Sunteți pe pagina 1din 23

Dr.

Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

ORGANIZAREA MOLECULAR
A MEMBRANELOR CELULARE
De la molecule la o structur funcional

Membrana celular
Definiia
Ultrastructura care
separ celula de mediu
dar o i unete cu acesta

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

CONSIDERAII GENERALE ASUPRA


ORGANIZRII MOLECULARE A MEMBRANELOR

Ap:
Rezidiu uscat:

20-30%
70-80%

Substane minerale:
Substane organice:
Lipide:
Proteine:
Component glucidic:

~1%
~99%
40-50%
50-60%
1-10%

De ce puin ap?

Aranjarea componentelor chimice n biomembrane


conform modelului mozaic fluid
Singer SJ, Nicolson GL (1972) The fluid mosaic model of the structure of cell membranes. Science. 175: 720-731.

Imagini de mozaic
2

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Aranjarea componentelor chimice n biomembrane


conform modelului mozaic fluid
Singer SJ, Nicolson GL (1972) The fluid mosaic model of the structure of cell membranes. Science. 175: 720-731.

Funciile membranei celulare


1. Funcie de barier
2. Funcie metabolic

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Caracteristici fizice, chimice i biologice


ale membranelor celulare
Eterogenitate
Asimetrie
Fluiditate bidimensional
Cine i cum particip la asigurarea acestor caracteristici?
Care este semnificaia biologic a acestor caracteristici?

Eterogenitatea structural a
membranelor celulare
Clasificri
Clasificri ale lipidelor membranare
Clasificri ale proteinelor membranare
Clasificri ale componentei glucidice membranare

Conceptul logic de clasificare


Stabilirea criteriului/criteriilor
5

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Eterogenitate
Contribuia lipidelor (I)
Clasificri ale lipidelor:
1. n funcie de structura chimic global:
- fosfolipide
- colesterol
- glicolipide

70-75%;
20-25%;
1-10%.

Eterogenitate
Contribuia lipidelor (II)
Alte clasificri ale lipidelor:

Clasificarea fosfolipidelor:
1. n funcie de poliolul din structur:
- fosfogliceride (glicerofosfatide);
- fosfosfingozide (sfingofosfatide).
2. n funcie de X
X - colin fosfatidilcoline (PC);
20-25%
X - etanolamin fosfatidiletanolamine (PE); 20-25%
X - serin fosfatidilserine (PS);
20-25%
X - inozitol fosfatidilinozitoli (PI); 10-15%
X - hidrogen acizi fosfatidici (PA); ~1%

Alte fosfolipide:

sfingomieline (SM); 20-25%


cardiolipine: 1,3-difosfatidil-glicerine.
plasmalogeni 6

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Mai mult eterogenitate


Contribuia acizilor grai

(a) n poziia 1 a glicerinei: un acid gras saturat (C14, C16, C18);


ordinea abundenei:C16 > C18 > C14.
(b) n poziia 2 a glicerinei: un acid gras nesaturat (C18:1, C18:2,
C18:3, C20:4)

Eterogenitate
Contribuia proteinelor
Clasificri ale proteinelor:
n funcie de poziia fa de bistrat
- periferice (extrinseci ) ~25%;

ectoproteine

- integrale (intrinseci) ~75%.

Proteinele extrinseci:
- ectoproteine;
- endoproteine.
?

endoproteine

protein
transmembranar

Proteinele intrinseci:
- transmembranare;
-?

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Eterogenitate
Caracteristicile fizico-chimice
ale proteinelor periferice
Extractibile cu soluii saline, sau ageni chelatori;
Au caracter hidrofil;
Dup extracie nu poart lipide asociate i i pastreaz
solubilitatea n ap;

Preluat din Molecular Biology of the Cell, editori: Bruce Alberts et all., ediia a III-a, 1994

Caracteristicile fizico-chimice
ale proteinelor transmembranare
- se pot extrage din structura membranelor numai cu detergeni;
- rmn asociate permanent cu lipide;
- sunt insolubile n ap;
- au caracter amfifil.
Definirea domeniilor structurale
ectodomenii

endodomenii
Preluat din Molecular Biology of the Cell, editori:
Bruce Alberts et all., ediia a III-a, 1994

domenii
transmembranare

1. ectodomeniu;
2. endodomeniu;
3. domeniu transmembranar.

Clasificare n funcie de numrul de treceri


prin bistratul lipidic:
1. unipas;
2. multipas.
Clasificare n funcie de orientarea lanului
polipeptidic fa de bistratul lipidic (poziia
captului amino-terminal):
1. tip I NH2 terminal n ectodomeniu;
2. tip II NH2 terminal n endodomeniu.
8

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Eterogenitate
Modaliti de structurare
a domeniului transmembranar

Preluat din Molecular Biology of the Cell, editori: Bruce Alberts et all., ediia a III-a, 1994

Eterogenitate
Contribuia componentei glucidice
Clasificri ale structurilor glucidice:
(?)
1. Glicolipide componenta glucidic pe lipid;
2. Glicoproteine componenta glucidic (oligozaharid) pe protein;
3. Proteoglicani componenta glucidic (polizaharid) pe protein.

Preluat din Molecular Biology of the Cell, editori: Bruce Alberts et9all., ediia a III-a, 1994

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Eterogenitate
Compoziia glucidic a glicocalixului
Monozaharide componente: Glc, GlcNAc, Gal,
GalNAc, Man, Fuc, acizi sialici (SA)

Acid neuraminic

Acid N-acetil-neuraminic

Acid N-glicolil-neuraminic

Eterogenitate
Compoziia glucidic a glicocalixului
Glicolipidele: 1 lan oligozaharidic, neramificat
Glicoproteinele: mai multe lanuri ologozaharidice,
ramificate, inserate N-, sau O-glicozidic
Proteoglicanii: mai multe lanuri polizaharidice
neramificate (glicozaminoglicani)
Consideraii structurale asupra secvenei glucidice
Glucoza niciodat n poziie terminal
Acizii sialici ntotdeauna n poziie terminal

10

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Asimetrie
Contribuia lipidelor
Asimetria distribuiei lipidelor membranare
PC i SM foia extern a bistratului lipidic
PE, PS i PI foia intern a bistratului lipidic
Colesterolul echilibrat ntre cele dou foie
Glicolipidele foia extern a bistratului lipidic; exclusiv

Asimetrie
Contribuia proteinelor

Proteinele extrinseci
-Ectoproteine
-Endoproteine

Proteinele integrale
- Transmembranare
-?

11

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Asimetrie
Contribuia proteinelor
Citoscheletul asociat membranei
organizare spaial (eritrocit)

Preluat din Molecular Biology of the Cell, editori: Bruce Alberts et all., ediia a III-a, 1994

Asimetrie
Contribuia componentei glucidice

12

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Semnificaii biologice
Eterogenitate
Multitudine de componente multitudine de posibiliti de
aciune (diversitate de funcii)

Asimetrie
Fenomene diferite posibile pe cele dou fee
Disjungere sau solidaritate de aciune ntre cele dou fee

Fluiditatea bidimensional
Cum trebuie neleas?

13

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Fluiditate bidimensional
Starea fizic i dinamica bistratului lipidic
- Proprieti fluide manifestate bidimensional

Micrile lipidelor n cadrul bistratului


1. Micri intramoleculare
2. Micri intermoleculare

Fluiditate bidimensional
Micrile intramoleculare
1. Micri de rotaie

109 rotaii/s

2. Micri de flexie

108 flexii/s

14

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Fluiditate bidimensional
Micrile intermoleculare
1. Micri de translaie 107 schimbri direcie/s

2. Micri flip-flop

extrem de rare

Fluiditate bidimensional
Reglarea fluiditii membranelor
Factori de reglare a fluiditii membranelor
Chimici

Fizici
- Presiunea
- Temperatura

15

- Intrinseci
- Extrinseci

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Reglarea fluiditii membranelor


prin factori celulari intrinseci
Rolul acizilor grai nesaturai

Rolul colesterolului

Factori chimici extrinseci


de reglare a fluiditii membranelor

Fiziologici
Patologici
Terapeutici

16

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Fluiditate bidimensional
Mobilitatea proteinelor membranare

Fluiditate bidimensional
Caracterul mezomorf al bistratului lipidic
Microdomenii de membran
Plute lipidice
Caveole

17

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Eterogenitatea plutelor lipidice


Evideniat prin interpretarea rezultatelor diferitelor metode de obinere:
- diferii detergeni neionici
- sonicarea preparatelor de membrane i analizarea fraciunii uoare
- analize imunocitochimice

Caracteristici compoziionale generale


- colesterolul de 3-5 ori mai abundent dect n restul membranei i
reprezint 33-50% din totalul lipidelor la acest nivel
- sfingolipidele (SM i glicolipidele) sunt mbogite i reprezint 30-35%
dintre lipidele din plute
- glicerofosfolipidele sunt srac reprezentate (n comparaie cu restul
membranei); 30% pentru PC + PE
- lipidele specifice foiei interne a bistratului (PS, PI) sunt slab
reprezentate la nivelul plutelor
- n foia intern de la nivelul plutelor, lipidele conin preferenial acizi grai
saturai; asta ar putea realiza necesarul de rigiditate corespunztor celei a
foiei externe, unde sfingolipidele sunt bogat reprezentate

Motilitatea componentelor
membranare: semnificaie biologic
Efecientizeaz funciile membranei
faciliatrea interaciunilor temporare ntre
parteneri funcionali
Asigur dinamicitatea microdomeniilor de
membran

18

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Funciile membranelor
Barier
Implicaiile metabolice ale funciilor membranei
Funcia de barier: absolut versus selectiv
Funciile metabolice: responsabilitatea proteinelor,
dar implic i celelalte componente exploatnd fericit
componentele organizrii moleculare

Rolurile lipidelor membranare


1. Rol structural asigur funcia de barier;
2. Roluri metabolice:
(i) Recunoatere i semnalizare intercelular (glicolipide)
(ii) Semnalizarea prin aciunea fosfolipazelor
- Fosfolipaza A1 (PLA1) elimin AG din poziia 1 a glicerinei;
- Fosfolipaza A2 (PLA2) elimin AG din poziia 2 a glicerinei;

C
A1

D
A2
B

- Fosfolipaza B (PLB) elimin ambii AG simultan;


- Fosfolipaza C (PLC) taie ntre glicerin i fosfat;
- Fosfolipaza D (PLD) scoate componenta X

19

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Acidul arahidonic
surs de mesageri secunzi
(i) prostaglandine
1. Calea ciclooxigenazei:

(ii) prostacicline
(iii) tromboxani

2. Calea lipooxigenazei:

leucotriene

Cascada fosfoinozitidelor
fosfatidilinozitol (PI)
PI kinaz

ATP
ADP

fosfatidilinozitol-4-fosfat (PIP)
PIP kinaz

ATP
ADP

fosfatidilinozitol-4,5-bisfosfat (PIP2)
fosfolipaz C

(specific pentru fosfoinozitide PLC-)

diacilglicerol (DAG)

inozitol-1,4,5-trisfosfat (IP3)

20

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Rolul proteinelor membranare


Asigur funciile metabolice ale membranelor, dar au i
rol structural.
Funcii ale proteinelor membranare:
Transportori prin membran (canale, pompe, conexoni);
Transportori cu membran (clatrin, caveolin);
Receptori (hormoni, factori de cretere, citokine
chemokine);
Molecule de adeziune (integrine, caderine);
Enzime (metaloproteinaze de matrice extracelular,
fosfolipaze, adenilat-ciclaz);
Proteine de semnalizare (proteine adaptoare, proteine
platform);
Proteine structurale (spectrin, ankirin).

Rolul componentei glucidice membranare


Rol de protecie a membranei
Particip la sarcina electric negativ a suprafeei
celulare (semnificaia biologic?)
Necesare, dar nu neaprat suficiente funcionrii
receptorilor
Particip la fenomene de recunoatere celular:
Purttoarele antigenelor de grup sanguin
Extravazarea leucocitelor
Fertilizarea (fuzionarea spermatozoidului cu ovocitul)

21

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Rezumat

microdomenii de membran; domenii de membran

Dinamicitatea i
maleabilitatea membranei

22

Dr. Mircea Leabu: Organizarea molecular a biomembranelor (curs pentru studenii de la medicin)

Perspectiva obinut prin cunoaterea


membranei celulare?

Ira H. Pastan i Mark C. Willingham

Journey to the Center of the Cell:


Role of the Receptosome
Science, 214, 504-509 (1981)

23