Biochimiea II dinamic (metabolismul)

Introducere
Scurt istoric
Fiecare etap a dezvoltrii societii umane s-a caracterizat prin dezvoltarea
cu precdere a anumitor domenii caracteristice pentru etapele respective. n
ceea ce privete de exemplu pictura, sculptura, astronomia etc., umanitatea a
aezat
la
loc
de
cinste n primul rnd operele Evului mediu n timp ce apariia zorilor capitalism
ului, s-a caracterizat prin dezvoltarea fr precedent a tehnologiilor.
nc pe la mijlocul secolului XVIII se tia c proteinele se pot scinda pn la
peptone nu numai n stomac, ci i n afara lui sub aciunea agentului
(principiului activ) din sucul gastric. O descoperire important n acest
domeniu a fcut savantul din Petersburg, K.C. Kirhhof n anul 1814. El a artat
c extractul din mal (orez ncolit) are proprietatea de a transforma amidonul n
zahr (maltoz).
De aici, proprietatea de a transforma amidonul n zahr o au un numai boabele
ncolite de orez,dar i extractele lor, adic transformarea amidonului se poate
produce nu numai n interiorul celulei, dar i n afara ei (n vitro).
Substana extras din mal cu proprieti de zaharificare a amidonului a cptat
numele de amilaz. n mod analog a fost obinut extractul din drojdie, care la
temperatura de camer scindeaz rapid zahrul din sfecl n componentele sale
glucoza i fructoza. Astfel s-a artat c zaharoza poate fi hidrolizat nu numai
n celulele vii de drojdii, ci i n afara lor sub aciunea unei substane speciale,
care se extrage din drojdie i care poart numele de zaharaz , sau invertaz.
Prin analogie cu natura moart (n baza eliberrii rapide a oxigenului din apa
oxigenat H2O2 n prezena catalizatorului din platin spongioas ) s-a presupus
i s-a consolidat conceptul prezenei biocatalizatorilor n celulele vii ale
omului, plantelor i animalelor, care se mai numesc fermeni sau Enzime.
n vremurile noastre putem afirma fr a grei c secolul XX a fost secolul
fizicii, iar secolul XXI va aparine cu siguran dezvoltrii biotehnologiilor.
Progresele tehnologice moderne au permis extinderea i aprofundarea studiilor
referitoare la diveri constitueni celulari i subcelulari. Noile cuceriri ale
biotehnologiei nu sunt ns posibile fr aportul substanial al unor tiine de
grani, n marea lor majoritate tinere, cum ar fi biochimia, biofizica,
biologia molecular, microbiologia industrial i altele.
Biochimia este definit ca fiind tiina ce se ocup cu studiul structurii chi
mice a organismelor vii, totalitatea reaciilor i transformrilor care au loc
n celula vie, reglarea acestora i interdependena permanent cu mediul
nconjurtor.
Din punctul de vedere al obiectului de studiu distingem mai multe ramuri ale
biochimiei:
Biochimie microbian
Biochimie vegetal
Biochimie animal

n ultimul secol, n cadrul biochimiei animalelor, o amploare deosebit a fost

nregistrat de biochimia omului, n special biochimia medical sau clinic,
dat
fiind
importana
practic
imens
a acesteia pentru pstrarea sntii omului.
n funcie
de modul
de abordare
a problemelor studiate, se disting
dou ramuri principale ale biochimiei:
Biochimie structural (descriptiv) (I)
Biochimie dinamic (biochimia metabolismului) (II)
Din punct de vedere istoric, biochimia devine o tiin de sine stttoare n cea
de a doua jumtate a secolului al XIX-lea cnd ea s-a desprins din complexul
tiinelor
chimice i biologice. Locul biochimiei ntre tiinele moderne poate fi
considerat unul central. Pe de o parte, dezvoltarea biochimiei nu ar fi fost
posibil fr aportul unor tiine clasice cum ar fi biologia, chimia, fizica,
matematica etc. Pe de alt parte, realizrile tiinifice ale biochimiei
au contribuit i contribuie la dezvoltarea altor tiine i domenii ale activitii
umane, cum ar fi genetica, fiziologia, medicina, biotehnologia(domeniu nou,
deosebit de vast care poate s ofere soluii avantajoase n rezolvarea
multor probleme practice de interes major), industria alimentar etc.
Reprezentarea general a disciplinei.
Biochimiea este o tiin cu o dezvoltare foarte rapid care n ultimele decenii a
permis aprofundarea cunotinelor noastre asupra intensitii proceselor vitale
i a influenat n mod esenial att gndirea ct i practica n domeniul
producerii, conservrii, ct i utilizrii alimentelor. Astzi avem posibilitatea de
a ptrunde esena proceselor dinamice de metabolism, am obinut informaii
importante privind sinteza i degradarea unor componente ale materiilor prime
vegetale i animale, att n celul, ct i n procesele biotehnologice de
fabricare a alimentelor.
Biochimia II studiaz procesele de transformare a biomoleculelor, cile i
mecanismele de biosintez i descompunere, corelarea acestor procese
continuii i permanente de transformare care constituie substratul material al
vieii i caracterizarea dinamismului acestuia.

Celula- unitate structural i funcional a vieii

Structura, ultrastructura i rolul componentelor celulei procariote
Celula
Celula este unitatea structural, funcional i genetic a organismelor vii,
capabil de autoconservare i de a-i duce viaa independent sau n complexe
celulare interdependente = esuturi.
Tipuri de celule :procariot, eucariot

Celula procariot

este caracteristic: bacteriilor i algelor albastre verzi = cianobacterii; este

alctuit din: - perete celular rigid, necelulozic, care conine murein;
membran celular;- citoplasm - vscoas, fr cureni citoplasmatici; bogat
n ribozomi cu rol n sinteza proteinelor specifice; materialul genetic =
nucleotid = nucleosid dispus difuz, neindividualizat, reprezentat de o
macromolecul de ADN, care formeaz un cromozom circular.

Celula eucariot
Celula animala

Celula vegetala

1. nveliul celulei
1. Membrana celular separ celula de mediul nconjurtor i intervine n
schimburile dintre celul i mediu;- este organizat pe modelul mozaicului

fluid, fiind alctuit din dou straturi fosfolipidice strbtute de proteine; membrana este permeabila i selectiv.
2. Peretele celular este specific celulei vegetale este structura nevie; la
ciuperci=fungi, este de natur chitinoas; la alge, muchi, ferigi, plante
superioare - este celulozic, fiind format din celuloz, hemiceluloz i substane
pectice; se formeaz cu participarea membranei celulare; lipsete la celula
animal; are rol de aprare, asigur schimbul de ap i substane dintre celul i
mediul nconjurtor.
3 . Citoplasma reprezint mediul n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Componente: citoplasma fundamentala= hialoplasma = nestructurat;
constituie mediul intern al celulei n care se desfoar principalele procese
metabolice celulare.
Prezint cureni citoplasmatici care pun n micare organitele componenta
structurat - reprezentat de organitele celulare:
Mitocondriile au rol n respiraia celular, la nivelul lor are loc oxidarea
substanelor organice, cu producerea de energie (se mai numescuzinele
energetice ale celulei); sunt autodivizibile = au material genetic propriu ADN mitocondrial, care conine informaia genetic pentru sinteza enzimelor
respiratorii.
Alctuire: sunt formate din membran dubl: membrana extern este neteda,
membrana intern formeaz pliuri numite criste, la nivelul crora se gsesc
enzimele oxido-reducatoare; cavitate n care se gsete substana fundamental
matricea (matrix) ce conine ADN, ARN, enzime.
Reticulul endoplasmatic - RE - este o reea de tuburi i vezicule care formeaz
un sistem circulator intracitoplasmatic; are membran simpla;
poate fi neted sau rugos =granular (REG) (cnd are ataai ribozomi).
Ribozomii (granulele lui Palade) organite fr membran, sferice, de natur
ribonucleoproteica ce conin ARN=acid ribonucleic i proteine; se gsesc liberi
n citoplasma sau ataai RE, formnd REG; sunt sediul biosintezei proteinelor
specifice.
Aparatul Golgi - este situat n apropierea nucleului i are funcii legate de
procesele de secreie celular, asamblare a produilor, de transport al secreiilor
i n producerea de membrane. Este mai dezvoltat n celulele secretoare; este
alctuit din totalitatea dictiozomilor= formaiuni discoidale cu membran
simpl, aplatizate, suprapuse, de la capetele crora se desprind permanent
vezicule cu secreii.
Lizozomii - organite de form sferic sau ovoidal, cu membran simpla, ce
conin enzime hidrolitice cu rol n digestia intracelular (fagocitoz). Lizozomii
sunt mai numeroi n celulele secretoare i n leucocite.
Centrozomul = centrul celular este situat n apropierea nucleului; este prezent
n celulele animale i la protiste; este format din doi centrioli;d natere fusului
de diviziune.

Vacuolele - sunt vezicule delimitate de o membran simpl numit

tonoplast;conin suc vacuolar (ap, sruri, enzime, acizi organici); sunt
temporare n celulele animale i permanente n celulele vegetale.
Totalitatea lor formeaz vacuomul.
Plastidele specifice celulei vegetale; sunt autodivizibile (au material genetic
propriu - ADN plastidial); sunt: fotosintetizante: - cloroplaste-conin pigmeni
verzi la plantele verzi; rodoplaste - conin pigmeni roii la algele roii;
feroplaste- conin pigmeni bruni la algele brune; nefotosintetizante:
cromoplaste conin pigmeni roii-portocalii: fructe; leucoplaste - nu au
pigmeni i depoziteaz diferite substane: amiloplaste depoziteaz amidon tuberculul de cartof; oleoplaste - depoziteaz uleiuri - la floarea soarelui;
proteoplaste depoziteaz proteine - n seminele plantelor.
Cloroplastele conin pigmenii clorofilieni (verzi), ce absorb energia
luminoas i o convertesc n energie chimic, n timpul procesului de
fotosintez.
Structural prezint: - membran dubl i cavitate; membrana prezint
:-membrana extern neted; -membrana intern - prezint prelungiri
tilacoide, care ptrund n cavitate i formeaz structuri discoidale aplatizate,
dispuse n fiic ce alctuiesc 4grana. n gran sunt localizai pigmenii
clorofilieni i aici se desfoar faza de lumin a fotosintezei; cavitatea conine
o substan fundamental = stroma. n strom se gsesc: ADN, ARN, ribozomi,
incluziuni lipidice, granule de amidon. Aici are loc faza de ntuneric a
fotosintezei.
Nucleul - este component celular fundamental, cu rol n coordonarea vieii
celulei. este alctuit din - membran dubl prevzut cu pori, prin care se
desfoar schimburile dintre nucleu i citoplasm; substan fundamental =
carioplasma = nucleoplasma, ce conine cariolimfa i cromatina; cromatina este
constituit din ADN, ARN i proteine i formeaz cromozomii, vizibili la
microscop, n timpul diviziunii celulare; n ADN este stocat informaia
genetic. Aceasta poate fi transmis celulelor rezultate prin diviziune sau poate
fi utilizat n coordonarea activitii celulare, prin tipurile de proteine (enzime)
sintetizate intracelular; unul sau mai muli nucleoli - ce conin ARN i au rol n
biogeneza ribozomilor i n diviziunea celular.

Introducere
Metabolism
ntre organismele vii i mediul nconjurtor exist un permanent schimb de
substane i energie astfel c organismele vii pot fi considerate din punct de
vedere temodinamic un sistem deschis.
Totalitatea acestor schimbri de substane i energie formeaz metabolismul.
Dup modul de desfurare el poate fi:
general(bazal);
intermediar.

Metabolismul general se refer la intrarea substanelor din mediul exterior i

evacuarea produselor rezultate, cu alte cuvinte, reprezint cheltuielile fixe de
energie necesare ntreinerii funciilor vitale (respiraia, circulaia, activitatea
sistemului nervos, excreia i secreia endocrin).
Metabolismul intermediar se refer la toate transformrile pe care le sufer
substanele n organism pn la evacuarea produselor rezultate n urma
transformrilor.
Metabolismul intermediar are dou laturi:
anabolism ;
catabolism.
Anabolismul const n sinteza compuilor macromoleculari din compui
simpli avnd loc aportul energiei.
Catabolismul const n degradarea compuilor macromoleculari cu formarea
compuilor simpli (ca monozaharide, glicerol, aminoacizi etc.) i este nsoit
de eliberare de energie. Ambele procese se desfoar simultan n organism
astfel dac ntr-un anumit loc se desfoar procese anabolice cu siguran n
alt loc din organism se desfoar procese catabolice.
Degradarea i sinteza diferitor substane presupune o succesiune de reacii,
fiecare reacie catalizat de anumit enzim ce reprezint calea metabolic.
Cile metabolice pot fi :
-liniare-ABCDEF;
D
-ramificate AB
E
F

-ciclice-din AB i viceversa;
- ciclice interptrunse. A2 A A1
Dei cile metabolice conin unele reacii reversibile pe ansamblu acestea sunt
ireversibile deoarece:
-procesele anabolice i catabolice se desfoar n compartimente diferite(cele
anabolice n citoplasm), iar cele catabolice n mitocondrii.
Nu toate reaciile pot fi reversibile din punct de vedere termodinamic:
procesele catabolice i anabolice depind de factori diferii.
Procesele bioenergetice.
Organismele care i sintetizeaz compui organici din CO2,H2O i energie se
numesc organisme autotrofe. Din acestea fac parte algele verzi, bacteriile
nitrificatoare fixatoare de azot i ntr-o msur mai mic bacteriile
ferogenoase, sulfogenoase.
Organismele care folosesc energia chimic eliberat prin degradarea
compuilor organici gata sintetizai se numesc organisme heterotrofe. Acestea
sunt dependente de cele autotrofe. Dintre acestea fac parte organismele
animalelor i omul, , bacteriile de mucegai etc.
Chemiotrofe ca surs de E folosesc reaciile de oxido-reducere, i nu lumina
solar ca plantele.

Concomitent cu schimbul de substane are loc i schimbul de energie. Astfel,

reaciile care se desfoar cu eliberare de energie se numesc reacii
exergenice, iar cele care se desfoar cu absorbie de energie se numesc
endergenice.
Energia eliberat prin procesele exergenice se nmagazineaz n nite legturi
speciale numite legturi macroerge i legturi fosfoesteri, fosfoamidice,
anhidridice. Compuii care conin legturi macroerge se numesc compui
macroergi. Dintre acetea locul principal revine ATP-ului (acidului
adenozintrifosfat). Energia eliberat n procesele ezergenice activeaz fosforul
anorganic fin compusul ionului acidului ortofosforic care se leag de ADP
(acidul adenozin difosforic) i se transform n ATP.
energie

ADP + H3PO4
ATP
n reaciile endergenice este necesar energia eliberat prin hidroliza ATP-ului
ATP

energie

ADP + H3PO4

Schimbul permanent de substane si energie dintre organism si mediu

se numete metabolism si constituie funcia fundamental a vietii; ncetarea
metabolismului determin moartea organismului. Or, Metabolismul este
ansamblul reaciilor biochimice care au loc in organism si sunt implicate in
meninerea viei i tuturor celulelor sale, schimbul permanent de materie si
energie dintre organism si mediu.
Metabolismul are dou procese: anabolism care reprezint
sinteza tuturor constituenilor celulari sau de rezerv ce are drept scop
rennoirea permanent a structurilor celulare uzate, sinteza unor substane active
(enzime, hormoni) i creterea si inmulirea celulelor.
Se face cu consum de energie. Catabolismul reprezint descompunerea
moleculelor pn la produi finali neutilizabili. Se face cu eliberare de energie
care asigura desfurarea proceselor fiziologice.
Organismul este un sistem deschis care face schimb de substan i
energie cu mediul extern. Acest schimb permanent se numete
metabolism. Metabolismul ncepe odat cu ingestia alimentelor i sfrete
cu excreia produilor neutilizabili. El se desfoar n trei etape: digestiv,
celular i excretorie. Legtura dintre aceste etape o asigur sngele i
circulaia acestuia.
n etapa digestiv, sub aciunea unor fermeni specifici, are loc fragmentarea
hidrolitic a macromoleculelor organice din alimente i transformarea lor n
molecule simple, fr specificitate, absorbabile ( glucoz,acizi grai, glicerin,
aminoacizi ).n etapa celular, principiile alimentare sufer numeroase
transformri.
Totalitatea transformrilor biochimice care au loc la nivel celular
reprezint metabolismul intermediar. Deci, metabolismul intermediar
reprezint schimbul de substane i energie dintre celul i mediul intern.

Reaciile metabolice din celule sunt de dou feluri: reacii anabolice, de

sintez a unor constitueni celulari sau de rezerv, i reacii catabolice, de
scindare a substanelor pn la produi finali neutilizabili (ap, dioxid de
carbon,s ubstane azotate simple). Prin reacii anabolice are loc rennoirea
permanent a structurilor celulare uzate, sunt sintetizate o serie de substane
active ( enzime, hormoni ),este asigurat creterea i nmulirea celulelor,
precum i ncrcarea lor cu material nutritiv de rezerv. Reaciile catabolice
genereaz energie. Ele se desfoar n dou faze succesive. n prim faz are
loc metabolizarea incomplet, pe ci specifice,a substanelor nutritive, pn la
stadiul de acetil coenzim A i acid oxaloacetic, produi intermediari comuni
glucidelor, lipidelor i proteinelor. n aceast faz se elibereaz o cantitate
redus de energie. n faza a doua are loc metabolizarea complet a produilor
intermediari. Aceast faz este comun tuturor substanelor nutritive. Ea const
n reacii de oxido-reducere prin care se elibereaz peste 90% din energia
chimic a moleculelor. O parte din aceste reacii se desfoar ciclic, n cadrul
ciclului citric sau ciclul lui Krebs, iar o alt parte are loc la nivelul lanului sau
catenei respiratorii celulare.
Metabolismul intermediar si energetic.
Metabolismul - este schimbul permanent de substane dintre organism i
mediu.
Din punct de vedere didactic metabolismul prezint 2 componente:
- intermediar - care reprezint totalitatea transformrilor pe care le sufer
alimentele introduse in organism (glucide, proteine, apa, minerale).
- energetic - const n generarea i utilizarea energiei necesare, desfaurarii
activitii diferitelor organe i sisteme. Reaciile metabolice au loc n celule,
unde deosebim:
= reacii anabolice sau de sinteze care rennoiesc permanent structurile
celulare sau sintetizeaz substae active (enzime, hormoni) asigurnd creterea,
inmulirea celulelor. Aceste sunt reacii care necesit energie.
= reaciile catabolice care genereaz energie prin procesele de oxido-reducere,
de ardere a alimentelor in prezena oxigenului. Energia in organism se
elibereaz treptat n etape succesive, o parte se transforma in cldura, o alta se
nmagazineaz sub forma compuilor fosfat -macro-energetici de tip A.T.P.
Caracteristica metabolismuli intermediar
Obiectivele metabolismului intermediar sunt:
- de a prelua din mediul nconjurtor energie sub form de energie chimic din
componena hranei sau sub form de energie luminoas;
- utilizarea componenei hrnii pentru sinteza substanelor proprii;
- degradarea substanelor celulare cu eliberare de energie.
Toate aceste aspecte alctuesc tabloul general al metabolismului intermediar
care presupune att procese catabolice ct i procese anabolice.
Catabolismul i anabolismul se desfoar n trei etape:

Catabolismul.
Stadiul I const n degradarea compuilor macromoleculari (proteine, lipide,
glucide) n compui simpli aminoacizi, acizi grai , glicerol i monozaharide.
Stadiul II Const n transformarea biomoleculelor de baz ntr-o substan
unic numit Acetil CoA.
Stadiul III const n antrenarea Acetil CoA ntr-o succesiune de reacii care
alctuesc ciclul Krebs cu formarea a 4 perechi de H i 2 atomi de carbon
sub form de CO2.
Anabolismul
Stadiul I al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest
stadiu din componena ciclului Krebs se formeaz Acetil CoA.
Stadiul II al anabolismului coincide cu stadiul II al catabolismului. n acest
stadiu se formeaz Acetil CoA biomolecule de baz.
Stadiul III al anabolismului coincide cu stadiul I al catabolismului. n acest
stadiu se sintetizeaz din biomolecule de baz macromolecule proprii
organismului dat(proteine, lipide, glucide).
8.1 Modul I. Enzime
a) Consideraii generale ale enzimelor
Localizarea intracelulara a enzimelor
Enzimele (fermenii) sunt substane foarte complicate care se gsesc numai
n natura vie vegetala i animal avnd un rol important n desfacerea
substanelor alimentare brute (graimi, proteine, zaharuri) n substane mai
simple pe care organismul s le foloseasc mai rapid i mai uor pentru
producerea de energie.
De asemenea, enzimele pot sintetiza substante complexe necesare vietii, din
substane mai simple.
Din arderea combustibilului alimentar n organism, rezult pe lng energie i
o serie de deeuri care nu mai pot fi utilizate de ctre organism sau care sunt
toxice. Enzimele descompun aceste deeuri pn la componentele simple din
care au fost sintetizate alimentele: ap, bioxid de carbon, azot, sulf, etc.
In celula, enzimele sunt localizate specific n anumite compartimente fie in
organite celulare, fie n citoplasm.
Separarea organitelor celulare prin ultracentrifugare urmat de identificarea
specific a enzimelor prin tehnici imunohistochimice a reprezentat modalitatea
prin care s-a stabilit exact localizarea intracelulara a enzimelor.
Unele procese au loc n toate tipurile de celule, enzimele respective fiind
raspndite ubicuitar(care este rspndit peste tot), cum ar fi de exemplu,
enzimele implicate n biosinteza proteinelor i acizilor nucleici, enzimele
glicolitice.
Alte procese au loc numai n anumite celule, ca urmare numai acestea posed
echipamentele enzimatice specifice. De exemplu, enzimele implicate n sinteza

hormonilor tiroidieni sunt numai n tiroid, enzimele implicate n biosinteza

ureei se gsesc numai n celulele hepatice.
Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de
enzimele care acioneaz n diferitele compartimente din celul.
Membrana celular conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie:
membranele extern i intern conin enzimele implicate n lanul respirator, si
nteza fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea
mitocondrial
conine enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate n decarboxilarea
oxidativ
a
cetoacizilor
catabolismul acizilor
grai, dezaminarea
aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.
Ribozomii abunda n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei
proteinelor. Ribozomii liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de
reticulul endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice,
pentozofosfailor, enzimele din biosinteza
acizilor grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe conin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaz proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor
sintetizate n reticulul endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor si
proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixta, citoplasmatic i mitocondrial, cum sunt
transaminaz glutamic oxalilacetic, malat dehidrogenaza, izocitrat
dehidrogenaza.
Generalizri Consideraii generale ale enzimelor.
In organismele vii, mii de reacii chimice se desf oar foarte rapid n
condiiile de presiune i temperatur ale acestuia. Toate aceste transformri
sunt
mediate
de enzime (denumite iniial fermeni sau diastaze), proteine specializate s catal
izeze reaciile metabolice.
Substanele transformate n aceste reacii se caracterizeaz printr-o tendin a
limitat de reacie "n vitro" n aceleai condiii cu cele din organism.
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un
compus ce inmagazineaz o mare cantitate de energie prezentnd un anumit
potenial termodinamic, dei n laborator, n aceleai condiii ca cele din
organism, aceasta este stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute
datorit aciunii catalitice a enzimelor.
A) Caracteristicile enzimelor

Enzimele pot fi definite biocatalizatori care prezint urmatoarele trasturi

caracteristice:
1. Enzimele au o putere catalitica enorma accelernd viteza reaciilor cu
pan la 1016 ori fa de viteza reaciei necatalizate. Aceast capacitate
depete puterea oricrui catalizator folosit n sinteza organic. Enzimele au
aceast imens putere catalitic n soluii diluate, n condiii moderate de pH i
temperatur.
Puterea catalitic poate fi definit ca raportul intre viteza reaciei catalizate si
viteza reaciei necatalizate enzimatic.
2. Enzimele nu se consuma si nu se transforma in reaciile catalizate.
3. Enzimele se caracterizeaz printr-o mare specificitate. Orice enzima este
foarte selectiv att n ceea ce privete substana pe care o transform
(substrat- S), ct i din punctul de vedere al reaciei catalizate. E (enzima).
Transformarea S. P(produsi) se desfoar fr reactii secundare, astfel c
rezult numai compuii dorii. Prin aceast aciune enzimele se deosebesc de
catalizatorii din chimia organic, reaciile murate n absena enzimelor
avnd randamente mai sczute i fiind nsoite de reacii secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le
transforma accelernd astfel viteza reaciei biochimice.
5. Capacitate de reglare. Reglarea activitii enzimatice se realizeaz n
moduri diferite ce variaz de la controlul cantitii de enzime sintetizate de
celul pn la modularea activitii sale prin interaciuni reversibile cu
activatori i inhibitori metabolici. Activitatea variat a enzimelor poate fi pus
pe seama capacitii de adaptare structural i functional a proteinelor.
Enzimele contribuie astfel la coordonarea i reglarea proceselor metabolice.
6. Enzimele se gsesc n celule i gsesc n cantitate foarte mic dar cu
efect semnificativ.
7. Enzimele pot cataliza reaciile n condiiile organismului, la temperatura
de aproximativ 30 0C, in condiii de, n general, neutru i la presiune
atmosferic.
Reaciile chimice ce au loc n organismele vii, n condiii de presiune i
temperatur relativ joase i pH bine definit nu se pot realiza, la vitezele
apreciabile care le caracterizeaz, dect admind intervenia unor catalizatori
deosebit de eficieni. Aceti catalizatori eficieni sunt produi chiar de
organism, sunt de natur proteic i poart numele de ENZIME (de la
grecescul "en zime" = drojdie). Ele se pot defini, deci, drept proteine cu
aciune catalitic; aproape toate moleculele-enzim, cunoscute pn acum,
dintre care multe obinute sub form cristalin au structur proteic. Numrul
enzimelor este de ordinul miilor cci, n lumea vie, fiecrei molecule organice,
existente aici, trebuie s-i corespund cel puin o enzim, care s participe la
sintez i/sau degradarea ei.
Or, Enzimele (din limba greac - zymosis - ferment) sunt proteine sau
proteide fr de care celule vii nu pot nfptui reacii complexe ntr-un timp
scurt, la temperatura mediului nconjurtor. Ele sunt substane care catalizeaz
reaciile biochimice din organism, avnd un rol esenial n biosinteza i

degradarea substanelor din materia vie, ntlnindu-se n toate organismele

animale, vegetale i n microorganisme, mai fiind denumite din aceast cauz
biocatalizatori. Fr enzime , procesele biochimice s-ar desfura cu viteze
foarte mici.
Rolul enzimelor n cadrul organismelor poate fi generalizat:
a). Descompunerea moleculelor mari.
b). Accelereaz procesele metabolice.
c). Coordoneaz unele etape ale ciclului metabolic.
B) Structura enzimelor
Enzimele sunt proteine globulare putnd avea o structur:
a). unitar - enzime monocomponente, alctuite numai din aminoacizi: tripsin,
, chimotripsin, pepsin, lipaz, ribonucleaz;
b). binar - enzime alctuite dintr-o parte proteic (apoenzima) i o grup
neproteic, definite de Euler astfel: Holoenzim= Apoenzim + Cofactor.
Studiul structurii enzimelor s-a realizat prin tehnici exacte: difracie de raze X,
dicroism circular, fluorescen, analize in UV i IR, RMN, spectrometrie
Raman etc.
Apoenzim este de natur proteic care confer enzimei specifizarea de
substrat.
Cofactor este de natur neproteic i care nu confer enzimei specificitatea de
reacii. Cofactorul poate fi reprezentat de :
-coenzime care sunt derivai de la vitamine cum ar fi NAD+;FAD+.
Ce prezint aceti cofactori (coenzime)?
R-s: Dintre toi cofactorii prezeni n organism, doi dintre ei mai cunocui
purttori de electroni sunt coenzimele NAD+ (nicotin-adenin dinucleotid) i
FAD+ (flavin-adenin-dinucleotidul). Restul de nucleotid din NAD + (sau
FAD+) este forma fosforilat a NAD+-lui, locul n care poate avea loc
reducerea reversibil, fenomen care const n transferul ionilor de
hidrogen (NAD++H+NADH )
- grupe prostatice TPP, piridoxalfosfat, hemul;
- ionii metalici Na+, Cu2+, Zn2+, Fe2+, Fe3+, Co2+.
Enzime, biofermeni substane proteice specifice sintetizate n organismele
vii, care ndeplinesc rolul de catalizatori biologici n reaciile biochimice,
asigurnd reglarea proceselor metabolice. Se gsesc n toate celulele i
lichidele organismului.
Dup structur enzimele se clasific n dou categorii: enzime exclusiv de
component de natur proteic i o component de natur neproteic numit
coenzim. Natur proteic format numai dintr-o holoproteid i enzime
hetroproteide formate dintr-o coenzim.
Enzimele se mpart n ase grupe mari: hidrolaze, transferaze,
oxidoreductaze, liaze, izomeraze i ligaze (sintetaze), fiecare avnd, la rndul
ei, mai multe subgrupe. Enzimele reacioneaz cu substratul (substana care va

fi scindat) i formeaz aa-numitul complex intermediar enzim-substrat (ES).

Aceasta duce la micorarea energiei de activare, nlesnind descompunerea
substratului. Fermenii sunt activi n concentraii extrem de mici (de ex.,
amilaza este activ n soluie de 1 : 1000.000, peroxidaza n soluie de 1 :
5000.000) i nu se consum n timpul procesului de catalizare. Enzimele sunt
proteine simple sau conjugate, ultimele avnd dou componente: prima
proteic, nedializabil, termolabil, numit apoenzim, i cealalt
micromolecular, dializabil i termostabil, numit coenzim (coferment sau
partea prostetic, cnd ea este strns legat de apoenzim). Cofermentul este
reprezentat prin enzim legat de metale (Si++, Zn++, Mg++ etc.), nucleotide,
vitamine . a. Partea neproteic (cofactorul) determin sensul reaciei,
activitatea catalitic propriu-zis i mecanismul reaciei chimice. Apoenzima
prin grupele sale chimice speciale stabilete legtura enzimei cu substratul,
adic determin caracterul specific al reaciei. Activitatea catalitic nu este
realizat de ntreaga molecul a enzimei, ci e concentrat ntr-o poriune
limitat, numit centru activ, afar de care n componena enzimei mai ntr
aa-numitul centru alosteric. Prin intermediul lui are loc reglarea activitii
enzimei. Unele enzime exist sub form inactiv (proenzim), activndu-se n
anumite condiii (de ex., pepsinogenul este activat n prezena acidului
clorhidric). Existena enzimei sub form de precursori inactivi reprezint un
factor de protecie, care previne, bunoar, autodigestia esuturilor, coagularea
intravascular a sngelui etc. Asupra activitii enzimelor acioneaz multe
substane (iod, metale, hormoni, metabolii etc.), printre care unele (numite
activatori) le sporesc activitatea catalitic, iar altele (numite inhibitori) o reduc.
Inhibitorul formeaz cu enzima un complex incapabil de activitate catalitic. n
funcie de stabilitatea acestui complex exist inhibiie ireversibil i inhibiie
reversibil. Ultima poate fi concurent (izosteric) sau neconcurent
(alosteric). n cazul inhibiiei concurente inhibitorul are o structur
asemntoare cu substratul. Astfel ntre substrat i inhibitor are loc un fel de
concuren pentru centrul activ, care depinde de raportul dintre concentraiile
lor. Inhibiia concurent st la baza aciunii preparatelor sulfanilamidice de
combatere a unor microorganisme, pentru care acidul paraaminobenzoic
(asemntor dup structur cu unele sulfanilamide) constituie factorul de
cretere al microorganismelor. n urma substituiei concurente se obine un
efect bacteriostatic (stagnarea creterii i nmulirii bacteriilor). n cazul
inhibiiei neconcurente inhibitorul (numit efector) nu seamn dup structura
sa cu substratul i, deci, nu se fixeaz n centrul activ catalitic, ci n centrul
alosteric. Ca efectori pot servi, de asemenea, unii metabolii, unele nucleotide
etc. Efectorul, fixndu-se n centrul alosteric, modific configuraia enzimei,
i, ca rezultat, centrul catalitic se deformeaz parial sau total, avnd ca urmare
pierderea sau reducerea activitii enzimei.
Ansamblul de reacii chimice care constituie metabolismul se desfoar ntr-o
ordine strict, la baza creia st procesul complex de reglare a activitii
enzimelor.

Dereglarea proceselor enzimatice, aprute ca rezultat al mutaiilor, reprezint

aa-numitele enzimopatii, caracterizate prin sinteza enzimei defectuoase, adic
inactiv sau cu activitate catalitic parial redus. n cazul multor afeciuni
activitatea enzimelor se modific, de aceea determinarea activitii acestora n
obiectele biologice (ser, urin) are o aplicare larg n diagnosticarea hepatitei,
pancreatitei, bolilor cardiovasculare . a. n afar de aceasta astfel de preparate
enzimatice, ca pepsina, tripsina, fibrinolizina, hialuronidaza, trombina,
lizozima . a., se administreaz i pentru tratarea unor boli.
C) Nomenclatura.
Nomenclatura de lucru i cea sistematic.
Nomenclatura de lucru este aceea care se obine adugnd terminaia aza la
numele substratului asupra creia acioneaz enzima. Exemplu: maltaza are ca
substrat maltoza, ureaza are ca substrat ureea.
Nomenclatura sistematica include doua componente
1) Definete substratul sau cele doua substane asupra crora acioneaz
enzima (la reaciile bimoleculare);
2) Sufixul aza - indic natura procesului pe care-l determina enzima. Ex.:
glucoamilaza. 1,4 glucon - glucohidrolaza (asupra leg.1,4 din glucon i
aciunea se realizeaz hidrolitic cu eliminare de glucoza).
Cnd avem doi componeni: transaminaza = glutamat - piruvat
aminotransferaza.
Clasificare
Dup locul unde acioneaz: endoenzime i exoenzime.
M = 13000 = 35000 - numr restrns
Dup
organizarea
structural
monomere - oligomere (majoritatea) (disociaz in
monomeri) M = 35000 sute de mii- izoenzime configuraie difetit, dar
catalizez.
aceleai reacii complexe enzimatice.
Sintetizate n celula legat una de alta i catalizeaz reaciile ntr-o anumit
succesiune.
Nomenclatura enzimelor nu este dificil. Aceasta se bazeaz pe 2 factori:
- substratul asupra cruia acioneaz enzima.
- modul cum reacioneaz enzima cu substratul dat.
De exemplu: piruvat decarboxilaz enzim care ndeprteaz grupa carboxil de
la piruvat.
Proteinele joac mai multe roluri n organism ca : enzime, enzime
inhibatorii, hormoni, rol protector (anticorpi), regulatori osmotici,
conectori ai muchilor cu oasele.
Nici
un
alt
polimer
compus
nu
mai
joaca
attea
roluri n natur deoarece proteinele sunt foarte diverse n structur.
Doar 20 de aminoacizi sunt folosii pentru a construi structura primara,dar ei

pot
fi
aranjai teoretic in 20 la puterea 19 secvene diferite.
Enzimele sunt catalizatori biochimici propriu-zii, aadar sunt compui care
mresc viteza reaciilor chimice ce se desfoar in sistemele biologice, fr s
se consume n cursul lor.
S-au efectuat lucrri numeroase de-a lungul anilor dovedindu-se prin acestea c
enzimologia constituie studiul bazelor moleculare ale vieii.
Enzimele sunt probabil mai importante dect orice alt element activ ca ajutor al
digestiei si sntii. Pan acum s-a artat c sute de enzime au un rol vital in
construirea sntii, datorit contribuiei lor la procesul de digestie. Studiile
viitoare probabil vor arta c enzimele au un rol mult mai important pentru
sntate
dect se cunoate n prezent.
Nu putem trai mult fr enzime. De fapt, concepia n sine este dependent de
aceste elemente. Ele funcioneaz ca un catalizator care face ca celulele
corpului s funcioneze eficient. Din momentul naterii, enzimele fac viata
posibil prin aciunile lor, reparnd i construind corpul i celulele creierului.
Aceti lucrtori acioneaz n corp i n creier n cel mai fantastic i puternic
mod. Ele lucreaz pentru o sntate deplin. Enzimele reprezint nsi fora
intangibila a vieii. Omul nu poate reui s creeze enzime vii aa cum natura
poate crea, dac ar fi putut, ar fi reuit s creeze viata sau s readuc la via
materia
moart.
Exista miliarde de enzime n corpul nostru, i sunt sute de tipuri diferite de
enzime gsite n snge, care vor descompune 5 milioane de molecule de
peroxid n ap i oxigen n 60 secunde. Enzimele intestinale pot descompune
moleculele de zahar i grsimi care sunt de 1 milion de ori mai mari dect
greutatea lor.
Centrul activ al enzimelor
Procesul enzimatic nu se desfoar oriunde n molecula enzimei, ci numai n
anumite zone care au o dispozitie spaial corespunzatoare, alctuite din 24 aminoacizi. Aceste zone se numesc "centri activi" i reprezint
aranjamentul spaial adecvat "prinderii" substratului.
Legarea substratului la centrul activ al enzimei i imprima o stare de tensiune
molecular care faciliteaz reacia biochimic. n centrul activ se gsesc numai
anumii aminoacizi care prezinta grupe -OH, - SH, - COOH, -NH2, radical
imidazol (de exemplu, serina, histidina, acid aspartic, lizina).
n cazul enzimelor cu structur binar, n centrul activ se poate distinge
un situs de fixare care se combin cu substratul prin legturi labile (la formarea
cruia particip
aminoacizi auxiliari)
i
un situs
catalitic (format
din aminoacizii
colaboratori care acioneaz asupra substratului), importan pentru aceast
interaciune fiind prezena cofactorilor. Aminoacizii care nu sunt implicai n
reacia enzimatic sunt aminoacizi necolaboratori. Functionalitatea centrului
catalitic este consecina structurii spaiale a proteinenzimei care prin dispoziia
sa n spaiu aduce anumii aminoacizi distanai n structura primar ntr-o
pozitie optim pentru legarea substratului

(Modelul
cheia i lactul)
Organizarea
centrului activ la
enzimele
alosterice.

Pentru E biocomponente centrul activ conine i cofactor (coferment).

n afar de aminoacizi care particip direct la reacia enzimatic, exist unii
care au rol indirect -->asigur flexibilitatea structurii teriare.
Exist aminoacizi care sunt considerai aminoacizi umplutur care variaz n
izoenzime sau n formele moleculare multiple.
Centrul activ este format din 2 regiuni :
prima regiune de recunoatere / legare cu a substratului; a 2-a regiune
responsabil de reacia enzimatica. Exemplu, acetilcolinesteraza are un centru
activ format din 2 regiuni :
a) anionic care conine gruparea COO- a acidului aspartic, are rol de
recunoaterea regiunii pozitive din substrat;
b) esterazic care conine grupele -OH din serin i grupul imidazolic din restul
de histidin care au rol n scindarea substratului:
CH3-CO-O-CH2-CH2-N-(CH3)3 ----->CH3-COOH + CH2OH-CH2-N-(CH3)3
acetilcolina -HOH colina.
Centrul activ are n general este o structur complmentar cu structura
substratului

Specificitatea enzimelor reprezinta :

1) capacitatea unei enzime de a cataliz, o anumit reacie enzimatic neputnd
aciona asupra substanelor cu structur asemntoare ca exemplu ureaza:
H2N-CO-NH2

ureaza

H 2O

2NH3+CO2

2) transformarea unui sau a mai multor substraturi cu structuri asemntoare n

cadrul reaciei respective, spre exemplu, amilazele pot ac iona att asupra
amidonului ct i asupra glicogenului .
3).Unele enzime sunt active pentru izomerii cis i pasive pentru izomerul trans
al aceleiai substrat.
Specificitatea poate fi de reacie: proprietatea unei enzime de a cataliza o
singur reacie termodinamic posibil cu excepie :

- enzimele proteolitice care n afar de legtur peptidic pot scinda legturi

esterice sau amidice i pot cataliza R de transesterificare ;
- enzimele piridoxal dependente catalizeaz R de transminare, de carboxilare,
izomerizare, alfa-beta eliminare;
- kinazele care catalizeaz transferul unui rest de fosfat de pe ATP pe anumite
substrate.
Specificitatea poate fi de substrat : absolut / relative / stereospecificitate optic
sau geometric.
Energia de activare
ntr-o reacie enzimatic creterea vitezei de reacie se face prin scderea
energiei de activare fr a modifica starea termodinamic a sistemului.
O reacie de transformare a unui substrat n produi de reacie va avea loc
numai atunci cnd o anumit populaie din moleculele substratului vor avea
suficienta energie pentru a trece ntr-o stare activa (= cu cea de tranziie T ).
Cantitatea de energie necesar pentru a aduce toate moleculele dintr-un
mol de substrat la o temperatura dat n stare de tranzi ie T se nume te
energie liber de activare (kcal/mol).
n laborator energia cinetic necesar creterii numrul de ciocniri eficace
pentru a forma produi de reacie se realizeaz prin cretere temperaturii. Acest
lucru nu este posibil pentru organismele vii deoarece omul este fiin
homeoterm, aceasta imposibilitate este depit de prezena enzimei care are
rolul de a scdea energia de activare a reactanilor fr a modifica starea
termodinamic a sistemului.
Eficienta catalizei enzimatice este asigurata prin mai multe mecanisme :
1) orientarea, apropierea substratului de centrul activ al E;
2) adaptarea indus a centrului activ la structura substartului;
3) cataliza general acid-baz;
4) cataliza covalent (enzima i o grupare funcional din centrul activ
formeaz un intermediar covalent)
8-2. Tema II. Specificarea enzimelor
1. Generaliti
Enzimele sunt substane care catalizeaz reaciile biochimice din organism,
au un rol esenial n sinteza i degradarea substanelor din materia vie. Toate
transformrile biochimice au loc numai prin intermediul enzimelor de aceea se
mai numesc i biocatalizatori. Ele determin realizarea unor reacii chimice cu
vitez mare, n condiii compatibile cu viaa: dac ele n-ar exista reaciile
chimice s-ar putea produce numai la temperaturi i presiuni ridicate, condiii
deosebite de alcalinitate i aciditate. Enzimele au un rol fundamental n
reglarea proceselor metabolice i pot aciona n interiorul sau n exteriorul
organismului.
Din punct de vedere chimic enzimele sunt substane proteice, cu rol
funcional. Sunt produse numai de organisme vii i acioneaz asupra unor
substane care se numesc substrat.

n celula se gsesc n nucleu, citoplasma, adsorbite la suprafaa diferitelor

componente celulare sau dizolvate n protoplasma sau n sucul celular.
Fiind substane proteice ii pierd proprietile catalitice n condiiile n care
are loc denaturarea proteinelor: temperatura ridicata, mediu acid, bazic,
prezenta solvenilor organici.
Enzimele se gsesc n organismele vegetale cu precdere n: semine n stare
de germinaie, plante, frunze, fructe. Concentraia lor este mai mare n
organismele tinere i puterea catalitic este mai mare.
Din punct de vedere fizic au proprietai asemanatoare proteinelor.
Paralela ntre catalizatori i enzime
a) Asemnri:
- in reacii reversibile asigura ajungerea foarte rapid la echilibru;
catalizeaz numai reacii termodinamic posibile (n sensul micorrii energiei
libere);
- nu modific echilibrul de reacii, ci numai viteza;
nu se consum n timpul reaciilor i nu se transform, de aceea o cantitate
foarte mic este suficienta pentru transformarea unor cantiti mari de substrat.
b) -Deosebiri:
- prezint specificitate de aciune care poate fi de reacii sau de substrat;
- asigur coordonarea, reglarea i controlul proceselor biochimice fiind
modulatori ai proceselor metabolice.
2. Structura i conformaia
Enzimele sunt macromolecule de natura proteic cu urmtoarele
caracteristici:
a) au particulariti structurale specifice, adic existena unor situsuri (zone n
care se leag n mod specific substratul):
- situs catalitic;
- situs allosterice;
b) prezint configuraie spaial care asigur funcionarea ca enzim.
Substratul enzimelor reprezint un compus care se poate lega specific la o
enzim i asupra cruia enzima acioneaz transformndu-l in produs de
reacie.
E +S[ES]E +P, unde E- enzima, S-substrat, P-produi de reacie
Substratul trebuie sa ndeplineasc urmtoarele condiii:
- sa satisfac necesitatea de specificitate a unei enzime;
- sa prezinte o dispunere spaial care sa-i permit accesul la enzim;
- sa prezinte o complementaritate structural i conformaional.
Situsul catalitic reprezint o zona specific i delimitat format dintr-un
numr
mic de radicali de aminoacizi care includ grupri:
-OH, - NH2, - COOH, - SH.
Situsul catalitic ocup o zona restrns din suprafaa enzimei, de aceea
substratul este o molecul dimensionat pe msura situsului.
Situsul allosteric reprezint o zona a crei activitate se bazeaz pe existena
unui

efector allosteric - activator sau inhibitor - care se leag la situsul allosteric i

creaz
capacitatea de modulator al reaciilor biochimice.
Centrul catalitic este reprezentat de :
- situs la enzimele holoproteice;
- situs plus cofactor la cele heteroproteice.
Enzimele heteroproteice prezint doua pri componente active doar mpreuna:
- apoenzima i cofactorul.
Apoenzima este o componenta de natura proteica, termolabila i nedializabil,
are n structura sa situsul catalitic i pe cel allosteric; determina legarea
substratului, formeaz complexul enzim - substrat i enzima - cofactor,
determin specificitatea fa de substrat, manifest grade diferite de afinitate
pentru cofactor.
8.2 Tema: Mecanismul catalizei enzimatice, cinetica reaciilor enzimatice,
influena diferitor factori asupra vitezei de reacie.
8.2.1.Cinetica reaiilor enzimatice
Prin studiul cineticii enzimatice este explicat modul in care enzimele
acioneaz, permind determinarea vitezei maxime de reacie a unei enzime i
a afinitaii
sale
pentru
substrat sau pentru unii efectori. Determinarea vitezei de reacie nu relev
stoechiometria reaciei sau mecanismul acesteia, deci este necesar o ecuaie
care s fac legtura ntre viteza iniial a reaciei (determinata experimental)
i concentraia reacantilor.
Dei cazul enzimelor monomerice cu un singur substrat este relativ rar, cinetica
clasica a enzimelor monomerice n faza staionar cu un singur substrat
(prezentata n continuare) este modul cel mai simplu de a trata i a inelege
cinetica enzimatic. Cele mai multe enzime au ns mai multe substaturi dnd
natere la produi diferii nerespectnd comportamentul clasic.
In reaciile cu un singur substrat, meninnd constanta concentraia enzimei,
creterea concentraiei de substrat determin mrirea vitezei de reacie pn
cnd se atinge o valoare maxim peste care orict ar crete concentraia
substratului viteza reaciei enzimatice rmne nemodificata. (La concentraii
mici de substrat, viteza de reacie este propor ional cu
concentraia substratului (reacii de ordin1). La concentraii mari de substrat,
viteza de reacie devine n dependent de concentraia substratului (reacii de
ordin 0), enzima saturndu-se cu substrat.
Viteza unei reacii enzimatice este determinat de concentra ia de substrat la
acel moment i de constantele Km i v max.

Enzimele pot cataliza numai reacii termodinamic posibile, adic numai acele
reacii chimice care au loc cu scderea entalpiei libere de reacie. Viteza
reaciilor catalizate de enzime reprezint cantitatea de substrat transformat (c)
ntr-un anumit interval de timp (dt). Valoarea vitezei reale de reac ie este
dat de relaia:
Vr =

dc
dt

Mrimea vitezei de reacie reprezint de fapt activitatea enzimatic.

Viteza reaciilor enzimatice (activitatea enzimatic) depinde de o serie de
factori: concentraia enzimei, concentraia substratului, afinitatea enzim substrat, temperatur, pH, prezena inhibitorilor.
a) Influena concentraiei enzimei[E]
Viteza de reacie crete proporional pentru concentraii mici i rmne
constant pentru concentraii mari de enzim pus n contact cu aceiai
cantitate de substrat. Grafic aceast variaie este redat astfel:

Cofactorul reprezint componenta neproteic termostabila, dializabil

(unele vitamine, nucleotide).
Cofactorul enzimatic, la randul sau poate fi:
- un rest al unei substane organice numita grupare prostetic, inseparabil legat
de
apoenzim;
- un rest al unei substane organice numit coenzim care poate trece de la o
apoenzim la alta, separndu-se uor de aceasta prin dializ si neparticipnd la
formarea centrului
Activ al enzimei respective;
- un rest al unei substae nespecifice numit activator sau cofactor anorganic
care determin transformarea unui zimogen, adic a unui compus inactiv din
punct
de
vedere enzimatic intr-o enzim activ.
Dintre enzimele a cror parte prostetic este hemul, este catalaza, care
catalizeaz descompunerea peroxidului de hidrogen in ap i oxigen.
Cofactorii au urmtoarele caracteristici: sunt indispensabili pentru
manifestarea activitii catalitice sau pentru potentarea ei; unii sunt uor

disociabili de apoenzim, alii nu; determin specificitatea de reacie, formeaz

complexul enzima - cofactor.
Coenzimele sunt micromolecule organice care se ataeaz temporar la
apoenzim ( vitamine, hemulul, NTP, NDP).
La plante, enzimele proteolitice sunt rspndite att n organele vegetative
(frunze, tulpini, rdcini), ct i n seminele aflate n repaus sau n germinaie.
n timpul germinaiei, degradarea proteinelor de rezerv din endosperm sau
cotiledoane are loc cu o intensitate deosebit pentru a furniza aminoacizii
necesari biosintezei proteinelor specifice embrionului n dezvoltare.
Degradarea proteinelor se realizeaz i n procesul de imbtrnire a plantelor
cnd sunt supuse hidrolizei proteinele organelor vegetative. Produii rezultai
migreaz spre organele reproductive unde procesul de biosintez proteic este
deosebit de intens.
Mecanismul catalizei enzimatice, cinetica reaciilor enzimatice, influena
diferitor factori asupra vitezei de reacie.
8.2.2.Mecanisme de aciune a catalizei enzimatice
Enzimele sunt deci substane active n cantiti foarte mici, nu modific echilibrul de
reacie, ci numai viteza acestora prin scderea energetice (activeaz sau labilizeaz
moleculele care intra n reacie).
n prezenta enzimelor nivelul energetic minimul este mult cobort, moleculele reacioneaz
cu viteze mari (n absena enzimelor nu ar reaciona).
Mecanismul prin care enzimele i exercit funcia lor catalitic include ansamblul
urmtoarelor
procese
moleculare
principale:
- asocierea specifica a enzimei (E) cu
substratul (S) - complex intermediar ES
disociabil (Ajustarea indus);

n cazul catalizei enzimatice,

ntre enzim i substratul care se transform, se formeaz un complex activat
enzima-substrat, care apoi se transform cu vitez mare n produii finali de
reacie.
La formarea complexului activat enzima substrat, substratul se fixeaz pe
regiuni bine determinate de pe suprafaa enzimei, care poart numele de centri
activi i molecula substratului, exist complementariti conformaionale i
chimice care permit asamblarea lor.
Centrul activ al unei enzime este construit dintr-un numr redus de aminoacizi
situai n vecintate sau la distan.
n general, se admite ca pentru o reacie chimica obinuita, enzima particip
cu doi centri activi. Pentru enzimele cu structura binar unul dintre centrii
activi este, n general, situat n fragmentul protetic, iar al doilean fragmentul
prostetic.
(Vezi modelul cheia i lactul)
Astfel, cataliza enzimatic are elemente comune cu cataliza omogen,
deoarece enzima este adeseori repartizat uniform n sistemul chimic al crui

transformare o asigur. Cataliza enzimatic are caracter i de cataliz

eterogen, reacia biochimic desfaurndu-se n regiuni bine determinate de
pe suprafaa enzimei, situate la limita de separare dintre sistemul reactant i
macromolecula catalizatorului.
Un alt caracter tipic este marea eficien catalitic a enzimelor. O reac ie
decurge n prezena enzimei de 108 pana la 1011 ori mai repede, dect n
absenta ei. Numrul de molecule de substrat transformate sub aciunea enzimei
ntr-un minut (numr de transfer, turnover) variaz ntre 1000 1000000.
Cataliza enzimatic are loc n condiii blnde. Reacii care necatalizate nu au
loc dect la temperaturi nalte, presiuni mari, valori extreme de pH, sub
influena enzimelor evolueaz cu mare vitez la temperaturi n jurul lui 37 0C i
la presiune atmosferic, la pH aproape neutru.
8.2.3. Influenta diferitor factori
A) Influenta pH-ului
Pentru enzimele din organismul uman, pH-ul optim de aciune este pH-ul
normal al mediului n care ele si manifest aciunea catalitic.
Centrul activ al enzimelor conine grupe ionizabile, acide sau bazice, deci
modificarea pH-ului are ca efect modificarea gradului de disociere i, implicit,
modificarea vitezei de reacie.
pH-ul optim de aciune a unor enzime
Pentru enzimele din organismul uman pH-ul optim este intre 5-9, dar exist
enzime ce acioneaz i n afara acestui interval. De exemplu, pepsina
acioneaza la pH 1,5-2, fosfatazele alcaline la pH 9-10, iar fosfatazele acide la
pH 4,5-5.
B) Influenta temperaturii asupra activitii enzimelor
Fiecare enzima este caracterizat de un coeficient termic al reaciei, notat
Q10, ce reprezint creterea vitezei de reacie pentru o cretere cu 10 0 a
temperaturii, n condiiile meninerii constante a celorlali parametri. Pentru
reaciile enzimatice Q10 este ntre 1 si 2, fiind mai mic dect pentru reaciile
necatalizate, pentru care Q10 este intre 2 si 4. Aceasta relaie este valabil
numai pan la temperatura optim, pentru care viteza de reacie este maxim.
Creterea temperaturii peste temperatura optima determina scderea vitezei de
reacie, datorit denaturrii prii proteice a enzimei.
Temperatura optim pentru enzimele din organismul uman este 37-40 0C, la
plante 50-600C, iar pentru cele din microorganismele din apele termale este 801000C.
Determinarea activitii unei enzime trebuie s se fac la o temperatur ntre
25-370C.
8.3 Tema Influenta efectorilor enzimatici
Efectorii enzimatici sunt substane cu structuri chimice variate care aduse n
mediul de reacie pot influena activitatea enzimei care catalizeaz reacia.
Efectorii enzimatici pot fi activatori sau inhibitori.

Activatorii enzimatici. Sunt compui care stimuleaz activitatea enzimelor.

Acetia pot fi:
- activatori ai unor proenzime.
Forma inactiv a enzimei se numete proenzim sau zimogen, n care centrul
activ al enzimei este mascat. Prin eliminarea unei pri din molecul, centrul
activ este demascat, enzima devenind activ
Enzimele se caracterizeaz printr-o remarcabil specificitate n raport cu tipul
de reacie catalizat i cu natura substratului transformat. Sunt
unele enzime(ureaza, arginaza) care nu catalizeaz dect o singura reacie bine
determinat.
Remarcabil este de asemenea multitudinea reaciilor catalizate de enzime.
Astfel, enzimele intervin n reacii
dehidroliz, de polimerizare i
policondensare, de oxidoreducere, de transfer de grupri funcionale (formil,
metil, amino, acil, carboxil), de formare i scindare de legturi covalente, de
reacii prin radicali liberi etc.
Unele caracteristici ale enzimelor sunt imprimate de structura lor proteic.
Astfel, activitatea lor n cursul metabolismului intermediar este limitat n timp.
Ele se degradeaz relativ rapid sub influena altora. Activitatea, degradarea i
biosinteza enzimelor, sunt reglate de factori i mecanisme de control, de
complexitate deosebit i situate la nivele variate de organizare a sistemelor
biologice.
8.3.1 Specificitatea de reacie
Enzimele catalizeaz un anumit tip de reacie, n funcie de modul de aciune
asupra substratului. Acest tip de specificitate st la baza clasificrii enzimelor
i este datorat cofactorului care guverneaz tipul de reacie n care se va angaja
substratul. De exemplu, un anumit -aminoacid poate fi substrat pentru mai
multe enzime care au cofactori diferii.

Specificitatea absolut.
Enzimele din aceasta categorie acioneaz strict asupra unui anumit tip de
substrat nerecunoscnd nici o modificare a substratului respectiv. Ele nu sunt
specifice pentru o anumita legtura sau grupare din structura substratului i
recunosc doar substratul n totalitate.
Exemple:

Arginaza

aci
oneaz
numai asupra argininei:
Anhidraza carbonica catalizeaz sinteza acidului carbonic:

8.3.2.

Cataliza prin ioni metalici

Multe enzime necesit prezena metalelor pentru a-si manifesta aciunea, fiind
din acest punct de vedere metaloenzime (conin ionii integrai n structuri intim
legate de enzim) sau enzime ce necesita metalele ca activatori ( metalul este
legat de enzim prin legturi mai slabe).
Interaciunile ionice dintre un metal legat la enzim i substrat pot ajuta la
orientarea substratului pentru reacie sau pentru a stabiliza starea de tranziie.
Metalele funcioneaz drept catalizatori electrofili sau ca i centri nucleofili la
pH neutru.
Alcool - dehidrogenaza este una dintre enzimele care folosesc acest mecanism,
n care un ion Zn2+ stabilizeaz sarcina negativa ce apare tranzitiv la molecula
de acetaldehida format n reacia de oxidare a alcoolului.
Enolaza este enzima ce catalizeaz reacia de transformare a acidului 2,3difosfogliceric n acid fosfoenolpiruvic n glicoliz, pentru care ionii de
Mg2+ sunt implicai n interaciunea cu substratul (Fig.de mai jos).
In cazul acesteia, Lys 345 funcioneaz ca baza extrgnd H +, iar Glu 211 ca
acid cednd H+ grupei OH-. Prin interaciunea acidului 2,3-difosfogliceric cu
Mg2+se aciditeaz H+ de la C2 devenind mai reactiv.

Manifestarea specificitii enzimei n raport cu un anumit substrat sau grupe de

substrat
crora le confer o anumit orientare spaial precis;
- activarea respectiv scderea energiei de activare a moleculelor de substrat
reactant (S+);

- procesul catalitic efectiv prin care substratul se transforma n produs (P).

E + S S + P +
sau E + S ..[ES] P1 + E P2
EP2 + S1 [EP2S1] P2S1 + E
S = donor
S1 = acceptor
Viteza reaciilor enzimatice influenate de: concentraia enzimei i
substratului, temperatura, valoarea pH-ului, prezenta electroliilor, ali factori.
Cunoaterea rolului acestor factori are importan pentru ca prin studiul lor pot
fi caracterizate enzimele i se poate interveni asupra activitii lor catalitice.
Factorii enzimatici.
8.3.3. Reglarea activitii enzimatice.
Caracteristicile componentei proteice
Apoenzima fiind protein are toate nivelurile structurale. Structura primar
este stabil, determinat de secven aminoacizilor din lanul polipeptidic.
Structura secundar reprezinta procentul de configuraie spaiala -helix (n
special) stabilizat prin legturi de hidrogen. Structura teriar se refer la
asamblarea formelor elementare n spaiul tridimensional i plierea catenelor
polipeptidice.
Majoritatea aminoacizilor polari se dispun la exteriorul moleculei, iar
aminoacizii nepolari la interior, formnd o zon hidrofob intern. Structura
cuaternar apare la majoritatea enzimelor care sunt alctuite din mai multe
catene polipeptidice identice (enzime homomultimerice) sau diferite (enzime
heteromultimerice), asocierea protomerilor facndu-se prin legturi de
hidrogen, interaciuni electrostatice, forte Van der Waals.
Ca orice protein, enzimele se pot denatura ca urmare a unor modificri la
nivelul structurilor secundare i teriare.
Componenta proteic a enzimelor se caracterizeaz prin urmtoarele:
- este nedializabil i termolabil;
- confer specificitatea de substrat pentru activitatea unei enzime;
- conine situsul catalitic i pe cel la care se leag efectorii n cazul enzimelor
allosterice;
- determin legarea substratului la situsul catalitic i a efectorilor la alt situs.
Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat deriva i de la vitamine
sau ioni metalici, legai mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim
asociai cu aceasta prin legturi covalente (grupe prostetice).
Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici
Ioni
Enzima
Coenzi
metali
ma
ci
Cu2+
Citocrom
NAD+

Grupa
transfera
t
H+

Enzima
Lactat

Zn2+
Mg2+
Mn2+
K+
Fe2+,
Fe3+

oxidaza
Alcool
dehidrogena
za
Hexokinaza
Arginaza
Piruvat
kinaza
Catalaza
Peroxidaza

FAD
PALPO
Biotina
FH4

H+
NH2
CO2
-CHO
-CH3

dehidrogenaza
Succinat
dehidrogenaza
Aspartat
aminotransfera
za
PropionilCoA
carboxilaza
Timidilat
sintaza

Acetia se caracterizeaz prin urmtoarele:

-sunt termostabili;
-sunt dializabili;
-sunt indispensabili pentru desfurarea activitii enzimei;
-confer specificitatea de reacie pentru o enzim;
-intervin n reacie inducnd conformaia optim a enzimei, favoriznd
aranjamentul adecvat reaciei sau transfernd electroni sau grupe chimice.
Ansamblul de reacii chimice care constituie metabolismul se desfoar ntr-o
ordine strict, la baza creia st procesul complex de reglare a activitii
enzimelor.
Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale
sunt asociate sub forma unor sisteme multienzimatice (enzime polifuncionale).
Acestea sunt sisteme proteice complexe capabile s foloseasc mai multe
coenzime diferite. Sunt fixate prin legturi slabe, n ordinea corespunztoare
intrrii n aciune, pe o protein central, ce poate fi chiar una dintre enzime.
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n
decarboxilarea oxidativa a -cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, cetoglutarat dehidrogenaza formate dintr-un ansamblu proteic, patru coenzime
(TPP, NAD+, acid lipoic, coenzima A) , ionul
Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras sintaza care
intervine n biosinteza acizilor grai format din 7 enzime legate de o protein.

Izoenzime
Sunt enzime
care n plasm prezint dou
sau mai
multe
forme
moleculare. Aceste variante sunt cunoscute ca i izoenzime i dei ele au
structuri diferite au aceeai funcie catalitic. Toate catalizeaz aceeai reacie,
dar cu viteze diferite.

Catalizeaz aceeai reacie, dar au proprieti fizicochimice, cinetice,

imunologice diferite.
Pe baza acestor proprieti pot fi detectate i separate prin electroforez i
cromatografie.
Din punct de vedere structural, sunt oligomeri formai din subuniti identice
sau diferite.
Se cunosc izoenzime pentru oxidaze, dehidrogenaze, fosfataze, transaminaze.
Exemple:
a) Lactat dehidrogeneza (LDH) izoenzime (informatii generale)
LDH este o oxidoreductaza ce participa la glicoliza anaeroba, cataliznd
reacia reversibil de conversie a acidului lactic n acid piruvic. Este o enzim
citoplasmatic tetrameric, compus din subuniti H (Heart) i M (Muscle),
larg distribuit n organism, fiind ntlnit cu precadere n rinichi, miocard,
musculatura scheletic, creier, eritrocite, ficat i plmni.
LDH este un indicator nespecific de lezare tisular. Pentru a identifica sursa
creterii nivelului enzimatic sunt necesare izolarea i cuantificarea celor 5
fractiuni diferite ale LDH-ului rezultate prin combinarea n diferite proporii a
celor dou tipuri de monomeri H si M: LDH-1 (H4), LDH-2 (H3M), LDH-3
(H2M2), LDH-4 (HM3) si LDH-5 (M4).
b) Fosfataza alcalina-izoenzime (informatii generale)
Fosfataza alcalina (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil
de izoenzime ale fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat,
intestin, rinichi i os, la care se adauga n timpul sarcinii o forma tranzitorie,
forma placentar. Anumite tumori maligne pot, de asemenea, produce o
izoenzima ALP-7.
Fosfataza alcalina de origine osoasa ostaza este o glicoprotein
tetramerica care se gsete pe suprafaa osteoblastului i intervine n
calcificarea matricei osoase, fiind cunoscut ca un indicator sensibil i fidel
al metabolismului osos. Are un timp de injumatire lung. Un nivel ridicat al
izoenzimei osoase este intlnit in perioada de cretere osoas, n cursul
procesului de vindecare a fracturilor, ct i n afeciuni ale sistemului osos
caracterizate prin hiperactivitate osteoblastic i remodelare osoas cum ar fi
boala Paget, rahitism, osteomalacie, acromegalie, osteosarcom, sarcom Ewing,
metastaze osoase (n special asociate cu carcinom prostatic i mamar) 4;5;6.
c) Creatin- fosfokinaza(CK) este localizat cu preponderena n musculatura
scheletic, miocard.
S-au pus n eviden 3 izomeri:
1. CK/HM-de origine muscular i miocardic,
2.CK/BB gsit n esutul cerebral
3.CK/MB provenit din miocard.
Aceast enzim catalizeaz formarea ATP din creatinfosfat i ADP i
se inactiveaz foarte repede prin oxidarea gruprilor SH.

8.3. Preparate enzimatice

Activitatea catalitic a enzimelor, extrem de important din punct de
vedere fiziologic, prezint i o deosebit importan practic. O serie de
industrii care prelucreaz materii prime de origine vegetal sau animal au de
a face n procesele lor tehnologice cu reacii catalizate de enzime care sunt
proprii acestor materii prime sau sunt elaborate de microorganismele ce
se dezvolt n /pe ele. Reacii enzimatice similare pot avea loc ns i cu
enzime exogene sau cu sisteme enzimatice extrase din diverse
surse bogate n enzime i introduse apoi n procesele tehnologice n scopul
realizrii unor transformri dorite. Aceste enzime sau sisteme enzimatice
izolate din mediile n care au fost elaborate se numesc preparate enzimatice.
Ele se caracterizeaz printr-o puritate mai mic sau mai mare n funcie de
cantitatea i tipul compuilor, provenii din sursa enzimatic, ce le nsoesc.
Cu alte cuvinte, preparatele enzimatice pot fi mai mult sau mai puin pure
(purificate).
n vederea obinerii preparatelor enzimatice trebuie ales un material
biologic bogat n enzime cu o nalt activitate catalitic; materialul trebuie s
fie ieftin, uor accesibil i s se prelucreze uor.
Materiile prime folosite la obinerea preparatelor enzimatice pot fi de natur
vegetal, animal sau microbian. La plante concentraii mari de
enzime se ntlnesc n semine,
n boabele de cereale germinate i negerminate, n fructe, rdcini, sev,
frunze. La animale enzimele segsesc n toate celulele, ns concentraii mari
de
anumite
enzime
se
gsesc localizate n diferite organe ca: ficat, rinichi, inim, muchi.
Acestea au ns organe i esuturi specializate n producerea de enzime,aa
cum sunt glandele salivare, mucoasa stomacului, pancreasul, mucoasa
intestinal. O surs foarte important de enzime pentru obinerea preparatelor
enzimatice o constituie microorganismele: bacteriile, drojdiile i mucegaiurile.
Acestea prezint avantajul c se pot obine cu uurin n cantiti mari prin
nmulirea n instalaii speciale pe medii de cultur ieftine, de obicei
subproduse ale industriei alimentare(tre de gru,extract de porumb, melas,
roturi de soia i de floarea soarelui, etc.).de asemenea, ciclul de
dezvoltare al microorganismelor este foarte scurt
n comparaiei cu ciclul de dezvoltare al animalelor i plantelor, iar roducia lor
de
enzime poate fi mult mrit prin selectarea i
utilizarea
de tulpini i mutante nalt productive i prin utilizarea unor condiii optime
de cultivare.
1. Preparatele enzimatice microbiene
nsuirea anumitor mucegaiuri i bacterii de a produce n cursul dezvoltrii lor,
ca de altfel i cerealele care germineaz, enzime amilolitice este de mult timp
cunoscut n trile din Asia, n special Japonia i China. Astfel pentru
prepararea buturii sake din orez se foloseste un amestec de
mucegaiuri productoare de enzime. Primul procedeu de zaharificare a

porumbului pentru obinerea bioetanolului, care s-a bazat pe folosirea

enzimelor microbiene, procedeul Amylo, a aprut la sfritul secolului trecut n
Frana,
servindu-se de o cultur pur din mucegai.
Triferment, drajeuri . Categoria: Medicamente
Compoziie Drajeuri coninnd tripsina 18 u.W., lipaza 6 u.W. i amilaza
(putere amilolitic) 6,5 g. Aciune terapeutica, preparat enzimatic digestiv,
cuprinde fermeni pancreatici, proteolitici, lipolitici i amilolitici.
Indicaii: pancreatit cronic, fibroza chistic pancreatic (la copii), dispepsii
de putrefacie i fermentaie, tulburri digestive prin exces alimentar la
bolnavii cu insuficien secretorie a pancreasului (profilactic i curativ),
tulburri digestive n cursul tratamentului cu sulfamide sau antibiotice cu
spectru larg.
Drajeuri. Categoria: Medicamente
Compoziie. Pancreatin 100 mg .Papain 25 mg. Extract liofilizat de aloe vera
5 mg . Aciune terapeutic. Preparat enzimatic digestiv rezultat prin asocierea
enzimelor pancreatice (amilaze, lipaze, proteaze) cu un extract obinut din
fructele plantei Carica papaya i un extract liofilizat de aloe vera. Aceasta
asociere aduce n organism un surplus de enzime sub forma de amestec: cele de
origine animal (enzime pancreatice) cu cele de origine vegetala (prezente n
fructele de Carica papaya), obinndu-se un sinergism de aciune la nivelul
tractului digestiv. enzimele digestive prezente n extractul Carica sunt papaina
(cu aciune similar pepsinei, denumit pepsin vegetal i care solubilizeaz
proteinele), renina (ce descompune proteinele din lapte) i o enzim similar
peptidazelor (care stimuleaz declanarea digestiei). Extractul de Carica
papaya prezinta i o usoara aciune antiulceroas. La aceste enzime se
asociaz extractul de Aloe vera care la
Fermeni pancreatici Categoria: Medicamente
Compoziie: Un drajeu conine pancreatina 275mg (echivalent cu o activitate
enzimatic minim per drajeu, de: 18 u.W activitate proteolitica, 6 u.W
activitate lipolitica si 6.5g activitate amilolitica) si excipieni: amidon de
porumb, zahar, gelatina, talc, acetoftalat de celuloza, polisorbat 80,
polietilenglicol 400, carbonat de calciu, colorant Subset Yellow (E 110), ceara
galbena, ceara carnauba. Descrierea produsului: fermeni pancreatici este un
preparat enzimatic digestiv, cuprinde fermeni pancreatici: proteolitici, lipolitici
si amilolitici. Acest produs asigura dizolvarea grsimilor, proteinelor si
carbohidrailor, ajuta digestia si menine tractul digestiv in stare optima.
Indicaii: Este indicat ca tratament in: - pancreatita cronica; - Fibroza chistica
pancreatica (la copii); - Tulburrii digestive prin exces alimentar la bolnavii cu
insuficena secretorie a pancreasului (profilactic si curativ); - Dischinezie
biliar; - Colite i enterocolite.
Kreon 10 000, capsule Categoria: Medicamente
Compoziie Capsule a 150 mg pancreatina in minimicrosfere cu inveli enteric
(echivalent cu 10 000 uniti Ph. Eur. lipaza, 8 000 uniti Ph. Eur.amilaza, 600
uniti Ph. Eur. proteaze totale); cutii cu 20, 50 capsule. Ac iune terapeutic.

Secreia enzimatic pancreatic absenta sau redusa (mai mica dect 10% din
normal) necesit tratament de substituie. enzimele pancreatice ingerate pe cale
oral sunt necesare pentru descompunerea nutrienilor n vederea digestiei.
Lipaza descompune graimile, amilaza descompune glucidele, iar proteaza
determina descompunerea proteinelor. Capsulele se dizolva n stomac n
cateva minute i elibereaz sute de minimicrosfere. Toate minimicrosferele au
un inveli enteric, pentru a proteja enzimele, n special lipaza, de la degradare
i denaturare de ctre sucul gastric. Prin aceasta form galenic se ob ine un
amestec omogen cu chimul gastric. Dimensiunea minimicrosferelor este
important pentru asigurarea trecerii prin pilor n timpul fazei
8.4. Tema. Nomenclatura i clasificarea enzimelor
Descrierea principalelor clase de enzime.
Odat cu creterea numrului de enzime descoperite i studiate sub aspectele
structurii lor chimice i mecanismului reaciei catalizate, a aprut necesitatea
unei clasificri tiinifice a acestora. Astzi este valabil clasificarea propus n
1964 de ctre Comisia de Enzimologie a Uniunii Internaionale de Biochimie
care are la baz tipul i mecanismul reaciei catalizate.
Enzimele sunt biocatalizatori care exercit o aciune specific n soluii
diluate. Enzimele acioneaz selectiv, nu provoac reacii imposibile
(nespecifice) ei, mresc viteza reaciilor chimice, acionnd pe diferite sectoare
ale macromoleculelor, vremelnic se combin cu ele, dup care revin n
compoziia iniial.
La rndul lor enzimele din fiecare clas se mpart n subclase i subsubclase,
n funcie de mecanismul de reacie, natura cofactorului, tipul de legtur
chimic din substrat asupra creia acioneaz etc. n cadrul fiecrei sub
subclase, enzimele sunt aranjate ntr-o anumit ordine, n special cronologic.
Conform acestei clasificri, fiecare enzim este caracterizat nu numai de o
denumire, ci i de un cod specific format din patru cifre: prima cifr reprezint
clasa, a doua subclasa, a treia cifr arat sub subclasa, iar ultima cifr a codului
indic
numrul
de
ordine
din
sub subclasa respectiv. Acest cod este precedat de prescurtarea E.C.(Enzyme
Commission).
De exemplu, denumirea corect i complet a catalazei este H2O2:
H2O2 oxidoreductaza, iar cea a enzimei cu denumirea trivial dihidroorotaza
este L-5,6-dihidroorotat-amidohidrolaza.
Conform acestui criteriu, enzimele cunoscute pn n prezent se clasific n
ase clase principale, enzimele cuprinse ntr-o clas cataliznd acelai tip de
reacie, adic dup reacia pe care o catalizeaz.
Enzimele sunt biocatalizatori adic o clasa special de molecule proteice
dotat cu activitate catalitic.
-Caracteristici- -sunt cei mai eficieni catalizatori cunoscui deoarece
acioneaz la concentraii foarte mici ,desfurnd o activitate intens.-nu se
consum i nu se transform n timpul reaciilor biochimice pe care le
catalizeaz.-micoreaz energia de activare a moleculelor asupra crora

acioneaz-nu modific starea final de echilibru a reaciilor pe care le

catalizeaz ,ci mresc numai viteza cu care se realizeaz acest echilibru .
- enzimele au specificitate de substrat, dar i specificitate de reacie.
- unele enzime au proprieti.reglatoare, adic deci de iniierea, desfurarea
sau stoparea unei anumite reacii.
Structura i conformaia enzimelor
Deoarece enzimele sunt molecule de natur proteica, ele vor fi alctuite dintrun numr foarte mare de aminoacizi care vor fi dispui ntr-o configuraie
spaial de tip. genetic, configuraie.care va fi specific pentru activitatea
catalitic a enzimei. Fiind proteic va avea toate proprietile .fizico-chimice
ale proteinelor. Unele enzime sunt monocomponente fiind alctuite din
macromolecula proteica. Majoritatea enzimelor sunt ns biocomponente.
Apoenzima-este molecula proteica a enzimei termo-labil, nedializabil,
dotat cu activitate catalitic determin specificitatea de substrat n reacia pe
care o catalizeaz.
Cofactorul-molecule de natur neproteica, cu structur chimic diferit,
indispensabile manifestrii activitii catalitice a unei enzime.
8.4.1. Clasificarea enzilemlor. Descrierea principalelor clase de enzime
Dup natura reaciilor pe care le catalizeaz enzimele au fost clasificate in 6
mari clase enzimatice:
1)Oxireductaze catalizeaz reaciile care decurg cu transfer de hidrogen,
electroni sau oxigen.
2)Hidrolaze - catalizeaz reaciile de liz a moleculelor de substrat sub
aciunea apei
3)Transferaze catalizeaz transferul unor grupri specifice de un substrat
donor la un substrat accptor.
4)Izomeraze- catalizeaz reaciile de rearanjare intramolecular a atomilor sau
gruprilor funcionale din molecula substratului.
5)Liazelecatalizeaz scindarea legturilor chimice fr aportul apei.
6)Ligazele catalizeaz reaciile de formare a unor noi legturi chimice cu
consum de ATP .
Oxireductaze (Dehidrogenaze)
Acea clasa de oxireductaze care catalizeaz reacia redox cu transfer de H2
adic au nite coenzime care joac rolul de acceptori intermediari de H 2 ntre
substrat i produsul final.
Glicoliza este procesul biochimic enzimatic de degradare a glucozei, respectiv
procesul de oxidare intracelular a glucozei n scopul obinerii de energie sub
form de ATP necesar celulelor eucaritote vegetale i animale.
Se realizeaz pe 2 cai metabolice :

a) Anaerob are loc n citoplasm i se desfoar sub prezena O2 , dar

fr participarea lui i const n degradarea glucozei pn la acid lactic ca
produs final rezultnd o cantitate mic de energie sub form de ATP;
b) Glicoliza aeroba se realizeaz n condiiile participrii directe a O2 i
const n degradarea glucozei pn la produi finali CO2, H2O i o cantitate
mare de energie
sub formade ATP.
Glicoliza anaeroba reprezint succesiunea de reacii enzimatice care se petrec
n condiiile aprovizionri insuficiente cu oxigen a esutului muscular .este un
proces rapid de generare a unei cantiti relativ mici de energie rezultnd
totodat i produi de metabolism ce pot fi utilizai n reaciile de biosinteza .
Oxireductazele
catalizeaz reaciile
biochimice
de
oxidoreducere.
Oxidoreducerea este un proces de transfer de electroni de la un donor la un
acceptor cu trecere de la forma redus la forma oxidat.
Atomii de hidrogen sunt donori de electroni n sistemele biochimice.
Oxidoreductazele sunt sisteme redox capabile de a se transfera reversibil din
forma redus n cea oxidat prin transfer de atomi de hidrogen sau de
electroni.
Oxidoreductazele cu transport de hidrogen sunt numite i dehidrogenaze
(aceste
enzime
particip la dehidrogenarea substratului). Acestea sunt enzime ce au n
structur
coenzime. Catalizeaz procesele celulare de oxidoreducere, procese ce se
desfoar prin transport de hidrogen, electroni i oxigen de la un substrat
donor la acceptor.
DH2 + A D + AH2
Dehidrogenaze-catalizeaz (de obicei reversibil) transferul de hidrogen de la
un substrat donor de hidrogen(notat DH2) la acceptorul de hidrogen(notat A)
DH2 + A D + AH2
Denumirea sistematic: donor de echivaleni reductori: acceptor eechivaleni
reductori oxidoreductaze.
Oxidaze sau oxigenaze = catalizeaz scoaterea hidrogenului de pe un substrat
(DH2)utiliznd oxigenul ca acceptor.

Produi de reacie: apa (H2O) sau peroxidul de hidrogen (H2O2).

DH2(Red)

O2

DH2

O2

Oxidaze
(Oxigenaze)
Oxidaze
D(Ox)

H2O

Oxigenazele - dou grupe:

A. Dioxigenaze ncorporeaz ambii atomi de oxigen n molecula
substratului(notat D):
B. Monooxigenaze sau hidroxilaze catalizeaz ncorporarea unui singur atom
de oxigen n molecula de substrat (notat, n acest caz, DH), iar cellalt este
redus la ap:
unde DH substrat donor de hidrogen; AH2 cosubstrat donor de hidrogen; DOH este substrat hidroxilat.
Transportori de hidrogen coenzime nicotinice(coenzime piridinice)
Coenzime nicotinice (coenzime piridinice).
Coenzime transportoare de hidrogen
Structur chimic:cele dou forme biologic active ale amidei nicotinice
(vitamina B3):
Nicotinamid adenindinucleotid-NAD+(n forma oxidat)
Nicotinamid adenin-dinucleotid fosfat-NADP+(forma oxidat)
Coenzimele dehidrogenazelor sunt :
a) Nicotinamid-adenin-dinucleotid prescurtat NAD+.
b)
Este o enzim cu structur dinucleotidic:

H2O2

c)

Prima schem care se termin cu

Mecanismul redox este axat pe nucleul piridinic, motiv pentru care notnd cu
-R restul moleculei, procesul redox poate fi prezentat astfel:
Sistemul redox poate fi prezentat astfel(vezi schema de mai sus):
c) Flavin -adenin -dinucleotid, prescurtat FAD
. Schematic structura chimic pentru FAD (marcnd structura flavinic i
notnd cu R restul nucleului dinucleotidului) este forma oxidat
Forma redus - cea de jos.
Oxidoreductazele
cu
transfer
de
electroni
sunt
enzime
cu
grupare prostetic hemic

(structur profirinic cu ioni centrali de Fe2+ sau Fe3+). Din aceast clas fac
parte
citrocomii. Toi citrocomii sunt sisteme redox cu transfer de electroni care
funcioneaz
pe baza mecanismului reversibil.
Se cunosc mai muli citocromi, n funcie de potenialul redox la care
acioneaz, astfel: citocromul a, citocromul b, citocromul c. Marea parte a
citocromilor acioneaz n lanul respirator i n procesul de fosforilare.
Lactat dehidrogeneza (LDH)
LDH este o oxidoreductaz ce particip la glicoliza anaerob, cataliznd
reaca reversibil de conversie a acidului lactic n acid piruvic. Este o enzim
citoplasmatic tetrameric, compus din subuniti H (Heart) i M (Muscle),
larg distribuit in organism, fiind ntlnit cu precdere n rinichi, miocard,
musculatura scheletici, creier, eritrocite, ficat i plmni.
LDH este un indicator nespecific de lezare tisular, are 5 fraciuni diferite ale
LDH-ului rezultate prin combinarea n diferite proporii a celor dou tipuri de
monomeri.
8.5. Transferaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de transfer a unor grupri (resturi de
molecule) de pe un substrat pe altul, dup reacia general:
SA + S!BSB + S!A (sau cea de sub linie)
Dup natura chimic a radicalului sau a gruprii funcionale transferate
distingem urmtoarele subclase:
metiltransferaze (transfer radicalul metil CH3 -);
aciltransferaze (transferaze grupare acil R-CO-; acil coenzima A);
aminotransferaze (transfer gruparea funcional amino - NH2);
glicoziltransferaze (transfer gruprii glicozil);
fosforiltransferaze (transfer gruprii fosfat).
Coenzimele transferazelor sunt numeroase::piridoxal fosfatul, tiamin
pirofosfatul,
coenzima A, acizii folici, coenzimele B12, biotina, S-adenozil metionina,
nucleotid polifosfai (ATP), formele active ale unor compui (UDP-glucoza,
CDP-colina) etc.
Exemplu: EC 2.7.1.2 ATP: D-glucozo-6-fosfotransferaza (glucokinaza)
D-glucoza + ATP = D-glucozo-6-fosfat + ADP
n cazul transferazelor de grupe fosfat denumirea face obligatoriu referire la
acceptor.
2.7.1-alcool, 2.7.2.-carboxil, 2.7.3-grupa cu azot.
Pentru fosfotransferazele ce necesit ATP ca donor de grupe fosfat se mai
utilizeaza denumirea uzuala kinaza.

8.6. Hidrolaze
n biochimie, o hidrolaz este o enzim care catalizeaz hidroliza unei legturi
chimice. De exemplu, o enzim care catalizeaz urmtoarea reacie este o
hidrolaz:
AB + H2O AOH + BH
Sunt enzime care catalizeaz ruperea legturilor moleculare ale unor substane
cu ajutorul apei (hidroliz). Dup natura legturii scindate distingem
urmtoarele subclase:
esteraze
(lipaze
cnd
hidrolizeaz lipide,
ribonucleaze
cnd
hidrolizeaz fosfoesteri);
Esterazele sunt enzime care catalizeaz reacia reversibila de scindare a
legturilor esterice cu formarea acidului i alcoolului corespunzatori.
Aceste enzime au o specificitate mica n raport cu substratul i ca urmare
microlizeaz cu viteze comparabile un numar mare de esteri.
Exist mai multe tipuri de esteraze n funcie de natura chimic a acidului care
particip la formarea legturilor ester.
Carboxilesterazele enzimele care catalizeaz scindarea hidrolitic a
esterilor carboxilici. Din aceasta categorie fac parte:
Lipazele sau, conform denumirii sistematice, glicerol-ester-hidrolaze, care
catalizeaz hidroliza gliceridelor dup reacia:
diglicerida + acid gras triglicerida + H2O
Lipazele nu au o specificitate strict, dar viteza de aciune catalitic variaz cu
originea diverselor lipaze. Au o specificitate n funcie de lungimea catenei
acizilor grai i posed o selectivitate n funcie de configuraia subtratului.
Posed, de asemenea, o specificitate stereochimic, unul din izomerii optici ai
aceluiai substrat putnd fi atacat cu o vitez mai mare dect cellalt.
Lipazele scindeaz toti cei trei acizi grai ai gliceridei, nsa nu simultan, ci
succesiv, fapt foarte important pentru procesul de absorbie a lipidelor.
Lipazele sunt enzime foarte rspndite n natur. n organismul animal se
gsete lipaza n sucul pancreatic, ficat, snge, limfa i n lapte. Plantele
oleaginoase conin, de asemenea, lipaze foarte active (n ricin, soia, floarea
soarelui). O serie de mucegaiuri i bacterii reprezint surse bogate n lipaze,
fiind folosite pentru biosinteza carboxilesterazelor i obinerea preparatelor
enzimatice de acest tip. Trebuie ns menionat c lipazele de diferite

proveniene se deosebesc ntre ele sub aspectul proprietilor i caracterului

aciunii.
Aciunea lipazelor are o mare importan pentru pstrarea alimentelor
(finurilor, crupelor), mai ales a celor ce conin cantiti mari de lipide.
Prin aciunea acestor enzime, n timpul depozitrii produselor alimentare,
se produce o rapid descompunere a gliceridelor n acizi grai i glicerol,
ceea ce conduce la o cretere a aciditii produselor i la deprecierea lor
calitativ.
Fosfolipazele sunt esteraze care catalizeaz reacia de scindare hidrolitic a
acizilor grai din glicerofosfolipide (fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina).
Fosfolipidele sunt grsimile inteligente din creierul nostru. Ele sunt experte
n izolare, ajutnd la producerea unei substane numita mielina care formeaz
o teac n jurul nervilor, asigurnd astfel o propagare silentioas a semnalelor
din creier.
Ele ajuta la furnizarea nutrimentelor care sunt implicate ntr-un proces cheie al
organismului.
Ne mbunatesc dispoziia, mintea i performanele intelectuale, dar ne i
protejeaz mpotriva declinului memoriei.
Surse importante de fosfolipide sunt sardinele, ouale(cele de la ginile
care au fost hrnite cu semine de in sau concentrate din fin de pete),
boabele de soia, arahidele i alte fructe oleaginoase.
Amilaza seric face parte din categoria hidrolazelor, subgrup de enzime
ce catalizeaz degradarea hidrolitic a amidonului, glicogenului, poli- i
oligozaharidelor.
Amilaza este o enzim de secretie exocrin care este prezent in ser sub dou
forme principale: izoenzima pancreatic (40% din amilaz seric total) i
izoenzima salivar (60% din amilaza seric totala). Enzima mai este prezent
in cantiti mult mai mici n ficat, sucul duodenal, intestinul subire, trompele
uterine i muchii scheletici.
Fosfataza alcalin (ALP) este o enzim ce face parte din clasa hidrolazelor
(ortofosfomonoesterfosfohidrolaza). Serul uman conine un amestec variabil
de izoenzime ale fosfatazei alcaline (ALP) provenite n principal din ficat,
intestin, rinichi i os, la care se adaug n timpul sarcinii o forma tranzitorie,
forma placentar. Substanele transformate n aceste reacii se caracterizeaz
printr-o tendin limitat de reacie "in vitro" n aceleai condiii cu cele din
organism.
De exemplu, oxidarea glucozei n celule se realizeaz rapid, glucoza fiind un
compus ce nmagazineaza o mare cantitate de energie prezentnd un anumit
potenial termodinamic, dei n laborator, n aceleai condiii ca cele din
organism, aceasta este stabil n prezena oxigenului.
Astfel de procese, favorabile termodinamic, pot decurge cu viteze crescute
datorit aciunii catalitice a enzimelor.
Colinesterazele scindeaz hidrolitic esterii colinei, prezeni ndeosebi n
esutul nervos, sinapse, eritrocite. Astfel, aciunea acestor enzime se

descompune : acetilcolina, mediatorul chimic care faciliteaz transmiterea

influxului nervos de la nervii motori la muchii striai.
Colinesteraza serica este o enzim care provine din ficat, pancreas, cord i
creier (substana alba), de unde este eliberat n snge.
Din punct de vedere clinic, colinesteraza este folosit n principal ca un
indicator al unei posibile intoxicaii cu insecticide. La persoanele care
lucreaz cu insecticide ce conin fosfor scderea acestei enzime din snge este
att de puternic, nct poate pune viata n pericol.
glicozidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi glicozidice);
peptidaze (cnd scindeaz prin hidroliz legturi peptidice).
8.7.Liaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de scindare a unor legturi chimice n
absena apei sau procese de oxido-reducere. Liazele pot determina ruperea
urmtoarelor legturi:
legtura C C (cele mai importante sunt decarboxibazele, care
catalizeaz eliminarea CO2 de pe substrat);
legtura >C=O (cele mai importante sunt aldolazele care determin scindarea
compuilor carbonilici);
legtura C - N.
8.3.5. Izomeraze
Sunt enzime care catalizeaz izomerizarea diferitelor substraturi biologice. Ele
pot contribui la transformarea aldozelor n cetoze i invers,a formelor cetoenolice etc.
8.3.6. Ligaze
Sunt enzime care catalizeaz reacii de sintez, formarea de noi legturi.
Formarea noilor legturi se face cu consum de energie,
motiv pentru care reaciile catalizate de ligaze sunt cuplate cu reaciile de
scindare a unor compui macroergici (ATP). Aceste enzime pot cataliza:
formarea legturii C - C (carboxilazele prin cataliza reaciilor de introducere
a unei molecule de CO2 n molecula altor substane);
formarea legturii C - S (sunt enzime care sintetizeaz formarea acilcoenzimei A
plecnd de la acizii carboxilici prin mecanismul:

Numele acestei enzime: Acetil - CoA sintetaz.

Studiul enzimelor - enzimologia s-a dezvoltat foarte mult n ultimele decenii,
numrul enzimelor cunoscute depind 2000 fa de 10 - 15enzime n 1920. n
organism alturi de enzimele bine individualizate i localizate se gsesc

sisteme enzimatice sau complexe multienzimatice care catalizeaz reacii

succesive sau cuplate.
n organismele vegetale exist i substane, care sunt factori coenzimatici
(ndeplinesc rolul de coenzime) sau sunt activatori enzimatici, cum sunt
vitaminele.
Rezumat
Enzimele sunt proteine specializate n cataliza reaciilor biologice. Unele
enzime sunt proteine simple, altele sunt conjugate coninnd ca grupri
prostetice ioni metalici, coenzime sau ambele. n reaciile catalizate de enzime
creterea concentraiei de substrat produce creterea vitezei de reacie pn la
un punct dup care viteza de reacie devine independent de concentraia
substratului
Enzimele se clasific n funcie de reacia pe care o
catalizeaz in: oxidoreductaze, transferaze,hidrolaze, liaze, izomeraze i
ligaze.
Coenzimele i gruprile prostetice servesc ca purttori intermediari ai
gruprilor f Caracteristicile cofactorilor
Cofactorii sunt compui cu structura chimica variat derivai de la vitamine
sau ioni metalici, legati mai labil de partea proteic (coenzime) sau fiind intim
asociati cu aceasta prin legturi covalente (grupe prostetice) (Tabel 4.1).
Acestia se caracterizeaza prin urmatoarele:
sunt termostabili;
sunt dializabili;
sunt indispensabili pentru desfurarea activitatii enzimei;
confera specificitatea de reacie pentru o enzim;
intervin n reacie inducnd conformaia optim a enzimei, favoriznd
aranjamentul adecvat reaciei sau transfernd electroni sau grupe chimice.
Sisteme multienzimatice
Exista ci metabolice n care toate enzimele ce catalizeaz reacii individuale
sunt asociate sub forma unor sisteme multienzimatice(enzime polifuncionale).
Acestea sunt sisteme proteice complexe capabile s foloseasc mai multe
coenzime diferite. Sunt fixate prin legturi slabe, n ordinea corespunztoare
intrrii n aciune, pe o protein central, ce poate fi chiar una dintre enzime.

Tabel 4.1 Exemple de cofactori enzimatici

Ioni
Enzima
Coenzima
Grupa
Enzima
metalici
transferata
2+
+
Cu
Citocrom
NAD
H+
Lactat dehidrogenaza
2+
+
Zn
oxidaza
FAD
H
Succinat
2+
Mg
Alcool
PALPO
NH2
dehidrogenaza
2+
Mn
dehidrogenaza
Biotina
CO2
Aspartat
+
K
Hexokinaza
FH4
-CHO aminotransferaza
2+
Fe ,
Arginaza
-CH3
PropionilCoA
3+
Fe
Piruvat kinaza
carboxilaza
Catalaza
Timidilat sintaza
Peroxidaza
Exemplul cel mai elocvent este reprezentat de complexele implicate n
decarboxilarea oxidativa a -cetoacizilor: piruvat dehidrogenaza, cetoglutarat dehidrogenaza formate dintr-unansamblu proteic, patru coenzime
(TPP, NAD+, acid lipoic, coenzima A) ,
ionul Mg2+, cu participarea final a NAD+. Un alt exemplu este acid gras
sintaza care intervine n biosinteza acizilor grai formata din 7 enzime legate
de o protein.
uncionale specifice, ai atomilor sau ai electronilor.
Localizarea intracelulara a enzimelor
n celula, enzimele sunt localizate specific n anumite compartimente fie n
organite celulare, fie n citoplasm.
Separarea organitelor celulare prin ultracentrifugare urmat de identificarea
specific a enzimelor prin tehnici imunohistochimice a reprezentat modalitatea
prin care s-a stabilit exact localizarea intracelulara a enzimelor.
1. Unele procese au loc n toate tipurile de celule, enzimele respective fiind
rspndite ubicuitar(prezent pretutindeni), cum ar fi de exemplu, enzimele
mplicate n biosinteza proteinelor i acizilor nucleici, enzimele glicolitice.
2. Alte procese au loc numai n anumite celule, ca urmare numai acestea
posed echipamentele enzimatice specifice. De exemplu, enzimele implicate n
sinteza hormonilor tiroidieni sunt numai n tiroida, enzimele implicate n
biosinteza ureei se gsesc numai n celulele hepatice.
3. Fiecare organ se caracterizeaz printr-un profil enzimatic reprezentat de
enzimele care gsesc n diferitele compartimente din celul.
Membrana celulara conine enzime implicate n transportul substanelor.
Mitocondriile prezint enzime ce catalizeaz procese generatoare de energie:
membranele extern i intern conin enzimele implicate n lanul respirator,
sinteza fosfolipidelor, elongarea i desaturarea acizilor grai, iar matricea
mitocondrial conine enzimele ciclului Krebs, enzimele implicate
n decarboxilarea
oxidativ
a
cetoacizilor
catabolismul acizilor
grai, dezaminarea aminoacizilor, biosinteza ureei.
Nucleul conine enzimele implicate n metabolismul acizilor nucleici.

Ribozomii abund n enzime implicate n diferitele faze ale biosintezei

proteinelor. Ribozomii liberi sintetizeaz proteinele celulare, iar cei fixai de
reticulul endoplasmatic, proteinele de export.
Citoplasma conine enzimele glicolitice, cii pentozofosfailor, enzimele
din biosinteza acizilor grai, a nucleotidelor etc.
Lizozomii abundeni n ficat, rinichi, globule albe contin hidrolaze:
enzime proteolitice, ribonucleaze, enzime care hidrolizeaza proteoglicanii,
sfingolipidele.
Complexul Golgi conine enzime implicate n exportarea proteinelor
sintetizate n reticulul endoplasmatic i maturarea glicoproteinelor i
proteoglicanilor.
Unele enzime au localizare mixt, citoplasmatica i mitocondrial, cum sunt
transaminaza glutamic oxalilacetica, malat dehidrogenaza, izocitrat
dehidrogenaza.
Centrul activ al enzimelor
Procesul enzimatic nu se desfoar oriunde n molecula enzimei, ci numai n
anumite zone care au o dispoziie spaial corespunztoare, alctuite din 24 aminoacizi. Aceste zone se numesc "centri activi" i reprezint
aranjamentul spaial adecvat "prinderii" a substratului.
Legarea substratului la centrul activ al enzimei i imprim o stare de tensiune
molecular care faciliteaz reacia biochimic. n centrul activ se gsesc numai
anumiti aminoacizi care prezint grupe -OH, - SH, - COOH, -NH2, radical
imidazol (de exemplu, serina, histidina, acid aspartic, lisina).
n cazul enzimelor cu structur binar, n centrul activ se poate distinge
un situs de fixare care se combin cu substratul prin legturi labile (la formarea
caruia particip aminoacizi auxiliari) i un situs catalitic (format din aminoacizii
colaboratori care acioneaz asupra substratului), important pentru aceast
interaciune fiind prezena cofactorilor. Aminoacizii care nu sunt implicai in
reacia enzimatica suntaminoacizi necolaboratori. Functionalitatea centrului

catalitic este consecin/a structurii spatiale a proteinenzimei care prin dispoziia

sa n spatiu aduce anumii aminoacizi distantai n structura primar ntr-o
poziie optim pentru legarea substratului (Fig.4.1)
Fig. 4.1. Organizarea centrului activ

De exemplu, pentru aciunea chimotripsinei, enzima care hidrolizeaz

legturile peptidice, este eseniala legare a substratului la Ser195care
constituie cu Asp102 i His57 centrul activ al enzimei, interaciunea acestora
fiind posibil datorit modificrii conformatiei spatiale a proteinei n timpul
reaciei enzimatice.
Enzimele allosterice prezint
dou situsuri: situsul catalitic la
care se leag substratul i situsul
allosteric la care se leagp
efectorul allosteric, activator sau
inhibitor .(Fig.4.2).

Fig. 4.2 Organizarea centrului activ la enzimele alosterice

Caracteristicile enzimelor
Enzimele pot fi definite biocatalizatori care prezinta urmatoarele trasaturi
caracteristice:
1. Enzimele au o putere catalitica enorma accelerand viteza reaciilor cu pana
la 1016 fa de viteza reaciei necatalizate. Aceasta capacitate depete
puterea oricrui catalizator folosit n sinteza organica. Enzimele au aceast
imens putere catalitic n soluii diluate, n condiii moderate de pH i
temperatur.
Puterea catalitic poate fi definit ca raportul ntre viteza reaciei catalizate i
viteza reaciei necatalizate enzimatic.
2. Enzimele nu se consuma i nu se transform n reaciile catalizate.
3. Enzimele se caracterizeaz printr-o mare specificitate. Orice enzim este
foarte selectiv att n ceea ce privete substana pe care o transform
(substrat) ct i din punctul de vedere al reaciei catalizate.
E (enzima)
Transformarea SP (produsi) se desfoara fr reactii
secundare, astfel c rezult numai compuii dorii.
Prin aceast aciune enzimele se deosebesc de catalizatorii din chimia
organica, reaciile desfurate n absena enzimelor avnd randamente mai
scazute i fiind insoite de reactii secundare.
4. Enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat pe care le
transform accelernd astfel viteza reaciei biochimice.
5. Capacitate de reglare. Reglarea activitii enzimatice se realizeaz n
moduri diferite ce variaz de la controlul cantitii de enzim sintetizate de
celul pn la modularea activitii sale prin interaciuni reversibile cu
activatori i inhibitori metabolici. Activitatea variat a enzimelor poate fi pus

pe seama capacitii de adaptare structural i funcional a proteinelor.

Enzimele contribuie astfel la coordonarea i reglarea proceselor metabolice.
7. Enzimele se gsesc n celule i acioneaz n cantitate foarte mic, dar cu
efect semnificativ.
8. Enzimele pot cataliza reaciile n condiiile organismului, la temperatura de
aproximativ 37oC, n condiii de n general neutru i la presiune atmosferic.
ntrebri:
8.1. Care este diferena dintre o recie catalizat de un catalizator chimic i una
catalizat de o enzim?
8.2. Ce este situsul activ al unei enzime?
8.3.Explicai de ce reaciile enzimatice necesit o temperatur optim i un pH
optim?
8.4. Care este semnificaia termenului de coenzim?
8.5. Care atom n NAD+ i NADP+ este responsabil de sarcina pozitiv?
8.6.