Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
Cursuri Biofizica - MD
Cursuri Biofizica - MD
Dilema continuitii sau discontinuitii materiei a aprut din timpul filozofilor greci.
Leucip a fost primul care a analizat problema divizrii materiei, deci a discontinuitii acesteia.
El a susinut faptul c indiferent ct de mult ncercm s divizm materia, la un moment dat ajungem la
un fragment ce nu mai poate fi divizat.
Unul dintre elevii lui Leucip, Democrit a denumit atomos (n limba greac atomos
nseamn indivizibil) aceste particule ce nu mai pot fi divizate.
Astfel, atomul reprezint cea mai mic fraciune indivizibil dintr-o substan ce pstreaz proprietile
acesteia.
Democrit considera ca universul este format din spaiu liber i din particule indivizibile,
numite atomi care difer ntre ei prin dimensiune, form, poziie i aranjare spaial.
Atomismul a fost respins de Aristotel i Platon care susineau teoria continuitii materiei.
Ipoteza existentei atomilor nu a fost complet acceptat dect la sfritul sec. al XIX lea, dup
demonstrarea teoriei cinetice i micrii browniene.
Structura atomului
n general se poate afirma c atomul este format din nucleu i electroni.
Numrul de electroni din atom a fost determinat experimental. Acesta se numete numr atomic
i se noteaz cu Z. Numrul atomic indic poziia elementului chimic n sistemul periodic.
Atomul este neutru din punct de vedere electric. Deci, conine n numar egal sarcini pozitive i
negative. Sarcinile negative sunt reprezentate de electroni iar sarcinile pozitive se afl n nucleu.
Exceptnd hidrogenul, celelalte elemente chimice conin n nucleu, pe lang protoni i un
numr variabil de neutroni. Masa neutronilor i masa protonilor formeaza numrul de mas, A, al
elementului respectiv.
Pentru acelai element chimic numarul de neutroni din nucleu poate fi variabil. Acest lucru nu
modific proprietile chimice ale elementului i nici poziia sa n sistemul periodic.
Numrul diferit de neutroni din nucleu confer elementului chimic proprieti fizice diferite.
Elementele chimice cu acelasi numr atomic Z, dar cu numere de mas diferite se numesc
izotopi (n limba greac izotop nseamn acelai loc).
Electronul
Electronul este sarcina electric indivizibil.
Primul experiment care a demonstrat c sarcina electric nu este divizibil la infinit, ci este
divizibil n unitai discrete, a fost efectuat de Faraday n 1833. n urma acestui experiment au fost
deduse legile electrolizei.
Faraday a evideniat faptul c masa unei substane dintr-o soluie eliberat la un electrod ntr-un
anumit interval de timp este proporional cu cantitatea de electricitate ce a trecut prin soluie n acel
interval de timp.
De asemeni, tot Faraday a demonstrat c o cantitate dat de electricitate elibereaz aceeai mas
dintr-o substan dat. Masa de substan eliberat este proporional cu masa echivalent a substanei.
Rezultatele experimentelor lui Faraday presupuneau existena unei uniti elementare de
electricitate, cantitatea de electricitate purtat de diveri ioni fiind multipli ai acestei uniti. Aceast
unitate a fost denumit de ctre Stoney (in 1874) electron, definind-o ca fiind cantitatea de
1
electricitate ce trebuie s treac printr-o soluie electrolitic pentru a elibera un atom dintr-o substan
monovalent.
e = F/NA
unde:
e sarcina electronului
F constanta lui Faraday
NA numrul lui Avogadro
Calculele lui Stoney au stabilit pentru electron o valoare aprox. de 10-20C.
Primele msurtori directe asupra sarcinii electronului le-a iniiat J.J. Thomson i J.S.
Townsend n 1897, valoarea exact fiind stabilit de Millikan n 1909.
Valoarea sarcinii electrice a electronului este 1,6x10-19C iar masa sa este 9,11x10-31Kg.
Pentru determinarea distribuiei n interiorul atomului a masei i sarcinii electrice s-au realizat
de-a lungul timpului mai multe experimente, elaborndu-se mai multe modele.
Experimentele lui Rutherford au demonstrat c sarcina electric pozitiv nu este distribuit
uniform n atom ci este concentrat ntr-un nucleu, confirmnd astfel modelul planetar al atomului n
care sarcina pozitiv a atomului este concentrat ntr-un nucleu cu raza de aprox. 10-14m i electronii se
rotesc n jurul acestuia pe orbite cu razele de aprox. 10-10m.
Dificultatea de baz a modelului planetar clasic const n stabilitatea atomului.
Dac avem n vedere legile electrodinamicii clasice, electronii, rotindu-se n jurul nucleului au o
miscare accelerat. Ori, o particul ncrcat electric care are o micare accelerat emite radiaie
electromagnetic ncercnd s-i micoreze energia cinetic. Pe msura scderii energiei cinetice ar
scdea i raza orbitei, energia potenial ar crete n valoare absolut i electronii ar cdea pe nucleu.
Pentru a corecta deficienele modelului planetar clasic, Niels Bohr a introdus ca postulate
concluziile impuse de datele experimentale:
1. postulatul I: Atomii sunt caracterizai de stri staionare, stri n care acetia nu absorb i nu
emit energie. ntr-o stare staionar energia sistemului este constant n timp.
2. postulatul II: Atomii absorb sau emit radiaie electromagnetic numai la trecerea dintr-o stare
staionar n alt stare staionar.
Frecvena radiaiei electromagnetice emise sau absorbite se poate determina prin relaia
cunoscut sub numele de condiia frecvenelor lui Bohr:
h= Em - En
sau
= E / h
unde:
E este diferena de energie ntre cele dou stri;
este frecvena radiaiei emise sau absorbite
MOLECULA
Dup Lehninger, moleculele din organismele vii, studiate individual, se supun principiilor fizice
i chimice obisnuite care guverneaza comportarea materiei inerte, dar studiate n ansamblu,
interactioneaza ntre ele conform unui alt grup de principii care alcatuiesc logica moleculara a strii vii.
Aceste principii nu includ, n mod necesar, legi fizice noi, nedescoperite nc. Mai degraba ele trebuie
privite ca un grup de reguli fundamentale care guverneaza natura, functia i interactiile tipurilor
specifice de molecule din organismele vii, proprieti ce confera acestora capacitatea de a se
autoorganiza, autireplica i autoregla. Este mult mai potrivit sa consideram aceste principii ca axiome
deoarece unele dintre ele sint intuitive i nu pot fi demonstrate nc.
Compoziia chimic a materiei vii este calitativ diferit de aceea a mediului n care aceasta se
gsete .
n esen, organismele vii au n constituia lor:
ioni de dimensiuni foarte mici (microioni). Dintre acetia ctm: Na+, K+, Cl- (implicai
ndeosebi n exctabilitate), Ca2+ (implicat n contracia musculara), Mg2+ (cu rol n procesul de
bioluminiscen), H+(secretat de mucoasa gastric i generator de tensiuni protonmotrice n
anumite microorganisme), HCO3- , HPO42-, OH-.
micromolecule (neutre sau disociate): aminoacizi, mononucleotide, monozaharide, acizi grai,
etc.
macromolecule
complexe macromoleculare
r0
r
Condiiile de formare a moleculei se realizeaz cnd forele de atracie dintre atomi sunt
egale cu cele de respingere, iar energia potenial este minim.
n care este constanta dielectric a mediului n care se gsesc corpurile, iar r distana dintre ele.
Ecuaia se aplic n cazul corpurilor macroscopice. n cazul atomilor i moleculelor legea nu se
poate aplica deoarece nu exist constanta dielectric ntre doi atomi. n acest caz apar fore specifice
ntre atomii constituieni ai unei molecule.
Legtura covalent este legtura n care doi atomi cedeaz i primesc electroni de
valen formnd un nivel electronic stabil. (un atom cedeaz un electron, cellalt atom
primete un electron).
Caracterele generale ale legturii covalente sunt:
este o legtur de distan mic. Distana dintre doi atomi este inferioar razei de
interaciune interatomic;
are caracter de saturaie. Odat format legtura dintre doi atomi, perechile
electronice nu mai permit alte legturi; cristalele covalente sunt foarte dure
(diamantul).
n legturile covalente formate ntre atomi diferii, perechea de electroni de legtur nu este
repartizat simetric ntre cei doi atomi, ci este atras spre atomul mai electronegativ; legtura capt un
moment de dipol. Dipolmomentul legturii va fi cu att mai mare cu ct diferena de electronegativitate
este mai mare.
Legtura coordinativ este o legtur format din doi electroni pui n comun.
Electronii sunt furnizai de acelai atom, pentru completarea nivelului energetic extern.
Ca exemplu, poate fi luat oxigenul, care poate realiza dou legturi covalente dar poate
fi i receptor pentru o legtur coordinativ.
Legtura metalic este o legtura puternic realizat cu electroni pui n comun care
genereaz i electroni liberi de conductibilitate.
Dipolul electric
Dipolul electric este un sistem format din dou sarcini electrice egale i de semn contrar, aflate
la distanta d una fa de alta.
n biofizic se ntlnesc n mod frecvent biomolecule care sunt, din punct de vedere electric,
dipoli permaneni. Ex. aminoacizii, proteinele i lipidele au acest caracter datorit distribuiei de
grupri de sarcin pe suprafaa biomoleculelor.
Legtura de hidrogen
Legtura de hidrogen este un caz particular al interaciei dipol-dipol.
O molecul format dintr-un atom de hidrogen i un atom electronegativ prezint o legtur
covalent cu caracter parial ionic. Se formeaz un dipol cu sarcina negativ spre atomul electronegativ
i sarcina pozitiv spre atomul de hidrogen. Dac n apropierea acestui dipol se gsete un alt atom,
atunci ntre atomul respectiv i dipol se realizeaz o legtur determinat de atracia dintre proton i
electronii atomului. Legtura format dintre dipol i atom se numete legtur de hidrogen.
Legtura de hidrogen are urmtoarele caracteristici:
distana dintre atomi este foarte mic
energia legturii de hidrogen este mai mare dect energia legturii dipol-dipol.
Dipoli indui
Se consider un atom (sistem neutru din punct de vedere electric) n apropierea cruia se
gsete un ion pozitiv. Ionul va exercita o for de atracie asupra electronilor i o for de respingere
asupra nucleului atomului. Atomul se va deforma, adic se produce o uoar separare a sarcinilor
pozitive i negative din atom, lund natere un dipol. Acesta se numeste dipol indus deoarece exist
att timp ct ionul exist n jurul atomului.
Dipoli tranzitorii
n general, ntr-un atom sau molecul electronii sunt distribuii simetric n jurul nucleului. La un
moment dat, aceast simetrie poate s se modifice, formnd un dipol. Deoarece electronii sunt n
continu micare, existena dipolului este condiionat de probabilitatea asimetriei i distribuiei
electronice i dureaz att timp ct dureaz aceasta. Un astfel de dipol se numeste dipol tranzitoriu.
Dac un astfel de dipol se afl n apropierea unei molecule, atunci poate induce n aceasta dipoli
a cror orientare i moment s depind de dipolul tranzitoriu.
n biomolecule se pot induce muli dipoli tranzitorii i efectul lor fiind cumulativ, forele
dispersive pot avea mare importan.
o dou perechi de electroni se afl pe dou orbite axate pe direciile -O-H ; acetia sunt electronii
ce formeaz legtura covalent;
o dou perechi de electroni graviteaz pe dou orbite situate perpendicular pe planul nucleelor; se
numesc electroni neparticipani.
Prin urmare, molecula de ap are o structur spaial tetraedric, nucleul de oxigen fiind n
centrul tetraedrului.
Datorit distribuiei asimetrice a sarcinilor, densitatea electronic maxim fiind n jurul
atomului de oxigen, molecula de ap este un dipol permanent.
Molecula de ap poate forma legturi coordinative - puni de hidrogen cu alte molecule.
Fiecare molecul de ap se poate lega coordinativ cu alte 4 molecule, formnd structuri spaiale.
Punile de hidrogen stau la baza structurilor supramoleculare, att n stare solid ct i n stare lichid.
Caracterul dipolar al moleculei de ap, dar n special punile de hidrogen, explic proprietile
speciale ale apei:
densitate maxim la 4C
cldura latent de vaporizare, cldura specific i conductivitatea termic deosebit de mari
constanta dielectric mare, ceea ce favorizeaz disocierea electrolitic
tensiune superficial mare.
intestiial (23%)
circulant sau vascular (7%)
2
97
3
94
4
92
5
85
6
74
nou nscut
67-74
Adult
58-67
Figura
comportare ca dipol - ntre moleculele de apa vecine se formeaz legturi de Hidrogen. Fiecare
molecula formeaz dou legturi de Hidrogen.
Figura
Modele de structur a gheii i a apei lichide.
Apa poate exista n trei stri de agregare:
o solid,
o lichid,
o gazoas.
Starea solid (gheaa) - prin difracie X pe cristale de ghea s-a demonstrat c moleculele de
ap sunt n structura spaial tetraedric.
Figura
Topirea gheii duce la stricarea structurii tetraedrice i spatiile goale din cristal se ocup cu alte
molecule de ap ceea ce explic creterea densitii apei la 4C la valoarea 1g/cm3.
Creterea temperaturii ---> de 4C duce la agitaie termic crescut iar densitatea se micoreaz.
n molecula de ap fiecare atom de hidrogen este legat de atomul de oxigen printr-o legtur
covalent.
9
Figura
Atomul de H i cel de O pun n comun fiecare un electron. Fiecare atom primete un electron
suplimentar.
Atomul de Hidrogen va avea 2 electroni iar cel de oxigen 8 electroni periferici n loc de 6 (in
anumite intervale de timp).
Electronii sunt mai puternic atrai de Oxigen dect de Hidrogen conferindu-i starea dipolar
moleculei de ap. Acest lucru confer proprietatea de disociere a cristalelor ionice n ap.
Legtura de Hidrogen permite formarea structurii de tetraedru cu atomul de Oxigen n centru
(cazul gheii).
La nghearea apei se cedeaz mediului 1,44 kcal pentru o molecul de ap deoarece energia
legturilor de Hidrogen la ghea este 10 kcal/mol.
La topire 15% din legturile de H se rup. Rmn 85% legturi de H dup dezgheare deci apa
mai conine configuraii spaiale de ghea.
Linus Pauling propune n configuraia apei pure structura de clatrat (sau cuc).
O molecul de ap este nconjurat de 20 de molecule.
La structura apei n stare gazoas nu mai avem legturi de Hidrogen.
n vederea ruperii legturilor de Hidrogen se consum cldura latent de vaporizare i rmn
Fore Van der Waals (fore slabe).
Modificarea structurii moleculare a apei n prezenta solviilor
Solvitul micoreaz de multe ori gradul de ordonare a moleculelor de ap similar cu creterea
temperaturii.
Solviii se mpart n patru categorii:
1. electrolii ce disociaz n ioni i se pot hidrata;
2. solvii capabili de a forma legturi de hidrogen;
3. solvii ineri chimic ce realizeaz legturi hidrofobe;
4. solvii cu diferite tipuri de grupri (polare, nepolare, proteine, macromolecule).
Tipuri de interaciune cu apa
Formarea de ap prin hidratare apa se dispune concentric n jurul ionului formnd primul i al
doilea strat de hidratare.
Formarea de cristale hidrai moleculele hidrofobe creeaz caviti n ap i devin molecule
interstiiale (cazul gazelor sau al anestezicelor).
Crearea de reele de ap n apropierea macromoleculelor (colagenul cu molecule de ap n
form de reea).
10
V k s
f -p
P
neutron 1 D .
Proprietile fizice ale apei grele
densitatea maxim la 11,6C fa de 4C la apa normal;
punct de topire 3,802C;
punct de fierbere 101,42C n condiii normale de presiune;
coeficientul de vscozitate 12,6 milipoise fata de 1,09 mp la apa normal la 20C.
Se poate marca apa cu ap grea pentru studiul metabolismului apei cu ajutorul spectroscopiei de
mas sau prin refracie.
Rolul apei grele n organism
ncetinete metabolismul;
inhib diviziunea celular;
abolete parial capacitatea de conducere a influxului nervos;
inhib transportul activ i contracia muscular.
Aceste modificri se explic prin:
structuralizarea mai pronunat a apei grele;
realizarea n celul a unor complexe ap-proteine mai stabile.
Dup deuterizare fora de contracie muscular scade iar timpul de laten al contraciei crete. La
nlocuirea apei cu ap grea se genereaz modificri profunde n funcia miocardului.
13
BIOMEMBRANE CELULARE
Biomembranele reprezint circa 10 - 20% din masa celular. Proporia de lipide i proteine care
intr n componenta acestora este diferit n raport cu funciile particulare ale fiecrei biomembrane.
Membranele cu activitate metabolic marit conin mai multe proteine (de ex. membrana intern a
mitocondriei cu peste 70% proteine n alctuirea sa). Teaca mielinic conine lipide n proporie de
75% ceea ce asigur rolul su de izolant electric. Glucidele reprezint un component minor, prezent
numai n proporie de 2-10%. Acestea sunt dispuse n principal pe faa extern a membranei fiind
legate covalent de lipide sau proteine. Acestor componente la nivel membranar li se asociaz o
nsemnat cantitate de ap (circa 20% din masa total) precum i ioni de Ca i Mg. Proporiile lor
variaz foarte mult n special n stri patologice.
Proteinele membranare sunt unele periferice iar altele sunt integrate n lipide.
Pe faa citoplasmic a multor membrane celulare se formeaz o reea de proteine fibrilare
formnd citoscheletul.
Pe faa extern a membranelor att proteinele ct i lipidele prezint poriuni oligozaharidice
fiind constituite ca glicoproteine i glicolipide.
Acestea formeaz n ansamblul lor inveliul celular numit glicocalix.
Lipidele membranare pot fi nepolare (neutre) cum este colesterolul ori polare cum sunt
glicerofosfolipidele i sfingolipidele.
Modelul de membran acceptat este cu dublu strat lipidic, monomoleculare juxtapuse cu
capetele polare spre exterior i cu catenele hidrocarburice n contact.
Stratul lipidic este strbtut de pori umplui cu ap, cu o structur de mozaic cu mici zone
hidrofile mprtiate pe un fond hidrofob.
15
PROTEINE MEMBRANARE
Proteinele membranare sunt specifice fiecrei membrane. Ele reprezint elementul activ al
membranei (cu rol de enzime, canale, transportori, receptori, etc.).
Concentraia lor variaz funcie de tipul membranei ntre 20% i 75% (membrana
mitocondriilor).
Putem grupa aceste proteine n dou categorii:
a) proteine extrinseci sau periferice, sau care ptrund n membran pe o anumita adncime. Ele
sunt slab legate de membran i pot fi ndeprtate prin splare ori prin tratare cu soluie ionic sczut.
Ele sunt frecvent implicate n transmiterea informaiei spre interiorul celulei.
b) proteine intrinseci sau integrale care traverseaz membrana pe toat grosimea ei. Pot fi
extrase prin tratare cu detergeni sunt implicate n general n fenomene de transport. Prile
intramembranare sunt structuri hidrofobe, n dublu helix, legate ntre ele, n mediul apos, prin zone
hidrofile neelicoidale.
Moduri de legare a proteinelor membranare:
proteine intrinseci
a) cu un singur segment transmembranar;
b) segmente transmembranare multiple.
proteine extrinseci
a) legturi electrostatice;
b) legturi hidrofobe;
c) legturi hidrofobe, prin ancorare de un segment terminal ce penetreaz membrana;
d) ancorare printr-o molecul lipidic legat covalent;
e) legare de o alt protein membranar.
16
Lipide
a) difuzie laterala n stratul lipidic (stnga) i schimb intre moleculele lipidice din strat
i cele adiacente proteinelor (dreapta);
b) rotaie n jurul axei proprii i basculare dintr-un strat n celalalt;
c) rotaie descriind o suprafa conic (o asemenea micare pot avea i derivaii acizilor
grai);
Proteine
a) difuzie lateral;
b) rotaie n jurul unei axe perpendiculare pe stratul bilipidic;
c) rotaie izotropic (fr axa preferenial);
d) rotaie descriind suprafee conice, molecule hidrofobe, comportndu-se ca un
bastona rigid.
17
primar (pompe ionice) - este cuplat cu o reacie exergonic (exemplu hidroliza ATP);
secundar - este cuplat cu transportul simultan al unei alte substane n sensul
gradientului electrochimic;
simport: ambele substane sunt transportate n acelai sens;
antiport: cele dou substane sunt transportate n sensuri opuse.
TRANSPORTUL PASIV
Este un proces de difuzie a ionilor i a moleculelor prin membran.
n acest transport pasiv exist dou fenomene distincte ca modalitate de transport microscopic.
difuzia liber prin membran (dializa) sub aciunea unui gradient de concentraie;
filtrarea printr-o membran sub aciunea unui gradient de presiune i concentraie.
Aceste fenomene se ntmpl pn cnd sistemul ajunge n echilibru termodinamic avnd
aceleai valori de concentraie i presiune ntre mediul intra i extracelular.
Difuzia simpl
Datorit structurii membranei ca strat bilipidic, zona intern fiind hidrofob, o particul trebuie
sa strabat o zon hidrofil i apoi s ajung n zona hidrofob. Datorit acestui lucru mecanismele de
difuzie vor fi diferite pentru particulele hidrofile (ioni i molecule polare) i particule hidrofobe
(nepolare) respectiv pentru particulele liposolubile i hidrosolubile.
Solubilitatea unei substane este diferit n mediul apos i n membran.
Raportul ntre solubilitatea ntr-un solvent (n cazul nostru membrana lipidic fluid) i
solubilitatea n ap se numete coeficient de partiie solvent-ap ().
Un coeficient de partitie diferit de 1 determin un salt de concentraie pe suprafaa membranei.
Difuzia pasiv sau transportul pasiv datorat agitaiei termice a unor particule din zonele de
concentraie (densitate mai ridicat) spre zonele cu valori mai mici printr-un mediu suport omogen se
supune legilor cunoscute sub numele de legile lui Fick.
Pentru prezentarea legilor difuziei este necesar a utiliza doi termeni: flux i gradient.
Fluxul reprezint cantitatea de substan, sarcin, energie, etc., transportate printr-o
suprafa S n unitate de timp.
Flux masic m/t (la limita (dm/dt)
Flux molar /t (la limita d/dt).
Gradientul reprezint variaia unei mrimi (concentraie, densitate, potenial electric, etc.)
ntre dou puncte ale spaiului raportat la distana dintre cele dou puncte.
18
altor reacii enzimatice difuzia facilitat poate s fie inhibat de anumii compui prin inhibiie
competitiv sau necompetitiv.
Eficiena difuziei facilitate este mult mai mic dect a celei prin canale. Ex: transportul de
glucoz din membrana eritrocitar mediaz circa 300 molec/s.
Un caz particular al difuziei facilitate este formarea n jurul ionului a unei structuri hidrofobe,
care i permite difuzia prin stratul bilipidic.
20
ionilor de Ca2+ de ctre reticulul sarcoplasmic necesit hidroliza ATP, n acest caz existnd o ATP-az
care este activat de ionii de Ca2+ prin pompa de Ca2+. Densitatea pompelor de Ca2+ n reticulul
sarcoplasmic este foarte crescut, aproximativ 20.000 m2. Ca2+ ATP-aza constituie peste 80% din
proteinele membranare intrinseci i ocup mai mult de 1/3 din suprafaa reticulului sarcoplasmic.
Formele i dimensiunile proteinei au fost determinate prin difracie cu raze X i microscopie
electronic dupa criofractur. Forma sa este simetric, cea mai mare parte fiind n contact cu
citoplasma.
Pompele protonice
Dac stoichimetria este diferit de 1/1 pentru s moli de substan S fiind transportai p moli de
substan P la echilibru rezult un raport al concentraiilor.
(S1/S2)s = (P1/P2)p
Deci raportul concentraiilor depinde de stoichimetria reaciei enzimatice.
Antiportul de Na+/Ca2+
Antiportul de Na+/Ca2+ asigur o concentraie sczut de calciu intracelular (exemplu: muchiul
cardiac, celula fotoreceptoare).
Pentru fiecare ion de calciu scos din celul (mpotriva gradientului de concentraie) sunt
introdui n celul trei ioni de sodiu (n sensul gradientului). La echilibru se obine:
1
Na1 Ca1
Na2 Ca2
Pentru un raport al concentraiei de sodiu de 1/10 (meninut prin transport activ primar: pompa
de Na /K+) se obine un raport al concentraiei de Ca de 1/103 deci o concentraie intracelular de calciu
de 1000 de ori mai mic dect a mediului interstiial.
+
Antiport
a. Funcionarea pompei;
S1, S2 = concentraiile substanei transportate n sensul gradientului electro-chimic, pe cele
dou fee ale membranei;
P1, P2 = concentraiile substanei transportate mpotriva gradientului electro-chimic, pe cele
dou fee ale membranei; S, P definesc stoichiometria transportului de echilibru.
s
S1 P1
S2 P2
S1 P2
S2 P1
Simport
s
a) Funcionarea pompei: notaiile sunt aceleai ca n figura precedent. La echilibru S1 P2 .
S2 P1
Simportul de Na+/glucoz i transportul activ prin pompa de Na+/K+.
Acest simport de glucoz este important n elaborarea urinei. n urina primar concentraia de
glucoz este comparabil cu cea din snge. Ea va fi absorbit total (glucoza) la nivelul tubului urinar
nsoit de Na+, transportat n sensul gradientului de concentraie meninut prin transport activ primar.
n regiunea proximal are loc un simport de Na+/glucoz cu o stoichimetrie de 1/1. n regiunea
distal a tubului apare un simport Na+/glucoz cu o stoichimetrie de 1/2 asigurnd pentru un raport al
concentraiei de Na+ de 1/10 un raport al concentraiei de glucoz de 1/100. Astfel este absorbit n
patul vascular practic ntreaga cantitate de glucoz. Pompa este electrogenic.
24
ACTIVITATEA ELECTRIC A
MEMBRANEI CELULARE
POTENIALUL MEMBRANAR DE REPAUS
De o parte i de alta a membranei celulare exist o diferen de potenial electric, generat de o
repartiie inegal a sarcinilor electrice n cele dou compartimente. n stare staionar, n cele dou
compartimente desprite de membran se stabilete o relaie bine determinat ntre toi parametrii
sistemului: potenial electric, potenial chimic, presiune etc., ceea ce definete echilibrul de membran.
CONDIIILE DE ECHILIBRU
n stabilirea echilibrului de membran intervin o serie de factori legai de caracteristicile
membranei i de particularitile mediilor disperse pe care le desparte membrana.
Organismul uman include o mare cantitate de ap (60-70% din greutatea corporal). Ea reprezint
solventul pentru sisteme disperse polifazice, cuprinznd cristaloizi sub form ionizat (Na+, K+,
Ca2+, Mg2+, etc.), molecule mici i macromolecule amfotere (n general anioni la pH fiziologic).
Mediul intracelular cuprinde i anioni proteici nedifuzibili prin membrana celular, ceea ce impune
o diferen de potenial ntre cele dou fee ale membranei i deci o repartiie inegal a ionilor
difuzibili.
Membranele biologice au o permeabilitate diferit pentru diversele specii ionice. n aceast situaie,
ionul care difuzeaz mai uor determin apariia unui gradient electric, gradient ce accelereaz
difuzia ionului de semn opus, astfel nct, la echilibru (egalitatea potenialului electro-chimic n cele
dou compartimente) nu se ajunge la egalizarea concentraiilor i anularea diferenei de potenial.
Echilibrul se stabilete n funcie de permeabilitatea membranei pentru fiecare ion. Transportul
activ impune un raport bine determinat al concentraiilor, ceea ce duce la o diferen de potenial
ntre cele dou fee ale membranei.
Gradienii de concentraie, de potenial i de presiune existeni la un moment dat determin un
transport pasiv, prin difuzie i osmoz, tinznd s antreneze sistemul spre echilibrul termodinamic.
Transportul activ, prin procese cuplate, impune fore termodinamice constante care ndeprteaz
sistemul de echilibrul termodinamic, plasndu-l ntr-o stare staionar.
Prin aciunea conjugat a factorilor de mai sus se ajunge la un echilibru corespunznd unei stri
staionare. Asta implic:
egalitatea potenialului electro-chimic n cele dou compartimente (intra- i extracelular) i
deci anularea transportului net de solvit prin membran;
izotonicitatea sistemelor disperse din cele dou compartimente i deci anularea fluxului
osmotic;
neutralitatea electric a soluiilor din cele dou compartimente.
25
P
P
Cj
Cj
C P A
C P A
Aj
Aj
unde:
Cj = concentraia cationilor difuzibili
Aj = concentraia anionilor difuzibili
PCj = Permeabilitatea membranei pentru cationul j
PAj = Permeabilitatea membranei pentru anionul j
e i i = faa extern, respectiv intern a membranei
Principalii ioni care intervin n echilibrul membranar sunt Na+, K+ i CI- i deci relaia de mai sus
devine:
VR
P K PNa Na e PCl Cl i
RT
log K e
F
PK K i PNa Na i PCl Cl e
N.B.: Prin convenie, potenialul lichidului interstiial este considerat nul i se ia ca referin,
deci potenialul feei interne a membranei este egal cu diferena de potenial transmembranar, astfel
nct sintagma "potenial membranar" e corect i reprezint potenialul feei citoplasmatice a
membranei.
Potenialul membranar poate fi msurat cu microelectrozi ce se introduc n celul. Concentraia
ionilor de Na+ i K+ e meninut de pompa de Na+/K+, compensnd fluxul pasiv al respectivilor ioni.
Ionii de CI-, pentru care, n general, nu exist pompaj activ, se vor distribui n mod pasiv n cele dou
compartimente, astfel nct s fie respectat echilibrul electro-chimic (difuzia datorat gradientului de
potenial e compensat exact de fluxul datorat gradientului de concentraie).
nlocuind n relaia Goldman - Hodgkin - Katz valorile cunoscute (msurate) ale concentraiilor
i permeabilitilor principalilor ioni (Na+, K+, CI-) se obine, pentru diferite celule i diferite specii, un
potenial de -40... -90 mV, n bun concordan cu datele experimentale. Micile diferene sunt datorate
interveniei altor ioni, existeni n concentraie mai mic (Mg2+, Ca2+, etc.), dar care au un rol important
n realizarea funciei anumitor celule i tesuturi (exemplu: muchiul striat, muchiul cardiac).
Exemplu: n tabel sunt date concentraiile ionice aproximative pentru axonul gigant de calmar.
Permeabilitatea membranei n repaus pentru principalii ioni se afl ntr-un raport:
26
Ionii
Mediul
citoplasmatic
(mM/1)
Mediul
Potenialul de
chimic (mV)
K+
400
20
-75
Na +
50
440
+ 55
CI-
52
560
-61
Tabel 1: Concentraiile ionice tipice i potenialul de echilibru electro-chimic pentru axonul gigant de calmar
nlocuind aceste valori n relaia Goldman - Hodgkin - Katz, la 25C, se obine: VR = -61 mV,
valoare foarte apropiat de datele experimentale.
g = g1N
Cu alte cuvinte, conductana membranei definete n termeni electrici permeabilitatea ei.
Fluxul ionilor prin membran este astfel determinat de combinaia n serie a unei surse de t.e.m.
a crei valoare e dat de potenialul de echilibru electro-chimic, deci dependent de raportul
concentraiilor, i o rezisten, expresie a permeabilitii membranei.
Consideraiile de mai sus sunt valabile pentru fiecare specie ionic n parte, deci schema
electric echivalent a unei poriuni de membran va cuprinde cte o ramur baterie-rezisten
corespunztoare fiecrui tip de ion, legate n paralel.
Pe suprafaa membranei, aa cum am vzut la difuzia particulelor ncrcate, se acumuleaz
sarcini electrice. Ele sunt desprite de un mediu dielectric, format de stratul bilipidic, a crui suprafa
e de circa 100 de ori mai mare dect a tuturor canalelor la un loc. Acest lucru confer membranei i o
comportare capacitiv, deci schema electric echivalent trebuie completat cu un condensator (C). n
consecin, pe lng fluxurile ionice, prin membran apare i un curent capacitiv de ncrcare/
descrcare a condensatorului, curent dat de deplasarea de sarcini (Q) la suprafaa membranei,
proporional cu valoarea capacitii (C) i cu viteza de variaie a potenialului (V):
27
N.B. Schema electric echivalent descris se refer, n mod expres, la celula neuronal i la
cea muscular striat. Membrana plasmatic a altor celule excitabile poate prezenta diferene
semnificative, constnd n: implicarea i a altor ioni (exemplu: calciu); intervenia altor pompe
(exemplu: pompa de schimb Na+/Ca2+); valori diferite ale parametrilor etc.
29
Faza descendent. Spre sfritul fazei ascendente scade din nou permeabilitatea membranei
pentru Na, prin blocarea specific a canalelor datorit noii valori a potenialului membranar. Curentul
de K+ devine preponderent, cu att mai mult cu ct crete i permeabilitatea membranei pentru potasiu,
care iese masiv din celul, contracarnd influxul de sarcini pozitive. Aceste mecanisme determin
scderea mai lent, a depolarizrii pn la potenialul de repaus i uneori. inducnd chiar o uoar
hiperpolarizare, numit postpotenial, datorit efluxului mai puiernic de K+.
Concentraiile intra i extracelulare de sodiu i de potasiu vor fi stabilite prin transport activ
(pompa dc Na+-K+).
31
Perioada refractar. n faza ascendent i n cea mai mare parte a fazei descendente a PA,
membrana e insensibil la aplicarea unui nou stimul: perioada refractar absolut. n faza ascendent,
procesul n avalan fiind oricum declanat, un al doilea stimul nu mai poate avea nici un efect.
Spre sfritul fazei descendente ns i n timpul postpotenialului, membrana prezint o
excitabilitate sczut - perioada refractar relativ - dnd un rspuns de amplitudine mai mic.
N.B.: Consumul cel mai mare de energie are loc la restabilirea concentraiilor de repaus,
deoarece aici intervine transportul activ, celelalte faze sunt rezultatul unui complex joc al
permeabilitii, prin deschiderea i nchiderea canalelor, implicnd deci transport pasiv.
Rspuns repetitiv. Dac intensitatea stimulului este mare sau excitaia e de lung durat,
membrana neuronal rspunde printr-o succesiune de PA. Frecvena de repetiie crete cu logaritmul
intensitii i e limitat de perioada refractar.
Se vede aadar c procesul de declanare a PA reprezint a conversie analog-discret, semnalul
analogic modulat n amplitudine (stimul sau potenial electrotonic) e convertit ntr-un semnal discret
modulat n frecven (succesiunea PA, impulsuri avnd caracteristici identice). Transmiterea
informaiei prin impulsuri modulate n frecven e caracteristic SNC.
Acomodarea reprezint fenomenul de cretere a pragului de excitabilitate a fibrei nervoase,
atunci cnd asupra ei acioneaz un stimul de lung durat.
Rm R Na RK RCl
Viteza de propagare
Cu ct distana pn la care stimulul reprezentat de curenii Hermann este mai mare, cu att
viteza de propagare a excitaiei crete.
Mielinizarea fibrelor nervoase determin o rezisten mare a membranei Rm. Viteza de
propagare saltatorie, de la un nod Ranvier la altul ajunge la 100 m/s. Rezult astfel c la animalele
superioare se obine o vitez de propagare apreciabil, fr mrirea dimensiunilor fibrei nervoase.
33
LASERUL N MEDICIN
Prima sugestie referitoare la teoria laserilor a fost fcut de Einstein n anul 1917, n lucrarea sa
Teoria cuantic a radiaiilor. Tot el introduce noiunile de emisie spontan i emisie stimulat.
Einstein caracterizeaz radiaia corpului negru prin domenii spectrale i cuante de energie care aparin
acestor domenii. Fiecrui atom excitat din cavitatea radiant i se atribuie o anumit probabilitate de
emisie n unitatea de timp, precum i o probabilitate de absorbie i de emisie forat (indus),
proporionale cu energia radiaiei. Pentru atomii neexcitai se presupune numai o probabilitate de
absorbie. Este punctul de plecare n explicarea funcionrii laserilor.
n 1924 Louis de Broglie a asociat fiecrei micri a unui punct material o und a crei lungime
de und se obine din impulsul mecanic al particulei, prin intermediul constantei lui Planck.
Charles Townes, J. P. Gordon i H. J. Zeiger au finalizat, n 1954, cercetrile privind
amplificarea radiaiei electromagnetice prin emisie stimulat, prin inventarea maserului.
n anul 1960, T. H. Maiman obine primul efect laser cu rubin. n acelai an acest tip de laser a
fost folosit pentru prima dat n oftalmologie pentru fotocoagulare.
Partea principal a oricrui tip de laser este constituit de un mediu activ (solid, lichid,
gazos sau semiconductor) n care se poate crea o inversie a populaiei ntre dou (sau
mai multe) niveluri energetice ale particulelor componente (atomi, molecule, ioni). Un
astfel de mediu, care permite o inversie de populaie, poart denumirea de mediu activ
laser.
Mediul activ este, practic, o colecie de atomi, molecule sau ioni care absorb energie de la o
surs extern i prin procese atomice complexe genereaz radiaie laser. Caracteristicile materialului
din care este constituit mediul activ determin parametrii funcionali ai laserului, inclusiv lungimea de
und.
Pentru ca ntr-un mediu s se poat crea starea de inversie de populaie, adic s devin
mediu activ, el trebuie s primeasc energie din exterior, de la o surs special, care
poart denumirea de surs de pompaj. Ea are rolul de a pompa atomii, moleculele sau
ionii pe un anumit nivel energetic superior. Sursele de pompaj sunt formate din lmpi cu
nalt presiune, cu luminozitate foarte mare aa numitele flashuri care dau pompajul
optic sau descrcarea electric direct n mediul activ gazos.
34
desfacerea legturilor, formarea legturilor ncruciate, formarea unui radical ce determin leziuni
oxidative sau fotodistrucia cromoforului. Cromoforul molecular poate fi de natur endogen (gruprile
laterale ale aminoacizilor, pigmenii hematici) sau pot fi de natur exogen, reprezentai de moleculele
introduse special n organism.
Acest mecanism st la baza terapiei fotodinamice. n practic, se utilizeaz pentru distrugerea
celulelor canceroase. Procedeul se bazeaz pe injectarea n organism a unui cromofor exogen care se va
acumula cu predilecie la nivelul celulelor canceroase. Sub aciunea radiaiei laser, cromoforul va
absorbi fotonii care vor reaciona cu oxigenul, rezultnd un produs toxic ce va distruge celulele
canceroase. Eficiena terapiei depinde de trei elemente eseniale: cromoforul molecular, radiaia laser i
concentraia de oxigen.
2 Efectele termice (n spe evaporarea, tierea i coagularea esuturilor) apar la densiti, puteri
foarte mari de pn la 1010 W/cm2 i la timp de expunere foarte scurt, ntre 1 ms i 100 s.
Diferitele efecte termice ale laserului se pot descrie pe baza temperaturii atinse i a duratei
expunerii, dar i pe baza particularitilor optice ale esutului i lungimii de und utilizate (tabel 1).
Temperatur
37C
40 - 45C
60C
80C
100C
peste 150C
300C
Efect tisular
fr leziuni tisulare ireversibile
inducie enzimatic; edem; fragmentare membranar i, n
funcie de durat, moarte celular
denaturarea proteinelor, coagulare iniial i necroz
denaturare colagenic, defecte de membran
uscare
carbonizare
evaporare
Tabel nr.1 - Efectul radiaiei laser asupra esutului viu, n funcie de temperatur
In vivo, prin fluxul sanguin local, cldura este transportat la distan de esutul supus razei
laser. n mod teoretic se consider c relaiile termice ale unui esut sunt determinate de trei factori:
1. conductibilitatea termic - fluxul de cldur este direct proporional cu diferena de
temperatur pe unitatea de lungime;
2. acumularea de cldur - poate fi definit printr-o constant material: aa numita cldur
specific;
3. transportul cldurii prin fluxul sanguin i alte mecanisme.
Rata de irigare sanguin influeneaz profunzimea ptrunderii cldurii. Organele slab irigate cu
snge, ca esutul adipos, pot fi mai uor lezate termic dect organele abundent irigate cu snge.
Influena vascularizaiei este, ns, neglijabil cnd durata expunerii depete cu mult rata irigaiei
sanguine.
n funcie de temperatur, efectele termice asupra esuturilor pot fi clasificate astfel: pn la
37C nu se produc leziuni tisulare ireversibile; ntre 40-45C apar inducie enzimatic, edem,
membrana celular devine lax i, n funcie de temperatur, se poate produce moartea celular; la o
temperatur de 60C denaturarea ireversibil a proteinelor, coagulare i necroz incipient; la 80C
denaturarea colagenului, defecte de membran; la 100C uscarea, vaporizarea apei tisulare, secionare,
ablaie; la peste 150C carbonizare, ardere; la peste 300C vaporizare, gazificare, leziuni
termomecanice, unde de oc (vezi i tabel 1).
Diferitele efecte termice ale razei laser nu se observ niciodat separat, ci ntotdeauna
concomitent ca, de exemplu, la secionare.
Cnd cade pe un esut omogen, raza laser ptrunde cu o putere descrescnd n profunzimea
esutului i este parial dispersat i absorbit. n mod corespunztor, n esut se formeaz un gradient
de temperatur. n zona unde temperatura depete aproximativ 300C, esutul este vaporizat; lng
acesta se afl o zon n care temperatura mai depete nc 150C i esutul se carbonizeaz, iar n
stratul urmtor esutul se coaguleaz. n zona extrem (cea mai ndeprtat), esutul este uor nclzit,
edemaiat, hiperemic, fr s fie provocate leziuni ireversibile. Ca urmare, n profunzimea i limea
esutului pot aprea toate efectele.
ntinderea diferitelor zone depinde foarte mult de adncimea de ptrundere a radiaiei i de
lungimea de und.
3. Efecte fotomecanice
Efectul mecanic rezult din vibraia mediului parcurs de radiaia laser i este generat de energia
eliberat mediului prin absorbia unui foton incident. Efectul mecanic s-ar traduce prin presiunile
exercitate la nivelul esuturilor. Sub presiune, un esut poate fi deformat reversibil sau ireversibil.
Leziunile ce pot apare sunt fie macroscopice (ruperea esuturilor moi, fracturarea esuturilor dure) fie
microscopice (leziuni celulare sau microfisuri la nivelul esuturilor dure).
Exist dou tipuri de interaciune fotomecanic:
1. prin unde de presiune tranzitorie ce pot fi generate prin urmtoarele mecanisme:
expansiune termoelastic brusc, prin nclzire rapid (laser pulsat);
reculul ablaiei, cnd o mas de esut este eliminat rapid prin ablaie, reculul trimite un
impuls de micare la nivelul esuturilor, iar acesta se va propaga ca o und de presiune;
expansiune brusc, secundar schimbrii unei faze, cum ar fi vaporizarea apei n esuturi
sau formarea de plasm;
2. starea de presiune semiconstant se obine secundar expansiunii termoelastice a esuturilor,
fiind cauzat de cldur. Termenul de stare semiconstant se explic prin faptul c expansiunea
termoelastic nu este o und de presiune trectoare, ci o distribuie static de presiune,
dependent de distribuia temperaturii.
39
4 Efecte neliniare
Folosirea formrii plasmei pentru a produce efecte clinice utile ntr-un esut biologic constituie
o deviere de la tehnicile anterioare de tratament cu laser. Formarea plasmei se bazeaz pe procese
neliniare asociate cu excitaia prin impulsuri scurte generatoare de unde de oc acustice.
Formarea plasmei este singura interacie laser-esut care nu se supune principiului fotobiologic
fundamental de reciprocitate, conform cruia un efect este independent de intervalul de timp n
decursul cruia sunt emii fotonii (fenomenul este dependent de putere). O dat cu apariia laserelor cu
puteri foarte mari, care pot s acioneze n impulsuri scurte, a devenit posibil producerea unor puteri
foarte ridicate (1010 W/cm2 pentru impulsuri n nanosecunde i 1012 W/cm2 pentru impulsuri n
picosecunde) n spoturi focale de 25-50 microni.. Cnd aceste lasere sunt focalizate pe un spot mic de
esut se produc fenomene neliniare, ducnd la formarea unei plasme care este un nor gazos bogat n
electroni liberi.
Aceast plasm a fost uneori denumit cea de-a patra stare a materiei, deoarece proprietile
sale sunt foarte diferite de cele ale solidelor, lichidelor sau gazelor.
Ca urmare a producerii brute a unui cmp electric de nalt tensiune (106-107 V/cm) n decurs
-9
de 10 -10-12 secunde se produce n spotul focalizat o und de oc acustic intens. Aceast und este
purttoarea unei energii cinetice potenial lezante i a fost utilizat n clinic pentru prima oar n
oftalmologie.
40
deoarece modific direcia i rezultatele fasciculului incident. Gradul de dispersie depinde n foarte
mare msur de lungimea de und a luminii i de compoziia esutului.
Dispersia n esuturile moi este deseori dominat de structuri sau neomogeniti care sunt cu
mare aproximaie de aceeai mrime cu lungimea de und. n esuturile conjunctive, fibrele de colagen
sunt structuri de dispersie deosebit de importante.
Astfel, un fascicul de radiaie ultraviolet colimat este, de obicei, difuzat prin dispersie mai
rapid dect lumina vizibil, care, la rndul ei, este mai rapid difuzat dect radiaia infraroie apropiat.
Acest fapt este important n practic din mai multe motive:
dispersia este n parte rspunztoare de ptrunderea diminuat a lungimilor de und scurte n
majoritatea esuturilor;
un fascicul laser ngust incident pe esut se lrgete considerabil n interiorul esutului;
capacitatea de formare a unui punct focal al radiaiei laser n interiorul esutului depinde n
principal de intensitatea i izotropia dispersiei.
41
lungimea de und
155
6018
10530
260 78
3-4
632 nm
280 84
3-4
543 nm
280 84
3-4
Smal
1053 nm
632 nm
543 nm
Dentin
1053 nm
Tabel nr. 2 - Proprietile optice ale dentinei i smalului (dup Fried i colab.)
n ceea ce privete dentina, pentru lungimi de und din vizibil (400-700 nm), coeficientul de
absorbie este independent de lungimea de und iar coeficientul de difuziune depinde de densitatea
canaliculilor dentinari (nu i de coninutul mineral). La 1053 nm, coeficienii de difuziune i de
absorbie ai dentinei sunt mai mari dect ai smalului, ceea ce duce la depozitarea energiei mai ales la
interfaa smal-dentin. Aceast depozitare a energiei poate cauza nclzirea suprafeei subiacente cu
vaporizarea ei, precum i crparea i necrozarea pulpei. n concluzie, lumina transmis i difuzat n
vizibil i infraroul apropiat poate penetra adnc n interiorul dintelui.
Pentru materialul cu coeficieni de absorbie foarte nali energia laser este absorbit foarte
aproape de suprafa, difuziunea luminii fiind neglijabil. Prin urmare, depozitarea energiei n esut
poate fi descris de coeficientul de absorbie i de reflectan. ntr-o band de absorbie puternic,
reflectana poate fi foarte nalt din cauza cresterii indicelui de refracie.
Hidroxiapatita din smal are benzi de absorbie puternice n regiunea infraroie, datorit
gruprilor fosfat, carbonat i hidroxil din structura sa.
42
IMAGISTICA CU ULTRASUNETE
Ecografia reprezint o metod de obinere a imaginii unui organ prin captarea i vizualizarea
undei ultrasonice reflectate (ecou) la suprafaa organului i a diferitelor structuri.
Imaginea ultrasonic reprezint proprietile mecanice ale esuturilor (parametri ca densitatea i
elasticitatea), proprieti puse n eviden de interaciunile dintre undele mecanice i esuturi,
interaciuni convertite n semnale electrice procesate i n cele din urm transformate ntr-o imagine.
n axul fasciculului dou obiecte apropiate ntre ele nu pot fi identificate separat n imagistica
cu ultrasunete dect dac sunt separate printr-o distan echivalent cu multiplul lungimii de und.
ntr-un ax perpendicular pe fascicul, capacitatea de a distinge dou obiecte nvecinate
(rezoluia) depinde de diametrul fasciculului. Cu ct acesta este mai ngust, cu att rezoluia este mai
mare. Diametrul fasciculului este condiionat de frecvena ultrasunetului, fiind mai redus n cazul unor
frecvene mai ridicate. Deasemeni, diametrul fasciculului ultrasonic este dependent i de diametrul
cristalului i de deprtarea fa de sond. Deoarece forma fasciculului ultrasonic este conic, cu
tendin la divergen, se poate obine o ngustare plasnd n faa cristalului o lentil acustic, care
corecteaz divergena.
Zonele n care imaginile ultrasonice sunt utile cuprind structurile cardiace, sistemul vascular,
ftul i uterul, ochiul, organele abdominale ca ficatul, rinichii, vezica biliar. Exist zone n care
ultrasunetele nu creeaz imagini de calitate: pungile de aer sunt reflectoare foarte bune pentru
ultrasunete, motiv pentru care ultrasunetele nu pot ptrunde n plmni i intestin; oasele atenueaz
mult fasciculul ultrasonic, ceea ce face dificil explorarea creierului la adult, cu ultrasunete.
n timp ce strbate esuturile, impulsul ultrasonic este reflectat, deviat, atenuat la fel ca orice
und. De exemplu, atunci cnd un impuls traverseaz interfaa muchi-snge aproximativ 0,1% din
energia acustic este reflectat. Acest ecou este folosit pentru a crea imaginea interfeei muchi-snge.
Restul impulsului se propag mai departe putnd pune n eviden structuri situate mai n adncime.
Un parametru important al ultrasunetelor dirijate sub form de fascicul este intensitatea
acustic, definit ca puterea acustic pe unitatea de suprafa.
Pe msur ce impulsul ultrasonic se propag n corp, intensitatea lui acustic scade proporional
cu distana de propagare. Atenuarea acustic crete de asemenea cu frecvena. Rezult de aici
compromisul fundamental n cazul imaginilor ultrasonice: pe msur ce frecvena crete pentru a obine
rezoluii mai bune, adncimea de explorare scade.
Obiectele mult mai mici dect lungimea de und provoac dispersia de tip Rayleigh. Aceast
dispersie difuz este proporional cu puterea a patra a frecvenei. De aceea imaginile obinute la
frecvene mai nalte au un aspect mai difuz. Dac un obiect este mult mai mare dect lungimea de und
atunci el se comport ca un reflector.
Sistemele de creare a unor imagini n interiorul corpului uman, cu ajutorul ultrasunetelor
formeaz imaginea pornind de la ecourile provenite de la structurile interne iradiate de fasciculul
ultrasonic. Imaginea este creat pornind de la dou ipoteze importante: ultrasunetele se propag liniar i
viteza de propagare n esuturi este, cu bun aproximaie, constant. De aceea, oasele plasate n calea
fasciculului ultrasonic fac practic imposibil obinerea unor imagini de calitate. Cauza nu este numai
reflexia foarte puternic ci i refracia nsemnat, precum i falsificarea distanelor datorit vitezei de
propagare mult diferit n os. La fel, straturile de esut adipos acioneaz ca lentile mecanice provocnd
devieri ale fasciculului ultrasonic.
nregistrarea semnalelor ecou poate fi realizat n condiii tehnice diferite, ducnd la
reprezentri grafice diferite, numite moduri ecografice.
43
Fiecare deflexiune reprezint un ecou provenit de la un esut biologic aflat pe direcia undei
ultrasonore. n principiu, fiecare ecou este apreciat prin amplitudinea vrfului de deflexiune pe care l
creeaz, msurat n decibeli. Poziia ecourilor n raport cu sonda este msurat n cm.
n fig. 1 axa orizontal corespunde distanei la care se afl fiecare esut fa de sonda
emitoare. Pe axa vertical este marcat amplitudinea fiecrui ecou.
Distana ce separ sonda de o structur reflectant se poate determina cu relaia:
D
1
ct
2
unde:
D este distana ntre emitor i mediul reflectant;
c este viteza undei ultrasonice n mediul respectiv;
t este timpul scurs de la emisia undei la recepia ecoului
44
Emisie
Circuit de
compensare
amplificare
Transductor
Receptie
Ecou
Coordonator
general
Generator
impulsuri
electrice
Generator
deflexie
orizontala
Generator de
marcare
Fig.2 - Schema bloc a aparaturii de tip Scan A
fiecare din poziiile lui va aprea o serie de puncte luminoase care reprezint zonele de interfa
ecogene. Dac se nregistreaz ecourile care aparin unei multitudini de poziii succesive, se obine o
imagine de seciune transversal a corpului uman format din elemente de intensitate luminoas
variabil de la alb la negru, trecnd printr-o succesiune de tonuri de gri (fig. 3)
Imaginea este observat chiar n timpul formrii i poate fi conservat temporar sau
fotografiat.
Fig.3 Neuroanatomia fetal - fetus de 11-12 sptmni. Se observ diviziunea emisferelor i plexul coroid
Din punct de vedere tehnic, obinerea unei seciuni ecotomografice presupune deplasarea
traductorului ntr-un singur plan. Acest lucru se poate realiza n mai multe moduri:
deplasarea automat liniar ce imprim sondei o micare pe un ax orizontal, cu ajutorul unui motor;
deplasarea manual prin contact direct.
Cel mai utilizat este procedeul de baleiaj manual prin contact. Sonda este deplasat manual de-a
lungul unei axe rectilinii alese dup necesitate, sonda putnd fi pendulat, cu schimbarea unghiului de
inciden. n acest scop, traductorul este montat la extremitatea unui bra ce funcioneaz ca un
pantograf. n acelai timp, acest bra ndeplinete i rolul de a converti poziia instantanee a sondei i
unghiul ei de nclinaie, n semnale electrice vectoriale, efectund i corecia de poziie pe ecran.
Schema bloc a aparaturii de tip Scan B este prezentat n fig. 4
Emisie
Circuit de
compensare
amplificare
Traductor
Receptie
Imagine
Coordonator
general
Generator
impulsuri
electrice
Generator
deflexie
verticala
Brat
scanning
46
Circuit de
compensare
amplificare
Traductor
Receptie
Imagine
Coordonator
general
Generator
impulsuri
electrice
Generator
deflexie
verticala
Generator
deflexie
baza timp
Fig.5 - Schema bloc a aparaturii pentru ecotomografia dinamic
n practica acestui mod de investigare folosind ultrasunetele, mna operatorului este nlocuit
cu un sistem de baleiaj automat, electronic sau mecanic, ce folosete grupuri de sonde legate n serie,
care formeaz capul ultrasonor. Baleiajul astfel realizat este mult mai rapid i este ciclic. Frecvena
baleiajului este suficient de mare pentru a crea o sumaie prin remanen retinian.
47
Endoscopia ultrasonic
Aceast tehnic presupune obinerea de imagini din interiorul cavitilor naturale (rect, vezic
urinar, vagin) cu ajutorul ultrasunetelor. Un transductor de construcie special este plasat la captul
unui dispozitiv endoscopic fcnd astfel posibil obinerea de imagini ultrasonografice ale pereilor
cavitii investigate precum i a organelor din vecintate.
Ecografia 3D
Permite obinerea imaginilor tridimensionale n dinamic, utiliznd un traductor 3D. Clasic
acesta este format dintr-un traductor convenional montat cu un motor, care realizeaz micri de
translaie sau rotaie a traductorului n jurul unei axe definind volumul tridimensional.
Figura 6 evideniaz, prin aceast tehnic, faciesul fetal.
ultrasunete care genereaz unde cu frecven de 3.5 MHz i primete un ecou cu frecven de 7 Mhz,
este posibil ca imaginea ecografic obinut n aceste condiii s fie dat numai de agentul de contrast,
fr artefactele determinate de structurile anatomice nconjurtoare.
Prin acest procedeu se pot evidenia vasele sanguine foarte mici, prin care circulaia sanguin se
realizeaz cu vitez foarte mic, imagine care nu poate fi obinut prin procedee clasice. Agenii de
contrast pot fi folosii i n ecografia n modul B, de exemplu pentru vizualizarea muchiului cardiac,
nlturnd artefactele determinate de micarea cordului n activitate. n acelai sens, tehnica ecoDoppler cu ageni de contrast este folosit pentru vizualizarea circulaiei sanguine n capilare.
Intensitatea folosit n ecografie este mic, de ordinul 10-2 W/cm2, intensitate la care efectele
nocive se consider neglijabile.
Dopplersonografia
Dac o surs de ultrasunete i receptorul se afl n micare relativ unul fa de cellalt,
frecvena oscilaiilor percepute de receptor depinde de viteza acestei micri.
n acest context se disting trei situaii:
1. Receptor fix i surs mobil
v
S
S1
0
Considerm 0 punctul n care se gsete receptorul i S poziia iniial a sursei. Sursa se mic
spre receptor cu viteza v.
2. Receptor mobil i surs fix
3. Receptor i surs mobili pe direcie comun
Explorarea sistemului arterial utiliznd efectul Doppler
Efectul Doppler este folosit pentru determinarea vitezei sngelui, prin detectarea undei
reflectate de hematii (fig.7 - metoda alb-negru).
tiina medical posed o metod deosebit de util pentru msurarea debitului sanguin prin
metode neinvazive (fr intervenii chirurgicale, substane de contrast sau substane radioactive).
Aceast metod bazat pe principiul Doppler se explic prin faptul c dac unda incident (acustic,
electromagnetic, n general pentru toate fenomenele ondulatorii) ntlnete un mediu (sngele, peretele
cordului etc) n micare, unda reflectat (ecoul) are o alt frecven dect unda incident. n consecin
se poate determina viteza de micare a mediului (sngelui) analiznd frecvena undei reflectate de pe
hematii (suprafaa de discontinuitate).
Aparatele moderne, debitmetre cu ultrasunete, msoar de fapt viteza de curgere, ns pot fi
etalonate astfel, nct semnalul de ieire s reprezinte debitul volumic. La o frecven a ultrasunetelor
de 3 - 15 MHz, debitul msurat difer de cel real doar cu 1%. Metoda este comod, nesngernd,
nedureroas.
49
Aparatura Doppler, graie diferitelor tipuri de echipamente, poate fi utilizat n patru tipuri de
aplicaii clinice, i anume:
- investigarea fluxului sangvin;
- msurarea presiunii sngelui;
- monitorizarea pericolului n timpul travaliului;
- detectarea potenialului emboliei gazose.
50
estimat la 0.5 mm la nivelul smalului dentar, a putut s evidenieze i straturi de smal mai subiri de
0.3 mm. Viteza sunetului n smalul dentar uman este de 6250m/s, iar n dentina uman de 3800 m/s.
Schema unui sistem ultrasonic puls-ecou este prezentat n fig. 9
n figur, amplitudinea din partea stng corespunde pulsului transmis, cea de-a doua
amplitudine corespunde suprafeei smalului, al treilea vrf corespunde jonciunii smal-dentin, iar
ultima amplitudine corespunde camerei pulpare.
Determinarea circulaiei sanguine n pulpa dentar
Efectul Doppler este utilizat pentru determinarea circulaiei sanguine n pulpa dentar n
vederea diagnosticului diferenial al pulpei vitale, pulpei necrozate ischemic i lipsa pulpei dentare,
evideniindu-se diferenele semnificative n circulaia sanguin la acest nivel, n strile cercetate.
De asemeni s-au putut evidenia diferenele semnificative n circulaia sanguin pulpar nainte
i dup administrarea anestezicelor locale. n dinii imaturi, revascularizarea pulpei dentare necrotice
este posibil i necesar.
Testele utilizate curent pentru evidenierea acestei revascularizri sunt puin sensibile, dnd de
multe ori rezultate eronate, oblignd astfel la decizii radicale fr suport real. Tehnica Doppler aplicat
n determinarea circulaiei sanguine la nivelul pulpei dentare este un test obiectiv i foarte sensibil
pentru evidenierea vitalitii pulpei dentare. Utilizarea sa elimin tratamentele radicale care nu sunt
imperios necesare.
Sinusurile maxilare
Afeciunile sinusurilor maxilare ce pot fi investigate ecografic sunt reprezentate de :
modificri produse de prezena corpilor strini
inflamaii acute sau cronice
traumatisme sau tumori
Aceste modificri au urmtoarele caracteristici:
reducerea pneumatizrii din cauza acumulrii de lichid sau esut sau din cauza existenei
unui corp strin sau a unei fermaiuni tumorale;
lrgirea moderat a spaiului plin cu aer din cauza atrofiei mucoasei sinusale sau a
deplasrii traumatice a unei pri din cavitate;
ntreruperea continuitii n interiorul sinusului produse de procese infiltrative sau
expansive ori de traumatisme.
51
Explorarea ultrasonic furnizeaz date n plus fa de cea radiografic, deosebit de utile pentru
stabilirea diagnosticului.
De remarcat este faptul c marginile distale ale sinusurilor maxilare pot fi evideniate doar dac
sunt pline cu material ecogenic. Imaginile ecotomografice pot fi msurate cu ajutorul unei scale,
obinndu-se astfel date precise despre profunzimea i grosimea tuturor structurilor din sinus.
Pentru explorarea ecografic ntramaxilar, conductibilitatea sinusului maxilar umplut cu aer
poate fi mbuntit printr-o irigare - test. n acest mod devine posibil i explorarea sinusurilor
parial umplute cu aer, completnd informaiile obinute prin examen radiologic.
Fig.10 a
Fig.10 b
52