa "u#o$itorului i a unei de#re"iuni n form de #Blnie* I(%n$i1ica&%a #re#aratului "-a #etrecut #rin metoda !pectrofotometric& ;-, com#arBnd "#ectrul 56 al "oluiei cercetate cu "#ectrul 56 al "oluiei "tandard de dietilfo"fat S etili$otiuroniu cu concentraia 2; VgGml* !dentificarea a fo"t efectuat i prin metode chimice #entru gru#ele funcionale "#ecifice= aminic, S-etili$otiuronic* 4entru gru#area S-etili$otiuronic "e interacionea$ "oluia de anali$at cu clorura de co altM a#are o coloraie ro$-murdar* ?ru#area aminic alifatic #rimar "e #une n e.iden la interaciunea #re#aratului cu ninhidrin n mediu a$ic la ncl$ire N a#are coloraie rou-.iolet* 4entru determinarea im#uritilor "trine "-a folo"it metoda cromatografiei n "trat "u ire* 4e lBng metodele de anali$ a #rinci#iului acti. din "u#o$itoare, au fo"t determinai unii indici de calitate n conformitate cu cerinele 2armaco#eei 3uro#ene= ma"a medie i uniformitatea ma"ei, com#ortamentul la to#ire, indicii chimici &de aciditate i de #eroxid'* 4entru determinarea )a-%i )%(ii "-au cBntrit 2; "u#o$itoare i "-a calculat .aloarea medie* Ma"a o inut "-a aflat n limitele 1,E/ N 2,1/g* Aceleai 2; "u#o$itoare, la care "-a determinat ma"a medie, "-au cBntrit indi.idual #entru determinarea ni1+&)i$9Bii )a-%i, (%vi%&ii )a-%i in(ivi( a"% 1a$a (% )a-a )%(i%,%= 2a de ma"a medie calculat, ma"a indi.idual #oate " #re$inte de.ierile JD,/>* )eterminrile "-au #etrecut n conformitate cu #re.ederile 2< @, #*EEF* <e$ultatele o inute #entru trei "erii de "u#o$itoare "e #re$int n figura 1* )in figur "e o "er., c de.ierea de la ma"a medie nu de#ete ;,11>*
!)!. g

2,015 2,01 2,005 2 1,995 1,99

1 3 5

m !)! m "%i" 2.001602g, V!&i!tii 0.11%

11

13

15

17

(&. )*po+ito!&"

Figura 1. 'ariatia in greutate a supozitoarelor #aginale ,,Ra#iset? C+)5+&$a)%n$ " "a $+5i&% -a (i/+"va&% "-a determinat n conformitate cu #re.ederile 2< @, #*EEF* !ntr-un flacon conic de 1;; ml, care conine /; ml a#a meninuta la tem#eratura de 3DJ2C, "e introduce un "u#o$itor* 2laconul "e agita #rin uoara rotire o data la / min*

19

Su#o$itoarele #re#arate cu a$e li#o"olu ile tre uie "a "e to#ea"c in cel mult 3; min, iar cele #re#arate cu a$e hidro"olu ile tre uie "a "e di$ol.e in cel mult 1 h* 4ot rmBne in flacon #articule de "u "tane acti.e "i "u "tane auxiliare nedi$ol.ate* S-a determinat com#ortamentul la to#ire #entru "u#o$itoare ,,<a.i"et9 #entru trei "erii de "u#o$itoare care con"tituie= Seria 0*$+0 *0 0;1 13 minute la 3DJ2;C* Seria 0,$+0 *0 0;1 1/ minute la 3DJ2;C* Seria 0,$+0 *0 0;1 1: minute la 3DJ2;C* Contaminarea micro ian "-a efectuat n core"#undere cu cerinele 2armaco#eei 3uro#ene, categoria 3P* !n 1*; g #rodu" farmaceutic "e admite #re$ena a cel mult 1;: microorgani"me aero e, entero acterii cel mult 1;2 i cel mult 1;; fungi &le.uri i fungi filamentoi', n a "ena Salmonella, 3"cherichia coli* Sta#h$lococcu" aureu"* )o$area "-a efectuat #rin metoda "#ectrofotometric i 14LC (de alternati2&). 0n M2+ au fo"t inclu"e tehnicele de do$are n urma extraciei cu a# la ncl$ire &Metoda 1'* Sta ilitatea a fo"t determinat #rin metoda cla"ica, "eriile de "u#o$itoare fiind de#o$itate tim# de un an la tem#eratura 2;J2 C, in condiii de umiditate :;-H;>, la loc ferit de lumina* La nce#utul de#o$itrii ex#erimentale "-a #etrecut do$area #rin metode, oglindite n M2+* 0n #roce"ul "tudierii "ta ilitii "u#o$itoarelor o atenie deo"e it "e acord coninutului de "u "tan acti. n forma farmaceutic, a#ariiei #rodu"elor de degradare, care ar micora coninutul #rinci#iului acti. i ar #utea fi toxice* )e aceea, #entru "tudierea cineticii degradrii tre uie folo"it o metod de anali$, ce ar #ermite determinarea "u "tanei acti.e n #re$ena #rodu"elor de degradare* A"tfel, #entru determinarea "ta ilitii I"u#o$itoarelor .aginale <a.i"et9 a fo"t folo"it metoda "#ectrofotometric* +oate determinrile au fo"t efectuate in #erioada 22*1;*;H - 23*1;*;D, #eriodicitatea te"trilor a fo"t 3 luni* S-au determinat indici de calitate= a"#ectul, identificarea, uniformitatea ma"ei, com#ortamentul la to#ire, contaminarea micro ian, do$area* )eterminrile "-au efectuat #aralel #entru toate trei "erii* 4e #erioada te"trilor #re#aratul i-a #"trat #ro#rietile fi$ico-chimice i a core"#un" cerinelor atri uite calitii n conformitate cu )A(* S-a "ta ilit termenul de .ala ilitate #entru toate cele trei "erii de 1 an, iar tem#eratura de #"trare recomandata e"te "u 2/;C, ferit de lumin* 0n com#artimentul 7Am alare9 "unt indicate cerinele #entru am alaA* 0n com#artimentul 7Marcare9 "unt indicate cerinele #entru marcarea am alaAului #rimar i de tran"#ort, care au fo"t introdu"e n M2+ #entru 7Su#o$itoare .aginale I<a.i"et9* A"tfel #utem meniona, c n #roce"ul "tandardi$rii "u#o$itoarelor I<a.i"et9 "-a con"tatat core"#underea lor cerinelor 2armaco#eei <omBne i 2armaco#eei 3uro#ene* C+nc" /ii 1* Cercetrile efectuate au "tat la a$a ela orrii M2+ #entru 7Su#o$itoare .aginale I<a.i"et9* 2* )A( #entru forma farmaceutic au trecut ex#erti$a la Agenia Medicamentului i "-a o inut certificatul de calitate* 7i2"i+#&a1i% 1* 2armaco#ea 3uro#ean, ed* 3<), 2;;1* 2* 2armaco#ea <omBn, ed*@, 2;;/* 3* 2armaco#ea de Stat, ed*@!, 6*1 i 2, 1FED, 1FEF*

STUDIUL CHIMICO6FARMACEUTIC AL METO,ROLOLULUI Li"ia C+nic+v1, Ta)a&a C+$%"%a1, La&i-a S+"+vi+va ! 1 Catedra Chimie farmaceutica i toxicologic 5SM2 7(* +e"temianu9 2 Centrul tiinific in )omeniul Medicamentului S ))a&. T<% -$ (. +1 $<% )%$+5&+"+" in c<%)ic+65<a&)ac% $ica" +here %a" ela orated the +LC method of meto#rolol identification , u"ing fi.e de.elo# ","tem"* e #erformed "#ecifical identification reaction" * S#ectro#hotometric method of Tuantitati.e determination for meto#rolol in #o%der and ta let" of ;*;/ g %ere ela orated, a" %ell a" 14LC method %a" ela orated in order to determine the #urit, of "u "tance* 5"ind the anal,tical method" ela orated , u" o.er the artificial iological te"t, there %a" extracted meto#rolol from iological liTuid" & lood #la"ma, urine'* 1a.ing con"idered the ela orated method" a" "#ecific and re#roducti.e the, are recommended for the "tud, of meto#rolol in iological liTuid"* R%/ )a$ Au fo"t a#licate reacii de identificare, cromatografia n "trat "u ire, utili$Bnd doua "i"teme de "ol.eni* Am utili$at metoda "#ectrofotometric #entru identificarea i do$area meto#rololului n #ul ere i com#rimate de ;,;/ g* S#ectrometria n !< "-a folo"it cu "co#ul determinarii "tructurii chimice ale #re#aratulului, #recum i metoda 14LC de identificare n #ul ere* Am determinat condiiile o#time de extracie a "u "tanei n #ro e iologice 7n .itro9* )at fiind fa#tul, c metodele folo"ite "unt "#ecifice i re#roducti.e ele "e recomand #entru "tudierea meto#rololului n lichide iologice* Ac$ a"i$a$%a $%)%i 0n #re$ent olile cardio.a"culare dein ntBietatea n ceea ce #ri.e"te frec.ena mortalitii * 3le re#re$int maladiile .Br"tei naintate, dar n ultimii ani afectea$ #o#ulaia din ce n ce mai tnar* Meto#rololul &J'-1-&i$o#ro#ilamina'-3-X#ara-&metoxietil'fenoxiY-2-#ro#anol'tartrat "e utili$ea$ #e larg n medicin n tratamentul olilor cardio.a"culare* 3"te un - locant cardio"electi. ce "cade influiena "im#atic a"u#ra inimii, a"tfel reduce numarul i inten"itatea cri$elor anginale, reduce mortalitatea de infarct miocardic i #re.ine aritmiile cardiace toate ace"tea duc la n untirea i #relungirea .ieii olna.ilor cardio.a"culari* 0n anumite condiii #re#aratul #o"ed efecte ad.er"e i toxice * 0n ace"t context #re$int un intere" deo"e it "tudiile meto#rololulului n lichide iologice n ca$ul intoxicaiilor* O2i%c$iv%"% " c&9&ii )e a efectua "tudiul n .ederea determinrii metodelor chimice i fi$ico-chimice de anali$ de identificare i do$are a meto#rololului, care ar #utea fi a#licate i n urma extragerii din lichidele iologice* Ma&%&ia"% 0i )%$+(% (% c%&c%$a&% 0n cadrul cercetrilor "-a folo"it meto#rolol n "u "tan #ur i n com#rimate* Am utili$at #la"ma "anguin i urin ca lichide iologice* Au fo"t a#licate metode chimice i fi$ico-chimice de anali$* 0n in.e"tigaii ex#erimentale, ca reageni "-au utili$at= cloroformul, acidul "ulfuric, alcool etilic FH>, acidul clorhidric, hidroxid de "odiu i hidroxid de amoniu, care au fo"t cu grad de #uritate I#ur #entru anali$9i Ichimic #ur9* 0n .ederea a#licrii reaciilor microcri"talo"co#ice "t metoda chimic de identificare a meto#rololului du# forma cri"talelor N #rodu"ele reaciilor cu reacti.ii core"#un$tori* 2orma cri"talelor de"eori de#inde de condiiile #roce"ului de cri"tali$are, de exem#lu de concentraia "oluiei de cercet , #re$ena im#uritilor, #1-ul mediului, tem#eratura, tim#ul de cri"tali$are* A#licarea microcri"talo"co#iei ne d #o"i ilitate " determinn cu exactitate identitatea "u "tanei i totodat "#ecificitatea ei* )at fiind fa#tul, c reactiile microcri"talo"co#ice "unt de im#ortan toxicologic, am determinat metodica de o inere a microcri"talelor cu acid #icric, reacti.ul )ragendorff, clorura de cadmiu, "ulfat de hidrargiu i iodura de cu#ru* Caracterul

"#ecific al meto#rololului n microcri"talo"co#ie "-a elucidat n urmtorul #rocedeu= #e lamela de "ticl "e de#une o #ictur de "oluie cloroformic de meto#rolol de ;,;1> , care "e e.a#or la "ec, dea"u#ra "e #icur reacti.ul* )u# u"care a#ar cri"tale caracteri"tice* Ace"te reacii "e "tudia$ mai ntBi #e "u "tan #ur, a#oi "e a#lic n extra"ul organic din materialulu iologicX:,/,DY* 4entru identificarea meto#rololului am a#licat metoda CSS folo"ind #lci de "ilicagel ?* Sau utili$at dou "i"teme de "ol.eni= en$en- n-hexan-alcool etilic FH> &3=/=/'M cloroformmetanol-hidroxid de amoniu 2/> &E;=1/=2', #entru care "-a determinat .aloarea <f egal cu ;*:H i re"#ecti. ;,/H* Ca rele.ant am utili$at reacti.ul )ragendorff* Metodica= ;,;/ g de meto#rolol "e di$ol. n 1;;ml cloroform &"oluia A'* )in "iluia A lum 1 ml i di$ol.m n 1; ml cloroform &"oluluia P' * 4e linia de "tart a #lcii "e a#lic 2Vl "oluie P, #laca "e introduce n camera de cromatografiere i "e cromatografia$ a"cendent n "i"temul de "ol.eni core"#un$tori, cBnd frontul de "ol.eni .a #arcurge 2G3 din lungimea total a #lcii cromatografice, #laca "e "coate din .a", "e u"uc la aer i "e #ul.eri$ea$ cu reacti.ul )ragendorff "au "e #relucrea$ cu .a#ori de iod* S#oturile de meto#rolol "e colorea$ n gal encafeniu* Se determin .alorile <f* Sen"i ilitatea reacieie"te de 1; VgGml* Metoda #oate fi a#licat la cercetarea meto#rololului in extra"ul organic din lichidele iologice* 4entru determinarea identitii "-a a#licat "#ectrometria n !< - e"te o metod modern ce "e caracteri$a$ #rintr-o informaie mai multilateral de"#re "tructura chimica a "u "tantei medicamentoa"e* 3a ne #ermite identificarea omologilor aceleiai cla"e, care #rin alt metod nu "e "e #ot diferenia* S#ectrul n !< al meto#rololului "-a nregi"trat cu aAutorul a#aratului 7S43CC<) D/-!<9, n inter.alul :;;-:;;; cm1, "u"#en"ie n ulei de .a$elin &;,;/ meto#rolol i / #icturi ulei de .a"elin'* 6i raiile inten"i.e "-au nregi"trat n regiunile 12FD cm -1- core"#und gru#ei C1 "i C-C M cele din 1/:/-1/DH cm-1N core"#und gru#arilor C-1 al inelului en$enicM iar din 1H;; cm-1 i 1H3F cm-1- caracteri$a$a #re$ena inelului en$enic &gru#arile car on-car onice a"imetrice' i HF; cm-1- caracteri"tice #entru gru#a (1* 0n "tudiul no"tru am a#licat reacii de identificare cu "rurile ionilor de #ota"iu, o inndu"e un #reci#itat al , cu clorura de fier "-a o inut un com#u" com#lex rou* Am efectuat reacie de formare a a$ocolorantului- re$ultatul e"te un com#u" com#lex #ortocaliu* Metodica= mai ntBi am efectuat hidroli$a acid a meto#rololului a#oi am adugat a$oreacti.ul &"tre#tocid cu nitrit de "odiu' i -naftol n urma creia "e formea$ a$ocolorantul* Metod de identificare i a#reciere a "u "ranelor medicamentoa"e a$at #e com#ararea cu "#ectrele "u "tanelor de referin "u a"#ectul anali$ei "tructurale e"te "#ectrofotometria de a "or ie n 56* A"tfel #entru identificarea meto#rololului "-au nregi"trat "#ectrele de a "or ie n inter.alul lungimelor de und 222-2DH nm* 4entru acea"ta ;,;/ g de meto#rolol "e trece ntr-un alon cotat cu ca#acitatea /;ml, "e adaug 1; ml acid clorhidric, etanol, hidroxid de "odiu "au cloroforrm i "e agit #n la di$ol.area com#let i "e aduce la cot &"oluia A'* Se ia 1 ml "oluie A i "e trece n alt alon cotat cu .olum 1;; ml i "e aduce cu "ol.ent core"#un$tor #n la cot &"ol.ent P'* S#ectrul de a "or ie al meto#rololului n aceti "ol.eni are urmtoarele maxime de a "or ie= a"tfel, n "oluia de alcool etilic are maximul la lungimea de und 22: nm, al "oluiei cloroformice maximele "e nregi"trea$ la 2DH nm, n hidroxid de "odiu- la lungimea de und 22/ nm, iar cel n acid clorhidric- la lungimea de und 222 nm* 4entru lucru de mai de#arte "-a determinat cur a de cali rare, unde ace"t maxim a fo"t ale" ca lungime de und analitic #entru determinarea metodei de do$are a meto#rololului n "u "tan, com#rimate i du# extragere din lichidele iologice X1,3,HY* 4re.enti. "-a cercetat de#endena a "or anei de concentraia meto#rololului* 4entru acea"ta ;,;1 g meto#rolol , "u "tan #ur, "e introduce intr-un alon cotat cu ca#acitatea de /; ml, "e di$ol. n cloroform i "e com#letea$ #Bn la cot &"oluia A ;,;2>'* 1;ml "oluie A "e #la"e$ n alt alon cotat cu ca#acitatea de /; ml i "e aduce cu cloroform #n la cot &"oluia P ;,;;:>'* Concentraia "oluiei P e"te de :; Vg Gml* )in "oluia P "e #regte"c o "erie de "oluii cu concentraiile core"#un$toare= /M 1;M 1/M 2;M 2/M 3; VgGml* Se citete a "or ana

ace"tor "oluii la lungimea de und 2DH nm, n cu.a cu drumul o#tic de 1; mm* 0n calitate de "oluie de referin "e utili$ea$ cloroformul* 0n a$a ace"tor date "-a con"truit graficul a "or anei n funcie de concentraia meto#rololului n "oluie de cloroform* )in cur a de etalonre a meto#rololului reie"e, c legea Pouguer Lam ert- Peer "e re"#ect 0n inter.alul de concentraie ;,1-3; VgGml de meto#rolol* 4e acea"t a$ "-a ela orat tehnica de lucru #entru do$area "#ectrofotometric n #ul ere i com#rimate* 3roarea relati. a metodei determinrii cantitati.e n com#rimate nu de#ete J ;,3 > * 0n continuare am a#licat metoda cromatografiei lichide de #erforman nalt &14LC', folo"ind coloana Lichro"or 1;;4-E* Conditiile= fa$a mo il A =P= C &acetonitril-acid fo"foric&;,;2/ . G.'- "ol tam#on trietilamin &H;=2/=1/', rata curentului ;,H mlGmin, detecia "-a 3 efectuat n 56 la WL 22F nm* (ot= 4re#ararea "ol tam#on +3A= Fml acid fo"foric conc* i 1; ml trietilamin, a# #n la F;;ml,"e aduce la #1 3,: cu acid fo"foric diluat i "e com#letea$ cu a# #n la 1 litru*
0,3 0,25 0,2 0,15 0,1 0.05 260 270 n m 280 290

$.'

276

2ig*1* S#ectrul de a "or ie al "oluiei de meto#rolol in cloroform*

0,3

2
0,25 0,2

0, 3

$$+
0,2 5

$$$

276

0, 2

A 0,15

0,1 5

0,1

0, 1

0.05 200 220 nm 240 260

0.0 5 20 0 22 0 24 0 26 0

n m

2ig*2* S#ectrul de a "or ie al "olutiei de meto#rolol in hidroxid de "odiu ;,1molGl

2ig*3* S#ectrul de a "or ie al "oluiei de meto#rolol n acid clorhidric ;,1molGl

0n continuare am determinat metoda de i$olare a meto#rololului din lichidele iologice cu a# acidulat acid "ulfuric i acid tricloracetic 3;>* Su "tana acti. "e extrage din mediul a$ic la #1 1;,;-11,; &(1:C1'*

MK0 )'

*=IL

A 1 ! * L 5 M
)in

2ig*:* 14LC* Cromatograma meto#rololului* C+nc" /ii A#licnd metoda "#ectrofotometric "-a "ta ilit maximul de a "or ie al meto#rololului n diferii "ol.eni= a"tfel, "#ectrul de a "or ie al meto#rololului n "oluie de alcol etilic are maximul de a "or ie N la lungimea de und 22: nmM "imilar "#ectrul de a "or ie al "olutiei cloroformice de meto#rolol la 2DH nm i "#ectrul de a "or ie al "oluiei de meto#rolol n acid clorhidric 222 nm, iar n hidroxid de "odiu - la lungimea de unda 22/ nm* S-au "ta ilit condiiile de indentificare #rin metoda cromatografiei #e "trat "u ire i 14LC* S-au efectuat reacii microcri"talo"co#ice caracteri"tice #entru meto#rolol i "#ectrometria n !<* S-a determinat metoda de i$olare i extragere a meto#rololului la #1 1;,; N 11,;* 7i2"i+#&a1i% 1* Paloe"cu C, Curea 3* Contolul medicamentelor - Pucureti= 3d* )idactic i #edagogic, 1FE3* #*12F N 13;* 2* Podoga P*, Maria 6irginia Coman * Cromatografie #e "trat "u ire N Pucureti= 3d*+ehnic, 1FF/ N 1H;#* 3* Cotelea +* +e$a de doctor 9!n.e"tigaii chimico N toxicologice a"u#ra cinari$inei i clonidinei9* Chiinu, 2;;2, *2;E#* :* bteqey ** lpcinghi *j* mncgmfmeynmz itiqm| ti gytghe ncmydiqggdmeynm r* 1F:E /* liomqeh *u* btvcgtmn ** kgqmfcm|f qenicydhett heeydh mmteh sdmmtxi 1FE1 N 23F y* H* kcmt{ngw** inqmtn *r* edgv -yendcgyngmm h icfixedmeyngf itiqm|e meh* vgcgh~e* 1FDH N 12H y* D* kg|vt{nghi u** mncgncmydiqqgyngmeynmz itiqm| icfixedmeynm ceicidgh m {vgh* gynhi, 1FHE* N 22H y*

IN'ESTIGAII CHIMICO6TO@ICOLOGICE ASU,RA METOCLO,RAMIDEI Ma&iana Han#an,1 Ta)a&a C+$%"%a,1 La&i-a S+"+vi+v! 1 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic 5SM2 7(*+e"temianu9 ! Centrul tiinific in )omeniul Medicamentului S ))a&. C<%)ic+6$+:ic+"+#ica" inv%-$i#a$i+n- +n )%$<+c"+5&a)i(% e ela orated the +LC method of methoclo#ramide identification , u"ing t%o de.elo##ed ","tem", "#ecro#hotometric method of Tuantitati.e determination for methoclo#ramide in #o%der and ta let" of ;*;1g* 5"ing the anal,tical method" ela orated , u" o.er the artificial te"t there %a" extracted metoclo#ramide from iological liTuid" &#la"ma, urine'* +he out#ut of methoclo#ramede from #la"ma %a" /;*::>M from urine- :H*E;> 1a.ing con"idered the ela orated method" a" "#ecific and re#roducti.e the, are recommended for the "tud, of methoclo#ramide in iological liTuid"* R%/ )a$ A fo"t ela orat metoda cromatografiei #e "trat "u ire de identificare a metoclo#ramidei, utili$Bnd 2 "i"teme de "ol.eni,metoda "#ectrofotometric de do$are n #ul ere i comrimate ;,;1g* A#licBnd metodele analitice ela orate de noi la #ro ele iologice n I.itro9 "-a efectuat extracia metoclo#ramidei din lichidele iologice* <andamentul metoclo#ramidei din #la"ma "anguin e"te de /;,::>, din urin-:H,E;>* )at fiind fa#tul, c metodele folo"ite "unt "#ecifice i re#roducti.e ele "e recomand #entru "tudierea metocl#ramidei n lichidele iologice* Ac$ a"i$a$%a $%)%i Clorhidratul de metoclo#ramid Xclorhidratul de :-amino-/cloro-(-X&2-dietilamino' etilY-2 meloxi en$amidY "e utili$ea$ #e larg n medicin n ca$ de .om i grea de diferit etiologie &#o"to#erator, n cadrul olii de iradiaie, #ro.ocate de medicamente', "ughi, e"ofagit de reflux, "ta$ ga"tric, di"#e#"ie, flatulen, migreneM #entru uurarea tu aAului duodenal i #entru examenul radiologic ga"trointe"tinal* 3"te un anti.omiti. #rin aciunea "a central, crete tonu"ul "fincterului inferior al e"ofagului fa.ori$ea$ golirea "tomacului #rin "timularea #eri"talti"mului ga"tric i relaxarea "fincterului #iloricM i "e atri uie un efect de normali$are a funciilor motorii i "ecretorii ale tu ului dige"ti., #rin mecani"m central* )atorit ace"tor #ro#rieti farmacologice, metoclo#ramida e"te utili$at #e larg n medicin* 0n anumite condiii, #re#aratul #o"ed aciuni ad.er"e i toxice* Sunt cuno"cute ca$uri de intoxicaie a #o#ulaiei cu ace"te #re#arate medicamentoa"e* )in ace"te con"iderente #re$int i intere"ul deo"e it a"u#ra "tudiului metoclo#ramidei n lichidele iologice* O2i%c$iv%"% " c&9&ii )e a efectua "tudiul n .ederea determinriii metodelor de i$olare, extragere, identificare i do$are a ace"tui #rodu" medicamento" extrae din lichidul iologic* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% (% c%&c%$a&% 0n cadrul cercetrilor "-a folo"it metoclo#ramida act. #ur, comrimate 1; mg* A fo"t folo"it #la"ma "anguin i urina ca lichide iologice* Au fo"t a#licate metode chimice de anali$ re$ultatele au fo"t #relucrate du# criteriul "tudent* Ca reageni "-au utili$at n in.e"tigaiile ex#erimentale= "oluie nitrit de "odiu, nafol, acid nitric, hidroxidul de "odiu, cloroformul, reacti.ul )ragendorff etc* care au fo"t cu gradul de #uritate 7#ur #entru anali$9 i 7chimic #ur 9* Metoda chimic de identificare a metoclo#ramidei "e a#recia$ #rin reacti.ii de #reci#itare= reacti.ul )ragendorff, ce formea$ un #reci#iat run, iar cu reacti.ul Lei ermann-#reci#itat gal en-oranAM i de coloare= cu reaci.ul Mandelin-coloraie cafenieM reactia de formare a a$ocolorantului-#reci#itat ro"u carami$iu* Cromatografia #e "trat "u ire "e di"tinge #rin a.antaAe remarca ile n ceea ce #ri.ete ra#orturile numrul de anali$e G ma" i .olumul a#aratului folo"it, numrul de anali$e G tim# de r"#un" "au numrul de anali$e Gco"t de amorti$are a in.e"tigaiilor X2, 3, H, EY* Se#ararea "u "tanelor din #ro a anali$at #rin metoda CSS, "e reali$ea$ #rin reacia diferit a

com#onenilor ace"teia, n urma unor #roce"e fi$ico-chimice, care "e de"foar la "u#rafaa fa$ei "taionare &"olide', #rin trecerea continu a unei fa$e mo ile &lichide', care #oart com#uii re"#ecti.i* 2iecare com#onent difer, n com#ortarea "a fa de granulele "or entului fa$ei "taionare i a"tfel, e"te reinut mai mult "au mai #uin la "u#rafaa ace"tora, "e#arBndu-"e de ceilali com#oneni, #re$eni n ame"tecul iniial X1Y* 0n #re$enta lucrare am folo"it metoda de identificare a metoclo#ramidei a#licBnd metoda cromatografiei #e "trat "u ire #e #lci "tandarde de "ilicagel ? X/, H, DY* 0n re$ultatul cercetrilor #re.enti.e, #entru identificare "e #ro#un urmtoarele "i"teme de "ol.eni= metanol - ammoniac 2/> &1;; =1', cloroform - metanol &F;=1;' #entru care "-a determinat .aloarea <f egal cu ;*:D i ;,D;* 0n calitate de rele.ant "-a utili$at reacti.ul )ragendorff, .a#ori de iod i reacti.ii #entru formarea a$ocolorantului* 4rin urmare ;*1 g metoclo#ramid "e di$ol. n1;; ml, "e adaug cloroform &"oluia A'* Se ia ;,1 ml "oluie A n 1;; ml cloroform &"oluia P'* 4e linia de "tart a #lcii "e a#lic cu ca#ilarul de "ticl 2 Ol "oluie P, #laca "e introduce n .a"ul cromatografic i "e cromatografia$ a"cendet n "i"tema de "ol.eni co#re"un$tori* CBnd frontul de "ol.eni #arcurge 2G3 din lungimea total a #lcii cromatografice, ultima "e "coate din .a", "e u"uc la aer i "e #relucrea$ cu reacti.ul )ragendorff "au cu .a#ori de iod, "#oturile de metoclo#ramid "e colorea$ n gal en N cafeniu* Alte 2 cromatograme, n "i"temele re"#ecti.e de "ol.eni, "e #relucrea$ cu acid clorhidric, nitrit de "odiu i "oluie naftol* S#oturile de metoclo#ramid "e colorea$ n ro$* Se determin .alorile <f* Sen"i ilitatea e"te de 1; OgGml* Metod de identificare i a#reciere a "u "tanelor medicamentoa"e a$at #e com#ararea "#ectrelor "u "tanelor de referin "u a"#ectul anali$ei "tructurale e"te "#ectrofotometria de a "or ie n 56* 4entru identificarea metoclo#ramidei "-au inregi"trat "#ectrele de a "or ie n "oluie de acid clorhidric ;,1 molGl , alcool etilic FH> i cloroform la inter.alul lungimilor de und 22;-3E; nm* #entru acea"ta ;,1g metoclo#ramid "e trece intr-un alon cotat cu ca#acitatea 1;; ml, "e adaug H; ml acid clorhidric, alcool "au cloroform #Bn la di$ol.area com#let i "e aduce la cot cu "ol.entul core"#un$tor, &"oluia A'* Se ia 1ml "oluie A i "e trece n alt alon cotat cu .olumul 1;; ml "e aduce cu "ol.ent core"#un$tor #Bn la cot, &"oluia P'* Se "#ectrofotometrea$ n cu. cu gro"imea "tratului de 1 cm n inter.alul lungimii de und 22;3E;nm* S#ectru de a "or ie a "oluiei P cu concentraia ;*;;1 > e"te #re$entat n figura 1*
1,00

0,8

$'-%<! 0,6 A 0,4 $<'%!, *!&%-.

0,2

0,00 250,0 260 280 300 nm 320 340 360,0

Fi#=1 S5%c$& " (% a2-+&2Bi% a" -+" Bi%i (% )%$+c"+5&a)i(9 ;n c"+&+1+&)

4entru lucru de mai de#arte "-a determinat cur a de cali rare unde ca lungime de und analitic "-a luat WL2D; nm* )in cur a de etalonare a metoclo#ramidei reie"e, c legea Pouguer Lam ert-Peer "e re"#ect n inter.alul de concentraie 2-3; OgGml metoclo#ramid* !n acea"t a$ "-a ela orat tehnica de lucru #entru do$area "#ectrofotometric n #ul ere i com#riomate* 4entru identificare metoclo#ramidei n "u "tan am a#licat metoda "#ectro"co#iei n !< du# care "e #oate deduce detalii de "tructur a #re#aratului* )in "#ectrul !< a metoclo#ramidei "e di"ting urmtoarele en$i de a "or ie la lungimile de und= 1/F;, 1H1:, 1/3;, 1:FH, 12/:, 1311 cm-1* Cromatografia de lichide de nalt #erforman n #re$ent e"te cea mai #o#ular metod de anali$ in"trumental n la oratoare de analli$ i control n domeniul farmaceutifc !dentificarea medicamentelor "e face du# tim#ul de retenie a fiecrui com#onent* )o$area "e efectuia$ du# aria #icului, care e"te #ro#orional cu cantitatea de medicament n #ro X3, :,Y* 0n condiiile= coloana C1E LiChro"#her 1;; <4-1Ee &12/x :, /;mm' mrimea #articulelor / mM rata curentului ;,H mlGmin t 2/CM lungimea de und 2F/ nm #entru identificare metoclo#ramidei am o inut un #ic cu tim#ul de retenie 2,H min &fig2'* I/+"a&%a, %:$&a#%&%a 0i (+/a&%a )%$+c"+5&a)i(%i (in "ic<i(%"% 2i+"+#ic%S;n vi$&+T S-au "tudiat metode de i$olare cu a#a alcalini$at cu "oluie (aC1 1; >* La : ml #la"m "e adaug 2 ml "oluie metoclo#ramid ;,;2 >, "e la" #e 2: ore, a#oi "e acidulea$ cu "oluie de acid "ulfuric 1; > #Bn la #1 2,; - 2,/ &hBrtia indicator uni.er"al'* Ame"tecul "e la" #e 2 ore, agitBndu-"e #eriodic, a#oi "e adaug 3 ml "oluie acid tricloracetic 3; >, "e agit i "e centrifughea$ tim# de 1; minute &/;;; rotGmin'* Centrifugatul "e "e#ar, iar re$iduul nc de 2 ori "e #relucrea$ cu acid "ulfuric ;,;2molGl "u controlul #1 2,; N 2,/ i din nou "e centrifughea$* Centrifugatele "e une"c i "e filtrea$* Se .erific .aloarea #1-ului, care tre uie " fie egal cu 2,;* "oluia a#oa" "e alcalini$ea$ cu "oluie (aC1 1;> #Bn la #1 F,;-1;,; &hBrtia indicator uni.er"al'* Se extrage cu cloroform de 3 ori cBte / ml, extraciile cloroformice "e une"c*
2E3 m6 2, H

A 1 ! * L 5

)in

Fi#=! H,LC= C&+)a$+#&a)a )%$+c"+5&a)i(%i 0n extractul cloroformic "e determin coninutul de metoclo#ramid #rin metoda "#ectrofotometriei 56* 4entru acea"ta, : ml extract cloroformic "e #la"ea$ ntr-un alon cotat cu ca#acitatea de 1; ml, .olumul "e aduce cu cloroform la cot i "e citete a "or ana la "#ectrofotometru, la lungimea de und 2D2 nm, n cu.a cu drumul o#tic de 1; mm*&fig*:' 0n calitate de "oluie de referin "e utili$ea$ cloroformul* 4aralel, "e anali$ea$ #ro a cu "oluie metoclo#ramid "tandard*

1,00

0,8

0,6 $'-%&A 0,4 $-&%-, *!!%!!

0,2

$'.%--

0,07 240,0 260 280 300 nm 320 340 360,0

Fi#=L S5%c$& " (% a2-+&2Bi% a" -+" Bi%i (% )%$+c"+5&a)i(9 %:$&a-9 c c"+&+1+&) (in 5"a-)a -an# in9 <e$ultatele o inute ne demon"tre$c c din #la"m cloroformul extrage /;,::>, iar din urin :H,E;> metoclo#ramid* C+nc" /ii A#licBnd metoda "#ectrofotometric "-a "ta ilit maximul de a "or ie al metoclo#ramidei la lungimile de und 2D; i 311 nm* S-au "ta ilit condiiile de identificare #rin metoda cromatografiei #e "trat "u ire, "#ectro"co#iei n !< i 14LC* S-a determinat metoda de i$olare i extragere a metoclo#ramidei din lichidele iologice* 7i2"i+#&a1i% 1* Paloe"cu C*, Curea 3* Controlul medicamentilor- Pucureti= 3d* )idactic i #edagogicM 1FE3, #*12FN13;* 2* Pogoda P*, Maria 6irginia Coman* Cromatografia #e "trat "u ire- Pucureti= 3d* +ehnic, 1FF/-1H;#* 3* )aniela Lucia MunteanM Mariu" PoAiM Controlul medicamentelor* &metodele "#ectrale, cromatografice i electrografice de anali$'* 3d* Med* 5ni.er* 7!uliu 1atiganu9 CluA-(a#oca 2;;3N3;3#* :* lipc r*, teq~icv *, etet b* m vc* uygngendmhti{ mvngydti{ cgfidgcim{ h omgmfmm- gynhi= mc, 1FEE* N HEE c* /* lpqidgh *j* iqmtnmt *k* kcindmeynge cpnghgvydhg g gdgngqgcmfedcmeynmf fedgvif itiqm|i N * mfm{, 1FDH N 3DHy* H* shicx u* gtngyqgzti{ cgfidgcim{ - gynhi= evmxmti, 1FDH-2DHy* D* sef{nmt **, kcmfetetme cgfidgcimm h icfixmm GGbdetge veqg* N 1FH3-(r3c3E* E* sdiq~ * cgfidgcim{ h dgtnm yqg{ N gynhi= mc1FH3-3;Fy

STUDIUL ,ARACETAMOLULUI FN LICHIDELE 7IOLOGICE Ma&ia C+-$in1 Ta)a&a C+$%"%a,1 L%+ni( L;-;i! 1 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic 5SM2 I(* +e"temianu9 2 Catedra Piochimie i iochimie clinic 5SM2 I(* +e"temianu9 S ))a&. ,a&ac%$a)+" S$ (. in $<% 7i+"+#ica" Li> i(e u"ed 4aracetamol #hi"ico-chemical method" in the #ure "u "tance for it" anal,"i" in the lood #la"ma* +he identification 2eCl3 reaction, (e""ler reagent, Lie ermann* Chromatogra#h, on the thin la,er in the eth,lacetate-metanol-ammonia 2/ > &E/=1;=/' there %ere u"ed* 2eCl 3 i" u"ed a" an eluent, o taining <f L :*/ cm* +here %a" u"ed 56 "#ectro#hotometric method in the h,droxide for identification o taining maximum a "or#tion on 2:: and 2/E %a.e length" #1 L 3,; .alue of the extraction medium %ith chloroform organic extragent, a" %ell a" 14LC method %a" ela orated in order to determine the #urit, of "u "tance* +he u"ed method" %here a##lied according to chemico-toxicological anal,"i" condition" of 4aracetamol in the iological liTuid"* R%/ )a$ Am a#licat metode chimice i fi$ico-chimice de identificare a #aracetamolului n "u "ta #ur i #la"m "anguin* Am folo"it reaciile de identificare cu 2eCl 3, r-.ul (e""ler, reacia Lie ermann* Am a#licat cromatografia #e "trat "u ire n "i"temele de "ol.eni etilacetatmetanol-amoniac 2/> &E/=1;=/'* Ca de.elo#ant am folo"it clorura de fier &!!!', o inBnd un <fL:,/cm* )ea"emenea am a#licat metoda "#ectofotometric 56 n acidul clorhidric i hidroxid de "odiu o inBnd maxime de a "or ie la lungimea de und 2:: i 2/E nm re"#ecti.* S-a determinat .aloarea #1L3,; a mediului de extracie cu extragentul organic cloroform*, #recum i metoda 14LC de identificare n "u "tan* Metodele folo"ite core"#und condiiilor de anali$ chimico-toxicologic a #aracetamolului n lichidele iologice* Ac$ a"i$a$%a $%)%i 4aracetamolul &para-acetil-amino-fenol) e"te un #re#arat cu aciune analge$ic, datorit inhi rii "inte$ei #ro"taglandinelor i anti#iretic, acionBnd la ni.elul centrului termoreglrii din hi#otalamu"* 4o"edBnd o excelent iodi"#oni ilitate du#a admini"trarea oral* )u# admini"trare, E;-F;> e"te meta oli$at n ficat #rin conAugare, re$ultBnd glucurono&cea mai mare #arte' i "ulfoconAugai, excretai a#oi n urin* C mic fraciune ia calea citocromului 4:/; din mitocondriile he#atice, fiind "ur"a unui meta olit foarte toxic, deoarece im#lic formarea unui com#onent intermediar, #rodu" de oxidare &acetilimidoTuinona' care e"te ra#id inacti.at #rin conAugare cu glutation i eliminat n urina* 0n ca$ de "u#rado$are cile de inacti.are #rin "ulfo- i glucurono-conAugare "e "aturea$ i a"tfel "e recurge la calea oxidati. a citocromului 4:/;* Meta olitul intermediar, toxic datorit gradului mare de reacti.itate e"te ra#id conAugat cu glutation* <e$er.ele he#atocelulare de glutation "e e#ui$ea$ n intoxicaiile ma"i.e "au n ca$ul in"uficienei he#atice, i a"tfel #rodu"ul intermediar (-acetilimidoTuinona li er difu$ea$ n cito#la"ma he#atocitelor, aAungBnd " reacione$e ire.er"i il cu glico#roteinele mem ranare, aAungBndu-"e la citoli$, cu necro$ he#atic generali$at i im#licit in"uficien he#atic &fig* 1'* )eci mecani"mul de toxicitate a #aracetamolului con"t n e#ui$area re$er.elor he#atocelulare de glutation care duce la citoli$ cu necro$ he#atic* Semnele unei intoxicaii a#ar la do$e foarte .ariate, nce#Bnd cu /-E g, n ca$ul co#iilor do$ele #ericuloa"e #ot fi mult mai mici* X :, /, H, EY O2i%c$iv%"% " c&9&ii 0n legtura cu creterea ntre uinrii #re#aratelor medicamentoa"e, "e marete nece"itatea a#licrii metodelor mai informati.e n anali$a ace"tora* Studierea legitilor re#arti$rii "u "tanelor n organi"m dea"emenea "olicit metode de examinare ra#ide i "en"i ile*

Sco#ul lucrrii con"t n "ta ilirea metodelor de identificare i do$are a 4aracetamolului ( cetaminofen) para-acetil-amino-fenol)) #recum i a metodelor de i$olare a ace"tuia din materialul iologic*

io!r"n#$orm"r%" &"r"c%!"molului Sul$o)con*ug"!i O HN CH3 HN O CH3 HN Glucurono)con*ug"!i O CH3

'%nol #ul$o!r"n#$%r"(" O HO / 50 )) 60+ 0 OH S OH OH C"l%" o,id"!i-" " Ci! & 450

Glucuronil !r"n#$%r"(" OHglucuronid / 25 )) 35+ 0 O HN CH3

O O HN CH3 HN CH3 O N "c%!il 1%n(o#%mic2ininimin", r"dic"l li1%r

GS OH Glu!"!ion con*ug"!ul ."r"c%!"molului /"cid "c%!"mino$%n 3 m%rc".!uric0

O N "c%!il .)1%n(oc2inonimin" Ci!o!o,ic

3%g"r% d% .ro%!%in%l% r%n"l% cu "l!%r"r%" (on%i m%dul"r%

3%g"r% d% .ro!%in%l% 2%."!ic% , $".! c% duc% l" n%cro(" c%n!rilo1ul"r" Fi#=1= 7i+$&an-1+&)a&%a ,a&ac%$a)+" " i
Ma$%&ia"% 0i )%$+(% (% c%&c%$a&%

0n cadrul cercetrilor "-a folo"it #aracetamol "u "tan #ur, com#rimate de /;; mg* A fo"t folo"it #la"ma "anguin i urina ca lichide iologice* Au fo"t a#licate metode chimice de anali$* <e$ultatele au fo"t #relucrate du# criteriul "tudent* 0n in.e"tigaiile ex#erimentale ca reageni "-au utili$at clorura de fier &!!!', formBnd o coloraie al a"tr-.ioleta, r-.ul (e""ler, ce formea$ coloraie gal en, reacti.ul Lie ermann N coloraie .iolet, etilacetat, metanol, amoniac 2/> , acidul clorhidric, hidroxid de "odiu, cloroform care au fo"t cu grad de #uritate I#ur #entru anali$9 i Ichimic #ur9* X1, 2Y 4entru identificarea #aracetamolului am a#licat metoda CSS folo"ind #lci cromatografice cu coninut de "ilicagel ?* S-a utili$at "i"teme de "ol.eni etilacetat-metanol-amoniac 2/> &E/=1;=/', metanol=amoniac 2/> &1;;=1,/', #entru care "-a determinat .aloarea <f L :,/M F,/* Ca de.elo#ant am folo"it clorura de fier &!!!'* ;,;1 g de #aracetamol "e di$ol. n 1;; ml cloroform &"oluia A'* )in "oluia A lum u1 ml i di$ol.m n 1; ml cloroform &"oluia P'* 4e linia de "tart a #lcii "e a#lic 2 Ol "oluie P, #laca "e introduce n camera de cromatografiere i "e cromatografia$ a"cendent n "i"temul de "ol.eni core"#un$tor, cBnd frontul de "ol.eni .a #arcurge 2G3 din lungimea total a #lcii cromatografice, #laca "e "coate din .a" "e u"uc la aer i "e #ul.eri$ea$ cu "oluie de clorura de fier &!!!'* S#oturile de #aracetamol "e colorea$ in al a"tru-.iolet* Se determin .alorile <f* Sen"i ilitatea reciei e"te de 1; OgGml* Sen"i ilitatea metodei ne d #o"i ilitate de a o a#lica n extra"ul organic din lichidul iologic cu coninut de #aracetamol* X1;Y Metod de identificare i a#reciere a "u "tanelor medicamentoa"e a$at #e com#ararea cu "#ectrele "u "tanelor de referin "u a"#ectul anali$ei "tructurale e"te "#ectrfotometria de a "or ie n 56* A"tfel #entru identificarea #aracetamolului "au nregi"trat maximele de a "or ie la lungimile de und 2:: i 2/E nm la .aloarea #1L3,; a mediului de extracie cu extragentul organic cloroform &fig* 2'* XFY 4entru identificarea #aracetamolului n "u "tan am a#licat metoda "#ectro"co#iei !<, care ne ofer #o"i ilitatea " #rimim o informaie com#let de"#re "tructura i com#o$iia moleculelor n "u "tan* 4re$ena en$elor de a "or ie caracteri"tice "#ectrului !< core"#und o"cilaiilor anumitor gru#e funcionale*` 0n cele din urm cu aAutorul a#aratului IS#ecord D/9 n inter.alul :;; N :;;; cm 1 am o inut "#ectrul #aracetamolului n "u"#en"ie de ulei de .a"elin &aPr'* 4rinci#alele en$i de a "or ie au fo"t identificate n inter.alul lungimilor de und 1/;H, 1H/D, 1/H/, 12H3, 122D, 1H12,cm- &fig* 3'* XDY A
;,D ;,H ;,/ ;,: ;,3 ;,2 ;,1

Fi#= !=S5%c$& " 5a&ac%$a)+" " i ;n U'

Fi#=* S5%c$& " 5a&ac%$a)+" " i ;n IR

Conform "tructurii chimice #aracetamolul e"te un com#u" ionic, ne-am #ro#u" " folo"im #o"i ilitatea de anli$ #rin metoda cromatografiei lichide de nalt #erforman &14LC', folo"ind o coloan Lichro"or C1E <4 &1/; x :,;mm', mrimea #articulelor 3 OmM Am utili$at ca eluent ame"tecul fa$a mo il N a# N acetonitril /;=/;M t 2/ CM lungimea de und 313 nm* I/+"a&%a 0i %:$&a#%&%a 5a&ac%$a)+" " i ;n "ic<i(% 2i+"+#ic% S;n vi$&+T S-a "tudiat #roce"ul de i$olare al #aracetamolului n lichide iologice cu a# acidulat cu acid "ulfuric 1;> i acid tricloracetic 3;>* La : ml #la"m "anguin "e adaug 3 ml "oluie alcoolic de #aracetomol ;,1 >, "e la" #e 2: ore* A#oi acidulm cu "oluie de acid "ulfuric 1; > #n la #1 2,;-2,/ &hBrtia de indicator uni.er"al'* Ame"tecul "e la" #e 1-2 ore, agitBndu-"e #eriodic, a#oi "e adug 3 ml "oluie de acid tricloracetic 3; >, "e agit i "e centrifughea$ tim# de 1; min &/;;; rotGmin'* Centrifugatul "e "e#ar, iar re$iduul nc de 2 ori "e #relucrea$ cu "oluie de acid "ulfuric ;,;2 molGl "u controlul #1 2,;-2,/ i din nou "e centrifughea$* Centrifugatele "e une"c i "e filtrea$* A#oi "e extrage cu cloroform de 3 ori cBte / ml* 3xtraciile cloroformice "e une"c i .olumul "e aduce #Bn la 2; ml* 0n extractul cloroformic "e determin coninutul de #aracetamol #rin metoda "#ectrofotometriei 56* 4entru acea"ta extra"ul cloroformic "e "#ectrofotometrea$, citindu-"e a "or ana "oluiei la lungimea de und 2H/ nm n cu.a cu drumul o#tic de 1; mm* 0n calitate de "oluie de referin "e utili$ea$ cloroformul* 4aralel "e anli$ea$ #ro a cu "oluie #aracetamol "tandard* 'repararea !olu"iei !tandard ;,;/ g &ma"a exact' #aracetamol, "u "tan de referin, "e trece cantitati. nt-un alon cotat cu ca#acitatea de 1;; ml, "e di$ol. ntr-un .olum de 1; ml i "e aduce la cot cu acelai "ol.ent &"ol* A'* 1 ml "oluie A "e #la"ea$ n alt alon cotat cu ca#acitatea de /; ml i .olumul "e com#letea$ #Bn la cot cu acelai "ol.ent &"ol* P'* 1 ml "oluie P conine 1; Og #aracetamol* X3Y C+nc" /ii S-a fcut o anali$ i liografic n ceea ce #ri.ete meta oli"mul medicamentelor n organi"mul uman* S-au determinat metodele chimice de identificare a C-( cetilamino)fenol n "u "tan #ur i du# extracie din materialul iologic* A#licBnd metoda "#ectrofotometri "-a "ta ilit maximul de a "or ie al #aracetamolului n acidul clorhidric i hidroxid de "odiu o inBnd maxime de a "or ie la lungimea de und 2:: i 2/E nm re"#ecti.* S-au "ta ilit condiiile de identificare #rin metoda CSS i 14LC* S-a determinat metoda de i$olare i extragere a #aracetamolului la #1 2,;-2,/* 7i2"i+#&a1i% 1* Pa ile. 2* 6* Chimie farmaceutic-Chiinu, 5ni.er"ita", 1FF: N 3/1#* 2* PoAi Mariu", Sndule"cu <o ert, <oman Li.iu, C#ren <adu= Anali$a i controlul Medicamentelor, 6ol* 2 N !ntelcredo )36A 2;;3 N DHE#* 3* Cotelea +* +e$a de doctor I!n.e"tigaii chimico-toxicologice a"u#ra cinari$inei i clonidinei9 Chiinu, 2;;2 N 2;E#* :* Le"ter M*, Md* 1addad, Michael * Shannon, A inche"ter, Rud, 2letcher 3ditor', Lame" 4* inche"ter= Clinical Management of 4oi"oning and )rug C.erdo"e /* Matco."chi C*, 4roco#iin 6*, 4arii P* ?hid 2armacotera#eutic N Chiinu, 2;;H-FEH #* H* Matthe% R* 3llenhorn, Seth Schon%ald, ?ar, Crdog, Ronathan a""er erger= 3llenhorn" Medical +oxicolog,= )iagno"i" and +reatment of 1uman 4oi"oning &Medical +oxicolog,', 2nd edition, 1FFD D* (acani"hi aCL* !nf N red a "or tion S#ectro"co#, N 4ractical 1olden )af ine, +o8$o, 1FH: N 21H#* E* <oman 6laicu, 3milia Maca.ei, !oan Murean= 4ractica urgenelor medicale, .ol* 1, 1FDF F* kcmt{ng w* j*, iqmtn * r* edgv N yendcgyngmm h icfixehydmeyngf itiqm|e N meh= vgcgh~e, 1FDH-12Hy* 1;* shicx u* gtngyqgzti{ cgfidgcim{ N gynhi= evmxmti, 1FDH N 2DHy*

RISCUL DE INTO@ICAIE CU AMINOFILIN I CONDIIILE O,TIME DE ANALIZ CHIMICO6TO@ICOLOGIC 'ic$+&ia Ci+2an , 1 Ta)a&a C+$%"%a,1L%+ni( L;-;i2 1 Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic 5SM2 7(*+e"temianu9 2 Catedra Piochimie i iochimie clinic 5SM2 7(*+e"temianu9 S ))a&. C+n$&i2 $i+n in -$ (.in# c<%)ica"6$+:ic+"+#. +1 a)in+5<.""in% in 2i+$&an-1+&)a$i+n 5&+c%-+he main idea of thi" %or8 %a" to de.elo# #h,"ical-chemical method" , in.e"tigation theo#h,lline !"olation te"t" from iological liTuid" %ere affected in 41 di.er"ion"* <e"ult" confirmed , thin la,er of chromatogra#h, a##lication*A##lication of mo ile #ha"e" of methanol-"ol*ammonium2/> &1;;-1*/' %ith <f ;*D/,and 56 "#ectro#hometr, %ith maximum a "or tion , %a.e length 2D/ nm, !< "#ectro"co#, &"u"#en"ion in oil of 6a"eline ' %ith and a "or tion 1HD;,1D1D,1/HD,D1/,FE; cm &aPr' !dentification of theo#h,lline %a" determined , 14LC method*+hi" method im#licate" coloumn C 1E Lichro"#her 1;;-<4-1EC %ith #recoloun Lichrocort-12:-: in mo ile #ha"e trietilamine 1:H Vl , 4ho"#horic acid D/; Vl, ater till /3; ml,41-3,3 %ith (a;1 "olution 1;> and a##l, Acetonitril till D/; ml* Current rate i" ;*H mlGmin R%/ )a$ Sco#ul lucrrii a fo"t de a de$.olta metodele fi$ico-chimice de cercetare a"u#ra teofilinei* 4ro ele de i$olare din lichidele iologice au fo"t efectuate la di.er"e #1-uri* <e$ultatele "-au confirmat #rin a#licarea cromatografiei #e "trat "u ire, a#licnd fa$ele mo ile metanol N "ol* amoniac 2/ > &1;; = 1,/' cu .aloarea <f ;,D/, i "#ectrofotometria 56 cu maxim de a "or ie la lungimea de und 2D/ nm, "#ecto"co#ia !< &"u"#en$ie n ulei de .a"elin' cu en$ile de a "or ie la 1HD;, 1D1D, 1/HD, D:/, FE; cm-1 &aPr'* !dentificarea teofilinei "-a determinat i #rin metoda 14LC a#licnd coloana C1E Licho"#her 1;;-<4-1E C cu #recoloan Lichrocort 12:-: n fa$a mo il trietilamin 1:H Vl,, acid fo"foric D/; Vl, a# #n la /3;ml, "e aAu"tea$ #1 3,3 cu "oluie (aC1 1;> i "e aduce cu acetonitril la D/;ml* <ata curentului ;,H mlGmin* Ac$ a"i$a$%a $%)%i 0n domeniul toxicologiei medicale "tudiul in.e"tigaiilor chimico-toxicologice a do ndit n ultimii ani un intere" deo"e it* Metodele a#licate n cercetrile actuale au #ermi" cercetarea de$echili relor a#rute n meta oli"mul #re#aratelor medicamentoa"e n ca$ul diferitor #atologii* +era#ia olii a"tmatice i hi#ertonice "e confrunt n ultimii ani cu #ro lema re$i"tenei organi"mului .i"-a-.i" de medicamentele #ro#u"e, difer de la co#il la adult de la om la om din cau$a meta oli"mului com#uilor medicamentoi, care e"te n de#enden de "i"temul micro"omal al ficatului* AminofilinaX1,3Y-dimetilxantilxantino-X1,2Y-etilendiamina "e utili$ea$ #e larg n #ractica medical datorit aciunii antia"tmatice* 0n ca$ul admini"trrii aminofilinei la olna.ii afectai de he#atit cronic din cau$a in"uficienei micro"omaleM meta oli"mul ei nu "e #etrece com#letM "e ntreru#e la formarea teofilinei i n cele din urm la do$ele re#etate are loc acumularea meta olitului teofilina care e"te foarte toxic* O2i%c$iv%"% " c&9&ii Lucrarea i #ro#une cercetarea chimico-toxicologic a aminofilinei n e.aluarea unor a"#ecte iochimice #ri.ind meta oli"mul aminofilinei* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% (% c%&c%$a&% 0n cadrul cercetrilor "-a folo"it teofilin "u "tan #ur* A fo"t folo"it #la"ma "anguin al olna.ului afectat de he#atita cronic* * 0n ca$ul admini"trrii aminofilinei la olna.ii afectai de he#atit cronic din cau$a in"uficienei micro"omale, meta oli"mul ei nu "e #etrece com#let, "e ntreru#e la formarea teofilinei & 1,3-dimetilxantina'* +ran"formarea re"#ecti.a e"te relatat mai

Ao" &fig*1'* La cumularea meta olitului 1*3- dimetilxantina "e #roduce intoxicaie gra.* Ace"t #roce" "e ntBm#l din cau$a inhi rii en$imei C,# 231* 1,3-dimetilxantina "e cumulea$ n cantiti mari i afectea$ "i"temul de a#rare antioxidant #ro#riu al organi"mului*Mecani"mul de intoxicare cu 1,3-dimetilxantina con"t n e#ui$area re$er.elor he#atocelulare de glutation, carea duce la citoli$ i urmat de necro$ he#atic* Semne de intoxicaie a#ar n de#enden de .Br"t, gen, #atologie* C
1 6 7

13C ( C
2

(12 12C * (
9 8

(12 (12 (D demetilare C,# 231 C 13 C ( C ( C13 ( oxidare la CE

(3

12C

C13

3ufilina

C 13C ( C ( 1 (1-CC-C13 NH2

(12 (1demetilare

1-metil-xantina

C 13C ( C ( C13 N H (1 O

1,3-dimetilxantina, +eofilina C (3 demetilare 13C ( (1 C ( 1 N H O

acid 1,3-dimetiluric

acid 1-dimetiluric

C (1-CC-C13 ( 1 NH ) CHO

13C ( C

Fi#=1 Sc<%)a )%$a2+"i/9&ii a)in+1i"in%i ;n +&#ani-) " -9n9$++eofilina formea$ o "erie de reactii #articulare= la di$ol.area n "oluia de amoniac i la interaciunea ace"tei "oluii cu "rurile de co alt, "e formea$a un #reci#itat al cu nuan ro$ de "are com#lexM cu "oluia de nitro#ru"iat de "odiu d o coloraie "ta il .erde-inten", care #rin adugarea unui "ur#lu" de acid, di"#are*)ea"emenea formea$ "are de argint care #re$int un #reci#itat gelatino" La ncl$ire cu (aC1 intr n reacie de conden"are i formea$ culoare ro$.iolet* Ace"te reacii "e "tudia$ mai ntai #e "u "tan #ur, a#oi "e a#lic n extra"ul organic din materialul iologic* 4entru identificarea teofilinei am a#licat metoda CSS folo"ind #lci cromatografice cu coninut de "ilicogel ?* S-au utili$at 2 "i"teme de "ol.eni= metanol-"ol*amoniac 2/>&1;;=1,/',

eter dietilic-etilacetat&E=2', #entru care "-a determinat .aloarea <f egal cu ;,D/M ;,H* Ca rele.ani "-au utili$at reacti.ul )ragendorff i 1Cl 2;> cu cri"tale de aMnC:* ;*;1g teofilin "e di$ol. n 1;; ml alcool etilic FH> &"oluia A'* 1 ml "oluia A "e #la"ea$ n alon cotat cu ca#acitatea de 1; ml i "e aduce cu alcool etilic #Bn la cot &"oluia P'* 4e linia de "tart a #lcii "e a#lic cu ca#ilarul de "ticl 2 Vl "oluie P #laca "e introduce n .a"ul cromatografic i "e cromatografia$ a"cendent n "i"temul de "ol.eni core"#un$tor* CBnd frontul de "ol.eni .a #arcurge 2G3 din lungimea total a #lcii cromatografice, ultima "e "coate din .a", "e u"uc la aer i "e #ul.eri$ea$ cu reacti.ul )ragendorff "au "e #relucrea$ cu .a#ori de iod* 4entru identificarea 1,3-dimetilxantinei "-a nregi"trat "#ectrul de a "or ie n ulei de .a"elin &;*;/ g teofilin i / #icturi de ulei de .a"elin', n inter.alul lungimilor de und :;;-:;;; cm-1 S-au de#i"tat urmtoarele en$i de a "or ie= n regiunea D:/, FE;, 1/HD 1HD; 1D1D cm-1

Fi#=*=* S5%c$& " (% a2-+&2Bi% a" -+" Bi%i (% 1=*6(i)%$i":an$in9 ;n IR Metoda de identificare i a#reciere a "u "tanelor medicamentoa"e a$at #e com#ararea cu "#ectrele "u "tanelor de referin "u a"#ectul anali$ei "tructurale e"te "#ectrofotometria de a "or ie n 56*S-au nregi"trat "#ectrele de a "or ie in cloroform la lungimea de und 2D/ nm* AAA

Fi#=*=5 D%$%&)ina&%a )a:i) " i (% a2-+&2Bi% a" )%$a2+"i$ " i 1,*6(i)%$i":an$ina ;n U' 0n continuare am con"truit cur a de etalonare= ;,;2 g 1,3-dimetilxantin #ul ere &ma" exact' "e #la"ea$ ntr-un alon cotat cu ca#acitatea de /; ml, "e di$ol. n cloroform i "e com#le-tea$ #Bn la cot &"oluia A ;,;: >'* / ml "oluie A "e #la"ea$ n alt alon cotat cu ca#acitatea de /; ml i "e aduce cu cloroform #Bn la cot &"oluia P ;,;;:>'* Concentraia "oluiei P e"te de :; OgGml* )in "oluia P "e #regte"c o "erie de "oluii cu concentraiile core"#un$toare= /M 1;M 1/M 2;M 2/M 3; OgGml* Se citete a "or ana ace"tor "oluii la lungimea de und 2D/ nm, n cu.a cu drumul o#tic de 1; mm* 0n calitate de "oluie de referin "e utili$ea$ cloroformul* Am "ta ilit condiiile de identificare a teofilinei #rin metoda 14LC &cromatografia lichid de nalt #erforman',o innd tim#ul de reinere egal cu 1,Dmin*

Fi# != H,LC= C&+)a$+#&a)a 1=*6(i)%$i":an$in%i a5"ic8n( c+"+ana LiC<&+-5<%& 100R,1J C+nc" /ii S-a fcut o anali$ a i liografiei n ceea ce #ri.ete meta oli"mul medicamentelor n organi"mul uman. S-au determinat metodele chimice de identificare a 1,3-dimetilxantinei n "u "tan #ur i du# extracie din materialul iologic&#12,/' * S-a determinat maximul de a "or ie a 1,3-dimetilxantinei n cloroform &W 2D/nm', tim#ul de retenie 1,Dmin &14LC'* S-a confirmat "chema de lucru a anali$ei chimico-toxicologice a 1,3-dimetilxantinei #entru a#licarea n #rogramul de "tudiu al chimiei toxicologice* 7i2"i+#&a1i% 1* Pa ile. 2*6* Chimie farmaceutic-Chiinu, 5ni.er"ita", 1FF:- HDH #* 2* Pade"cu M*, Ciocoiu M* Com#endiu de fi$io#atologie "#ecial* 3d* 6a"iliana, !ai, 2;;1, 3D1 #* 3* C*Ple"cu, C* Curea Controlul medicamentelor- Pucureti= 3d* Medical i #edagogic* :* Cotru M* 4o#a L* Stan +* 4reda (* ainc"e", AAtau M* +oxicologia- Pucureti, 1FF1, 2:3#* /* 2armaco#eea <omBn, 3d* A* @-a, 3d* Medical, Pucureti, 1FF3 H* ?uu (* 6* +oxicologie- Chiinu, tiina, 1FF/, 2H1 #* D* Liteanu C*, <ca !*, +eoria i metodologia "tati"tic a anali$ei urinelor, 3d* Scri"ul <omBne"c, Craio.a, 1FDF*

SINTEZA I STUDIUL CLASTERULUI HOMOTRINUCLEAR AL FIERULUISIIIT CA

,RECURSOR ,ENTRU O7INEREA ,RODUSELOR FARMACEUTICE ANTIANEMICE Si"via M%"nic Catedra Chimie ?eneral 5SM2 7(icolae +e"temianu9

S ))a&. S.n$<%-i- an( -$ (. +1 a n%W i&+nSIIIT <+)+$&in c"%a& c" -$%& a- 5&%c &-+& 1+& +2$ainin# 5<a&)ac% $ica" an$ian%)ic 5&+( c$A ne% trinuclear iron&!!!' furoate %ith the general formula X2e3C&U-fur'H&C13C1'3YClK2C13C1 ha"
#re#ared and in.e"tigated , elemental anal,"i", M"" auer, @-ra, and !< "#ectro"co#,*

een

R%/ )a$ A fo"t "inteti$at o com inaie com#lex de ti# V 3-oxo-trinuclear a 2e&!!!' cu acidul Ufurancar oxilic cu com#o$iia chimic X2e3C&U-fur'H&C13C1'3YClK2C13C1* Com#u"ul a fo"t "tudiat #rin anali$ elementar, "#ectro"co#ie !<, M"" auer i difracie cu ra$e @ #e monocri"tal* In$&+( c%&% 0n ultimele decenii com#uii coordinati.i ai metalelor i g"e"c o utili$are tot mai larg n di.er"e domenii, #rintre care dre#t cele mai eficiente "unt= chimia clinic i medicina, iologia, n "#ecial, iotehnologiile de culti.are diriAat a microorgani"melor X1, EY* Com#uii coordinati.i manife"t #ro#rieti iologice, care "unt determinate de #re$ena n com#leci a metalelor im#licate n maAoritatea #roce"elor iochimice uni.er"ale* 2ierul e"te caracteri$at #rin cea mai a undent #re$en n organi"me fiind unul din #rinci#alii iocationi im#licai n #roce"ele iochimice #arcur"e la toate ni.elele de com#lexitate celular* 5n rol im#ortant re.ine fierului datorit "emnificaiei "ale #entru #roducerea celulelor roii ale "Bngelui i formarea hemoglo inei i a mioglo inei, #recum i #entru multe en$ime* 2ierul Aoac de a"emenea rolul #rinci#al n multe #roce"e iochimice i "i"teme en$imatice care include= meta oli"mul energetic, #roducerea "erotoninei i do#aminei, formarea colagenului i funcia "i"temului imun* )eficiena nutriional i utili$area unor #rodu"e "race n fier, .itamine i alte #rinci#ii ioacti.e afectea$ gra. "ntatea #o#ulaiei i n #rimul rBnd a .iitoarelor mame i a co#iilor* )eficiena fierului n organi"mul uman are dre#t con"ecin anemia fieri#ri. - una din cele mai "tringente i ne"oluionate #ro leme la momentul actual dar i a#ariia defectelor n r"#un"ul imun al organi"mului X:, H, D, 1;, 11, 1:Y* 0n #re$ent n ntreaga lume "e efectuea$ cercetri legate de o inerea unor "u#limente alimentare ce conin fier* 3"te cuno"cut, c cel mai acce"i il #entru organi"mul uman e"te fierul hemic, care "e conine n ficat i alte #rodu"e din carne* 0n" #entru "u#linirea deficitului de fier e"te nece"ar utili$area lor n cantiti "#orite* La momentul actual ioma"a ciano acteriei <pirulina platen!i! e"te con"iderat "ur"a .egetal #rinci#al non-con.enional de "u "tane ioacti.e, dar i "ur"a organic a unor microelemente cu o "emnificaie fi$iologic #ronunat, ndeo"e i a manganului, cromului, "eleniului, $incului i a fierului X3,1/Y* )atorit fa#tului c ioma"a de <pirulin& e"te o "ur" ogat de #roteine, aci$i grai #oline"aturai, .itamine, antioxidani &"u#eroxiddi"muta$a', caroten &ficocianina', #oli$aharide &calcium "#irulan', aminoaci$i imunoacti.i, etc* m ogirea ei cu fier legat organic .a #ermite o inerea unor "u#limente alimentare i #rodu"e noi care .or #utea fi utili$ate #entru #re.enirea anemiei* A"tfel, una din direciile actuale ale "tudiilor contem#orane e"te "tudiul #o"i ilitii diriArii cantitati.e i calitati.e a #roce"elor io"intetice, utili$Bnd com#uii coordinati.i ai metalelor* S-a demon"trat eficacitatea utili$rii unor com#ui coordinati.i ai metalelor &Cr, Cu, Mn, Co, (i, \n i Sn' la culti.area ciano acteriei <pirulina platen!i! #rin "timularea #roce"elor io"intetice i acumularea diferitor "u "tane ioacti.e X/, 12, 13, 1EY* Culti.area <pirulinei n #re$ena unor com#ui coordinati.i ai fierului ar #ermite acumularea fierului n ioma", ceea ce ar contri ui la o inerea unei ioma"e calitati.e cu un coninut ogat de ficocianine i fier, care ar #utea fi utili$at atBt la o inerea unor #rodu"e nutriionale de fortificare a r"#un"ului imun, cBt i a

#re#aratelor medicamentoa"e &com#rimate, "oluii inAecta ile' #entru #rofilaxia i tratarea anemiei #recum i a unor maladii legate de imunodeficiena organi"mului uman* Sco#ul "tudiului dat a fo"t efectuarea "inte$ei, o inerea formelor #olicri"taline i anali$a com#onenei chimice a com#u"ului coordinati. al 2e&!!!' cu "co#ul, n #er"#ecti., de in.e"tigare a aciunii ace"tui com#u" coordinati. cu acidul #iromucic a"u#ra #roce"ului de acumulare a #rinci#iilor ioacti.e i a fierului n ioma"* Ma$%&ia"% 0i )%$+(% (% inv%-$i#a&% Acidul U-furancar oxilic &Aldrich, FE>' a fo"t #urificat #rin recri"tali$are din "oluiile 12C-metanol X2Y* Com#u"ul iniial Cu2&C:13CCCC':K:12C a fo"t #re#arat #rin reacia dintre &CuC1'2CC3 cu acidul U-furancar oxilic, 2eCl3 H12C a fo"t o inut din "ur"ele comerciale i utili$at far #urificare #re.enti.* 3icroanaliza C i 1 a fo"t efectuat n La oratorul Microanalitic a !n"titutului de Chimie folo"ind 6ario-3L-!!!-C1(CS 3lemental Anal,$er, iar 2e n La oratorul de Chimie Pioanorganic, folo"ind #rocedurile "tandarde de anali$* <pectrul $A a com#uilor a fo"t m"urat la "#ectrofotometrul 4er8in 3lmer S#ectrum 1;; 2+-!< n regiunea 2/;-:;;;cm-1* <pectrul 3o!!bauer a com#lecilor la tem#eratura camerei &<+' i E;a au fo"t m"urate utili$Bnd echi#ament electrodinamic* Ca "ur" "-a utili$at /DCo n Cr-matricea* 4entru cali rare "a utili$at nitro#ru""iatul de "odiu (a2X2e&C('/&(C'YK212C* R%/ "$a$%"% +2Bin $% 0i (i-c Bii Conform unui #rocedeu original a fo"t "inteti$at com#u"ul coordinati. de ti# V 3-oxotrinuclear ai 2e&!!!' cu acidul U-furancar oxilic cu com#o$iia chimic= X2e3C&Ufur'H&C13C1'3YClK2C13C1, unde U-fur acidul U-furancar oxilic* 0n 2/ ml alcool metilic au fo"t di$ol.ate ;,/:g &2 mmol' 2eCl3 H12C i ;,H3g &1 mmol' Cu2&C:13CCCC':K:12C* Soluia de culoare run a fo"t filtrat i l"at la tem#eratura camerei* )u# o $i, #reci#itatul cri"talin #ortocaliu "u form de ace, a fo"t filtrat, "#lat cu metanol i u"cat la aier* <andament= H;>* Calc* 4entru C3313;C22Cl2e3= C, :;*3EM 1, 3*;EM 2e, 1D*;D>* ?"it= C, 3F*1EM 1, 3*/:M 2e, 1D*33>* Com#u"ul e"te "olu ili n )M2A, )MSC, metanol* Com#u"ul coordinati. a fo"t caracteri$at #rin anali$ elementar la 2e, C, (, i 1, "#ectro"co#ie Mo"" auer, !< i difracie cu ra$e @* Structura com inaiei a fo"t determinat #rin metoda de difracie cu ra$e @ #e monocri"tal* )in ace"t "tudiul "-a "ta ilit, c com#u"ul coordinati. cri"tali$ea$ in gru#ul de "ingonie monoclinic 421Gn cu urmtorii #arametri a celulei elementare= a L F*HH3, b L 1/*H2:, c L 1F*;E2 , L F2*/: i #re$int o "tructur ti#ic 3-oxotrinuclear n care cei trei ioni de fier "unt "ituai n .Brfurile unui triunghi i"o"cel cu un atom de oxigen tridentat n centru* 2iecare din atomii de metal coordinea$ cu cBte doi atomi de oxigen ai gru#elor car oxilice, oxigenul din centru i molecule de metanol ca ligan$i axiali* Studiul !< n "tare "olid a com#lexului anali$at confirm formarea unui com#u" nou i arat #re$ena gru#elor car oxilice, alcoolului metilic i fragmentului 2e3C* 4rinci#alele en$i de a "or ie in "#ectrul !< al com#u"ului "unt &cm -1'= 3/F3, 3131, 1/FH, 1/DF, 1/H3, 1:D;, 1:1H, 13D2, 123;, 12;:, 113F, 1;DD, 1;1/, F3:, EE:, E//, E;;, DHH, H;;* 2rec.ene caracteri"tice #entru gru#ele alcoolului metilic a#ar la 3/F3 cm -1 i 13D2 cm-1* 2rec.ene caracteri"tice #entru ligan$ii car oxilici "unt "&CCC' i a"&CCC' ale o"cilaiilor de .alen ale gru#elor CCC-* 3le "e caracteri$ea$ #rin #re$ena a dou en$i de a "or ie inten"i.e la 1/FH cm -1 &a"&CCC'' i 1:1H cm-1 &"&CCC''* )eferena n numrul de und al en$ilor de a "or ie " i a" indic modul de coordinare N #unte identat* Pen$ile analitice #entru inelul furanic "unt 1;1/ cm -1, EE: cm-1, DHH cm-1* 4re$ena frec.enei caracteri"tice la 1:D; cm-1 "emnalea$ c oxigenul din inelul furanic nu #artici# la coordinare* 4entru identificarea o"cilaiilor de .alen a fragmentului 2e3C a fo"t efectuat "tudiul n inter.alul de E;;-H;; cm -1* Panda medie inten" la H;; cm-1 & a"&2e3C'' e"te caracteri"tic #entru clu"terul V-oxo trinuclear X1DY* S#ectrele M"" auer #entru com#u"ul dat #re$int un du let atBt la tem#eratura camerei cBt i la E;a* 6alorile de#la"rii de i"omer &(a+' L ;*HEmmG"ec &3;;a', ;*DD mmG"ec &E;a' i

de"#icrii de cuadru#ol &3' L ;*/1mmG"ec &3;;a', ;*/:mmG"ec &E;a' calculate din "#ectrele M"" auer, indic #re$ena fierului n "tare de oxidare & +3' "#in nalt &/G2' cu o nconAurare de"tul de "imetric i "unt n un corcondan cu datele din literatur X1FY*

2ig 1* 2orma "#ectrului Mo"" auer a com#u"ului X2e3C&U-fur'H&C13C1'3YClK2C13C1 la tem#eratura E;a* )in datele literaturii de "#ecialitate XF, 13, 1HY referitoare la rolul exce#ional al com#uilor coordinati.i ai fierului n #roce"ele meta olice io"intetice ale <pirulinei, urmea$ c re#re$entanii cla"ei de 3-oxotrinucleari coninBnd aci$ii car oxilici n calitate de #unte car oxilat manife"t un efect #o$iti. a"u#ra com#o$iiei iochimice i acumulrii fierului n ioma"a "#eciei re"#ecti.e* <eieind din acea"t conclu$ie n #er"#ecti. #re$int un intere" deo"e it iniierea unui "tudiu detaliat al influenei com#u"ului coordinati. cercetat a"u#ra com#onenei iochimice a <pirulinei. C+nc" /ii A fo"t "inteti$at o com inaie com#lex a 2e&!!!' cu acidul U-furancar oxilic cu com#o$iia chimic X2e3C&U-fur'H&C13C1'3YClK2C13C1* Com#u"ul a fo"t "tudiat #rin anali$ elementar, "#ectro"co#ie !<, M"" auer i difracie cu ra$e @ #e monocri"tal* Com#u"ul coordinati. cri"tali$ea$ in gru#ul de "ingonie monoclinic 421Gn i #re$int o "tructur ti#ic 3-oxotrinuclear n care cei trei ioni de fier "unt "ituai n .Brfurile unui triunghi i"o"cel cu un atom de oxigen tridentat n centru* 6alorile de#la"rii de i$omer i de"#icrii de cuadru#ol calculate din "#ectrele M"" auer, indic #re$ena fierului n "tare de oxidare & +3' "#in nalt &/G2' cu o nconAurare de"tul de "imetric* M "B )i&i Autorul aduce "incere mulumiri )-lui Con"tantin +urt, doctor ha ilitat n chimie, mem ru-core"#ondent al A<M, #rofe"or uni.er"itar, #entru di"cuii i aAutor, i )r* 1elene Stoec8li-3.an" #entru "tudiul cu ra$e @ #e monocri"tal* Lucrarea a fo"t efectuat cu "u"inerea financiar a 2undaiei WSF. R%1%&inB% 7i2"i+#&a1ic% X1Y Amato 4*, Morale" R*A*, en S*C* S* 3ffect" of chromium #icolinate "u##lementation on in"uline "en"iti.it,, "erum li#id", and od, com#o"ition in health,, nono e"e, older and %omen* +he Rournal of ?erontolog,, Serie" A= Piological Schience", &2;;;', 6* //, #* 2H;-2H3* X2Y 2* Armarego and )* )* 4errin, 4urification of La orator, Chemical", Putter%orth1einemann, Cxford, :th ed*, &1FFH'* X3Y Chamorro ?*, Sala$ar M*, ArauAo a?, do" "anto" C4*, Ce allo" ?*, Ca"tillo L2* 5#date on the #harmacolog, of S#irulina &Arthro"#ira ', an uncon.entional food* Arch* Latinoam* (utr*, &2;;2', Se#*6* /2, (o3, #* 232-2:;* X:Y )illon RC* 4re.ention of iron deficienc, and iron deficienc, anemia in tro#ical area"* Med* +ro#*, &2;;;', 6*H;, (o1, #* E3-F1*

X/Y XHY XDY XEY

XFY X1;Y X11Y X12Y X13Y

X1:Y X1/Y X1HY X1DY X1EY X1FY

)udnicenco +* )irected ",nthe"i" of carotenoid" , green microalga %aematococcu! plu2iali!* A "tract" of :th 3uro#ean or8"ho# Piotechnolog, of Microalgae, ma, 2F and 3;, &2;;;'* 1a, ?*, Sand"tad P*, htela% A*, Porch-!ohn"en P* !ron "tatu" in a grou# of (or%egian children aged H-2: month"* Acta 4aediatr*, &2;;:', 6*F3, (o*/, #* /F2-/FE* 38me8ci CP, )onma C*, Sardogan 3*, ildirim (*, 5,"al C*, )emirel 1*, )emir +* !ron, nitric oxide, and m,elo#eroxida"e in a"thmatic #atient"* Piochemi"tr,, &2;;:', 6* HF, (o* :, #*:H2-:HD* ?udumac 6*, Paciu 3*, <B.neac 6* Penefficial effect of $inc admini"tration on collagen degradation during reco.er, from ex#erimental he#atic fi ro"i"* A "tract" and #rogramme of the :th !nternational Sim#o"ium IMetal 3lement" in 3n.ironment, Medicine and Piolog,9* (o.* HE, +imi"oara, <omBnia, &2;;;', #*2* S* Melnic, Ch* Simmon", L* \o"im, +* Chiriac, 6* Pulimaga, 6* <udic, )* 4rodiu", 1* Stoec8li-3.an", S* Sho.a, C* +urta, Piotechnological a##lication of ne% homo and heteronuclear iron&!!!' furoate" for culti.ation of iron-enriched "#irulina*, &in #re""'* ueiro$ Sde S*, +orre" MA* !ron deficienc, anemia in children* R* 4ediatr* &<io R', &2;;;', 6* DH "u##l* 3*- S 2FE-3;:* <a"ul !*, aandel ?4 An a##roach to iron deficienc, anemia* Can* R* ?a"troenterol, &2;;1', 6* 1/, (o* 11, #* D3F-D:D* <udic 6* S#irulina iotechnolog,= ne% in.e"tigation in #roduction facilitie" and #roduct"* A "tract" of the :th !nternational Piotechnolog, of Microlagae* Ma, 2F and 3;, Perghol$<eh rc8e, ?erman,, &2;;;'* <udic 6*, +urt C, ?udumac 6*, Pulimaga 6*, Chiriac +*, ?hel et 6*, Mereacre 6*, La$are"cu A*, \o"im L* (anotehnologii de "inte$ a com#uilor coordinati.i noi ai 2e&!!!' i iotehnologii de o inere a #rodu"elor farmaceutice antianemice* 3x#o$iie internaional "#eciali$at !(2C!(63(+-2;;:, noiem rie 1;-13, Chiinu &2;;:', &C2/', #*/D* &di#lom medalie de argint'* Schai"on ?*, Cramer 4*, +o elem ?* !ron deficienc, anemia* 1ematologi"t -" .ie%#oint GG Sem* 1o#*, &1FE2', 6* /E, (o* :3, #*2/:D-2//;* Samuel"on <*, Mani 56*, !,er 5M*, (a,a8 5S* 1,#ochole"terolemic effect of "#irulina in #atient" %ith h,#erli#edemic ne#hrotic ",ndrome* R* Med 2ood*, &2;;2', 6*/, (o*2, #* F1-FH* +urt C*, <udic 6*, La$are"cu A*, Pulimaga 6*, \o"im L*, Chiriac +*, +he Dth !nternational S,m#o"ium on 7Metal 3lement" !n 3n.ironment, Medicine and Piolog,9, +imi"oara <omania, K, &2;;H', #* 333-33E* npogh * *, }efetghi r* *, efptmnghi *b* }endcgyngmeynge m|petme dce{vect nggcvmtixmgtt ygevmtetmz cgfi &!!!' m eqe|i &!!!'* * jegc* mfmm, &1FE/', *3;, 2, }* 1:H;* wpvmn u**, egz * lmgmfmeynmz ygydih 'orphFridium cruentum @>3- A-,1 h pyqghm{ npq~dpc* bq~gqgm{* &2;;1', *11, 1, C*/2-/H* +urta C*!*, S#atari 2*A*, La$are"cu A*?*, Simono. u*, ).or8in A*A*, Li#8o%"8i !a*= +he "#ectro"co#ic anal,"i" of the trinuclear ironS"&!!!' com#ound %ith gl,cine aminoacid, R*!norg*Piochem*, &1FF/', /F &2-3', #*3:1*

DIO@IMAII DE NICHELSIIIT CU ,IRIDINA I DERI'AII EIR ,RO,RIETI MAGNETICE I CATALITICE L= C<i-$& #a, D= 7a$;&, '= C<i-$& #a Catedra Chimie general 5SM2 I(icolae +e"temianu9 !n"titutul de Chimie AM, Centrul <e#u lican de diagno"ticare medical S ))a&. Di+:i)a$%- +1 nicX%" SIIIT Wi$< 5.&i(in% an( i$- (%&iva$%-R )a#n%$ic an( ca$a".$ic 5&+5%&$i%+he com ination" of nic8el&!!!' %ith com#o"ition X(i&)iox'2L2Y@Kn1@ and X(i&)iox'24,LY@Kn1@ &L - deri.ate" of #,ridine, )iox - monoanione of U-dioxime, x N Cl, Pr' %ere o tained* +heir magnetic #ro#ertie" and catal,tic action in "ome reaction" %ere "tudied* R%/ )a$ S-au o inut com#ui ai nichelului&!!!' cu com#onena X(i&)iox'2L2Y@Kn1@ i X(i&)iox'24,LY@Kn1@ &L N deri.aii #iridinei, )iox N monoanion de U-dioxim, @ N Cl, Pr'* Sau "tudiat #ro#rietile lor magnetice i aciunea catalitic n unele reacii* 0n "eria 2e, Co, (i "e o "er. tendina de micorare a gradului de oxidare "u#erior de la 2e "#re (i* (ectBnd la aceea c n condiii o inuite #entru nichel e cuno"cut doar "tarea de oxidare [2, chimia ace"tui element nu e"te chiar atBt de "im#l* )in com#uii cu gradul de oxidare inferior &-1,;,[1' cea mai numeroa" cla" o #re$int com#uii (i&;', ca de exem#lu, (i&CC':, (iLx&CC':-x, (iL:, unde L e"te ligand acid, a:X(i&C(':Y, a:X(i&CC1':Y i alii* Com#ui ai nichelului cu gradele de oxidare -1 i [1 "e ntBlne"c mai rar, de exem#lu, anionul X(i2&CC'HY2- i re"#ecti. com#lexul ne"ta il a:X(i2&C('HY* 0n "eriile i$oelectronice (i&!', Co&;', Cu&!!' chimia nichelului &1' e"te mai a#roa#e de chimia Co&;'* 0n maAoritatea ca$urilor com#uii nichelului&1' au "tructur tetragonal "au trigonal* Strile de oxidare [3 i [: ale nichelului #ot fi "ta ile doar la exi"tena unei coordonri deo"e ite* La interaciunea metalului cu ligan$ii are loc redi"tri uirea "arcinilor* )ac metalul "e afl n "tare de oxidare "u#erioar a#oi ligandul tre uie " #o"ede den"itate electronic nalt i una "au mai multe "arcini negati.e* 0n ace"t ca$ "arcina "e de#la"ea$ de la ligand "#re metal, n" ace"t #roce" nu tre uie " ai un caracter nelimitat, ceea ce ar #utea duce la oxidarea ligandului* Cu alte cu.inte, electronegati.itatea ligandului tre uie " fie nalt* Ca re$ultat "e formea$ legturi trainice ntre metal i ligand* )e aici de.ine clar de ce maAoritatea com#lecilor (i&!!!' i (i&!6' n "fera de coordinaie #rimar conin n calitate de donori de electroni atomi de (, C, 2* Sunt cuno"cui #uini com#ui ai (i&!!!', dar #ro#rietile unora din ei &3PaCK(iC2KFMoC3K1212C, (a&a'(i!CHKn12C, a2(i2H' au fo"t de"tul de ine "tudiate* La oxidarea unor com#leci ai (i&!!' "e formea$ com#leci ai (i&!!!'* Aa, la oxidarea cu oxigen a X(i&)iar"'2Cl2Y ntr-un curent de ioni de clorur "e o ine X(i&)iar"'2Cl2YCl* La interaciunea unor com#ui de ti#ul (i&<34'2@2 &@ L Cl, Pr' cu Cl(C i Pr(C "e formea$ com#uii (i&<34'2@3, care au un electron necu#lat* 0n calitate de "ta ili$atori a gradelor de oxidare "u#erioare ale nichelului &[3 i [:' "unt cuno"cui a"tfel de ligan$i ca oximele* 0n" metodele de"cri"e n literatur X1, 2Y #ermit de a o ine un numr limitat de com#ui ai (i&!!!' cu oximele* )e exem#lu, la oxidarea cu rom a (i&1)f'2 "e formea$ doar o "ingur "u "tan (i&1)f'2Pr &1)fN anion de U - en$ildioxim'* Cxidarea, n", a dioximailor de nichel&!!' n #re$ena aminelor heterociclice duce la formarea unei cla"e numeroa"e de com#ui com#leci, deoarece rolul ligan$ilor axiali n ace"t ca$ l nde#line"c a$ele Le%i" &#iridina i deri.aii ei', care #ot .aria* Aceti com#leci au com#onena X(i&)iox'2L2Y@Kn1@ i X(i&)iox'24,LY@Kn1@ i "tructur octaedric &L N deri.aii #iridinei, )iox N monoanion de U-dioxim, x N Cl "au Pr' X3, :Y*

6alorile momentelor magnetice a ace"tor com#ui &1,D3 N 1,E3 M*P*' "unt caracteri"tice #entru ionul (i3[ &dD' n cBm# octaedric i .or e"c de"#re aceea c ace"t ion n com#lecii / 2 "tudiai "e afl n "tare cu "#in minim* !onul d D n cBm# octaedric #oate a.ea configuraia t 2 g eg H "au t 2 g e g &fig*1'* 2ig*1 Strile cu "#in maxim "i "#in minim #entru ionul dD n cBm# cri"talin octaedric

3nergia diferitor "tri "e calculea$ de la .aloarea energiei configuraiei iniiale, adic da la energia ionului introdu" ntr-un n.eli "feric cu "arcina egal cu "uma "arcinilor ligan$ilor* Acea"t energie e"te egal cu "uma .alorilor &-2G/;' #entru fiecare electron t2g, &[3G/;' #entru fiecare electron eg i C #entru fiecare cu#lu electronic care "e afl #e o or ital &ta *1' +a elul 1* 3nergia "trilor cu "#in maxim i minim &configuraia dD' Configuraia electronic
/ 2 t2 g eg

umrul = necuplai * !

2ria c>mpului slab puternic

ESCC ),?+ @& A $C

)-?+ @& A *C - ; [ C Aici ; e"te energia de "cindare n cBm# cri"talin octaedricM C N energia medie de cu#lare #entru ionul dat* Cu cBt e mai #uternic cBm#ul cri"talin din Aurul ionului d D cu atBt e mai mare #ro a ilitatea c electronii ace"tui ion .or nimeri #e or italele mai "ta ile t2g* )in re#re$entarea grafic a de#endenei energiei de "ta ili$are n cBm# cri"talin &3SCC' de tria cBm#ului &fig*2' "e o "er. c #anta dre#tei n cBm# #uternic e"te mai mare decBt n cBm# "la * 2ig*2 6ariaia 3SCC n funcie de tria cBm#ului &configuraia dD'

H 2g

eg

La inter"ecia celor dou dre#te efectele cBm#ului ligan$ilor i a re#ul"iei interelectronice "unt egale &; L C'*

(ectBnd la aceea c #aramagneti"mul dioximailor de nichel&!!!' "e "u#une legii lui Curie - ei"" X/Y, totui exi"t o oarecare de#enden de tem#eratur a momentelor magnetice &ta *2', care nu #oate fi de"cri" doar cu aAutorul con"tantei lui ei""* 3 #o"i il c tem#eraturile nalte contri uie la "chim area cu locul a ligan$ilor "ferei interne i externe* +a elul 2* )e#endena de tem#eratur a momentului magnetic al com#lexului X(i&)1'2&:-CCCC21/-4,'2YPrK21Pr* 2% D" I1(!&'% cm*?mol !? I1% Jef.% 1K mol?cm* +-+%!' !%-$ +'!%., !%-& ,+<%.! !%<,!<%.! !%<' *.,%*$ !%<. **!%<!%<' *&!%<+ !%<' $.,%$. !%<' $*<%** !%<$ metoda <43 &2g$$gxxg,,' d #o"i ilitatea de a itala d$2, ce "e #oate reali$a n modelul cBm#ului

$., !'<&%$! $+* !.<&%!. $&$ $!<&%&! !<! $*<<%$' !', $'.!%,< !,* *&!*%&! !*! **!$%<!!*','%&< -,!-+%<' Studiul dioximailor de (i&!!!' #rin #re"u#une c electronul necu#lat ocu# or cri"talin #entru un octaedru ntin" XHY* Aciunea catalitic a dioximailor de nichel&!!!' a fo"t cercetat n reacia de formare a #oliuretanilor XDY
4 N C O 5 HO 46 4 NH C O O 46

i n reacia de oxidare a tetralinei XEY* 0n reacia de formare a #oluiretanilor aceti com#leci la tem#eraturi Aoa"e "unt inhi itori, iar la /;-E; C .ite$a reaciei crete ru"c n com#araie cu reacia necatalitic &ta *3'* <eieind din re$ultatele o inute mecani"mul catali$ei #oate fi #re$entat a"tfel* La #rima eta# are loc formarea dioximaturetanilor coordinati.i, care la tem#eraturi Aoa"e "unt ineri faa de "i"temul reactant, #rin ce "e lmurete .ite$a mic a reaciei de formare a uretanilor n condiiile date* La mrirea tem#eraturii are loc de"com#unerea dioximaturetanului i redi"tri uirea "arcinilor la atomii "i"temului, din care cau$ hidrogenul #lanului ecuatorial al carca"ului dioximatic trece la alcool* +a elul 3* Con"tantele de .ite$ a reaciei dintre :,:--difenilmetandii$ocianat i #olidietilenglicoladi#inat n #re$ena unor dioximai ai (i&!!!' 6ioximaii de iB333C "(!&,% l?mol(s $&DC +&DC <&DC '& $,& .$& *' +,& ,*+$ $. $+& !<!& !< *,! $,!+

4r catalizator E iBF6fC$PG$HCl($FCl E iBF6fC$B*)CF*)PGC$HCl($FCl E iBF6fC$B,)CF*)PGC$HCl($FCl

4rin urmare atomii de oxigen ai gru#ei oxime cu "ur#lu" de den"itate electronic coordonea$ a$otul :,:--difenilmetandii$ocianatului* <e"tructurarea de mai de#arte n com#lexul intermediar duce la formarea nodului #olimeric* La eta#a final "e formea$ #rodu"ele reaciei de ti#ul metalo#olimerilor, n lanul molecular al crora "unt inclu"e moleculele nicheldioximaturetanilor*

Aadar, U-dioximaii de nichel&!!!' #ot fi con"iderai catali$atori #rinci#ial noi n reacia de formare a #oliuretanilor, deoarece ei rmBn n #olimer nu n "tare li er, ci legat N de ti#ul metalo#olimerilor* 0n reacia de oxidare a tetralinei <1 n #re$ena dioximailor de nichel .ite$a oxidrii "-a calculat du# formula ; L /,//K1;-: & @ AGG% + @ A1A2@G + @ AG% ', unde @ AGG% , @ A1A2@G , @ AG% re"#ecti. "unt concentraiile hidro#eroxidului tetralinei, tetralonului N 1 i tetralolului N 1=

OOH H

OH H

0n ta elul : "unt #re$entate .ite$ele reaciei de oxidare a tetralinei la nce#utul reaciei i la "fBritul ei n #re$ena unor dimetilglioximai ai nichelului &!!!' +a elul :* 6ite$a oxidrii tetralinei n #re$ena dimetilglioximailor de nichel &!!!' 6imetilglioximaii de nichel B333C E iBF6C$PG$HKr($.+FKr E iBF6C$B*)CF*)PGC$HKr($.+FKr E iBF6C$B,)CF*)PGC$HKr($.+FKr E iBF6C$B*)COOC$F+)PGC$HKr($FKr E iBF6C$B,)COOC$F+)PGC$HKr($FKr E iBF6C$B*)CO BC$F+C$) PGC$HKr(*FKr E iBF6C$B*)CO F$)PGC$HKr($FKr E iBF6C$B*)CFO)PGC$HKr($FKr E iBF6C$B,)CFO)PGC$HKr($FKr 4r catalizator L&(!&+% mol?l(s iniial final !&%-. $%,. *%,< !%-& *%,& *%,< !*%&+ $%,' $%.& $%+& !!%+. ,%!& $%<$ *%-< $%-' &%!* !%'& !%+, $%,& )

0n #re$ena dioximailor de nichel&!!!' are loc de"com#unerea acti. a <CC1, iar iniierea radicalilor li eri #oate decurge conform "chemelor=
A% + G2 + A% 2 A + % 2 G2 ,
X >i & Hio8 ' 2 1Y*r + AGG% AG2 + %*r + X >i & Hio8' 2 1Y + ,

X >i & Hio8 ' 2 1Y*r + AGG% X >i & Hio8 ' 2 AGG% Y*r + 1, X >i & Hio8 ' 2 AGG% Y X >i & Hio8 ' 2 G% Y + AG ,
X >i & Hio8 ' 2 G% Y + AGG% X >i & Hio8' 2 Y + % 2 G + AG2 ,

X >i & Hio8 ' 2 Y + AGG% X >i & Hio8' 2 G% Y + AG *

Cu totul n alt mod "e com#ort fa de hidro#eroxidul tetralinei com#lexul X(i&)1' 2Y, n #re$ena cruia are loc cea mai mare acumulare a <CC1 &13*H/K1;-2 molGl', chiar mai mare decBt n ca$ul oxidrii nacatalitice a tetralinei* 4ro a il, i"-&dimetilglioximato'-nichel&!!' nu reacionea$ cu <CC1, iar generarea radicalilor li eri are loc n alt mod N #e calea acti.rii oxigenului molecular= X >i & H% ' 2 Y + G2 X >i & H% ' 2 Y + G2 ,
X >i & H% ' 2 Y + G2 + A% X >i & H% ' 2 Y + %G2 + A*

Structura #lanar a com#lexului i li#"a ligan$ilor axiali, #ro a il, e"te una din cau$ele acti.itii "la e a X(i&)1'2Y n #roce"ul oxidrii tetralinei* 0n ace"t ca$ gradul de oxidare a nichelului nu "e "chim i nu "e formea$ #rodu"ele interaciunii dintre X(i&)1' 2Y i <CC1, care ar #utea duce la #relungirea lanului, generBnd radicali noi tot mai acti.i* 4e a$a datelor o inute "-a #ro#u" mecani"mul #ro a il de oxidare a tetralinei n #re$ena dioximailor de nichel&!!!'* )in "chema #ro#u" reie"e c catali$atorii #artici# n toate actele elementare a #roce"ului radical-nlnuit* La acea"ta eta#ele de limitare "unt=
X >i & H% ' 2 12 Y*r + AGG% X >i & H% ' 2 12 Y*r*****AGG% i AG2 + X >i & H% ' 2 12 Y X AGG >i & H% ' 2 12 Y*

7i2"i+#&a1i% 1* C8ac A*, Sime8 M*, 5 er die Cxidation"#roducte de" (ic8el-)imeth,lgl,oxim"* Chem* Anal,t*, 6*3, (r 3-:, 1F/E, #* 2/3-2HD* 2* Sime8 M*, Cxidation .on (ic8el&!!' "al$en der U-dioxime mit rom und Aod* Collect* C$ech* Chem* Commun", 6*2D, (r2, 1FH2, #*33D-3:2* 3* *r* lidc, ** mydcpi* U-mgnymfmt tmneq{&s' y mcmvmtgf m tengdgcfm eg cgm|hgvtfm* * tegcit* mfmm, 6*, (r 1, 1FD/, c* 12H-13;* :* *r* lidc, ** mydcpi* ggcvmtixmgtte ygevmtetm{ tmneq{&s' y vmfedmqqmgnymfgf m yfeittfm inymiq~tfm qmitvifm* gcv* mfm{, 6*D, (r 2, 1FE1, c* 2D:-2DE* /* *r* lidc, ** mydcpi* fitmdt yhgzydhi nggcvmtixmgtt ygevmtetmz tmneq{ &s' y U-vmgnymfifm* gcv* mfm{, 6*3, (r 11, 1FDD, c* 1D;/-1D;F* H* }*b* pnmti, r*r* lgcghmngh, *u* oqgngh, *r* lidc, ** mydcpi* }endc kw vmgnymfmtgh tmneq{&s' y mcmvmtgf m tengdgcfm eg cgm|hgvtfm* gcv* mfm{, 6*2, (r 1, 1FDH, c* 2F-33* D* *r* lidc, *}* evgyeeh, ** mydcpi* idiqmdmeyni{ indmhtgyd~ vmgnymfmtgh tmneq{ h ceinxmm goci|ghitm{ gqmpceditgh* |heydm{ bj }}w, yecm{ omgq* m mf* tipn, (r /, 1FE1, c* H1-H/* E* *r* lidc, ** mydcpi, ** wezoeq~, b** }itvp* mvngi|tge gnmyqetme dedciqmti, nidiqm|mcpefge nggcvmtixmgttfm ygevmtetm{fm tmneq{&s' y Uvmgnymfifm* jedemfm{, 6*@@!6, (r 1, 1FE:, c* D1-D/*

COM,UII COM,LECI AI ,LATINEI CU ACTI'ITATE ANTITUMORAL M= An$+n, L= C<i-$& #a Catedra Chimie ?eneral 5SM2 (icolae +e"temianu S ))a&. C+)5"%: 5"a$in ) c+)5+ n(- Wi$< an$i6$ )+& ac$ivi$. A ",nthe"i" of exi"ting literature a out the "tructure and #ro#rietie" of #latinum com#ound" a" %ell a" their action on the nucleic acid"* R%/ )a$ Ace"te materiale #re$int o "inte$ a literaturii exi"tente #ri.ind "tructura i #ro#rietaile com#uilor #latinei, #recum i mecani"mul lor de aciune a"u#ra aci$ilor nucleici* Su "tanele medicamentoa"e eficace n neo#la"mele umane i ex#erimentale au, n general, #ro#rieti chelatoare "au "unt uor meta oli$ate cu com#ui cu a"tfel de #ro#rieti* Multe dintre ele interacionea$ cu aci$ii nucleici, inhi nd "inte$a A)(, ceea ce ex#lic modul lor general de aciune* 5tili$nd deri.aii #urinei ca ligan$i ai unor ioni metalici, mai ale" ai 4t&!!' i 4t&!6', au fo"t "inteti$ate com inaii com#lexe cu aciune cito"tatic* Se #re"u#une c n

urma aciunii lor a"u#ra .iru"urilor, "e eli erea$ ligandul iologic acti., care inhi n continuare creterea celulelor* !m#licarea com#uilor de coordinaie n ace"te fenomene are dre#t Au"tificare fa#tul c diferite #ri ale .iru"urilor re#re$int ageni de chelare, care #ot nlocui ligan$ii n com#uii de coordinare* Chiar o alternare minor de ace"t gen, .a conduce a#roa#e "igur la reducerea "au la eliminarea #atogenitii .irale* Su "tituia n com#lecii #lanari tetracoordinati.i e"te im#ortant din #unct de .edere iologic, deoarece com#lecii #lanari ai #latinei &!!' "unt im#ortante remedii antitumorale* Att n com#lecii 4t&!!', ct i n ali com#leci #lanari "u "tituia are loc #ractic totdeauna conform mecani"mului a"ociati. i, din acea"t cau$, .ite$a reaciilor de#inde de natura i concentraia ligandului #re$ent* 0n ca$ general, ca#acitatea de "u "tituie a crei.a gru#e n com#lecii #lanari de#inde de natura ligandului ce "e afl n #o$iia tran" fa de acea"t gru#* 0n "eria de ligan$i = 12CM C1-M (13M Cl-M Pr-M !-M (C2M CCM C(- ca#acitatea de "u "tituie crete* Ace"t efect "e de"crie mai uor #rin intermediul mecani"mului de a"ociere* Ligan$ii acce#tori din drea#ta "eriei facilite$ formarea legturii n #o$iia tran" fa de "ine, a"tfel atrgnd den"itatea electronic a metalului i a tran"-ligandului i uurea$ "u "tituia nucleofil n #o$iia dat* Ceilali ligan$i, #rin intermediul efectului facilitea$ ru#erea legturii i eli erarea ligandului nde#rtat* +ran" efectul are o mare im#ortan #ractic, deoarece #ermite alegerea "ucce"i.itii reaciilor care .or duce la formarea i$omerilor #uri ci" i tran" =

Acti.itatea antitumoral a com inaiilor coordinati.e ale 4t&!!' #are a fi limitat la cele de ti#ul X4tA2@2Y, neutre din #unct de .edere electric, caracteri"tic i$omerilor ci"* Com inaiile coordinati.e ale 4t&!!' cu "arcin electric "unt inacti.e, chiar dac ligan$ii "unt uor "chim a ili* Acti.itatea antitumoral a com#lecilor 4t&!!', de ti#ul X4tA 2@2Y, de#inde de natura ligan$ilor* Cele mai une re$ultate au fo"t o inute cu Cl- i Pr-, ligan$i anionici monodentai cu ca#acitate de "chim intermediar i cu anionii oxalat, malonat, ligan$i car oxilai identai* 4rin urmare, ci"-diclorodiamino#latina &!!' &ci" X4t&(13'2Cl2Y', cuno"cut i "u denumirea de Sarea lui 4e,rone, introdu" n tera#eutic de ctre <o"en erg i 6an Cam#, manife"t cea mai ridicat acti.itate antitumoral* 0n cadrul cercetrii acti.itii iologice "-a calculat aa-numita do$ letal )L /; &do$a ce #ro.oac moartea a /;> din animalele a"u#ra crora "e efectuea$ cercetrile', do$a inhi atoare )!F; &cea mai mic do$ care duce la regre"ia tumorii' i indicile tera#eutic !+ & !+ L )L /;G)!F;'* S-au o inut urmtoarele re$ultate X1Y=

+a elul 1* )atele #ri.ind acti.itatea iologic a ci"-4t&(13'2Cl2 i a tran"-4t&(13'2Cl2 Complexul cis)PtB F*C$Cl$ trans)PtB F*C$Cl$ 6;+&% mg?Mg !* $. 63-&% mg?Mg !%' $. 32 <%! !

4recum reie"e din ace"t ta el, com#uii com#leci acti.i au configuraia ci" i dou gru#e ce "e de"#rind uor* 0n com#lexul ci"-))4 gru#ele aminice "unt inerte i, n com#araie cu gru#ele clorului, "unt ligan$i tran"-orientati.i mult mai #uternici* A"tfel, clorul "e la ili$ea$ i #oate fi uor "u "tituit cu ali ligan$i* 0n" concentraia mare a ionului Cl - n #la"ma "ang.in duce la aceea c "u "tituia are loc foarte greu* )in acea"t cau$ n tim#ul tran"#ortului #rin "nge, ci"-))4 #ractic nu "e tran"form* 0n ca$ul micorrii concentraiei locale a ionului de Cl are loc "u "tituia, ceea ce #oate duce la legarea trainic a ci"-com#lexului cu ligandul iologic* A"tfel, com#ortamentul ci"-))4 #oate fi ex#licat ca fiind un re$ultat al #o"i ilitii gru#elor de a "e ru#e de la com#lex &tran"-efect' i a nucleofilitii ligandului* ?enerali$nd, #utem afirma c #ro#rietile unui medicament de#ind de "tructura ntregii molecule "au a unei anumite #ri ca#a ile " "e com ine cu un centru rece#tor &fig*1'* 2igura1* Structura unor com#ui ai #latinei cu acti.itate antitumoral

)in fig*1 #utem "ta ili o "erie de corelaii "tructur-reacti.itate= -com inaiile octaedrice ale 4t&!6' #re$int acti.itate cito"tatic mai redu" decBt cele #lan #trate ale 4t&!!', "e #re"u#une c "#eciile ce conin 4t&!6' "unt redu"e in .i.o la deri.ai ai 4t&!!'* -acti.itatea cito"tatic a fo"t #u" n e.iden numai la com inaiile cu configuraie ci", i$omerii tran" a#rBnd ca inacti.i* -com#lexul tre uie " conin dou gru#ri nela ile "u form de doi ligan$i monodentai "au un ligand identat* -ligandul clor "e com#ort ca un mem ru acti., #e cBnd legturile amin-#latin "unt foarte "ta ile i inerte la atacul nucleofilic* -ligan$ii amin ca gru#ri nela ile tre uie " conin o Aonciune (-1 i, #rin ace"ta, #o"i ilitatea de a forma #uni de hidrogen*

-"#eciile neutre nu au dat do.ad de acti.itate antitumoral, chiar dac "-a re"#ectat criteriul de la ilitate* Ace"t fa#t e"te ade"ea corelat i cu tran"#ortul #rin mem ranele celulare, i cu im#o"i ilitatea de a atinge concentraiile dorite* )in 1FDE, ci"-#latinul, ca #re#arat unic "au com inat cu alte cito"tatice &.in la"tinul, loemicina, adriamicina, ciclofo"famid', a fo"t folo"it n tratamentul carcinoamenlor o.ariene, #ulmonare, ale .e$icii i $onei ca#-gBt* Cele mai frec.ente efecte "ecundare ce a#ar n tera#ia cu ci"-#latin "unt afectarea $onei ga"trointe"tinale &a#ariia de greuri i "tri de .om' i a rinichilor, datorit inhi rii en$imatice #rin coordinarea #latinei la gru#rile "ulfhidrice ale #roteinelor* )e aceea, "e recomand admini"trarea unor com inaii cu "ulf ca (-etilditiocar amatul de "odiu, tiouree i chiar diuretice ce m#iedic legarea #latinei la atomii de "ulf ai #roteinelor* Ci" #latinul e"te admini"trat intra.eno" "u form de "oluie (aCl ;*F> "teril* Cdat aAun" n circulaia "ang.in, el rmBne intact datorit concentraiei relati. cre"cute de ioni de Cl &1;;mM'* Com#u"ul neutru intr a#oi n celul att #rin difu$ie #a"i., ct i #rin di"tri uie celular* 0n celul, molecula neutr de ci" #latin "ufer un #roce" de hidroli$ n care ligandul Cl e"te nlocuit cu o molecul de a#, generBnd "#ecii cu "arcin #o$iti.* 1idroli$a decurge n interiorul celulei la concentraii mult mai mici ale ionului clorur &32; mM' N i, deci, la concentraii mai mari de a# = Y4t!!&(13'2Cl2Y [ 12C L X 4t!!&(13'2Cl&12C'Y[ [ ClX4t!!&(13'2Cl&12C'Y[ [ 12C L X4t!!&(13'2&12C'2Y2[ 2igura 2* )i"tri uia celular a ci"-#latinului i intele intercelulare

Aa cum e"te indicat n fig*2, odat intrat n celul ci"-#latinul are mai multe inte #oteniale= A)(, A<(, en$imele care conin "ulf &ca de exem#lu metalotioneina "au glutationul' i mitocondria* )intre ace"tea, doar acionnd a"u#ra A)( "e #oate "to#a de$.oltarea celulei canceroa"e* Ci"-#latinul formea$ com inaii coordinati.e cu A)( n #rinci#al #rin intermediul anumitor atomi de a$ot din #erechile de a$ ale ace"tuia* Aceti atomi de a$ot &n "#ecial atomul (D a #urinelor' "unt li eri " "e coordine$e cu ci"-#latinul #entru c ei nu #artici# la formarea legturilor de hidrogen cu alte a$e ale moleculelor de A)(*

2igura 3* 4erechile de a$e ale A)(* Ci"-#latinul "e leag la atomii (D a a$elor #urinice &guanina "au adenina'*

Se #ot forma multe ti#uri de aduci "au com inaii com#lexe ci"-#latin - A)(* Cele mai im#ortante dintre ace"tea #ar " fie cele n care 2 ligan$i Cl - ai ci"-#latinului "unt nlocuii de atomi de a$ot #urinici din a$e adiacente ale aceleiai catene de A)(* Pa$ele #urinice im#licate n mod normal n formarea ace"tor aduci "unt guaninele* S-au e.ideniat n" i aduci care im#lica o molecul de ? i una de A* 2igura :* Structura ci"-#latinului coordinat n interiorul unui du#lex de A)(

innd "eama de geometria "a, tran"-))4 nu #oate forma aduci 1,2 intracatenari* )e aici reie"e i caracterul inacti. n eliminarea celulelor canceroa"e* Se con"ider c tocmai formarea ace"tor coordinri 1,2 intracatenare "unt im#ortante #entru acti.itatea anticanceroa" a ci"#latinului* Cercettorii au o "er.at c legarea ci"-#latinului la A)( afectea$ atBt re#licarea, cBt i tran"cri#ia, #recum i mecani"mele de re#arare ale A)(*

Acti.itatea citotoxic a ci"-#latinului #oate #ro.eni din im#o"i ilitatea celulei de a re#ara moleculele de A)( afectate* 0ntr-ade.r, "tudiile in .itro a"u#ra extractelor celulare au e.ideniat c cei mai ntBlnii aduci ci"-#latin - A)( &aducii 1,2 intracatenari' nu "unt eliminai #rin re#arare* Ace"t #roce" ar tre ui " ai loc #rin intermediul "i"temului de re#arare #rin exci$ie* 0n afar de acti.itatea antitumoral, ci"-#latinul "-a do.edit a fi un un agent anti.iral* S-a #re"u#u" c .iru"urile "unt "ingurii ageni care tran"form celulele normale n celule tumorale, dar totodat "-a con"tatat c #articulele .irale "unt rareori reg"ite n celulele tumorilor, ceea ce ar duce la conclu$ia c tran"formarea are loc du# infecia .iral, #rin im#rimarea caracterului .iral celulelor normale* 0ncercnd o mutaie la celulele mamiferelor, #utem #re"u#une c le$iunile #rimare ale A)( #ro.ocate de com#lecii #latinici acionea$ eli ernd genomul .iral* Acea"ta duce la multi#licarea acti. a #articulelor .irale care #ot a.ea, dar #ot i nu a.ea, defecte* Modificarea "ur.ine n "i"temul imunologic care .a fi "timulat " #roduc anticor#i m#otri.a celulelor tumorale* S-ar #utea ca, #rin eliminarea genomului .iral i a #articulelor .irale fr di"trugerea celulelor care le-au coninut, ace"tea " re.in la "tarea normalM #re"u#unerile date "unt #o"i ile, dar in"uficient "tudiate* C+nc" /ii )in cele ex#u"e mai "u", #utem #uncta urmtoarele conclu$ii = #entru ca un com#lex #latinic " #o"ede #ro#rieti antitumorale, el tre uie " conin 2 gru#ri nela ile "u form de doi ligan$i monodentai "au un ligand identat i 2 gru#ri ce #ot fi uor "u "tituite cu ali ligan$iM acti.itate antitumoral manife"t doar i$omerii ci", care, datorit tran"-efectului, #ierd uor 2 gru#ri i, a"tfel, "e #ot uni la ligan$ii iologiciM cel mai nalt indice tera#eutic al com#uilor de ti#ul X4tA 2@2Y, n cadrul cercetrilor acti.itii iologice, "-a de#i"tat la com#u"ul numit ci"-#latin &ci"-4t&(13'2Cl2 "au ci"-))4'M nimerind n celul, ci"-#latinul hidroli$ea$ i atac urmtoarele inte intercelulare = A)(, A<(, mitocondriile &A)(ul mitocondrial' i #roteinele care conin "ulfM legndu-"e de molecula de A)( &n "#ecial la atomul (D a dou a$e #urinice intracatenare', ci"-#latinul "to#ea$ re#licarea i tran"cri#ia A)(ului, a"tfel locnd ntreg meta oli"mul celularM aducii 1,2 intracatenari a"tfel formai nu #ot fi eliminai #rin #roce"ul de re#arare al A)(ului din cau$ c nu "unt recuno"cui de factorii #roteici "#ecificiM #entru a #re.eni efectele ad.er"e ale ci"-#latinului a"u#ra tractului ga"tro-inte"tinal, "e recomand admini"trarea unor com inaii cu "ulf ca (-etilditiocar amatul de "odiu, tiouree i chiar diuretice ce m#iedic legarea #latinei la atomii de "ulf ai #roteinelor* 7i2"i+#&a1i% 1* M* (* 1ughe" GG jegcitmeyni{ mfm{ omgqgmeynm cgxeyygh GG gynhi, mc, 1FE3, ## 3E1-3EH* 2* R* <eediA8 GG +he mechani"m of action of #latinum anti-tumor drug"* GG 4ure A##lied Chemi"tr,, 1FED, .ol* /F, 2, ##* 1E1-1F2* 3* R*R* <o ert", A*R* +hom"on GG +he mechani"m of action of antitumor #latinum com#ound"* GG 4rogre"" in (ucleic Acid <e"earch and Molecular Piolog,, 1FDF, .ol* 22, ##* D1-133 :* Li##ert GG !m#act of Ci"#latin on the recent de.elo#ment of 4t coordination chemi"tr,= a ca"e "tud,* GG Coordination Chemi"tr, <e.ie%", 1FFF, 1E2, ##* 2H3-2F/ /* P* u*b* mqgh &cev*' GG ucevte mfmeynme heeydhi* jegcitmeynme ygevmtetm{ qefetdgh 6-6!! cp* GG etmtciv, mfm{, 1FEF* H* R* <eediA8 GG +he rele.ance of h,drogen onding in the mechani"m of action of #latinum antitumor drug"* GG !norganica Chimica Acta, 1FF2, .ol* 1FE-2;;, ##*ED3-EE1* D* A* 4a"ini, 2* \unino GG (e% ci"#latin analogue" - on the %a, to etter antitumor drug"* GG Ange%andte Chemie !nternational 3dition 3ngli"h, 1FED, 2H, ##* H1/-H2:*

E* *b* kceytgh, b** gtghiqghi, u*b* rgcoptghi GG udgcge gngqetme cgdmhggpgqeh ngfqenyt ygevmtetmz qidmt h nyecmfetdiq~tgz m nqmtmeyngz cindmne* GG ueydtmn bnivefmm evmxmtynm jipn }}}w, 1FEH, 12, ##* DF-EF* F* Mihe"cu ?rigore GG Micro iologie general i .irologie 3ditura 5P GG 2;;; 1;* 4alamaru M*(, !ordan A* <*, Cecal Alex* GG IChimie ionaorganic i metalele .ieii9 3ditura P!+ GG 1FFD 11* ?recu !, (eamu M, 3ne"cu L GG I!m#licaii iologice i medicale ale chimiei anorganice9 3ditura Runimea GG 1FE2