DIAGNOSTIC IN VIROZE

RESPIRATORII
VIROZE RESPIRATORII
Sindrom Virusuri frecvent
asociate
Etiologii
infrecvente
IACRS Rhinovirusuri,
Coronavirusuri
V. paragripale,
enterovirusuri,
adenovirusuri
Gripa Orthomixovirusuri
Crup V. paragripale Orthomixov,
VRS,
adenovirusuri
ronsiolita VRS Orthomixo!"
paragripale"
adenovirusuri
ronho!
pneumonie
Orthomixovirusuri
VRS,
Adenovirusuri
Virusuri
paragripale
v. ru#eolos,
V$V, C%V



Diagnostic in infectia cu
virusuri gripale
Orientare clinica

febra (3- !ile"# $ialgie# cefalee# astenie

(%& sapta$ani"# tuse nepro'uctiva#
faringita# rinoree(

Gripa nu se diagnosticheaza clinic

Si!pto!atologie ase!anatoare cu in"ectii deter!inate de#
Mycoplasma pneumoniae# a'enovirusuri#
virusul respirator sincitial# r)inovirusuri#
virusuri paragripale# si Legionella spp(
ORTHOMIXOVIRUSURI-V. GRIPALE A, B, C
myxa-mucus
tip A, , C & '(, %
su)tipuri& *A si 'A +,- tipuri de *A si . de 'A
Matrice
Nucleocapsida helicoidala
ARNss
HA - hemaglutinina
transcriptaza
anvelopa
NA - neuraminidaza
Produse patologice *
a$ spalatura nazo "aringiana se obtine cu
a+utorul unor ta$poane cu coa'a (sterile"
intro'use in cornetul na!al inferior(
%$ aspiratul nazo"aringian se obtine folosin'
un speculu$ na!al prin a'$inistrarea a 3 $l ser
fi!iologic in nari cu o seringa atasata la un tub 'e
plastic(
c" la&a' traheo%ronsic se obtine prin
bron)oscopie in con'itii speciale 'e catre personal
calificat
Pentru a $ari sansa 'e i!olare probele se recoltea!a
in pri!ele () ore 'e la 'ebutul infectiei(
Produse patologice
E*sudat naso+"aringian,SN-

Recoltare ta$pon steril - recoltare secretii 'e pe peretele

posterior si lateral al orofaringelui si 'in orice arie a'iacenta cu
infla$atie# e,u'at sau ulceratie( Se evita atingerea ta$ponului
'e li$ba# obra+i sau bu!e pentru evitarea conta$inarii-

recoltarea na!ala se obtine cu a+utorul unui ta$pon cu coa'a

intro'us in cornetul na!al inferior(

Stocare si transport( Opti$ se inoculea!a imediat 'upa

recoltare( Daca aceasta nu este posibil se ing)eata la -./ 0 si
se transporta pe !apa'a carbonica

Prelucrare( Ta$ponul este 'ispus intr-un tub steril cu circa 1

$l $e'iu 'e transport pentru virusuri si &2 S3V $ini$ o ora#
ti$p necesar elutiei virusului( Tubul se centrifug)ea!a la &//
g# 1 $inute# la 4 0( Supernatantul este in'epartat si
se'i$entul este resuspen'at in 3-4 $l T3S sau $e'iu 'e
cultura( Spalarea celulelor se poate repeta pentru in'epartarea
ur$elor 'e $ucus 'in secretii( In final 'epo!itul 'e celule reluat
in T3S serveste pentru i!olare virala sau pentru efectuarea 'e
frotiuri ce vor fi testate in i$unofluorescenta cu intreaga baterie
'e seruri antivirale 'isponibile(
Diagnosticul 'e laborator al gripei
Directii 'e 'iagnostic

I!olare virala 5 i'entificare

Detectie 'irecta

antigene virale- RI3

aci' nucleic- P0R

Diagnostic serologic
1(-culturi pri!are de rinichi
de !ai!uta rhesus
+linia continua epiteliala
de rinichi de caine ./DC0
+ /adin+Dar%1 Canine
0idne1$
&( pe ou 'e gaina e$brionat#
'e 6-11 !ile# inoculat
intraa$niotic sau
intraalantoi'ian(
Izolare &irala 2 diagnostic de electie

3e!adsor%tia
de!onstreaza izolarea &gripale
pe culturi de celule

Virusurile gripale nu sunt

citopatogene(

7a 48 ore 'upa inocularea v(

gripal se incearca 'etectia
virusului prin )e$a'sorbtie#
obisnuit cu eritrocite 'e
cobai la 4 0(

9e$a'sorbtia re!ulta 'in

incorporarea in $e$brana
plas$atica celulara a 9A
virale( 9e$atiile a'sorbite
specific ro!etea!a la
periferia celulelor infectate(
1(-culturi pri$are 'e rinic)i 'e
$ai$uta r)esus(
-linia continua epiteliala 'e
rinic)i 'e caine (:D0; -
:a'in-Darb< 0anine
;i'ne<"(
&( pe ou de gaina
e!%rionat4 de 5+66 zile4
inoculat intraa!niotic
sau intraalantoidian
Izolare &irala 2 diagnostic de electie

I!olarea pe O=E

I!olarea se 'e$( prin proprieratea v(

gripale 'e a aglutina )e$atii
Etape#
>Ag &iral + dilutii %inare
>suspensie de he!atii
>Se incu%eaza la te!peratura ca!erei + 78 !inute
Rol RHA:
Demonstrarea prezentei virusului hemaglutinant
Titrarea antigenului hemaglutinant inaintea reactiei de hemagutino-inhibare
93A
DE/ONSTRAREA PREZENTEI VIR9S9:9I
IN OGE
REACTIA DE 3E/AG:9TINARE
07ASI3I0AREA V( 9E:A=7?TI@A@TE
I( 9A structurala care 'istruge R

V gripale# paragripale
II( 9A structurala care nu 'istruge R

Arbovirusuri# v rubeolos
III( 9A non-structurala

po,virusuri
IDENTI-ICAREA V GRIPA:E
R( 9E:A=7?TI@O-I@9IAARE
Tehnica reactiei#
dilutii %inare din ser i!un de re"erinta
ag &iral he!aglutinant + 78 !in la ;(<C
siste! indicator + suspensia de he!atii
Se incu%eaza 78 !in la te!peratura ca!erei
Reactia de identi"icare a &irusurilor gripale
93AI
antigenic s)ift vs antigenic 'rift
Diagnosticul serologic

@ecesita recoltarea 'e pro%e de ser pereche 'e la

acelasi pacient(

@u se practica in $o' curent 'ecit in ca! 'e epi'e$ii#

pentru diagnostic retrospecti&

Diagnosticul necesita 'e$onstrarea unei cresteri

se!ni"icati&e .de peste = ori$ a titrului Ac
specifici antivirali intre proba 'e fa!a acuta# recoltata
la o sapta$ana 'e la 'ebutul bolii si cea 'in
convalescenta# recoltata &-3 sapta$ani $ai tar!iu(

:eto'a preferata 'e evi'entiere a anticorpilor anti

virali specifici este he!aglutinoinhi%area
/IAG'OS0IC SERO1OGIC
R*AI 2 0ulpini de referinta 3 ser pacient
diagnostic retrospectiv,
recoltarea de probe de ser
pereche
cresteri semnificative (de
peste 4 ori) a titrului Ac
specifici