Partea I Noiuni generale

Curs 1 Generaliti Virusologie, bacteriologie i

parazitologie
Cursul 2 Noiuni de epidemiologie
Cursul 3 Mijloace de aprare ale organismului uman

Curs 1 Generaliti Virusologie,

bacteriologie i parazitologie
Obiectul de studiu al acestei discipline l reprezint organismele care provoac daune
sntii omului. Din aceast categorie fac parte virusurile, bacteriile si paraziii.
Virusurile sunt entiti infecioase acelulare, reprezentate de complexe macromoleculare
alctuite din subuniti repetitive (fig. 1.1). Au alctuirea cea mai simpl, din cauza creia, nici
astzi nu exist o prere unic privind ncadrarea lor n lumea vie. Virusurile su nt strict
dependente de gazda parazitat, neputndu-se multiplica n afara ei din cauza absenei unui
sistem enzimatic care s replice materialul genetic. Astfel, toate virusurile sunt parazite.
Bacteriile sunt organisme unicelulare, de tip procariot (materialul genetic nu este
delimitat de o membran), al cror mod de via este saprofit sau parazit (fig. 1.2). Bacteriile
saprofite consum substana organic moart aflat n descompunere, realiznd transformarea
organicului n mineral. Bacteriile parazite se hrnesc pe seama unui organism gazd viu.
Termenul de parazit face referire la un organism ce triete pe seama altui organism. n
cazul de fa, n aceast categorie sunt inclui fungii parazii, protozoarele parazite, viermii
parazii si artropodele parazite.
Fungii sunt organisme eucariote (materialul genetic este delimitat de o membran
nuclear), heterotrofe, al cror corp este alctuit din hife (filamente lungi uni- sau pluricelulare)
i se numete miceliu (fig. 1.3).
Protozoarele sunt organisme animale unicelulare de tip eucariot (fig. 1.4). Triesc n
mediu umed sau acvatic, pot fi libere sau parazite. Se nmulesc att sexuat, ct i asexuat.
Viermii sunt organisme eucariote pluricelulare, nevertebrate, lipsite de picioare, cu
corpul lunguie i cu tegumentul lucios, ce se gsesc de obicei n mediul umed (fig. 1.5). Cei
parazii prezint o serie de adaptri: dein structuri cu care se fixeaz n corpul gazdei, produc
substane care s-i protejeze de enzimele secretate de aceasta, au bine dezvoltat aparatul digestiv
i reproductor.
Artropodele sunt organisme animale eucariote pluricelulare, nevertebrate, al cror corp
este segmentat i protejat de un exoschelet chitinizat (crustaceele, scorpionii, pianjenii,
miriapodele, insectele) (fig. 1.6).
Multe dintre aceste organisme nu pot fi observate cu ochiul liber, avnd dimensiuni foarte
mici, motiv pentru care se i numesc microorganisme.
MICROBIOLOGIA (gr. mikros =mic, bios=via, logos=tiin) este tiina care se
ocup cu studiul celor mai mici organisme ce pot fi observate doar cu ajutorul microscopului,
denumite n sens larg microbi. Obiectul de studiu al microbiologiei l reprezint
microorganismele, grup heterogen ce are n comun dimensiunile microscopice, organizarea, n
general, unicelular i structura intern relativ simpl.

n acest grup al microorganismelor sunt incluse: bacteriile, fungii microscopici, unele

alge, protozoarele i virusurile.

Figura 1.1 Virusul H1N1

Figura 1.2 Bacterie Shigella dysenteriae

(http://news-frist.blogspot.com/2009/08/predicting-futurecourse-of-h1n1-virus.html)

(higieneialiments.blogspot.com)

Figura 1.3 Candida albicans candidoza

Figura 1.4. Protozoar Giardia intestinalis

(http://en.wikipedia.org/wiki/Candida_(fungus))

(http://www.avianbiotech.com/diseases/Giardia.htm)

Figura 1.5. Taenia solium teniaza

Figura 1.6. Ixodes ricinus cpua

(http://en.wikipedia.org/wiki/File:Ixodes.ricinus.searching.jpg )

(http://www.human-healths.com/tag/fish-tapeworm)

Istoricul dezvoltrii microbiologiei ca tiin

Denumirea i clasificarea microorganismelor
n 1735, Karl von Linn (fig. 1.7.) pune bazele taxonomiei. Taxonomia reprezint tiina
care se ocup cu studiul clasificrii organismelor. Astfel, dezvolt sistemul nomenclaturii binare
ce const n denumirea fiecrui organism prin dou nume latinizate sau cu origine greceasc.
Primul nume reprezint genul i se scrie cu majuscul, al doilea specia sau epitetul i se scrie cu
liter mic.
Spre exemplu, Staphylococcus aureus este o bacterie foarte rspndit. Staphylococcus
este genul i aureus specia. n acest caz, genul face referire la forma i dispunerea celulelor,
adic staphylos nseamn grup, grmad, iar coccus sfer. Cu alte cuvinte, aceast bacterie este
sferic, iar celulele sunt dispuse grupat. Aureus face referire la huloul auriu care se formeaz n
jurul celulelor.
Uneori, organismul poate fi definit dup un cercettor, spre exemplu Escherichia coli sau
bacilul coli este denumit dup cercettorul Theodor Escherich. Specia coli face referire la locul
unde triete microorganismul, adic n colon.
Organismele au fost iniial clasificate n 2 regnuri: Plantae i Animalia, nainte de a fi
descoperite microorganismele. Cnd s-a demonstrat clar existena acestora, acest sistem n dou
regnuri nu a mai corespuns realitii.
Carl Woese dezvolt un nou sistem de clasificare ce grupeaz organismele n funcie de
caracteristicile moleculare ale acestora i deci de cele celulare. Totui, oamenii de tiin au czut
de acord asupra acestui sistem abia n 1978 i, doisprezece ani mai trziu, a fost publicat noul
sistem. Woese mparte organismele n 3 grupe mari, denumite domenii. Un domeniu este mai
cuprinztor dect regnul. Aceste domenii sunt:
Eubacteria: bacterii care prezint perete peptidoglicanic.
Archaea: procariote care nu prezint perete peptidoglicanic.
Eucarya: organisme care au materialul genetic delimitat de o membran nuclear i sunt
grupate n urmtoarele regnuri:
Protista (acesta nc se mai modific): alge, protozoare, mucegaiuri unicelulare;
Fungi: drojdii, mucegaiuri pluricelulare i ciuperci;
Plantae: muchi, ferigi, alge, gimnosperme, angiosperme;
Animalia: spongieri, celenterate, molute, viermi, artropode (insecte, crustacee,
pianjeni, etc.) i vertebrate (ciclostomi, peti, amfibieni, reptile, psri i
mamifere).
Studiul microorganismelor
n 1590, Zacharias Janssen pune la punct primul microscop n Middleburg, Olanda.
Microscopul lui Janssen consta din 3 tuburi (fig. 1.8). Unul dintre ele se gsea la exterior i le
coninea pe celelalte dou. La ambele capete ale tuburilor interioare se gseau lentile utilizate

pentru amplificarea imaginii. Modelul lui Janssen putea permite ajustarea imaginii prin rsucirea
tuburilor interne. Astfel, imaginile puteau fi vzute de 3 sau 9 ori mai mari dect erau n realitate.
n 1665, Robert Hooke, un cercettor englez, popularizeaz utilizarea microscopului
(fig. 1.10) prin observarea unei seciuni prin plut, n care se puteau distinge cmrue mici, pe
care le numete celule. Descoperirea lui duce la dezvoltarea teoriei celulare n secolul XIX de
ctre Mathias Schleiden, Theodor Schwann i Rudolf Virchow. Teoria celular susine c toate
organismele vii au corpul format din celule.
Experimentele lui Hooke l-au inspirat pe olandezul Antonie van Leeuwenhoek (16321723) s exploreze lumea microscopic (fig. 1.9). A mbuntit microscopul lui Hooke,
putndu-se ajusta mai eficient mrirea imaginilor. Lentilele confecionate de acesta aveau
capacitatea de a mri imaginea ntre 30 i 266 ori. Leeuwenhoek a putut observa
microorganisme, pe care le-a i descris cu deosebit precizie (fig. 1.11). Din desenele sale, reiese
foarte clar c a observat streptococi, bacili i, de asemenea, protozoare (Vorticella, Volvox,
Euglena). n 1681, public descrierea unor populaii mari din ceea ce se va numi mai trziu
Giardia lamblia. Indivizii au fost descrii din propriile sale materii fecale. Dei van
Leeuvenhoek a descris levuri, primele ilustraii ale fungilor microscopici au fost publicate de
Robert Hooke n 1667.
Deoarece, n aceast perioad nu s-au fcut conexiuni ntre microorganismele descrise i
fermentaie sau boli, observaiile fcute de aceti cercettori au avut un impact redus asupra
omenirii. Anterior, Cicero i Fracastorius au sugerat c apariia febrei ar putea fi determinat de
animale minuscule, denumite generic contagium vivum, dar de atunci au trecut cteva secole
pn cnd a fost acceptat rolul microorganismelor n producerea bolilor.
Teoria conform creia viaa apare de novo din obiecte neanimate a rezistat din Evul
Mediu pn la nceputul secolului al XX-lea. Van Helmont chiar propunea o reet de producere
a oarecilor. Ct de mult a fost nrdcinat aceast idee n mintea oamenilor poate fi evideniat
prin faptul c H. Charlton Bastian, unul dintre cei mai importani susintori ai teoriei, a murit n
1915, convins c avea dreptate.
n secolul al XVIII-lea, Lazzaro Spallanzani (Italia) dovedete c prin fierbere
prelungit, microorganismele dispar i nu mai reapar dac vasul este nchis ermetic. Acesta
descoper existena bacteriilor patogene i a celor anaerobe. Cu toate acestea, descoperirile sale
nu au dus la anularea teoriei generaiei spontane.
Pn n a doua jumtate a secolului al XIX-lea, s-au realizat doar cercetri privind forma
i structura microorganismelor. Louis Pasteur (1822-1895) (fig. 1.12) este considerat printele
microbiologiei. Studiile sale au demonstrat clar falsitatea teoriei generaiei spontane. Dar chiar
i cu astfel de argumente, aceast teorie a mai continuat s supravieuiasc. Cercetrile sale
asupra fermentaiei au artat natura biologic a procesului, specificitatea procesului (un
microorganism are rol ntr-un anumit tip de fermentaie) i natura biologic a bolilor buturilor
fermentate. A introdus procedeul de pasteurizare (nclzirea la 56 C previne multiplicarea
microorganismelor). De asemenea, introduce problema prevenirii infeciilor prin vaccinare.
Descoper vaccinul antiholeric aviar, vaccinul anticrbunos, antirabic. Alturi de Robert Koch
5

(fig. 1.14), este considerat fondatorul bacteriologiei medicale. Acesta din urm a devenit
cunoscut dupa izolarea bacilului antraxului, bacilului tuberculozei si a vibrionului holeric. n
1905 primete premiul Nobel pentru Medicin i Fiziologie datorit descoperirilor asupra
tuberculozei. Dup ce Casimir Davaine demonstreaz modul de transmitere direct a antraxului
ntre vite, Koch studiaz bacilul antraxului mai detaliat. Pune la punct o serie de metode de
purificare a bacteriei din snge i de cretere a unor culturi pure. Descoper cauza izbucnirii
focarelor de antrax ca fiind rezistena timp ndelungat, n sol, a endosporilor. Introduce
sterilizarea instrumentelor chirurgicale cu ajutorul temperaturilor ridicate. mbuntete
metodele de cultivare a bacteriilor i de colorare, putnd astfel descoperi bacteria responsabil de
producerea tuberculozei. La mijlocul secolului al XIX-lea 1 din 7 decese era datorat acestei boli.
Studiaz in Egipt holera si identific microorganismul responsabil de aceast boal, fr a putea
demonstra existena lui. Probabil la fel de importante ca i studiile asupra tuberculozei, sunt
postulatele sale care stabilesc criteriile dup care un organism poate fi considerat cauz a unei
boli. Acesta trebuie:
s fie identificat n toate cazurile examinate
s fie preparat si meninut intr-o cultur pur
s fie capabil s produc infecia, chiar i dup cultivri repetate
s fie izolat de la un animal inoculat i cultivat din nou.
Ilia Mecinikov, contemporan cu Pasteur i Koch realizeaz numeroase cercetri n
imunologie, demonstrnd nsemntatea reaciilor celulare n aprarea organismului.
Dimitrie I. Ivanovski (1869-1920) descoper virusul mozaicului tutunului (VMT) i
ncepe dezvoltarea unei noi tiine microbiologice - virusologia. Experienele lui Ivanovski sunt
confirmate de Martinus Beijerinck, considerat adevratul fondator al virusologiei.
VIRUSOLOGIA (lat. virus- otrav) este tiina care se ocup cu studiul virusurilor.
Dezvoltarea microbiologiei a fost posibil datorit progreselor realizate n mbuntirea
microscopului, dar i n cultivarea microorganismelor. Introducerea coloraiei a fost una dintre
etapele importante n progresul acestei tiine. Ferdinand Cohn, botanist german, a utilizat, n
cercetarea sa, colorani vegetali, de tipul carminului sau hematoxilinei. Deja la 1877, Robert
Koch utiliza albatrul de metil pentru evidenierea bacteriilor, iar prin fixarea colorantului cu
ajutorul cldurii, a putut colora bacilul tuberculozei. n 1884, patologul danez, Hans Christian
Gram, introduce faimoasa coloraie care i poart numele.
n ceea ce privete mediile de cultur, Pasteur a introdus primul mediu semi-sintetic care
coninea sruri de amoniu, pulbere de drojdie i zahr. Anterior acestuia, pentru creterea
bacteriilor a fost utilizat bulionul de carne, care se folosete i n prezent. Pentru creterea
fungilor a fost introdus mediul cartof-dextroz-agar. Ferdinand Cohn propune ideea de mediu de
baz, la care se pot aduga alte substane, n funcie de necesiti. Mediile iniiale erau lichide,
abia n 1882 a fost introdus gelatina i agarul, fapt ce a permis rspndirea utilizrii mediilor
solide.
Un element banal, dar care a revoluionat microbiologia, a fost reprezentat de plcile
Petri (fig. 1.13). Introducerea acestora de ctre Petri, un asistent al lui Koch, a uurat foarte mult
6

cultivarea microorganismelor. Studiul gangrenei gazoase, n primul rzboi mondial, a stimulat

producerea vaselor pentru creterea bacteriilor anaerobe.
Apariia, dup rzboi, a centrelor de producere industrial a mediilor de cultur a uurat
activitatea de cercetare a microbiologilor, nemaifiind nevoii s-i le produc singuri. La
prepararea mediilor s-a adugat i dezvoltarea metodelor de sterilizare (introducerea, n 1884, a
autoclavului de ctre Chamberland, coleg cu Pasteur), fapt ce permitea izolarea i cultivarea
bacteriilor, reducnd riscul contaminrii.
Microbiologia a evoluat rapid dup aceast perioad, studiul bacteriilor permind
descifrarea codului genetic, a mecanismelor sintezei proteice, a mecanismele reglrii celulare etc.
Studiile realizate pe Escherichia coli au permis dezvoltarea unor noi tiine, cum ar fi
biotehnolgiile microbiene, ingineria genetic.
Distrugerea microorganismelor
Eforturi imense au fost depuse spre sfritul secolului al XVIII-lea n dezvoltarea
tehnicilor antiseptice. Acestea au nceput cu un raport al medicului maghiar Ignaz Semmelweis
privind scderea considerabil a numrului de cazuri de febr postnatal, atunci cnd s-au utilizat
tehnici antiseptice. Dei a realizat o documentare serioas, studiul a fost prezentat ntr-o manier
pompoas i egocentric, ceea ce i-a garantat eecul.
Joseph Lister (1827-1912), chirurg englez, a dezvoltat una dintre cele mai importante
tehnici antiseptice (fig. 1.15). n timpul operaiei, pacientul era pulverizat cu acid carbolic, apoi
rana era bandajat cu pansamente mbibate n acelai acid. Numrul de infecii a sczut net
comparativ cu operaiile fr metode antiseptice. Acidul carbolic sau fenolul a fost unul dintre
primele antiseptice utilizate. Ca urmare a modului organizat i tiinific de redactare a lucrrii n
care prezenta rezultatele sale, tehnica introdus de el a avut un impact major n chirurgie.
Paul Ehrlich (1854-1915), chirurg german, a pus bazele utilizrii medicamentelor, n
vederea omorrii microorganismelor deja ptrunse n corp. Lucrnd pe Treponema pallidum, a
testat mai multe substane care ar fi putut distruge agentul cauzator al sifilisului. mpreun cu
Sahachiro Hata (fig. 1.16) a identificat arsfenamina, compusul 606, denumit apoi, Salvarsan, n
1908, primete premiul Nobel pentru sintetizarea acestui medicament.
Oamenii de tiin s-au folosit de nceputul pus de Ehrlich pentru a gsi medicamente ce
pot vindeca pacienii infectai. Una dintre cele mai mari realizri a venit n anul 1929, cnd
Alexander Fleming (fig. 1.17) descoper Penicillium notatum, organismul care sintetizeaz
penicilina, substan inhibitoare pentru foarte multe bacterii. Fleming cultiva Staphylococcus
aureus n laborator. Deasemenea, fcea experimente pe mucegaiul Penicillium notatum.
Accidental, culturile de Staphylococcus aureus au fost contaminate cu P. notatum, ducnd la
moartea bacteriilor. Penicilina a devenit unul dintre primele antibiotice, dar a putut fi utilizat
abia n 1940, deoarece nu se gsiser metode de a o face stabil.
n ceea ce privete microbiologia n Romnia, cei mai importani cercettori au fost:
Victor Babe (1854-1926) (fig. 1.18). Acesta descoper un sporozoar parazit al
cpuelor, numit Babesia, ce provoac o boal rar si grav, numita babesioza. Demonstreaz
7

pentru prima dat existena bacilului tuberculozei n urina bolnavilor infectai. De asemenea,
descoper incluziunile citoplasmatice prezente n celulele nervoase, n cazul turbrii, denumite
ulterior corpusculii Babe-Negri.
Babe a fost unul dintre iniiatorii utilizrii serului n tratamente i a fost primul care a
introdus vaccinarea antirabic n Romnia.
De asemenea, descoper incluziunile metacromatice (metacromatic- referitor la esuturi, a
cror elemente se coloreaz diferit, cu acelai colorant), prezente n citoplasma unor bacterii
Gram pozitive (bacilul difteric), numite corpusculii Babe-Ernst.
Ioan Cantacuzino (fig. 1.19) realizeaz studii n domeniul bacteriologiei, imunologiei,
epidemiologiei. A fcut cercetri la Paris, alturi de Ilia Mecinikov. Descoperirile sale au fost
importante n tratarea holerei, tifosului exantematic, tuberculozei i scarlatinei. Ca discipol al lui
Mecinikov, s-a preocupat de studiul aprrii organismului. n timpul primului rzboi mondial, a
fost eful echipei de combatere a epidemiei de tifos.
Ali microbiologi romni care au adus contribuii importante au fost: Constantin
Levaditi, Constantin Ionescu-Mihieti, Mihai Ciuc, Dumitru Combiescu, tefan S.
Nicolau (fondatorul colii romneti de virusologie).

Figura 1.8. Microscopul fabricat de Zacharias

Jenssen
(http://theojanssen.ca/documents/Janssen/Zacharias%20Janssen/Zacharias_Janssen.htm)

Figura 1.7. Karl von Linn

(http://www.pandasthumb.org/archives/2007/05/happy_linnaeus.html)

Figura 1.9. Microscopul fabricat de Antonie van

Leeuwenhoek
(http://www.instructables.com/id/Cardboard-vanLeeuwenhoek-microscope/step2/The-lens/)

Figura 1.10. Microscopul fabricat de Robert

Hooke
(http://www.ssplprints.com/image/91077/hookescompound-microscope-and-its-illuminating-system1665)

Figura 1.12. Microbiologul francez Louis Pasteur

Figura 1.11. Desenele realizate de

Leeuwenhoek dup observaiile la
microscop (http://www.vanleeuwenhoek.com/His-

Figura 1.13. Plac Petri pentru cultivarea

microorganismelor pe medii solide

Microscopic-World.htm)

(http://www.800ezmicrocart.com/mediapro25petridishes.aspx)

Figura 1.14. Microbiologul Robert Koch

Figura 1.15. Pulverizatorul cu fenol al lui Joseph

Lister

(http://www.myinterestingfacts.com/robert-koch-facts/)

(https://en.wikipedia.org/wiki/Louis_Pasteur)

(http://www.cosmeticsandskin.com/ded/vapourisers.php)

Figura 1.16. Paul Ehrlich i Sahachiro Hata

descoperitorii arsfenaminei (Salvarsan)
(http://fineartamerica.com/art/all/paul+ehrlich/canvas+prints)

Figura 1.18. Microbiologul romn Victor

Babe

Figura 1.17. Alexander Flemig descoperitorul

primului antibiotic - penicilina
(http://www.fameimages.com/alexander-fleming)

Figura 1.19. Cercettorul romn Ioan Cantacuzino

(https://ro.wikipedia.org/wiki/Ion_Cantacuzino)

(https://en.wikipedia.org/wiki/Victor_Babe%C8%99)

10

Cursul 2 Noiuni de epidemiologie

n cursul acesta vom urmri mai multe aspecte, i anume:
Interaciunea dintre gazd i patogen sau epidemiologia n sensul strict;
Recoltarea probelor biologice i aspecte generale privind diagnosticul de laborator;
Principii de sterilizare i dezinfecie.

1. Interciunea patogen-gazd
Epidemiologia se ocup cu studiul distribuiei i a factorilor determinani ai bolilor ntr-o
populaie. Cuvntul provine din grecescul epi deasupra, pe, i demos populaie.
Epidemiologistul este cercettorul specializat n identificarea i prevenirea bolilor ntr-o
populaie dat. Acesta are n vedere etiologia (cauza) bolii i ncearc s previn i s controleze
rspndirea bolilor.
Epidemiologia este considerat ramur a microbiologiei, deoarece microorganismele sunt
cele care provoac majoritatea bolilor. Poate fi considerat i ramur a ecologiei, datorit
relaiilor care se stabilesc ntre patogeni, gazd i mediu.
Noiunile cele mai importante legate de epidemiologia infeciilor sunt:
morbiditatea: numrul de mbolnviri la un numr dat de locuitori (10.000, 100.000);
incidena: numrul de mbolnviri noi ntr-o perioad dat de timp (anual, semestrial,
sezonier, etc.);
prevalena: numr de infecii la un moment dat ntr-o colectivitate;
mortalitate: numrul deceselor printr-o anumit infecie raportat la un anumit numr de
locuitori;
letalitate: numrul de decese raportat la numrul de persoane infectate;
index de manifestare: numrul de boli aparente clinic raportat la numrul total de
persoane infectate.
1.1.Clasificarea infeciilor
A. n funcie de spaiu i timp, infeciile apar:
sporadic: cazuri izolate necorelate n timp i spaiu; acestea nu reprezint un pericol
pentru populaie.
endemic: cazuri regulate ca frecven, limitate n spaiu i nelimitate n timp. Numrul de
persoane care contracteaz boala i severitatea ei sunt att de reduse , nct nu reprezint
o problem de sntate public.
epidemic: cazuri numeroase ce apar ntr-un timp scurt i ntr-o zon geografic
limitat (holer, febr tifoid, cium); aceasta duce la creterea mortalitii i a
morbiditii. Reprezint o problem de sntate public.
pandemic: cazuri foarte numeroase ntr-o perioad de timp fr limite geografice
(pandemiile de grip, SIDA).
11

Epidemiile pot aprea, n funcie de surs, n 2 categorii:

epidemii ce au o surs comun: un numr mare de persoane se mbolnvete brusc de la
aceeai surs. Aceste epidemii sunt atribuite unei surse de ap contaminate sau unor alimente
impropriu preparate. Spre exemplu, holera sau toxiinfeciile alimentare aprute prin
consumarea unor alimente de la o cantin. Numrul infeciilor scade brusc, dac sursa este
eliminat.
epidemii propagate: apar prin transmiterea de la o persoan la alta. Agentul cauzator al bolii
trece de la o persoan infectat la una sntoas. Numrul de cazuri noi apare mai lent, iar
limitarea mbolnvirilor este mai greu de realizat.
B. Un alt criteriu de clasificare al infeciilor l reprezint simptomatologia acestora sau
organul afectat (Tabelul 1).
Tabelul 1. Clasificarea clinic a infeciilor
Clasificarea
Exemple de infecii
Secretorii
Boli diareice
Invazive
Ale tractului respirator superior
Boli respiratorii
Ale tractului respirator inferior
Meningite
Infecii ale SNC
Encefalite
Abcese
Endocardite
Infecii cardiovasculare
Miocardite
Vasculite
Diseminat
Septicemie
C. Agentul cauzator al infeciei poate fi utilizat ca un al treilea criteriu de clasificare. n
tabelul 2 este rezumat aceast clasificare.
Tabelul 2. Clasificarea microbiologic a bolilor infecioase
Clasificarea
Organism
Gram-pozitiv
Bacterian
Gram-negativ
Ribovirus
Viral
Dezoxiribovirus
Cu anvelop sau fr
Diseminat
Fungic
Localizat
Protozoar
Parazitic
Vierme
cestod
nemaod
protein
Prionic

12

1.2.Rezervorul de germeni
Rezervorul reprezint locul n care microorganismele pot s-i menin capacitatea
infecioas. Acestea includ organismul uman, animal, anumite medii nevii i obiecte (Tabelul 3).
Rezervorul uman reprezint principalul rezervor viu de germeni. Importani sunt
purttorii sntoi care reprezint surse oculte de infecie pentru persoanele din jurul lor.
Purttorii sntoi sunt acei indivizi la care germenii se multiplic la poarta de intrare fr
s produc manifestri clinice i nici imunologice. Nu trebuie confundat starea de
purttor sntos cu cea de purttor aparent sntos la care semnele clinice sunt minime
sau absente, dar sunt prezente semnele biologie i imunologice (purttori de virus
hepatitic B). Rezervorul uman joac un rol important n rspndirea multor infecii:
streptococice, febra tifoid, difteria, gonoreea, sifilisul, poliomielita, hepatita, SIDA etc.
Rezervorul animal. Att animalele slbatice, ct i cele domestice pot constitui sursa
multor infecii. Bolile comune omului i animalelor se numesc antropozoonoze.
Transmiterea poate avea loc prin contactul direct cu animalul infectat, prin contactul
cu unele produse animale (piei, blnuri - crbune pumonar), consumul de carne
infectat (crbune intestinal), muctura animalelor (rabie), neptura unor insecte
(malaria) etc.
Rezervoarele neanimate. Apa i solul. Solul este sursa infeciilor produse de unii fungii
patogeni, precum i de sporii bacteriilor strict anaerobe (spori de bacil tetanic i
botulinic). Apa se contamineaz de la materiile fecale ale omului i animalelor.
Tabelul 3. Clasificarea organismelor infecioase, pe baza rezervorului natural
Rezervorul
Microorganisme tipice
Treponema pallidum, Neisseria gonorrhoeae, HIV, virusul
Uman
hepatitei B i C, Shigella, Salmonella typhi
Rabia, Yersinia pestis, Leptospira, Brucella, Salmonella
Animal
nontifoid
Histoplasma capsulatum, Clostridium tetani, Clostridium
Solul
botulinum
Legionella, Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium marinum,
Apa
Vibrio cholerae
1.3.Transmiterea agenilor infecioi
Agenii infecioi se transmit, n general, prin 3 modaliti:
Transmiterea prin contact a agentului infecios este posibil de la omul bolnav la cel
sntos prin:
contact direct prin atingere (rujeol, varicel, variol etc.), srut (hepatita
B), contact sexual (sifilis, gonoree, SIDA etc.),
contact indirect prin obiecte care au venit n contact cu bolnavul, ca, de
pild, batiste, lenjerie, vesel, termometre, siringi infectate etc.,
picturile lui Pflgge pe care bolnavul le rspndete n timpul strnutului
i a tusei (virusurile gripale, paragripale etc.).
13

Transmiterea prin ap sau alimente contaminate: hidric (salmonelle, shigelle),

alimentar (botulism, toxiinfecii alimentare).
Transmiterea prin vectori. Cei mai importani vectori sunt artropodele. Unele dintre ele,
ca de pild mutele, sunt vectori mecanici care transport agenii infecioi dintr-un loc n
altul. Vectorii biologici sunt cei care particip activ la transmiterea agentului infecios.
Astfel, unele artropode inger agentul infecios n timp ce sug sngele persoanei infectate
(de pild, narul anofel, care transmite malaria), gzduind o parte a ciclului evolutiv al
acestuia i transmindu-l prin neptur altei persoane.
Transmiterea perinatal. Are loc de la mam la ft, n timpul sarcinii sau la natere.
1.4.Etapele infectrii gazdei de ctre agentul patogen
n orice infecie au loc urmtoarele evenimente:
contaminarea (ntlnirea cu agentul infecios),
ptrunderea i multiplicarea n organismul gazd prin eludarea rezistenei
antiinfecioase,
producerea leziunilor morfologice i funcionale, datorate n parte aciunii directe a
agentului infecios i cel mai frecvent, reaciilor de aprare ale organismului,
deznodmntul infeciei, care poate fi vindecarea cu sau fr sechele, exitusul sau
coexistena pe timp ndelungat a celor doi parteneri ai infeciei: agentul infecios i
organismul.
n majoritatea infeciilor, evenimentele descrise mai sus se petrec consecutiv, ntr-o
perioad limitat de timp. n infeciile produse de germenii condiionat i accidental patogeni,
contaminarea, ptrunderea i chiar i colonizarea (multiplicarea la locul de intrare) se petrec cu
mult timp nainte ca infecia s se declaneze. Durata intervalului pn la producerea acesteia
depinde n mare msur de statusul imunitar ale gazdei, care poate permite sau nu producerea
unei infecii cu aceti germeni. Aceste etape sunt nsoite de mecanismele de aprare
antiinfecioas ale gazdei; ceea ce deosebete agenii infecioi este maniera n care sunt capabili
s eludeze aceste mecanisme.
Contaminarea
Prima ntlnire a organismului cu microbii se produce n momentul naterii; ftul
viaa intrauterin este steril din punct de vedere microbiologic este aprat de membranele
fetale, iar placenta permite ptrunderea unui numr foarte redus de microorgansime din circulaia
mamei: virusul rubeolic, rujeolic, HIV, Treponema pallidum, Toxoplasma gondii.
n timpul naterii, nou-nscutul vine n contact cu microorganismele prezente n canalul
vaginal i pe pielea mamei. El nu este expus acestei contaminri total neprotejat, ci motenete
de la mam, pe cale sanguin, un repertoriu bogat de anticorpi, la care se adaug cei din colostrul
i laptele matern. Acetia i asigur o protecie relativ fa de infecii, pn cnd va ncepe s-i
dezvolte propriile mecansime de aprare antiinfecioas.

14

Dintre microorgansimele cu care organismul vine n contact pe parcursul existenei

sale, o parte vor disprea de pe suprafaa organismului, o parte vor coloniza pielea i mucoasele
i doar o mic parte vor produce infecii propriu-zise.
Contaminarea poate fi endo i exogen.
Infeciile exogene sunt cele care rezult n urma contactului cu agentul infecios din
mediul nconjurtor. Agenii infecioi pot contamina organismul n cele mai variate mprejurri:
pe cale alimentar,
respiratorie,
contact sexual,
manevre medicale,
promiscuitatea cu animalele,
mucturile de insecte etc.
Modul de contaminare sugereaz aproape ntotdeauna i posibilitile de prevenire
nespecifice ale infeciei. n infeciile exogene produse de germenii nalt patogeni, timpul care
trece de la contaminare pn la apariia simptomatologiei clinice este n general bine definit
(perioada de incubaie).
Infeciile endogene rezult n urma contaminrii cu germeni de pe suprafaa mucoaselor
i a pielii. Aceste microorgansime produc infecii, dac traverseaz barierele anatomice i
ptrund n esuturi (E.coli). Pe de alt parte, ageni infecioi din flora normal a organismului,
care nu produc infecii la individul sntos, le vor produce la indivizi cu deficiene imune (supui
unui tratament imunosupresor, cu deficiene imune genetice, cu deficiene imune dobndite). n
ambele situaii, contaminarea are loc cu mult nainte de producerea infeciei propriu-zise.
Ptrunderea
n zone anatomice care sunt n relaie direct cu exteriorul (tubul digestiv, cile
respiratorii, cile urinare, cile genitale, conjunctiva, etc.) - fr traversarea barierelor
epiteliale. Ex. de microrgansime: V. cholerae (holera), C.diphteriae, E.coli (infeciile
urinare) etc.
n esuturile profunde - cu trecerea microorganismelor prin barierele anatomice
reprezentate de piele i mucoase. Unele microorganisme pot trece direct prin pielea
intact, cum sunt leptospirele i unii viermi, spre exemplu: filariile, iar altele pot traversa
epiteliul mucoasei respiratorii, digestive, a tractului genitourinar i conjunctiva.
direct n snge sau n esuturile profunde, prin
leziuni traumatice,
muctura unor animale (virusul rabic, Pasteurella multocida),
nepturile unor insecte (Plasmodium falciarum)
diverse acte medicale efectuate fr respectarea normelor de asepsie (HIV, virusul
hepatitei B, etc.).
Multiplicarea
Numrul de microorgansime care ptrund n organism (mrimea inoculului) este n mod
obinuit prea mic pentru a produce simptome. Agenii infecioi trebuie s nving mecanismele
15

de aprare antiinfecioas ale gazdei i s se nmuleasc la un nivel corespunztor, pentru ca

prezena lor n organism s se fac simit. n general, microorganismele se multiplic mai ncet
in vivo dect in vitro, tocmai din cauza reaciilor de aprare pe care le declaneaz. Intervalul de la ptrunderea agentului infecios pn la apariia simptomatologiei clinice se numete
perioad de incubaie.
n funcie de durata acesteia, infeciile pot fi:
cu perioad de incubaie scurt, de 1-7 zile (toxinfecii alimentare, meningite, difterie,
gonoree etc.);
cu incubaie medie, de 8-21 de zile (febra tifoid, tetanus etc.);
cu incubaie lung, de zeci de zile (hepatita B, 60-180 de zile);
cu incubaie foarte lung, de ani de zile (tuberculoz, SIDA, lepr etc.).
Bolile infecioase ciclice (cu evoluie regulat), ca de pild: rujeola, rubeola, varicela,
variola etc., au o perioad fix de incubaie.
Un aspect foarte important, determinant n evoluia infeciei, este sediul multiplicrii
microorgansimelor: extra- sau intracelular. Microorgansimele cu habitat extraclelular sunt
supuse aciunii complementului, lizozimului, anticorpilor, fagocitozei etc., pe cnd cele cu
habitat intracelular sunt protejate de aceti factori. Eliminarea lor din organism se face prin
distrugerea celulelor n care se afl, ceea ce atrage dup sine, producerea unor leziuni tisulare.
Localizarea infeciei
Un proces infecios poate fi localizat atunci cnd germenii se multiplic ntr-o zon
relativ limitat a organismului (abces sau furuncul).
Infecia se poate propaga de la poarta de intrare prin continguitate din aproape n aproape
i prin diseminare la distan pe cale sanguin sau/i limfatic. n cel din urm caz, rezult
infecia sistemic sau generalizat. Dintr-un proces infecios localizat, germenii pot fi vehiculai
de snge sau limf la diferite organe, iniiind o localizare secundar.
Un aspect particular al diseminrii microbilor n organism este transportul mediat
celular i translocarea. Transportul mediat celular este modalitatea pe care o folosesc
microorganismele care rezist digestiei intracelulare a fagocitelor (de exemplu, chlamydiile,
gonococii etc.). Ele se vor nmuli n aceste celule i vor fi vehiculate la distan. Translocarea
este proprietatea unor germeni de a traversa un epiteliu pentru a ajunge n circulaie (de exemplu,
bacilul tific este translocat de ctre celulele epiteliale ale mucoasei digestive i ajunge n
circulaie).
Prezena bacteriilor n snge se numete bacteriemie, iar multiplicarea lor n snge
septicemie.
Toxemia este prezena n snge a unei toxine secretate sau eliberate de microb, fie n
afara organismului (toxina botulinic prezent n conserve), fie n organism (endotoxina
bacteriilor gram-negative cnd se produce o liz masiv a acestora n snge).

16

Producerea leziunilor morfologice i funcionale

Alterri organice i funcionale datorate agenilor infecioi
Alterri mecanice. Obstruciile mecanice se datoreaz reaciei inflamatorii a gazdei ca
rspuns la prezena microorganismului. Orice organ tubular poate fi obstruat n anumite
infecii, uneori cu urmri nefaste:
- obstrucia cilor respiratorii - n difterie.
- ptrunderea germenilor dintr-o infecie a urechii medii la meninge poate duce la
dilatarea ventriculilor cerebrali prin obstruarea circulaiei LCR.
- n infeciile parazitare. Dac agenii infecioi au dimensiuni mari i sunt n numr
suficient, ei pot obstruciona unele ci anatomice vitale. (Ascaris lumbricoides
poate obstrua un canalicul biliar, iar dac se gsete n numr mare produce un
ghem care obstrueaz tubul digestiv)
Distrugere celular. Bacteriile distrug celulele prin toxinele pe care le secret. Acestea
acioneaz, fie n apropierea porii de intrare (Shigella), fie la distan de locul unde sunt
produse (Corynebacterium diphteriae). La aciunea toxinelor se mai adaug cea a enzimelor
hemolitice i leucolitice. Virusurile cu efect citopatogen produc liza celulelor n care se
nmulesc.
Alterri farmacodinamice ale metabolismului. Toxina tetanic modific metabolismul
celulelor motoare ducnd la paralizii spastice, iar cea botulinic interfereaz eliberarea de
acetilcolin la nivelul sinapselor colinergice, rezultatul fiind paralizia flasc. n ambele
cazuri, moartea se produce prin paralizia muchilor respiratori. Toxina holeric crete
nivelul de AMP-ciclic n celulele epiteliului intestinal, ceea ce are ca rezultat, eliminarea
unor cantiti mari de ap n intestin cu producerea consecutiv a diareei. Moartea survine
prin deshidratare.
Alterri datorate reaciilor de aprare antiinfecioas
Puroiul: un amestec de leucocite vii i distruse, bacterii i un exudat. El rezult n urma
migrrii rapide a leucocitelor n focarul infecios, stimulate de substane chemotactice,
produse chiar de bacterii, dar i de esuturi sau leucocite. Dup distrugerea lor, leucocitele
elibereaz n jur hidrolaze puternice din granulaiile lizozomale. Aceste enzime lezeaz
esuturile nvecinate, extinznd zona afectat. Abcesul. Cnd puroiul se constituie ntr-o
colecie, vorbim de un abces. De exemplu, furunculul se produce prin obstrucia unei glande
sebacee, ceea ce ofer stafilococului auriu, prezent n mod normal pe piele, oportunitatea de a
se nmuli eficient i de a produce infecia. Localizarea unui abces este esenial pentru
prognostic. Astfel, furunculele cutanate sunt dureroase, dar prognosticul nu este grav n
general, pe cnd localizarea unui abces la nivel cerebral este fatal. Pacienii cu deficiene
genetice ale funciilor leucocitare sufer de infecii purulente recurente, chiar i n
condiiile unui tratament corect cu antibiotice.
Reacia de faz acut. Prezena bacteriilor n esuturi elicit o reacie generalizat,
cunoscut sub denumirea de rspuns de faz acut i care este un mecanism al rezistenei
antiinfeciose naturale. Dac intensitatea acestei reacii depsete nivelul fiziologic, ea
17

determin tulburri foarte grave. Bacteriile induc secreia IL-1, care acioneaz asupra
centrului termoreglrii, rezultatul fiind febra. IL-1 stimuleaz, de asemenea, sinteza unor
substane numite prostaglandine, care i ele acioneaz asupra centrului termoreglrii i sunt
responsabile de starea general de disconfort pe care o resimim n timpul unei infecii.
Endotoxinele bacteriilor gram-negative pot induce i ele rspunsul de faz acut. n doze
mici, endotoxinele produc febr i mobilizeaz unele mecansime de aprare
antiinfecioas. n cantiti mari, ele induc ocul endotoxic i coagularea intravascular
diseminat.
Rspunsul umoral (formarea de anticorpi specifici). n circulaie i n esuturi, anticorpii se
combin cu agenii infecioi sau cu unele produse ale acestora (toxine, enzime etc.). Aceste
complexe antigen-anticorp vor induce, n mod normal, un rspuns inflamator prin
intermediul sistemului complement, n scopul eliminrii agenilor nfectioi sau a
neutralizrii produilor lor toxici. Acest rspuns nu are ntotdeauna un efect protector. La
persoane cu predispoziie alergic este posibil sensibilizarea organismului fa de
anumite antigene bacteriene, ceea ce duce la instalarea unor stri de hipersensibilitate
mediate umoral (de tip I, II sau III). Astfel, de pild, sunt foarte bine cunoscute mecanismele
umorale prin care se produc complicaiile alergice poststreptococice cum sunt cardita
reumatismal (HS de tip II) i glomerulonefrita acut (HS de tip III).
Rspunsul celular, mediat de limfocitele T citotoxice i macrofage, poate depi n
intensitate limitele fiziologice, fiind asociat cu inflamaia cronic. Acest aspect se ntlnete
mai frecvent n infeciile cu germeni cu habitat predominant intracelular (tuberculoz, lepr)
i cu virusuri.
1.5.Etapele evoluiei unei boli infecioase
perioada de incubaie: intervalul de timp care trece de la ptrunderea microbului n
organism pn la apariia primelor simptome.
debutul bolii reprezint apariia primelor simptome i poate fi brusc sau insidios.
perioada de stare. n aceast perioad se manifest semnele clinice i paraclinice
caracteristice bolii.
perioada de convalescen n care se refac leziuni i se restabilesc funciile perturbate.
Aceast perioada este important deoarece acum pot aprea recderi, complicaii sau
cronicizarea infeciei. n cazul unei evoluii favorabile se produce vindecarea cu sau fr
sechele. n cazuri nefavorabile, boala evolueaz spre exitus sau spre cronicizare.
1.6.Manifestrile clinice ale infeciei
Manifestrile clinice ale infeciei sunt multiple, fiind influenate de o serie de variabile:
factorii genetici ai gazdei i ai agenilor infecioi,
doza infectant,
calea de ptrundere,
factorii de patogenitate ai microbilor,
18

rezistena antiinfecioas a gazdei,

considerente anatomice,
factorii de mediu i de ali factori pn n prezent necunoscui.
Unele infecii au, n general, acelai tablou clinic la majoritatea indivizilor (holer,
cium, dizenterie, rabie etc.).
Alteori, evoluia este diferit, n funcie de rezistena individului i patogenitatea
agentului infecios. Astfel, la unii indivizi, infecia poate fi urmat de starea de boal, deci
evolueaz cu manifestri clinice; la cei la care organismul este capabil s-i mobilizeze rapid i
eficient mijloacele de aprare, infecia va rmne inaparent, determinnd doar modificri
imunologice decelabile prin teste de laborator. ntre aceste dou extreme exist diferite nuane,
care pot fi reprezentate sub forma unui iceberg.
Dup aspectul evolutiv, infeciile sunt :
Infeciile acute: evolueaz ntr-un timp limitat, rezultatul fiind n general vindecarea.
Exemple: bolile infecto-contagioase ale copilriei (rujeol, varicel, rubeol, oreion etc.).
n infeciile cronice: agentul patogen acioneaz timp ndelungat n organism. Ele
rezult, fie din cronicizarea unei infecii acute (hepatita B), fie n urma infeciei cu
germeni care dau boli cu evoluie cronic (tuberculoz, sifilis, lepr etc.).
Infeciile latente: agentul infecios se gsete n organism pentru o perioad ndelungat,
se nmuleste intermitent i produce recidive (infecia herpetic).
Infeciile lente: afecteaz ncet i progresiv sistemul nervos central. Unele sunt de natur
viral, ca, de exemplu, panencefalita subacut sclerozant, produs de virusul rujeolic.

2. Recoltarea probelor biologice i aspecte generale privind

diagnosticul de laborator
2.1.Recoltarea probelor biologice
Recoltarea corect a probelor este cel mai important pas n identificarea agentului
responsabil de o boal infecioas. Colectarea inadecvat poate determina eecul izolrii
microorganismului sau imposibilitatea de interpretare a rezultatelor, ca urmare a contaminrii
probelor.
Concepte de baz privind recoltarea microbiologic:
a. Colectarea probei se face exact din locul infeciei, evitndu-se contaminarea de la
esuturile sau secreiile din jur.
b. Colectarea probei trebuie realizat la timpul potrivit din zi (spre exemplu, colectarea
sputei dimineaa, nainte de mas).
c. Colectarea unei cantiti suficiente de material. Utilizarea de recipiente adecvate: sterile,
etane. Utilizarea de medii de transport adecvate. A se verifica data de expirare nainte de
utilizarea lor.

19

d. Ori de cte ori este posibil, colectarea probelor se face anterior administrrii unui
tratament antimicrobial.
e. Notarea corect a probelor i completarea fielor necesare analizei. Este necesar
specificarea sursei de colectare. Spre exemplu: leziune, membrul inferior, stng.
f. Reducerea la minim a timpului de transport. Meninerea unui mediu adecvat ntre
colectare i transport.
g. Decontaminarea pielii, dac este posibil. Utilizarea de alcool 70-95% i 2% clorhexidin
sau 1-2% tinctur de iod. Este nevoie de meninerea substanei dezinfectante timp de 2
minute.
h. Petru realizarea mai multor teste este nevoie de asigurarea mediilor potrivite pentru
transport, n funcie de microorganismele suspectate (virus, bacterie aerob sau anaerob
etc).
2.2.Aspecte generale privind diagnosticul de laborator
Prin diagnosticul medical microbiologic se identific etiologia infeciilor. Procedurile de
laborator utilizate n cazul infeciilor includ:
1. Identificarea morfologic a agentului infecios pe frotiuri (microscop optic i electronic).
2. Izolarea prin cultivare i identificarea agentului patogen.
3. Detectarea antigenelor prin metode imunoenzimatice sau prin imunofluorescente (vezi
cursul 3).
4. Identificarea ADN-ului prin hibridizri ADN-ADN sau ADN-ARN.
5. Identificarea ADN-ului prin PCR i electroforez.
6. Identificarea anticorpilor sau a celulelor imunitare mpotriva agentului infecios.
n domeniul bolilor infecioase, rezultatele testelor de laborator depind foarte mult de
calitatea specimenelor, de atenia recoltrii, de profesionalismul tehnic i de experiena
personalului de laborator. Dei medicul trebuie s aib competenele necesare pentru a realiza
cteva teste microbiologice simple, tehnicile de laborator mai complexe sunt lsate pe seama
microbiologilor i a tehnicienilor. Medicul specializat pe boli infecto-contagioase trebuie s tie
cnd se recolteaz probele, ce investigaii de laborator s cear i cum s interpreteze rezultatele.
Comunicarea dintre medic i microbiolog. Diagnosticul microbiologic vizeaz
caracterizarea a mii de ageni asociai cu bolile infecioase. Tehnicile utilizate pentru
caracterizarea diverilor ageni infecioi variaz mult, n funcie de manifestrile clinice i de
tipul de agent presupus (virus, bacterie, fung, ali parazii). Deoarece printr-o singur analiz nu
este posibil izolarea i caracterizarea tuturor potenialilor patogeni, informaiile clinice sunt
mult mai importante dect n cazul analizelor hematologice sau chimice. Clinicianul trebuie s
pun un diagnostic prezumtiv, nu s atepte mai nti rezultatele de laborator. Atunci cnd cere
analizele de laborator, trebuie s informeze microbiologul despre acest diagnostic iniial.
Etichetarea corect a specimenelor trimise spre analiz trebuie s includ datele de identificare
ale pacientului, date clinice, testele cerute i datele de contact corecte ale medicului clinician.

20

Multe dintre microorganismele patogene se nmulesc lent, iar izolarea i identificarea lor
poate dura zile sau chiar sptmni. Tratamentul optim nu poate fi aplicat n lipsa diagnosticului
microbiologic. Dup recoltarea i trimiterea probelor spre laborator, medicul recomand
pacientului nceperea tratamentului pentru presupusul diagnostic. Recomand, n general, un
medicament cu spectru mai larg. n funcie de rezultatele de laborator, tratamentul poate fi
meninut sau modificat. Clinicianul este inut la curent cu evoluia testelor de laborator pentru ca,
eventual, s modifice tratamentul mai repede.
n laborator, se examineaz la microscop material proaspt necolorat sau material fixat i
colorat i se cultiv microorganismele n condiii optime, n funcie de informaiile clinice
primite. Microorganismele izolate pot fi testate antimicrobial pentru a se decide medicaia
optim. Microorganismele izolate din zone ale corpului, n mod normal sterile, au importan
clinic. Orice microorganism recoltat din snge, LCR, lichid sinovial sau pleural este important
n diagnosticare. n mod contrar, multe zone ale corpului au o microbiot normal, care poate fi
modificat endogen sau exogen. Identificarea de microorganisme potenial patogene, din tractul
respirator, gastro-intestinal, urinar, din rni sau din piele, trebuie privit n contextul microbiotei.
Interpretarea rezultatelor are n vedere corelarea datelor microbiologice cu informaiile clinice.
Aspectele mai detaliate privind diagnosticul de laborator sunt tratate n capitolele
urmtoare.

3. Principii de sterilizare i dezinfecie

Sterilizarea este definit ca fiind omorrea sau ndeprtarea tuturor microorganismelor i
virusurilor de pe un obiect sau produs.
Dezinfecia reprezint ndeprtarea patogenilor de pe obiecte sau de pe tegument.
Termenul asepsie acoper toate msurile luate n vederea prevenirii contaminrii
obiectelor sau leziunilor.
n dezinfecie i sterilizare se utilizeaz att ageni chimici, ct i fizici. O msur a
eficacitii acestui proces o reprezint valoarea D, care exprim timpul necesar reducerii cu pn
la 90% a numrului de microorganisme.
Agenii pentru sterilizare sunt:
aerul cald uscat (180C, 30 minute; 160C, 120 minute);
aerul cald umed (121C, 15 minute, o presiune atmosferic; 134C, 3 minute, 2
atmosfere);
razele sunt utilizate n radiosterilizare.
Dezinfecia este realizat, de obicei, cu ajutorul agenilor chimici, dintre care cei mai
importani sunt: aldehidele, alcoolii, fenolii, halogenii i surfactanii (detergenii).
Termeni i noiuni generale
Sterilizarea reprezint omorrea tuturor microorganismelor i virusurilor sau completa lor
eliminare de pe un material, cu o ct mai mare precizie. Un obiect, sterilizat i mpachetat astfel
21

nct s nu fie contaminat, este numit steril. Metodele standard de sterilizare cu aplicaii medicale
sunt capabile s provoace distrugeri iremediabile microorganismelor patogene, precum bacterii,
protozoare, fungi, viermi (inclusiv ou). Proceduri speciale sunt necesare pentru inactivarea
prionilor (ex. autoclavarea: 121C timp de 4 ore i 30 minute). Descoperirile din ultimii ani
indic faptul c arheobacteriile hipertermofile rezist la temperaturi de peste 100C i la
autoclavare la 121C, timp de o or. Aceste forme de via extreme, alturi de prioni, nu pot fi
distruse prin metode standard de sterilizare.
Dezinfecia este un tratament orientat ctre prevenirea transmiterii anumitor
microorganisme. Scopul procedurilor de dezinfecie este acela de a face un obiect incapabil s
rspndeasc microorganisme.
Conservarea este un termen general ce face referire la msurile adoptate n vederea
prevenirii sporulrii microorganismelor pe diferite produse (farmaceutice, medicamente).
Decontaminarea reprezint ndeprtarea sau reducerea numrului de microorganisme de
pe un obiect.
Scopul msurilor i tehnicilor aseptice este acela de a preveni contaminarea microbian a
obiectelor i leziunilor. Msurile aseptice implic utilizarea unor ageni chimici care s acioneze
contra patogenilor din sau de pe esuturi.
Mecanisme de aciune
Cnd microorganismele sunt distruse prin cldur, proteinele lor (enzimele) sunt
denaturate ireversibil. Radiaiile ionizante duc la formarea unor grupe reactive ce distrug ADN ul i proteinele. Expunerea la radiaii UV modific structural ADN-ul (dimeri timinici),
mpiedicnd replicarea. Aceste distrugeri pot fi reparate pn ntr-un anumit punct prin
expunerea la lumin (fotoreactivare). Majoritatea agenilor chimici (alcooli, fenoli, aldehide,
metale grele, oxidani) denatureaz proteinele ireversibil. Surfactanii (amfoterici i cationii)

atac membrana citoplasmatic. Derivaii acridinici

se leag de ADN, prevenind
replicarea i transcripia.
A. Metode fizice de sterilizare i dezinfecie
I.
Cldura
Aplicarea cldurii este o metod simpl, ieftin i eficient de distrugere a patogenilor.
Metodele ce utilizeaz cldura variaz, n funcie de necesiti.
Pasteurizarea (fig. 2.1). Aceasta este un tratament antimicrobian utilizat pentru alimentele
n form lichid:
La temperaturi joase: 61,5 C, 30 minute; 71 C, 15 secunde;
La temperaturi ridicate: expunerea cteva secunde la 80-85 C;
Ultrapasteurizarea: nclzirea la 150 C timp de 2 secunde jumtate ntr-un container
presurizat, cu aburi.
22

Dezinfecia. Aplicarea unor temperaturi mai sczute dect cele necesare sterilizrii. De
reinut! Fierberea instrumentelor, acelor, seringilor, etc. nu constituie sterilizare. Muli
spori bacterieni nu sunt distrui prin aceast metod.
Sterilizarea prin cldur uscat (fig. 2.2). Valorile recomandate pentru sterlizarea la cald
sunt: 180C timp de 30 minute, 160C timp de 120 minute, n timp ce, obiectele pentru
sterilizat trebuie s ating aceste temperaturi pe toat durata procesului.
Sterilizarea prin cldur umed (Fig. 2.3). Autoclavele presurizate i saturate n aburi
sunt utilizate pentru urmtoarele valori:
121 C, 15 minute, o atmosfer;
134 C, 3 minute, 2 atmosfere.
II.
Radiaiile
Radiaiile nonionizante. Razele UV (280200 nm) reprezint un tip de raze nonionizante
care sunt rapid absorbite de ctre o varietate de materiale. Razele UV sunt astfel folosite
doar pentru a reduce patogenii aflai n aer (teatre chirurgicale, diferite echipamente) i
pentru dezinfecia suprafeelor netede (fig. 2.4).
Radiaiile ionizante. Sunt utilizate dou tipuri:
Radiaiile gamma constau n unde electromagnetice produse prin dezintegrare
nuclear (radioizotopul Co 60).
Radiaiile corpusculare constau n electroni produi de generatoare i accelerai
pentru a le crete nivelul energetic.
Echipamentele de radiosterilizare sunt scumpe. La scar larg, astfel de echipamente sunt
utilizate doar pentru sterilizarea bandajelor, materialelor pentru suturi, echipamente medicale din
plastic i farmaceuticele sensibile la cldur. Doza necesar depinde de nivelul de contaminare i
de ct de sensibile sunt microorganismele la radiaii.
III.
Filtrarea
Lichidele i gazele pot fi sterilizate i prin filtrare (fig. 2.5). Majoritatea filtrelor
disponibile rein doar bacteriile i fungii, dar cu ajutorul filtrelor ultrafine, pot fi reinute virusuri
i chiar molecule mari. Datorit porilor de dimensiuni mici, filtrele membranare permit reinerea
diferitelor particule. Cel mai bine cunoscut tip de filtru este acela din coloizi organici. Aceste
materiale pot fi procesate, astfel nct se obin straturi filtratoare foarte subiri, cu dimensiunile
porilor calibrate. n filtrele obinuite ca grosime, lichidele sunt trecute printr-un material fibros
(azbest). Eficacitatea acestui tip de filtru se bazeaz pe adsorbie. Datorit posibilelor efecte
toxice, sunt scoase din uz.
B. Metode chimice de sterilizare i dezinfecie
I.
Etilen oxid (fig. 2.6). Acest gaz reactiv este inflambil, toxic i puternic iritant al
mucoaselor. Etilen oxidul poate fi utilizat pentru sterilizarea la temperaturi joase (20-60
C). Gazul are o capacitate mare de penetrare i poate trece prin unele folii de plastic. Un
dezavantaj l reprezint faptul c nu poate distruge microorganismele uscate i necesit
un nivel relativ de umiditate n camera de sterilizare, de 40-90%. Etilen oxidul se

23

II.

III.

IV.

V.

VI.

comercializeaz sub form de soluii n plastic, cauciuc i materiale similare. Itemii

sterilizai necesit o perioad pn este ndepratat etilen oxidul total de pe suprafaa lor.
Aldehidele. Formaldehida este cea mai important dintre acestea. Poate fi utilizaz n
aparate speciale de sterilizare. Utilizarea sa principal este n dezinfecie. Formaldehida
este un gaz solubil n ap. Este iritant al mucoaselor; contactul cu pielea poate produce
inflamaii sau eczeme alergice. Are un spectru larg de aciune asupra bacteriilor, fungilor
i virusurilor. La concentraii ridicate, poate distruge i sporii. Aceast substan este
utilizat ca dezinfectant al suprafeelor i obiectelor, la o concentraie de 0,5 -5%. n
trecut, era utilizat sub form gazoas pentru a dezinfecta aerul din ncperi (5g/m 3).
Mecanismul de aciune se bazeaz pe denaturarea proteinelor. O alt aldehid utilizat n
dezinfecii este glutaraldehida.
Alcooli. Tipul de alcool utilizat n dezinfecii este etanolul (80%), propanolul (60%) i
izopropanolul (70%). Alcooli sunt eficeni mpotriva bacteriilor i fungilor, mai puin
mpotriva virusurilor. Nu pot distruge sporii bacterieni. Datorit aciunii rapide i a
ptrunderii bune n piele, sunt utilizai n dezinfecia igienic i chirurgical a pielii, mai
ales a minilor. Un dezavantaj l reprezint faptul c nu au un efect ndelungat. Alcooli
dentaureaz proteinele.
Fenolii. Chirurgul britanic, Joseph Lister, a fost primul care a utilizat fenolul n medicin.
Astzi, derivaii fenolului sunt nlocuii cu grupri organice i/sau halogeni (alchilai,
arilai, fenoli halogenai). O caracteristic comun a substanelor fenolice este slaba
aciune asupra sporilor i virusurilor. Fenolii denatureaz proteine. Ei se leag de
materiale organice destul de de slab, fiind potrivii pentru dezinfecia excreiilor.
Halogenii. Clorul, iodul i derivai ai acestor halogeni sunt potrivii ca dezinfectani.
Clorul i iodul au un efect microbicidal general i distrug sporii.
Clorul denatureaz proteinele prin legarea de gurprile amino libere. Acidul
hipocloros, pe de alt parte, este produs sub form de soluii apoase, apoi se
desface nacid clorhidric i oxigen, acionnd ca un agent oxidant. Clorul este
utilizat pentru dezinfectarea apei de but, a apei din piscine (0,5 mg/l).
Hipoclorura de var (clorura de var) poate fi utilizat ca dezinfectant nespecific al
excrementelor. Cloraminele sunt compui organici ai clorului care desfac clorul n
soluie apoas. Sunt utilizai n curarea i splarea produselor i dezinfecia
excrementelor.
Iodul are proprieti similare cu ale clorului. Cele mai importante preparate pe
baz de iod sunt soluiile de iod i iodur de potasiu n alcool (tinctura de iod),
utilizate pentru dezinfecia pielii i a leziunilor mici. Iodoforii sunt complexe ale
iodului cu surfactani (polivinilpirolidona). Iodoforii au efecte mai puin iritante
dect iodul pur, dar au i efecte mai slabe germicide.
Oxidanii. Acest grup include ozonul, peroxidul de hidrogen, permanganat de potasiu i
acidul peracetic. Majoritatea sunt utilizai ca antiseptici moderai ai mucoaselor, pielii sau
rnilor.
24

Surfactanii. Aceste substane (cunoscute i ca ageni activi de suprafa, tenside sau

detergeni) includ detergenii anionici, cationici sau amfoterici, dintre care cei cationici i
amfoterici sunt cei mai eficieni. Efectele bactericide ale acestor substane sunt doar
moderate. Nu au efect asupra bacilului Koch (cu excepia amfotensidelor), sporilor sau
virusurilor necapsulate. Eficacitatea lor este bun mpotriva bacteriilor Gram-pozitive,
dar mai slab asupra bacteriilor Gram-negative. Avantajele includ nivelul sczut de
toxicitate, lipsa mirosului, tolerana bn a pielii i efectul curitor.
C. Dezinfecia practic
Scopul dezinfeciei chirurgicale a minilor este acela de a ndeprta ct mai multe
microorganisme. Procedura este aplicat dup splarea puternic a minilor. Utilizarea alcoolului
este cea mai potrivit n astfel de cazuri, cu toate c nu are efect sporicid. Alcooli sun astfel
combinai cu ali dezinfectani (compuii amoniului). Mai pot fi utilizai iodoforii.
Scopul dezinfeciei igienice a minilor este acela de a cura minile contaminate cu
patogeni. i n acest caz, alcooli sunt principalii ageni folosii. Alcoolii i compuii iodului se
preteaz pentru dezinfectarea pielii pacienilor n vederea pregtirii pentru operaii sau injecii.
Agenii cu miros puternic sunt opiunea logic pentru dezinfecia excreiilor (fecale,
sput, urin etc.). Nu este necesar distrugerea sporilor. n acest caz, sunt utilizate preparatele
fenolice. Canalizrile contaminate ale spitalelor pot fi dezinfectate termic (80-100C), dac este
necesar.
Dezinfecia suprafeelor este o parte important a igienii spitalelor. Combinaia ntre
curenie i dezinfecie este foarte eficient. Agenii corespunztori includ derivai ai aldehidelor
i fenolilor n combinaie cu surfactanii.
Dezinfecia instrumentelor este utilizat doar pentru ustensilele ce nu cauzeaz leziuni
mucoaselor i pielii (ex. instrumente dentare utilizate n lucrul pe substana dur a dintelui).
Aceste pregtiri trebuie s aib i un efect curitor. Dezinfecia lenjeriei poate fi realizat prin
substane chimice sau n combinaie cu tratamente termice. Substanele utilizate includ derivai ai
fenolilor, aldehide i clor, precum i i compui surfactani. Dezinfecia trebuie s aib loc n
timpul splrii.
Clorul este agentul ales pentru dezinfecia apei potabile i a celei din piscine. Este uor
de dozat, acioneaz rapid i are un spectru larg de aciune. Nivelul recomandat al concentraiei
pentru apa de but este de 0,1-0,3 mg/l, iar pentru apa din piscine 0,5 mg/l.
Dezinfecia final a unei ncperi este procedura aplicat n spital dup finalizarea
tratamentului unui pacient infectat i se aplic ncperii, ct i mobilierului. Evaporarea i
atomizarea formaldehidei (5g/m3), metoda preferabil, necesit o perioad de expunere de 6 ore.
Aceast procedur este acum nlocuit cu metode ce implic dezinfecia de suprafa i prin
pulverizarea de produse coninnd formaldehid. Dezinfecia din spitale este important n
prevenirea circulaiei infeciilor ntre pacienii aceluiai spital. Procedura trebuie s fie notat
pentru fiecare caz n parte.
VII.

25

Figura 2.1 Schema procesului de pasteurizare

(http://knowledgeofhealth.com/unclean-foodmilking-the-public-part1/)

Figura 4.2 Etuva sterilizare cu cldur uscat

(http://www.medicalexpert.ro/etuvetermostat.html)

Figura 2.3 Autoclavul sterilizare cu cldur

umed
(http://www.fairdealtraders.com/autoclave.php)

Figura 2.4 Lampa UV

(http://halmapr.com/news/hanovia/page/9/)

26

Figura 2.5 Filtre microbiologice

(https://www.fishersci.com/shop/products/fisherbran
d-water-testing-membrane-filters-47mmsterile/09719555)

Figura 2.6 Sterilizator cu etilen oxid

(http://www.alibaba.com/product-detail/EthyleneOxide-Sterilizer_12251148/showimage.html)

27

Cursul 3 Mijloace de aprare ale

organismului uman
Corpul nostru este expus continuu la bacterii, virusuri, fungi i parazii. n mod normal,
toi acetia se gsesc, n procente variabile, n piele, cavitatea bucal, cile respiratorii, tractul
digestiv, la nivelul conjunctivei sau n tractul urinar. Dac ptrund n esuturile profunde, multe
dintre aceste microorganisme pot produce perturbri grave ale funciilor organismului sau chiar
moartea. n plus, suntem expui uneori i la microorganisme obligatoriu patogene, care produc
boli de tipul: pneumoniilor, infeciilor streptococice, meningitelor, febrei tifoide.
Organismul prezint un sistem de mecanisme care combat infeciile i agenii toxici.
Acest sistem cuprinde (Fig. 3.1.):
mecanisme nespecifice (nnscute);
mecansime specifice (dobndite).

Figura 3.1. Imunitatea nnscut i dobndit (dup Burmester i Pezzutto, 2003)

1. Mecanismele nespecifice
Imunitatea nnscut se refer la rezistena prezent la natere, nefiind dobndit prin
contact cu o particul strin (antigen). Este caracteristic tuturor indivizilor dintr-o specie i
include:
barierele fiziologice prezente la porile de intrare
mecanismele nespecifice ale sistemului imunitar:
fagocite
mediatori ai inflamaiei
componente ale sistemului complement
celulele NK (asasini naturali).
28

Figura 3.2. Originea elementelor figurate ale sngelui (dup Burmester i Pezzutto, 2003)

Figura 3.3. Deplasarea neutrofilelor prin pereii capilarelor prin diapedez i cu ajutorul
chemotaxiei spre locul infeciei (dup Guyton i Hall, 2006)

29

1.1. Barierele fiziologice prezente la porile de intrare

Pielea. Puine microorganisme sunt capabile s ptrund prin pielea intact, dar multe pot
ptrunde i se pot localiza n glandele sebacee, sudorale sau n foliculii piloi. Transpiraia i
sebumul ca urmare a pH-ului acid i a unor substane (mai ales acizi grai) au proprieti
antimicrobiene. n piele este prezent lizozimul, o enzim care degradeaz peretele celular
bacterian i poate oferi o protecie parial. Lizozimul este prezent i n lacrimi, n secreiile
respiratorii i ale cervixului uterin. Pielea produce diverse substane antimicrobiene, printre
care i o protein, numit psoriazina.
Membranele mucoase. n tractul respirator se afl o pelicul de mucus care este deplasat
continuu de ctre cili spre faringe. Bacteriile tind s se lipeasc de acest film mucos. n plus,
acesta mai conine lizozim i alte substane antimicrobiene. Pentru unele microorgansime,
prima etap n infecie este ataarea la suprafaa celulelor epiteliale prin proteine adezive de
suprafa (pilii gonococilor sau ai bacilului coli). Dac aceste celule prezint legate IgA un
mecanism de rezisten al gazdei ataarea bacteriei poate fi prevenit. Microorganismul
poate depi mecanismul prin distrugerea anticorpului de ctre o proteaz. Cnd
microorganismele ptrund prin membranele mucoase, tind s fie preluate de fagocite i
transportate prin vasele limfatice spre ganglioni. Fagocitele acioneaz ca bariere n
rspndirea infeciilor. Mucusul i cilii din tractul respirator sunt completai de macrofagele
alveolare. De asemenea, vibrizele din narine i reflexul de tuse previn aspirarea agenilor
patogeni. n tractul gastro-intestinal intervin: saliva cu enzime hidrolitice, aciditatea gastric,
enzimele proteolitice i macrofagele enterice. Microflora constant din membranele mucoase
se opune i ea adeziunii agenilor patogeni (aa numita interferen bacterian). Spre
exemplu, lactobacilii din vagin menin un pH acid, care inhib levurile, bacteriile anaerobe i
gram-negative.

1.2. Mecanismele imunitii nnscute

Rspunsul iniial la atacul patogenilor este reprezentat de activarea fagocitelor i a
sistemului complement prin ci alternative. Urmtoarea linie defensiv este reprezentat de
eliberarea de citokine i de ali mediatori care declaneaz rspunsul inflamator. Acesta se
produce rapid i are rolul de a limita rspndirea infeciei pn cnd este iniiat un rspuns
specific. Totui, unele microorganisme au dezvoltat modaliti de a depi aceste bariere. Spre
exemplu, bacteriile (pneumococii) care au capsule bogate n polizaharide pot evita fagocitoza, iar
unele virusuri (poxvirusurile) produc omologi ai receptorilor pentru citokine, care funcioneaz
ca antagoniti pentru citokine. Aceste mecanisme ncetinesc rspunsul imun, suficient pentru a
permite microorganismului s gseasc o ni de ptrundere.

30

1.2.1. Fagocitele
Neutrofilele i macrofagele tisulare sunt principalele care atac i distrug bacteriile,
virusurile i ali ageni patogeni. Neutrofilele sunt celule mature care atac i distrug bacterii,
chiar n sngele circulant. n mod contrar, macrofagele tisulare sunt iniial monocite sanguine, cu
activitate limitat. Odat ajunse n esuturi, i mresc volumul, uneori de peste 5 ori, devin
macrofage tisulare, capabile s lupte cu agenii infecioi intratisulari. Neutrofilele i monocitele
se pot ngusta i trece prin porii capilarelor, proces numit diapedez. n spaiile interstiiale se
deplaseaz prin micri amiboide.
Leucocitele sunt atrase ctre zonele infectate prin chemotaxie. Cnd un esut se
inflameaz, sunt produse peste o duzin de substane diferite care declaneaz chemotaxia
leucocitelor. Aceste substane includ: toxine virale i bacteriene, resturi ale esuturilor distruse, o
serie de produi de reacie ai sistemului complement, substane rezultate n urma coagulrilor din
zonele inflamate. Chemotaxia depinde de gradientul concentraiei substanelor chemotactice.
Concentraia este mai mare n apropierea sursei, fapt ce direcioneaz micrile leucocitelor.
Chemotaxia este eficient pe o raz de 100 m. Astfel, dat fiind c nici o zon dintr-un esut nu
este la o distan mai mare de 50 m fa de un capilar, semnalul chimic poate atrage rapid
lecucocitele.
Fagocitoza. Cea mai important funcie a neutrofilelor i macrofagelor tisulare este
fagocitoza, capacitatea de a ingera substane strine. Fagocitoza este un proces selectiv, altfel sar distruge celule sntoase ale organismului. Selecia se bazeaz pe trei criterii:
structurile sntoase din organism au suprafaa neted. Activitatea fagocitelor va crete
cu ct structurile cu care intr n contact sunt mai abrazive.
structurile sntoase prezint un nveli proteic care va respinge fagocitele. Structurile
mbtrnite sau strine nu au aceste nveliuri i vor fi recunoscute de ctre fagocite.
sistemul imunitar produce anticorpi. Acetia se leag la suprafaa microorganismelor, iar
prin intermediul lor, fagocitele vor distruge microorganismele.
Neutrofilele sunt deja mature cnd ptrund n esuturi i pot distruge microorganismele
imediat. O singur neutrofil poate fagocita ntre 3 i 20 de bacterii. Macrofagele tisulare sunt
mult mai puternice, fiind capabile s distrug pn la 100 de bacterii. De asemenea, pot digera i
particule mai mari, chiar hematii ntregi sau parazii ai malariei. n plus, pot elibera produii
degradai i astfel supravieuiesc cteva luni. Odat ingerate, majoritatea particulelor sunt
distruse de ctre enzimele intracelulare. Veziculele de fagocitoz fuzioneaz cu lizozomi, acetia
elibernd enzime care degradeaz particulele nglobate. Att lizozomii neutrofilelor, ct i ai
macrofagelor, conin enzime proteolitice. n schimb, doar lizozomii macrofagelor conin i lipaze
care pot distruge nveliul bacilului tuberculozei.
Aceste leucocite mai conin i ali ageni bactericizi care sunt eficieni atunci cnd
aciunea lizozomilor eueaz. Printre acetia se numr agenii oxidani (superoxidul, apa
oxigenat, ionii hidroxil) din membrana fagosomilor sau a peroxizomilor i hipocloritul, a crui

31

formare este catalizat de enzimele lizozomilor. Exist i bacterii care pot scpa acestor
substane, spre exemplu bacilul tuberculozei.
Sistemul reticulo-endotelial. O parte dintre monocitele care ptrund n esuturi devin
macrofage tisulare, iar restul rmn ataate de esut luni sau chiar ani. Au aceeai capacitate
imunologic ca i a macrofagelor mobile. Dac sunt stimulate, se desprind din esut, devin
mobile i rsound corespunztor la procesul inflamator. Astfel, corpul are un sistem monocitemacrofage, rspndit aproape n toate esuturile. Totalitatea monocitelor, macrofagelor mobile,
macrofagelor ataate i a unor celule epiteliale specializate din esutul hematopoietic formeaz
sistemul reticulo-endotelial. Deoarece acest sistem este mai bine cunoscut sub denumirea de
reticulo-endotelial dect de monocite-macrofage, trebuie reinut ca un sistem fagocitar
generalizat localizat n toate esuturile, mai ales n zonele care intr n contact cu o cantitate mare
de substane strine. Astfel, n piele macrofagele se numesc histiocite. n ganglionii limfatici,
macrofagele se gsesc n sinusurile limfatice (capilare) i cur limfa. n plmni, macrofagele
se localizeaz n alveole i poart denumirea de macrofage alveolare. Dac particulele ajunse n
plmni au dimensiuni mici, pot fi degradate de ctre macrofage. Dac dimensiunile sunt prea
mari, celula fagocitar devine gigantic i nconjoar, ca o capsul, particula, pn cnd, dac
este posibil, o va putea degrada. Astfel de capsule se formeaz n jurul bacilului tuberculozei,
particulelor de siliciu sau a particulelor de carbon. n ficat macrofagele se numesc celule
Kupffer. Acestea cur sngele portal care ajunge la ficat de la intestine. n splin i n mduva
osoas se gsesc macrofage care cur sngele, n cazul n care ptrund microorganisme pn la
acest nivel. n splin, tot prin fagocitoz sunt degradate i hematiile mbtrnite.
1.2.2. Inflamaia
Cnd esuturile sunt lezate, fie din cauza bacteriilor, a traumelor, a substanelor toxice, a
temperaturilor ridicate, elibereaz o serie de substane i determin transformri secundare ale
esutului sntos din jur. Acest complex de transformri se numete inflamaie. n timpul
inflamaiei, apar urmtoarele transformri:
vasodilataie local, cu exces de snge n zona respectiv
creterea permeabilitii capilarelor, ceea ce duce la acumularea de lichid n spaiile
interstiiale
coagularea lichidului din spaiile interstiiale, ca urmare a excesului de fibrinogen eliberat
din capilare
mobilizarea unui numr crescut de granulocite i monocite n zona afectat
creterea n volum a celulelor din esutul afectat.
Dintre substanele care produc aceste reacii se numr: histamina, bradichinina,
serotonina, prostaglandinele, produi ai sistemului complement i limfokine (eliberate de
limfocitele T). Aceste substane activeaz sistemul reticulo-endotelial i, n cteva ore,
macrofagele ncep s digere esutul distrus. Uneori, pot s distrug i celule sntoase.

32

Efectul de delimitare al inflamaiei. Unul dintre primele rezultate ale inflamaiei este
delimitarea ariei afectate de restul esutului. Spaiile interstiiale i vasele limfatice din zona
inflamat sunt blocate prin cheaguri de fibrin. Acest proces ncetinete rspndirea bacteriilor
sau a substanelor toxice. Spre exemplu, cnd stafilococii ptrund n esuturi, elibereaz toxine
celulare extrem de puternice. Ca urmare, inflamaia se produce rapid mai rapid dect se pot
multiplica i rspndi patogenii. Astfel, infeciile stafilococice sunt bine delimitate. n schimb,
streptococii nu determin distrugeri locale puternice. Procesul de delimitare al infeciei este mai
ncetinit, iar streptococii se pot rspndi. Ca rezultat, infeciile streptococice au o tendina mai
mare de a disemina i produc deces mai frecvent dect stafilococii.
Rspunsul macrofagelor i neutrofilelor n timpul inflamaiei. n cteva minute de la
declanarea inflamaiei, macrofagele deja prezente n esut ncep fagocitoza. n momentul
activrii, i mresc volumul, apoi se desprind din locul n care sunt ataate i devin mobile.
Numrul macrofagelor astfel activate nu este mare, dar este vital.
Urmtoarea linie defensiv este reprezentat de neutrofile. Acestea pot invada aria
inflamat ca urmare a produilor eliberai aici i care determin urmtoarele procese (Fig. 3.3.):
marginaia: alterarea suprafeei interne a capilarelor din zona inflamat i ataarea
neutrofilelor de endoteliul acestora
diapedeza: slbirea legturilor intercelulare din endoteliul capilarelor i venulelor,
formarea de pori prin care neutrofilele ajung n zona inflamat
chemotaxia: atragerea neutrofilelor n zona inflamat.
Astfel, n cteva ore, zona inflamat este invadat de neutrofile.
Produi ai inflamaiei, ajuni n circulaia sanguin, determin activarea mduvei osoase.
Aceasta va mobiliza i sintetiza neutrofile. Numrul neutrofilelor poate crete n cteva ore pn
la 15000 25000 (de la 4000 5000, n mod normal), proces numit neutrofilie. Monocitele din
depozite sunt reduse, iar sinteza lor dureaz mai mult. Astfel, noi macrofage vor putea ajuta la
distrugerea invadatorilor doar n cteva zile sau chiar sptmni. De asemenea, mduva osoas
ncepe s produc o cantitate mai mare i de granulocite.
Formarea puroiului. Cnd macrofagele i neutrofilele ingereaz mari cantiti de
microorganisme, la un moment dat vor muri. Dup cteva zile din momentul nceperii
inflamaiei, se formeaz o cavitate n zona afectat. Aici se gsesc procente diferite de esut
necrozat, macrofage i neutrofile moarte i licid interstiial. Acest amestec este cunoscut sub
denumirea de puroi. Dup ce inflamaia a fost stopat, celulele moarte i esutul necrotic se
autolizeaz, n cteva zile. Produii rezultai sunt absorbii de esutul din jur i de ctre limf.
1.2.3. Sistemul complement
Acest sistem completeaz aciunea anticorpilor. Este alctuit din aproximativ 20 proteine,
multe dintre ele fiind proenzime. Aceste proteine reprezint 5% din totalul proteinelor
plasmatice. Principalele structuri ale sistemului sunt 11 proteine (C1-C9, B i D), prezente n

33

mod normal n snge, dar care pot ajunge i n spaiile interstiiale. Aceste proenzime sunt
normal inactive, dar se pot activa prin 2 ci:
calea clasic: este iniiat de prezena a cel puin dou complexe antigen-anticorp.
calea alternativ: activarea se produce prin aciunea produilor derivai din
microorganisme, endotoxine, polizaharide sau IgA agreagate.
Activarea duce la formarea a numeroi produi, unii dintre acetia avnd efecte
importante n prevenirea distrugerilor tisulare determinate de microorgansime sau toxine. Printre
cele mai importante efecte se numr:
Opsonizarea i fagocitoza. Unul dintre produi (C3b) activeaz fagocitoza, stimulnd
att macrofagele, ct i neutrofilele. Determin aceste celule s ingereze bacteriile la
suprafaa crora sunt ataai anticorpi. Acest proces se numete opsonizare.
Liza. Unul dintre cei mai importani produi ai sistemului complement este complexul
litic, o combinaie de mai muli factori care determin distrugerea membranei
microorganismului invadator.
Aglutinare. Produii complementului modific suprafaa microorganismelor,
determinndu-le s adere unele la altele, astfel iniiindu-se aglutinarea.
Neutralizarea virusurilor. Enzimele complementului i ali produi pot ataca structurile
unor virusuri i i fac nonviruleni.
Chemotaxia. Fragmentul C5a iniiaz chemotaxia neutrofilelor i macrofagelor,
determinndu-le s migreze n numr mare n zona unde se afl antigenul.
Activarea bazofilelor i mastocitelor. Fragmentele C3a, C4a i C5a activeaz aceste
celule, determinndu-le s eliberze histamin, heparin i alte substane n lichidele
locale. Aceste substane determin creterea debitului sanguin, eliberarea de ser i
proteine plasmatice care ajut la imobilizarea patogenilor.
Efecte inflamatorii. n plus la efectele determinate de mastocite i bazofile, produi ai
sistemului complement determin o cretere i mai mare a fluxului sanguin, eliberarea de
proteine din capilare i coagularea proteinelor din lichidul interstiial, astfel prevenind
rspndirea infeciei.
1.2.4. Celulele NK
Celulele NK sunt limfocite T care distrug alte celule, precum celulele tumorale. Celulele
NK sunt ntotdeauna active i n cutare de celule infectate. Acestea sunt diferite de celelalte
celule ale sistemului imunitar care se activeaz doar n prezena unui antigen.

2. Mecanismele specifice (dobndite)

Dac elementele sistemului imunitar nnscut acionau indiferent de tipul de particul
non-proprie, n cazul imunitii dobndite, componentele sale se activeaz doar n contact cu un

34

anumit antigen. Elementele care aparin imunitii specifice sunt reprezentate de limfocitele B i
T.
n funcie de calea prin care este dobndit, imunitatea se clasific astfel:
Natural: cnd nu se intervine medical;
Artificial: cnd se intervine prin diferite tehnici puse la punct de om (vaccinuri,
seruri imune).
Aceste dou tipuri de imunitate se clasific la rndul lor, n funcie de efortul depus de
organism, n dou tipuri:
Activ. Imunitatea dobndit activ are loc atunci cnd un individ este expus unui agent
patogen i i formeaz anticorpi i limfocite specializate. Imunitatea natural se
dobndete prin intrarea n contact cu patogenul, iar cea artificial se dobndete prin
vaccinare. Vaccinul este o substan care conine microorganisme slbite sau inactive.
Pasiv. n cazul imunitii pasive, anticorpi deja formai sunt introdui sau trecui
individului. Acesta nu i produce singur. Cea natural are loc cnd anticorpii IgG de la
mam trec la ft prin placent sau cnd IgA sunt trecute nou-nscutului prin colostrul
matern. Cea artificial are loc prin seruri imune ce conin anticorpi.
2.1. Limfocitele B i imunitatea mediat umoral (prin intermediul anticorpilor)
Imunitatea mediat prin anticorpi, numit i imunitate mediat umoral, utilizeaz
anticorpii n fluidele extracelulare, precum secreii mucoase, plasm i limf. Aceti anticorpi
sunt produi de celulele B sau limfocitele B. Acestea atac n principal bacteriile, toxinele
bacteriene i virusurile care invadeaz fluidele corpului. De asemenea, atac i esuturile
transplantate.
Imunitatea mediat umoral a fost descoperit de cercettorul german Emil von Behring,
la nceputul secolului al XX-lea, n cutarea lui de a creea o tehnic de imunizare mpotriva
difteriei.
Antigenele. Un anticorp recunoate antigenul specific prin una sau mai multe regiuni
prezente la nivelul antigenului, numite epitopi, sau determinani antigenici. Epitopii trebuie s
aib o anumit form, dimensiune i structur chimic pentru ca anticorpul s poat interaciona
cu ei i s poat distruge antigenul.
Antigenele au o mas molecular de aproximativ 8.000 10.000 Da sau chiar mai mult.
Unele substane strine pot avea o mas molecular mult mai mic i nu sunt percepute ca
antigene. Acestea se numesc haptene i pentru a deveni antigene, trebuie s se cupleze cu un
transportor (o protein). Anticorpii atac doar haptena, nu i transportorul. Spre exemplu,
penicilina este o hapten, nefiind perceput de organism ca antigen. Totui, n unele cazuri, cnd
penicilina se ataeaz de proteine serice, se produce o reacie alergic. Persoanele care rspund n
acest mod, sunt alergice la penicilin. O reacie alergic este un rspuns tipic imun.

35

Antigenele pot fi proteine, polizaharide cu molecul mare, lipide sau acizi nucleici.
Totui, antigenele de tip lipide sau acizi nucleici trebuie s se combine cu proteine sau
polizaharide, altfel nu sunt considerate antigene.
Anticorpii. Anticorpii sunt cunoscui i sub denumirea de imunoglobuline, un grup de
proteine solubile. Un antigen poate determina producia a diferii anticorpi, n funcie de epitopii
si. Epitopii sau determinanii antigenici sunt cunoscui ca situs-ul de legare al antigenului.
Numrul de situsuri de legare ale antigenului este denumit valena anticorpului. Exist cel puin
2 epitopi pe fiecare antigen, unde un anticorp uman se poate lega. Acesta este cunoscut ca i
anticorp bivalent deoarece valena lui este 2.
Un anticorp bivalent este numit monomer i este alctuit din 4 lanuri proteice. Acestea
sunt 2 lanuri grele (heavy) H i 2 lanuri uoare (light) L. Aceste proteine sunt conectate
ntre ele i formeaz o structur cu aspect de Y, suficient de flexibil nct s poat dobndi
aspect de T. n aceast molecul se disting dou regiuni: regiunea variabil (braele Y-ului) i
regiunea constant (piciorul Y-ului). Regiunea variabil are o conformaie spaial
complementar cu epitopii antigenelor.
Regiunea constant se numete regiune Fc. Aceast regiune permite legarea de anticorpi
complementari dac ambele situsuri de legare pentru antigene sunt ocupate. Astfel, anticorpii
complementari sunt liberi s se ataeze de antigene i s reacioneze cu ele. Exist 5 tipuri de
regiuni constante asociate cu 5 clase de imunoglobuline (Fig. 3.4.):
IgG (imunoglobulinele G). IgG neutralizeaz toxinele bacteriene i atac bacteriile i
virusurile aflate n circuitul sanguin, prin creterea eficacitii fagocitelor. Aproximativ
80% dintre anticorpi aparin acestei clase. IgG pot strbate pereii vaselor i placenta,
ptrunznd n fluidele tisulare.
IgM (imunoglobulinele M). IgM reprezin prima clas de anticorpi ce rspund la un
antigen sau la o infecie iniial i reprezint cam 10% din anticorpii din ser. IgM au
dimensiuni relativ mari i au structur pentameric, fiind formai din 5 monomeri unii
printr-un lan peptidic (join-chain). Datorit dimensiunii, IgM rmn n lumenul vasului
sanguin. IgM sunt responsabile de hemaglutinare n timpul transfuziilor incorecte,
precum i de sporirea eficacitii fagocitelor. IgM sunt primele care apar n momentul
iniial expunerii la antigene.
IgA (imunoglobulinele A). IgA sunt cei mai ntlnii anticorpi n secreii i n
membranele mucoase. Reprezint 15% din anticorpii serici. IgA protejeaz copiii de
infecii gastrointestinale i lupt mpotriva antigenelor ce atac sistemul respirator.
Plasmocitele din membranele mucoase produc anticorpi secretori IgA, ce sunt apoi trecui
prin celule mucoase i atac antigenele de la suprafaa mucoaselor, precum bacteriile i
virusurile. IgA au o durat de via limitat.
IgD (imunoglobulinele D). IgD sunt prezente n snge i n limf, acestea sunt receptori
la suprafaa limfocitelor B. Asigur de asemenea protecie mpotriva viermilor parazii.
IgE (imunoglobulinele E). IgE interacioneaz cu bazofilele i cu mastocite care
elibereaz mediatori chimici, de tipul histaminelor care produc reacii alergice. IgE
36

reprezint mai puin de 1% din totalul anticorpilor serici. Asigur aprare mpotriva
viermilor parazii.
Celulele B. Celulele B sau limfocitele B se dezvolt din celule stem ale mduvei osoase
i ale ficatului ftului. Spre deosebire de limfocitele T, despre limfocitele B se cunosc mai puine
detalii privind procesarea lor. Limfocitele B secret anticorpi, fa de limfocitele T, n cazul
crora ntreaga celul interacioneaz cu antigene. Limfocitele B au o diversitate mai mare dect
limfocitele T, putnd produce milioane de tipuri de anticorpi. Dup procesare, acestea sunt
transportate la nivelul ganglionilor limfatici i n splin, unde utilizeaz receptori antigenici
pentru a putea identifica antigene. Cnd limfocitele B intr n contact cu antigenele extracelulare,
se multiplic ntr-o manier clonal; o parte devin plasmocite productoare de anticorpi (circa
2000/s), iar restul se transform n celule cu memorie. O celul cu memorie este o celul care
asigur organismului o imunitate de lung durat mpotriva unui anumit antigen.
Un anticorp se leag la un epitop al unui antigen i formeaz un complex antigenanticorp. Acest complex este specific. Totui, cnd exist cantiti mari de antigene, acestea pot
fi legate de anticorpi nespecifici, ceea ce face ca respectivul complex s nu prezinte o
interaciune perfect. Dac limfocitele B nu intr n contact cu antigenele, sunt distruse prin
apoptoz. Apoptoza reprezint moartea programat a celulelor, care vor fi eliminate din
organism prin intervenia fagocitelor.
Strategii de combatere a antigenelor. Formarea complexelor antigen-anticorp este util
n rspunsul la organisme infecioase sau substane strine, deoarece le ndeprteaz din
organism. Metodele de aprare prin formarea complexelor antigen-anticorp constau n aglutinare,
opsonizare, neutralizare, citotoxicitate mediat umoral i celular i activarea complementului.
Aglutinarea determin legarea antigenelor ntr-un agregat ce va fi uor distrus de
fagocite.
Opsonizarea reprezint acoperirea bacteriilor ncapsulate de anticorpi ce se leag i de
fagocite, facilitnd liza bacteriilor.
Neutralizarea determin blocarea antigenelor de a se lega de celulele int, ducnd la
neutralizarea antigenelor.
Citotoxicitate mediat umoral i celular reprezint legarea anticorpilor de toxinele
bacteriene, mpiedicn legarea i ptrunderea n celulele int.
Activarea complementului este utilizat cnd agenii infecioi sunt nvelii n proteine
reactive ce determin ataarea IgM i IgG la agent, determinnd liza membranei celulare
i ingestia de ctre fagocite.
Imunitatea de durat. Cnd antigenele sunt ntlnite pentru prima oar, are loc un
rspuns imun primar ce determin creterea titrului anticorpilor. Titrul reprezint cantitatea de
anticorpi din serul unui organism infectat. Cnd antigenul atac pentu prima dat organismul
cantitatea de anticorp este extrem de redus. Apoi titrul anticorpului crete gradual i scade odat
cu distrugerea sau neutralizarea antigenului.
Cnd organismul intr n contact pentru a doua oar cu antigenul, are loc un rspuns
imun secundar ce duce la transformarea rapid a limfocitelor cu memorie n plasmocite
37

productoare de anticorpi. Un limfocit B cu memorie este un limfocit B produs ca urmare a

rspunsului primar i care nu s-a transformat atunci n plasmocit.
Anticorpii utilizai pentru dignostic. Anticorpii sunt utilizai n diagnosticarea bolilor,
din moment ce prezint activitate specific. Aceasta este util n identificarea unui agent patogen
necunoscut.
Anticorpii pot fi produi n laborator prin clonarea unor celule cultivate productoare ale
anticorpilor respectivi. Aceti anticorpi se numesc anticorpi monoclonali. Celule maligne ale
sistemului imunitar, numite celule mielomice sunt utilizate deoarece se divid continuu. Acestea
fuzioneaz cu limfocite ce produc un singur tip de anticorpi formnd celule numite hibridomale.
Acestea se divid n continuu i produc mari cantiti de anticorpi. Anticorpii monoclonali sunt
utilizai pentru dignosticarea infeciilor streptococice i infeciilor clamidiale. Deasemenea,
testele de sarcin utilizeaz anticorpi monoclonali ce leag hormonii prezeni n urin, n timpul
sarcinii.
2.2. Limfocitele T i imunitatea mediat celular
Imunitatea mediat celular implic limfocite specializate numite limfocite T care atac
organismele strine direct i nu prin intermediul anticorpilor. Limfocitele T sunt, deasemenea,
eficiente mpotriva viermilor, fungilor i protozoarelor. n plus, aceste celule regleaz diferite
aspecte ale sistemului imunitar.
Imunitatea mediat celular a fost explicat de cercettorul rus Ilia Mecinikov care, la
nceputul secolului al XIX-lea, a observat c celulele fagocitare sunt mult mai active la animalele
imunizate.
Limfocitele T. Limfocitele T se dezvolt n mduva osoas i migreaz n timus, unde se
maturizeaz (Fig. 3.5.). Aici se divid rapid i se difereniaz pentru a reaciona mpotriva a
diferite tipuri de antigene. Un limfocit dezvolt specificitate pentru un singur tip de antigen.
Urmtorul dezvolt specificitate pentru un alt tip .a.m.d., astfel nct se formeaz mii de tipuri
diferite de limfocite T. Aceste limfocite T preprocesate prsesc timusul i ajung prin circulaia
sanguin spre esutul limfoid din tot organismul. Timusul este i cel care asigur ca limfocitele T
s nu reacioneze mpotriva propriului organism. Astfel, selectez care limfocite vor fi eliberate,
prin amestecarea lor cu aproximativ toate tipurile posibile de antigene proprii. Dac un limfocit
T reacioneaz, este distrus prin fagocitare. Aceasta se ntmpl la 90% dintre celule. Prin
urmare, singurele limfocite T eliberate sunt nereactive la antigenele proprii i reacioneaz doar
la cele non-proprii, cum ar fi cele din bacterii, toxine sau esuturi transplantate. Majoritatea
limfocitelor T se formeaz cu puin timp nainte de natere i timp de cteva luni dup natere.
Dup aceast perioad, ndeprtarea timusului reduce, dar nu elimin imunitatea mediat celular.
Odat ce organismul devine adult, abilitatea de a creea limfocite T se diminueaz.
Limfocitele T atac un antigen specific situat la suprafaa celulei. Aceste celule se
numesc celule ce prezint antigene (antigen-presenting cells) APCs, cum ar fi, macrofagele sau
celulele dendritice. Dup ce antigenul este ingerat de APC, fragmente din antigen sunt plasate la
suprafaa celulei. Aceste fragmente trebuie s se aflea n apropierea moleculelor proprii ale
38

suprafeei celulare. Moleculele proprii fac parte din complexul de histocompatibilitate, grup de
proteine unice pentru fiecare persoan i utilizate n distingerea propriului de nonpropriu. Cnd
un receptor antigenic ntlnete fragmente din antigenul complementar, celulele T se transform
n celule T efectoare ce ndeplinesc rspunsul imun. Un limfocit T este o celul stimulat
antigenic. Unele limfocite T atac antigenele n timpul rspunsului primar, n timp ce altele devin
celule cu memorie i au rol n rspunsul secundar imun. Exist 4 tipuri de celule T:
Celule T Helper sunt cele mai numeroase limfocite T, reprezentnd peste trei sferturi din
totalul lor. Dup cum le spune i denumirea, aceste celule ajut la funcionarea sistemului
imunitar. Au rol n reglarea acestuia, prin intermediul unor mediatori numii limfokine.
Printre cele mai importante limfokine se numr: Interleukina-2 Interleukina-6, factorul de
stimulare al granulocitelor-monocitelor, interferonul g.
Funciile specifice limfokinelor. n absena limfokinelor, sistemul imunitare este
aproape paralizat. n cazul SIDA, virusul imuno-deficienei dobndite distruge tocmai limfocitele
T helper. Prezentm n cele ce urmeaz, o parte din funciile specifice reglatorii:
stimularea creterii i proliferrii limfocitelor T citotoxice i a celor supresoare;
stimularea creterii limfocitelor B, diferenierii lor n plasmocite i producerii de
anticorpi;
activarea macrofagelor, prin reinerea lor la locul infeciei i stimularea fagocitozei;
stimularea limfocitelor T helper prin feed-back pozitiv.
Celulele T citotoxice sunt celule capabile de a distruge microorganisme, dar mai ales
celulele infectate de ctre virusuri i bacterii sau celule tumorale. Receptorii de la
suprafaa limocitelor T citotoxice se leag de celulele care urmeaz a fi distruse. Apoi,
secret proteine, numite perforine, care produc orificii n membrana celulei atacate. n
interiorul acesteia ptrunde lichid interstiial i alte substane eliberate de celulele
citotoxice. Celula atacat va fi distrus n scurt timp. Unele dintre limfocitele T citotoxice
sunt letale pentru celulele parazitate de virusuri. De asemenea, distrug celulele tumorale,
celulele din inima transplantat sau alte celule strine organismului gazd.
Celulele T responsabile de prelungirea hipersensibilitii (TD) sunt asociate cu reaciile
alergice.
Celulele T supresoare. Se cunosc destul de puine lucruri despre aceste celule, dar se tie
faptul c sunt capabile s opreasc rspunsul imun cnd nu exist antigene. Se consider
c au rolul de a preveni reaciile imune excesive din partea limfocitelor citotoxice, care ar
putea distruge propriile esuturi ale organsimului. Probabil c aceste limfocite joac un
rol important n prevenirea atacrii celulelor gazdei de ctre sistemul imunitar, fenomen
numit toleran imun.
Limfocitele T sunt identificate i dup receptorii de suprafa, numii grupuri de
difereniere (clusters of differentiation) CD. Acestea sunt de dou tipuri:
CD4-Celule T helper
CD8-Celule T citotoxice i supresoare

39

Figura 3.4. Clasele de anticorpi (imunoglobuline) (dup Burmester i Pezzutto, 2003)

Figura 3.5. Maturizarea limfocitelor T (dup Burmester i Pezzutto, 2003)

40

Teste de diagnostic imunologic

Reacia dintre antigen i anticorp este specific. Un antigen va interaciona doar cu
anticorpul complementar sau cu unul foarte apropiat ca structur. Ca urmare a acestei proprieti,
reaciile dintre antigene i anticorpi pot fi utilizate pentru identificarea unuia cu ajutorul celuilalt.
Prin aceast reacie poate fi identificat unul dintre cei doi dintr-un amestec. Microorganismele i
alte celule posed o varietate de antigene i pot reaciona cu mai muli anticorpi. Astfel,
anticorpii monoclonali sunt foarte utili n identificarea antigenelor deoarece sunt specifici doar
unui singur antigen i sunt identici. Antiserul generat n cadrul unui rspuns imun conine mai
multe tipuri de anticorpi i, ca urmare, apar frecvent erori.
Testul ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) reacia imunoenzimatic
Testul ELISA poate fi aplicat n mai multe moduri, ns principiul de funcionare este
acelai. Se identific antigene sau anticorpi cu ajutorul unor anticorpi legai de o enzim (Fig.
3.6.). Enzima va reaciona cu un substrat care i va modifica culoarea. n funcie de intensitatea
culorii, se poate msura concentraia antigenului sau anticorpului pe care dorim s-l identificm.
Testul ELISA direct. Are ca scop identificarea unor antigene (proteine). Se introduce
proba cu antigenul necunoscut n microplcile de diluie. Antigenele se ataeaz de pereii
plcilor, iar excesul se ndeprteaz prin cltire. Se adaug apoi anticorpi cunoscui ataai de o
enzim (ex. peroxidaza). Apoi se introduce substratul care urmeaz a fi degradat de enzim. Cu
ct sunt mai multe antigene, cu att mai muli anticorpi vor reaciona, iar substratul va avea o
culoare mai intens.
Testul ELISA indirect (Fig. 3.7.). Poate fi utilizat pentru identificarea de antigene sau de
anticorpi. Se introduce antigenul, anticorpi cunoscui sau care urmeaz a fi identificai i
anticorpii marcai cu enzima.
Testul ELISA sandwich (Fig. 3.7.). Este utilizat pentru detecia de antigene sau anticorpi.
Se introduc anticorpii cunoscui sau care urmeaz a fi identificai, apoi antigenele care urmeaz a
fi identificate sau cunoscute i apoi anticorpii marcai cu enzima. Pentru c antigenul se afl ntre
doi anticorpi, testul se numete sandwich.
Testele de imunofluorescen
Coloranii fluoresceni (ex. fluoresceina, rhodamina) se pot lega covalent cu anticorpi i
pot fi detectai cu ajutorul unui microscop cu fluorescen care emite lumin ultraviolet. Astfel
de anticorpi marcai pot fi utilizai pentru identificarea antigenelor (ex. de la suprafaa bacteriilor,
cum ar fi streptococii sau treponemele) sau a unor celule din seciuni histologice (Fig. 3.8.). O
reacie imunofluorescent direct are loc cnd anticorpi cunoscui, marcai interacioneaz cu
antigene necunoscute. Reacia indirect apare atunci cnd este utilizat un proces n dou etape:
un antigen cunoscut este montat pe lam, se adaug ser cu anticorpi necunoscui, apoi se cltete.
Dac anticorpii sunt complementari cu antigenele, rmn ataai i pot fi evideniai la microscop
prin adugarea unor anti-imunoglobuline marcate fluorescent sau cu un reactant caracteristic
(proteina A stafilococic)
41

O alt aplicaie a anticorpilor marcai fluorescent este n tehnica flow cytometry. Prin
aceasta, se pot descrie i numra celule dintr-o suspensie cu ajutorul unor lasere.
Immunoblotting (Western blotting)
Este o metod de identificare a unui anumit antigen dintr-un amestec complex de proteine
(Fig. 3.9.). Amestecul de proteine este separat, n funcie de masa molecular, prin electroforez
n gel de poliacrilamid. Gelul este acoperit cu o membran nitrocelulozic, iar proteienele sunt
transferate membranei. n timpul transferului, soluia n care au fost introduse proteinele este
ndeprtat aproape complet, iar proteinele i redobndesc configuraia tridimensional.
Membrana nitrocelulozic este supus reaciei cu anticorpi marcai enzimatic. Testul
utilizat poate fi direct sau indirect (imunoglobuline, urmate de anti-imunoglobuline marcate
enzimatic). Antigenul care urmeaz a fi identificat apare sub forma unei benzi pe suprafaa
membranei. Tehnica este utilizat, spre exemplu, pentru a confirma o ELISA pozitiv pentru
HIV. Este demonstrat prezena anticorpilor n serul pacientului mpotriva unei proteine HIV.

Figura 3.6. Principiul de funcionare al testului ELISA

(http://tube.medchrome.com/2011/11/elisa-test-antibody-detection.html)

42

Figura 3.7. ELISA indirect i sandwich

(http://www.sbs.utexas.edu/sanders/Bio347/Lectures/2006/Lecture%208%202006.htm)

Figura 3.8. Principiul de funcionare al imunofluorescenei

(http://www.suggestkeyword.com/SW1tdW5vZmx1b3Jlc2NlbmNl/)

43

Figura 3.9. Principiul de funcionare pentru Western blotting

(http://www.slideshare.net/MMASSY/antigen-ab-reactions)

44

PARTEA II. VIRUSOLOGIE

Curs 4: Virusologie parte general

Curs 5: Virusologie parte special (virusurile
hepatitice, virusul poliomielitei, virusul gripal, virusul
imunodefienei dobndite

45

CURS 4 Virusologie parte general

Definiie. Virusurile sunt complexe constituite din proteine i genom viral (ADN sau
ARN). Sunt lipsite att de structur celular, ct i de procese metabolice independente. Se
multiplic doar n celulele gazd, bazndu-se pe propria informaie genetic i exploatnd
sistemul enzimatic al acesteia.
Virusurile sunt entiti infecioase ce difer radical de alte microorganisme printr-o serie
de caracteristici:
Nu prezint organizare celular, ci sunt alctuite doar din material genetic i proteine.
Nu prezint un sistem metabolic propriu, depinznd de sistemele enzimatice ale celulei
gazd, pe care le exploateaz n vederea sintezei propriilor componente. i introduc
materialul genetic n celula gazd, aceasta accept materialul genetic i ncepe s
sintetizeze structurile proprii virusului.
Virusurile infecteaz bacterii (bacteriofagii), plantele, animalele sau omul.

Figura 4.1 Dimensiunile virusurilor (dup Kayser et al., 2005)

4.1. Structura virusurilor

Particula viral matur (fig. 4.2) este cunsocut sub denumirea de virion. Acesta prezint
dou tipuri de constitueni:
eseniali: genomul viral, capsida (nveliul proteic);
accesorii: peplosul (anvelopa viral), spiculele sau glicoproteinele implantate n nveliul
extern.
Genomul. Materialul genetic viral este reprezentat de ADN sau ARN, n funcie de acest
aspect virusurile sunt caracterizate drept ribovirusuri, respectiv dezoxiribovirusuri. De obicei,
46

ADN-ul este dublu catenar, liniar sau circular. ARN-ul este, n general, monocatenar, cu excepia
reovirusurilor (responsabile de diareea la copii mici ntre 6 luni i 2 ani). La unele familii de
virusuri, ARN-ul este segmentat. Virusurile cu ARN monocatenar sunt mprite la rndul lor n
2 categorii:
Cu lan +: atunci cnd ARN-ul are aceeai polaritate cu ARNm, sinteza proteinelor
putndu-se realiza utiliznd genomul ca atare;
Cu lan -: atunci cnd ARN-ul are polaritatea complementar ARNm i nu se poate
realiza sinteza proteinelor, dect prin transcrierea informaiei ntr-o caten
complementar.
Capsida. Capsida este nveliul virusului ce protejeaz acidul nucleic i este mai mult sau
mai puin conectat cu genomul. Capsida mpreun cu genomul formeaz nucleocapsida, mai
ales n cazul unei strnse relaii ntre cele dou componenete (myxovirusuri virusul rujeolei).
Capsida este format din uniti repetitive numite capsomere. Numrul acestora variaz, dar este
constant n cadrul aceleai specii. Capsomerele sunt sferice sau cilindrice i conin cteva
polipeptide. Capsida protejeaz acidul nucleic mpotriva degradrii. La toate virusurile, mai puin
la cele protejate de anvelop, capsida este responsabil de ataarea virusului la celula gazd i
determin specificitatea antigenic.
Anvelopa. Anvelopa care nconjoar capsida, la o serie de familii virale, este dependent de
membranele celulei gazd (nuclear sau celular, uneori cea a reticulului endoplasmatic).
Anvelopa are o structur lipoproteic, lipidele aparin membranei, proteinele aparin att gazdei,
ct i virusului i sunt integrate sub form de spicule (fig. 4.3). Virusurile care prezint anvelop
nu sunt adsorbite la suprafaa celulei gazd prin capsid, ci prin anvelop. ndeprtarea acesteia
cu ajutorul unor solveni organici sau detergeni reduce infectivitatea acestora.

Figura 4.2 Structura general a unui virus (dup

Kayser et al., 2005)

Figura 4.3. Componentele unui virus (dup

Kayser et al., 2005)

Alte componente virale. Enzime virale. Virusurile necesit un numr de enzime

diferite, n funcie de tipul de genom i modul de infecie. La unele specii virale, enzimele sunt
componente ale particulei virale. Ex. neuraminidazele necesare ptrunderii i eliberrii
myxovirusurilor; ARN-polimeraza ARN dependent, prezent la virusurile -; ADNpolimeraza la virusul variolei, ADN-polimeraza ARN-dependent (revers-transcripie) la virusul
47

hepatitei B i la retrovirusuri. Hemaglutinina. Unele virusuri sunt capabile de aglutinarea

eritrocitelor umane datorit existenei hemaglutininei la nivelul anvelopei, capabil de acest
proces. Hemaglutinina joac un rol esenial n adsorbia i ptrunderea n celula gazd.
4.2. Simetria virusurilor
n funcie de modul de dispunere a capsomerelor i de morfologia capsidei, virusurile pot
avea trei tipuri de simetrie:
Simetrie radiar (fig. 4.4). Virusurile cu simetrie radiar au aspect de icosaedru
(poliedru cu 20 de fee reprezentate de triunghiuri echilaterale). Numrul
capsomerelor virionului variaz ntre 32 i 252, n funcie de numrul
capsomerelor pentru fiecare latur a triunghiurilor (2 sau 6). Capsomerele
aceluiai virion trebuie s fie identice, att ca morfologie, ct i ca proprieti
antigenice i biologice. Prin purificare i cristalizare s-au putut obine imagini ale
diverselor virusuri.
Simetrie helical. Aceasta este prezent atunci cnd unul dintre axurile capsidei
este mai lung dect cellalt. Capsida se nfoar n jurul genomului sub form de
helix, crend o structur de tip cilindric.
Simetrie mixt (complex). Este prezent la bacteriofagi i la virusul variolei.
Virusul are aspect de cirea cu coad, capul avnd simetrie radiar i coninnd
genomul, iar coada are simetrie helical i ajut la introducerea genomului n
celula gazd.

Figura 4.4 Simetria virusurilor (http://dvm5.blogspot.ro/2010/11/introduction-history-of-viruses.html)

48

4.3. Clasificarea virusurilor

Cel mai vechi sistem de clasificare al virusurilor utiliza simptomatologia bolilor produse
de acestea. Acest sistem nu este corect tiinific, deoarece un virus poate provoca mai multe boli,
n funcie de esutul infectat. ncepnd cu anul 1966, virusurile au fost clasificate n ordine,
familii i genuri utilizndu-se urmtoarele criterii:
Tipul acidului nucleic:
ribovirusuri (virusuri cu ARN);
dezoxiribovirusuri (virusuri cu ADN);
Particularitile fizico-chimice ale genomului: genom mono- sau dublu catenar, liniar,
circular, segmentar;
Morfologia: simetria capsidei (helical, radiar, mixt), prezena sau absena anvelopei;
Strategia de replicare;
Structura i proprietile antigenice;
Tropismul:
afinitatea virusurilor pentru anumite gazde naturale (genotropism): virusuri ale
omului, animalelor, insectelor, plantelor, bacteriofagi i actinofagi;
afinitatea virusurilor pentru organe int (organotropism), esuturi (histotropism),
celule (citotropism):
virusuri respiratorii: virusul gripal;
virusuri dermotrope (cu afinitate pentru piele i mucoase): poxvirus;
virusuri neurotrope (cu afinitate pentru sistemul nervos central): virusul
turbrii i al poliomielitei;
virusuri organotrope (cu afinitate pentru organele interne): virusul febrei
galbene;
virusuri hematotrope (transmise prin snge): virusul hepatitei B;
virusuri dermoneurotrope (cu afinitate pentru piele i sistemul nervos
central): herpes virus;
virusuri pantrope (cu afinitate pentru celulele sistemului reticuloendotelial).
Denumirea tiinific a virusurilor utilizez urmtoarele sufixe:
ales pentru ordine ex. Nidovirales;
viridae pentru familii ex. Herpesviridae;
virinae pentru subfamilii ex. Alphaherpesvirinae;
virus pentru genuri ex. Herpesvirus.
O specie viral cuprinde un grup de virusuri care au aceeai informaie genetic i care
mpart aceeai ni ecologic. Speciile virale sunt desemnate, de regul, prin caractere
descriptive, ca de exemplu virusul imuodeficienei umane (HIV), cu subspeciile notate prin
numere. Se mai utilizez i denumiri rezultate prin combinaia unor litere i cifre (ex. SV40, MS 2
etc.).
49

4.4. Replicarea virusurilor (fig. 4.5)

Paii urmai n vederea multiplicrii virusurilor sunt urmtorii (fig. 4.6):
a. Adsorbia virusurilor la nivelul receptorilor membranari;
b. Ptrunderea virusului i decapsidarea lui;
c. Proliferarea componentelor virale;
d. Asamblarea componentelor virale;
e. Eliberarea virusului din celul.
Aa cum am menionat i mai sus, virusurile se multiplic doar n celule gazd vii. Paii
detaliai ai procesului sunt prezentai mai jos.
a. Adsorbia. Virionii pot infecta doar celule care prezint receptori membranari
compatibili. Cnd un virus ntlnete o astfel de celul, se adsoarbe fie prin intermediul
capsidei, fie prin intermediul anvelopei. Practic receptorii membranari sunt cei care permit
infectarea celulei.
Unele aspecte privind aceti receptori sunt elucidate. Acetia sunt proteine
transmembranare cu rol esenial n viaa celulei, mai ales n comunicarea intercelular. Se
cunoate faptul c receptorii CD4 sunt specifici HIV-ului, receptorii complementului (C3) sunt
specifici virusului Epstein-Barr. Cunoaterea structurii acestor receptori are un rol practic
deosebit de important. Pe de o parte, este important n vederea producerii de medicamente
antivirale menite s inhibe adsorbia virusului la celula gazd. Pe de alt parte, identificarea
genelor codificatoare ale receptorilor permit realizarea de animale transgenice susceptibile la
infecia cu virusul respectiv la care ele erau, n mod normal, rezistente. Un exemplu n acest sens
este obinerea de oareci transgenici susceptibili la virusul poliomielitei, care nu putea fi studiat
dect pe maimue.
b. Ptrunderea i decapsidarea virusului. Virusurile adsorbite la nivelul receptorilor
membranari ptrund n celul prin endocitoz. La virusurile cu anvelop, aceasta poate
fuziona cu membrana celular a gazdei, n celul ptrunznd doar nucleocapsida. Urmtorul
pas l reprezint decapsidarea, cu eliberarea acidului nucleic viral. Acest proces are loc prin
activarea enzimelor gazdei. Mecanismul exact de conservare a materialului genetic viral nu
este pe deplin elucidat.
c. Replicarea acidului nucleic. Se realizeaz diferit, n funcie de tipul de acid nucleic al
virusului.
Dezoxiribovirusurile: replicarea ADN-ului viral are loc n nucleul celulei gazd. Unele
virusuri (herpesvirusurile) conin propriile lor replicaze. Altele (poliomavirusurile induc
tumori) care nu au propriile lor replicaze codific polipeptide care modific polimerazele
gazdei pentru a replica propriul lor ADN. La hepadnavirusuri (provoac hepatita B)
materialul genetic const dintr-o secven de ADN monocatenar antisens i o scurt secven
de ADN sens. Celula infectat transcrie o molecul de ARN sens (catena matri) utiliznd ADN
antisens. Acest ARN este integrat n capsida virusului mpreun cu ADN polimeraza. Aceasta

50

sintetizeaz o caten de ADN antisens i pentru a stabiliza capetele genomului sintetizeaz o

scurt secven sens.
Ribovirusurile: din moment ce eucariotele nu posed enzime pentru replicarea ARNului, virsul trebuie s aduc el nsui ARN- polimerazele ARN-dependente. Acestea sunt
coninute n virion sau exist doar informaia codificat n genomul virusului. Virusurile care
conin ARN monocatenar sunt replicate n dou moduri, n funcie de polaritatea moleculei:
Cele cu polaritate +: ARN-ul funcioneaz precum ARNm, replicazele
putndu-se sintetiza rapid.
Cele cu polaritate -: ARN-ul trebuie s fie transcris ntr-o secven
complementar care s aib rol de ARNm. n acest caz, polimeraza pentru prima
transcripie exist n interiorul virusului.
n cazul ribovirusurilor monocatenare, indiferent de polaritate, sunt produse prima dat
molecule complementare, care vor fi transcrise n molecule fiice. Acestea din urm vor avea
aceeai polaritate cu a genomului din care proveneau.
Virusurile care conin ARN dublu catenar transcriu o caten sens de ARN care este
segmentat. Aceasta funcioneaz att ca ARNm ct i ca matri pentru sinteza ARN-ului
complementar. Virusurile acestea au nglobate ARN-polimerazele ARN-dependente.
Retrovirusurile, dei conin un genom ARN cu polaritate pozitiv, replicarea lor este
diferit. Genomul const din 2 molecule de ARN monocatenar sens i este transcris de reverstransciptaz n ADN complementar. Acesta devine bicatenar. Transcrierea din ADN n ARN
este utilizat att pentru sinteza de proteine, ct i pentru refacerea genomului viral.
Indiferent cum este obinut ARN m, acesta este utilizat pentru sinteza de proteine virale.
Sinteza este realizat cu informaie viral i cu componente celulare (ARNt, ribozomi, factoride
iniiere etc.). n urma sintezei, se obin 2 tipuri de proteine: capsidale (structurale, care apar spre
sfritul replicrii) i noncapsidale (enzime produse la nceputul replicrii virusului).
d. La sfritul replicrii, componentele virusului prezente n numeroase exemplare sunt
asamblate n particule virale noi. La unele specii, aceste particule pot fi acoperite de
anvelop.
e. Eliberarea virusurilor. n cazul virusurilor cu anvelop, odat cu formarea componentelor
acesteia, particulele virale sunt eliberate din celul.

51

Figura 4.5. Replicarea virusurilor n funcie de materialul genetic (dup Kayser et al., 2005)

52

Figura 4.6. Replicarea virusurilor

(https://en.wikipedia.org/wiki/Hepatitis_C_virus#/media/File:HepC_replication.png)

4.5. Patogeneza
Patogeneza se refer la factorii responsabili de originea i evoluia unei boli. n cazul
virusurilor, infecia se realizeaz pe cale digestiv sau prin mucoase. Virusurile se pot replica
doar la poarta de intrare (infecii localizate) sau pe cale sanguin, limfatic sau nervoas ajung s
se rspndeasc (infecii generalizate). n ambele cazuri, replicarea virusului induce leziuni
degenerative. Rspunsul imun poate contribui la eliminarea virusurilor prin distrugerea celulelor
infectate, dar acelai rspuns poate exagera simptomele bolii.
Transmiterea. Virusurile pot fi transmise pe orizontal (n cadrul unui grup de indivizi)
sau pe vertical (de la mam la ft).
Poarta de intrare. Cele mai importante pori de ptrundere a virusurilor sunt
reprezentate de mucoasa respiratorie i tractul digestiv. Epiderma intact reprezint o barier
mpotriva virusurilor, care pot ptrunde prin microtraume (aproape ntotdeauna prezente) sau
prin inoculri mecanice (insectele hemtofage).
Rspndirea virusului n organism. Exist dou tipuri de infecii:
Infecii locale. n cazul acestora, virusurile sunt rspndite de la o celul
la alta. Infecia i simptomele bolii sunt limitate la poarta de intrare. Spre
exemplu, rhinovirusurile (responsabile de unele rceli) se multiplic doar
n tractul respirator superior.
53

Infecii generalizate. n cazul acestora, virusurile sunt rspndite la

distan de poarta de intrare, prin intermediul sngelui sau limfei i ajung
la organele int. Odat ajunse, ncepe replicarea virusurilor i apariia
simptomelor bolii. Spre exemplu, enterovirusurile se multiplic la nivelul
intestinului, dar nu provoac simptome dect dac ajung n sistemul
nervos central sau n musculatur. O alt modalitate de rspndire este cea
neurologic, de la poarta de intrare de-a lungul nervilor pn la SNC
(virusul rabic).
Infecia organelor, organotropism. Infectarea unei celule gazd poate fi realizat doar
dac prezint pe suprafaa ei receptori specifici. Acest mecanism explic organotropismul
observat la virusuri. Totui, tropismul este doar aparent, este mai corect spus susceptibilitatea sau
rezistena celular (i deci a organelor).
Evoluia infeciei. Leziunile aduse organelor de ctre virusuri sunt n principal de natur
degenerativ. Inflamaiile sunt procese secundare. Severitatea simptomelor clinice depinde n
primul rnd de distrugerea provocat de virus (sau de sistemul imunitar). Majoritatea
componentelor virale sunt produse nainte de apariia simptomelor. De asemenea, infeciile pot
trece neobservate dac gradul de distrugere celular este nesemnificativ sau lipsete complet. n
astfel de cazuri, se vorbete de infecii subclinice, opuse celor simptomatice. Infeciile aparente
nu sunt acelai lucru cu infeciile latente, n care virusul nu se replic. Pe de alt parte, infeciile
pot fi exagerate, fie datorit complexelor pe care le formeaz particulele virale cu anticorpii, fie
datorit distrugerii celulelor infectate de ctre sistemul imunitar. Aceste procese devin patologice
cnd virusul nsui nu produce distrugerea celulei sau o produce ntr-un grad redus.
Agravarea infeciei virale cauzat de anticorpi (ADE). Procesul mbolnvirii poate fi
nrutit cnd virusurile reacioneaz cu anticorpi insuficient de muli. Se formeaz complexe
recunoscute de celule care n mod normal nu prezint receptori pentru virusul respectiv, n
schimb, prezint receptori pentru anticorp. n acest caz, anticorpii sporesc infecia.
Excreia virusurilor. Eliminarea noilor virusuri depinde de locul unde se replic virusul.
Spre exemplu, virusurile care infecteaz tractul respirator sunt elimintate n aerul expirat prin
picturi. n cazul infeciilor generalizate, nu doar organul int este implicat n excreia virusului,
ci i replicarea la poarta de intrare contribuie la eliminare. Din moment ce replicarea apare
naintea simptomelor, persoana infectat devine contagioas nainte de a fi bolnav propriu-zis.
Reaciile celulei gazd. Consecinele posibile ale infeciei virale asupra gazdei sunt:
Necroza: replicarea virusului duce direct la distrugerea celular.
Apoptoza: virusul iniiaz o cascad de reacii ce duc la moartea celular programat
(sinucidere), n cele mai multe cazuri ntrerupnd ciclul de replicare a virusului.
Infecii nonnecrotice: replicarea ca atare a virusului nu duce la distrugerea celulei, dei
aceasta poate avea loc, ca urmare a rspunsului imun.
Infecii latente: genomul viral se gsete n interiorul celulei, dar nu se replic, nici nu
distruge celula.

54

Transformarea tumoral: infecia viral transform celula gazd ntr-o celul

cancerigen, replicarea virusului poate avea sau nu loc, n funcie de virus i celula gazd.
Necroza: moartea celulei gazd apare, eventual, dup infecia iniial cu multe specii
virale. Aceast distrugere a celulei implic, de obicei, producerea de componente virale.
Replicarea viral combinat cu distrugerea celular este denumit ciclul litic viral. Distrugerea
celulei, necrotic sau apoptotic, este motivul apariiei simptomelor n cazul virozelor, efect
cumulat cu cel produs de sistemul imunitar. Aceste efecte observate la celulele din culturi
celulare se numesc efect citopatic(CPE) i pot fi utilizate n diagnostic. Efectele includ:
detaarea celulelor de substrat sau de celelalte celule, formarea de celule multinucleare gigantice,
apariia de incluziuni i vacuole. Acestea din urm apar ca urmare a acumulrii de componente
virale. Scopul acestor transformri este replicarea virusurilor, moartea celulei aprnd ca o
consecin secundar.
Apoptoza: celulele posed mecanisme naturale, care iniiaz distrugerea programat prin
transformri citoplasmatice i nucleare. Infeciile cu unele virusuri pot duce la apoptoz.
Replicarea virusurilor trebuie s fie ncetinit pentru ca apoptoza s precead nmulirea
virusurilor. Corpul elimin rapid celulele apoptotice, nainte de apariia proceselor inflamatorii.
Apoptoza este considerat astfel un proces de aprare, care poate fi depit de unele virusuri.
Infeciile latente. n acest tip de infecie, virusul este integrat n celul, dar nu are loc
replicarea. Celula nu este afectat i nu se manifest simptomele bolii. Acest tip de infecii este
ntlnit, n particular, la virusurile herpetice, care pot rmne n stare latent mult timp n
organism. Latena protejeaz virusurile de activitatea sistemului imunitar. Totui, se poate iniia
ciclul litic care duce la apariia simptomelor i multiplicarea virusurilor.
Transformarea tumoral. Un numr de infecii virale nu duce la moartea celulei gazd,
ci mai degrab conduce la transformarea tumoral a ei. n urma infeciilor cu dezoxiribovirusuri
tumorale, tipul de celul infectat determin fie cancerizarea, fie replicarea virusurilor, fie
iniierea ciclului litic. n urma infeciilor cu ribovirusuri, apare replicarea virusurilor, dar celula
i pstreaz viabilitatea sau replicarea este blocat.
4.6. Mecanismele de aprare
Mecanismele de aprare ale organismului mpotriva infeciilor virale pot fi clasificate n
dou categorii. Mecanismele de aprare nespecifice sunt cele mai importante i sunt reprezentate
n primul rnd de interferoni. n afara efectelor asupra creterii celulare, a rspunsului imun i al
imunoreglrii, aceste substane pot construi o barier antiviral pentru o scurt perioad de timp.
Interferonii nu afecteaz direct virusurile, ci induc un mecanism de rezisten celular care
interfereaz cu etapele replicrii virusului. Mecanismele specifice includ imunitatea mediat
umoral i imunitatea mediat celular.
Rspunsul imun nespecific. Este activat odat cu ptrunderea virusului n organism.
Unul dintre cele mai importante procese este fagocitoza. Granulocitele i celulele Natural Killer
55

sunt principalele fagocite. Modificarea pH-ului sau febra pot bloca unele etape ale replicrii
virusurilor.
Interferonii sunt substane de natur proteic produse de sistemul imunitar. Datorit
ingineriei genetice, acetia pot fi produi n cantiti mari. Principalele efecte biologice ale
acestora sunt antivirale i antimitotice. O serie de substane pot induce producerea interferonilor
(ARN dublu catenar, nucleotide naturale sau artificiale, bacteriile, diferii compui cu mas
molecular mic i virusuri). Toate aceste substane determin activarea genelor codificatoare de
interferoni. Acetia inhib replicarea viral.
Rspunsul imun specific. Include att mecanisme mediate umoral (producerea de
anticorpi), ct i mecanisme mediate celular (limfocite T Helper i citotoxice). n general,
parazitarea gazdei de ctre virusuri determin exprimarea la nivelul membranei celulare a
antigenelor virale. Aceasta induce un rspuns imun mediat celular.
Imunitatea mediat umoral. Anticorpii atac doar virusurile aflate extracelular. Astfel,
odat stabilit infecia ntr-un organ, aprarea organismului nu mai ine de anticorpi. Imunitatea
mediat umoral este capabil s previn generalizarea infeciei doar dac anticorpii sunt prezeni
din primele stadii ale bolii (indui prin vaccinare). IgG i IgM sunt activi n snge, n timp ce IgA
sunt activi la nivelul mucoaselor. Efectul de neutralizare al antigenelor este maxim cnd
anticorpii reacioneaz cu situsurile de legare la receptori ai virusurilor, mpiedicnd astfel
adsorbia acestora.
Imunitatea mediat celular. Acest tip de imunitate este pe de parte cel mai eficient cnd
vine vorba de infecii virale. Limfocitele T recunosc celule infectate cu virusuri i le distrug.
Observaiile precum c pacienii cu deficiene ale imunitii umoral rezist mai bine infeciilor
virale dect cei cu deficiene ale imunitii mediate celular, subliniaz importana limfocitelor T.
4.7. Prevenire
Cele mai importante msuri profilactice n faa potenialelor infecii virale sunt
considerate vaccinrile active. Vaccinurile ce conin virusuri inactivate sunt mai puin eficiente
dect cele care conin virusuri atenuate. Imunizarea pasiv cu imunoglobuline este utilizat doar
n cazul postexpunerii, ca msur profilactic.
Imunizarea activ. Antigenul (virusul) este introdus n corp, fie inactivat, fie atenuat dar
capabil de replicare, pentru a stimula sistemul imunitar.
Vaccinurile inactivate. Imunitatea dobndit n urma administrrii de virus inactivat este
n principal umoral i nu este de durat. Din acest motiv trebuie repetat vaccinarea. Cele mai
importante astfel de vaccinuri sunt antigripal, antirabic, antihepatitei A i B. Unele vaccinuri
inactivate conin cele mai importante antigene ale virusului respectiv. Acestea induc o imunizare
mai eficient i sunt mai bine tolerate.
Vaccinuri atenuate. Aceste vaccinuri confer o imunizare de durat i mai eficient doar
dup o singur doz, deoarece virusurile coninute sunt capabile s se replice n organismul
gazd, inducnd i un rspunsul celular. Aceste vaccinuri sunt preferabile cnd sunt disponibile.
56

n cazul acestora, exist totui riscuri, n ceea ce privete stabilitatea lor, potenialul crescut de
contaminare cu alte virusuri, ce duce la apariia de noi tulpini virulente.
Vaccinuri cu virusuri recombinante. Din moment ce este nevoie de un numr mic de
proteine antigenice pentru a induce imunizarea, se pot utiliza vectori virali pentru obinerea de
vaccinuri. Vectorul viral cel mai potrivit este o tulpin cel mai puin virulent. Pentru vector nu
trebuie s existe imunizare anterioar. Virusul utilizat ca vector va integra genele codificatoare
de antigene de la virusul virulent i va exprima proteinele imunogene. Astfel de virusuri nu s-au
aprobat nc pentru a fi folosite pe om. Vaccinul antirabic utilizat pentru imunizarea animalelor
este unica aplicaie practic de acest tip.
Vaccinuri ADN. Din moment ce ADN-ul simplu poate fi inserat n celulele eucariote i
informaia respectiv s poat fi exprimat, ADN-ul ce codific proteinele virale poate fi utilizat
ca surs de vaccin. Avantajul acestor vaccinuri, atualmente n stadiu de testare, include uurina
producerii i stabilitatea ridicat.
Indicaiile vaccinrilor sunt generale, selective sau elective.
Vaccinrile generale privesc ntreaga populaie adult sau infantil i se efectueaz dup
un program guvernamental care ia n considerare gravitatea i prevalena infeciilor dintr-o
anumit ar. n Romnia, n aceast categorie intr vacinurile: anti-tuberculos, anti-hepatitic B,
anti-tetanic, anti-difteric, anti-pertussis, anti-poliomielitic, anti-rujeolic.
Vaccinrile selective vizeaz grupe de indivizi cu risc ridicat de a contracta o infecie.
Din aceast categorie intr vaccinul anti-hepatitic B i anti-gripal pentru personalul medical.
Vaccinrile elective vizeaz pacienii la care anumite infecii sunt mai grave sau mai
frecvente dect la restul populaiei. Spre exemplu, vaccinarea anti-rabic a persoanelor mucate
de animale.
Calea de administrare a vaccinurilor este, n general, parentereal. Aceast cale nu
stimuleaz ns producerea de IgA secretori.
Complicaiile vaccinrilor sunt n principal:
a) Boala infecioas indus prin vaccinuri vii atenuate la persoane cu deficiene aprrii
imune. Se cunoate efectul teratogen al vaccinului antirubeolic administrat la gravide.
b) Accidentele alergice. Reaciile anafilactice se pot datora impuritilor antigenice
provenite din substraturile de cultivare ale tulpinilor vaccinante (ou embrionat, antibiotice
din mediul de ntreinere al culturilor celulare) sau chiar antigenelor virale.
Contraindicaiile vaccinrilor sunt temporare i definitive. Contraindicaiile temporare:
sarcina (contraindic vaccinurile atenuate i timp de 3 luni dup vaccinare este contraindicat
sarcina); bolile febrile acute; este contraindicat vaccinarea sugarilor aflai sub protecia
anticorpilor materni. Contraindicaiile permanente: imunodeficienele i sensibilizrile atopice.
Imunizarea pasiv. Acest tip de imunizare implic introducerea de anticorpi. Preparatele
pentru imunizri pasive sunt: seruri hiperimune heterologe brute 1 (expun la riscul de oc
anafilactic i al bolii serului); seruri hiperimune heterologe purificate i concentrate (riscul
11

donatorul este un organism animal

57

ocului anafilactic rmne); imunoglobuline umane hiperimune specifice (reduc riscurile

alergice, dar sunt scumpe); gamaglobuline umane standard (conin anticorpi variai la titruri
medii i joase i sunt indicai doar n profilaxie).Protecia conferit de acestea este de scurt
durat i este eficient doar n cazul viremiilor. Imunizarea pasiv este administrat de obicei ca
msur profilactic postexpunere (dup o infecie sau o situaie ce implic riscul infectrii).
4.8. Chemoterapia
Substanele care pot inhiba diferitele etape ale replicrii pot fi utilizate ca ageni
chemoterapeutici. n termeni practici, este mai important inhibarea sintezei acizilor nucleici
dect a proteinelor virale. Principalele obstacole implicate sunt nivelul sczut de specificitate ai
agenilor (efectele toxice datorit afectrii metabolismului) i necesitatea nceperii tratamentului
foarte devreme n ciclul infecios.
Problemele ntmpinate n utilizarea chemoterapeuticelor. Replicarea viral este complet
integrat n metabolismul gazdei. Virusul suplinete doar informaia genetic. Aceast asociere
strns ntre virus i gazd este principala surs a dificultilor ntmpinate. Orice interferen cu
sinteza viral poate afecta i funcionarea celulei. Intervenia specific este posibil doar n cazul
virusurilor care-i codific propriile enzime ce vor reaciona asupra substratului viral. O alt
problem este necesitatea administrrii terapeuticelor foarte devreme, naintea apariiei
simptomelor. n tabelul de mai jos, sunt prezentate cteva dintre cele mai importante antivirale.

Medicament
Aciclovir
Amantadin

Cidofovir
Entecavir

Famciclovir
Interferon-alfa

Lamivudin

Tabelul 4. Medicamente antivirale (dup Beers, 2011)

Indicaii
Reacii adverse
herpes bucal, genital, herpes
efecte secundare minime
zoster, vrsat de vt
grip cu virus de tip A
grea, nervozitate, ameeal,
tulburri de vorbire, tulburri
de somn, pierderea
echilibrului
infecii cu citomegalovirus
leziuni renale, scderea
leucocitelor
hepatit B cronic
ameeal, grea, oboseal,
durere de cap, diaree,
dispepsie
herpes bucal, genital, herpes
efecte secundare minime
zoster, vrsat de vt
hepatit B i C
simptome de tip gripal,
inhibiia mduvei osoase,
depresie sau anxietate
HIV, hepatit B cronic,
stare de ru, vrsturi, dureri
58

Ribavirin

hepatit C

de stomac, diaree, durere de

cap, dureri ale articulaiilor,
dureri ale muchilor i
discomfort, tuse, iritaie sau
secreie nazal, febr
distrugerea hematiilor, anemii

4.9. Diagnosticul de laborator

Urmtoarele metode pot fi utilizate pentru obinerea unui diagnostic de laborator:
Izolarea virusului prin cultivarea ntr-o gazd compatibil. De obicei se folosesc
culturi celulare, mai rar animale de laborator sau ou embrionate.
Detectarea direct a virusului. Metodele serologice, de biologie molecular i
microscopie electronic sunt utilizate pentru identificarea virusurilor sau componentelor
virale n mod direct.
Serodignosticul implic punerea n eviden a anticorpilor IgG i IgM n serul
pacienilor.
Indicaii i metode. Procedurile ce implic diagnosticul de laborator pentru detectare
virusurilor sunt foarte scumpe i necesit un timp destul de mare. De aceea, este important de
cntrit dac este neaparat nevoie de confirmarea laboratorului n punerea diagnosticului.
Medicul care urmeaz s pun diagnosticul trebuie s ia n considerare toate aspectele posibile.
Diagnosticul de laborator este justificat doar dac tratamentul pacientului ar fi influenat de
diagnosticul precis sau informaiile sunt necesare ntr-un studiu epidemic.
Izolarea virusului prin cultivare
Culturile celulare primare pot fi obinute utiliznd diverse esuturi proaspete. Totui,
aceste celule se pot divide doar de un numr limitat de ori. De aceea s-au pus la punct tehnici de
obinere a unor celule hibride care se multiplic la infinit. Pentru scopuri dignostice, celulele sunt
cultivate ntr-un singur strat numit film celular ce ader la o suprafa de sticl sau plastic.
Replicarea virusurilor n culturi celulare determin modificri morfologice ale celulelor, aanumitul efect citopatic. Aceste modificri sunt adesea suficiente pentru diagnostic.
Probele trebuie s fie recoltate n funcie de specia viral presupus i ct mai devreme
posibil. De asemenea, condiiile de recoltare trebuie s fie ct mai sterile. Transporul probelor
trebuie fcut rapid i n cutii frigorifice, deoarece virusul nu rezist pre mult n afara celulei
gazd. Laboratorului trebuie s-i fie oferite ct mai multe informaii privind cursul i stadiul
bolii. Datele clinice i un presupus diagnostic pot ghida laboratorul spre identificarea unui
anumit virus. Cutarea oricrui tip de virus potenial prezent n prob nu este fezabil din motive
financiare i de eficien.
Procesarea materialului de ctre laborator. nainte ca celulele gazd s fie inoculate,
materialul din probe trebuie s fie supus unor tehnici de ndeprtare a posibilelor bacterii

59

(antibiotice, centrifugare, uneori filtrare). Toate aceste tehnici cresc riscul pierderii materialului
viral, din acest motiv sterilizarea nu trebuie s fie prea riguroas.
Identificarea virusului este bazat n primul rnd pe modificarea celulelor gazd, apoi se
realizeaz examene serologice utiliznd anticorpi cunoscui i microscopie imunoelectronic.
Detectarea direct a virusurilor
Prin aceast metod se identific de obicei particule virale i nu virusul complet. Scopul
este identificarea direct a virusurilor n materialul recoltat de la pacient fr cultivare anterioar.
Virusurile prezente n fluidele seroaselor, cum ar fi virusul herpetic sau al varicelei pot fi
detectate la microscopul electronic. Antigenele virale pot fi identificate n secreii prin reacia
imunologic enzimatic, aglutinare pasiv sau cu anticorpi imunofluoreceni. Genomul viral
poate fi identificat prin hibridizare utiliznd ADN sau ARN complementar cu cel viral.
Detectarea virusului prin amplificare biochimic reacia n lan a polimerazei (PCR).
Aceast metod este una dintre cele mai sensibile. n primul rnd, este extras acidul nucleic de la
pacient. Orice genom riboviral este transcris n ADN de ctre revers-transcriptaz. Acest ADN,
precum i cel extras de la dezoxiribovirusuri este replicat in vitro cu ajutorul unei polimeraze. Se
introduce n proba supus polimerizrii ADN-ul de la pacient, ADN-polimeraz termorezistent,
primeri (secvene oligonucleotidice complementare cu ADN-ul ce urmeaz a fi replicat) i
nucleotide. Prin nclzirea probei la 95 C ADN-ul se denatureaz (se rup legturile de H). Se
coboar temperatura treptat pn la 75 C, moment n care ADN-polimeraza adaug primerii
complementari i n continuare nucleotide, realiznd replicarea ADN-ului. Ciclul acesta de
nclziri i rciri repetate duce la obinerea unei cantiti de ADN de cteva mii de ori mai mare
dect iniial. ADN-ul astfel obinut este supus hibridizrii.
Serodignosticul
Dac o infecie viral induce un rspuns mediat umoral, anticorpii rezultai pot fi utilizai
n serodiagnostic. Interpretarea datelor serologice se confrunt cu problema deciderii dac
anticorpii sunt produi recent sau mai demult. 2 criterii pot ajuta n acest sens: detectarea IgM
(fr IgG) demonstreaz prezena unei infecii primare. Testul pentru detectarea IgM se face la
nceputul bolii. Identificarea mai trziu att a IgG, ct i a IgM confirm infecia primar. O
cretere de 4 ori a titrului anticorpilor IgG n 10-14 zile de la debutul infeciei sau o scdere
identic mai trziu reprezint, de asemenea, o confirmare.

60

Figura 4.8. Reacia de polimerizare n lan (dup Kayser, 2005)

61

Curs 5 Virusologie partea special

n tabelul de mai jos este prezentat clasificarea celor mai importante virusuri. n cele ce
urmeaz, vom discuta o parte din acestea, n funcie de clasificarea din tabel.
Tabelul 5. Clasificarea virusurilor
Acidul
Simetria Anvelop
Familia
Genul
Exemple
nucleic capsidei
importante
Papillomaviridae
Papillomavirus
HPV
Hepadnaviridae

Orthohepadnavirus

VHB

Herpesviridae

Simplexvirus
Varicellovirus

Cytomegalovirus

virusul herpetic
virusul varicelozosterian
virusul EpsteinBarr
cytomegalovirus

Poxviridae

Orthopox

virusul variolei

Picornaviridae

Enterovirus
Hepatovirus

virusul
poliomielitei
VHA

Reoviridae

Rotavirus

Rotavirus

Togaviridae

Rubivirus

virusul rubeolei

Flaviviridae

Hepacivirus

VHC

Orthomyxoviridae

Influenzavirus

Paramyxoviridae

Rubulavirus
Morbilivirus

virusurile
gripale A, B, C
virusul urlian
virusul rujeolei

Rhabdoviridae

Lyssavirus

virusul rabiei

Filoviridae

Filovirus

virusul Ebola

Retroviridae

Lentiviridae

HIV 1 i 2

ADN
radiar

Lymphocryptovirus

mixt

radiar

+
ARN

helical

62

6.1.

Virusuri cu ADN

HPV- Human Papilloma Virus

HPV-ul este un virus care provoac o boal dermatologic, cutanat; prezint peste 150
de tulpini diferite izolate pn n prezent, avnd i o variant genital; 90% din populaia
globului are o form sau alta de HPV.
Virusul HPV (fig. 5.1) se manifest prin excrescene n diferite zone ale corpului,
condiloame sau veruci. Infecia cu HPV este cea mai comun boal cu transmitere sexual, de
origine viral, transmindu-se prin contact genital (sex vaginal, oral, anal) i, de asemenea, prin
contact tegumentar.
n rile Europei de vest, cancerul de col utern se plaseaz pe locul IV printre neoplaziile
maligne ale femeii.Cancerele colului uterin sunt, n proporie covritoare, cancere epiteliale.
Papilloma virusurile aparin familiei Papillomaviridae care include i virusurile:
Papilloma, Polyoma 40, Polyomavirus, Vasmolating simian. HPV-ul este un virus cu peste 150
de tulpini diferite. Au fost descrise mai mult de 45 de tipuri. Virusurile determin la om: veruci
vulgare, veruci plantare, condilomatoza vaginal, papilomul laringian juvenil etc. Tipurile 16,
18, 31, 33, 35 par a fi cu mare probabilitate implicate n carcinogeneza colului uterin.
Patogenez. Semnele specifice n infecia cu HPV sunt direct condiionate de tipul de
virus i de localizarea infectiei: leziunile cutanate (fig. 5.4), leziunile mucoasei (fig. 5.2), alte
localizri ano-genitale se pot intlni la nivelul vaginului (fig. 5.3), vulvei, perineului, canalului
anal i penisului. Localizrile extragenitale se pot intlni la niveul mucoasei orale i laringiene
sub forme de condiloame bucale si papilomatoza florid localizata la nivelul buzelor mucoasei
linguale, gingivale i palatine.
Majoritatea persoanelor infectate cu HPV nu prezint simptome i de aceea, multe
persoane nu tiu c sunt infectate i pot transmite virusul i partenerului sexual. Virusul triete
n piele sau mucoase i, de regul, nu cauzeaz nici un simptom. Nu toat lumea care are virusul
va avea i negi vizibili. Aceti negi pot aprea i ntr-o form puin crescut, pot fi plai sau greu
vizibili.
Semne de boal ale leziunilor colului uterin inclusiv ale cancerului: scurgeri albeleucoreea, scurgeri roii-hemoragice, durerea.
Transmiterea. Se poate realiza direct, prin contact sexual sau chiar prin autoinoculare.
La femei se localizeaz n regiunea vulvo-perineal, pe pereii vaginului sau la nivelul colului
uterin. La brbat, principala localizare este cea penian, n special n anul balano-prepuial.
Transmiterea n localizrile genito-anale, are loc, probabil, n exclusivitate prin contact sexual.
Infecia ar implica peste 10% din femeile care au peste 35 de ani.
Diagnostic. Procentul vindecrii n funcie de stadiile boli este demonstrativ pentru
importana diagnosticului precoce: n stadiul preinvaziv ansele de vindecare sunt aproape de
100%, n stadiul I vindecarea scade n jurul a 75%, ca n stadiile avansate, procesul vindecrii s
fie mult redus.
Examenul citologic Papanicolau reflect modificrile patologice celulare din infeciile
cervicale. Alte diagnostice: clinic, colposcopic, colpomicroscopic si histopatologic.
63

Tratament. n cancer col uterin: radioterapia, tratament chirurgical, chimioterapia. Multe

veruci, cele comune, dispar de la sine, n decurs de 1-2 ani. Verucile genitale sunt persistente i
contagioase, iar medical se prefer s le ndeprteze chirugical sau s le combat cu
medicamente. Pot fi ndeprtate prin aplicare de substane chimice, secionate, crioterapie sau
ardere cu laser. Imiquimoda este o crem folosit pentru tratamentul verucilor genitale.
mbolnvirea se produce n egal msur la brbai i femei, poate s apar la orice vrst
i s cuprind orice organ. n funcie de sex, exist ns localizri predilectice, iar n funcie de
vrst, exist anumite perioade din via cnd riscul de mbolnvire este mai mare.

Figura 5.1. Virusul papilloma uman

microscop electronic
(http://www.mvadmakers.com/papilloma/demo/pagine2.php?l=1&m=3&ID_art=4)

Figura 5.2. Leziuni cutanate produse de HPV

(http://www.njkb120.com/pic/2115_2.html)

Figura 5.3. Col uterin afectat de HPV

(http://www.mvadmakers.com/papilloma/demo/pagine2.php?l=1&m=3&ID_art=4)

Figura 5.4. Leziuni cutanate produse de HPV

(http://www.hiv.va.gov/provider/imagelibrary/hpv.asp?post=1&slide=139)
64

Virusul hepatitei B
Hepatitele virale sunt boli sistemice care afecteaz ficatul. Evoluia infeciei variaz de la
formele subclinice pn la formele manifestate cu stare de ru, anorexie, grea, vrsturi, icter i
com prin insuficien hepatic acut. Pentru a se instala aceasta din urm, trebuie s fie distruse
peste jumtate dintre hepatocite. Majoritatea hepatitelor sunt produse de virusuri; cele mai
importante sunt n numr de cinci:
virusurile hepatitei A (VHA) i al hepatitei E (VHE) sunt asemntoare fizic i biologic.
Sunt virusuri fr anvelop, cu simtrie radiar i cu ARN. Produc hepatite acute
autolimitate. Aparin unor familii virale diferite.
virusurile hepatitei B (VHB) i C (VHC) aparin unor familii virale diferite, sunt virusuri
cu anvelop, care pot da infecii persistente cu potenial evolutiv spre hepatit cronic sau
cancer hepatic.
virusul hepatitei D (VHD) este un virus cu ARN defectiv, infecteaz doar mpreun cu
VHB.
Hepatitele virale sunt nsoite de creteri importante ale concentraiei transaminzaelor
serice: alaninaminotransferaza i aspartat aminotransferaza.
Virusul hepatitei B aparin familiei Hepadnaviridae. Este un virus cu simetrie radiar,
prezint ADN i o anvelop. Aceasta din urm conine Ag HBs, iar n capsid se gsesc Ag HBc
i Ag Hbe (fig. 5.5). Virusul hepatitei B nu poate fi cultivat.

Figura 5.5. Structura virusului hepatitei B

(https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Hepatitis_B_virus_v2.svg)

Figura 5.6. Distribuia geografic a hepatitei B cronice

(http://virology-online.com/viruses/HepatitisB.htm)

Patogenez. Boala are o perioad de incubaie cuprins ntre 45 i 160 de zile (n medie
100 de zile). De obicei, simptomele apar la 30-180 de zile de la expunerea la virusul hepatic B,
dar trebuie spus ca jumtate dintre persoanele infectate cu acest virus nu vor prezenta nici un
semn de infecie. Faza acut a hepatitei B genereaz un set de simptome, acest fapt ns nu este
valabil n cazul infeciei cronice, care, cel mai frecvent, este asimptomatic. Persoanele care
65

sufer de hepatita acut B pot experimenta simptome de grip accentuate de grea, anorexie,
indispoziie fizic i oboseal, durere n zona ficatului i icter. Simptomele hepatitei acute
dureaz, n medie, ntre 1-3 luni. n aceast perioad, persoana infectat este foarte contagioas.
Virusul nu este foarte rezistent n mediul obinuit se consider ca apa fierbinte, utilizat n
maina de splat n mod normal, este capabil s omoare virusul de pe haine, i de asemenea
detergentul de vase i apa cald i vor elimina pe cei de pe tacmuri.
n faza acut, hepatita B genereaz simptome de o severitate care variaz de la una
minim, asimptomatic pn la manifestri fatale. Statisticile sugereaz c peste o treime din
persoanele infectate nu prezint simptome, la acetia infecia considerndu-se tcut. O alt
treime a persoanelor infectate cu virusul hepatic B prezint simptome similare cu cele generate
de o grip: slbiciune fizic, dureri, cefalee, febr, lipsa poftei de mncare, diaree, icter, grea i
vrsturi. Iar o ultim categorie a persoanelor infectate va prezenta simptome mai severe, care se
vor manifesta perioade mai lungi de timp. Pe lng simptomele asemntoare celor provocate de
grip, mai pot aprea dureri abdominale puternice i icter accentuat. Icterul apare ca i consecin
a faptului c ficatul se afl n incapacitatea de a elimina bilirubina (un pigment care, n parametri
mai ridicai dect cei normali, cauzeaz nglbenirea pielii i a albului ochilor) din snge.
Imunitatea i cronicizarea. La gazda normal imunologic, dei forma de boal este mai
sever, rspunsul imun ajunge progresiv eficient. Aproxiamtiv 10% din pacieni nu elimin
virusul din hepatocite, infecia devine persistent i sngele rmne infecios pentru tot restul
vieii. Uneori leziunile hepatice duc pn la hepatit cronic, alteori pot rmne asimptomatice.
Vrsta la care a fost contractat infecia influeneaz evoluia. Copiii infectai perinatal devin n
procent de 90-95% purttori de Ag HBs comparativ cu 23% cnd infecia este contractat ntre 1
i 3 ani de via i numai 3% cnd infecia survine la adultul tnr.
Complicaiile tardive ale hepatitei B sunt grave: ciroze hepatice, carcinom hepatic.
Diagnosticul de laborator. Impune analiza antigenemiei i a serodiagnosticului. Se
utilizeaz variante ale testului ELISA. Antigenemia HBs indic infeciozitatea sngelui n boal
acut, boal cronic sau portaj. Antigenemia Hbe n aceleai circumstane indic o contagiozitate
periculoas prin snge i, grav, prin secreii.
Anticorpii anti-HBc semnific boal acut sau cronic. n cazurile rare cnd Ag HBs nu
este detectat pentru c a disprut naintea debutului bolii, doar prezena IgM anti-HBc rezolv
corect diagnosticul. Prezena anticorpilor anti-HBs seminifc imunitatea la reinfecie, iar
prezena anticorpilor anti-Hbe indic un potenial infecios redus al sngelui.
Tratament. Evoluia natural a hepatitei cronice B este ctre ciroz hepatic i cancer,
prin urmare, principalul scop al tratamentului este de a stopa aceast evoluie, eradicarea
virusului fiind un el foarte dificil de obinut. Pe termen scurt, tratamentul se orienteaz ctre
obinerea urmtoarelor:
inhibiia replicrii virale;
normalizarea valorilor transaminazelor;
seroconversia AgHBe i apariia Ac anti HBe;
ncetinirea/regresia fibrozei.
66

n prezent, n Romnia se folosesc n tratarea infeciei cu virus hepatic B:

A) medicamente cu efect antiviral si imunomodulator:
A.1. IFN (interferon) standard
A.2. IFN (interferon) pegilat
B) medicamente cu efect antiviral
B.1. Lamivudina
B.2 Adefovir
B.3. Entecavir
Transmitere. Infecia cu hepatit B apare cnd snge infectat intr n organismul unei
persoane neinfectate. Este de asemenea transmis prin sex neprotejat (fr prezervativ) i, foarte
frecvent, de la o mama infectat la copil n timpul naterii. Exista cteva grupuri care prezint un
risc ridicat de a contacta hepatita B:
persoane cu parteneri sexuali multipli sau diagnosticate cu boli cu transmitere sexual;
copii nscui din mame infectate;
personal al spitalelor sau pacieni internai pe perioade lungi n spitale;
persoane care au contact prelungit cu persoane infectate (familii, prieteni);
receptori ai transfuziilor de snge;
utilizatori ai drogurilor injectate;
persoane care lucreaz n sau sunt ncarcerate n nchisori;
persoane ale cror snge ar fi putut intra n contact cu saliva unei persoane infectate cu
virusul hepatic B;
persoane care cltoresc n ri cu prevalen ridicat de hepatita B;
pacieni dializai.
Profilaxie. Vaccinul este disponibil din 1982 i se consider c prentmpin infectarea
cu virusul hepatic B i a celorlalte infecii asociate cu acesta. Vaccinul mpotriva hepatitei B
produce niveluri eficiente de anticorpi mpotriva virusului hepatic B la majoritatea adulilor,
copiilor i nou-nscuilor. Schema de vaccinare cel mai frecvent utilizat este de 3 injecii
intramusculare administrate astfel: prima doza, a doua doza la o lun de la cea precedent, i cea
de a treia doz la 6 luni de la prima.
Ca orice vaccin, prezint i efecte adverse. Acestea sunt cauzate de aluminiul
(ENGERIX-B) i de mercurul (Tiomersal) (EUVAX-B) prezente n compoziia lor. Un studiu
arat c din 850.000 persoane vaccinate, 41 au semnalat reacii adverse (crize convulsive, pareze
faciale, reticulopatie, mielit, neuropatie ocular) (Shaw et al., 1988 n Todea-Gross, 2012). n
unele ri s-e renunat la vaccin, fiind administrat doar la cererea prinilor.
Alte ci de prevenire:
utilizarea corespunztoare a prezervativelor de fiecare dat cnd facei sex cu un partener
instabil;
administrarea imunoglobulinei antihepatit B (HBIG) nou-nscuilor din mame infectate
i vaccinarea acestora la 12 ore dup natere;
evitarea drogurilor injectate (a acelor sau a seringilor folosite);
67

evitarea utilizrii de ctre mai multe persoane a unor intrumente care ar putea avea snge
pe ele: aparate de ras, periue de dinti etc.;
evitarea efecturii de tatuaje sau piercinguri n locaii dubioase, care nu prezint
ncredere.
Virusul Epstein-Barr
Numele virusului Epstein Barr provine de la cei doi anatomo-patologi care l-au
descoperit: sir M.A. Epstein (1921-) i Y.M Barr (1932-). Virusul afecteaz ADN-ul celulelor
gazd i face parte din grupa Herpesviridae, subfamilia Gammaherpesvirinae, genul
Lymphocryptovirus, cu specia-tip virusul herpetic uman 4. Acesta este responsabil de producerea
mononucleozei infecioase i este implicat n apariia unor cancere: limfomul Burkitt sau boala
Hodgkin, anumite cancere nazale i faringiene i alte limfoame la persoanele cu SIDA. Virusul
acioneaz pe limfocitele B. Infecia este foarte frecvent: n Statele Unite aproximaiv 50% din
copii de 5 ani, i aproape 95% din adulu au avut o infecie cu EBV.
Simptomele sunt similare cu cele ale rcelii comune sau ale unor boli virale uoare.
Infecia se transmite prin srut sau contact intim de alt tip cu persoane infectate cu EBV. Se
consider c genele virale modific ciclul de cretere al celulelor infectate i determin
transformarea malign a acestora. EBV a fost asociat i cu sindromul de oboseal cronic, ns
dovezile n acest sens sunt insuficiente i controversate.
Prin mononucleoz se nelege prezena unui numr crescut de leucocite mononucleare
n snge (monocite i limfocite). Mononucleoza infecioas sau febra glandular provin de la
afecteaz ganglionii limfatici, simetric, n special retrocervicali, axilari i inghinali. Categoria de
pacieni vizat de acest virus este cea a adolescenilor i tinerilor, n special. Dup o period de
incubaie de 5-7 zile, apare limfadenopatie, febr, cefalee, faringit, fatigabilitate i scderea
apetitului. n unele cazuri poate fi afectat ficatul, aprnd o hepatit sau poate fi afectat splina
provocnd splenomegalie. Pot aprea deasemenea complicaii nervoase (encefalit, convulsii,
neuropatie periferic, paralizie de nervi cranieni, psihoz) i hematologice (granulocitopenie,
tombocitopenie). Simptomele pot persista cteva sptmni dup vindecare. Tratamentul este n
principal simptomatic.
Prin limfom se nelege o tumor malin a ganglionului limfatic care include boala
Hodgkin i limfoamele non-hodgkiniene. Acestea sunt proliferri maligne ale celulelor limfoide
n regiuni ale sistemului imun, incluznd ganglionii limfatici, mduva osoas, splina, ficatul i
tractul gastro-intestinal, cu speran de supravieuire de la cteva luni la civa ani. Simptomele
includ adenopatie periferic, pierdere n greutate, febr i transpiraii (acestea sunt numite i
simptomele B). Tratamentul se face cu chlorambucil sau o combinaie de ciclofosfamid,
vincristin i prednisolon, uneori cu adugarea de doxorubicin i/sau bleomicin, rspunsul la
aceste medicamente fiind adesea bun. n boala localizat se poate utiliza radioterapia, urmat de
administrarea de medicamente. Pacienii care rspund la chimioterapie trebuie supui unui
transplant de mduv osoas.

68

Simptome i complicaii: EBV produce diferite simptome, n funcie de tipul viral i de

civa ali factori a cror influen este incomplet determinat. La majoritatea copiilor mai mici
de 5 ani, infecia este asimptomatic. La adolesceni i aduli infecia este foarte frecvent poate
fi sau nu simptomatica. Intervalul de timp dintre producerea infeciei i apariia manifestrilor
(perioada de incubaie) este cuprins ntre 30 i 50 de zile. Principalele patru simptome ale
mononucleozei infecioase sunt oboseala extrem, febr, faringit (dureri n gt) i mrimea
ganglionilor limfatici. Acestea nu sunt prezente ntotdeauna mpreun. De obicei, infecia
debuteaz cu stare general alterata (malaise), care persist cteva zile (pn la o sptmn).
Acest disconfort vag este urmat de apariia febrei, faringitei, hipertrofiei ganglionilor limfatici.

6.2.

Virusuri cu ARN

Virusul poliomielitei
Virusul poliomielitei aparine genului Enterovirus. Acest gen se caracterizeaz prin
stabilitate n mediul acid (pH 3-5), care permite strbaterea barierei gastrice. Virusurile acestui
gen sunt distruse de clorul din apa potabil, dar supravieuiesc n apa menajer i de canal. Se
replic optim la 36-37 C n culturi de celule de rinichi de om sau de maimu. Virusul
poliomielitic prezint trei tipuri antigenice: VP1, VP2, VP3. Este un virus mic, nud, cu simetrie
radiar i ARN liniar, cu sens pozitiv.
Patogenitate. Transmiterea se face pe cale fecal-oral. Virusul se multiplic la nivelul
orofaringelui, amigdalelor, ganglionilor limfatici cervicali, enterocitelor i formaiunilor limfoide
de la nivelul intestinului. Majoritatea infeciilor evoleaz inaparent.
Poliomielita. Virusul poliomielitic invadeaz sistemul nervos central pe cale sanguin i
axonic. Replicarea n neuroni determin lezarea acestora i neuronofagie. Neuronii coarnelor
anterioare sunt cei mai afectai. Lezarea neuronilor motori inferiori determin paralizia flasc,
ireversibil atunci cnd neuronii sunt distrui.
Cazurile grave au drept cauz invazia nucleilor bulbari, urmat de paralizii ale nervilor
cranieni (paralizie respiratorie, tulburri de deglutiie etc.). Elemente de risc major n acest caz
sun: amigdalectomia, extraciile dentare .a. practicate n perioada de incubaie (favorizeaz
propagarea virusului pe calea axonilor lezai n plaga operatorie).
n poliomielit este bine marcat evoluia bifazic: boala minor (corespunde replicrii
virusului la poarta de intrare i viremiei), urmat de cteva zile de acalmie clinic i de boala
major (corepsunde replicrii virusului n neuroni).
Diagnosticul de laborator. Enterovirusurile pot fi izolate din faringe i fecale i, n
funcie de sindrom, se mai poate examina LCR, exsudat conjunctival. La decedaii suspectai de
poliomielit se examineaz probe din segmentul lombar i cervical al mduvii spinrii i
coninutul colonului. Izolarea enterovirusurilor se face n culturi de celule i este facilitat de
efectul citopatic.
Serodiagnosticul poliomielitei se bazeaz pe seroconversia anticorpilor neutralizani sau
fixatori de complement. De aceea, la pacienii suspeci, trebuie examinate dou probe de ser
prelevate la interval de 2 sptmni.
69

Tratament antiviral nu exist.

Epidemiologie. Rezervorul infeciei este uman, iar transmiterea fecal-oral este
favorizat de condiiile igienico-sanitare deficitare. n zonele calde infeciile se manifest tot
timpul anului, iar n cele temperate au un vrf estivo-autumnal. Receptivitatea este maixim la
vrsta copilriei.
Pe msura acumulrii de populaie receptiv, izbucnesc epidemii cu tipurile antigenice
pentru care popoulaia infantil nu este protejat. Aa au fost epidemiile de poliomielit din
Romnia din 1948 i 1957.
Combatere i profilaxie. Msurile de combatere includ izolarea bolnavilor pentru
controlul eficient al eliminrilor fecale i orofaringiene ale virusului. Carantinarea contacilor nu
d rezultate din cauza prevalenei mari a infeciei inaparente. Alte msuri: controlul i protecia
surselor de ap, controlul evacurii apei menajere, desmutizarea, educaia sanitar.
Contra poliomielitei exist 3 tipuri de vaccinuri:
vaccinul oral (VPO) trivalent atenuat (vaccinul Sabin). Determin infecia inaparent cu
replicarea viruslui n intestin i rspndirea n colectivitate. Vaccinarea ncepe n perioada
imunologic a sugarului i se administreaz 3 doze la interval de 2-15 luni. Pn la
nceputul colii primare mai sunt necesare 3 vaccinri de rapel. Vaccinarea asigur nivele
protectoare ale anticorpilor IgA, IgG i IgM. Administrarea vaccinului atenuat trebuie
realizat primvara devreme pentru a se evita interferena cu alte enterovirusuri.
Reacii adverse grave ale vaccinului oral Sabin:
- poliomielita postvaccinal (n perioada aprilie 1982-iunie 1983, 4 copii cu vrste
cuprinse ntre 3 i 24 luni au dezvoltat anormaliti neurologice care erau
asemntoare simptomelor de poliomielit postvaccinal)
- encefalomielite
- scleroz multipl
- epilepsie
- imunodeficien
- deces.
vaccinul formolat (vaccinul Salk) se administreaz parenteral numai la persoanele
imunodeficiente. Protejeaz doar fa de boal, nu i de infecia inaparent.
vaccinul recombinat. n 1998 virusul poliomielitic din vaccin a fost supus unei inactivri
puternice. Vaccinul este asemntor vaccinului Salk, cu unele modificri.
n Romnia este folosit vaccinul VPI, injectabil, IMOVAX Polio, produs de firma Sanofi
Pasteur S.A., France i conine:
- VPI, cu cele 3 tipuri de antigene (1, 2, 3), cultivat pe celule Vero2;
- alte ingrediente: 2-fenoxietanol, aldehid formic, reziduuri proteice;
- urme de antibiotice: Streptomicin, Neomicin, Polymyxin B.

Celulele Vero sunt extrase din rinichi de maimu verde, din Africa, la fel ca n cazul vaccinului Sabin i Salk

70

Reacii adverse n cazul acestui vaccin: reacii locale, alergie, oc anafilactic, vasculite,
parez facial, convulsii, parestezii, cefalee, somnolen, sindromul Guillain-Barre3, scleroz
multipl, artrit reumatoid juvenil.

Figura 5.7. Virusul poliomielitei (https://en.wikipedia.org/wiki/Poliovirus#/media/File:Polio.jpg)

Figura 5.8. Efectele lezrii

motoneuronilor de ctre virusurile
poliomielitei
(https://www.netterimages.com/anteriorpoliomyelitis-polioencephalitisunlabeled-neurologyneurosciencesfrank-h-netter-1401.html)

Figura 5.9. Pacient afectat de poliomielit

(http://www.who.int/mediacentre/multimedia/2002/ind_polio/
en/index2.html)

afeciune caracterizat prin debut acut de paralizie flasc simetric, rapid progresiv, ascendent, fr febr la
debutul paraliziei i cu pierderea sensibilitii.

71

Virusul hepatitei A
VHA este un picornavirus care prezint o singur serovarietate. Este stabil la pH acid (35), dar sensibil la pH alcalin (10). Rezistena relativ a virusului la dezinfecie impune precauii
la ngrijirea pacienilor i la manipularea prelevatelor patologice sau a excrementelor.
Virusul hepatitei A ingerat se replic primar n zone neidentificate ale tractului digestiv
i, pe cale sanguin, infecteaz hepatocitele. Din ficat este eliminat odat cu bila n intestin.
Hepatita A are o perioad de incubaie de 2-4 sptmni, scurt n raport cu cea determinat de
VHB sau VHC. Leziunile hepatice sunt benigne i infecia este autolimitat. Virusul este prezent
n snge i fecale cu 2 sptmni nainte de debutul bolii i 1-2 sptmni dup dispariia
icterului .
Imunitatea mpotriva acestui virus, asigurat de IgG, este de durat.
Diagnosticul de laborator. Izolarea virusului i depistarea antigenelor nu sunt tehnici
uzuale, fiind utilizate n cercetare.
Pentru diagnosticare se folosete examenul serologic. IgM anti-VHA persist 2-4 luni i
indic o infecie acut sau recent. IgG anti-VHA sunt persistente i indic boala n antecedente.
Depistarea anticorpilor se face prin ELISA. Dac IgM i cele totale anti-VHA sunt pozitive,
semnific infecie acut, dac IgM sunt negative, iar cele totale sunt pozitive, indic trecerea prin
boal cu imunizare.
Tratament specific nu exist. Totui, tratamentul recomandat cel mai frecvent este
odihna n pat. Este de asemenea dezirabil s se bea multe lichide, n special dac apar diaree i
vrsturi. O alt msur ce trebuie luat este evitarea alcoolului. Dei nu exist tratament medical
dup debutul hepatitei A, exist posibilitatea de a diminua unele simptome (precum durerea i
greaa) prin utilizarea unor medicamente prescrise de un medic.
Epidemiologie. Rspndirea VHA este general. Sursa de infecie este reprezentat de
bolnavi sau de cei cu infecie subclinic (mai ales copiii fac aceast form). Transmiterea este
predominant fecal-oral, doar n condiii de mare promiscuitate este posibil transmiterea prin
contact interuman apropiat. Receptivitatea este general, iar rata mortalitii sub 1%, de regul
consecin a formelor fulminante.
Profilaxia nespecific se refer la msurile pentru ntreruperea transmiterii fecal-orale.
Cea specific se refer la administrarea de imunoglobuline umane standard care reduc rata
formelor icterice pn la 80%, dar nu opresc infecia. Exist disponibile i vaccinuri.

72

Figura 5.10. Structura virusului hepatitei A

(http://www.dreamstime.com/stock-illustrationhepatitis-virus-structure-hav-inflammation-livercan-be-caused-group-viruses-image43481051)

Figura 5.11. Pacient cu icter

(http://www.medicinenet.com/hepatitis_pictures_slideshow/article.htm)

Virusul hepatitei C
Virusul hepatitei C este un flavivirus din genul Hepacivirus. Prezint mai multe tipuri de
antigene. Hepatita C are cea mai mare perioad de incubaie dintre hepatitele virale: 2 -4 luni. n
afara leziunilor hepatice, pacienii pot dezvolta vasculite, glomerulonefrite, artrit reumatoid,
fibroz pulmonar, anemie aplastic, limfoame non-Hodgkiniene. Unele dintre aceste manifestri
sunt clar expresia unei sensibilizri imunologice. Altele ar putea fi cauzate de efectele citopatice
ale replicrii virusului n celulele extrahepatice. Infecia cu VHC se poate croniciza. Strategia
persistenei virusului este probabil variaia antigenic.
Complicaiile bolii sunt grave: cca 50% din pacieni dezvolt hepatit cronic activ, care
la 20% evolueaz spre ciroz. n multe zone infecia cu VHC este identificat la 60-90% din
pacienii cu carcinom hepato-celular.
Pentru diagnosticul etiologic mai accesibil este evidenierea anticorpilor anti=VHC prin
teste ELISA. n caz de rezultate incerte, se identific genomul VHC prin PCR i electroforez.
Tratamentul antiviral. Interferonii i administrai n faza acut a infeciei cu virusul
hepatitei C minimalizeaz riscul cronicizrii. Interferonul este utilizat n tratarea formelor
cronice i i se poate asocia ribavirin.
Rspndirea virusului este mondial. Sursa de infecie este reprezentat de bolnavul cu
infecie acut sau cronic. Transmiterea cea mai frecvent este prin snge i derivate de plasm.
Mai puin frecvent este transmiterea prin transplant de organe, pe cale sexual sau de la mam
la ft. Incidena hepatitei C este mai mare la persoanele care se tatueaz. Cateoriile cu risc de
contractare a bolii sunt:
- personalul medical;
- bolnavii cu hemofilie;
- dializaii cronic.
Profilaxia prin imunoglobuline este contraindicat. Nu exist vaccin.
73

Virusurile gripale
Virusurile gripale reunesc trei specii (A, B i C) i aparin familiei Orthomyxoviridae.
Sunt virusuri cu anvelop, capsida are simetrie helical, iar ARN-ul viral este segmentat (8
segmente la virusurile gripale A i B, respectiv 7 segmente la virusul gripal C). n structura
anveolpei se remarc prezena a dou proteine importante: hemaglutinina (favorizeaz legarea de
receptorii celulei gazd) i neuraminidaza (lichefiaz mucusul epiteliului respirator, favoriznd
accesul virusului spre receptorii celulari; faciliteaz eliberarea virusului din celul i previne
autoagregarea virusurilor) (fig. 5.12).

Figura 5.12. Structura virusului gripal (http://micro.magnet.fsu.edu/cells/viruses/influenzavirus.html)

Virusul gripal A infecteaz omul, mamiferele i psrile, iar celelalte dou specii sunt
gzduite doar de om. Virusurile gripale A izolate de la gadele cunoscute reunesc 15 variante
antigenice ale hemaglutininei (H1-H15) i 9 variante ale neuraminidazei (N1-N9). De aici
posibilitatea de a aprea periodic noi subtipuri. Denumirea subtipurilor de virus gripal A respect
regulile stabilite de OMS. Numele sunt compuse i includ: genul (tipul), gazda de origine (cu
excepia omului), aria geografic a izolrii, numrul tulpinii i anul izolrii, cu precizarea ntre
paranteze a formulei antigenice: ex. A/equin/Praga/1/56 (H7N7).
Patogeneza. Ajunse pe mucoasa respiratorie, virusurile gripale fluidific prin
neuraminidaz mucusul. Astfel, virusul ptrunde n celulele epiteliului respirator i le
necrozeaz. De la celulele iniial infectate, din aproape n aproape este cuprins tot epiteliul
respirator.
Interferonul apare n secreiile respiratorii o zi dup contagiune i joac un rol esenial n
procesul vindecrii care survine n 3-7 zile. Anticorpii pot fi detectai abia dup 1-2 sptmni de
la debutul bolii. Virusul gripal este prezent n mucoasa nazo-faringian 1-2 zile nainte de
debutul bolii i cam tot attea zile dup vindecarea clinic. Moartea i descuamarea celular sunt
rspunztoare de simptomatologia respiratorie a gripei. Vindecarea complet a leziunilor

74

epiteliului respirator poate dura i o lun, iar dezorganizarea transportului mucusului favorizeaz
suprainfecia bacterian.
Gripa debuteaz brusc, avnd o perioad de incubaie de 1-4 zile. Se manifest prin
frisoane, cefalee, tuse uscat. Apoi, apare febra mare, dureri musculare generalizate, stare de ru,
anorexie i astenie. Febra i manifestrile sistemice se reduc dup vreo 3 zile, dar tusea i astenia
mai persist 1-3 sptmni. Exist i infecii inaparente. Aceste manifestri sunt specifice
infeciei cu virusul A i B. Infecia cu virusul gripal C se manifest ca o rceal comun.
Complicaiile majore ale gripei sunt: pneumoniile i sindromul Reye. Pot aprea i
suprainfecii ale sinusurilor, urechii medii sau plmnilor. Pneumoniile pot fi determinate de
virusul gripal sau de bacterii (Staphylococcus aureus, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus
influenzae). Sindromul Reye este o encefalopatie acut cu degenerarea gras a ficatului i cu o
mortalitate de 40%. Afecteaz copiii cu vrste ntre 2 i 16 ani supui tratamentului cu derivai ai
acidului salicilic n cursul gripei sau varicelei.
Diagnosticul etiologic al gripei poate fi direct i indirect.
- pentru diagnosticul direct se examineaz tampon faringian, nazal sau spltur de
la aceste nivele. Metodele clasice de izolare pe ou embrionate sau pe culturi de
celule permit studiul tulpinilor i prepararea de vaccinuri. Metodele rapide includ
coloraia imunofluorescent, tehnicile ELISA, PCR.
- diagnosticul indirect este serologic. Se utilizeaz tehnica ELISA. Creterea de 4
ori a titrului anticorpilor n serul convalescent fa de cel acut are importan n
diagnostic.
Tratament. Amantadina sau rimantadina reduc la jumtate perioada bolii. Au fost
semnalate tulpini de virus gripal A rezistente la aceste medicamente. Este formal contraindicat
utilizarea de derivai ai acidului salicilic pentru combaterea febrei. Contraindicaia are rolul de a
prentmpina sindromul Reye.
Epidemiologie. Sursa de infecie pentru virusurile gripale B i C este strict uman, iar
pentru A include i animalele. Boala se transmite prin picturile lui Flgge i mini sau obiecte
contaminate cu virusul gripal. Receptivitatea este general.
Profilaxie. Se consider c vaccinul este eficient n msura n care include tulpini noi
epidemice. Vaccinurile actuale conin virus gripal inactivat prin formol, dar conin adjuvani
toxici (aluminiu sau mercur) i substane alergizante (antibiotice, proteine strine). Exist studii
i cercettori care susin c sigurana vaccinului antigripal este practic nul, iar efectele
secundare sunt numeroase i cresc odat cu vrsta i cu repetarea anual. n 1976, fiind o
epidemie de grip n SUA, au fost vaccinai 50 de milioane de oameni i s-au constatat mii de
cazuri de sindrom Guillain-Barre, motiv pentru care s-a oprit vaccinarea. n 2006, n Israel a fost
oprit vaccinarea dup ce au decedat 4 vrstnici la scurt timp de la inoculare. Prezena
mercurului (Thiomersal) n compoziia vaccinului i introducerea lui anual duce la acumularea
acestuia n celula nervoas i poate determina instalarea Alzheimer-ului.

75

Virusul rabic
Virusul rabic aparine familiei Rhabdoviridae, genul Lyssavirus. Este un virus cu
anvelop, cu simetrie helical i genom de tip ARN (fig. 5.13). Virusul este distrus rapid prin
epunerea la lumin, radiaii ultraviolete, cldur (1h la 50 minute cldur umed). Virusul rabic
se cultiv n celule diploide umane sau animale (rinichi de hamster nou-nscut), n embrioni de
ra sau de gin, pe animale de laborator (oarece alb, iepure).
Gazdele naturale pentru virusul rabic sunt animalele cu snge cald. La animalele infectate
virusul este larg rspndit n esuturi i umori: sistem nervos, saliv, urin, lapte, snge i limf.
n general, infecia este mortal pentru animale. La om nu a fost izolat niciodat din snge sau
celule sanguine.
Patogenez. Rabia, numit i turbare, este transmis prin muctura animalelor care
elimin virusul prin salv, ca i prin zgrieturi cu gheare contaminate cu saliv. Virusul se
replic n muchii i esutul conectiv de la nivelul mucturii, invadeaz sistemul nervos central
pe cale centripet. Replicat intens n neuroni, difuzeaz centrifug prin nervii periferici ctre
glandele salivare, alte glande i esuturi.
Congestie i distrugeri neuronale se produc n scoara cerebral, cerebel, hipocamp i
ganglionii spinali. Coarnele posterioare ale mduvei sunt sever afectate prin neuronofagie i
infiltrat inflamator.
Incubaia rabiei este de 2-16 sptmni, dar poate fi i de 10 zile pn la un an.
Incubaia este mai scurt la copii, mai scurt n mucturile feei i gtului, respectiv mai scurt
i cu evoluie mai grav a bolii dup mucturile de lup. Rabia evolueaz n trei stadii:
prodromal, de excitaie i paralitic.
La om prodromul dureaz 2-10 ore n care bolnavii au tulburri de caracter, cefalee,
indispoziie, febr, grea, vrsturi. Acuz precoce senzaii anormale la nivelul plgii: arsuri,
dureri intermitente, hiperestezie. Au vocea rguit, hipersalivaie, disfagie.
n faza de excitaie apar hidrofobia i aerofobia. Un spasm dureros al muchilor
deglutiiei induce teama de a nghii: saliva li se scurge din gur (fig. 5.14); spasmul poate fi
declanat la auzul sau vederea apei curgnd. Spasme laringiene sunt declanate prin cureni de
aer. Bolnavii au hiperestezie, hiperacuzie, hipersomie, fotofobie, insomnie. Frecvent fac crize de
furie. n final se instaleaz paralizii. Moartea survin dup 3-5 zile de la debutul bolii. Rabia poate
evolua paralitic de la nceput, mai ales cnd este transmis prin muctura liliecilor vampir.
Diagnosticul de laborator. Diagnosticul direct este o urgen. Se examineaz, n funcie
de talia animalului, piese necropsice sau organe integrale: creier, mduva spinrii, glandele
salivare, cornee.
Microscopia direct. Se examineaz amprente din creier, mduva spinrii, cornee. Ofer
rezultate rapide prin depistarea corpusculilor Babe-Negri n neuroni. Coloraia
imunofluorescent este mai specific i mai sensibil. Depistarea antigenic poate fi fcut cu
mare specificitate i sensibilitate prin ELISA. Izolarea virusului se poate face din prelevate
postmortem. Gazda de laborator cea mai sensibil este oricelul sugar. Manifestrile infeciei
apar n interval de 3 sptmni. Izolarea n culturi de celule este cea mai rapid (2-4 zile), iar
76

identificarea izolatelor poate fi fcut i mai repede prin reacii de neutralizare sau coloraie
imunofluorescent. Serologia are valoare redus dat fiind evoluia acut i rapid a bolii.
Tratamentul antiviral nu exist. Se apeleaz la sero- i vaccinoterapie n funcie de
categoria animalului muctor:
aparent sntos i posibil de observat timp de 10 zile: dup splarea urgent a plgii cu
ap i spun i infiltraie local cu imunoglobulin uman antirabic;
bolnave su suspecte de rabie sau dac rabia a fost diagnosticat prin laborator la animalul
sacrificat imediat dup agresiune: msurile urgente de la punctul de mai sus, urmate de
vaccinare antirabic imediat;
animalul muctor dezvolt n cursul observaiei semne de rabie sau dac rabia a fost
diagnosticat prin laborator la animalul sacrificat imediat dup agresiune: msurile de la
punctele de mai sus;
animalul muctor este vagabond, necunoscut sau slbatic: imediat msurile de la punctul
2.
Utilizarea imunoglobulinei antirabice umane este de dorit, n lips (i dac pacientul nu
este sensibil) poate fi folosit serul antirabic preparat pe cal. Vaccinul antirabic folosit n prezent
este preparat pe culturi de celule diploide umane (5 doze intramusculare n zilele 0, 3, 7, 14 i
28) sau vaccinul preparat pe embrionii de ra decapitai (23 doze subcutanate).
Epidemiologie. Grupe de risc pentru rabie sunt: lucrtori cu animale posibil bolnave:
speologi sau constructori ce ptrund n peteri; personal din laboratoare de diagnostic sau
vaccinuri. Transmiterea bolii: n 99% din cazuri prin muctura animalului bolnav care
inoculeaz virusul odat cu saliva. Liliecii fac o form asimptomatic i transmit virusul prin
aerosoli. Se poate transmite i prin transplant de cornee (doar 6 cazuri documentate). Riscul de a
contracta boala este de: 60% dac plaga mucat este la cap; 15-40% la nivelul extremitilor
superioare; 10% la nivelul extremitilor inferioare.

Figura 5.13. Structura virusului rabic

(https://www.flickr.com/photos/41447040@N08/3815910986)

Figura 5.14. Pacient cu rabie

(https://lightraft.com/treasure/this-is-what-rabieslooks-like-in-humans/)

77

Virusul imunodeficienei umane dobndite

Virusul imunodeficienei umane dobndite aparin familiei Retroviridae. Este un virus cu
simetrie radiar, prezint anvelop. Genomul este reprezentat de dou molecule de ARN identice
cu polaritate pozitiv. Prezint trei enzime importante: reverstranscriptaza, proteaza i integraza.
Virusul a fost identificat i izolat n 1983 n Frana de ctre Luc Montagnier i n 1984 de ctre
Rober Gallo.
HIV infecteaz multe esuturi umane: limfocite T i B, macrofage, megacariocite, celule
dendritice, promielocite, celule stem, celule timice epiteliale, microglii, oligodendrocite, celule
Langerhans, celule intestinale, miocardice, renale.
Infecia cu HIV i patogenez. Infecia parcurge dou stadii:
- infecia primar, extins pe cca 10 ani, include diseminarea virusului n organele
limfoide, latena clinic i inducerea expresiei virusului;
- SIDA cu evoluie letal n aproximativ 2 ani.
Infecia primar cu HIV evolueaz n 50-70% din cazuri cu un sindrom acut
mononucleozic (manifestri asemntoare mononucleozei infecioase), care debuteaz la 3 -6
sptmni dup infecie i dureaz de la cteva zile la cteva sptmni. Unii pacieni prezint
limfadenopatie persistent, generalizat, iar la alii infecia evolueaz asimptomatic.
Prodromul SIDA include simptome constituionale: pierderea n greutate, oboseal,
transpiraii nocturne, diaree persistent la care se poate aduga: herpes-zoster prelungit,
candidoz oral.
Bolile i simptomele definitorii pentru SIDA se datoreaz imunosupresiei pronunate:
infecii cu microorganisme oportuniste (pneumonie cu Pneumocystis carinii, cu virus
citomegalic, reactivri grave ale infeciilor cu Mycobacterium tuberculosis sau M. avium,
candidoz esofagian, meningit cu Cryptococcus neoformans, diaree cronic), demen, retinit,
forme neobinuite de cancere (sarcomul lui Kaposi, carcinom ano-rectal, limfoame.
Diagnosticul de laborator. Se examineaz snge pentru detectarea de virus i serologie.
Alte produse de unde se poate izola virusul sunt: LCR, saliv, lacrimi, lapte, urin, secreii
vaginale. n acestea cantitatea de virus este extrem de mic.
Serologia este folosit curent pentru diagnosticare i pentru triajul donatorilor de snge.
rile dezvoltate, cum este cazul Germaniei, nu utilizeaz teste rapide, care n rile
subdezvoltate sunt singurele pe baza crora se pune diagnosticul.
Ca metode de diagnostic se utilizeaz: ELISA, confirmat prin Western blotting. PCR-ul
se consider a fi tehnica cea mai sensibil. Niciun test utilizat pentru diagnosticarea infeciei cu
HIV nu este 100% sigur.
Tratamentul antiviral. Medicamentele antivirale sunt inhibitori ai reverstranscriptazei:
zidovudina, didanozina, zalcitabina i stavudina. Medicamentele sunt scumpe i extrem de toxice
(neutropenie, anemie, mielopatie, pancreatit). Eficiena lor este relativ sczut.
Epidemiologie. Modul de transmitere este asemntor VHB. Riscul transmiterii prin ace
contaminate este semnificativ mai redus dect n cazul hepatitei B. n SUA, 63% dintre cazurile
de SIDA sunt la homosexuali i la brbaii bisexuali, iar 23% din cazuri sunt persoane care
78

utilizeaz droguri injectabile. Un studiu publicat n 1997 de ctre Padian i colaboratorii si

indic faptul c riscul de transmitere a virusului de la brbat la femeie este de 0,0009%, iar
invers este i mai mic.
Profilaxie. Nu exist vaccin i nicio posibilitate chimioprofilaxic. Obiectivele majore
ale educaiei sanitare pe plan general sunt:
- contactele sexuale, n afara cuplurilor monogame, trebuie protejate cu prezervativ;
- nu trebuie utilizate n comun obiecte personale (lame de ras, periue de dini, ace
care perforeaz tegumentul).

79