Biologia molecular

grupeaz un ansamblu de tehnici bazate pe studiul

i detecia modificrilor acizilor nucleici.
Utilizat n medicina uman i veterinar pentru
cercetare, diagnostic, tratamentul bolilor,
ameliorare.
1985 K.B. Mulis a descoperit tehnica PCR
markerii moleculari

 Biologia molecular a evoluat n ultimii 10 ani

datorit progreselor realizate n cercetrile
de biochimie, genetic, tehnicilor de
microscopie electronic, tehnologie a ADN
recombinant
informaticii.
Secvenializarea genomului uman - va
permite tratarea unor boli care prezint
numeroase necunoscute.
Primul genom secvenializat a fost cel de
gin (Hillier i col., 2004; Wong i col.,
2004). taurine, iar n 2005, suine 2006

 Genotip- componenta genetica a unui

organism; mai poate fi definit ca secvena
acizilor nucleici. Secvena nucleotidic din
ADN este informaia transmisibil
Fenotipul aspectul exterior,reprezint
totalitatea caracteristicilor funcionale i
structurale ale unui organism sau expresia
informaiei genetice asupra creia
opereaz selecia natural.

Acizii nucleici

Dintre acizii nucleici ARN a aprut

primul
ARN este considerat molecula
primordial a vieii i nu ADN,
deoarece:
riboza (glucidul coninut de ARN) se
realizeaz mult mai uor dect
deoxiriboza (glucidul coninut de ADN);
structura ciclic a deoxiribozei (din
ADN) nu posed gruparea 2hidroxil.

 ARN
Gruprile 2 i 3 joac rol structural n
ARN i sunt implicate n formarea
structurii teriare a ARN de transport
(forma de trefl), prin legturi de H;
gruparea 2hidroxil a ribozei joac ea nsi
un rol catalitic direct. De exemplu
capacitatea de autoexcizie (matisare) a
intronilor din ARN mitocondrial

ozele

ARNt

ARNt

Tipuri de ARN

Celula procariot
Caracteristici ale procariotelor (pro- nainte, karyion smbure sau
nucelu).
-bacteriile au forme i dimensiuni diferite.
Au membrana celular care formeaz un singur compartiment
citoplasmatic, fr o structur intern bine organizat.
Conin un singur cromozom, constituit dintr-o singur molecul de
ADN circular, fr a prezenta un nucleu bine conturat.

 Celula procariot
se multiplic prin diviziune simpl sau
fisiune binar, n funcie de condiiile de
mediu.
Neexistnd compartimente intracelulare
transcripia ADN i translaia ARNm au
loc concomitent.
Un singur tip de ARN polimerizeaz,
transcrie cele trei tipuri de ARN (m, r,
t).

 Caracteristicile celulelor eucariote

90-99% din informaia genetic,
existent n genomul unei celule
eucariote, este represat, deci este
netranscriptibil i nu se exprim
fenotipic.
Exist gene funcionale comune aproape
tuturor tipurilor celulare ale organismului
respectiv, care sunt n mod selectiv
activate sau reprimate n funcie de tipul
i stadiul de difereniere al celulei
respective.

Caracteristicile
celulelor eucariote
Exist un sistem de control care decide i
menine expresia anumitor gene i supresia
altora, n funcie de necesitile celulei
respective.
Factorii de control sunt proteinele reglatoare.
codificate de gene reglatoare, care sunt mai mult
sau sau mai puin active n funcie de tipul celular,
funciile i vrsta celulei.

 Proteinele reglatoare au
capacitatea de a se lega de ADN,
care controleaz activitatea unei
anumite gene structurale i pot
supresa sau activa expresia acestei
gene n funcie de cerinele
fiziologice ale celulei.

Transcripia unei gene

Nucleul celulelor
eukcariote
Nucleul, conine aproape ntreaga cantitate
de ADN care formeaz genomul celular,
ocup aproximativ 10% din volumul total al
celulei, dar acesta variaz n funcie de
esut, vrsta celulei, activitatea
metabolic, gradul de difereniere,
patologia celulei.

Nucleul
Structur:
cromatina nuclear,
nucleolul
matrixul nucleolar care formeaz
nucleoplasma (sau carioplasma)
membrana nuclear care nchide
compartimentul.

 Membrana nuclear
-dubl trilaminar:
membrana nuclear intern prin proteinele
specifice se leag de lamina nuclear.
membrana nuclear extern se continu
cu membrana reticulului endoplasmatic
spaiu perinuclear care are diametrul de
20-40 nm.

Structura nucleului la
microscopul electronic

Structura nucleului la
microscopul electronic

Nucleul celulelor eukcariote

Nucleul reprezint un centru metabolic activ care
realizeaz
-replicarea ADN,
transcripia informaiei n ARN,
asigur diviziunea celular,
repararea ADN.
proteinele joac un rol important.
ARN-urile sintetizate i procesate n nucleu, sunt
urmate de sinteza proteic.
Deci ARN-urile i alte componente din nucleu
trebuiesc exportate n citoplasm iar alteleproteinele- transportate n nucleu.

Porii membranei nucleare

traversarea membranei nucleare este un
proces selectiv.
Numrul porilor variaz cu specia i
tipul celular.
Fiecare por este format dintr-o
structur de proteine asociate
cunoscute sub denumirea de complex al
porului nuclear.

 Diametrul porului este de 9 nm i lungimea

de 15 nm.
moleculele mici (greutate molecular pn
la 1500 daltoni ) difuzeaz rapid, iar cele
mari, mai greu.
Moleculele mai mari dect diametrul porului
(de exemplu, ARNm) sunt complexate cu
diferite proteine (nucleoproteine), care
interacioneaz cu receptorii specifici
coninui de proteinele globulare ale
porului.

 Receptorii activeaz tranzitul acestor particule n

sau n afara nucleului, prin lrgirea canalelor
porilor.
Transportul nuclear este selectiv i necesit un
semnal nuclear de import care este prezent
numai n proteinele nucleare (implicate n
activitatea nuclear; enzime, histone, factori de
transcripie).

Acest semnal este reprezentat de o secven

scurt de aminoacizi (4 pn la 8 aminoacizi).

Cromatina nuclear

n nucleul celulelor eucariote, ADN exist

sub form de cromatin care este
organizat n mod ierarhic, n structuri
din ce n ce mai complexe:

Nucleozomul
Complexul octameric conine cte dou molecule
din fiecare tip de histon: H2A, H2B, H3 i H4.
segmente de ADN formate de 20-100 pb i
care reprezint regiunile de legtur denumite
ADN linkeri.
histona H1 care este situat n afara
octamerului. Ea este asociat att cu nucleozomul
core, ct i cu segmentul ADN linker i are rol n
stabilitatea nucleozomului

Nucleozomul

Nucleozomi

Fibre de cromatin

 Nucelozomii legai prin intermediul

linkerilor n irag de perle realizeaz o
structur mult mai compact, formnd
superfibre spiralizate cu un diametru de
250-300 denumite fibre groase.

Acestea reprezint cel de-al doilea

nivel de condensare al cromatinei.

Cromozomii metafazici
n metafaz, cnd se formeaz
cromozomii, fibrele devin mult mai
condensate, prin mpachetri adiionale,
formnd domenii (sau loops-uri).
Acest tip structural de cromatin este
bine legat ntr-un suport structural din
nucleu, denumit matrix nuclear (matrix sau
scaffold).

Eucromatina i
heterocromatina
Genele active care transcriu ARN formeaz zona
eucromatic, pe cnd genele inactive zona
heterocromatic. Cele dou zone se disting prin
sensibilitatea la atacul ARN-azei .
La nivelul eucromatinei, cromatina fiind, enzima
are acces i poate mai puin condensat aciona,
n timp ce la nivelul heterocromatinei enzima este
inactiv, accesul ei fiind mpiedicat de gradul mare
de condensare a acesteea.

Cromatina eucariotelor
Cromatina eucariotelor conine
proteine nehistonice (proteine
reglatoare, factori de transcripie
precum i
enzime ca ADN polimeraza sau
ARN polimeraza,
enzime de reparare, topoizomeraze).

eritrocite

neuron

Nucleolul la ME
Nucleolul este situat la celulele aflate n
interfaz. Structur:
un centru fibrilar, format din ADN
netranscriptibil;
o regiune fibrilar dens, care conine
ARN n curs de sintez;
o component granular care conine
particulelor de preribozomi.

plasmocite

 Rolul nucleolului
n 1960 s-a descoperit c nucleolul joac rol n
sinteza ARN ribozomal (ARNr) i n asamblarea
ribozomilor.
Din ARNr 45S, prin clivarea parial rezult cele 3
tipuri de ARN ribozomal: ARNr 18S din
subunitatea mic,ARNr5S, ARNr 5,8S i ARN
28S n subunitatea mare a ribozomilor.

Aceste molecule de ARN, nainte de a fi exportate

n citoplasm, formeaz complexe
ribonucleoproteice cu mai multe tipuri de proteine
(peste 70 proteine).

Volumul nucleolului
n mod normal nucleolul ocup 30% din
volumul nucleului.
n celulele tumorale nucleolii apar
hipertrofiai avnd o form neregulat.
Gradul lor de hipertrofie este proporional
cu gradul de malignitate.

 Matricea nuclear
Matricea nuclear este structurat dintr-o
reea de filamente insolubile, care ar fi
echivalent citoscheletului citoplasmei.
Se consider c fiecare tip celular ar avea un
set distinct de proteine, pe acestea fiind
structurate loops-urile din structura
cromozomilor i ajut la organizarea
cromozomilor, la reglarea replicrii, a
transcripiei ADN.

 Importana biomedical a acizilor nucleici: baza

chimic a ereditii

Un clugr din secolul XIX - Gregor Mendel a

introdus pentru prima oar noiunea de gen:
unitate de baz responsabil pentru deinerea
i transmiterea a unei caracteristici unice.
Iniial s-a crezut c proteinele sunt carui ai
informaiei genetice, pn la mijlocul secolului
XX, cnd s-a descoperit c ADN-ul este baza
ereditii, datorit faptului c este capabil de
auto-replicare.

Acizii nucleici sunt

ADN-ul i ARN-ul
ADN
Sediul principal al
localizrii ADN-ului
este nucleul celulelor.
Sedii secundare sunt:
mitocondriile i
cloroplastele (n
celula vegetal).

ARN
Diferitele tipuri de
ARN sunt
localizate n nucleu,
citoplasm,
mitocondrii,
ribozomi.

STUCTURA ACIZILOR
NUCLEICI
ADN-ul a fost descoperit in anul 1896, in nucleii
leucocitelor din sange.
Functia lui era necunoscuta. Acest compus denumit
acid nucleic, a fost izolat din nucleii diferitelor tipuri
de celule.
Analizele chimice, efectuate in anul 1910 au
identificat doua clase de acizi nucleici: ADN si ARN.
In anul 1924, studiile microscopice si utilizarea
colorantilor specifici pentru ADN si proteine au
demonstrat ca amandoua substantele se gasesc in
cromozomi

Dogma Central a geneticii

moleculare

DNA

RNA

Propus de ctre Francis Crick

n 1958 pentru a descrie fuxul
informaiei genetice n celul.

Acid dezoxiribonucleic

Acid ribonucleic

Informaia depozitat n ADN

este transferat ARN-ului, care
mai departe o transfer
proteinelor.
Dogma Central propus de
Crick a suferit numeroase revizii
n ultimii 47 de ani.

Protein

Dogma Central a Geneticii

ADN
ARN

Transcriere

proteine

Traducere

transcrierea = transferul informaiei genetice de la

ADN la ARN (sintez de ARN pe matri de ADN)
traducerea = transferul informaiei genetice de la ARN
la proteinele functionale, a cror secven de aminoacizi
este codificat n structura ADN-ului.

 replicarea = transferul informaiei

genetice de la celula mam la
celulele-fiice prin copierea ADN-ului
parental cu formarea a dou molecule
de ADN cu structur identic ADNului parental

Dogma Central Revizuit

Recombinarea=
reaaranjarea
materialului genetic
Recombination
Mutation/Repair

Mutaii/Reparare =
lezarea ADN cu
alterarea informaiei
genetice/ corectarea
leziunilor ADN
Revers- transcrierea =
transferul informaiei
genetice de la ARN la
ADN

Ce sunt acizii nucleici

(ADN and ARN)?
Acizii nucleici sunt polinucleotide (produi de
policondensarea aunor uniti denumite nucleotide).
Nucleotidele reprezint unitatea monomeric a acizilor
nucleici i sunt compuse din:
- o baz azotat heterociclic:
- purine: adenin (A) i guanin (G)
- pirimidine: citozin (C) i timin (T) pentru ADN
citozin (C) i uracil (U) pentru ARN
- o pentoz:
- dezoxiriboza (este prezent n ADN)
- riboza (este prezent n ARN)
- fosfat

STRUCTURA BAZELOR
AZOTATE

 Fosfaii
Fosfatul anorganic este un complex stabil,

format pornind de la acidul fosforic PO4H3

(scris Pi).

Esterii fosfat se pot forma dintr- un fosfat i

o grupare hidroxil liber (alcool, enol, fenol).

Condensarea unui fosfat i a unui acid de

exemplu, sau a unui fosfat cu un alt fosfat d
o anhidrid.

Pirofosfatul care este o anhidrid a acidului

fosforic.

Fosfaii

Bazele pirimidinice
Sunt reprezentate de citozin, uracil i timina.
Citozina - C4 este substituit de gruparea amin i
C2 ceton.
Uracilul -carbonii 2, 4 poart gruparea ceton.
Timina C2 i C4 posed gruparea ceton dar C5 are
legat un metil i se mai numete metil-uracil).

Pirimidinele
Citozina

Uracil

Timina

NH2

4
5

H3C

NH

NH

NH
1

NH

NH

Atomii heterociclului pirimidinic sunt numerotai de

la 1 la 6 (astfel ncat atomii de N din ciclu s
primeasc indicele minim).

Bazele azotate prezint

fenomenul de tautomerie
NH

NH2

NH2

NH

NH

forma amino

forma imino

Citozina

C
HN

forma lactam

OH

forma lactim

Bazele azotate prezint

fenonemul de tautomerie
Formele mai stabile:
Forma lactam este mai stabil dect forma
lactim
Forma amino este mai stabil dect forma
imino

n acizii nucleici exist formele lactam i

amino

Baze azotate purinice i

pirimidinice
Nucleul aromatic pirimidinic
O baz purinic este constituit din
doi nuclei heterociclici alipii,

Baze purinice i
pirimidinice

Baze purinice
Exist dou baze purinice adenina
i guanina.
Adenina nu conine atomi de oxigen.
Guanina - C 2 este substituit cu o
grupare amin i carbonul 6 printro legtur cetonic.

Purine
Adenina

Guanina

NH2

6
1

N
2

N
3

NH

HN
H2N

NH

Atomii heterociclului purinic sunt numerotai de la

1 la 9 (astfel ncat atomii de N din ciclu s
primeasc indicele minim).

STRUCTURA PENTOZELOR
DIN ACIZII NUCLEICI

Ozele
Riboza i dezoxiriboza
n ARN glucidul este riboza iar n
ADN este dezoxiriboz.
Dezoxiriboza deriv din riboz
printr-o reducere a funciei alcool a
C2-hidroxil.

Pentoze
Riboza
HO

5
CH2

Dezoxiriboza

OH

HO CH2

OH

OH OH

OH

lipsete
2-OH

Atomii de carbon ai pentozelor sunt numerotai

de la 1 la 5.
Pentoza din ADN este dezoxiriboza, cruia i
lipsete gruparea hidroxil 2-OH.
Pentoza din ARN este riboza.

STRUCTURA
NUCLEOZIDELOR

Structura nucleozidelor:
baz + pentoz

Legtur
-N-glicozidic

Nucleozidele sunt
derivai ai bazelor
azotate care au o
pentoz legat de un
atom de azot din
heterociclu:
N9 pentru purine
N1 for pirimidine
printr-o legtur -Nglicozidic.

Nucleozide i nucleotide

Legtura dintre o baz azotat cu zaharurile

(ozele) d un nucleozid; acestea sunt legturi
N-ozidice.
ntr-o nucleozid atomii bazei azotate se
numeroteaz prin cifre 1 ...n, iar pentru a se
distinge carbonii ozei sunt numerotai 1 - 2.

Nucleozide i nucleotide

Structura nucleotidelor

Terminologie
Ribonucleozide/Ribonucleotide
(cnd pentoza = riboz)
Baza

Nucleozidul

Adenina Adenozina (A)

(A)

Nucleotidul
Adenozin monofosfat
(AMP) sau adenilat
Adenozin difosfat
(ADP)
Adenozin trifosfat
(ATP)

adenozina

Terminologie Ribonucleozide/Ribonucleotide
(cnd pentoza = riboz)

Baza

Nucleozidul

Adenina (A) Adenozina (A)

Nucleotidul
Adenozin monofosfat (AMP)
Adenozin difosfat (ADP)
Adenozin trifosfat (ATP)

Guanina (G)

Guanozina (G)

Guanozin monofosfat (GMP)

Guanozin difosfat (GDP)

Citozina (C)

Citidina (C)

Guanozin trifosfat (GTP)

Citidin monofosfat (CMP)
Citidin difosfat (CDP)

Uracil (U)

Uridina (U)

Citidin trifosfat (CTP)

Uridin monofosfat (UMP)
Uridin difosfat (UDP)

Timina (T)

Timidina (T)

Uridin trifosfat (UTP)

Timidin monofosfat (TMP)
Timidin difosfat (TDP)
Timidin trifosfat (TTP)

Adenozintrifosfat

uridinmonofaofat

Terminologie comparativ
Ribonucleotide

Dezoxiribonucleotide

Adenozin monofosfat

Dezoxiadenozin monofosfat

(AMP) sau adenilat

(dAMP) sau dezoxiadenilat

Adenozin difosfat

Dezoxiadenozin difosfat

(ADP)

(dADP)

Adenozin trifosfat

Dezoxiadenozin trifosfat
(dATP)

Dezoxiguanozina

Terminologie Dezoxiribo-nucleozide/nucleotide
(cnd pentoza = dezoxiriboz)
Baza

Nucleozidul

Nucleotidul

Adenina (A)

Dezoxiadenozina (A)

Dezoxiadenozin monofosfat (dAMP)

Dezoxiadenozin difosfat (dADP)
Dezoxiadenozin trifosfat (dATP)

Guanina (G)

Dezoxiguanozina (G)

Dezoxiguanozin monofosfat (dGMP)

Dezoxiguanozin difosfat (dGDP)

Citozina (C)

Dezoxicitidina (C)

Dezoxiguanozin trifosfat (dGTP)

Dezoxicitidin monofosfat (dCMP)
Dezoxicitidin difosfat (dCDP)

Uracil (U)

Dezoxiuridina (U)

Dezoxicitidin trifosfat (dCTP)

Dezoxiuridin monofosfat (dUMP)
Dezoxiuridin difosfat (dUDP)

Timina (T)

Dezoxitimidina (T)

Dezoxiuridin trifosfat (dUTP)

Dezoxitimidin monofosfat (dTMP)
Dezoxitimidin difosfat (dTDP)
Dezoxitimidin trifosfat (dTTP)

Dezoxicitozina trifosfat

Dezoxitimidinmonofosfa
t

 Funciile fiziologice ale nucleotidelor

Crmizi pentru sinteza acizilor nucleici
Compui macroergici care furnizeaz energia
necesar diferitelor procese biologice (ex.
ATP, GTP)
Reglatori alosterici ai diferitelor enzime
(ex.ADP e activator alosteric al ICDH din ciclul
Krebs)
Donori de grupe metil (ex.Sadenozilmetionina)
Mesageri intracelulari ai hormonilor hidrofili
(ex. AMPc, GMCc)

Nucleotide naturale
libere: AMPc
NH2
N
N
O

CH2

O P

AMPc

A d e n i n e 3,5adenozin

N
N

R ib o s e
OH

monofosfatul ciclic
(AMPc) este
mesager secund
imlicat n
transmiterea
mesajului hormonal
din mediul
extracelular n
interiorul celulei.

STRUCTURA ADN
1. structura primar
2. structura secundar
3. structura teriar

Lanul polinucleotidic al
ADN
(structura
primar/covalent)

G u a n in e
N

HN
H2N

5' end HO

CH2

N
NH2

C y to s in e

ADN este un
polidezoxiribonucleotid n care
gruparea 3OH a unui
dezoxiriobonucleotid este
legat la gruparea 5OH a
dezoxiriobonu-cleotidului vecin
printr-o legtur fosfat
diesteric.

Lanul polinucleotidic este

polar:prezint dou capete
distincte.

3linkage

O
O P O

N
CH2

5linkage

O P O
O

O
H3C

NH

NH

O P O

CH2

T h y m in e

O
OH
3' end

Captul 3este cel cu gruparea

3-OH liber.
Captul 5este cel cu gruparea
5-OH liber sau fosforilat.
Lanul polinucleotidic al ADN
este ncrcat negativ la pH-ul
fiziologic.

G u a n in e

Reprezentare simplificat a lanului ADN

HN
H2N

5' end HO

CH2

N
NH2

C y to s in e

N
O
O P O

N
CH2

Pentoza: linie
orizontal

Baza: litera
corespondent

Leg. fosfodiesteric:

O
H3C

3 C
P

NH

NH
CH2

3 G
P

linie oblic i P la
O
mijloc
T h y m in e

O P O

O P O

OH

O
OH
3' end

P
5

3
OH

Reprezentarea simplificat a catenei de ADN

O

G u a n in e
N

HN
H2N

5' end HO

CH2

Prin convenie o caten de

ADN se scrie n direcia
5- 3.

N
NH2

C y to s in e

N
O
O P O

N
CH2

ex. GCT nseamn 5GCT 3

O

O P O
O

O
H3C

NH

NH

O P O

CH2

T h y m in e

O
OH
3' end

STRUCTURA SECUNDAR
A ADN

Dublu helixul ADN

Watson i Crick au decoperit c structura
secundar a ADN este un dublu helix format
din dou catene de ADN asociate prin
mperecherea bazelor
Inelele glucidice legate prin resturi fosfat
constituie scheletul extern al dublu helixului, n
timp ce bazele azotate hidrofobe sunt orientate
spre interior i perpendicular pe axa helixului.
ADN-ul uman conine aproximativ 3,5 x 109
perechi de baze.

Dublul helix al ADN

( structura secundar)
1. Stabilitatea ADNdc este asigurat de:
- interaciunile hidrofobe dintre bazele azotate suprapuse (stivuite)
de pe aceeai caten
- legturile de hidrogen ce se stabilesc ntre bazele azotate de pe o
caten i cele complementare de pe cealalt caten.
1. Cele dou catene de ADN sunt antiparalele.

ADN dublu helix

(structura secundara)
3.

G-C are 3 legturi de H.

A-T are 2 legturi de H.

4.

Cele dou catene sunt

complementare (G is
complementar C, A is
complementare T).

5.

Nr. A = Nr. T
Nr. G = Nr. C

Dublu helix ADN

(structura secundar)
6.
-

Exist mai multe confomaii ale

ADN;
Conformaia B: descris de
Watson i Crick are orientare
dreapt, pasul dublu helixului
este 34 (3,4nm), diametrul de
2nm, iar nr. perechi baze per tur
este 10; cea mai rspndit.

Conformaia A: dublu helix de

dreapta dar mai compact, pasul
elicei este de 2,8nm, nr. perechi
baze per tur este 11.

Conformaia Z: dublu helix de

stinga, pasul elicei 4,56nm i nr.
perechi baze per tur este 12.

STRUCTURA TERTIAR A
ADN:
polinucleozomul

De la ADN la cromozomi
In eucariote ADN-ul este stocat n nucleu.
Deoarece nu este suficient sapiu iar molecula
ADN-ului este extrem de mare (lungimea ADN
de la o singur celula uman e 2m!!!), ADN-ul
trebuie compactat.
Exist cinci nivele de compactare a ADN
care conduce la o scdere de 10.000 de ori
lungimii ADN.

compactare a ADN
n nucleu
-Primul nivelr

Dublul helix de ADN se

nfoar n jurul unui
octamer proteic format din
histone- fiecare unitate de
ADN spiralat de 1,75 ori n
jurul unui compelx histonic
se numete nucleozom.

Histonele sunt proteine

bazice cu mas molecular
mic (max. 20.000), bogate
n aa bazici (Arg pt.H2A,
H2B i, Lys pt H3, H4).

compactare a ADN
n nucleu
-Primul nivelr

n jurul octamerului histonic

(H2A H2B H3 H4)x2 este spiralat
ADN-ul nucleozomic fomat din 140
perechi de baze.
Nucleozomii sunt legai ntre ei prin
ADN intrenucleozomic sau ADN linker
format din 30 perechi de baze).Histona
H1 itercaioneaz cu ADN linker, avnd
rol n superspiralizarea nucleozomilor.
Polinulceozomul seamn cu nite
mrgele pe a (=fibrile de cromatin
de 10nm ).

Mrgele de ametist

Aparena de
mrgele pe a a
ADN

Nivelele de
compactare a
ADN n nucleu
-al doilea nivel Polinucleozomul se
superspiraleaz pentru a
forma structura de solenoid.
Solenoidul conine 6-7
nucleozomi per tur.Pasul e de
10nm, diametrul de 30 nm.
Solenoidul formeaz fibrele de
cromatin de 30 nm.

Nivelele de compactare a
ADN n nucleu
-nivelele 3,4 i 5-

r
- Fibrele de cromatin se compacteaz
i mai mult form domenii n form de
bucl.
- Aceste domenii n bucl sunt
superspiralizate i organizate n
structuri distincte numite cromozomi.
- ADN -ul uman nuclear ( genomul)
const n 23 perechi de cromozomi.

Diferena dintre celulele

diploide i celulele haploide
Majoritatea celulelor eucariote conin
perechi de cromozomi i sunt astfel
denumite diploide.
Celulele care conin cromozomi nepereche
sunt denumite haploide.

 Structura secundara a ADN a fost stabilita in anul

1953 de catre J. D. Watson, F. H. C. Crick si M. H.
F. Wilkins si corespunde tipului B de ADN, prezent
in regiunile de eucromatina, cu gene active
metabolic.
Conform acestui model, molecula de ADN este
alcatuita din doua catene macromoleculare,
antiparalele, cu directie diferita de inaintare, rasucite
in jurul unui ax comun avand forma unei scari in
spirala

STUCTURA ACIZILOR
NUCLEICI
Cele doua balustrade ale scarii sunt
reprezentate printr-un schelet glucido-fosforic,
treptele scarii fiind reprezentate prin bazele
azotate intre care se stabilesc punti de
hidrogen de tipul A=T, respectiv GC.
Prin asezarea in interior a bazelor azotate,
acestea sunt protejate la actiunea diferitilor
factori de mediu, asigurandu-se stabilitatea
moleculei si implicit a informatiei genetice,
conferita de ordinea nucleotidelor dintr-o
catena.

STUCTURA ACIZILOR
NUCLEICI
Datorita faptului ca pot exista numai patru tipuri
de legaturi de hidrogen, A=T, GC, respectiv
T=A, CG, se asigura reproducerea cu mare
fidelitate a informatiei genetice in urma procesului
de replicare.
Pasul elicei este de 34 . Deoarece la un pas al
elicei se afla 10 perechi de nucleotide, distanta
dintre doua perechi alaturate de nucleotide este de
3,4 .

 Diametrul elicei la modelul B al ADN, este de 19

fata de 20 stabilita initial.
Dublul helix prezinta rasucire spre dreapta, fiind
usor asimetric, avand doua ferestre: mare si mica.
Acestea reprezinta locurile unde actioneaza
factorii mutageni.

ADN
Catenele ADN sunt complementare.
Legturile de hidrogen se formeaz
astfel:
A -T
G-C
Fiecare lan de ADN posed o extremitate
5'fosfat i o extremitare 3'hidroxil.

 Stabilitatea moleculei de ADN

este dat de:
1. structura dublu catenar,
care permite moleculei s se
repare rapid

 datorit deoxiribozei, ADN este

mai rezistent la hidroliz dect
ARN.
ADN conine gene i sisteme
de control pentru transcripia
ARNm i a celorlalte tipuri de
ARNt i ARNr

((((((((((((

Hibridizarea AT
n acizii nucleici nucleotidele sunt asociate
2 cte 2, prin legturi de H.
Legtura-hibridizare AT este mai puin
stabil dect G C, deoarece ntre adenin
i timin se formeaz dou legturi de H
iar ntre citozin i gunin 3.

Hibridizarea adeninatimina

Hibridizarea GuaninCitozin

ADN

Molecul de ADN

Condensarea i hidroliza
nucleotidelor

Creterea lanului de acizi nucleici se face totdeauna

prin extremitatea 3OH terminal.
Condensarea se face pornind de la un substrat activat
o nucleotid trifosfat.
Hidroliza ultimilor doi fosfai va furniza energia
necesar condensrii.
Va fi eliberat o molecul de ap.