Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
VETERINAR CLUJ-NAPOCA
FACULTATEA DE AGRICULTUR
COALA DOCTORAL
Conductor tiinific
Prof. univ. dr. Carmen PUIA
CLUJ-NAPOCA
2011
REZUMAT
Poluarea mediului nconjurtor reprezint contaminarea cu diverse materiale care
interfereaz cu sntatea uman, calitatea vieii sau funcia natural a ecosistemelor
(organismele vii i mediul n care triesc).
Bioremedierea solurilor contaminate cu petrol i produse petroliere constituie
procesul biologic n care hidrocarburile acestora sunt degradate prin intermediul
microorganismelor. Microorganismele folosite n acest proces sunt cu preponderen cele
indigene, dar pot fi folosite i microorganismele izolate din alt parte i inoculate pe
solurile contaminate.
n acest sens s-a observat faptul c numeroase microorganisme au capacitatea de a
utiliza hidrocarburile att n stare gazoas ct i n stare lichid i solid din seriile
alifatice, aromatice i asfaltice, pe care le folosesc ca surs de carbon i energie (Zarnea,
1994). Acestea degradnd hidrocarburile parial sau complet iar rezultatul rmas n urma
activitii lor microbiene este nepoluant pentru mediu fiind alctuit din ap, CO2 i
substane netoxice.
Microorganismele care particip n procesul de biodegradare a hidrocarburilor
sunt: bacteriile, fungii, levurile i algele. Cele mai importante grupe de microorganisme
care particip la biodegradarea hidrocarburilor sunt bacteriile i fungi.
OBIECTIVELE TEZEI
Obiectivele propuse pentru realizarea temei de cercetare au fost urmtoarele:
Izolarea pe diferite medii de cultur a principalelor grupe de microorganisme
(bacterii i fungi) din solurile poluate cu petrol.
Obinerea de tulpini pure i identificarea lor taxonomic.
Testarea capacitii de biodegradare a microorganismelor selectate i izolate n
cultur pur, pe medii cu petrol.
Multiplicarea microorganismelor i crearea de consorii microbiene n vederea
degradrii hidrocarburilor petroliere din solurile poluate.
Studiul sinergismului microorganismelor implicate n consorii.
Aplicarea i verificarea consoriilor microbiene n casa de vegetaie, pe
variante de sol poluate cu petrol.
241
MATERIALUL BIOLOGIC
Materialul biologic folosit n realizarea experienelor privind depoluarea biologic
a solurilor contaminate cu petrol a fost constituit din microorganismele izolate din
probele de sol poluate i prelevate de pe dou situri petroliere aflate n dou zone
geografice diferite: Ploieti i Suplacu de Barcu.
Din probele de sol prelevate de pe situl petrolier Ploieti au fost izolate 21 tulpini
bacteriene (CBP) i nou tulpini fungice (FP) iar din probele de sol recoltate de pe situl
petrolier Suplacu de Barcu au fost izolate 20 tulpini bacteriene (CBS) i 12 tulpini
fungice (FS).
Pentru testarea efectului bioremediator al consoriilor microbiene aplicate pe solul
poluat artificial cu diferite concentraii de petrol s-a folosit ca plant indicatoare salata
(Lactuca sativa var. capitata), soiul Attraktion, deoarece perioada de vegetaie este scurt
i este sensibil la toxicitatea solului (Banks and Schultz, 2005; Hublek et al., 2007).
- 1% (10.000 mg/kg)
- 3% (30.000 mg/kg)
- 5% (50.000 mg/kg)
- Ploieti (CMP)
- Suplacu de Barcu (CMS)
- combinat (CMC)
fiecrui recipient pentru a se obine un rezultat ct mai exact al coninutul de iei rmas
n sol.
Analiza solului privind coninutul de hidrocarburi petroliere a fost realizat n
laboratoarele Institutului de Cercetri pentru Instrumentri Analitice Cluj (ICIA Cluj).
Coninutul de hidrocarburi petroliere a fost determinat prin analiza FTIR. Analiza
care are la baz metoda spectrofotometric prin infrarou.
Eficacitatea bioremedierii pe plante de salat
Pentru verificarea eficacitii bioremedierii, cu ajutorul plantelor de salat, au fost
nfiinate dou experiene:
prima experien s-a nfiinat dup dou luni de bioremediere a solurilor
contaminate;
a doua experien a fost nfiinat la finalizarea procesului de bioremediere
(dup patru luni).
nfiinarea celor dou experiene s-a realizat simultan cu perioada n care au fost
efectuate analizele biochimice ale solului cu privire la coninutul hidrocarburilor
petroliere din sol.
Principalele obiective urmrite n fiecare experien au constat n:
influena concentraiilor de iei asupra creterii i dezvoltrii plantelor de
salat;
influena tipului de iei folosit n experien asupra creterii i dezvoltrii
plantelor salat;
influena consoriilor microbiene asupra creterii i dezvoltrii plantelor de
salat.
Observaiile fenologice urmrite au fost creterea i dezvoltarea plantelor de salat
precum i numrul de frunze formate. Observaiile i msurtorile asupra plantelor de
salat s-au efectuat la diferite intervale de timp: la 28 zile, 43 zile i 57 zile de la semnat.
Aceste experiene cuprind variante de sol poluate cu diferite concentraii de iei la
care s-au adugat consoriile microbiene. Din fiecare variant s-au prelevat cte 0,5 kg
sol n trei repetiii. Probele de sol din cele trei repetiii au fost omogenizate obinndu-se
244
proba medie. Fiecare prob medie a fost repartizat n cte trei vase de vegetaie cu
diametrul de 12 cm n care au fost semnate un numr de 20 semine de salat.
Vasele de vegetaie s-au amplasat randomizat conform schemei din figura 4.14.
REZULTATE EXPERIMENTALE OBINUTE
Degradarea hidrocarburilor petroliere
Tulpinile bacteriene CBP1, CBP2, CBP6, CBP7, CBP8, CBP10, CBP11, CBP13,
CBP14, CBP15, CBP16, CBP17, CBP18, CBP19, CBP20, CBP21, CBS1, CBS2, CBS3, CBS4,
CBS8, CBS10, CBS15, CBS16, CBS17, CBS18, CBS19, CBS20 au folosit ca surs de carbon
hidrocarburile din iei. Acestea au fost utilizate n vederea crerii consoriilor microbiene
alturi de fungii izolai din probele medii de pe siturile petroliere Ploieti i Suplacu de
Barcu.
n urma procesului de testare a tulpinilor fungice se remarc faptul c toate
tulpinile fungice au avut o foarte bun i bun dezvoltare pe una dintre mediile minerale
cu adaos de iei.
Identificarea i ncadrarea taxonomic a tulpinilor bacteriene i fungice
Din proba de sol de pe situl petrolier Ploieti au fost identificate 16 tulpini
bacteriene din genurile Acinetobacter, Klebsiella, Bacillus (ase tulpini), Burkholderia,
Pseudomonas i speciile Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa (trei tulpini),
Pseudomonas fluorescens, Burkholderia cepacia i nou tulpini fungice din genurile
Aspergillus,
Fusarium,
Paecylomices,
Penicillium
(dou
tulpini),
Rhizopus,
petrolier
Ploieti
bioremediate
cu
consoriu
microbian
format
din
CONCLUZII
Au fost izolate un numr de 21 tulpini bacteriene i 9 tulpini fungice de pe situl
petrolier Ploieti iar de pe situl petrolier Suplacu de Barcu au fost izolate un numr de
20 tulpini bacteriene i 12 tulpini fungice.
Tulpinile bacteriene din genurile Acinetobacter, Bacillus, Burkholderia,
Enterobacter, Escherichia, Klebsiella, Pseudomonas i tulpinile fungice din genurile
Aspergillus,
Acremonium,
Crysosporium,
Fusarium,
Mortierella,
Paecilomyces,
249
BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. BAEK K.H., H.S. KIM, H.M. OH, B.D. YOON, J. KIM, I.S. LEE, 2004, Effect
of crude oil, oil components and bioremediation on plant growth, Journal of
environmental science and health, Part A Toxic/Hazardous Substances &
environmental engineering vol. A39 (9): 2465-2472.
2. BANKS M.K., K.E. SCHULTZ, 2005, Comparison of plants for germination
toxicity tests in petroleum - contaminated soils, Water, Air and Soil Pollution
167: 211-219.
3. HUBLEK T., SIMONA VOSHLOVA, V. MATJU, NORA KOVOV,
ENK NOVOTN, 2007, Ecotoxicity monitoring of hydrocarbon-contaminated
soil during bioremediation: A Case Study, Arch. Environ. Contam. Toxicol. 52:
17.
4. STNESCU RODICA, LILIANA BOBIRIC, OANAMARI ORBULE, 2006,
Remedierea solurilor contaminate, Ed. Agir, Bucureti, 235 pag.
5. ZARNEA G., 1994, Tratat de microbiologie general. Bazele teoretice ale
ecologiei microorganismelor. Microorganismele i mediile lor naturale, Ed.
Academiei Romne, Bucureti, 943-947.
6. ZISU I., GH. IANO, 2008, Aspects regarding the pollution of agricultural lands
from banat with petroleum hydrocarbons, Annals of West University of Timisoara,
Series Chemistry, 17 (1): 97-102.
250