Insamantarea produselor patogenice

Izolarea unui agent patogen infectios este hotaritoare in diagnosticul bacteriologic.Insamantarea se face pe medii acvate lichide sau solide.Prin insamantare urmarim obtinerea de colonii izolate.O colonie este o populatie bacteriana omogena provenind dintr-o singura celula.Genetic acasta polulatie reprezinta o clona.  Trecerea unei singure colonii de pe un mediu de cultura pe un alt mediu adecvat se numeste REPICARE.  Prin repicare se obtine Cultura Pura care poate fi studiata asupra caracterelor morfotinctoriale, biochimice, antigenice si de patogenitate si astfel poate fi identificata.  Tehnica insamantarii prin epuizarea inoculului pe suprafata unei placi Petri este metoda de electie pentru obtinerea de colonii izolate. Injoculul se depune pe un sector limitat al placii= sector A, apoi cu ansa se disperseaza pe un sector B in striuri paralele. Se sterilizeaza ansa si se repeta operatiunea pana la epuizarea intregii suprafetei a placii Prin dilutii successive:  Se folosesc tuburi cu bulion in care se fac dilutii succesive din produsul patologic. Din ele se fac treceri pe mediul solid  Din dilutiile cele mai mari vom obtine colonii izolate.  In profunzimea mediilor solide Se face prin inteparea mediului si incorporare in toata masa mediului. Studiul caracterelor de cultura In mediul lichid urmarim:  Turbiditatea( majoritatea tulpinilor tulbura uniform bulionul)  Formarea sedimentului ( ex Streptococul se depune la fundul tubului formand un sediment si lasa coloana de mediu limpede.)  Pelicula Ex. Mycobacteriile formeaza un val la suprafata mediului.  Elaborarea unor pigmenti: ex bacilul Piocianic elaboreaza pigment verde,

 Degajarea de mirosuri caracteristice Ex B. Piocianic degaja un miros aromat de floare de tei. Pe medii solide Urmarim:  Relieful coloniilor, care poate fi bombat, turtit, cu suprafata neteda sau rugoasa  Conturul coloniilor bine delimitat, circular sau festonat cu prelungiri.  Marimea: coloniile de streptococi au diametrul mic, Klebsiella formeaza colonii cu diametrul mare  Producerea de pigment: Stafilococul produce pigment auriu, Serratia produce pigment rosu  Consistenta poate fi untoasa, cremoasa, mucoasa, apoasa.  Coloniile pot fi transparente sau opace  Coloniile pot fi emulsionabile sau nu in ser fiziologic  In functie de aceste caracteristici deosebim doua tipuri de colonii pe mediile solise:  Colonii de tip S (Smooth=netede) cu suprafata bombata, neteda, lucioasa, cu contur bine delimitat si consistenta cremoasa.  Colonii de tip R ( rough=rugoase)  Cu suprafata turtita, neregulata, cu contur crenelat, festonat, uscate si aderente.  Majoritatea speciilor la izolarea dintr-un produs patologic se dezvolta sub forma de colonii de tip S  Exceptie : Bacilul carbunos, bacilul difteric, bacilul tuberculos