EXPLORAREA ERITROCITELOR

- DETERMINAREA VSH (viteza de sedimentare a hematiilor)

- NUMARAREA ERITROCITELOR
EXPLORAREA LEUCOCITELOR NUMARAREA LEUCOCITELOR
DETERMINAREA GRUPELOR DE SANGE IN SISTEMUL 0AB SI Rh

DETERMINAREA VSH
-

sangele este constituit din- faza dispersata = elementele figurate

- faza dispersanta = plasma
- extras din circulatie, sangele se comporta ca o suspensie instabila din care se separa componenta celulara
de cea plasmatica
definitie: VSH = lungimea de cadere a hematiilor prin plasma intr-un interval de timp
factori care influenteaza VSH:
- globulari- numar, forma, volum eritrocite
- plasmatici- concentratia proteinelor plasmatice
- valoarea colesterolemiei
- proteinele patologice
- concentratia plasmatica a acizilor biliari
- alti factori- temperatura camerei
- inclinarea tubului
- anticoagulantul folosit
Metoda WESTERGREEN (de determinare a VSH)
principiu:
- masurarea VSH este un indicator al vitezei de separare a eritrocitelor din suspensie, sub actiunea
acceleratiei gravitationale
materiale necesare:
- vata
- alcool sanitar
- seringa cu ac steril
- solutie de citrat de Na 3,8 % (anticoagulantul)
- aparatul Westergreen- pipete Westergreen
- stativ pentru pipete
- eprubete
tehnica de lucru:
- se aspira in seringa 0,4 ml solutie citrat de Na 3,8 %
- se punctioneaza o vena de la plica cotului, respectand regulile de asepsie si asntisepsie, cu staza minima
(fara garou)
- se recolteaza in aceeasi seringa sange pana la diviziunea 2, peste anticoagulantul de 0,4 ml (adica 1,6 ml
sange)
- se omogenizeaza amestecul si se pune intr-o eprubeta
- din eprubeta, sangele este aspirat in pipeta Westergreen (divizata milimertic de la 200 la 0 diviziuni)
- dupa care se aseaza perfect in pozitie verticala in suportul pentru pipete
- sub actiunea acceleratiei gravitationale, are loc separarea componentei globulare de cea plasmatica
aparatul Westergreen- stativ cu pipete de 300 mm
- diametru 2,5 mm
- gradate 200- 0 diviziuni (diviziunea 0 in sus)
citirea rezultatelor- la 1 h si la 2 h de la fixarea in stativ

valori normale
1 ora

2 ore

Barbati

5-7 mm

10-15 mm

Femei

6-8 mm

12-16 mm

variatii fiziologice- cresteri- varstnici

- sarcina
- menstruatie
- scaderi- la copii
NUMARAREA ERITROCITELOR

principiu- se numara la microscopul optic eritrocitele aflate intr-un volum de sange cunoscut si diluat intr-o
proportie cunoscuta.
lichidul de dilutie utilizat poate fi :

- solutia HAYEM
- solutia WITHBY
- serul fiziologic

materiale- lichidul de dilutie

- vata
- alcool sanitar
- ac de seringa steril
- pipeta POTAIN pentru globule rosii (cu biluta rosie in interior)
- hartie de filtru
- camera de numarat (Thoma sau Burker-Turk)
- microscopul optic
- lamele de sticla
tehnica- se dezinfecteaza cu alcool pulpa degetului (mediu sau inelar)
- se punctioneaza cu un ac steril, cu respectarea regulilor de asepsie si antisepsie
- prima picatura de sange se sterge cu un tampon de vata curat
- urmatoarea picatura de sange, fara a exercita presiune asupra degetului, se aspira in pipeta Potain
pana la diviziunea 0,5 (sau 1)
- peste ea se aspira in continuare, in pipeta, lichid de dilutie pana la diviziunea 101, realizandu-se o
dilutie a sangelui de 1/ 200 sau 1/ 100
- se agita pipeta pentru omogenizarea continutului
- se arunca din pipeta primele picaturi pentru ca contin numai lichid de dilutie
- se fixeaza camera de numarat pe platina microscopului si se identifica reteaua gravata pe camera
- se aseaza o lamela curata pe camera de numarat si se depune o picatura din lichidul din pipeta la
marginea camerei de numarat
- lichidul va patrunde prin capilaritate in camera
- se asteapta cateva minute pentru sedimentarea si repartizarea eritrocitelor pe cadrilajul camerei
- camera se examineaza la microscop cu obiectivul mic si cu lumina solara
- se numara in zig-zag hematiile din 80 de patratele mici cu suprafata de 1/ 400 mm2, numarand
elementele asezate pe doua din laturile sale si in interiorul fiecarui patrat
cauze de eroare:
- diluarea sangelui prin comprimarea degetului
- diluarea incorecta a sangelui
- patrunderea de bule de aer in pipeta Potain sau in camera de numarat
- omogenizarea insuficienta
- examinarea unui numar insuficient de patratele
- neatentie la numarare

NUMARAREA LEUCOCITELOR

principiu- se numara leucocitele direct la microscop, dintr-un volum de sange cunoscut, diluat intr-o proportie
cunoscuta cu o solutie care produce liza hematiilor
lichidul de dilutie folosit- solutia TURK
materiale necesare:
- lichidul de dilutie
- vata
- alcool sanitar
- ac de seringa steril
- pipeta POTAIN pentru globule albe (cu biluta alba in interior)
- hartie de filtru
- camera de numarat (Burker-Turk)
- microscopul optic
- lamele de sticla
tehnica de lucru:
- se dezinfecteaza cu alcool pulpa degetului (mediu sau inelar)
- se punctioneaza cu un ac steril, cu respectarea regulilor de asepsie si antisepsie
- prima picatura de sange se sterge cu un tampon de vata curat
- urmatoarea picatura de sange, fara a exercita presiune asupra degetului, se aspira in pipeta Potain
pana la diviziunea 1
- peste ea se aspira in continuare, in pipeta, lichid de dilutie pana la diviziunea 11, realizandu-se o
dilutie a sangelui de 1/ 10
- se agita pipeta pentru omogenizarea continutului
- se arunca din pipeta primele picaturi pentru ca contin numai lichid de dilutie
- se fixeaza camera de numarat pe platina microscopului si se identifica reteaua gravata pe camera
- se aseaza o lamela curata pe camera de numarat si se depune o picatura din lichidul din pipeta la
marginea camerei de numarat
- lichidul va patrunde prin capilaritate in camera
- se asteapta cateva minute pentru sedimentarea si repartizarea eritrocitelor pe cadrilajul camerei
- camera se examineaza la microscop cu obiectivul mic si cu lumina solara
- se numara in zig-zag hematiile din 50 de patratele mici cu suprafata de 1/ 16 mm2, numarand
elementele asezate pe doua din laturile sale si in interiorul fiecarui patrat
Calculul numarului de leucocite:
-

se gasesc X leucocite in 50 de patratele mici cu suprafata de 1/ 16 mm2

- numarul de leucocite totale/ mm3 = [X/ 50] x 16 x 10 x D
unde X/ 50 = numarul mediu de leucocite dintr-un patratel mic
16 = corectia de suprafata (aducere la 1 mm2)
10 = corectia de adancime (aducere la 1 mm3)
D = corectia dilutiei sangelui de 10
Valori normale
-

adult 5000- 9000/ mm 3

sugar 8000- 12000/ mm 3
NN 12000- 20000/ mm 3

Variatii fiziologice:
Leucocitoza= cresterea nr de leucocite peste 10.000/ mm 3
Leucopenie= scaderea nr de leucocite sub 4000/ mm 3
Variatii fiziologice :

Scaderi- persoanele sensibilizate fata de unele alimente

Cresteri- dupa mesele copioase
- in efortul muscular intens
- in sarcina
- in a doua jumatate a zilei
variatii patologice:
- cresteri- infectii acute sau cronice
- stari septice grave si intoxicatii ale maduvei rosii
- intoxicatii
- scaderi- infectii virale
- soc anafilactic
- hipofunctie medulara