Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 1 / 11

Instituia Public Universitatea de Stat de Medicin i Farmacie

Nicolae Testemianu
FACULTATEA FARMACIE
CATEDRA CHIMIE FARMACEUTIC I TOXICOLOGIC
Aprobat la edina catedrei
Proces verbal _1_ din _28.08.2014
ef de catedr, d.h.f., profesor universitar
_______________ Vladimir Valica

RECEPTORII. CINETICA REACIEI RECEPTOR - LIGAND

Indicaie metodic pentru studenii anului V la Chimia medical

Chiinu 2014
INTRODUCERE

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 2 / 11

Studierea receptorilor i enzimelor ca inte de aciune pentru substanele medicamentoase

permite de a evidenia legiti comune i selective pentru explicarea mecanismului lor de aciune.
Scopul lucrrii: De a analiza tipurile de interaciuni medicament - receptor n funcie de
structura chimic.
Scopul determinat
1.

Descrierea naturii receptorilor ca macromolecule-inte ale medicamentului, precum

i a proceselor cinetice care au loc la interaciunea medicament -receptor .
Planul studierii temei
Pentru studierea temei se acord 1 lucrare de laborator:

Coninutul lucrrii
Pregtirea teoretic pentru efectuarea sarcinilor din scop.
Recapitulare.
MATERIAL INFORMATIV
n acest capitol este descris natura chimic a receptorilor ca macromolecule-inte ale
medicamentului, precum i procesele cinetice care au loc la interaciunea receptor - ligand.
Structura celular specializat n asigurarea interaciunii medicament - organism este receptorul.
Din punct de vedere biochimic receptorii farmacodinamici sunt macromolecule, pri ai
macromoleculor sau complexe macromoleculare de natura proteic cu o structur flexibili ce se
leag o structur chimic cu apariia unui efect biologic. Ei sunt localizai n membrana celular,
organite celulare sau n citoplasm. Ctre aceste molecule se refer proteinele i acizii nucleici.
Structura int structur macromolecular biologic, de regul legat de o funcie
biologic anumit, alterarea creia poate solda cu apariia unei boli i asupra creia trebuie
efectuat o anumit aciune.
Majoritatea receptorilor prezint lipo- sau glicoproteine, care se localizeaz pe suprafaa
membranei celulare sau pe membrana organitelor. Ei pot s traverseze toat grosimea membranei
citoplasmatice (proteine integrate) sau s fie localizate n parte interioar. Dac liganzii din
molecule hidrofile(ex. neuromediatori), atunci situsul de legare trebuie s fie obligatoriu n
partea exterioar a celulei. Receptorii moleculelor hidrofobe sunt legate slab de membrana
celulei, iar complexele formate cu liganzi pot s ias din membran n citoplasm.
Farmacoreceptorii pot fi clasificai dup mai multe criterii (localizare, natura lor,
specificitate, repartiie n sinapse etc.). Diversitatea receptorilor poate fi convenional grupat n
4 categorii:
1. Receptori care controleaz activitatea cananlelor ionice (N-colinoreceptori,
GABAA receptori);
2. Receptori care realizeaz efectul farmacologic prin intermediul proteinei G (fig.
2)

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 3 / 11

receptorii pentru angiotensin, bradichinin, endotelin; amine biogene:

adrenalin, dopamin, histamin, serotonin; nucleotide i nucleozide: adenozin,
ATP, ADP i a ionilor de Ca);
3. Receptori care controleaz direct funcia unei enzime (receptorul este legat direct
cu tirozinchinaza i regleaz fosforilarea proteinelor: receptorii pentru insulin
(fig.3)i somatotropin );
4. Receptori ce controleaz transcripia ADN-ului.
Primele 3 categorii de receptori sunt membranari, iar a 4 receptori nucleari. Liganzii lor
(ex. hormonii steroizi i tiroidieni), datorit proprietilor hidrofobe au capacitatea de a ptrunde
prin membran n interiorul nucleului datorit difuziei pasive (fig.1). Sensul biologic al recepiei
intracelulare este n schimbrile eseniale i de durat n structura celulei.

Fig.1. Schema interaciunii ligand-receptor pentru hormonii steroizi.

Receptorii intracelulari a hormonilor steroizi se difereniaz de ceilali prin prezena
domenului capabil de a lega lanul polipeptidic cu ligandul datorit zincului i asigur legarea
cu ADN-ul.
Structura proteinei G este complex. Se observ c singurul lan polipeptidic are apte
spirale transmembranare, iar captul aflat n mediul extracelular are o grup NH 2 terminal
glicozidat.

Fig. 2. Structura i mecanismul de aciune a proteinei G la cuplarea cu ligandul

n prima etap are loc cuplarea ligandului cu receptorul i activarea proteinei G. Apoi (2),
se elibereaz GDP de ctre subunitatea alfa, care se deplaseaz lateral i se leag cu GTP. n

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 4 / 11

etapa 3, unitatea alfa activeaz proteina membranar a unei enzime sau canal ionic, producnd un
rspuns celular.

Fig.3 Structura receptorului de insulin

Concentraia receptorilor naturali n majoritatea esuturilor variaz n limitele de la
femtomoli la picomoli. esuturile craniene au o cantitate mult mai mare de receptori datorit
inervaiei nervoase extinse.
Dinamica receptorilor.
Receptorii sunt o structur dinamic. Legarea ligandului i alterarea funciei genelor poate
afecta numrul, perioada de via i sensibilitatea receptorilor i canalelor. Receptorii sunt
nlocuii cu alii n procesul normal de cretere a celulei, iar viaa lor dureaz de la cteva ore la
cteva zile. Din ceea ce este cunoscut despre procesele de neurotransmisie i neuromodulare, este
raional s presupunem c celulele int pentru substanele endogene, neurotransmitori,
neurohormoni i neuromodulatori sunt sub un control tonic cromotropic, ce variaz cu ritmul
cicardian a organismului. n contrast, efectele liganzilor externi administrai (ex:
medicamentele), sunt foarte rar sub controlul homeostatic, i n rezultat, efectele lor devin
frecvent mai mici la administrri repetate. Defapt, nu ar trebui s fie o surpriz c majoritatea
agenilor terapeutici activi sunt antagoniti a funciei receptorilor.
Baza molecular a mai multor maladii se reflect n schimbarea funciei receptorului de pe
membrana celular. n boala Parkinson, celulele nervoase presinaptice din substana cenuie care
produc dopamin mor. Acest defect de transmitere rezult din descreterea nivelului de dopamin
i ca consecin apare hipersensibilitate postsinaptic n ncercarea celulelor int de a compensa
lipsa dopaminei i de a menine homeostaza. Hipercolesterolemia i fibroza chistic implic
defecte n transportul substanelor n cadrul receptorilor lor nrudii. Boala Alzheimer este
caracterizat prin pierderea inervaiei colinergice n diencefal care urmeaz cu degenerri a
nervilor, disfuncii cognitive i sfrit letal.
Receptorii pentru medicamente
Majoritatea medicamentelor care interacioneaz cu receptorii (sau enzime) au analogi
naturali (sau substrat) cunoscui. Sunt totui un anumit tip de receptori care s-au dezvoltat
independent- receptori orfani pentru care medicamentele sintetice sunt unicii liganzi cunoscui.
Cel mai elocvent exemplu este cel al receptorilor centrali ai benzendiazepinei (BZ) prezeni n
canalul ionic GABAA . Deoarece acesta este situsul de aciune a al celor mai utilizate anxiolitice
benzodiazepinice, este un receptor model cu relevan clinic. n ciuda eforturilor considerabile
i a numrului impuntor de compui activi, nici un ligand natural endogen care ar modula
anxietatea prin acest receptor nu a fost identificat. Alte exemple de receptori ai medicamentelor

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 5 / 11

sunt familia receptorilor opioizi (pentru morfin i derivaii ei) i canabinoizi, compus din din 2
membri CB1 i CB2 prin care acioneaz urmtorii componeni: 9-tetrahydrocannibol,
component activ a marijuana (psihoactiv,analgezic, antiemetic). Cuplarea receptorului VR-1 cu
ligandul cunoscut capsaicin, aflat n ardei rou, induce senzaia de cald.
Unele medicamente stimuleaz sau inhib activitatea enzimelor specifice. Spre exemplu,
galantamina i prozerina scad activitatea colinesterazei, ce distruge acetilcolina, i provoac
efecte similare excitrii sistemului nervos simpatic. Fenobarbital i ziscorin cresc activitatea
gluconiltransferazei n ficat, cu scderea nivelului de bilirubin n snge. Substanele
medicamentoase pot inhiba activitatea reductazelor acidului folic, chinazei, plasminei,
calicreinei, sintetaza oxidului de azot i astfel s schimbe procesele biochimice dependente de
acestea.
O serie de medicamente i manifest proprietile fizico-chimice ctre membranele
celulare. Aciunea celulelor n sistemul nervos i cel muscular depinde de fluxul de ioni, ce
determin potenialul electric transmembranar. Unele medicamente modific transportul ionilor.
Prin acest mecanism i manifest aciunea antiaritmicele, preparatele antiepileptice, anestezicele
generale, antihipertensivele (inhibarea ionilor de calciu). Blocanii canalelor K+(amiodaron,
ornid, sotalol) sunt antiaritmice efective. Blocarea canalelor K+dependente de
ATP(glibenclamid, glimepiridsamaril) induce secreia insulinei de ctre -celulele pancreasului
i sunt efective n tratamentul diabetului zaharat tip II.
Comunicarea celular
Transferul informaiei ntre celule i multitudinea de surse informaionale necesare
pentru meninerea homeostazei celulare i viabilitii esuturilor, presupune o varietate larg a
modalitilor de semnalare. Aceasta include temperatura, potenialul de membran, distensia
mecanic i stressul, alterarea concentraiei de ioni (H+/K+), odorizanii i feromonii, precum i
mai multe clase tradiionale a neurotransmitorilor, neuromodulatorilor i hormonilor. Aceti
stimulatori fizici i compui endogeni i exercit funcia prin interaciuni cu suprafaa celular a
structurilor int, de regul proteine, care sunt clasificate ca receptori. Astfel, neurotransitorii,
neuromodulatorii i hormonii pot produce o cretere tranzitorie a mesagerilor celulari secunzi ca
AMPciclic sau inozitol trifosfat (IP3) sau de lung durat care urmeaz cu schimbri n expresia
genelor prin activarea factorilor de transcripie.
Alterarea funciei receptorului poate fi rezultatul urmtoarelor fenomene:
Suprastimularea receptorilor cu desensibilizarea ulterioar, datorit disponibilitii
excesive a ligandului sau cuplrii puternice a receptorului activat cu sistemul mesagerului
secundar.
Reducerea stimulrii la descreterii accesibilitii ligandului sau compromiterea
procesului de cuplare ligand-receptor.
Medicamentele care trateaz efectiv maladiile prin restabilirea defectelor asociate strii
patologice n transmiterea semnalului pot aciona prin:
nlocuirea transmitorilor endogeni: Levodopa nlocuiete dopamina n boala Parkinson.
Blocarea stimulrii agoniste excesive : antagonistul receptorilor H2, cimetidina
blocheaz secreia acidului clorhidric , astfel reduce riscul formrii ulcerului.
internalizarea receptorului, creterea vitezei de metabolizare a acestuia sau scderea
vitezei de sintez a lui.

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 6 / 11

Proprietile fundamentale ale substanei farmacodinamic active

-afinitatea - capacitatea de a se lega de receptor; Relaiile ntre receptor i ligand, n viziunea
clasic broasc-cheie, descriu un model static, n care nu sunt schimbri n conformaia
receptorului. Totui Koshland descrie un model flexibil influenat de complexul format substrat
enzim cauzeaz schimbri tridimensionale n structura proteinei responsabile de activitatea
biologic
-eficacitate - capacitatea de a se lega de receptor cu stimularea acestuia i declanarea secvenei
de reacii ce vor genera efectul farmacodinamic.
-potena medicamentului- reprezint capacitatea unei substane de a avea activitate biologic. Cu
ct efectele biologice sunt mai intense, raportate la unitatea de greutate, cu att potena este mai
mare. Din punct de vedere terapeutic, potena este cu att mai mare cu ct doza activ va fi mai
mic.
Principalele teorii ale interaciunii ligand-receptor
Teoria Ocupaional. Substana medicamentoas, agonist sau antagonist, interacioneaz cu
receptorul conform legii aciunii maselor. Cantitatea receptorilor ocupai este proporional cu
cantitii de medicament i cantitii de receptori disponibili. Creterea concentraiei de
medicament va duce la creterea complexului medicament-receptor, n anumite limite, deoarece
numrul de receptori este limitat. Antagonitii receptorilor acetilcolinei(ex.atropina) cauzeaz o
deplasare la dreapta a curbei de doz-rspuns (DR). .
Principalele reguli sunt:
1. Complexul RL poate fi reversibil
2. Asocierea receptorului cu ligandul n formarea
complexului RL este definit ca un proces bimolecular,
iar la disociere procesul devine monomolecular.
3. Toi receptorii n sistemul dat se presupun a fi
echivaleni i capabili de a forma legturi cu liganzii
independent unul de altul.
4. Formarea complexului RL nu influeneaz concentraia
liber a ligandului sau afinitatea receptorilor liberi ctre
leganzi.
5. Rspunsul obinut de receptorul ocupat va corespunde
direct proporional numrului de receptori ocupai.
6. Rspunsul biologic este dependent de atingerea echilibrului ntre R i L .
Teoria vitezei. n baza datelor experimentale, n care persistena rspunsului mediat de ctre un
antagonist variaz de la rspunsul maximal la unul mai mic pe durata blocadei receptorului,
Paton a inclus viteza ca parametru a reaciei ligand-receptor. Astfel rspunsul (E) este considerat
proporional cu factorul de influen (), care are o anumit eficacitate i determin o vitez a
interaciunii RL (V). Astfel,

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 7 / 11

E= V
Proprietile farmacocinetice au un rol definitiv n aprecierea vitezei formrii complexelor
RL cu liganzii exogeni, care n mare msur sunt medicamente. Totui aceast teorie nu ia n
calcul cuplarea transducional i potenialul amplificrii dup legarea iniial a ligandului de
receptor.
Teoria inactivrii
Teoria inactivrii receptorului reprezint o sintez ntre teoria ocupaional i cea a vitezei,
oferind o abordare alternativ a studiului interaciunilor receptor-ligand.
unde k+1 este rata asocierii,
k-1 rata disocierii.
k2 rata constant a tranziiei complexului de la RL la RL,
i cu posibilitatea regenerrii formei active a receptorului R
Teoria inactivrii presupune c complexul RL este o stare
intermediar activ care duce la formarea receptorilor inactivi
(R) n complexul RL. Variabila k3 este dependent de
numrul de receptori formai i rata formrii R
Din aproximativ 470 structuri int prin care medicamentele i manifest aciunea, 71% din
ele sunt receptori. Din aceste medicamente, 90% produc efectul lor terapeutic prin antagonismul
fa de substanele endogene agoniste.
Cinetica reaciei ligand- receptor
Interaciunea ntre liganzi i receptori se realizeaz datorit formrii legturilor de
hidrogen i legturilor coordonative, s-au complexelor cu transfer de sarcin ion-ion, ion-dipol,
forele de dispersie, Van der Waals. Legturile covalente, att de rspndite n chimia organic,
sunt foarte rare n legturile dintre receptorii i ligand.

Legtura covalent apare ntre doi atomi, dac este atracia electrostatic dintre o
pereche de electroni pus n comun de doi atomi i nucleele atomilor. Aceast
legtur este realizat la o distan mic 1-2A, iar energie este 10-150kcal mol -1.
Aceste legturi se formeaz ntre preparatele de arseniu, mercur i enzime care au
grupe sullfhidrice ntre alchilfosfai i colinesteraze; dibenamin i receptorii
adrenergici.

Legturile ionice sunt destul de stabile. Energia legturii constitue 5 kcal mol -1.
Aceasta are o anumit importan pentru asocierea preparatelor farmacologice cu
receptorii.

Legturi ion-dipol, energia 2-5kcal mol-1 sunt pentru orientarea preparatului

farmacologic ctre moleculei receptorului.

Legturile de hidrogen au energia 1-7 kcal mol-1 i particip la asocierea

preparatului farmaceutic cu receptorului.

Legturile dipol-dipol particip la fixarea preparatului farmacologic n cmpul

receptorului cu energia 1-3kcal mol-1

Legturile Van der Waals apolare ce stabilizeaz legtura ligand- receptor cu

energia 0,2-1kcal mol-1.

Legturile hidrofobe formeaz la interaciunea medicamentelor nepolare n mediu

apos.
Orientarea preparatului farmacologic n cmpul receptorilor are loc cnd compuii sunt
optimi i complementari. Aceasta se realizeaz cnd energia legturii este mai mare de 10kcal
mol-1.

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 8 / 11

Preparatul medicamentos, similar structurii metabolitului, dar care mpiedic legturii

acestuia cu receptorul este numit antagonist. Dac antagonistul-medicament se leag de acelai
receptor ca i liganzii endogeni, ele sunt numii antagoniti concureniali.

Agonitii:
Amplific rspunsul celular.
Medicamentele care se leag de receptori induc o schimbare conformaional efectiv.
Legtura cu agonist este efectiv. Agonistul poate fi att un neurotranmitor endogen sau
hormon, ca i ligandului sintetic. Dac la interaciunea receptorului cu substana activ
se produce un efect biologic maxim, atunci este numit agonist puternic.
Agonitii pariali sunt substane ce se leag cu aceeai receptori ca i agonitii puternici, dar
n pofida dozei adecvate nu poate asigura un rspuns biologic maxim, chiar la o eventual
cretere a concentraiei medicamentului.
Agonitii neutrali se leag cu receptorul, dar nu schimb rspunsul celular n comparaie cu
nivelul bazal.
Agonitii inveri ( antagoniti)
o Micoreaz rspunsul celular
o Inhib efectul agonistului
o Legarea este inefectiv, iar activitatea intrinsec este aproape nul
o Poate s se lege att cu situsurile cu care se leag agonistul, ct i cu altele n calitate
de inhibitor alosteric, cu modificarea afinitii receptorului
o Deosebim antagonism:
Fizic- activitatea adsorbant a sorbenilor fa de toxine
Chimic- reaciile ntre baze i acizi
Funcional- interaciunea ntre colinomimeticei colinoblocante.
Medicamentele care interacioneaz cu receptorii pot s manifeste tt ca agoniti ct i ca
antagoniti. n acest caz avem de a face cu substane agoniste-antagoniste, sau
sinergoangagoniste. Spre exemplu analgeticul opioid pentazoin, care este agonist ctre receptorii
opioizi kapa i n acelai timp antagonist al -receptorilor. Aceste substane influeneaz asupra
unei unumite subclase de receptor i manifest o aciune selectiv. Astfel nifedipina
(antihipertensiv) blocheaz selectiv 1- adrenoreceptorii, spre deosebire de fentolamina care
blocheaz 1 i 2- adrenoreceptorii.

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 9 / 11

Teoria receptorului este bazat pe legea clasic a aciunei masei pentru studiul catalizei
enzimelor. Extrapolarea teoriei clasice enzimelor ctre receptori este aproximativ. n
interaciunea substratul enzim (ES), substratul S sufer o conversie enzimatic de cataliz ce
rezult cu un produs sau produse. Datorit echilibrului stabilit, acumularea produselor au
capacitatea de a inversa procesul reaciei. Alternativ, inversia poate fi utilizat n alte ci celulare
i astfel elimin starea de echilibru sau poate aciona ca un modulator de feedback pentru a altera
reacia ES n sens negativ sau pozitiv
Enzim + substrat ES E + Produs
Complexul receptor-ligand (RL) este rezultatul termodinamicii reaciei de legtur ceea
ce duce la schimbri funcionale n celula int. Dup formarea complexului RL, rspunsul
funcional n activarea receptorului poate fi relatat prin concentraia ligandului. Este evident c
receptorii formeaz spontan complexe active ca rezultat a interaciunii cu alte proteine. Aceasta
este deosebit de actual, cnd multitudinea de receptori ADNc nativi din sistemele celulare sau n
asociere cu proteine care formeaz un mediul a celulei gazd n care receptorul se exprim mai
repede dect n mediul su natural. Acesta este un fenomen major care caracterizeaz eficacitatea
ligandului. Interaciunea spontan ntre receptor i efector poate avea loc mai frecvent ntr-un
sistem unde proteinele sunt n exces i unde lipsesc factorii normali de control al acestui tip de
interaciuni.Compuii au eficacitate diferit n dependen de sistemul n care ei sunt examinai ,
iar esutul studiat poate adesea avea proprieti agoniste i antagoniste distincte a diferitor clase
de receptori.
Teoria clasic a receptorilor presupune c afinitatea i eficacitatea sunt parametri
independeni. Altfel spus, nu exist corelaie ntre afinitatea ligandului i capacitatea lui de a
asigura un rspuns maxim. Ligandul cu o afinitate relativ joas (<10-5M) rmne a fi un agonist
cnd o concentraie suficient interacioneaz cu receptorul. relaia dintre efectul nregistrat i
doza medicamentului poate fi reprezentat prin hiperbol (isoterma de sorbie a lui Langmuir), n
dependen de etapa procesului de formare a RL. Majoritatea substanelor studiate au o
asemenea reprezentare grafic.

Graficul dependenei mrimii efectului de doza

administrat.

Parametrii msurai la testarea legturii receptor ligand

sunt: constanta de disociere Kd, constanta afinitii reciproce Ka. Parametrul Kd descriu
afinitatea ligandului ctrre situsul int: Bmax, de obicei msurat n moli pe miligram, msura
concentrauei situsurilor de legtur ntr-un esut dat i valoarea IC 50. Parametrii Kd i Bmax pot
fi determinai utiliznd curba de saturaie unde concentraia radioligandului este n cretere pn
cnd toate situsurile de recunoatere a liganzilor sunt ocupai sau msurarea asocierea sau
disocierea cinetica. Kd este raportul dintre constanta de vitez a disocierii i cea a asocierii.
Valoarea IC50 este concentraia liganzilor capabili de a inhiba legturile specifice ale
radioligandului. Aceast valoare este determinat prin curba de competiie cu o concentraie fix
a radioligandului n esut i la concentraia variabil a liganzilor neetichetai. Cum este artat n

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 10 / 11

figura de mai jos, dac datele utilizate pentru derivaia valorii IC 50 sunt grupate ntr-un interval
care reflect 40-60% a curbei de competiie, multe informaii utile sunt pierdute. n mod ideal,
curba de concuren ar trebui s cuprind intervalul de 10-90% i include minimum 20 de date.

Valoarea IC50 pentru un compus dat este dependent de: concentraia radioligandului utilizat,
densitatea receptorului, afinitatea pentru receptor, Kd pentru radioligand.
Compararea activitii liganzilor ntre diferite teste de legtur se realizeaz prin ecuaia
Cheng-Prusoff, unde obinem valoarea Ki:
Unde L este concentraia radioligandului utilizat i Kd este constanta de disociere a
radioligandului la receptor. Aceast relaie corecteaz diferenele asociate condiiilor testului .
Testele de legare pot fi folosite pentru evaluarea rapid a caracteristicilor, dar sunt n general
limitate n abilitatea lor de a delimita agonitii de antagoniti, n special prin tehnica highthroughput.
Testele biochimice, ce impun msurarea producerii AMPc sau urmresc circuitul
fosfatitidilinozitolului, conform schemei activrii sau inhibrii receptorului, pot fi realizate prin
metodele bazate pe fluorescen. Aceasta depinde de utilizarea coloranilor sensibili de
detectare a calciului, care asigur msurarea n timp real prin dispozitive de nregistrare video.
Alte abordri a testelor funcionale presupun formarea complexului RL cu expresia genei ce
produce un rspuns imediat. Aici se includ diverse gene reporter sau teste care produc
luminescen ce poate fi msurat calorimetric. Adaosul de melatonina la un ovocit reduce
concentraiile intracelular AMPc rezultate dup integrarea pigmentului n celulele. Stimularea
agonistului determin creterii AMPc, rezultnd dispersia pigmentului, reacie care poate fi
determinat imediat vizual sau poate fi cuantificat n relaii de transmitere a luminii.
n general, se difereniaz urmtoarele tipuri de interaciuni a mai multor liganzi cu un tip de
receptor.
1. Dup concurena la locul legrii:
Neconcurent- cnd legarea mai multor liganzi are loc la situsurile diferite ale
aceluiai receptor.
Concurent- diferii liganzi se leag de acelai situs al receptorului.
Fr concuren- ligandul de tipul 2 interacioneaz nu cu receptorul, dar cu
complexele formate din ligandul tip1 cu receptorul dat.
2. Dup schimbarea afinitii:

Catedra Chimie farmaceutic i toxicologic

09.3.1-12
Elaborare metodic pentru studeni i profesori
(Chimie medical)

RED.:
DATA:

01
06.07.2009

Pag. 11 / 11

Fr schimbrile afinitii: legarea ligandului anumit nu urmeaz cu schimbarea

afinitii receptorului ctre liganzii de alt tip.
Cu schimbarea afinitii: legarea ligandului unui sau a mai multor tipuri urmeaz
cu schimbarea afinitii receptorului ctre liganzii de alt tip.
3. Dup interaciuni ntre liganzi:
o Fr interaciuni - concentraia a dou sau a mai multor tipuri de liganzi n mediu
unui singur tip de receptori se schimb numai din cauza interaciunilor ligandreceptor.
o Cu interaciuni - cnd concentraia liganzilor se schimb din cauza desfurrii
reaciei chimice ntre ei.
Cercetarea interaciunii ligand-receptor permite identificarea tipului de receptor. Grupele
de proteine nrudite, localizate n diferite esuturi cu diferene n structur i ordinea
aminoacizilor sunt sensibili ctre un anumit tip de agoniti specifici, datorit afinitii
individuale.
Cu creterea exponenial a volumului de informaie, nregistrarea, pstrarea, analiza i
prelucrarea datelor devin activiti cheie ce asigur succesul descoperirilor medicamentului.
Aceasta sunt realizate prin formare bazelor de date, compendium, librriilor electronice.
n ciuda tehnologiilor sofisticate contemporane utilizate n studiul interaciunilor
receptor ligand, acest proces rmne a fi n mare partea fi empiric, fiind definit de relaiile
structur-activitate a componentelor. Odat cu creterea cunotinelor n clonare, exprimarea i a
derivarea uoar a cristalelor de receptori sau enzimelor i a analiza interaciunii ligandului sau a
substratului prin utilizarea cristalografiei cu razeX, spectroscopiei cu rezonan magnetic
nuclear, s-au furnizat informaii noi privind structura medicamentelor selectate care pot fi
utilizate n design-ul noilor liganzi.

ntrebri pentru lucru de sinestttor:

1.
2.
3.
4.

Dai definiia receptorilor. Clasificarea. Dai exemple de receptori.

Caracterizai dinamica receptorilor i comunicarea celular.
Descriei principalele teorii a interaciunii ligand receptor.
Caracterizai cinetica reaciilor ligand-receptor.

Bibliografie:
1. Abraham D.J. Bourghers medicinal chemistry and drug discovery sixth edition, volume
1, ed. Wiley Interscience, England.
2. Ghicavi V., Bacinschi N., Guuil Gh. Farmacologie, ed. Chiinu, 2012.
3. Thomas G. Medicinal chemistry, an introduction second edition, ed. Wiley Interscience,
England, 2007.