CAPITOLUL 1

NOIUNI INTRODUCTIVE
1.1. DEFINIIA I OBIECTUL BIOCHIMIEI
n accepiunea general, biochimia este tiina modern care
studiaz materia vie i fenomenele specifice acesteia sub raportul
compoziiei, naturii, organizrii moleculare, asamblrii i corelaiilor
biomoleculelor componente, precum i al proceselor de degradare i
biosintez a acestor biomolecule prin care se genereaz i se consum
energia necesar vieii.
BIOCHIMIA
MATERIA VIE
(BIOMOLECULE COMPONENTE)
PROCESE DE
DEGRADARE I
BIOSINTEZ

COMPOZIIE
NATUR
ORGANIZARE
MOLECULAR

ASAMBLARE

CORELAII

Biochimia este tiina care se ocup cu studiul bazelor

moleculare ale vieii, adic investigheaz materia vie n unitatea ei
structural i funcional, unitate care rezid att din similitudinea
compoziiei chimice a sistemului de organizare biochimic, ct i din cea
a proceselor biochimice comune tuturor formelor de via.
9

Prin coninutul i evoluia sa, biochimia este o tiin complex,

cu caracter interdisciplinar, caracter ce reiese din impactul i
raporturilor sale cu alte tiine, precum chimia organic, chimia fizic,
biologia celular, fiziologia i care-i confer biochimiei noi coordonate.

1.2. CARACTERISTICILE BIOCHIMICE

ALE ORGANISMELOR VII
Comparativ cu materia nevie, organismele vii se caracterizeaz
printr-un ansamblu de principii i trsturi definitorii de organizare i
funcionare la nivelul moleculelor, cum ar fi:
- sunt sisteme deschise, adic se afl n permanent schimb de
materie, energie i informaie cu mediul ambiant i au drept
caracteristic definitorie metabolismul, concept care definete
esena material i dinamismul vieii;
- posed un grad nalt de organizare i complexitate, adic
sunt alctuite din diferite tipuri de molecule i macromolecule
cu structuri variate i funcii specifice;
- reprezint o stare calitativ superioar att sub aspectul
naturii, structurii i modului de asamblare a biomoleculelor
componente, dar mai ales sub aspectul interaciunilor dintre
coleciile de molecule specifice;
- au capacitatea unic de a extrage i de a transforma
energia din mediul ambiant, adaptnd-o i utiliznd-o pentru
edificarea propriilor structuri i pentru meninerea organizrii
structurale;
- au capacitatea de autoreplicare precis din generaie n
generaie, n forme identice ca mas, conformaie, structuri
interne i proprieti;
- pentru toate organismele vii, celula este unitatea morfologic
i funcional ce conine echipamentul de baz complet
pentru meninerea i continuitatea vieii.

10

1.3. COMPOZIIA CHIMIC

A ORGANISMULUI ANIMAL
Toate organismele vii au compoziia chimic elementar de baz
comun i reprezentat prin bioelemente i biomolecule.
1.3.1. BIOELEMENTE
n compoziia materiei vii intr n mod constant 27 de elemente
chimice (din cele 100 cunoscute), denumite bioelemente eseniale, care
se mpart n:
a) macroelemente sau bioelemente plastice (constitutive);
b) microelemente sau oligoelemente.
Macroelementele sunt nemetale (C, H, O, N, P, S, Cl) i metale
(Na, K, Ca, Mg), au o pondere de circa 99% din masa organismului i
intr n structura tuturor celulelor, esuturilor i lichidelor biologice.
Dintre macroelemente, atomul de carbon reprezint elementul
primordial n structura chimic a tuturor compuilor caracteristici materiei
vii i are urmtoarele proprieti eseniale:
- configuraie tetraedric ce i permite s formeze structuri sau
reele tridimensionale;
- are capacitatea de a forma legturi covalente stabile de tip
CC sau legturi covalente ntre atomi de carbon i atomi de
O, N, H, S, rezultnd o varietate de molecule.
Microelementele sau oligoelementele, dei reprezint numai 1%
din totalul bioelementelor, sunt componente structurale ale unor biomolecule importante (enzime, vitamine, hormoni, pigmeni). Din aceast
categorie fac parte: I, F, B, Br, Mn, Fe, Co, Cu, Zn, Sn, Si, Mo, Se, As.
Carena acestora determin o serie de dereglri metabolice.
1.3.2. BIOMOLECULE
Biomoleculele sunt un ansamblu de molecule de diverse tipuri
integrate n structura morfologic a materiei vii i care condiioneaz
organizarea structural i funcional a organismului animal. Fiecare clas
11

de biomolecule ndeplinete n celul roluri bine determinate, specifice i

ele sunt rezultatul seleciei pe scara evoluiei, fiind cele mai potrivite
pentru funcia lor biologic.
n funcie de natura, structura, dimensiunile i rolurile pe care le
ndeplinesc, biomoleculele se clasific n dou categorii:
- biomolecule anorganice;
- biomolecule organice.
1.3.2.1. Biomolecule anorganice
Din aceste biomolecule fac parte: apa i srurile minerale.
I. Apa n organismul animal
Apa este constituentul primordial, indispensabil vieii, deoarece
constituie mediul celular lichid n care se desfoar toate reaciile
biochimice specifice materiei vii. Ea este distribuit diferit n esuturi i
lichide biologice, cum ar fi: plasm sanguin, limf i suc gastric 95%,
muchi i piele 80%, ficat i plmni 75%, creier 70%. Activitatea
metabolic normal la nivel celular necesit minim 65% ap.
n organism apa se gsete sub dou forme:
- apa liber, care se gsete n compartimentele extracelulare, respectiv spaii interstiiale i lichide circulante intravascular (snge i limf);
- apa legat (de constituie), care se gsete n compartimentele intracelulare i particip la alctuirea structurii celulare i
a mediului celular.
Apa are proprieti fizico-chimice unice care decurg din asimetria
electric i din caracterul bipolar al moleculelor, caracteristici ce au
drept urmare asocierea acestora prin legturi de hidrogen:
H

:O

H ... :O

H ... :O

H ...
12

Datorit acestor proprieti apa ndeplinete n organism urmtoarele roluri:

este unul dintre cei mai buni solveni biologici pentru o
multitudine de substane (mai puin pentru compui nepolari);
rol structural, deoarece particip la constituia ansamblului
celular, la organizarea morfologic a celulei i la formarea
coloizilor celulari;
disociaz i genereaz ioni H3O+ i HO, necesari n procesele de tamponare, n meninerea echilibrului acido-bazic i n
biocataliz;
particip direct n reacii de hidratare, hidroliz i redox;
rol transportor, deoarece este mediul de vehiculare a diferitelor substane n organism;
rol termoreglator, prin procesele respiraie i transpiraie,
meninnd temperatura organismului n limite constante.
Proveniena apei este n general exogen, doar o mic parte
provenind din reaciile biochimice (origine endogen).
II. Srurile minerale
Srurile minerale se gsesc n cantiti variabile, dizolvate sau
nedizolvate, n toate celulele, esuturile i lichidele biologice din organismul animal, sub form de cloruri, ioduri, carbonai, fosfai, sulfai,
urai etc. Ele ndeplinesc n organism roluri foarte variate, cum ar fi:
structural (intr n structura esutului osos i a dinilor - Ca, P, Mg, F),
efectori enzimatici (activatori: Cl sau inhibitori: Hg2+, Pb2+), reglator
(componente structurale ale unor hormoni i vitamine - Co, P, I),
stimuleaz funcia de reproducere (Se) i digestia (Cl), intervin n
energetica celular ( PO 34 ) i n meninerea pH-ului n limite
constante (Na, K, Mg, Ca).
n celul, cationii i anionii se menin ntr-un echilibru dinamic, n
funcie de activitatea fiziologic.

13

1.3.2.2. Biomolecule organice

Biomoleculele organice conin n structura lor atomi de C, H, O i
eventual N, P, S, prezint o diversitate de structuri i ndeplinesc o
multitudine de roluri n organism.
Principalele clase de biomolecule organice specifice tuturor
organismelor vii sunt:
glucide
lipide
protide
acizi nucleici
enzime
vitamine
hormoni
compui macroergici
compui organici intermediari.
Aceste biomolecule ndeplinesc n cadrul celulei diferite roluri i
anume:
structural - intr n structura celulei, membranelor i
formaiunilor intracelulare, determinnd prin ansamblarea lor edificiul
molecular al celulei (glucide, lipide, protide);
biocatalitic - particip la desfurarea coordonat i la
reglarea tuturor reaciilor chimice necesare activitii celulare (enzime);
informaional - stocheaz, transmit i exprim informaia
ereditar (acizii nucleici);
energetic - servesc drept combustibil celular i, n urma
proceselor proprii de degradare, elibereaz energia necesar funciilor
vitale ale celulei, energie nglobat i stocat n compui macroergici
(ATP,GTP);
reglator - moduleaz activitile biochimice ale celulei, ca
reglatori ai diferitelor procese (vitamine, hormoni).
Ca dimensiuni, biomoleculele acoper un domeniu extrem de larg,
iar forma i caracteristicile lor sunt extrem de importante pentru
participarea lor la edificarea componentelor structurale ale celulei,
precum i pentru specificitatea interaciunilor lor biochimice. n tabelul
1.1 este redat distribuia cantitativ a principalelor clase de biomolecule
organice n diferite esuturi.
14

Tabelul 1.1
Distribuia cantitativ (valori procentuale medii) a principalelor clase de
biomolecule organice n diferite esuturi
esut
Muchi
Ficat
Creier
Piele
Oase
Snge

Protide (%)

Lipide (%)

Glucide (%)

22
22
10
25
19
18

5
3
14
7
prezente
1

0,6
2
0,1
prezente
prezente
0,1

Dei materia vie prezint grade diferite de complexitate structural

i funcional, exist totui o schem unic de organizare biochimic i
biologic. Ca rezultat al procesului evolutiv, aceast schem reflect
creterea gradului de complexitate organizatoric n urmtoarea ierarhie:
atomi molecule simple macromolecule complexe
supramoleculare celule indivizi populaii
specii ecosisteme.
Formarea biomoleculelor organice este un proces unic care, n
prima etap, pornete de la precursori chimici anorganici (molecule

simple cu mase moleculare mici, ca: CO 2, H2O, N2, NO 3 , NH3) ce sunt

convertii n metabolii intermediari (compui organici cu mas molecular mic: 50 150 Da, care apar n cursul proceselor metabolice).
n a doua etap, metaboliii sunt transformai n molecule simple
fundamentale (uniti structurale cu mas molecular cuprins ntre 100
350 Da, ca: oze, acizi grai, glicerol, aminoacizi, nucleotide).
n etapa a treia, prin condensarea unui numr mare de molecule
simple rezult macromoleculele (cu mase moleculare mari de 103 109
Da, cum ar fi poliglucide, lipide, proteine, acizi nucleici etc.).
Urmtoarea treapt de organizare structural sunt sistemele
supramoleculare (ca rezultat al asocierii macromoleculelor prin legturi
chimice slabe de tipul celor de hidrogen, legturi ionice, prin fore Van

15

der Waals sau interaciuni hidrofobe). Se formeaz astfel ribozomii, complexele multienzimatice, lipoproteidele.
Ultimul nivel de organizare l reprezint asamblarea acestor
sisteme supramoleculare n formaiuni intracelulare (organite celulare
ca: nucleu, mitocondrii, reticul endoplasmatic, lizozomi). Acest nivel
marcheaz formarea celulei, cea mai mic entitate care manifest
atributele strii de viu.
Schematic, procesul unic al organizrii moleculare care ilustreaz
trecerea de la forma chimic la forma biologic de micare a materiei este
prezentat n figura 1.1.
PRECURSORI
CO , CHIMICI
H O, NH ,ANORGANICI:
,N
2

M=18-64 Da

METABOLII INTERMEDIARI:
ACID PIRUVIC; ACID CITRIC, GLICERALDEHID-3 FOSFAT etc.
M=50-150 Da

MOLECULE SIMPLE FUNDAMENTALE:

OZE, ACIZI GRAI, GLICEROL, AMINOACIZI, MONONUCLEOTIDE
M=100-350 Da

MACROMOLECULE:
POLIGLUCIDE, LIPIDE, PROTIDE, ACIZI NUCLEICI
M=103-109 Da

SISTEME SUPRAMOLECULARE:
RIBOZOMI, COMPLEXE MULTIENZIMATICE
M=106-109 Da

FORMAIUNI INTRACELULARE:
NUCLEU, MITOCONDRII, LIZOZOMI, RETICUL ENDOPLASMATIC

CELULA
16

Figura 1.1 - Schema organizrii moleculare n celul

1.3.2.3. Celula
Celula constituie unitatea de baz structural, funcional i
genetic a tuturor organismelor vii.
Sub aspect biochimic, celula reprezint o constelaie de macromolecule, molecule mici i ioni care se asambleaz dup un program
genetic i care se gsesc n raporturi biochimice de strict condiionare i interaciune reciproc.
Organizarea i funcionarea acestor componente biochimice ale
celulei este asociat cu particularitile infrastructurii celulare i aceast
corelaie legic ntre topografia i topochimia celulei determin proprietile sale fundamentale i anume:
autoansamblarea;
autoreglarea;
autoreproducerea;
autointegrarea.
Caracterul esenial pe care se bazeaz diferenierea celulelor l
reprezint natura mediului intracelular sau nivelul de organizare
intracelular. Din acest punct de vedere celulele se clasific n dou tipuri
principale: procariote i eucariote.
Celulele procariote sunt considerate ca fiind primul tip de
organism viu i care au organizarea intern cea mai simpl (tipul reprezentativ l constituie bacteriile i algele).
Celulele eucariote reprezint un stadiu avansat n evoluia celulei
vii i se caracterizeaz printr-un nalt grad de organizare structural
intern specific (existena unor particule subcelulare distincte numite
organite celulare, a unui sistem de membrane interne care delimiteaz
organitele i compartimenteaz spaiul intracelular, a unui aparat genetic
localizat n nucleu, delimitat de restul celulei, procese respiratorii localizate n mitocondrii etc.)
n grupul celulelor eucariote se ncadreaz i celulele de origine
animal i de aceea considerm necesar pentru lucrarea de fa s facem o
prezentare general a topografiei celulei eucariote animale, preciznd
totodat i funciile majore ale fiecrui compartiment subcelular, dup
cum urmeaz:
a) membrana plasmatic, care formeaz conturul celulei i
delimiteaz mediul intern de cel extern al celulei. Este de natur
17

lipoproteic i regleaz transportul selectiv de substane intra- i extracelular, asigur homeostazia metabolic a celulei i meninerea n limite
compatibile cu activitatea celular a presiunii osmotice, a concentraiei
diferitelor componente i contribuie totodat la coordonarea intra- i
intercelular (receptori membranari) a proceselor biochimice;
b) citoplasma (citosol) este masa celular solubil ce nconjoar
nucleul, constituit din dou componente: componenta nestructurat
(citoplasma fundamental) i componenta structurat (organitele celulare). Este constituit dintr-o mare varietate de macromolecule, molecule,
ioni i asigur traficul n cadrul celulei a produilor de sintez i de
degradare biochimic, stabilind interaciuni biochimice ntre diferitele
compartimente i formaiuni intracelulare;
c) nucleul este cea mai mare i mai dens formaiune subcelular delimitat de o membran dubl cu numeroi pori nucleari. n spaiul
interior al nucleului (nucleoplasma) se afl inclus nucleolul i granulele
de cromatin ce reprezint sediul informaiei genetice pstrat n ADN,
transmis celulei prin procesul secvenei ANDARNprotein, replicat
pentru asigurarea perpeturii celulei prin procesul de biosintez a ADN;
d) reticulul endoplasmatic reprezint o reea de canalicule i
vezicule aplatizate, legate de membrana plasmatic, ce traverseaz celula.
Exist dou tipuri de reticul endoplasmatic: neted i rugos (asociat cu
ribozomii). Ribozomii sunt complexe nucleoproteice (alctuite din 65%
acizi ribonucleici i 35% proteine) i reprezint sediul biosintezei
proteinelor. Reticulul endoplasmatic particip la procesul de biosintez a
proteinelor (prin intermediul complexului macromolecular numit polizom), ca i la transportul proteinelor i a altor substane prin celul,
precum i la procese de detoxifiere celular;
e) aparatul Golgi (dictozomii) reprezint o reea de tubuli sau
vezicule aplatizate, limitate la regiuni restrnse din citoplasm i localizate de obicei lng nucleu. Funciile atribuite aparatului Golgi se refer
la: acceptarea proteinelor biosintetizate la nivelul ribozomilor, concentrarea acestora i mpachetarea lor n granule dense, ce sunt ulterior
secretate n lichidul extracelular, colectarea i asamblarea proteinelor
necesare pentru biosinteza membranei lizozomilor, reprezint totodat
sediul biosintezei heteropoliglucidelor;
f) mitocondriile sunt particule infracelulare a cror mrime,
form i numr variaz de la o celul la alta, constituite dintr-o membran dubl (una extern i alta intern), care delimiteaz un spaiu
intermembranar, denumit spaiu matriceal. Din punct de vedere biochimic mitocondria este sediul metabolismului celular aerob (care include
18

cele trei procese biochimice fundamentale: ciclul Krebs, -oxidarea

acizilor grai i respiraia celular cuplat cu fosforilarea oxidativ),
fiind considerat adevrat central energetic a celulei, reprezint sediul
biosintezei ureei i hemului la animale i are aparat genetic propriu
(AND mitocondrial i ribozomi proprii), fiind capabil s transcrie programul genetic (ADN-ARN);
g) lizozomii sunt organite de form neregulat delimitate de o
membran neted care le individualizeaz n spaiul citoplasmatic i
servesc la transportul proteinelor i la degradarea intracelular a
substanelor captate n celul prin fagocitoz (bacterii) sau pinocitoz
(proteine, glucide, lipide i acizi nucleici);
h) incluziunile citoplasmatice din care fac parte peroxizomii
(particule citoplasmatice cu rol oxidativ, care conin oxidaze productoare de H2O2 i catalaza care descompune H2O2) i constitueni
facultativi (sub form de granule, picturi, cristale sau vacuole care sunt
rezultatul activitii metabolice a celulei: granule de protein, de melanin, leucocite granulare, picturi de lipide etc.);
i) citoscheletul (microtubuli i microfilamente) reprezint un
sistem de fibre pe care l au toate celulele, cu compoziie chimic
special, care menine structura celulei i permite n acelai timp
modificarea formei sau chiar micarea moleculelor celulei motoare
(miozina, kinezina etc.)
Organizarea ultrastructural a celulei eucariote este redat n
figura 1.2.

19

Figura 1.2 - Ultrastructura celulei eucariote

20

CAPITOLUL 2
GLUCIDE
2.1. CONSIDERAII GENERALE
Glucidele (zaharurile) sunt categoria de biomolecule prezente n
absolut toate tipurile de celule i organisme.
n general sunt compui ternari, fiind alctuite din carbon,
hidrogen i oxigen, i au formula general empiric (CH2O)m, ceea ce le-a
atras denumirea improprie de hidrai de carbon, deoarece exist i
excepii (de exemplu, deoxiriboza).
Glucidele de origine vegetal sunt sintetizate de ctre plantele
verzi direct din dioxid de carbon i ap sub aciunea luminii, n procesul
de fotosintez i constituie componentele de baz ale hranei omului i
animalelor, respectiv importante surse de energie.
Glucidele existente n organismul animal se gsesc n cantiti
mici (3% din masa corporal), sunt de natur exogen i au urmtoarele
funcii:
energetic, deoarece prin degradarea lor furnizeaz 50 70% din energia total care se produce n organismul animal;
structural, deoarece intr n constituia substanei fundamentale a esutului conjunctiv sub form de gliconjugate cu proteinele
(proteoglicanii), dar i n structura unor biomolecule de importan
major: coenzime, glicolipide, acizi nucleici;
surse de atomi de carbon, necesari biosintezei proteinelor,
lipidelor, acizilor nucleici.

21

2.2. CLASIFICARE
Glucidele pot fi clasificate dup mai multe criterii, astfel:
a) dup structura lor chimic pot fi: polihidroxialdehide, polihidroxicetone sau produi de condensare ai acestora;
b) dup gradul de complexitate structural se mpart n:
oze sau glucide simple;
glucide complexe sau ozide.
Ozele sunt glucidele care prin hidroliz nu mai pot fi scindate n
molecule cu proprieti de glucide.
Glucidele complexe sunt moleculele rezultate prin condensarea
unui numr variabil de oze, respectiv 2 - 10 oze identice sau diferite i se
numesc oligoglucide, sute sau chiar mii de oze i se numesc poliglucide.
Din categoria glucidelor complexe fac parte deasemenea proteoglicanii,
care sunt heteroglucide n sensul c alturi de componenta glucidic
conin n structura lor i o component neglucidic numit aglicon.
c) dup rolul pe care-l ndeplinesc n organismul viu sunt
glucide de rezerv (de depozit) i glucide de constituie.

2.3. OZE
Ozele sunt glucidele cele mai simple care constituie unitile
structurale ale glucidelor complexe.
2.3.1. STRUCTURA OZELOR

22

Ca structur ozele sunt polihidroxialdehide care conin n mole-

cul o grupare funcional aldehid

C O
I
H

i se mai numesc aldoze sau

polihidroxicetone, care conin n molecul o grupare ceton ( C O ) i

se mai numesc cetoze. Pe lng gruparea carbonil, toi cei-lali atomi de
carbon din structura unei oze au legat cte o grupare hidro-xil ( HO ).
Deoarece conin numr variabil de atomi de carbon, ozele pot fi: trioze
(C3), tetroze (C4), pentoze (C5), hexoze (C6), heptoze (C7).
Ozele pot prezenta o structur aciclic (linear) i una ciclic.
Structura linear este acea structur a ozelor care presupune c
toi atomii din molecul se gsesc n acelai plan. Prin convenie s-a
numerotat cu cifra 1 atomul de carbon din gruparea aldehid i cu cifra 2
cel din gruparea ceton.
Structura ciclic este rezultatul unei reacii de adiie intramolecular a atomului de hidrogen de la gruparea OH a penultimului sau
ultimului atom de carbon la dubla legtur carbonilic, reacie urmat de
ciclizare (pentoze i hexoze). n urma acestei reacii, n molecula ozei
respective se creeaz un ciclu de tip furan (4 atomi de C i unul de O), iar
structura se numete furanozic sau un ciclu de tip piran (5 atomi de C i
unul de O) i structura este piranozic.

n acelai timp apare un hidroxil nou la atomul de carbon carbonilic, numit hidroxil semiacetalic (la aldoze) sau semicetalic (la cetoze).
Acest hidroxil semiacetalic sau semicetalic poate avea orientare spaial
diferit fa de planul ciclului creat, orientare sau . Aceti doi noi
23

izomeri poart numele de anomeri, iar transformarea unuia n cellalt,

mutarotaie. Astfel, glucoza prezint urmtoarele structuri posibile:

Structurile liniare i ciclice ale celor mai importante oze din celula
vie:
Trioze:

Pentoze:

24

Hexoze:

25

26

2.3.2. PROPRIETI FIZICE I CHIMICE ALE OZELOR

2.3.2.1. Proprieti fizice
n general, ozele sunt substane solide, cristalizate, de culoare
alb, cu gust dulce, uor solubile n ap i insolubile n solveni organici
nepolari (eter, cloroform) .
Au n structura lor cel puin un atom de carbon asimetric
(adic un atom de carbon cu cele patru valene satisfcute de atomi sau
radicali diferii, notat C*), de aceea ozele sunt considerate molecule
chirale (asimetrice). Moleculele chirale stabilesc relaia de nesuperpozabilitate cu imaginea lor n oglind i se mai numesc enantiomere.
Datorit asimetriei moleculare, ozele sunt substane optic active,
adic au proprietatea de a roti planul luminii polarizate, atunci cnd sunt
strbtute de aceasta i deci de a se prezenta sub forma a dou tipuri de
izomeri optici: dextrogiri - sunt enantiomerii care rotesc planul luminii
polarizate spre dreapta i se noteaz cu D sau (+) i levogiri, care rotesc
planul luminii polarizate spre stnga i se noteaz cu L sau ().
De exemplu, aldehida gliceric se poate prezenta sub forma urmtoarei perechi de enantiomeri:

Amestecul echimolecular de izomeri optici levogiri i dextrogiri

se numete racemic i este optic inactiv. Racemicul poate fi ns dedublat
n cei doi antipozi optici (+) i ().
Ozele care difer prin configuraia unui singur atom de carbon asimetric se numesc oze epimere. Spre exemplu, glucoza, fructoza i manoza
sunt epimere:

27

n cazul n care ntr-o molecul exist mai muli atomi de carbon

asimetrici, numrul izomerilor optici se calculeaz dup formula:
N=2n
unde n = numrul atomilor de C*.
2.3.2.2. Proprieti chimice
Fiind compui cu funciune mixt, carbonil i hidroxil, ozele
prezint proprieti chimice specifice acestor grupri. Dintre acestea voi
meniona numai reacia de reducere, de oxidare, de eterificare i
esterificare datorit importanei biochimice att a reaciilor n sine, ct i
a produilor care se formeaz.
I. Reacia de reducere: ozele pot fi reduse la gruparea carbonil,
transformndu-se n polialcooli (alditioli). Astfel glucoza se reduce la
sorbitol, manoza la manitol, iar aldehida gliceric la glicerol.

28

II. Reacia de oxidare a ozelor are loc n condiii diferite de

reacie i n funcie de acestea, respectiv de gruparea funcional care se
oxideaz, rezult acizi carboxilici onici, zaharici i uronici.

Posibilitatea de oxidare a ozelor demonstreaz totodat caracterul

lor reductor, datorat prezenei n molecul a gruprii aldehid (respectiv
hidroxilului glicozidic).
Ele pot reduce uor ionii de Cu2+ n mediu alcalin (reactivul
Fehling) sau ionii de Ag+ n mediu alcalin (reactivul Tollens), cu formarea
oxidului cupros Cu2O, precipitat rou-crmiziu, respectiv a argintului
metalic.
29

III. Reacia de eterificare este reacia de eliminare de ap ntre

hidroxilul glicozidic al unei oze i gruparea hidroxil a unui alcool cu
formarea unei legturi de tip eter, numit legtur glicozidic. Rezult
glicozizi sau eteri.

IV. Reacia de esterificare: n celula vie ozele sunt esterificate

cu acid fosforic la gruparea OH de alcool primar sau la hidroxilul
semiacetalic. Se obin esterii fosforici, adic forma activ a ozelor,
bogat energetic, sub care ele particip n toate procesele metabolice. Cei
mai importani esteri fosforici ai ozelor implicai n procesele metabolice
de biosintez i degradare sunt:
esteri ai triozelor:

esteri ai pentozelor:

30

 esteri ai hexozelor:

Alturi de esterii fosforici care sunt considerai derivai ai ozelor

rezultai n urma reaciei de esterificare, exist i derivai aminai ai
ozelor, respectiv aminoglucidele. Acetia conin o grupare amin la
atomul de carbon C2, grupare ce poate fi n unele cazuri acetilat sau
sulfonat. Cele mai importante aminoglucide sunt: glucozamina, galactozamina i acidul neuraminic.
2.3.3. EXEMPLE DE OZE
Ozele cu importan biochimic n organism sunt hexozele: glucoza, galactoza, fructoza, manoza.
Glucoza:
este principala oz din organismul animal;
are rol energetic important, deoarece prin degradarea sa (glicoliz) genereaz energie care este stocat sub form de ATP (compus
macroergic);
este distribuit n toate celulele i lichidele organismului animal
(cu excepia urinei);
concentraia glucozei din snge se afl n limite constante (80 120 mg/100 ml), se numete glicemie i este asigurat prin aciunea
antagonist a celor doi hormoni pancreatici: insulina (rol hipoglicemiant)
i glucagonul (rol hiperglicemiant). Creterea coninutului de glucoz din
snge determin diabetul zaharat.
Galactoza:
dei n cantitate mai mic, are rol foarte important pentru
organism, deoarece, alturi de glucoz, intr n structura lactozei, principal surs energetic pentru sugari;
31

 particip la structura lipidelor complexe (galactocerebrozide)

ntlnite n creier i esutul nervos sau la structura glicoproteidelor.
Fructoza:
reprezint 30 - 60% din aportul glucidic la mamifere;
se gsete liber n miere, fructe i melas, iar alturi de
glucoz intr n structura zaharozei.
Manoza:
intr n structura unor glicoproteide i glicolipide din organismul animal, precum i a unor poliglucide vegetale (manani).

2.4. OLIGOGLUCIDE
Oligoglucidele sunt biomolecule formate dintr-un numr restrns
de oze (2 - 8), cele mai importante pentru organismul animal fiind
diglucidele.
Diglucidele sunt cei mai simpli compui glicozidici rezultai prin
condensarea a dou molecule de oze identice sau diferite. n structura lor
apare o legtur glicozidic de tip eter, format fie prin condensarea
hidroxilului semiacetalic al unei oze cu un hidroxil alcoolic al altei oze
(diglucide reductoare), fie prin condensarea hidroxilului semiacetalic al
unei oze cu hidroxilul semiacetalic al celeilalte oze (diglucide nereductoare).
n figura 2.1 sunt redate exemple de diglucide reductoare i rolul
lor biochimic, iar n figura 2.2 sunt redate exemple de diglucide nereductoare i rolul lor biochimic.

2.5. POLIGLUCIDE
Poliglucidele sunt macromolecule formate prin condensarea
unui numr mare de oze identice (homoglicani). Din aceast categorie fac
parte: amidonul, glicogenul i celuloza.
Poliglucidele conin n structura lor uniti diglucide repetitive de acelai fel:
- n(maltoz) n cazul amidonului i glicogenului;
- n(celobioz) n cazul celulozei.
32

 Pot avea structur liniar (celuloza) sau ramificat (amidon,

glicogen).
DIGLUCIDE REDUCTOARE
(au proprieti reductoare
datorit OH glicozidic liber)

MALTOZA:

este format din dou molecule de -glucoz

legate C1 - C4;
se gsete n seminele germinate de cereale,
ndeosebi n orzul ncolit (mal);
este unitatea diglucidic ce intr n structura
amidonului;
este scindat hidrolitic de enzima maltaz n
ozele componente.

CELOBIOZA:

rezult

prin condensarea a dou

molecule de -glucoz, C1 - C4;
este unitatea diglucidic structural a
celulozei;
este scindat de enzima celobiaz.

LACTOZA:

este

IZOMALTOZA:

este

format din dou molecule de glucoz legate C1 - C6;

este
constituentul
structural
al

33

format din -galactoz i glucoz condensate C1 - C4;

este diglucidul principal din lapte
sintetizat de glanda mamar;
este scindat de enzima lactaz din

amilopectinei i glicogenului.

pancreas n ozele componente.

Figura 2.1
DIGLUCIDE NEREDUCTOARE
(nu posed nici o grupare hidroxil glicozidic
liber i nu au caracter reductor)

TREHALOZA:

ZAHAROZA:

format din dou

este format prin condensarea -glucozei cu - este
glucoz legate C - C ;
fructoza i apariia legturii C1 - C2;
se gsete n cantiti importante n fructe,
sfecla de zahr, miere;

molecule de -

este diglucidul specific pentru alge i

ciuperci.

sub

aciunea acizilor diluai sau a enzimei

zaharaz este scindat hidrolitic i rezult un
amestec echimolecular de -glucoz i fructoz, numit zahr invertit.

Figura 2.2

Constituie substane energetice de rezerv pentru organism.

Sunt scindate hidrolitic pn la unitile structurale de baz
(oze) de ctre enzime numite glicozidaze (hidrolaze).
Glicogenul este produs de condensare al -glucozei, constituind
rezerva de glucoz a organismului animal. Localizarea lui este predominant hepatic (glicogen hepatic), dar n anumite cantiti se gsete i n
muchi (glicogen muscular).
34

Glicogenul este alctuit din uniti repetitive de maltoz (-glucoz legat C1 - C4), iar dup 6 - 7 resturi de glucoz la periferia
moleculei i 3 - 4 resturi de glucoz n partea central a moleculei se
stabilesc legturi glicozidice C1 - C6, determinnd o ramificare puternic a macromoleculei de glicogen.
Structura schematic a moleculei de glicogen este:

n funcie de necesitile organismului, celula hepatic stocheaz

glucoza sub form de glicogen sau o elibereaz pentru a reface glicemia
(concentraia de glucoz din snge).
Glicogenogeneza i glicogenoliza contribuie la meninerea glicemiei i sunt procese supuse unui complex mecanism de reglaj hormonal.
n stare pur se prezint sub forma unei pulberi albe, solubil n
ap, cu care formeaz soluii coloidale opalescente. Cu iodul formeaz
coloraie rou-brun.
Amidonul este poliglucidul de rezerv specific unor plante, constituind n acelai timp una dintre sursele de glucoz importante pentru
organismul animal. La plante este stocat n semine sau tuberculi, fiind
mobilizat hidrolitic, pe cale enzimatic, n cursul germinrii sau nmuguririi. Ca i glicogenul, este un produs de policondensare al glucozei.
Este alctuit din dou componente:

35

- amiloza, constituit numai din uniti de maltoz, cu o

structur neramificat; reprezint 30% din macromolecul; este solubil
n ap, iar cu iodul se coloreaz n albastru nchis;
- amilopectina, care reprezint 70%, are o structur ramificat,
coninnd i uniti de izomaltoz (ramificarea intervine dup 25 - 30
resturi de glucoz); formeaz la cald soluii apoase, vscoase, care prin
rcire se transform n gel; cu iodul se coloreaz n albastru-violet.
Hidroliza enzimatic a amidonului n organism sau in vitro
decurge treptat, cu fragmentarea moleculei i formarea unor compui
numii dextrine, apoi maltoz i n final -glucoz:
Amidon Dextrine Maltoz -glucoz.
Celuloza este un produs de policondensare al -glucozei, avnd ca
unitate repetitiv celobioza. Celuloza este compusul organic cel mai
abundent de pe pmnt. Este foarte rezistent la hidroliz i intr n
structura elementelor de rezisten din peretele celular vegetal. Celuloza
poate fi degradat de un numr redus de microorganisme i protozoare
capabile s produc un sistem enzimatic complex, celulozolitic, n care
mai multe enzime acioneaz sinergic, hidroliznd macromolecula pn la
glucoz. Prezena acestor microorganisme n rumenul i colonul animalelor ierbivore le face capabile s utilizeze celuloza ca surs major de
hran.

2.6. PROTEOGLICANII
Proteoglicanii (heteroglicanii) sunt produi de policondensare a
mai multor tipuri de uniti structurale i conin 95% lanuri glucidice i
doar 5% component proteic. Sunt compui polianionici, cu mai multe
fragmente poliglucidice grefate pe un miez proteic. Dei pn n prezent
sunt recunoscute ase clase de glucozaminoglicani, anumite proprieti
sunt comune tuturor substanelor cu compoziia menionat. Catenele
heteropoliglucidice neramificate sunt constituite din uniti diglucidice
repetitive, n care una din componente este o hexozamin, iar cealalt un
acid uronic (o hexoz oxidat la C6, care devine COOH). O alt caracteristic o constituie gruprile sulfat, ataate fie prin legturi de tip
amid la gruparea NH2 a ozelor aminate, fie prin legturi ester la grupri
36

OH. Gruprile carboxil de la acizii uronici, ca i gruprile sulfat contribuie la formarea sarcinii polianionice ridicate a proteoglicanilor. Att
sarcina electric, ct i structura macromolecular sunt utile n exercitarea
rolului biologic de lubrifiani i elemente de rezisten n esutul conjunctiv. Proteoglicanii formeaz soluii foarte vscoase i elastice, absorbind mari cantiti de ap. Aceasta face ca ei s acioneze att ca elemente
de susinere a celulelor, ct i s contribuie la meninerea echilibrului apei
i srurilor n organism.
Acidul hialuronic se deosebete de ceilali proteoglicani prin
faptul c nu conine grupri sulfat i nu se gsete legat de fragmente
proteice. Spre deosebire de ceilali proteoglicani, el nu este specific
celulei animale, fiind produs i de unele bacterii. Unitatea repetitiv din
acidul hialuronic este alctuit din acid -glucuronic C1-N-acetilglucozamina C3:

Acidul hialuronic se gsete n lichidul sinovial, corpul vitros al

ochiului, cordonul ombilical, n substana fundamental a esutului conjunctiv i n cartilaje.
Condroitin sulfatul, din tendoanele cartilaginoase, ligamente,
peretele aortei, creier, rinichi, plmni, are n unitatea repetitiv acid
-glucuronic C1-N-acetilglucozamina-4sulfat C3:

37

Heparina, a crei unitate repetitiv este prezentat mai jos, are rol
de anticoagulant i hipolipemiant:

Dermatan sulfatul i keratan sulfatul se gsesc n piele, pereii

vaselor de snge, valvele cardiace. Prezint asemnri structurale cu condroitin sulfatul. Dermatan sulfatul prezint acid iduronic n locul acidului
glucuronic:

38

CAPITOLUL 3
LIPIDE
3.1. CONSIDERAII GENERALE
Lipidele constituie acea clas de compui organici naturali, extrem
de variat din punct de vedere structural, cu caracter hidrofob, apolar i
respectiv proprietatea de a fi insolubile n mediu apos, dar solubile n
solveni organici (cloroform, eter, benzen etc.).
Din punct de vedere chimic, lipidele sunt esteri sau amide (ntr-o
msur mai mic), ai acizilor grai cu diferii alcooli (se mai numesc
lipide saponificabile).
Sunt distribuite n toate celulele organismului animal, proporia i
compoziia lor fiind caracteristic fiecrui tip de esut. Deasemenea
produsele de origine animal, ca untul, laptele, oule, se difereniaz prin
predominana calitativ i cantitativ a anumitor tipuri de lipide.
Din punct de vedere biochimic lipidele ndeplinesc n organismul
viu urmtorul rol:
constituie o important surs de energie (au valoare energetic
superioar glucidelor i protidelor);
au rol plastic, respectiv intr n structura diferitelor componente celulare i infracelulare, iar n asociaie cu proteinele
formeaz unitatea structural de baz a membranelor celulare
i particulelor subcelulare;
constituie un nveli protector al multor organe (sunt izolatori
termici i mecanici);
particip direct sau indirect la diferite procese metabolice
ca activatori ai unor enzime, componente ale sistemului de
transport al electronilor n mitocondrii etc.;

39

 funcioneaz ca sistem de transport n lichidele biologice

pentru substane liposolubile (vitamine liposolubile, hormoni,
acizi grai eseniali).

3.2. CLASIFICARE

Exist mai multe criterii de clasificare pentru lipide, conform

schemei urmtoare:
LIPIDE

N FUNCIE DE LOCALIZARE:

LIPIDE DE
CONSTITUIE
(STRUCTUR)
intr n citoplasma
celulelor, membranelor i formaiunilor
subcelulare;
nu variaz funcie de
starea de nutriie a
organismului;

N FUNCIE DE ORIGINE:

LIPIDE DE
REZERV
sunt localizate n esutul adipos i reprezint surs de energie
pentru organism;
variaz cantitativ n
funcie de factorii alimentari i fiziologici;

LIPIDE EXOGENE
(prin asimilaie)
provenite prin aport
alimentar
utilizate pentru formarea de lipide proprii

LIPIDE ENDOGENE
(proprii)
provenite prin reacii
de biosintez

N FUNCIE DE STRUCTURA CHIMIC:

LIPIDE SIMPLE (C, H, O)

LIPIDE COMPLEXE (C, H, O, N, P, S)

N FUNCIE DE NATURA
ALCOOLULUI CONSTITUENT

N FUNCIE DE NATURA
ALCOOLULUI CONSTITUENT

GLICERIDE

CERIDE

STERIDE

GLICEROFOSFOLIPIDE

SFINGOLIPIDE

3.3. COMPONENI CHIMICI STRUCTURALI

Principalii componeni chimici structurali ai lipidelor sunt acizii
grai monocarboxilici (RCOOH) i anumii alcooli.
40

41

3.3.1. ACIZI GRAI

n structura lipidelor animale intr n exclusivitate acizi grai cu
urmtoarele caracteristici:
au numr par de atomi de carbon (de la 4 la 26);
radicalul alchil (R) este constituit dintr-un lan hidrocarbonat cu lungime variabil (21-30 atomi C), cu structur
liniar, ciclic sau ramificat, avnd caracter saturat sau
nesaturat (cu una, dou, trei sau patru duble legturi);
radicalul alchil (R) constituie partea hidrofob a moleculei,
iar gruparea carboxil (COOH) partea hidrofil;
radicalul alchil (R) al unor acizi grai poate avea grefat i
gruparea hidroxil (OH), rezultnd hidroxiacizi.
Acizii grai saturai se gsesc distribuii n proporii variate n
diferite esuturi i produse de origine animal, au caten linear saturat
(4-30 atomi C), sunt solizi, iar punctele de topire cresc o dat cu creterea
numrului de atomi de carbon din molecul.
Exemple de acizi grai saturai foarte rspndii:
acid butiric (C4) CH3(CH2)2COOH (n unt);
acid miristic (C14) CH3(CH2)12COOH (majoritatea grsimilor naturale);
acid palmitic (C16) CH3(CH2)14COOH (majoritatea grsimilor naturale);
acid stearic (C18) CH3(CH2)16COOH (majoritatea grsimilor animale).
Acizii grai nesaturai sunt mai rspndii n natur dect cei
saturai, sunt lichizi (cu excepia acidului oleic care este semisolid), iar
din punct de vedere fiziologic cei mai importani sunt acizii grai
nesaturai cu 18 atomi de carbon.
Acizii grai nesaturai cu structur linear sunt monocarboxilici,
conin una sau mai multe duble legturi, au puncte de topire mai mici
dect cei saturai cu acelai numr de atomi de carbon.

42

Exemple de acizi grai nesaturai cu caten linear:

Denumirea
acidului

Numr
atomi C

Formula

Palmitoleic
Oleic

16
18

Linoleic

18

Linolenic

18

Arahidonic

20

Nervonic

24

CH3(CH2)5CH=CH(CH2)7COOH
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH
CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH
(CH2)7COOH
CH3CH2CH=CHCH2CH=CHCH2
CH=CH(CH2)7COOH
CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CHCH2
CH=CH CH2CH=CH(CH2)3COOH
CH3(CH2)7CH=CH(CH2)13COOH

Numrul i
poziia
dublelor
legturi ()

9
9
9,12
9,12,15
5,8,11,14
15

Acizii: linoleic, linolenic i arahidonic sunt indispensabili pentru

creterea, dezvoltarea i funcionarea normal a organismului animal i de
aceea au fost denumii acizi grai eseniali (A.G.E.) sau vitamine F.
Ei particip la formarea membranelor celulare, la metabolismul mitocondrial, intr n structura fosfolipidelor, sunt precursori ai prostaglandinelor.
Prostaglandinele (PG) fac parte dintr-o clas special de acizi
grai nesaturai denumii eicosanoizi, deoarece au catena format din 20
atomi de carbon. PG predomin n organele genitale i n plasma seminal, dar se gsesc i n esuturile altor organe: creier, inim, rinichi, uter,
stomac, placent. Au rol hormonal (stimuleaz sinteza hormonilor n
unele glande endocrine), stimuleaz contracia musculaturii netede (uter
gravid, vezic urinar), exercit aciune vasodilatatoare, scznd presiunea sanguin, diminueaz aciditatea gastric, intervin n reglarea temperaturii corporale etc.
Principala proprietate general a acizilor grai este caracterul lor
hidrofob, deci nu sunt solubili n ap datorit catenei lungi de atomi de
carbon puternic nepolar i care anuleaz caracterul polar al gruprii
carboxil.
Acizii grai pot reaciona cu hidroxizii alcalini (NaOH, KOH), la
cald, reacie cunoscut sub numele de saponificare, i formeaz spunuri (sruri de sodiu sau potasiu) cu proprieti tensioactive i deci ageni
exceleni de emulsionare. Deasemenea acizii grai se pot esterifica, iar
43

cei nesaturai vor adiiona la nivelul dublelor legturi atomi de hidrogen,

halogeni, oxigen.
3.3.2. ALCOOLI
Alcoolii care intr n constituia lipidelor (denumii i lipide
nesaponificabile) pot fi clasificai n trei categorii, n funcie de structura
chimic, dup cum urmeaz:
ALCOOLI
ALCOOLI ALIFATICI
NEAZOTAI:
glicerina (glicerolul) din lipidele
simple i complexe

ALCOOLI CICLICI
mioinozitolul

alcoolii cetilic, cerilic, miricilic (din

structura ceridelor)

intr n structura inozitidelor

sterolii (au nucleu de baz
ciclul steran - C17H28)

intr n structura steridelor

ALCOOLI AMINAI
(AMINOALCOOLI):

colamina

colina

HO CH2 CH2 NH2

intr n structura lipidelor complexe

sub form de esteri fosforici

serina
sfingozina
H3C (CH2)12 CH = CH
|
H C OH
|
intr n structura glicerofosfolipidelor
H C NH2

44

|
CH2OH
intr n structura sfingolipidelor

Trebuie subliniat faptul c alcoolii policiclici (sterolii) fac parte

din clasa steroizi (steroide) i au diferite grupri chimice grefate pe
nucleul steran care le confer activiti biologice variate. Dup origine,
sterolii pot fi:
a) zoosteroli (de origine animal: colesterolul, lanosterolul,
copro-sterolul);
b) fitosteroli (de origine vegetal: sitosterol, stigmasterol);
c) micosteroli (din levuri, ciuperci i mucegaiuri: ergosterolul).
Colesterolul este principalul sterol de origine animal distribuit, sub form liber sau esterificat n toate celulele organismului.
Predomin n esutul nervos (creier, mduva spinrii), n glbenuul de
ou, n calculii biliari, n piele, n glandele suprarenale.
Este de origine exogen, dar i endogen, fiind sintetizat din
acetilcoenzima A.

n organismul animal colesterolul are un rol biochimic deosebit de

important i anume:
prin esterificare cu acizi grai superiori formeaz lipidele complexe denumite colesteride;
intr n structura biomembranelor celulare i contribuie la
permeabilitatea acestora;
acioneaz asupra permeabilitii eritrocitelor, influennd procesele de difuzie;

45

 este antitoxic i antihemolitic (neutralizeaz efectul unor toxine sau inhib aciunea hemolitic a unor substane ptrunse
n organism);
are rol izolator n tecile de mielin, influennd transmiterea
influxului nervos;
este precursorul metabolic (provitamina) vitaminei D3;
este precursorul metabolic primar al acizilor biliari i al
hormonilor sexuali i corticosuprarenali.
Concentraia normal de colesterol din snge se numete colesterolemie. n stri de hipercolesterolemie se intensific depunerea lui n
esuturi (xantomatoza), favoriznd apariia aterosclerozei.
Acizii biliari reprezint un ansamblu de compui steroizi
secretai de bil n intestin sub form de sruri alcaline (sruri biliare).
Acizii biliari sunt produii finali ai metabolizrii colesterolului la nivelul
ficatului i ulterior sunt deversai n bil.
Structura chimic de baz din care deriv acizii biliari este acidul
colanic:

n funcie de numrul i de poziia gruprilor OH grefate pe

molecula acidului colanic deriv mai multe tipuri de acizi biliari:
acidul colic (3,7 i 12 OH);
acidul deoxicolic (3,12 OH);
acidul litocolic (3 OH).
Acizii biliari se conjug n ficat la nivelul gruprii carboxil
(COOH) cu aminoacizii glicocol (HOOCCH2NH2) sau taurin
(H2NCH2CH2SO3H) i rezult acidul glicocolic i taurocolic, sub
46

form de sruri de Na i K denumite sruri biliare. Srurile biliare sunt

secretate n bil i deversate n intestin, unde acioneaz ca ageni de
emulsionare a lipidelor alimentare, uurnd astfel scindarea enzimatic
i absorbia acestora prin transformarea lor n picturi foarte fine cu
interior hidrofob i exterior hidrofil.
Ca i spunurile, srurile biliare sunt substane tensioactive
care micoreaz tensiunea superficial de la suprafaa lipidelor insolubile
n mediu apos, ducnd la apariia agregatelor micelare.

3.4. ACILGLICEROLII (GLICERIDE)

Gliceridele sunt lipidele simple cele mai rspndite, ele intrnd n
componena tuturor celulelor animale i vegetale i constituind forma
de depozit a lipidelor la animale i plante.
3.4.1. CONSIDERAII GENERALE
n organismul animal sunt n general gliceride de rezerv, localizate n esutul adipos i mai puin gliceride de constituie, reprezentnd
astfel sursa major de energie pentru organism.
Sunt buni izolatori termici i mecanici cu rol de protecie n
organism, iar n combinaie cu proteinele (particule lipoproteice) servesc
ca transportori ai acizilor grai (via sistem limfatic i snge) n organism.
Din punct de vedere al structurii chimice gliceridele sunt esteri
ai glicerolului cu diferii acizi grai, esterificarea avnd loc la o grupare
hidroxil din molecula glicerolului (i rezult monoglicerid), la dou
grupri hidroxil (diglicerid) sau la trei grupri hidroxil (triglicerid).
Dintre toate gliceridele, trigliceridele sunt cele mai rspndite n organismul animal.
Structura general a unei trigliceride este:

47

n care: R, R1 i R2 sunt radicali ai acizilor grai constitueni, identici sau

diferii. Trigliceridele naturale de origine animal sunt mixte, innd
seama de acizii grai constitueni. O astfel de triglicerid mixt ce conine
acid palmitic n poziia , acid oleic n poziia i acid stearic n poziia
' are urmtoarea structur:

Denumirea ei clasic este palmitoleostearin sau palmitoil-

oleoil-' stearoilglicerol.
3.4.2. PROPRIETI GENERALE
ALE TRIGLICERIDELOR
Proprietile trigliceridelor (fizice i chimice) sunt determinate de
natura acizilor grai pe care i conin.
Din punct de vedere al strii de agregare, cele cu acizi grai nesaturai sunt lichide (uleiuri - gliceride vegetale), iar cele cu acizi grai
saturai sau cu acizi grai nesaturai, dar cu dublele legturi n poziia
trans sunt solide sau semisolide (unturi i seuri - gliceride animale).

48

Din punct de vedere al proprietilor chimice, trigliceridele vor da

reacii caracteristice legturilor ester i dublei legturi (dac acizii grai
constitueni sunt nesaturai).
Hidroliza trigliceridelor are loc fie chimic (sub aciunea unor
acizi minerali), fie enzimatic, sub aciunea lipazelor, cu eliberarea glicerolului i acizilor grai constitueni.

Hidroliza are loc de fapt n trepte, cu eliberarea succesiv a

acizilor grai , ' i n final .
Saponificarea este o reacie de hidroliz n mediu alcalin, n
urma creia se elibereaz spunuri (sruri ale acizilor grai)

Indicele de saponificare reprezint cantitatea de KOH n miligrame necesar pentru a saponifica un gram de triglicerid. Acest indice
(Is) permite caracterizarea compoziiei chimice, respectiv a naturii acizilor grai ce intr n structura trigliceridelor. Valoarea indicelui de saponificare este invers proporional cu masa molecular a trigliceridei,
respectiv cu masa molecular a acizilor grai constitueni (cu lungimea
catenei de atomi de carbon).
Saponificarea este procesul care st la baza obinerii spunurilor.
Hidrogenarea este o proprietate caracteristic trigliceridelor de
natur vegetal, uleiurilor lichide, care conin preponderent acizi grai
nesaturai. Prin adiia catalitic de hidrogen la dublele legturi, acetia se
transform n acizi grai saturai, solizi. Pe aceast proprietate se bazeaz
procesul industrial de obinere a margarinelor din uleiuri vegetale. Ca
urmare a procesului de hidrogenare, vitaminele liposolubile, inclusiv
49

acizii grai eseniali (vitamine F) sunt distruse. De aceea margarinele

trebuie s fie mbogite ulterior cu aceste vitamine liposolubile (A, D, E).
Halogenarea trigliceridelor nesaturate decurge dup acelai
mecanism ca i hidrogenarea, ele adiionnd brom sau iod.
Indicele de iod este o mrime ce caracterizeaz gradul de nesaturare al trigliceridelor. El reprezint cantitatea de iod n grame care se
adiioneaz la 100 g trigliceride.
Rncezirea este un proces natural, complex, de degradare pe
care l sufer uleiurile i grsimile n timp, n condiii necorespunztoare
de conservare. Sub aciunea umezelii i a unor microorganisme care se
instaleaz, trigliceridele sunt parial hidrolizate. Acizii grai nesaturai
eliberai pot fi oxidai cu oxigenul din aer la dublele legturi i rezult
astfel acizi grai i aldehide-acizi cu mase moleculare mici.

De asemenea, prin oxidarea acizilor grai pot rezulta i acizi

-cetonici, care prin decarboxilare formeaz metil-cetone cu C8 - C12.

Toi aceti produi rezultai (acizi grai cu mase moleculare mici,

mai ales acidul butanoic, aldehide-acizi i metil-cetone) confer mirosul
caracteristic, neplcut, de rnced.

50

Procesul de rncezire poate fi prevenit cu ajutorul unor substane

antioxidante naturale, cum sunt tocoferolii, vitamine E, carotenii care
inhib procesul de rncezire.

3.5. CERIDE
Ceridele, numite i ceruri, sunt esteri ai acizilor grai cu alcooli
superiori. Structura lor general poate fi reprezentat astfel:
R1 O CO R2
R1 = radical al alcoolului
R2 = radical al acidului gras
Att acizii grai, ct i alcoolii conin 16-34 atomi de carbon.
Ceridele sunt secretate de diferite organe ale plantelor: frunze,
tulpini, fructe. Ele se depun pe suprafaa acestora, avnd rol protector.
De asemenea, ceridele pot fi ntlnite i la unele organisme animale. Astfel, ceara de albine, lanolina de pe lna oilor sunt amestecuri de
ceride caracteristice acestor specii.
Fiind solide i mai puin uleioase la atingere dect grsimile, cerurile sunt folosite n industria farmaceutic i cosmetic, precum i pentru
obinerea unor alifii, unguente i creme de lustruit.

3.6. STERIDE
Steridele sunt lipide simple constituite din acizi grai superiori
(preponderent palmitic, oleic i linoleic), esterificai cu alcooli policiclici
(steroli). Dac alcoolul este colesterolul, esterificarea are loc la gruparea
OH de la C3 i produsul de reacie se va numi colesterid.
Steridele sunt componente existente n cantiti mici n toate celulele organismului animal, inclusiv n produse de origine animal: lapte,
ou.

3.7. GLICEROFOSFOLIPIDE

51

Glicerofosfolipidele sunt lipide complexe, n structura lor

particip sub form esterificat acizi grai, glicerol, acid fosforic, precum
i un alt alcool cu mas molecular mic, n special un aminoalcool. Ele
sunt lipide de constituie, intr n structura membranelor plasmatice.
Acestea sunt alctuite de fapt din 40-50% fosfolipide i 50-60% proteine,
precum i din glicolipide.
Alcoolii ce pot intra n structura fosfolipidelor sunt: colina, colamina, serina i inozitolul.
n funcie de natura celui de-al doilea alcool, glicerofosfolipidele
se mpart n :
lecitine (colinglicerofosfolipide), care conin colin
cefaline (colaminglicerofosfolipide), care conin colamin
seringlicerofosfolipide, care conin serin
inozitolglicerofosfolipide, care conin inozitol.
Structura general poate fi reprezentat astfel:

Cele mai rspndite sunt lecitinele i cefalinele. Acizii grai ntlnii cel mai frecvent n structura lor sunt acidul stearic, acidul palmintic i
acidul oleic.

52

De obicei n poziia este esterificat un acid gras nesaturat (acid

oleic). Aceast structur confer glicerofosfolipidelor att un caracter
amfoter (sunt amfioni), ct i un caracter amfipatic. Caracterul amfipatic
este determinat de prezena unei componente hidrofobe, liposolubil
(catenele celor doi acizi grai) i a unei componente hidrofile, solubile n
ap (fosforil-colina, fosforil-colamina, respectiv fosforil-serina). Datorit
acestor dou componente, moleculele se pot orienta diferit n structurile
celulare, formeaz straturi duble de lecitine i cefaline n care sunt apoi
incluse macromolecule de proteine. De asemenea, sunt incluse molecule
de steroli, precum i de glicolipide. n felul acesta ele alctuiesc structura
membranelor plasmatice, determinndu-le permeabilitatea, fenomenele de
osmoz i de transport activ al diferitelor biomolecule n interiorul organismului.
Prezena macromoleculelor proteice orientate pe suprafaa extern
a membranei, pe suprafaa intern a sa, incluse n interiorul membranei
sau pe ntreaga grosime a acesteia, determin tocmai permeabilitatea
membranelor plasmatice. Proteinele din structura membranelor sunt n
acelai timp biochimic i biologic active. Ele pot fi enzime sau complexe
enzimatice specifice, pot fi receptori pentru mesagerii chimici de lumin,
presiune sau excitaii mecanice, sau pot fi proteine transportoare ale substanelor hidrofile. n felul acesta membranele plasmatice i ndeplinesc
rolul lor complex de a asigura compartimentarea celular, precum i
transportul diferitelor substane att din mediu spre celule i invers, ct i
ntre citosol i organitele celulare.
n organism colinfosfolipidele i colaminfosfolipidele sunt scindate hidrolitic sub aciunea unor fosfolipaze i rezult lizolecitina i
lizofosfatidilcolamina cu aciune hemolizant.
Dintre glicerofosfatide lecitinele i cefalinele se gsesc n toate
celulele organismului animal, preponderent n creier i n glbenuul de
ou.
53

Serinfosfolipidele predomin n esutul cerebral, unde se gsesc

alturi de inozitolfosfolipide.

3.8. SFINGOLIPIDE
Sunt lipide complexe care conin obligatoriu un alcool cu 18 atomi
de carbon, numit sfingozin (sau omologul su saturat dihidrosfingozina). Sunt lipidele distribuite n special n esutul cerebral, unde particip
la constituia membranelor celulare (de regul n amestec cu alte substane).
Structura general a unei sfingolipide este de forma:
H

18
H3 C (CH2)12 C = C

H HC OH

HC NH CO R1

H2 1 C O R 2
Sfingolipid

unde: R1 = radical al unui acid gras saturat (lignoceric) sau nesaturat

(nervonic);
R2 = radical fosforilcolin, fosforilcolamin, galactoz, acid Nacetilneuraminic, legat la C1 din sfingozin.
n funcie de natura radicalului R2 exist mai multe tipuri de
sfingolipide:
sfingomieline, care conin fosforilcolin sau fosforilcolamin;
cerebrozide, care conin -galactoz sau -glucoz;
sulfatide, care conin galactozo-2sulfat;
gangliozide, care conin acid N-acetilneuraminic.
Dintre acestea cele mai abundente i importante sfingolipide sunt
sfingomielinele care intr n structura tecilor de mielin, ndeplinind
datorit caracterului lor hidrofob rol de izolatori ai tecilor de mielin din
axoni.
54

Cerebrozidele, sulfatidele i gangliozidele pot fi ncadrate n categoria glicoconjugatelor i au funcii celulare importante: par s intervin
n specificitatea de esut i de organ, n recunoaterea celul-celul, n
imunitatea tisular sau n restaurarea excitabilitii esutului la impulsurile
nervoase, pierdut prin congelare sau prin inhibare cu proteine bazice.

55

CAPITOLUL 4
PROTIDE
4.1. CONSIDERAII GENERALE
Protidele sunt componente chimice primordiale ale materiei
vii, compui organici naturali, care prin structura i proprietile lor
definesc esena vieii constituind baza material a existenei i a tuturor fenomenelor specifice acesteia. Denumire lor deriv de la cuvntul
grecesc proteios care nseamn de prim rang, de cea mai mare importan.
Protidele se caracterizeaz prin urmtoarele trsturi definitorii:
sunt constituenii universali i indispensabili ai tuturor formelor de via (purttorii materiali ai vieii), asigurnd
organizarea, meninerea structurii morfologice i manifestarea
funciilor vitale ale celulelor;
sunt biomacromolecule alctuite din uniti structurale de
baz, numite aminoacizi, legate una de alta prin legturi
peptidice ( CO NH );
dei prezint structuri chimice i funcii biologice diferite, sunt
alctuite din 20-22 aminoacizi fundamentali, aceiai la toate
vieuitoarele, de la cea mai simpl bacterie pn la om;
prezint un grad nalt de organizare structural ntr-o permanent interaciune cu sistemele chimice ambiante;
se prezint ntr-o mare diversitate de tipuri diferite structural
i funcional, ca rezultat al unui numr infinit de posibiliti de
organizare molecular;
prezint proprieti fizice i biochimice specifice, consecin
a organizrii structurale i respectiv a conformaiei spaiale a
macromoleculelor;
56

 sunt biomacromolecule informaionale implicate n transmiterea informaiei de la o celul la alta sau de la un organism la
altul;
se afl ntr-o strns interdependen cu acizii nucleici, n
sensul c biosinteza proteinelor se realizeaz pe baza informaiei genetice stocat n ADN, iar unele protide sunt enzime
implicate n procesul de biosintez al acizilor nucleici.
Datorit gradului nalt de diversitate structural, protidele ndeplinesc funcii fundamentale, specifice organismelor vii, cum ar fi:

PROTIDE
SISTEME TAMPON
intervin n meninerea echilibrului acido-bazic (meninerea pH-ului n limite
fiziologice) n organism

COMPONENTE
PLASTICE:
particip la realizarea i
meninerea structurii celulelor, membranelor i formaiunilor intracelulare

PURTTORI MATERIALI
AI TUTUROR
NSUIRILOR BIOLOGICE
intervin n procesele de difereniere, cretere, dezvoltare
i reproducere celular

BIOCATALIZATORI
(ENZIME)
prezint activitate enzimatic, cataliznd reaciile
biochimice de sintez i
degradare din organism.

TRANSPORTORI
ndeplinesc
funcii
de
transport i depozitare a
ionilor metalici, vitamine,
oxigen, dioxid de carbon

HORMONI
particip la reglarea proceselor metabolice
PIGMENI RESPIRATORI
transport pe cale sangu-in
oxigenul molecular la
esuturi sau depoziteaz
oxigenul n muchi.

SUBSTANE DE SUSINERE
I REZISTEN MECANIC
ndeplinesc funcii mecanice n
oase, piele, muchi, vase
sanguine
ANTICORPI
confer imunitate organismului contra unor ageni
patogeni externi

SUBSTANE CU ROL
CONTRACTIL
ndeplinesc activitatea contractil i locomotoare

57

Din punct de vedere al compoziiei chimice elementare, majoritatea protidelor sunt substane cel puin cuaternare (C, H, O, N); unele
conin sulf i fosfor, iar altele conin metale (fier, cupru, magneziu etc.)
Distribuia protidelor n organismul animal difer n funcie de
organ i specie, deci sunt organo-specifice i specie-specifice.

4.2. CLASIFICARE
Clasificarea protidelor se face dup mai multe criterii, conform
schemei urmtoare:
PROTIDE

N FUNCIE DE CONFORMAIE
I MORFOLOGIE:

PROTEINE
FIBRILARE:

keratin
e
(din piele,
pr, unghii,
coarne, ln,
pene)

colagen
(din tendoane,
esut conjunctiv)

miozina
(din muchi)

fibroina
(din mtase)

PROTEINE
GLOBULARE:

enzi
me

antic
orpi

horm
oni

albu
mine

fibri
nogen

hemo
globin

N FUNCIE DE STRUCTUR:

PEPTIDE
oligopeptid
e
(2-10
aminoacizi)

polipeptide
(10-100
aminoacizi)

PROTEIDE
holoproteide
(proteine)

heteroproteide:

au pe lng
gruparea
proteic i o
component
neproteic
(prostetic)

4.3. COMPONENI CHIMICI STRUCTURALI

Unitatea structural de baz a protidelor o reprezint aminoacizii
legai prin legturi covalente numite legturi peptidice ( CO NH).
58

59

4.3.1. AMINOACIZI
Structura fiecrei protide se caracterizeaz printr-un numr finit
i variabil de aminoacizi. Natura, numrul, proporia i secvena
aminoacizilor constitueni determin diversitatea enorm a tipurilor de
protide.
4.3.1.1. Structur, clasificare i rol biochimic
Aminoacizii sunt compui biochimici cu funcie mixt, deoarece
conin o grupare funcional carboxil (COOH) i o grupare funcional
amin (NH2), ambele grefate la acelai atom de carbon din poziia
(C2).
R

H C NH2

COOH
n funcie de particularitile structurale ale radicalului R,
aminoacizi se clasific astfel:

1. AMINOACIZI ACICLICI:
a) AMINOACIZI MONOAMINOMONOCARBOXILICI CU RADICAL (R)
ALIFATIC:

60

b) AMINOACIZI MONOAMINOMONOCARBOXILICI CU O GRUPARE

HIDROXIL (HIDROXIAMINOACIZI):

c) AMINOACIZI MONOAMINOMONOCARBOXILICI CU SULF

(TIOAMINOACIZI):

d) AMINOACIZI MONOAMINODICARBOXILICI:

e) AMINOACIZI DIAMINOMONOCARBOXILICI:

61

2. AMINOACIZI CICLICI
a) AMINOACIZI HOMEOCICLICI (CU NUCLEU AROMATIC):

b) AMINOACIZI HETEROCICLICI:

n funcie de caracterul pe care-l manifest catenele laterale

(R) aminoacizii componeni ai protidelor naturale se clasific n:
a) aminoacizi cu catene apolare: glicocol, alanin, leucin, izoleucin, metionon, fenilalanin, triptofan;
b) aminoacizi cu catene polare: serina, treonina, cisteina, tirozina, asparagina, glutamina;
c) aminoacizi cu catene ionizabile: acidul aspartic, acidul glutamic, lizina, arginina, prolina.

62

 n organismul animal au fost identificai aminoacizi care nu

intr n structura protidelor, dar care au rol important n celul: fie sunt
componeni structurali ai altor biomolecule (-alanina, acidul -aminobutiric), fie sunt produi intermediari n diferite reacii biochimice (citrulina, ornitina, homocisteina, dihidroxifenilalanina).
Importana fundamental a aminoacizilor const n participarea
lor n structura proteinelor. Biosinteza proteinelor proprii specifice organismului animal este direct corelat cu aportul de aminoacizi exogeni,
provenii din hran. Organismul animal nu poate sintetiza dect aproximativ 50% din setul de aminoacizi necesari biosintezei proteinelor proprii, restul de aminoacizi fiind procurai prin hran (proteine alimentare
aminoacizi
proteine biosintez proprii).
degradare

hidrolitic

Din acest punct de vedere aminoacizii pot fi clasificai n trei

categorii:
a) aminoacizi eseniali (indispensabili pentru creterea i dezvoltarea normal a organismului, care nu se pot sintetiza i
deci trebuie procurai prin hran);
b) aminoacizi semieseniali (sunt sintetizai n cantiti nesatisfctoare n organism i trebuie suplimentai prin hran);
c) aminoacizi neeseniali (sunt sintetizai de organism i pot
lipsi din hran).
Dintre aminoacizii eseniali amintim: valina, leucina, metionina,
lizina, fenilalanina, treonina, triptofanul, aminoacizi care se gsesc n
germenii seminelor de leguminoase, n plantele rdcinoase, dar i n
produse animaliere ca: lapte, brnz, ou, carne de pete. Lipsa lor din
alimentaie provoac tulburri de cretere i dezvoltare, tulburri de
fertilitate, atrofierea unor glande.
Alimentaia animalelor trebuie s fie complet i echilibrat n
aminoacizi (respectiv proteine) cu valoare alimentar complet. Pentru
aceasta este nevoie de cunoaterea precis a calitii sursei de protein,
nivelului proteic optim al raiei, valoarea aminoacidului limitativ. Echilibrarea raiei proteice se face prin adugarea la nutreurile vegetale a
aminoacizilor de sintez sau a proteinelor de origine animal (fin de
oase, de carne, de snge, de pete, de scoic).

63

4.3.1.2. Proprietile generale ale aminoacizilor

a) Aminoacizii sunt substane optic active (cu excepia glicocolului), deoarece au n molecula lor cel puin un atom de carbon asimetric
(C) la care sunt legate cele dou grupri funcionale, amino i carboxil;
b) Aminoacizii n totalitate prezint o anumit solubilitate n
ap, datorit celor dou grupri (NH2 i COOH) care determin n
soluie apoas polarizarea aminoacizilor (amfiioni):

Gradul de solubilitate n ap variaz n funcie de natura radicalului R i de pH-ul soluiei.

Totodat aminoacizii sunt puin solubili n solveni organici.
Variaia solubilitii aminoacizilor n ap i solveni organici n funcie de
natura lor este utilizat n separarea, identificarea i determinarea lor cantitativ prin
tehnica de analiz fizico-chimic numit cromatografie.

c) Aminoacizii sunt substane cu caracter amfoter (deoarece se

gsesc n soluie sub form de amfiioni), astfel n mediul acid se comport
ca baze (acceptori de protoni), iar n mediu bazic se comport ca acizi
(donatori de protoni).
Ionii astfel formai migreaz sub aciunea unui cmp electric spre
catod (K) sau anod (A+) n funcie de valoarea pH-ului soluiei.

cmp
electric

cmp
electric

A+
64

Pentru fiecare aminoacid exist o valoare de pH numit pH

izoelectric (pHi), la care sarcina net a moleculei este zero (numrul
sarcinilor pozitive este teoretic egal cu cel al sarcinilor negative) i drept
urmare aminoacizii nu migreaz n cmp electric. Valoarea pHi depinde
de structura aminoacidului i la aceast valoare solubilitatea aminoacidului este minim.
d) Aminoacizii, datorit caracterului amfoter, constituie sisteme
tampon (au aciune de tamponare) foarte eficiente pentru meninerea
constant a pH-ului celular.
e) Aminoacizii sunt biomolecule cu reactivitate chimic mare
datorit prezenei n structura lor att a gruprii carboxil, ct i a gruprii
amino.
Datorit gruprii carboxil (COOH) aminoacizii reacioneaz
cu:
bazele (NaOH) i formeaz sruri;
alcoolii i formeaz esteri;
amoniacul i formeaz amide;
aminele i rezult amide substituite;
elimin CO2 (decarboxilare) i rezult amine.
n organismul animal reaciile de decarboxilare a aminoacizilor
(catalizate de enzimele specifice - aminoacid decarboxilaze) conduc la
formarea de amine biogene care exercit diferite aciuni farmaco-dinamice sau sunt precursori ai unor coenzime, hormoni i vitamine. Unele
dintre ele sunt toxice pentru organism (putresceina, cadaverina), fiind prezente n carnea alterat.
Datorit gruprii (NH2) aminoacizii pot reaciona cu:
alchilderivai halogenai i rezult derivai cuaternari
de amoniu;
cloruri acide cu formare de amide substituite;
dioxidul de carbon i rezult carbamino-derivai
(aceast reacie st la baza transportului CO2 de la esuturi la pulmon de ctre aminoacidul lisin din structura
hemoglobinei);
ninhidrina i formeaz compui colorai n marea lor
majoritate albastru intens;
2,4 dinitrofluorbenzenul i rezult 2,4-dinitrofenil
derivai colorai n galben.
65

 Datorit prezenei ambelor grupri, amino i carboxil, aminoacizii pot condensa ntre ei cu formare de legturi peptidice (CONH)
ntre gruparea amino a unui aminoacid i gruparea carboxil a altui
aminoacid, rezultnd compui numii peptide.
R1
R2
R3

H2NCHCOOH + H2NCHCOOH + H2NCHCOOH

2H2O

R1
R3

H2NCHCONHCHCONHCHCOOH

R2
TRIPEPTID

Moleculele ce conin 2, 3, 4 sau chiar 10 aminoacizi condensai se

numesc dipeptide, tripeptide, tetrapeptide, respectiv decapeptide, iar la
modul general oligopeptide. Polipeptidele sunt molecule ce conin n
structura lor mai mult de 10 aminoacizi condensai, iar proteinele sunt
macromolecule cu mase moleculare mari (1103 - 1105) i cu un nalt grad
de organizare structural.
n structura unui lan peptidic apare ntotdeauna un aminoacid cu
gruparea amino liber (se numete a.acid N-terminal), ales prin convenie
n stnga lanului i un aminoacid cu gruparea carboxil liber (se numete
a.acid C-terminal), ales prin convenie cel din dreapta lanului.
4.3.2. PEPTIDE
Denumirea peptidelor se stabilete prin indicarea succesiv a
denumirii fiecrui aminoacid component al moleculei de peptid cu adugarea sufixului il la fiecare denumire; excepie face numai aminoacidul
C-terminal cu grupare carboxil liber, care-i menine denumirea
neschim-bat. De exemplu: o tripeptid cu structura:
H2N Ala Asp Cis COOH
va fi denumit Alanil Aspartil Cistein.
66

Dintre proprietile generale ale peptidelor (oligo i polipeptide) amintim:

sunt solubile n mediu apos, oligopeptidele formnd soluii
propriu-zise, iar polipeptidele dispersii coloidale;
au caracter amfoter i formeaz sruri solubile cu acizii i cu
bazele;
avnd n constituie cel puin 3 aminoacizi, deci minim dou
legturi peptidice, peptidele (att oligo, ct i polipeptidele), reacioneaz
cu ionii de cupru n mediu alcalin i formeaz compui cu structur de
chelai de culoare albastr (reacia biuretului);
prin hidroliz acid sau enzimatic sunt scindate n aminoacizii
constitueni.
n organismul animal au fost identificate o serie de peptide deosebite prin gradul de complexitate structural i prin funciile biochimice pe
care le ndeplinesc.
Un tripeptid important pentru organismul viu este glutationul
rezultat prin condensarea acidului glutamic, cisteinei i glicocolului.

Legarea cistinei de acidul glutamic se realizeaz prin gruparea

carboxil din poziia a acidului glutamic.
Glutationul se prezint n dou forme structurale distincte: glutation redus (GSH) i glutation oxidat (GSSG). Glutationul oxidat
provine din dou molecule de glutation redus care se oxideaz la nivelul
gruprii tiol (SH) cu formarea gruprii disulfurice caracteristic cistinei:

67

Datorit gruprii tiol (SH) libere, glutationul prezint proprieti

biologice. Astfel:
Glutationul particip la procesele redox din celul prin transfer
de hidrogen;
Protejaz gruprile tiol (SH) din structura unor enzime contra oxidrii; se comport ca activator al unor enzime SH-dependente;
Glutationul poate fi donator de hidrogen pentru anumii compui pe care i trece din stare oxidat n stare redus. n unele procese
biochimice, glutationul redus acioneaz ca o coenzim, comportndu-se
ca donator de hidrogen;
GSH acioneaz ca antioxidant, meninnd n stare redus
activ diferii compui (acidul ascorbic, adrenalina, hemoglobina);
Glutationul prezint aciune antitoxic;
n organismul animal, GSH acioneaz n strns corelaie cu
insulina - hormon pancreatic care intervine n reglarea glicemiei.
Ocitocina i vasopresina sunt octapeptide ciclice care prezint o mare asemnare din punct de vedere structural.
Ocitocina i vasopresina (primii hormoni polipeptidici sintetizai
n laborator) sunt peptide cu proprieti hormonale secretate de lobul
posterior al hipofizei (neurohipofiz). Ocitocina stimuleaz lactaia i
contracia musculaturii netede (muchiul uterin), nlesnind expulzarea
ftului. Vasopresina determin constricia vaselor sanguine avnd aciune
hipertensiv i regleaz eliminarea apei din organism pe cale renal,
prezint proprieti antidiuretice. Dac vasopresina este sintetizat de
organism n cantiti insuficiente, se instaleaz diabetul insipid care se
manifest prin eliminare exagerat de ap prin urin (poliurie).
Polipeptidele sunt constituite din 10-100 aminoacizi.
Insulina este o polipeptid cu rol hormonal secretat de pancreas. A fost descoperit de fiziologul romn Nicolae Paulescu cu opt luni
naintea canadienilor.
Molecula de insulin are o configuraie spaial elicoidal i este
constituit din 51 aminoacizi ordonai bicatenar. O caten A este format
din 21 aminoacizi i a doua caten B este constituit din 30 aminoacizi.
68

Aceste catene sunt legate intercatenar prin dou puni disulfurice stabilite
ntre radicalii de cistein din poziiile 7 ale ambelor catene i respectiv
ntre radicalii de cistein din poziia 20 a catenei A i din poziia 19 a
catenei B. Exist i o a treia punte disulfur intracatenar, stabilit ntre
radicalii cistein din poziiile 6 i 11 ale catenei A. Existena punilor
disulfurice intercatenare este determinant pentru activitatea hormonal a
insulinei.

Figura 4.1 - Reprezentarea schematic a structurii insulinei

Insulina prezint unele variaii structurale n funcie de specie,

care se manifest n secvena aminoacizilor din poziiile 8, 9 i 10 ale
catenei A.
Insulina intervine n reglarea concentraiei de glucoz din snge
(glicemie), exercitnd un efect hipoglicemiant. n insuficienta secreie de
insulin se declaneaz diabetul zaharat, care se manifest prin creterea
glicemiei peste nivelul normal (80-120 mg glucoz/100 ml snge uman)
i apariia de glucoz n urin (glicozurie).
Glucagonul este un polipeptid cu rol hormonal, secretat de
pancreas. Structura glucagonului este alctuit din 29 aminoacizi dispui
monocatenar. Spre deosebire de insulin, glucagonul conine metionin i
triptofan i nu conine cistein, izoleucin i prolin.
Glucagonul are efect hiperglicemiant. Din aciunea antagonic
insulin glucagon se regleaz glicemia care astfel se menine n
limite normale.
O polipeptid recent descoperit n creier este scotofobina,
alctuit din 14 aminoacizi i care are rol n procesele de memorare, fiind
implicat n codificarea informaiei primite n sistemul nervos central.

69

 De asemenea, corticotropina (ACTH sau hormonul adrenocorticotrop) este polipeptid secretat de lobul anterior al hipofizei; este
format din 39 aminoacizi i stimuleaz biosinteza i secreia hormonilor
steroizi de ctre corticosuprarenal.
Hormonul melanocit este polipeptid secretat de lobul anterior
al hipofizei i stimuleaz producerea de celule melanocite ale pielii, iar
gastrinele sunt polipeptide sintetizate de mucoasa gastric, cu rol n
stimularea secreiei gastrice.
Printre polipeptidele naturale elaborate de microorganisme se
numr antibioticele, care prezint interes n chimioterapia modern,
deoarece manifest aciuni de antibiotice, iar amanitina i faloidina sunt
peptide extrem de toxice (otrvuri), coninute n unele specii de ciuperci.
4.3.3. PROTEINE
Holoproteidele sau proteinele sunt biomacromolecule primordiale ale organismului viu, cu un nalt grad de organizare structural i
cu rol fundamental n structura i implicit n funciile celulei. Sunt
biocomponente constituite dintr-un numr mare de aminoacizi (legai
prin legturi peptidice) al cror tip i succesiune n catena polipeptidic
este determinat genetic.
Enorma diversitate structural i funcional a proteinelor animale
(care poate fi specie-specific i organo-specific) este determinat att
de numrul, tipurile i secvena aminoacizilor componeni, ct i de
organizarea spaial, configuraional a moleculei de protein.
4.3.3.1. Structura proteinelor
Proteinele sunt macromolecule cu structur complex, n care
atomii i grupele de atomi constitueni sunt dispui conform unui
aranjament spaial conformaional, n cadrul aceleiai configuraii a
moleculei de protein (configuraie = dispunerea tridimensional a
atomilor n raport cu un anumit centru de referin sau cu o anumit
component a structurii considerat rigid; conformaie = modalitatea n
care atomii sunt repartizai n spaiu tridimensional, ca o consecin a
70

rotirii acestora n jurul unei legturi simple existente n molecula

respectiv).
Structura general a proteinelor este determinat de urmtorii
factori:
a) caracterul legturii peptidice (caracter parial de dubl
legtur, datorit delocalizrii electronilor ai legturii C = O);
b) geometria legturii peptidice (legtura peptidic, avnd caracter parial de dubl legtur, nu permite o rotaie liber a atomilor de C i
N n jurul ei, fapt ce se repercuteaz asupra organizrii spaiale a proteinelor);
c) natura catenelor laterale (R) ale aminoacizilor componeni
care pot prezenta grupri polare (provenite din gruprile funcionale
COOH, NH2, OH, SH) sau nepolare;
d) conformaia (organizarea stereospecific).
Structura global a macromoleculelor proteice este o rezultant a
coexistenei i interaciunii mai multor nivele de organizare, i anume:
1. Primar
2. Secundar
3. Teriar
4. Cuaternar.
1. Structura primar este structura de baz a fiecrei proteine i
reprezint numrul, tipul, proporia i ordinea aminoacizilor n catena
polipeptidic.
Ea se caracterizeaz prin:
existena legturilor peptidice (CONH) care se stabilesc
ntre diferii aminoacizi;
existena unei succesiuni (secven) bine definite a aminoacizilor n catenele polipeptidice, secven sub control genetic
(prin informaia cuprins n AND);
determin configuraia de ansamblu specific fiecrei proteine.

71

Figura 4.2 - Structura primar a unui lan polipeptidic

2. Structura secundar: reprezint aranjamentul spaial al

lanului polipeptidic (evideniat prin studii de microscopie electronic sau
analiz cu raze X), aranjament datorat multiplelor legturi de hidrogen
intra- i intercatenare ce se stabilesc ntre gruprile NH i CO din
legturi peptidice diferite. Formarea acestor legturi de hidrogen este
posibil datorit distribuiei diferite a electronilor la nivelul legturii
peptidice, legtur care devine parial ionizat, deoarece atomul de O va
avea un exces de electroni (), iar atomul de N un deficit de electroni
(+). Dei legturile de hidrogen sunt relativ slabe, totui stabilitatea
structurii secundare este asigurat prin posibilitatea formrii acestor
legturi ntr-un numr mare i prin repartizarea lor uniform de-a lungul
catenelor polipeptidice.
Structura secundar este reprezentat prin trei modele (conformaii): -helix, n planuri pliate i tip colagen.
Modelul -helix rezult prin spiralarea catenei polipeptidice
ntr-o elice orientat de la stnga la dreapta (orientare care predomin n
structura proteinelor native i este mai stabil din punct de vedere energetic). Aceast structur are urmtoarele caracteristici:
pe fiecare spir (tur) sunt 3,6 aminoacizi;
distana dintre ture este 5,4 ;
toate gruprile NH i CO formeaz legturi de hidrogen;
radicalii R ai tuturor aminoacizilor sunt orientai spre exteriorul elicei, deasupra sau dedesubtul planului legturilor peptidice.
O astfel de structur se ntlnete n -keratina din firul de pr
uman, lna i blana animalelor.
72

 Modelul n planuri pliate (-pliere, foaie -pliat): n

aceast structur lanul polipeptidic sufer o ndoire cu un unghi de 90,
care se face n dreptul atomului de C , purttor al gruprilor COOH i
NH2 implicate n legturi peptidice. Aceast ndoire (pliere) a lanului
polipeptidic determin apariia de legturi de hidrogen intercatenare
ntre dou sau mai multe lanuri polipeptidice (ntre atomii de H dintr-o
legtur peptidic a unui lan polipeptidic i atomii de O dintr-o legtur
peptidic a altui lan polipeptidic), legturi care confer stabilitate acestei
structuri. Modelul n planuri pliate este de tip paralel (-keratina) i
antiparalel (fibroina din mtasea natural).

Figura 4.3 - Conformaia -helix a lanului polipeptidic

73

Figura 4.4 - Modelul n planuri pliate

Figura 4.5 - Modelul tip colagen

Proteinele cu structur -pliere sunt flexibile, dar nu elastice i

sunt n general proteinele sub form de filamente (proteine fibrilare).
Rezult astfel c -keratina cu structur -pliere este mai relaxat
dect -keratina care are o configuraie -helix, ntre ele existnd o
transformare reversibil de forma:
-keratina
(-helix)

-keratina
(-pliere)

Modelul tip colagen: este conformaie specific colagenului

(protein fibrilar prezent n oase, tendoane, cartilaje, esut conjunctiv,
constituind aproximativ 30% din totalul proteinelor din organism).
Din punct de vedere structural molecula de colagen se prezint ca
un superhelix format din 3 lanuri polipeptidice spiralate (triplu helix),
fiecare caten spiralat fiind rsucit spre stnga i nfurat att n jurul
propriei axe, ct i n jurul axei comune celor trei catene. Fibra de colagen
apare astfel ca o funie mpletit a crei stabilitate este realizat prin
legturi de hidrogen intercatenare, legturi electrostatice, fore Van der
Waals i puni disulfurice, care i confer o rigiditate extrem.
74

Fiecare caten polipeptidic are ca unitate repetitiv un triplet de

aminoacizi: glicocol - prolin - hidroxiprolin, care prin structura lor
chimic nu permit adoptarea conformaiei -helix sau -pliere, ci faciliteaz adoptarea conformaiei triplu helix.
Trei catene polipeptidice formeaz unitatea structural repetitiv a
colagenului i care poart numele de tropocolagen. n fiecare molecul
de tropocolagen exist dou catene polipeptidice de un tip i una de un alt
tip, iar la una din extremitile moleculei se gsesc grupri chimice
ionizate. Moleculele de tropocolagen sunt orientate n acelai sens i
asociate n fibrile de forma:

75

Figura 4.6 - Structura triplu helix a colagenului

Figura 4.7 - Conformaia unui lan polipeptidic din structura

triplu helix a colagenului

3. Structura teriar este o organizare spaial complex rezultat prin nfurarea lanului polipeptidic ntr-o suprastructur tridimensional (globular).
Proteinele cu structur teriar, respectiv proteinele globulare, prin
nfurarea lor, formeaz un miez hidrofob, format din radicali nepolari
i o parte extern hidrofil, cu grupri chimice disociabile ale aminoacizilor constitueni.
Structura teriar, prin complexitatea sa, include att structura
primar, ct i structura secundar (-helix n principal sau -pliere n
secundar); ntre structura secundar i cea teriar exist numeroase similitudini, de aceea s-a acreditat i terminologia de structur secundoteriar.
Structura teriar a proteinelor globulare poate fi clasificat, n
funcie de secvena zonelor cu structuri secundare ordonate, astfel:
conformaia , care conine doar catene -helix antiparalele
grupate dou cte dou;
conformaia , care conine numai catene cu structur -pliat
antiparalele;

76

 conformaia +, care conine att catene -helix, ct i catene

cu structur -pliat plasate n diferite pri ale moleculei.
Foaia -pliat este format din lanuri antiparalele, avnd la
capete grupate catenele -helix;
conformaia /, n care segmente cu structur secundar
orientate paralel ntr-o foaie -pliat alterneaz cu segmente cu
structur secundar -helix aflate de o parte i de alta a foii pliate.
Structura teriar este un stadiu avansat de organizare spaial a
structurii proteinelor, a crei complexitate este determinat de existena
unor multiple interaciuni chimice intramoleculare, cum ar fi:
legturi covalente formate prin puni disulfurice stabilite
ntre radicalii de cistein;

legturi ionice stabilite ntre grupri polare ( NH 3 i COO

din diferii amoniacizi);
legturi de hidrogen nepeptidice;
legturi de tip eter, de tip ester, prin fore Van der Waals sau
interaciuni hidrofobe;
legturi dipol-dipol (stabilite ntre gruprile OH din serin,
treonin).
Toate aceste legturi sunt ns legturi slabe (cu excepia celor
covalente), care confer structurii teriare o anumit labilitate i care se
pot desface sub aciunea unor factori fizici sau chimici, fenomen cunoscut
sub numele de denaturarea proteinelor, proces nsoit de cele mai multe
ori de pierderea proprietilor biologice.

77

Figura 4.8 - Structura teriar a unei proteine (reprezentare schematic)

4. Structura cuaternar reprezint cel mai nalt grad de organizare molecular a proteinelor, caracteristic proteinelor native, care
exist ca agregate moleculare formate din mai multe catene polipeptidice
unite n subuniti. Structura cuaternar reprezint asocierea unor catene
polipeptidice identice, numite protomeri (care au deja structur primar,
secundar, teriar definit), ntr-un ansamblu (agregat) denumit oligomer. n funcie de numrul protomerilor (care pot fi identici sau diferii)
proteinele oligomere pot fi dimeri, trimeri, tetrameri.
Legturile dintre protomeri se manifest la suprafaa fiecrui protomer, sunt legturi de hidrogen i de tip electrostatic i au rolul de a
stabiliza agregatul molecular.
Asamblarea proteinei oligomere are loc prin alturarea unor poriuni din suprafaa monomerilor, precizia cu care se realizeaz asamblarea
i stabilitatea configuraiei proteinei oligomere fiind asigurate de principiul complementaritii subunitilor.
Un exemplu de protein oligomer l constituie componenta
proteic a hemoglobinei (Hb) - pigment sanguin - denumit globin.
Structura cuaternar a globinei este un tetramer constituit din
patru protomeri, respectiv din patru catene polipeptidice: 2 catene
identice (fiecare avnd 141 aminoacizi) i 2 catene identice (fiecare
avnd 146 aminoacizi). Cei patru protomeri se constituie n cte dou
subuniti, fiecare subunitate avnd o caten polipeptidic i una .

78

Asocierea celor patru protomeri pentru formarea structurii cuaternare a Hb este redat prin relaia:

monomeri

+2

monomeri
tetramer 22

n situaia n care anumii factori fizici sau chimici induc disocierea subunitilor, aceasta presupune totodat modificarea conformaional a proteinei i respectiv pierderea activitii ei biologice.
4.3.3.2. Proprieti generale a proteinelor
A. Proprieti fizico-chimice
Starea de agregare: n stare pur sunt substane solide, cristaline sau amorfe, stabile la temperatur obinuit, iar la t>50C se denatureaz.
Masa molecular variaz de la cteva mii la milioane de
Daltoni (1 Da este unitatea atomic de mas = 1,6710-24 g). Pentru determinarea masei moleculare se folosesc, ca metode curente, ultracentrifugarea i cromatografia de excludere molecular.
Solubilitatea proteinelor: proteinele globulare sunt solubile n
ap i n soluii saline, iar cele fibrilare sunt insolubile. Solubilitatea
proteinelor depinde de pH-ul i compoziia mediului.
Caracterul coloidal: datorit configuraiei macromoleculare
proteinele se comport n soluii diluate ca nite coloizi hidrofili (sisteme
heterogene constituite dintr-o faz dispersat - proteina care manifest
afinitate pentru mediul de dispersie reprezentat de ap).
79

Datorit caracterului coloidal proteinele nu dializeaz prin membrane semipermeabile i se denatureaz reversibil.
Disocierea proteinelor: proteinele sunt polielectrolii avnd
caracter amfoter (n mediu acid se comport ca baze, iar n mediu bazic
ca acizi).
Prezena concomitent a ionilor negativi carboxilat (COO) i a
ionilor pozitivi amoniu ( NH 3 ) pe un lan polipeptidic induce proteinelor un caracter amfiionic (ioni bipolari).
n funcie de structura primar a fiecrei proteine, ca i de pH-ul
mediului, pentru orice protein exist o valoare de pH, numit pH
izoelectric (pHi), la care sarcina global a proteinei este zero, starea
coloidal se destabilizeaz, iar proteinele prezint solubilitate minim.
La pH>pHi sarcina global a proteinei este negativ (anion), iar la
pH<pHi sarcina global a proteinei este pozitiv (cation)
Comportarea electroforetic: datorit caracterului amfoter
proteinele pot migra ntr-un cmp electric, la catod (K ) sau anod (A+), n
funcie de sarcina lor global.

H3 N

protein

COO

H+
HO

H3 N

H2N

cation

anion

COOH

COO

A+

Deplasarea n cmp electric a proteinelor d posibilitatea fracionrii lor prin metoda analitic denumit electroforez.
Trebuie menionat c la pHi proteinele nu migreaz n cmp
electric, deci mobilitatea electroforetic este nul.
Comportarea ca sistem tampon: caracterul amfoter al proteinelor d posibilitatea acestora de a se comporta ca sisteme tampon,
participnd astfel la meninerea pH-ului fiziologic.
Absorbia n ultraviolet: datorit prezenei n molecul a
aminoacizilor cu nucleu aromatic (tirozina, de exemplu) proteinele absorb
n domeniul ultraviolet la = 280 nm, proprietate utilizat pentru determinarea cantitativ a proteinelor prin metoda spectrofotometric.
B. Proprieti chimice
80

Reaciile chimice la care particip proteinele se pot clasifica n

patru categorii:
Reacii datorate prezenei legturilor peptidice, care pot fi la
rndul lor clasificate n:
a) reacii de hidroliz: sunt reaciile de scindare hidrolitic a legturilor peptidice, n mediu acid, bazic sau sub aciunea enzimelor proteolitice, cu punerea n libertate a aminoacizilor componeni ai macromoleculei proteice.
b) reacia biuretului: proteinele, ca urmare a prezenei legturilor
peptidice, reacioneaz cu ionii de Cu2+, n mediu alcalin, formnd
combinaii complexe de tip chelat de culoare albastr-violet.
Reacii datorate gruprii amino (NH2) libere:
Toi aminoacizii componeni ai proteinelor reacioneaz cu ninhidrina prin intermediul gruprii amino (care se elibereaz sub form de
amoniac) i formeaz o coloraie albastr-violet (cu cteva excepii, cum
ar fi: prolina, cisteina, hidroxiprolina).
Reacii de precipitare:
n funcie de natura reactivilor de precipitare, proteinele precipit
reversibil i ireversibil.
Precipitarea reversibil (salifierea) se realizeaz n prezena unor
concentraii mari de electrolii tari, (NH4)2SO4 sau Na2SO4, fr modificarea structurii spaiale, iar dup ndeprtarea agenilor chimici de precipitare proteinele revin la starea lor nativ, fr modificarea proprietilor
biologice ale acestora.
Precipitarea ireversibil este nsoit de modificri profunde ale
structurii proteinelor, care se denatureaz i nu se mai pot redizolva,
rmnnd n stare precipitat. Precipitarea ireversibil se poate face cu
acizi minerali concentrai (HNO3, HCl), cu acizi organici (acid tricloracetic, picric, sulfosalicilic), cu sruri de metale grele (Pb2+, Hg2+) sau cu
solveni organici (aceton, alcool).
Reacii datorate catenelor laterale: sunt reacii chimice n
care sunt implicai radicalii provenii de la aminoacizii ce alctuiesc
structura primar a unei proteine. Aceste reacii sunt diverse, n funcie de
natura catenei laterale (esterificare, alchilare etc.)
C. Proprieti imunologice. Reacia antigen-anticorp
81

Procesele imunologice se definesc ca reacii de aprare a organismului mpotriva unor microorganisme, toxine sau chiar celule ale organismului care au dobndit caractere anormale.
Sistemul imun la om i mamifere cuprinde un ansamblu de
macromolecule circulante specifice (anticorpi) i nespecifice (complement, lizozim), precum i celule imunocompetente: properdin, limfocite
(de tip T i B), leucocite, macrofage.
Sistemul imun asigur realizarea reaciei de aprare a organismului definit ca rspuns imun. n rspunsul imun umoral sunt implicate proteine oligomere numite anticorpi sau imunoglobuline biosintetizate de limfocitele B (produse n mduva osoas) ca rspuns la ptrunderea n organism a unor proteine strine numite antigeni.
Limfocitele T (produse n timus i n mduva osoas) intervin n
imunitatea mediat celular, interacioneaz cu antigenul i prolifereaz
masiv; o parte din ele rmn ca celule cu memorie imunologic, n timp
ce alt parte iniiaz distrugerea antigenului prin cooperare cu limfocitele B.
Antigenul (Ag) sunt macromolecule strine pentru organismul
n care au ptruns i care o dat introduse n organism, pe cale natural
sau injectare, declaneaz biosinteza unor proteine specifice de autoaprare numite anticorpi.
Antigenul reacioneaz cu anticorpii formai, determinnd reacia
antigen-anticorp, reacie prin care este anihilat aciunea nociv a antigenului.
Cei mai muli antigeni sunt proteine, peptide, poliglucide sau acizi
nucleici.
Antigenii conin la suprafa secvene structurale numite determinani antigenici sau epitopi, care sunt recunoscute de ctre anticorpi
specifici. Putem spune c antigenul este polivalent, iar determinanii antigenici sunt diferite grupri chimice (NH2, COOH, OH, SH) sau radicali ai unor aminoacizi ciclici.
Figura 4.9 - Reprezentarea schematic
a unui antigen
(1, 2, 3, 4 sunt determinani antigenici)

82

 Anticorpul (Ac) sau imunoglobulinele (Ig) sunt substane de

natur proteic cu rol de aprare, a cror biosintez este declanat de
ctre antigen i care posed capacitatea de a reaciona specific cu antigenul care a provocat formarea lor.
Sinteza anticorpilor constituie rspunsul imun n cadrul reaciei
de aprare a organismului mpotriva antigenilor, iar procesul biochimic de
formare a anticorpilor se numete imunizare.
Sinteza anticorpilor se realizeaz exclusiv de ctre limfocitele B,
iar un antigen declaneaz producerea unei grupe de anticorpi care sunt
api s reacioneze cu determinani diferii de pe molecula antigenului.
Spre deosebire de antigeni, anticorpii sunt bivaleni, molecula
lor coninnd dou situs-uri sau zone de combinare (paratrop) la nivelul crora se leag antigenii.

Figura 4.10 - Reprezentarea schematic a unor anticorpi divaleni

Din punct de vedere structural molecula de imunoglobulin este o

protein tetramer constituit din dou lanuri polipeptidice grele
identice (H-heavy) i dou lanuri uoare (L - light) identice legate
prin legturi disulfurice intercatenare, fiecare din lanuri avnd dou regiuni distincte: una variabil i alta constant.
Lanurile grele sunt prevzute cu o regiune flexibil (regiune balama) care conine dou fragmente identice Fab (antigen binding
fragment), susceptibile pentru legare la antigen i fragmentul Fc
(crystallizable frag-ment), uor cristalizabil i incompatibil pentru legare
la antigen.
Ag

Ag

H2N

NH2
Fab 1

H2N

83 ab
F 2

NH2
Lan uor (L)
COOH

HOOC
Fc1

Fc2
HOOC

COOH

Lan greu (H)

Glucide

Figura 4.11 - Schema structural a unei molecule de anticorp

Reacia antigen-anticorp este procesul imunologic de aprare a

organismului i se manifest prin neutralizarea antigenilor ptruni n
organism. Ea este stereospecific, are la baz complementaritatea epitopparatop i este nsoit de formare de complexe moleculare (precipitine)
cu structur ca de reea, ce pot fi solubile sau insolubile.
Legturile din complexul Ag-Ac sunt legturi slabe (electrovalente, de hidrogen, legturi Van der Waals), iar interacia dintre antigen i
anticorp este caracterizat prin procese de precipitare sau de aglutinare
n urma crora se instaleaz o stare de rezisten specific, denumit
stare de imunitate. Deci produsul reaciei Ag-Ac este un complex
imun, inactiv, conform reaciei:
Ag + Ac

Ag - Ac
Complex imun

84

Figura 4.12 - Diagrama schematic a complexului Ag-Ac

4.3.3.3. Proteine cu importan biologic

Ipoteza c n organismele vii exist aproximativ zece miliarde de
tipuri de proteine ne ndreptete s subliniem imposibilitatea descrierii
i caracterizrii lor n totalitate. Totui s-a ncercat o clasificare general a
proteinelor n funcie de morfologia molecular i de solubilitate, astfel:
HOLOPROTEIDE (PROTEINE)

1. PROTEINE GLOBULARE
(SOLUBILE):
PROTAMINE
HISTONE
ALBUMINE
GLOBULINE
PROLAMINE
GLUTEINE

2. PROTEINE FIBRILARE

A. INSOLUBILE
(SCLEROPROTEINE):
KERATINE
FIBROINE
COLAGENE

85

B. SOLUBILE:
FIBRINOGEN
MIOZINA
ACTINA
TROPOMIOZINA
TROPONINA

1. Proteinele globulare se gsesc n celul sub form solubil n

citoplasm, n faza lipidic a membranelor celulare, au form elipsoidal
sau sferic i sunt solubile n ap.
n proteinele globulare secvenele cu structur secundar organizat alterneaz cu secvene fr structur organizat, care permit nfurarea macromoleculei proteice sub forma unui ghem.
Dintre proteinele globulare, cele mai simple sunt protaminele (cu
M 5 KDa, de natur exclusiv animal - intr alturi de acizii nucleici n
cromatina din celulele spermatice ale petilor) i histonele (cu M 20
KDa, se gsesc n stare liber n leucocite i sperma petilor sau asociate
cu acizii nucleici n celulele glandulare, n eritrocite i pot fi implicate n
reglarea activitii genelor).
Albuminele sunt proteine globulare cu mas molecular mare,
uor solubile n ap, soluii saline, acizi i baze diluate. Au structur
teriar, precipit numai n prezena soluiilor saturate de (NH4)2SO4 sau
Na2SO4, iar prin nclzire la 60 - 70C coaguleaz.
Sunt rspndite n citoplasm i n diferite lichide i produse biologice, cum ar fi:
n plasma sanguin (50 - 60%): serum albuminele;
n lapte: lactoalbumina;
n albuul de ou: ovalbumina;
n esutul muscular: mioalbumina;
n semine de leguminoase: legumelina.
n organismul animal albuminele ndeplinesc urmtoarele funcii:
- regleaz presiunea osmotic a sngelui i a pH-ului sanguin;
- asigur transportul unor substane ca: acizi grai, biliari sau
unele medicamente;
- constituie rezerv de proteine.
Globulinele au mas molecular mai mare dect albuminele
(M 104 - 105 Da) i cristalizeaz mai greu dect acestea; sunt insolubile
n ap, dar solubile n soluii slab saline i slab alcaline; precipit n soluii semisaturate de (NH4)2SO4 (50%) i se denatureaz termic ceva mai
greu dect albuminele.
n organismul animal se gsesc rspndite n urmtoarele lichide,
esuturi i produse biologice:
86

 n plasma sanguin (38 - 48%): serumglobuline;

n lapte: lactoglobuline;
n ou: ovoglobuline;
n muchi: miozina (protein contractil).
Globulinele din plasma sanguin sunt heterogene, separndu-se
prin electroforez n mai multe fraciuni: 1, 2, 1, 2, i -globulinele
(n acestea din urm se includ anticorpii).
Deasemenea, componenta de natur proteic a diferitelor heteroproteide, cum ar fi: hemoglobina, mioglobina sau citocromii sunt globuline.
Prolaminele i gluteinele sunt proteine globulare de natur
exclusiv vegetal, avnd coninut ridicat de acid glutamic i aspartic. Se
gsesc n boabele de gru, secar, ovz, porumb.
2. Proteinele fibrilare se prezint sub form de molecule filiforme (alungite) care confer organismului rol de susinere, protecie i
rezisten mecanic.
n organism se gsesc n stare solid i intr n constituia esutului
conjunctiv, de susinere i epidermic. Sunt rezistente la aciunea soluiilor
saline, acide sau alcaline i nu sunt hidrolizate de enzimele proteolitice.
Din proteinele fibrilare insolubile (scleroproteine) fac parte:
keratinele care intr n constituia epidermei, prului, coarnelor, copitelor. Sunt proteine cu sulf, insolubile n ap i n soluii saline;
fibroina din mtasea natural;
colagenele: sunt componente proteice principale ale esutului
conjunctiv, ligamente, tendoane, cartilagii, piele i n general ale tuturor
esuturilor i organelor. Sunt insolubile n ap, rezistente la aciunea
enzimelor proteolitice, iar prin fierbere cu apa fibrilele de colagen sufer
modificri structurale profunde, cu desfacerea legturilor intercatenare i
a triplului helix i transformarea lor n gelatine, solubile i hidrolizabile
de ctre enzimele proteolitice;
elastina intr n structura fibrelor elastice din artere i tendoane, dar n comparaie cu colagenul are elasticitate redus (asemntoare cu cea a cauciucului). Nu se transform n gelatine i este degradat
de enzima elastaz din extractele pancreatice.

87

Proteinele fibrilare solubile se gsesc n snge i n esutul muscular i intervin n procesul de coagulare a sngelui sau n contracia muscular.
Fibrinogenul este o protein fibrilar solubil, hexamer (format din dou lanuri , dou i dou ), cu rol esenial n procesul de
coagulare a sngelui.
Conversia fibrinogenului solubil n fibrin insolubil se realizeaz conform schemei:
Trombina

FIBRINOGEN
(SOLUBIL)

Ca2+

Fibrinaz

FIBRIN

TROMBUS (CHEAG)

(INSOLUBIL,
SOLID)

Acest proces este un lan ntreg de reacii enzimatice care implic

cel puin 10 factori i care reprezint procesul de coagulare a sngelui.
Miozina este o holoproteid cu structur mixt (globular i
fibrilar) care constituie suportul biochimic al contraciei musculare
datorit proprietilor sale contractile i mai ales enzimatice (activitate
ATP-azic). Exist dou tipuri de miozine: I i II, dar n filamentele
musculare groase a fost identificat doar miozina de tip II. Ea are mas
molecular mare i este format din trei catene polipeptidice nfurate
helicoidal i strnse laolalt ntr-o configuraie rsucit: fiecare din cele
trei helixuri paralele se nfoar ntr-un segment terminal cu aspect globular, la una din extremitile moleculei.
Un filament de miozin este format dintr-un mnunchi de 80
molecule, decalate aproximativ 6 nm una fa de alta, avnd la extremiti
segmentele voluminoase (globulare) care formeaz proiecii de degete
dispuse n spiral n jurul mnunchiului. Aceste degete oscilante (de
fapt extremitile cu aspect globular) pot lega filamentele de actin, formnd complexul actomiozina.

88

Figura 4.13 - Miozina: seciune transversal i longitudinal

Actina este protein muscular contractil, localizat la nivelul

filamentelor subiri; sub aspect structural este un polimer constituit din
subuniti globulare (G-actina), cu M = 50 - 60.000 Da, prin polimerizarea crora (la concentraii saline fiziologice) au rezultat filamente de
F-actin. Fiecare filament este constituit din dou lanuri nfurate n
dublu helix, orientate n acelai sens i conin fiecare 300 - 400 monomeri.

Figura 4.14 - Filament de F-actin

n procesul contraciei musculare, capetele globulare ale miozinei

(proieciile de degete) se aga de situsurile active ale filamentelor de
F-actin. La acest proces particip i tropomiozina i troponina, polipeptide ce mediaz reglarea contraciei prin intermediul ionilor de calciu.
Datorit faptului c 18 - 22% din greutatea esutului muscular o
reprezint holoproteidele, s-a ncercat o clasificare a proteinelor fibrei
musculare n funcie de localizarea lor histologic:
a) Proteinele stromei sunt proteinele care intr n compoziia
membranei propriu-zise a fibrei musculare (denumit sarcolem), precum
i n compoziia esutului conjunctiv care unete fibrele musculare n fas89

cicule. Acestea sunt: colagenul, elastina i reticulina, mucine i mucoine (acestea din urm asigurnd alunecarea fasciculelor);
b) Proteinele miofibrilare sunt proteinele structurale ale esutului
muscular care au rol att n activitatea muchiului viu, ct i n comportarea muchiului dup sacrificarea animalului, respectiv n stadiul de rigiditate i maturare a crnii. Aceste proteine miofibrilare sunt reprezentate
de miozin, actin, tropomiozin, troponin, paramiozin, metamiozin, contractin;
c) Proteinele sarcoplasmatice cuprind grupul de proteine din
fluidul intracelular (sarcoplasm), fluid care nvelete miofibrilele dispuse paralel din alctuirea fibrei musculare. Aceste proteine contribuie la
determinarea unor caracteristici organoleptice ale crnii: gustul, culoarea,
mirosul. Din proteinele sarcoplasmatice fac parte: miogenul, mioalbumina, mioglobulina, globulina X, oximioglobina (aceasta din urm se
afl n profunzimea muchiului i d culoare roie).
4.3.4. HETEROPROTEIDE
Heteroproteidele sunt proteinele conjugate, adic acele proteide
alctuite dintr-o component proteic (aminoacizi) i o component
neproteic, numit i component prostetic, reprezentat de radicali ai
acidului fosforic, ioni metalici, glucide, lipide, acizi nucleici, pigmeni.
n funcie de natura gruprii prostetice, heteroproteidele se clasific astfel:
HETEROPROTEIDE
1. METALPROTEIDE:

4. LIPOPROTEIDE:

FERITINA
HEMOSIDERINA
SIDEROFILINA
TRANSFERINELE
CERULOPLASMINA
AZURINA
ANHIDRAZA CARBONIC

DE DENSITATE NALT
(HDL)
DE DENSITATE JOAS
(LDL)
DE DENSITATE
INTERMEDIAR (IDL)
DE DENSITATE FOARTE
JOAS (VLDL)
CHILOMICRONII

2. FOSFOPROTEIDE:

5. CROMOPROTEIDE:
90

 CAZEINELE
VITELINELE

HEMOGLOBINA (Hb)
MIOGLOBINA I DERIVAII
SI
CROMOPROTEIDE
NEPORFIRINICE

3. GLICOPROTEIDE:

6. NUCLEOPROTEIDE:

HAPTOGLOBULINE
OVOMUCOIDUL
OVOMUCINA
AVIDINA
LIZOZIMUL

ACIZI NUCLEICI

1. METALPROTEIDELE sunt heteroproteide a cror component prostetic este un ion metalic, cum ar fi: Fe2+, Fe3+, Cu2+, Co2+,
Mg2+, Zn2+ etc. Ionul metalic se leag de componenta proteic prin legturi covalente i covalent-coordinative, formnd o structur stabil de
chelat. Metalul poate stabili legtura covalent-coordinativ cu diferite
grupri chimice din structura lanului polipeptidic sau cu molecule mici
care se afl n apropierea ionului metalic, numite liganzi.
Exemple de metalproteide:
Feritina - conine 23% Fe, predomin n ficat, splin, mucoasa
intestinal i mduva osoas i reprezint depozitul de fier din
organism;
Hemosiderina - conine 37% Fe, se gsete n sistemul
reticulo-endotelial i are rol n meninerea sideremiei n limite
fiziolo-gice n anemia feripriv;
Siderofilina - conine Fe, se afl n splin i are rol de transportor de fier n organism;
Transferina - conine Fe, Cu i Zn, se afl n plasma sanguin
i are rol de transportor de fier, cupru i zinc n organism;
Ceruloplasmina - conine Cu, se afl n plasma sanguin i are
rol de transportor al cuprului n organism i n procesele de
oxido-reducere din organism (de exemplu: oxideaz vitamina
C);
Azurina - conine Cu, se gsete n unele bacterii i este similar cu ceruloplasmina;
Anhidraza carbonic este heteroproteid cu Zn2+ sau Co2+ i se
gsete n eritrocite.
91

2. FOSFOPROTEIDELE sunt heteroproteide a cror component prostetic este reprezentat de radicalul acidului ortofosforic (PO3H2).
Acest radical se leag de componenta proteic prin intermediul aminoacidului serin (i rezult fosforilserina) sau prin intermediul aminoacidului treonin (i rezult fosforiltreonina).
HOOC
NH2
NH CH CO

H2C O PO3H2

COMPONENTA
PROTEIC
COMPONENTA
PROSTETIC

Figura 4.15 - Schema unei fosfoproteide

Prezena radicalului fosforil (PO3H2) n molecula acestor heteroproteide, le confer acestora caracter acid i deci proprietatea de a forma
sruri de calciu sau potasiu.
Exemple de fosfoproteide:
Cazeinele sunt heteroproteidele din lapte i constituie cca 80%
din proteinele laptelui. Sunt substane heterogene care cuprind
4 fraciuni denumite: , , i -cazeine, care difer ntre ele
prin coninutul n fosfor, prin raporturile cantitative ntre aminoacizi, prin mobilitatea electroforetic i punct izoelectric.
Compoziia cazeinei variaz de la o specie la alta, astfel
cazeina uman are un coninut mai ridicat de sulf, deoarece
conine cistein i glucide ntr-o mai mare proporie dect laptele de vac, n timp ce laptele de oaie are un coninut mai mare
de acid sialic.
n lapte, cazeina se gsete n proporie de 90% sub
form coloidal (micele de cazein), iar restul de 10% este
cazeina solubil (format din mici agregate). Cele dou forme se gsesc ntr-un echilibru influenat de ionii de Ca 2+ prezeni n lapte. Prin fierberea laptelui cazeinele nu coaguleaz,
ele avnd rol de protecie asupra albuminelor i globulinelor
prezente n lapte; coagularea cazeinelor se poate face sub aciunea bacteriilor lactice (fermentaia lactic) sau cu cheag
(endopeptidaz cu activitate proteolitic secretat de stomacul
rumegtoarelor tinere). n procesul de coagulare este necesar
92

i prezena ionilor de Ca2+ i rezult un produs numit paracazeinat de calciu, componentul principal al brnzei.
Cazeinele sunt proteine complete, deoarece conin
toi aminoacizii eseniali, ceea ce confer laptelui atributul de
aliment cu valoare nutritiv complet.
Vitelinele sunt fosfoproteidele din glbenuul de ou, asociate
cu lecitinele, care se caracterizeaz printr-un coninut ridicat de
fosfor i de aminoacidul serin (peste 34%).
Vitelinele din glbenuul de ou se mai numesc i ovoviteline i au rolul de a furniza fosforul i aminoacizii necesari
dezvoltrii embrionului.
3. GLIPOPROTEIDELE sunt heteroproteide a cror component prostetic este de natur glucidic (oze, derivai ai ozelor, diglucide, poliglucide).
n aceste heteroproteide predominant este componenta proteic,
dar structura lor nu este pe deplin elucidat. Sunt macromolecule solubile
n ap, cu care formeaz soluii vscoase, pot fi acide (n esutul conjunctiv) sau neutre (n plasm, tractul gastrointestinal, urin), se gsesc n
amestec cu mucopoliglucidele sau asociate cu enzime i hormoni.
Glicoproteidele au o larg rspndire n esutul animal, predominnd n plasm, secreia mucoaselor, umoarea vitroas, cordonul ombilical, ou.
ndeplinesc n organismul viu diverse roluri biologice, cum ar fi:
sunt constitueni structurali ai celulelor, intervin n procesele de recunoatere de la suprafaa celulelor, n antigenitatea suprafeelor celulare, sunt componente ale matricelor extracelulare i ale mucinelor
tractusului gastrointestinal i urogenital.
Exemple de glicoproteide:
Glicoproteidele de grup sanguin (din eritrocite, care determin specificitatea de grup sanguin);
Haptoglobulinele (glicoproteide serice, dar i din fluidul cerebrospinal, lichid pleural);
Ovomucoidul i ovomucina (din ou);
Avidina (secretat de mucoasa oviductului);
Lizozimul (din ou i din alte esuturi animale).
93

4. LIPOPROTEIDELE sunt heteroproteidele a cror component prostetic este de natur lipidic (fosfolipide, trigliceride, colesterol liber sau esterificat). Componentele proteice ale lipoproteinelor se
numesc apolipoproteine, locul lor de sintez fiind n ficat i intestin.
ntre componenta proteic i cea prostetic se stabilesc legturi
ionice sau prin fore Van der Waals.
Lipoproteidele circulante care se gsesc n plasma sanguin
i limf se difereniaz n mai multe fraciuni pe baza densitii lor, astfel:
- lipoproteide de densitate nalt (mare) - HDL;
- lipoproteide de densitate joas (mic) - LDL;
- lipoproteide de densitate intermediar - IDL;
- lipoproteide de densitate foarte joas (foarte mic) - VLDL.
n lapte au fost identificate lactolipoproteide, iar n ou lipovitelina.
n organismul animal lipoproteidele ndeplinesc diverse roluri ca:
intr n constituia membranelor celulare, furnizeaz energie, particip la
transportul substanelor liposolubile (vitamine, hormoni, medicamente,
toxine etc.), particip la transportul de lipide necesare dezvoltrii embrionului din ou, regleaz procesele metabolice celulare.
5. CROMOPROTEIDE
Cromoproteidele sunt heteroproteidele a cror grupare prostetic
este o substan colorat (pigment) care confer culoare ntregii molecule.
Dup natura chimic a componentei prostetice, cromoproteidele se
clasific n:
a) cromoproteide porfirinice
b) cromoproteide neporfirinice.
a) Cromoproteidele porfirinice au drept component prostetic de baz un nucleu tetrapirolic, numit porfirin (porfin), substituit
cu diferii radicali (metil, vinil, propionil), rezultnd astfel protoporfirina. Cele 4 nuclee pirolice se leag ntre ele prin intermediul a patru
radicali metin (CH).
Protoporfirina reprezint componenta prostetic specific diferitelor cromoproteide de origine animal. Ea chelateaz un ion de Fe 2+ i
formeaz substana numit hem, care st la baza structurii urmtorilor
compui heminici: hemoglobina, mioglobina, hemenzimele etc.
94

 Hemoglobina (Hb) este pigment respirator care fixeaz

reversibil oxigenul i-l transport la esuturi, asigurnd
rezerva de oxigen necesar oxidrii celulare; este pigment
de culoare roie, component a hematiilor (reprezint 90%
din proteinele totale ale hematiilor); se afl concentrat n
citoplasm; ca structur este constituit din:
Hemoglobina (Hb) =

Componenta
Componenta
(Globina) +
(Hem)
proteic
prostetic

Structura hemului. Hemul este o feroprotoporfirin n care

atomul de Fe este divalent. Hemul este format din protoporfirina IX
(adic un inel tetrapirolic la care sunt ataate patru grupri metil, dou
vinil i dou lanuri propionat), care a chelatat un ion de Fe 2+ legat prin
legturi covalent coordinative de atomii de azot din ciclurile A i C i
prin legturi covalente cu atomii de azot din ciclurile B i D.
Totodat atomul de Fe din hem poate forma n plus i dou legturi adiionale: cu un rest de histidin din globin, cu apa (n hemoglobina redus), cu O2 (n hemoglobina oxigenat) sau CO, CN.

Figura 4.16 - Structura hemului

95

Structura globinei.
Globina este componenta proteic a hemoglobinei i ca structur
este o protein globular tetramer, n care cei patru protomeri se prezint ca perechi de catene polipeptidice de tip i de tip .
2 catene + 2 catene 22
tetramer

ntre catenele i se formeaz legturi electrostatice

(COO , NH3+), iar ntre catenele i legturi de hidrogen.
Molecula tetramer de globin conine 4 molecule de hem deoarece fiecare din cele 4 catene polipeptidice leag cte o molecul de hem.
Inelele de hem sunt plasate cte unul pe fiecare lan globinic ntr-o
cavitate (buzunar al hemului) format n regiunea hidrofil a globinei.

(A)

(B)

Figura 4.17 - Molecula tetramer de globin (A)

Organizarea cuaternar a structurii globinei (B)

Asamblarea structural a globinei cu hemul se realizeaz prin

urmtoarele legturi:
covalent-coordinative ntre Fe din hem i doi radicali de histidin aflai n poziii diferite ale catenei polipeptidice (un radical coordineaz direct fierul, iar cellalt se leag indirect prin
intermediul unei molecule de ap);
96

 interaciuni electrostatice ntre ionii carboxil (COO) de la

resturile propionice 6 i 7 i ionii NH3+ ai lizinei din structura globinei;
fore Van der Waals stabilite ntre radicalii metil i vinil ai
hemului cu radicali provenii de la aminoacizi nepolari din
globin (fig. 4.18).
Trebuie subliniat faptul c hemul este invariabil pentru toate
speciile animale, n timp ce globina prezint specificitate de specie.
Rolul hemoglobinei.
I. Funcia biologic esenial a hemoglobinei const n transportul oxigenului molecular (O2) de la plmni la esuturi (capilarele
tisulare) i dioxidul de carbon (CO2) de la esuturi la plmni. Acest
transport se realizeaz pe baza capacitii Hb de a forma cu O 2 un compus
disociabil denumit oxihemoglobina - Hb(O2)4.
Hb + 4O2

Hb(O2)4 + 4H2O

97

Figura 4.18 - Structura hemoglobinei (asamblarea globinei cu hemul)

Sensul acestei reacii reversibile depinde de presiunea parial a O2

i anume: la nivelul alveolelor pulmonare, unde presiunea parial a O 2
este mai mare, se formeaz oxihemoglobina, iar la nivelul capilarelor
tisulare (esuturi), unde presiunea parial a O2 este sczut, oxihemoglobina disociaz elibernd O2 necesar oxigenrii esuturilor.
98

Se numete putere oxiforic a Hb volumul de O 2 pe care Hb l

poate lega din 100 ml snge.
Legarea reversibil a oxigenului la hemoglobin se realizeaz
prin coordinarea acestuia de ctre ionul de Fe 2+: mai nti se rupe legtura covalent-coordinativ dintre Fe2+ i ap i apoi se interpune oxigenul
ntre radicalul de histidin din globin i Fe2+ din hem.

=N

HIS

Fe2+

=N

+ O2

HIS

Fe2+

O2

N
N
H O H

O2

+ H2O
N

HIS

Figura 4.19 - Mecanismul formrii oxihemoglobinei

n fapt, formarea oxihemoglobinei const n ruperea legturilor

ionice i de hidrogen dintre cele dou subuniti ale globinei, obinerea unei forme mai relaxate n care lanurile polipeptidice au o afinitate
mai mare pentru oxigen (rezult oxihemoglobina). Fixarea i eliberarea
oxigenului de ctre hemoglobin este un proces dependent de pH, cunoscut sub numele de EFECT BOHR.
II. Un alt rol esenial al hemoglobinei este transportul dioxidului
de carbon (CO2). Dioxidul de carbon rezultat n urma proceselor metabolice este transformat n ioni bicarbonat sau se fixeaz la hemoglobin (la
nivelul gruprilor amino libere din globin), formnd carbhemoglobina.
Hb NH2 + CO2

Hb NH COO + H+
grupare carbamino

III. Hemoglobina acioneaz ca sistem tampon: oxihemoglobinat alcalin (KHbO2)/oxihemoglobin acid (HHbO2).
Sub aceast form Hb particip la reglarea pH-ului sanguin.
99

S-au identificat mai multe tipuri de hemoglobine care caracterizeaz diferite stadii de dezvoltare: embrionar, fetal i postnatal. Aceste
hemoglobine difer prin structura primar a catenelor i sunt urmtoarele: hemoglobin fetal (HbF), hemoglobin embrionar (HbE), hemoglobin adult (HbA).
S-a identificat o familie de boli denumite generic hemoglobinopatii (care sunt cauzate de biosinteza de hemoglobine, cu structuri
anormale sau de biosinteza insuficient de hemoglobin normal), cum ar
fi: anemia hemolitic, anemia falciform, talasemiile.
Derivai ai hemoglobinei.
Carboxihemoglobina (HbCO) este un compus toxic, puin
disociabil, care rezult prin legarea monoxidului de carbon (n locul apei)
de ctre hemoglobin. Afinitatea Hb pentru CO este mai mare dect
pentru O2.
Formarea HbCO blocheaz funcia respiratorie i produce intoxicaii (respectiv asfixii) cnd atinge 50% concentraie n snge.
Heminele, care sunt derivai toxici ai hemoglobinei, conin
ionul Fe3+ i de aceea sunt incapabile de a lega oxigenul molecular.
Din categoria heminelor fac parte:
- Methemoglobina (HbM) rezult prin oxidarea Fe2+ din
hemoglobin la Fe3+ i stabilirea unei legturi covalente Fe3+ grupare
hidroxil (OH). Methemoglobina este un produs toxic. Ea se sintetizeaz
n eritrocite n cantiti mici, dar procesul este controlat de enzime specifice pentru ca HbM s nu depeasc valoarea critic de 0,4% din coninutul total de hemoglobin. Acest prag critic poate fi depit n intoxicaii
cu azotii sau azotai din pesticide, ngrminte, medicamente.
- Clorhemina rezult prin legarea covalent a unui atom de
clor de ionul Fe3+. Clorhemina nu conine globin i se poate prepara n
laborator prin aciunea acidului acetic i a clorurii de sodiu asupra hemoglobinei. Reacia este nsoit de formarea unor cristale caracteristice
(cristale Teichman), utilizate n criminalistic la depistarea urmelor de
snge.
Mioglobina (Mb) este cromoproteida de culoare roie prezent
n muchi. Ea prezint similitudini structurale i funcionale cu hemoglobina i are rol n transportul O2 la nivelul esutului muscular, fiind
totodat o form de rezerv a oxigenului necesar oxidrii celulare.
100

 Citocromii (b, c1, c2, a, a3) sunt cromoproteide a cror component prostetic este similar cu hemul din Hb. Sunt enzime din clasa
oxidoreductazelor, participnd la reaciile de oxidoreducere prin transfer
de electroni la nivel mitocondrial.
Hemenzimele sunt enzime din clasa oxidoreductazelor care au
n structura lor o component prostetic asemntoare hemului din structura Hb.
b) Cromoproteide neporfirinice.
Sunt acele heteroproteide la care gruparea prostetic este format
din pigmeni colorai n galben-portocaliu sau rou, numii carotenoide.
De aceea, cromoproteidele neporfirinice se mai numesc i carotenoproteide.
6. NUCLEOPROTEIDE
Nucleoproteidele sunt heteroproteide la care gruparea prostetic
este reprezentat de acizi nucleici.
n funcie de natura componentei proteice, nucleoproteidele se
clasific n: nucleoprotamine i nucleohistone, iar n funcie de natura
chimic a gruprii prostetice se clasific n: ribonucleoproteide, a cror
component prostetic este acidul ribonucleic (ARN) i deoxiribonucleoproteide, a cror component prostetic este acidul deoxiribonucleic (ADN).
- Ribonucleoproteidele sunt localizate n citoplasma celular,
cu precdere la nivelul ribozomilor i ntr-o anumit proporie n nucleul
celular;
- Deoxiribonucleoproteidele sunt localizate n nucleul tuturor
celulelor i reprezint componentele structurale ale cromozomilor i
genelor.
Nucleoproteidele constituie baza molecular a unor procese
biochimice fundamentale, ca: stocarea, transmiterea i exprimarea
informaiei ereditare, biosinteza proteinelor, diviziunea celular.
Acizii nucleici sunt biomacromolecule informaionale de importan biologic fundamental, cu urmtoarele caracteristici:
pstreaz, transmit i exprim caracterele ereditare;
sunt purttorii informaiei genetice ce se transmite din
generaie n generaie;
101

 constituie baza molecular a biosintezei proteinelor i

enzimelor;
reprezint baza molecular pentru diferenierea i reglarea celular;
reprezint baza molecular pentru constana replicrii
celulare.
Dup natura componentei glucidice coninut n molecul, acizii
nucleici sunt de dou tipuri:
a) cei care conin deoxiriboz i se numesc acizi deoxiribonucleici (ADN);
b) cei care conin riboz i se numesc acizi ribonucleici (ARN).
Structura acizilor nucleici.
Unitatea chimic structural de baz a acizilor nucleici este
nucleotidul, format dintr-o baz azotat (purinic sau pirimidinic),
pentoz (deoxiriboz sau riboz) i radical al acidului ortofosforic
(PO3H2).
Toate aceste componente structurale ale nucleotidului sunt legate
covalent n ordinea: baz azotat pentoz fosfat.
Nucleozidul este compusul constituit din dou uniti chimice:
baza azotat i pentoza.
n acizii nucleici nucleotidele componente se asambleaz succesiv
(se condenseaz) prin intermediul unor legturi 3'5'fosfodiesterice,
stabilite ntre pentozele nucleotidelor adiacente (bazele azotate nu sunt
implicate n alte legturi covalente dect cele pe care le stabilesc cu pentoza). Rezult astfel lanuri de nucleotide care alctuiesc polinucleotidele,
respectiv acizii nucleici ADN i ARN.
Structura schematic a acizilor nucleici este redat n figura 4.20.

102

ACIZI NUCLEICI (ADN i ARN)

(polinucleotide)

MONONUCLEOTIDE

RADICAL PO3H2

NUCLEOZID

BAZ AZOTAT

PURINICE:
adenin (A)
guanin (G)

PENTOZ

PIRIMIDINICE:
citozin (C)
timin (T)
uracil (U)

DEOXIRIBOZ

RIBOZ

Figura 4.20 - Structura schematic a acizilor nucleici

Exemple de baze azotate purinice:

Exemple de baze azotate pirimidinice:

103

 Exemple de pentoze:

Nucleotidele pot fi definite ca esteri fosforici ai nucleozidelor care

rezult prin esterificarea acidului ortofosforic cu o grupare hidroxil aparinnd pentozei.
n funcie de natura pentozei constituente, nucleotidele pot fi:
deoxiribonucleotide (conin 2deoxiDriboza) i ribonucleotide (conin Driboza). n deoxiribonucleotide acidul fosforic este esterificat cu
gruprile hidroxil din poziiile 3' i 5' ale deoxiribozei, iar n ribonucleotide acidul fosforic este esterificat cu gruprile hidroxil din poziiile
2', 3', 5' ale ribozei.
Exemplu de nucleotid monofosfat care conine adenin:

104

Nucleotidele sunt esteri att monofosforici, ct i di- sau trifosforici.

Gruprile fosfat sunt ataate la gruparea hidroxil din poziia 5' a
pentozei. Aceti compui se mai numesc nucleozid 5' fosfai sau
5' nucleotide.
Nucleozidele 5' fosfai (mono, di i trifosforilate) poart
diverse denumiri n funcie de natura bazei azotate, dar i n funcie de
natura pentozei i pot fi:
AMP i dAMP; ADP i dADP; ATP i dATP;
GMP i dGMP; GDP i dGDP;GTP i dGTP;
CMP i dCMP; CDP i dCDP; CTP i dCTP;
TMP i dTMP; TDP i dTDP; TTP i dTTP;
UMP ; UDP i UTP.
Semnificaia biochimic a ATP, ADP i AMP este extrem de
important, deoarece aceste nucleotide:
particip n procesele de conservare i utilizare a energiei
eliberate n cadrul metabolismului celular (se mai numesc
compui macroergici);
acioneaz ca substane donatoare sau acceptoare de grupri fosfat n diferite reacii metabolice.
Dintre ele ATP este compusul macroergic (bogat n energie) universal al materiei vii, care deine un rol biochimic decisiv n reaciile i
procesele metabolice. n structura lui chimic are dou legturi macroergice (Ai B), fiind acumulator i generator de energie.
105

Figura 4.21 - Structura ATP, ADP i AMP

Prin hidroliza ATP se elibereaz 8000 - 10000 cal/mol, energie

necesar desfurrii reaciilor metabolice.
Reacia:
2
ATP-aza

ATP

ADP + Pi(H3PO4) + E
1

implic dou aspecte: 1 - formarea ATP din ADP i Pi care reprezint

conservarea energiei chimice (E) rezultat din
metabolismul celular;
2 - hidroliza ATP (sub aciunea hidrolitic a
ATP-azei) n ADP i Pi care reprezint eliberarea i utilizarea energiei chimice stocate n
molecula de ATP.
Prin policondensarea mononucleotidelor se formeaz polinucleotidele, reacia avnd loc fie ntre nucleotide identice (i rezult homopolinucleotidele) sau ntre nucleotide diferite (i rezult heteropolinucleotidele).
Acizii nucleici sunt deci polinucleotide i anume: polideoxiribonucleotide (respectiv ADN) i poliribonucleotide (respectiv ARN).
106

Structura, rolul i proprietile ADN.

1. Structura primar a ADN este reprezentat de tipul, numrul
i secvena de baze azotate constituente ale mononucleotidelor. Cele 4
tipuri de nucleotide (d-AMP, d-GMP, d-CMP i d-TMP) se unesc printr-o
legtur fosfodiester stabilit ntre radicalul fosforic care esterific gruparea OH din poziia 5' a deoxiribozei din molecula unui nucleotid i
gruparea OH din poziia 3' a deoxiribozei aparinnd nucleotidului adiacent. Se realizeaz astfel o structur simetric 3' 5' n care nucleotidul
terminal are grupare hidroxil de la carbonul 3' liber i gruparea hidroxil
de la carbonul 5' fosforilat. S-a demonstrat c ntr-o molecul de ADN,
indiferent de specie, suma bazelor purinice (A + G) este egal cu cea a
bazelor pirimidinice (T + C), iar rapoartele A/T i G/T aproximativ egale
cu unitatea. De aceea s-a emis ipoteza c exist o complementaritate
ntre adenin i timin (se mperecheaz prin dou legturi de hidrogen A==T) i ntre guanin i citozin (se mperecheaz prin trei
legturi de hidrogen C G).
2. Structura secundar reprezint organizarea n spaiu, respectiv configuraia tridimensional a ADN.
Pe baza datelor experimentale obinute prin metoda difraciei cu
raze X, Watson i Crik au elaborat modelul dublu-helicoidal (dublu
helix orientat spre dreapta) al ADN. Acest model se caracterizeaz prin:
este constituit din dou catene polinucleotidice care se mpletesc n jurul unui ax comun, cptnd forma unei spirale duble
orientat spre dreapta;
catenele polinucleotidice sunt orientate antiparalel (respectiv
o caten este orientat pe direcia 5' - 3', iar cealalt pe direcia 3' - 5') i
sunt stabilizate prin multiple legturi de hidrogen realizate ntre baze
azotate complementare (A==T i CG), dar i prin interaciuni Van der
Waals ntre baze azotate vecine dintr-un lan polinucleotidic;
bazele purinice i pirimidinice sunt dispuse n interiorul
helixului, crend un mediu hidrofob, iar radicalii fosforici i deoxiriboza (polare) sunt orientate spre exterior;
o tur complet a dublului helix are diametrul de 34 i
conine zece perechi de baze azotate;
107

Figura 4.22 - Structura unui fragment dintr-o caten

a macromoleculei de ADN

datorit perechilor de baze azotate, fiecare din cele dou catene polinucleotidice diferite ale ADN devine replic complementar a
celeilalte;
succesiunea nucleotidelor (bazelor azotate) nmagazineaz
informaia genetic care se transmite nealterat din generaie n
generaie;
raportul molar A + T / G + C este un indice caracteristic
fiecrei specii (n general este supraunitar la animale i plante sau ntre
0,36 - 2,70 la bacterii).

108

(B)

(A)

Figura 4.23 - Modelul schematic dublu helix a ADN:

(A) - reprezentarea schematic a celor dou
catene polinucleotidice rsucite;
(B) - vedere din interiorul dublu helixului

Sunt descrise trei forme similare ale ADN-ului dublu helicoidal:

A, B i C. Forma B a ADN este biologic activ i se gsete n filamente
la o umiditate de 92%; forma B este convertit n A cnd umiditatea
filamentului se reduce sub 75%, iar forma C este asemntoare cu A,
numai c dimensiunea unei ture este de 33 .
n cromozomii celulelor procariote i eucariote, acizii deoxiribonucleici sunt mpachetai foarte compact, macromoleculele prezentnd
un aspect pliat. Aceast structur superncolcit este mult mai bogat n
energie liber i presupune disocierea legturilor de hidrogen i deschiderea dublului helix ntr-o mic regiune a macromoleculei.
109

3. Localizarea intracelular a ADN.

Aceasta difer sensibil n funcie de gradul de evoluie al sistemului biologic.
La procariote exist un singur ADN dublu catenar circular
supernfurat care constituie un cromozom circular asociat parial cu
membrana plasmatic (rezult un cromoid = aparat genetic simplu,
necompartimentat).
La eucariote aproximativ 98% din totalul ADN este distribuit
n nucleu (ADN - nuclear), unde se afl cuplat cu proteine bazice (histone sau protamine), formnd cromatina. Deasemenea au fost puse n
eviden cantiti mici de ADN mitocondrial (un ADN satelit localizat n
matricea mitocondrial).
4. Proprietile generale ale ADN.
Datorit existenei bazelor azotate, ADN absoarbe puternic n
domeniul ultraviolet (maxim de absorbie la 260 nm), dar aceast absorban este inferioar celei prezentate de bazele azotate individuale (efect
hipocrom = efect de mascare a bazelor azotate).
La temperatura de 80-90C macromolecula de ADN sufer
un proces de denaturare care presupune separarea celor dou catene ale
dublului helix, scderea vscozitii, masei moleculare i activitii optice,
dar creterea absorbiei n domeniul ultraviolet (efect hipercrom). Prin
anularea legturilor de hidrogen, bazele azotate nu mai sunt plasate n
poziii paralele suprapuse i astfel crete absorbia n U.V.
Dac se rcete lent o soluie de ADN denaturat, cele dou
catene polinucleotidice se pot recombina, reconstituind aproape perfect
structura bicatenar anterioar, cu conservarea proprietilor biologice ale
acestora (procesul se numete renaturare sau normalizare). Renaturarea
st la baza procesului de hibridare prin care una din catenele despiralizate ale ADN denaturate termic se poate recombina cu o caten de ARN,
rezultnd o molecul hibrid ADN ARN cu structur dublu elicoidal
(un astfel de hibrid cu via scurt se formeaz i n cazul replicrii ADN).
Sub aciunea unor endonucleaze (care acioneaz n interiorul
catenelor polinucleotidice) moleculele de ADN sunt scindate hidrolitic
rezultnd oligodeoxiribonucleotidele.
5. Funciile biologice ale ADN.
110

 ADN constituie baza molecular a conservrii i transmiterii din generaie n generaie a informaiei genetice;
Asigur i controleaz biosinteza proteinelor (enzimelor);
ADN asigur diferenierea i reglarea celular, precum i
constana replicrii celulare;
ADN reprezint baza molecular a mutaiilor genetice naturale sau induse.
Structura, rolul i proprietile ARN.
1. Structura primar a ARN este reprezentat printr-o singur
caten poliribonucleotidic, constituit dintr-un numr variabil de uniti structurale fundamentale, numite ribonucleotide.
Fiecare ribonucleotid are, n locul deoxiribozei din ADN, riboza i
n locul timinei, uracilul.
Cele 4 ribonucleotide (AMP, GMP, CMP i UMP) sunt dispuse
ntr-o secven specific prin stabilirea de legturi fosfodiester 3' - 5' ntre
ele.
2. Localizare, tipuri de ARN i funciile lor.
ARN se gsesc att n citoplasm, ct i n nucleu, predominnd
n prima.
Orice celul include 3 tipuri majore de ARN, care sunt urmtoarele:
ARN ribozomal (ARNr), localizat n cantitatea cea mai mare
n ribozomi i este implicat n biosinteza proteinelor. Se gsete combinat
cu proteinele, cu care formeaz complexe ribonucleoproteice, numite
ribozomi, care sunt de altfel locul de biosintez a proteinelor;
ARN de transport (ARNt) sau ARN solubil (ARNs), reprezint 15% din totalul ARN din celule i este localizat n partea solubil a
celulei (citosol). El leag specific fiecare din cei aproximativ 20 aminoacizi implicai n biosinteza proteinelor (reprezentnd forma lor de
transport) i i transfer la nivelul ribozomilor. Deci el funcioneaz ca
izoreceptor pentru aminoacizi, dar i ca adaptor care ordoneaz fiecare
aminoacid;
ARN mesager (ARNm) sau ARN de informaie (ARNi),
reprezint 2-4%, din totalul ARN celular i este mesagerul informaiei din
ADN cromozomial (fiecare molecul de ARN m determin biosinteza unei
111

singure molecule de protein). Att ARNt, ct i ARNm particip n procesul de biosintez al proteinelor i sunt considerai ca factori de legtur
informaional ntre ADN i proteine.
Diferitele tipuri de ARN sunt localizate n nucleul i citoplasma
celulelor organismelor animale, dar la celulele bacteriene ntreg coninutul de ARN este localizat numai n citoplasm.

112

CAPITOLUL 5
ENERGETICA ORGANISMULUI VIU
5.1. CONSIDERAII GENERALE
n organismul viu se petrec numeroase transformri interne, chimice i fizice, de o mare complexitate i care sunt nsoite de conversii de
energie. Dinamismul materiei vii este rezultanta unitii i interaciunilor
proceselor biochimice de degradare i sintez, procese care se petrec
simultan i care sunt nsoite de transformri energetice, respectiv:
energia generat prin reaciile biochimice de degradare a unor biomolecule este utilizat pentru biosinteza altor biomolecule sau este
transformat n diferite forme utile de energie necesar proceselor
vitale.
Energetica organismului viu (bioenergetica) studiaz legile
dup care decurg procesele de transformare a energiei n organismele vii
(procese generatoare i consumatoare de energie), respectiv procesele
bioenergetice.
Transformrile bioenergetice care sunt strict corelate cu procesele metabolice din organismul viu se realizeaz prin intermediul unor
substane chimice bogate n energie, denumite compui macroergici.
Aceti compui au proprietatea specific de a stoca energia chimic rezultat n procesele de degradare (catabolism) i de a furniza energie pentru
procesele de biosintez (anabolism) sau alte procese consumatoare de
energie.
Dup specific, transformrile de energie n organismele vii se pot
clasifica astfel:

113

TRANSFORMRI BIOENERGETICE
TRANSFORMAREA
ENERGIEI SOLARE N
ENERGIE CHIMIC
(STOCAT N MOLECULE ORGANICE:
GLUCIDE, LIPIDE,
PROTEINE):
- se realizeaz prin fotosintez
de ctre plantele verzi

TRANSFORMAREA
ENERGIEI CHIMICE DIN
MOLECULELE ORGANICE N ENERGIE UTILIZAT DE CTRE ORGANISM (N SPECIAL SUB
FORM DE ATP):
- se realizeaz la organismele
heterotrofe

TRANSFORMAREA
ENERGIEI CHIMICE
STOCATE N MOLECULELE DE ATP (SAU ALI
COMPUI MACROERGICI)
N ALTE FORME DE
ENERGIE (CALORIC,
MECANIC, OSMOTIC)

Sistemele biologice sunt sisteme deschise caracterizate prin

schimb permanent de materie i energie cu mediul ambiant.

5.2. COMPUI MACROERGICI

ANABOLISM

BIOMOLECULE: GLUCIDE, LIPIDE, PROTIDE, ACIZI NUCLEICI

CO2

INTERMEDIARI
METABOLICI

ENERGIE

ANABOLISM

ALIMENTE

CATABOLISM

Denumirea de compui macroergici sau de substane bogate n

energie este atribuit acelor molecule specializate n stocarea i eliberarea energiei. Toi aceti compui conin legturi fosforice macroergice.
Compusul macroergic cu rol central n energetica organismului
viu este adenozintrifosfatul (ATP), principal acumulator i furnizor de
energie n procesele metabolice. Schematic, rolul central al ATP n energetica celular se prezint astfel:

Pi (fosfat
anorganic)

ADP

ATP

ENERGIE

114

ADP

Rezult c: procesele de catabolism sunt procese generatoare

de energie, conservat i stocat n ATP conform reaciei:
ADP + Pi + E ATP
n acelai timp, procesele de anabolism sunt procese consumatoare de energie furnizat prin reacia de hidroliz a ATP:
ATP ADP + Pi + E
sau
ATP AMP + PPi + E
pirofosfat

unde: ADP = adenozindifosfat

AMP = adenozinmonofosfat
Pi = H3PO4
PPi = H4P2O7
Caracterul ATP de compus macroergic este conferit de particularitile sale structurale, respectiv de componenta pirofosfat, care nglobeaz dou legturi de tip anhidrid fosforic ce nmagazineaz o cantitate mare de energie.
legturi macroergice

O
O
O

HO P O P O P O ADENOZIN (BAZ AZOTAT + PENTOZ)

O
O
O

Figura 5.1 - Structura schematic a ATP

n reacia de hidroliz a ATP are loc scindarea legturilor de tip

anhidrid, cu eliberare de una sau dou molecule de H3PO4 i a unei
cantiti mari de energie chimic necesar celulei (8000 10000 cal/mol
ATP).
Pe lng ATP, pentru anumite procese biochimice sunt necesari
compui macroergici specifici (respectiv alte nucleotide trifosforilate),
derivai de la restul bazelor azotate, ca: GTP, CTP, UTP, TTP.
115

Fiecare celul conine ntr-un anumit moment doar o cantitate

redus de ATP, care dureaz foarte puin timp, i nu poate fi obinut din
afara celulei. Nici ATP, nici ADP i nici AMP nu pot difuza spontan prin
membrana celular. Fiecare celul trebuie s-i biosintetizeze singur
compuii macroergici necesari, realiznd o permanent recirculare a
fosforului i a compuilor fosforilai.
Una dintre cele mai otrvitoare substane, cianura, blocheaz
aproape toate procesele de sintez a ATP i moartea survine ntr-un timp
scurt deoarece necesarul energetic al proceselor care susin viaa nu mai
poate fi asigurat.
n afar de ATP, n cantiti mici i numai ca intermediari n procesul general de obinere a ATP mai apar i ali compui macroergici:
Fosfoenolpiruvatul sau enoilfosfatul (prezent n toate celulele
vii):
CH2
CH2

C O PO3H2 + HOH C OH + H3PO4 + energie

COOH
COOH
(forma enol instabil)

CH3 CO COOH
acid piruvic (forma ceto)

Creatinfosfatul sau fosfocreatina specific celor trei tipuri de

muchi (cardiac, striat, neted):
NH2
CPK

C = NH
+ ATP

N CH3

CH2 COOH
creatin

HN PO 32
C = NH

+ ADP

N CH3
CH2 COOH
creatinfosfat (CP)

Reacia este catalizat de enzima creatinfosfokinaz (CPK).

116

 Tioesterii derivai de la Coenzima A (R CO SCoA):

Acetia se formeaz n reacia dintre acizii carboxilici i coenzima
A (CoA SH), reacie dependent de ATP i catalizat de enzima
tiokinaz.
ATP

CH3 COOH + HS CoA

CH3 CO SCoA + AMP + PPi

H2O

acetil Coenzima A
(compus macroergic)

Prin reacia de hidroliz a acetil-coenzimei A rezult cca 7500

calorii/mol.

117

CAPITOLUL 6
ENZIME
6.1. CONSIDERAII GENERALE
Totalitatea reaciilor biochimice de degradare i sintez care determin metabolismul organismului viu sunt catalizate de molecule specializate, numite enzime. Enzimele sunt biocatalizatori, reprezentnd o
clas special de molecule proteice dotate cu activitate catalitic.
Ca biocatalizatori, enzimele prezint urmtoarele caracteristici
generale definitorii:
sunt cei mai eficieni catalizatori cunoscui (dei acioneaz
la concentraii foarte mici - de ordinul micromolilor - manifest o activitate extrem de intens);
sunt substane care micoreaz energia de activare a moleculelor asupra crora acioneaz (numite substrat S ), pe care le
transform n produi de reacie (P);
nu se consum i nu se transform n reaciile pe care le
catalizeaz;
catalizeaz numai reaciile termodinamic posibile;
nu modific starea final de echilibru a reaciilor, ci mresc
numai viteza cu care se realizeaz acest echilibru;
se caracterizeaz printr-o specificitate remarcabil a funciei catalitice, determinnd att mecanismele de producere a unui
anumit tip de reacie, ct i capacitatea de recunoatere numai a unui
anumit substrat;
unele enzime au proprieti reglatoare (respectiv pot discerne
i decide iniierea, desfurarea sau stoparea unei reacii sau succesiuni de
reacii biochimice).
118

6.2. STRUCTURA I CONFORMAIA ENZIMELOR

Deoarece enzimele sunt biocatalizatori de natur proteic, ele sunt
alctuite dintr-un numr foarte mare de aminoacizi dispui ntr-o configuraie spaial determinat specific pentru activitatea catalitic a
enzimei.
De aceea structura chimic de ansamblu a enzimelor este dictat
de nivelurile de organizare structural a proteinelor.
Unele enzime sunt monocomponente (holoproteide), fiind alctuite numai din macromolecula proteic care include i centrul catalitic
(situsul catalitic) unde substratul accede la enzim.
Majoritatea enzimelor sunt ns biocomponente (heteroproteide),
adic sunt proteine conjugate cu o grupare prostetic numit cofactor:
APOENZIMA (PROTEIN)
ENZIME
BICOMPONENTE
COFACTOR ENZIMATIC
(COENZIME, GRUPRI
PROSTETICE, IONI METALICI)

APOENZIMA este macromolecula proteic a enzimei, termolabil, nedializabil, dotat cu activitate catalitic. n structura apoenzimei este localizat situsul catalitic (zon distinct la care se leag specific
substratul de reacie) i situsul allosteric (n cazul enzimelor allosterice)
la care se leag efectorul allosteric.
Totodat apoenzima determin specificitatea de substrat n reacia pe care o catalizeaz i sufer modificri conformaionale n anumite
limite permisive.
COFACTORII ENZIMATICI sunt componente neproteice, micromolecule cu structuri chimice diferite, indispensabile pentru manifestarea activitii catalitice.
Cofactorul enzimatic este componenta termostabil, dializabil, nu reacioneaz dect n prezena apoenzimei, facilitnd aciunea
acesteia asupra substratului i determin mecanismul prin care apoenzima i exercit proprietile catalitice.
119

Dup natura chimic i modul de legare la apoenzim, cofactorii

se clasific n:
- coenzime (reprezentate prin micromolecule organice care se
ataeaz temporar la apoenzim, iar la finele reaciei se detaeaz de aceasta; n general sunt derivate de la vitamine, de tip
heminic sau de tip nucleotide trifosforilate;
- grupri prostetice (legate puternic de molecula apoenzimei prin
legturi covalente);
- ioni metalici (indispensabili pentru exercitarea funciei catalitice a unor enzime, care se leag sub form de chelat cu anumii aminoacizi din molecula apoenzimei).
SITUSUL CATALITIC este acea zon (regiune) existent n
apoenzim, la care se ataeaz n mod specific substratul de reacie
(S) pe care enzima l transform n produs de reacie (P).
Deci rolul situsului catalitic este:
a) recunoate i leag substratul (S) pe baza complementaritii stereochimice dintre enzim i substrat, formnd un
complex supramolecular activat enzim-substrat (ES);
b) transform substratul n produi de reacie (P);
[ES] E + P

E+S

Apoenzim
Cofactor
Situs catalitic

[ES]

c) asigur marea specificitate de substrat a enzimelor care au

capacitatea de a fi selective pentru un anumit substrat (deci de
a cataliza un singur tip de reacie biochimic). Unele enzime
manifest specificitate absolut de substrat, recunoscnd numai o anumit molecul, n timp ce altele recunosc o anumit
grupare funcional sau o anumit legtur chimic i transform mai multe molecule care conin gruparea sau legtura
chimic recunoscut, deci au specificitate relativ de substrat.
Situsul catalitic se caracterizeaz printr-o anume configuraie
spaial i printr-o structur specific care creeaz o compatibilitate
ntre situs i un anumit substrat ce se va ataa la acest situs catalitic.
120

Situsul catalitic este localizat n poriunea intern, hidrofob a

moleculei de apoenzim, este constituit dintr-un grup de aminoacizi
care difer prin funcia lor de ali aminoacizi componeni ai apoenzimei i mpreun cu regiunea din molecul la care se ataeaz cofactorul formeaz centrul catalitic al enzimei bicomponente. La enzimele
monocomponente, centrul catalitic este sinonim cu situsul catalitic.
Enzimele care exercit n afar de activitate catalitic i rol reglator se numesc enzime allosterice. Acestea conin n afar de situsul
catalitic i un al doilea situs numit allosteric, la care se pot lega anumite
molecule numite efectori allosterici sau modulatori allosterici (activatori sau inhibitori). Legarea acestor efectori allosterici la situsurile allosterice este selectiv i reversibil i moduleaz tranziiile moleculei de
enzim ntre dou conformaii posibile pe care aceasta le poate
adopta. Prin aceste tranziii (numite tranziii allosterice) se permite sau
nu accesarea situsului catalitic de ctre molecula de substrat. De exemplu,
fixarea activatorului la situsul allosteric induce modificri conformaionale discrete ale enzimei, care permit accesul substratului la situsul
catalitic prin modelarea conformaional adecvat a acestuia; n schimb,
fixarea inhibitorului allosteric produce distorsiuni ale conformaiei
tridimensionale ale enzimei, capabile s transforme arhitectura situsului
catalitic astfel nct s devin inacesibil substratului (fig. 6.1).
Efectorii allosterici sunt clasificai n efectori homotropici i
heterotropici.
Situs allosteric
pentru activator
Situs
catalitic

Substrat

Activator

Situs allosteric Protomeri

pentru inhibitor

Inhibitor
Situs catalitic inaccesibil
pentru substrat

Figura 6.1 - Conformaia activ i inactiv a unei enzime allosterice

121

Efectorii homotropici sunt reprezentai de nsi substratul allosteric care funcioneaz ca efector allosteric activator.
Efectorii heterotropici sunt molecule diferite de substrat, activatori sau inhibitori, iar efectul se numete heterotropic. Dac efectorul
este un produs final de reacie (D) dintr-o secven de reacii nlnuite n
care enzima allosteric (EA) catalizeaz prima reacie, efectorul heterotropic exercit o inhibiie de tip feedback. Acest tip de inhibiie intervine
n reglarea feedback:
EA

E2

E3

D.

Cnd concentraia lui D a atins valoarea necesar pentru celul, el

devine inhibitor allosteric pentru EA.
Deoarece enzimele sunt biocatalizatori de natur proteic, organizarea lor structural determin ncadrarea acestora n patru grupe principale:
- enzimele monomere, alctuite dintr-o singur caten polipeptidic cu o structur globular i care au mase moleculare mici; ele catalizeaz reacii de hidroliz;
- enzimele oligomere, alctuite din dou sau mai multe catene
polipeptidice identice sau diferite, asociate ntr-o structur de ansamblu
compact. Aceste lanuri polipeptidice sunt uor de separat i de aceea se
mai numesc i subuniti structurale identice sau diferite, numite
protomeri. Majoritatea enzimelor implicate n reacii metabolice sunt
enzime oligomere, n acestea fiind incluse i enzimele allosterice;
- izoenzimele reprezint forme moleculare multiple ale aceleiai
enzime, care catalizeaz aceeai reacie biochimic i au aceeai origine (celul, esut, lichid biologic dintr-un organism). Au ns proprieti
fizico-chimice i imunologice diferite.
Un exemplu de polimorfism enzimatic l reprezint enzima lactat
dehidrogenaz (LDH), enzim care catalizeaz transformarea acidului
lactic n acid piruvic i care se prezint ca un ansamblu de cinci izoenzime separabile electroforetic i denumite LDH1, LDH2, LDH3, LDH4,
LDH5;
- sistemele multienzimatice, formate dintr-un numr de enzime
asociate prin legturi necovalente care catalizeaz un ansamblu de reacii
nlnuite.
122

6.3. MECANISMUL REACIILOR ENZIMATICE

Aa cum am artat anterior, o reacie enzimatic decurge n dou
etape:
1) S + E

ES
COMPLEX ACTIVAT ENZIM-SUBSTRAT

2) ES E + P
E

Transformarea chimic S P se realizeaz prin intermediul

unei stri de tranziie a substratului (S*), care reflect o activare (excitare)
a moleculelor reactante; aceast stare de tranziie este de fapt o stare n
care moleculele de substrat sunt aduse la un nivel energetic superior, n
raport cu nivelul energetic iniial. Trecerea de la o stare iniial (S) la o
stare activat (tranzitorie), (S*), n procesul de transformare a substratului de reacie (S) n produs (P) necesit o anumit cantitate de energie
(E) numit energie de activare. Energia de activare (E) exprim diferena finit ntre nivelul de energie al strii de tranziie a moleculelor
activate i nivelul de energie a moleculelor aflate n stare iniial. Ea
desemneaz cantitatea de energie necesar pentru ca toate moleculele
dintr-un mol de substan s ating o stare activat. Ca orice catalizator,
enzimele scad energia de activare a moleculelor de substrat.

Figura 6.2 - Diagrama profilelor energetice a unei reacii necatalizate

i catalizate de enzima E
123

Din analiza diagramei rezult c n reacia catalizat energia de

activare (E) este mai mic dect n cazul reaciei necatalizate, fapt ce
denot c un procent mai mare de molecule se vor gsi n stare activat n
prezena enzimei, devenind astfel apte de a reaciona cu o vitez de
reacie mai mare, permind conversia rapid n produi.
n reaciile necatalizate energia de activare poate fi generat de
coliziunile care apar ntre molecule.
Dac moleculele care se ciocnesc sunt orientate corespunztor,
apare starea de tranziie activat care face ca reacia s aib loc. Rata de
formare a strii de tranziie determin viteza de reacie. Creterea temperaturii care crete viteza de deplasare a moleculelor favorizeaz coliziunea
acestora i implicit viteza de reacie. La temperatura fiziologic (cel mai
adesa 37C) cele mai multe reacii biochimice s-ar desfura cu viteze
imperceptibile. La temperaturile fiziologice, la un pH aproape neutru i la
concentraiile sczute ale reactanilor (molecule stabile) reaciile biochimice rapide necesare vieii nu s-ar fi putut desfura n absena enzimelor.
Viteza de desfurare a reaciilor enzimatice reflect activitatea enzimatic.

6.4. CINETICA ENZIMATIC

6.4.1. VITEZA DE REACIE; ORDIN DE REACIE
Cinetica chimic studiaz legile dup care se petrec n timp reaciile chimice sub raportul vitezelor de reacie, respectiv al evoluiei n
timp a transformrilor caracteristice unei reacii chimice.
Studiul cinetic al activitii enzimatice se bazeaz pe msurarea cantitativ a vitezei de desfurare a reaciei catalizate. Viteza de
reacie (v) reprezint cantitatea de substrat (S) care se transform n unitatea de timp (t) sau cantitatea de produs (P) care se formeaz n unitatea de
timp (t):
v

dS
dP

K[S]n
dt
dt

Viteza de reacie constituie un parametru de exprimare cantitativ a activitii enzimatice.

124

Sub raport cinetic, reaciile chimice enzimatice se difereniaz prin

ordinul cinetic de reacie (notat cu n), care exprim dependena vitezei
de reacie de concentraia reactanilor. Reaciile frecvent ntlnite sunt
de ordinul 0 i de ordinul nti:
- pentru n=0 (reacii de ordin 0) viteza de reacie este constant (v = KS0 = K) i enzima este saturat n substrat;
- pentru n=1 (reacie de ordinul nti) viteza crete direct proporional cu concentraia substratului (v = KSx).
6.4.2. FACTORI CARE INFLUENEAZ
ACTIVITATEA ENZIMATIC
1. Concentraia substratului
Creterea concentraiei substratului determin creterea vitezei de
reacie pn la o valoare denumit Vmax (viteza maxim), dup care
rmne constant:

Figura 6.3 - Reprezentarea grafic a vitezei de reacie enzimatic

n funcie de concentraia substratului

125

Km = constanta Michaelis este acea concentraie de substrat la

care viteza de desfurare a unei reacii enzimatice este jumtate din
viteza maxim.
Km este un parametru specific fiecrei enzime, care reflect afinitatea enzimei pentru substrat.
2. Concentraia enzimei
Viteza reaciei enzimatice este direct proporional cu concentraia
enzimei.
3. Temperatura
Temperatura influeneaz activitatea enzimatic i viteza de reacie. Cu creterea temperaturii viteza de reacie crete, dublndu-se la fiecare 10C, dar scade brusc atunci cnd se depete o anumit valoare, de
obicei 40C. Totui s-au descris enzime stabile la temperaturi ridicate, n
special la microorganisme. Pentru enzime care catalizeaz aceeai reacie,
dar izolate din surse diferite, pot fi descrise temperaturi optime diferite
(de exemplu -amilaza bacterian i cea pancreatic).

Figura 6.4 - Influena temperaturii asupra vitezei de reacie enzimatic

126

4. Influena pH-ului
Stabilitatea conformaiei unei proteine este influenat de starea
gruprilor ionizabile din catenele laterale ale aminoacizilor, iar n cazul
enzimelor funcionarea situsului catalitic depinde de conformaia global
a moleculei proteice. De asemenea ionizarea substratului poate fi o condiie sau o barier n calea aciunii enzimei. De aceea pH-ul afecteaz rata
de desfurare a reaciilor enzimatice. De obicei pH-ul optim de aciune a
unei enzime este identic cu pH-ul esutului, organului sau celulei n care
enzima acioneaz.

Figura 6.5 - Influena pH-ului asupra vitezei de reacie enzimatic

5. Aciunea efectorilor enzimatici

Efectorii enzimatici sunt substane de natur chimic foarte diferit, care modific n sens pozitiv sau negativ activitatea enzimelor (viteza
de reacie).
Dup aciunea pe care o exercit asupra activitii enzimatice, se
clasific n:
- efectori activatori;
- efectori inhibitori;
- efectori allosterici.
127

Efectori activatori:
- anioni - Cl activeaz -amilaza;
- cationi - K+, Ca2+, Mg2+, Mn2+;
- molecule - acizii grai activeaz lipazele.
Efectorii inhibitori abolesc total sau parial activitatea enzimatic.
Dup modul de aciune se mpart n dou grupe: inhibitori competitivi i
inhibitori necompetitivi.
a. Inhibiia competitiv are loc n cazul n care inhibitorul prezint
analogie structural cu substratul, competiionnd cu acesta pentru ocuparea situsului catalitic.
Exemplu: enzima succinatdehidrogenaza n care acidul malonic
este inhibitorul competitiv:
acid succinic HOOC CH2 CH2 COOH substrat
acid malonic HOOC CH2 COOH
inhibitor competitiv
b. Inhibiia necompetitiv este realizat de ageni care afecteaz
conformaia general a enzimei i implicit situsul catalitic. n aceast
manier acioneaz agenii denaturani ai proteinelor (cationii metalelor
grele, radiaiile, acizii organici).
Exprimarea cantitativ a activitii enzimatice se face prin uniti
de activitate (UI).
UI = cantitatea de enzim care catalizeaz transformarea a 1 M
substrat (sau producerea a 1 M produs de reacie) /min/l/ n condiii
optime de temperatur i pH.

6.5. CLASIFICAREA I NOMENCLATURA

ENZIMELOR
Actuala clasificare i nomenclatur a enzimelor se bazeaz pe
principiile i regulile stabilite de Comisia de enzime a Uniunii Internaionale de Biochimie (IUB). Clasificarea i nomenclatura enzimelor implic
un sistem numeric codificat, criteriul esenial de clasificare constituindu-l
tipul de reacie chimic catalizat de o anumit enzim. Identitatea fiecrei enzime este stabilit printr-un numr de cod i un nume sistematic.
Astfel, fiecare enzim este caracterizat printr-un numr de cod de forma:
EC W. X. Y. Z, unde:
128

EC - Comisia de enzime a Uniunii internaionale de biochimie;

W - clasa enzimatic din care face parte;
X - subclasa enzimatic - numrul general al substratului sau al
grupului de substrate asupra crora acioneaz enzima (de exemplu, oxidoreductazele care au X=2 acioneaz asupra gruprii alcool secundar a
substratului);
Y - numrul substratului specific sau al coenzimei;
Z- numrul de serie (ordine) al enzimei.
n funcie de natura reaciilor pe care le catalizeaz, enzimele au
fost clasificate n ase clase enzimatice; fiecare clas cuprinde subclase
enzimatice delimitate de natura substratului i coenzimelor implicate n
reacie (tabelul 6.1).
CLASELE DE ENZIME
OXIREDUCTAZE
-

catalizeaz reaciile care decurg cu

transfer de hidrogen, oxigen sau
electroni

catalizeaz transferul unor grupri

specifice de la un substrat donor la
un substrat acceptor

catalizeaz reaciile de liz a moleculelor de substrat sub aciunea apei

LIAZE
- catalizeaz scindarea legturilor
chimice fr aportul apei

TRANSFERAZE

IZOMERAZE
- catalizeaz reaciile de rearanjare
intramolecular a atomilor sau
gruprilor funcionale din molecula
substratului

HIDROLAZE

LIGAZE

catalizeaz reaciile de formare ale

unor noi legturi chimice cu consum
de ATP (GTP)

Numele sistematic indic natura substratului (donatorului), natura

acceptorului i tipul de reacie catalizat de enzim. De exemplu, enzima
cu numrul de cod EC 1.1.1.27 are numele sistemic lactatdehidrogenaza.
Numrul de cod al acestei enzime indic:
1 - Clasa enzimatic 1 (oxireductaze);
1 - Substratul general sau grupul de substrate - 1 (gruparea
asupra creia acioneaz substratul este CH OH);
1 - Coenzima NAD+;
129

 27 - numrul de serie (ordine) al enzimei.

Numele sistematic indic:
lactat - natura substratului (acidul lactic);
dehidrogenaza - reacia catalizat de enzim (dehidrogenare).
Tabelul 6.1
Clase enzimatice i exemple de subclase
Clasa enzimatic
Oxidoreductaze
Oxidaze
Dehidrogenaze
Oxigenaze
Peroxidaze
Transferaze
Metiltransferaze
Aminotransferaze
Kinaze
Fosforilaze
Hidrolaze
Fosfataze
Fosfodiesteraze
Proteaze
Liaze
Decarboxilaze
Aldolaze
Izomeraze
Racemaze
Mutaze
Ligaze
Carboxilaze

Caracteristici
Utilizeaz oxigenul ca acceptor de electroni, dar nu l
ncorporeaz n substrat
Utilizeaz ca acceptori de electroni alte molecule
dect oxigenul (ex. NAD+)
ncorporeaz oxigenul direct n substrat
Utilizeaz apa oxigenat (peroxidul de hidrogen) ca
acceptor de electroni
Transfer radicalul metil
Transfer gruparea amino de pe un aminoacid pe un
cetoacid
Transfer gruparea PO 32 de la ATP la substrat
Transfer gruparea PO 32 din fosfatul anorganic
pe substrat
Elibereaz radicalul PO 32 din substrat sub
aciunea apei
Cliveaz legturile fosfodiester de tipul celor din acizi
nucleici
Cliveaz legturile amidice de tipul celor din proteine
Produc dioxid de carbon n urma unor reacii de
eliminare
Formeaz aldehide ca urmare a unor reacii de
scindare
Determin interconversia stereoizomerilor D i L
Transfer grupe de atomi n cadrul aceleiai molecule
Utilizeaz ca substrat dioxidul de carbon
130

Sintetaze

Unesc dou molecule n reacii ATP dependente

6.6. CARACTERISTICILE I MECANISMUL DE

ACIUNE AL FIECREI CLASE DE ENZIME
6.6.1. OXIDOREDUCTAZE
Enzimele din aceast clas catalizeaz reacii redox caracterizate
prin:

a. transfer de hidrogen transhidrogenaze; dehidrogenaze;

b. transfer de electroni transelectronaze;
c. reacii de combinare a unui substrat cu oxigenul oxigenaze.
Exemple:
a. Dehidrogenazele funcioneaz n prezena unor coenzime care
joac rol de acceptori intermediari ntre substrat i produsul final.
Coenzimele oxidoreductazelor sunt derivai ai vitaminelor, coninnd n plus o pentoz i o baz azotat A adenina:
Nicotinamid vitamina PP niacina
Adenin baz azotat purinic
Dinucleotid
NAD+

131

Flavin vitamina B2 riboflavina

Adenin
Dinucleotid
FAD

132

Reaciile generale catalizate de dehidrogenaze sunt:

SH2 + NAD+
substrat
redus

coenzima
oxidat

dehidrogenaza
NAD+ dependent

substrat
oxidat

dehidrogenaza
FAD dependent

substrat
oxidat

SH2 + FAD
substrat
redus

+ NADH + H+

+ FADH + H+

coenzima
oxidat

coenzima
redus

coenzima
redus

b. Transelectronaze
- coenzima derivat de la hem

cit Fe2+
forma
redus

+e

cit Fe3+
forma
oxidat

c. Oxidaze - realizeaz transferul de electroni direct pe O 2 i se

numesc oxidaze citocromoxidaza sau catalizeaz ncorporarea oxigenului n molecula unui substrat i se numesc oxigenaze.
2 cit Fe2+ + O2

2e
citocrom C oxidaza

+2e

133

2 cit Fe3+ + O 22

O metalenzim care catalizeaz dismutaia anionului superoxid

.
O 2 radical liber al oxigenului extrem de reactiv i iniiator al fenomenelor de lipoperoxidare membranar n ap oxigenat compus stabil i
mai puin toxic este SUPEROXID DISMUTAZA SOD.
.
2 O 2 + 2H+

SOD

H2O2 + O2

Ea este localizat n citosol i este prima treapt de aprare a organismului viu mpotriva speciilor reactive ale oxigenului. Exist mai multe
forme ale acestei enzime:
- una hibrid, coninnd Mn/Fe, izolat din mitocondria de E.
Coli;
- alta coninnd Cu/Zn, existent n citosol i izolat din eritrocite bovine.

Figura 6.6 - Superpoziia liganzilor la situsul activ al Fe-SOD i Mn-SOD

d. Peroxidaze - utilizeaz H2O2 peroxidul de hidrogen sau apa

oxigenat ca donor de oxigen:
134

H2O2

peroxidaze

H2O + O

SH2 + O

S + H2O

substrat
redus

substrat
oxidat

________________________________
SH2 + H2O2

peroxidaze

+ 2H2O

Unele peroxidaze sunt heteroproteide seleniu dependente i ca

exemplu menionm glutation peroxidaza. n reaciile catalizate de peroxidazele care au glutationul drept cofactor, glutationul redus GSH funcioneaz ca donor de hidrogen i electroni, iar peroxizii ca acceptori.
2GSH GS SG
2R OH

ROOR

e. Catalaze - catalizeaz o reacie n care H2O funcioneaz att ca

donor, ct i ca acceptor de oxigen. Rolul catalazelor este de a detoxifia
celula de H2O2:
H2O2 + H2O2

catalaze

O2 + 2H2O

6.6.2. TRANSFERAZE
Aceste enzime transfer diferite grupri funcionale ntre un donor
i un acceptor. Gruprile amino, acil, fosfat, metil i glicozil sunt cel mai
adesea transferate.
Aminotransferazele transaminaze transfer o grupare amino de
pe un aminoacid donor pe un -cetoacid acceptor cu formarea unui
nou aminoacid i a unui nou -cetoacid.

COOH

O
CH NH2

CH2
+ CH3 C COOH

CH2

COOH

135

COOH

C=O

CH2

CH2

COOH

NH2

+ CH3 CH COOH

AAT
alanina
aminoacid 2

acidul piruvic
-cetoacid 1
acidul -cetoglutaric
-cetoacid 2

acidul glutamic
aminoacid 1

n acest caz AAT = GPT (glutamat piruvat transaminaza). Coenzima transaminazelor este un derivat al vitaminei B6 numit piridoxalfosfat. Ca donori de grupri amino funcioneaz aminoacizii urmtori:
acidul aspartic, glutamic, alanina, iar ca acceptori: acidul piruvic, oxalilacetic, -cetoglutaric.
Kinazele sunt enzime care catalizeaz transferul unui radical fosforic de la ATP sau alt nucleozid trifosforilat la o grupare OH sau NH2
acceptoare. Ele se mai numesc i fosfotransferaze. De exemplu, glucokinaza catalizeaz fosforilarea glucozei:

glucoza

glucozo-6-fosfat

Glicoziltransferazele sunt implicate n biosinteza poliglucidelor,

transfernd un radical glicozil pe o molecul poliglucidic preexistent
(primer):

136

Aciltransferazele sau transacilazele asigur transferul gruprii acil

(RCO) de pe un donor pe un acceptor. Coenzima transacilazelor se
numete Coenzim A (CoASH), molecul complex care conine un
radical provenit de la acidul pantotenic (vitamin din complexul B) fosforilat, un ADP i un radical de cisteamin:
acid pantotenic (vitamina din grupul B)
CoA SH

cisteamina H2N H2C CH2 SH

ADP

Gruparea tiol (SH) este gruparea activ la care se leag radicalul

acil. Unul dintre cei mai importani radicali acil este radicalul CH3CO
(acetil) care este transferat sub form de acetilcoenzim A (CH3COS
CoA). Acesta este un metabolit important, intervenind att n reacii
anabolice, ct i catabolice (caracter amfibolic):
137

Coenzima A

6.6.3. HIDROLAZE
n aceast clas sunt cuprinse foarte multe enzime care catalizeaz
reaciile de descompunere (scindare) a substanelor complexe n molecule
mai simple, numai cu participarea apei.
XOY + HOH

XOH + YOH

Exemple: esteraze: lipaze, fosfataze, ATP-aze;

glucidaze: amilaza, maltaza, lactaza;
peptidhidrolaze (proteaze): pepsina, tripsina, carboxipeptidaze etc.
6.6.4. LIAZE

138

Sunt enzime care catalizeaz scindarea diferitelor substrate fr

participarea apei. Ele acioneaz prin ruperea legturilor dintre diferii
atomi: CC, CN, CO, CS:

6.6.5. IZOMERAZE
Catalizeaz reaciile de transformare a unui substrat ntr-un izomer
al su:

glucoza

galactoza

6.6.6. LIGAZE sau SINTETAZE

Sunt enzime specific anabolice al cror scop l constituie unirea
mai multor substrate, avnd ca rezultat formarea unei substane mai
139

complexe. Reaciile catalizate de ligaze au loc numai n prezena unor

furnizori de energie (ATP, GTP, UTP) i se soldeaz cu formarea unor noi
legturi chimice:
COOH piruvat

carboxilaza
ATP + HCO3 + CO

CH3

acid piruvic

COOH

CO
+ ADP + H3PO4

CH2

COOH
acid oxalilacetic

140

CAPITOLUL 7
BIOCHIMIA PROCESELOR METABOLICE
7.1. CONSIDERAII GENERALE
Organismele animale au ca proprietate specific posibilitatea de a
lua din mediul nconjurtor substanele nutritive pe care le folosesc n
scopul biosintezei componenilor structurali i funcionali proprii, asigurndu-i astfel creterea, dezvoltarea, reproducerea. Acest lucru se
realizeaz printr-un numr mare de reacii chimice enzimatice care se
condiioneaz reciproc i care poart numele de metabolism.
Metabolismul reprezint ansamblul proceselor biochimice de
degradare (catabolism) i sintez (anabolism) din care rezult substane chimice necesare vieii. Se poate spune c metabolismul reprezint esena material a vieii, el realizndu-se n strns interdependen cu mediul ambiant.
Procesele metabolice presupun transformri energetice, fiind nsoite de generare (procese exergonice) sau de consum (procese endergonice). Se tie c sursa de energie pentru via este soarele i c energia
solar este transformat de plantele verzi n energie chimic n procesul
de fotosintez. Aceast energie chimic este stocat n molecule organice
(glucoz, alte glucide, trigliceride, proteine), preluate ulterior de organismele heterotrofe direct sau indirect din plante i degradate pn la CO 2 i
H2O cu eliberarea energiei chimice nmagazinate. O mare parte a acestei
energii este stocat sub form de compui macroergici (ATP), iar restul
este transformat direct n cldur. La rndul lor, aceti compui
macroergici sunt utilizai pentru biosinteza macromoleculelor proprii
organismului din precursori mai simpli, pentru efectuarea de lucru
mecanic (contracia muscular) i pentru transportul activ (lucru osmotic) prin membrane.
Putem spune c metabolismul const din dou procese unitare i
inseparabile, catabolism i anabolism, cu urmtoarele caracteristici:
141

METABOLISM
CATABOLISM (DEGRADARE):
n care compuii macromoleculari
sunt transformai n molecule simple

ANABOLISM (SINTEZ):
n care se formeaz macromolecule
proprii din precursori mai simpli

SE ELIBEREAZ

SE CONSUM

ENERGIE

ENERGIE

Acest circuit energetic (flux) este comun tuturor formelor de

via.
n ceea ce privete procesul de catabolism, acesta parcurge
urmtoarele etape:
PROTIDE

GLUCIDE

LIPIDE

AMINOACIZI

OZE

GLICEROL +
ACIZI GRAI

ACID PIRUVIC

CICLUL
KREBS

CO2

ATP
NADH (H+)
FADH2

COENZIME REDUSE

O2

H2O

CRMIZILE
EDIFICIULUI
MACROMOLECULAR
METABOLII
SIMPLI

ACETILCOENZIMA A
NH3

BIOMOLECULE
COMPLEXE
(COMBUSTIBILI)

RESPIRAIA CELULAR
ENERGIE
FOSFORILARE OXIDATIV
ATP
142

Rezult c n catabolism au loc reacii de oxidare la care particip

coenzimele reduse: NADH(H+), FADH2 i NADPH(H+) i rezult energie
sub form de ATP.
Anabolismul este procesul metabolic consumator de energie,
prin care se biosintetizeaz din precursori simpli (metabolii) provenii
din procesele de catabolism, biomolecule complexe. Anabolismul este
deci procesul invers catabolismului, n care au loc reacii de reducere la
care particip coenzimele oxidate: NAD+, NADP+ i FAD i care utilizeaz energie (ATP) pentru sinteza biomoleculelor complexe.

7.2. ASPECTE DE METABOLISM GLUCIDIC

Glucidele sunt biomolecule cu rol energetic i structural, sintetizate de plantele verzi, din compui simpli (CO2, H2O i energie solar), iar
n organismul animal ajung pe cale exogen (hran). Compuii gluci-dici
din hran asigur o mare parte din necesarul caloric pentru ani-male,
se depun (se acumuleaz) sau sunt convertite n alte biomolecule
necesare celulelor.
Metabolismul glucidic cuprinde:
- degradarea (catabolismul) glucidelor;
- biosinteza (anabolismul) glucidelor.
7.2.1. DEGRADAREA GLUCIDELOR
7.2.1.1. Digestia
Pentru a putea fi absorbite prin peretele intestinal, oligo- i
poliglucidele sunt supuse unei digestii prealabile sub aciunea unor
enzime din clasa hidrolaze i anume glucidaze.
Oligo- i poliglucidele care nu sunt hidrolizate enzimatic nu pot fi
absorbite, ajung n tractul intestinal inferior unde sunt preluate de bacterii.
Acestea, avnd mai multe tipuri de glucidaze dect organismele animale,
hidrolizeaz compuii glucidici pn la nivel de oze, pe care le folosesc n
metabolismele proprii i apoi elimin n intestin produi de metabolism ce
pot determina creterea motilitii intestinale i crampe.
143

Schema digestiei glucidelor cuprinde urmtoarele etape:

OLIGO- I POLIGLUCIDE

LA MONOGASTRICE

OZE

DEXTRINE

HIDROLIZ CHIMIC N
STOMAC (pH = 1,5 2,5) I
APOI N DUODEN SUB
ACIUNEA -AMILAZEI
PANCREATICE
OZE

ABSORBIA OZELOR PRIN PERETELE

INTESTINAL:
prin difuzie simpl (trioze, pentoze);
sub form de oze fosforilate (esteri fosforici ai
hexozelor)

PRELUAREA OZELOR (DUP CE UNELE AU FOST

DEFOSFORILATE) DE FLUXUL SANGUIN I
AJUNG PRIN VENA PORT LA FICAT, UNDE
TOATE OZELE SUNT TRANSFORMATE N
GLUCOZ

STOCAT SUB
FORM DE
GLICOGEN HEPATIC;

STOCAT N MUCHI
SUB FORM DE GLICOGEN MUSCULAR

144

LA POLIGASTRICE

HIDROLIZ ENZIMATIC SUB

ACIUNEA CELULA-ZEI, N
RUMEN I CONTI-NU N
INTESTIN

HIDROLIZ ENZIMATIC N
CAVITATEA BUCAL SUB
ACIUNEA -AMILA-ZEI
SALIVARE (pH = 6,8)

7.2.1.2. Glicogenoliza
n organismul animal glucoza este stocat sub form de glicogen,
de unde este eliberat n funcie de necesitile organismului. Glicogenul
hepatic constituie principala rezerv de glucoz imediat disponibil nu
att pentru necesitile proprii ale ficatului, ct pentru aprovizionarea cu
glucoz a creierului i eritrocitelor.
Glicogenoliza (catabolismul glicogenului) este procesul biochimic, enzimatic, prin care macromolecula de glicogen este scindat la nivel
hepatic sau muscular, cu formare n final de glucozo-6-fosfat, respectiv
glucoz. Glicogenoliza ncepe la capetele nereductoare ale lanurilor de
glicogen i este un proces de fosforoliz prin care sunt eliberate molecule
de glucoz fosforilate. Enzima care intervine n procesul de fosforoliz
este fosforilaza hepatic, care exist n dou forme :
- forma b puin activ;
- forma a foarte activ.
Iniierea glicogenolizei (respectiv activarea fosforilazei a) se afl
sub controlul unor hormoni pancreatici, adrenalina i glucagonul, ce
acioneaz corelat sau independent.
Glicogenul hepatic i muscular este stocat n citoplasm (sub
form de agregate granulare), unde exist pe lng enzima fosforilaz i
alte enzime implicate n scindarea legturilor C1-C6, respectiv o enzim
de deramifiere (glucantransferaza) i o glicozidaz.
Principalele etape ale glicogenolizei sunt redate n schema
urmtoare:
GLICOGEN (C6H10O5)n
H3PO4
(C6H10O5)n-1
+
1P)
DERAMI-

GLUCOZO-1-FOSFAT (GIZOMERIZARE SUB ACIUNEA

FOSFOGLUCOMUTAZ

FIERE

DEXTRINE
PUTERNIC
RAMIFICATE

FOSFOROLIZ SUB ACIUNEA

FOSFORILAZEI a

GLUCOZO-6-FOSFAT (G-6-P)
HOH
GLUCOZ + H3PO4
SNGE
ESUTURI
(GLICEMIA)

145

7.2.1.3. Glicoliza
Glicoliza este procesul de degradare enzimatic a glucozei, respectiv procesul complex de oxidare intracelular a glucozei n scopul
obinerii de energie sub form de ATP necesar celulelor eucariote,
vegetale i animale.
Acest proces se realizeaz prin dou ci metabolice:
I - glicoliza anaerob, care are loc n citoplasm, se desfoar
n prezena oxigenului (O2), dar fr participarea lui i const
n degradarea glucozei pn la acid lactic ca produs final,
rezultnd totodat o cantitate mic de energie sub form de
ATP;
II - glicoliza aerob, care se realizeaz n condiiile participrii
directe a oxigenului i const n degradarea glucozei pn la
produi finali: CO2, H2O i o cantitate mare de energie sub
form de ATP. Acest tip de glicoliz cuprinde mai multe etape:
a) degradarea glucozei pn la acid piruvic (prin reacii
comune cu glicoliza anaerob);
b) ciclul acizilor tricarboxilici sau ciclul Krebs, format dintr-o succesiune de reacii ce se desfoar n matrixul
mitocondrial;
c) lanul respirator (sistemul transportor de electroni sau
respiraia celular) cuplat cu fosforilarea oxidativ, proces
n care coenzimele reduse rezultate din ciclul Krebs sunt
oxidate de ctre oxigenul molecular, rezultnd ap i
energie stocat n molecula de ATP. Procesele sunt localizate n membrana mitocondrial intern.
I - GLICOLIZA ANAEROB
(ETAPELE DEGRADRII CITOPLASMATICE A GLUCOZEI)

Reprezint succesiunea de reacii enzimatice care se petrec n condiiile aprovizionrii insuficiente cu oxigen a esutului muscular. Este un
proces rapid de generare a unei cantiti relativ mici de energie, rezultnd
totodat i produi de metabolism ce pot fi utilizai n reacii de biosintez.
Reacia general a procesului de degradare anaerob a glucozei
este:
CH3
GLICOLIZ
ANAEROB

146

C6H12O6
glucoz

2HC OH + 2ATP

COOH
acid lactic

Enzimele care catalizeaz lanul de reacii enzimatice ce alctuiesc

glicoliza anaerob sunt localizate n citoplasm, unde este transferat i
glucoza printr-un proces de transport pasiv cu ajutorul unei proteine.
Pentru ca acest proces generator de energie s aib loc n celul,
trebuie ca moleculele combustibil s fie mai nti activate, adic s
treac ntr-o stare de energie mai ridicat.
Etapele glicolizei anaerobe sunt:
1. Formarea glucozo-1-fosfatului (activare):

2. Izomerizarea glucozo-6-fosfatului la fructozo-6-fosfat:

fructozo-6-fosfat

3. Formarea fructozo-1,6-difosfatului
147

4. Scindarea fructozo-1,6-difosfatului n triozofosfai:

5. Izomerizarea i stabilirea echilibrului ntre triozele fosforilate:

CH2 O PO3H2

CO

CH2OH

triozofosfatizomeraza

CHO

CHOH

CH2 O PO3H2

Echilibrul este deplasat spre formarea gliceraldehid-3-fosfatului

(GAP) care va intra n etapele ulterioare ale glicolizei; deci glucoza
2GAP.
6. Oxidarea GAP la acid 3-fosfogliceric are loc n dou etape
catalizate de dou enzime diferite:
a.
CHO

CHOH
+ H3PO4

CH2 O PO3H2

NAD+

NADH(H+)

CO O PO3H2

CHOH

gliceraldehid-3-Pdehidrogenaza

CH2 O PO3H2
acid 1,3-difosfogliceric

b.
148

CO O PO3H2

CHOH
+ ADP

CH2 O PO3H2

COOH

CHOH

+ ATP

fosfoglicerokinaza (Mg)

CH2 O PO3H2
acid 3-fosfogliceric

7. Formarea acidului 2-fosfogliceric:

COOH

CHOH

CH2 O PO3H2

COOH

fosfogliceromutaza

HC O PO3H2

CH2OH
acid 2-fosfogliceric

8. Formarea acidului 2-fosfoenolpiruvic:

COOH

HC O PO3H2

CHOH

COOH

HOH

enolaza

C O PO3H2
CH2
acid 2-fosfoenolpiruvic
compus energizat

9. Formarea acidului piruvic:

COOH

C O PO3H2 + ADP

CH2

COOH

piruvatkinaza

CO

+ ATP

CH3

Deoarece s-au format 2 trioze/mol glucoz 2 2 ATP/mol

glucoz = 4 ATP/mol glucoz.
Atunci cnd celula are nevoie urgent de energie sau atunci cnd
aprovizionarea cu oxigen este insuficient, acidul piruvic nu trece n
mitocondrie pentru degradarea final, ci rmne n citoplasm unde este
transformat n acid lactic.
10. Formarea acidului lactic:
149

COOH

CO
+ NADH(H+)

CH3

COOH

LDH

CHOH + NAD+

CH3
acid lactic

2 trioze/mol glucoz consum cei 2NADH(H+) rezultai din reacia 6, pentru formare de acid lactic.
Aceast ultim reacie ilustreaz fluxul coenzimei NAD+/
NADH(H+) ntre mai multe enzime independente:
S1H2
redus
enzima 1
S1
oxidat

S2H2
redus

NAD+
enzima 2
NADH(H+)

S2
oxidat

n cazul glicolizei anaerobe S1H2 = gliceraldehid-3-fosfat

S2H2 = acid lactic
Bilanul energetic al procesului de glicoliz anaerob:
din etapa 6 i 9 rezult 2 moli ATP pe fiecare trioz, ceea ce
nseamn 4 moli ATP n total;
n etapa 1 i 3 se consum 2 moli ATP;
n final 4ATP 2ATP = 2ATP/mol de glucoz.
n prezentarea anterioar, pentru simplificare, s-a pornit glicoliza
utiliznd drept combustibil glucoza, dar n muchi, din rezerva de glicogen muscular, glucoza este eliberat printr-un proces de fosforoliz sub
form de ester fosforic (G1P) care apoi trece n G6P. Se reduce
astfel consumul de ATP pe glicoliza anaerob cu un mol i n acest caz
bilanul energetic va fi:
4ATPrezultai 1ATPconsumat = 3 moli ATP/mol de glicogen.
150

Schema general a procesului de glicoliz anaerob

151

n afar de muchiul scheletic care n primele faze de efort funcioneaz anaerob, n organismul animal mai sunt i alte celule care produc
acid lactic, deoarece utilizeaz glicoliza anaerob ca furnizor energetic.
S-au descris celule din rinichi i din retin care funcioneaz virtual anaerob, ca i eritrocitele mature care neavnd mitocondrii folosesc aceeai
cale de obinere a ATP. Acumularea acidului lactic n celul este nociv,
ntruct scade pH-ul citoplasmatic, inhibnd enzimele, inclusiv cele din
glicoliz. De aceea el este eliminat n snge, care l transport la ficat,
unde este reconvertit n piruvat i apoi n glucoz. Procesul se numete
gluconeogenez, iar ciclul fiziologic prin care acidul lactic este metabolizat, ciclul Cori.
FICAT

SNGE

MUCHI

glicogen

glucoz

glicogen

glucoz

CO2 + H2O + E

4/5

glucoz

1/5

gluconeogeneza

ac.lactic

glicoliza
anaerob

ac.lactic

ac.lactic

FERMENTAIILE GLUCIDELOR
Procesul de degradare enzimatic a glucidelor de ctre microorganisme poart numele de fermentaie.
Fermentaiile sunt produse numai de ctre microorganismele
heterotrofe, care i asigur n felul acesta hrana, ct i energia necesar
nmulirii i dezvoltrii lor.
n funcie de caracteristicile microorganismelor, ct i n funcie de
produsul final rezultat, fermentaiile se pot clasifica astfel:
lactic (produs final acidul lactic)
- fermentaii anaerobe
alcoolic (produs final etanolul)
butiric (produs final acidul butiric)
152

acetic (produs final acidul acetic)

- fermentaii aerobe
citric (produs final acidul citric)
Fermentaia lactic (cenobioza) este procesul de degradare anaerob a glucidelor sub aciunea bacteriilor lactice. Bacteriile lactice transform glucoza n acid lactic dup un mecanism asemntor cu cel al
glicolizei anaerobe din muchi. Bilanul energetic al procesului fermentativ este de 2 moli ATP/mol glucoz.
Fermentaia lactic poate fi:
- homofermentativ, cnd pe lng acid lactic rezult cantiti
mici de alcool etilic, acizi volatili, substane de arome;
- heterofermentativ, cnd pe lng acid lactic rezult cantiti
mari de produi secundari, cum ar fi: etanolul, dioxidul de carbon.
Fermentaia lactic este utilizat n procesele de obinere a produselor lactate (iaurt, brnzeturi), n conservarea nutreurilor prin nsilozare
i n fermentarea i conservarea legumelor. Procesul de fermentaie lactic
poate folosi ca substrat i alte hexoze (fructoz, galactoz, manoz),
diglucide (lactoz, zaharoz, maltoz) sau poliglucide (amidon) i are trei
faze:
faza preliminar, caracterizat printr-o fermentaie violent,
nsoit de degajare de gaze, a crei durat este funcie de
temperatur i de natura produsului supus fermentaiei (se
recomand un toptim = 18-20C);
faza principal sau faza determinant a fermentaiei, ce const
ntr-o acumulare masiv de acid lactic (crete de la 0,3 la
1,5%);
faza final, care se caracterizeaz printr-o reducere treptat de
acid lactic ca urmare a dezvoltrii unor microorganisme care l
consum. O dat cu consumarea lui ncepe alterarea ntr-o
msur mai mare sau mai mic a produselor rezultate n urma
fermentaiei lactice.
STAREA PSE A CRNII
Starea PSE a crnii (n special de porc) este o stare anormal a
muchiului ce se caracterizeaz prin aspectul pal, moale (soft) i
153

exudativ (exudative) al acestuia. Aceast stare influeneaz negativ

calitatea crnii, se instaleaz dup sacrificarea animalului, cnd se ntrerupe circulaia sanguin i se creeaz condiii favorizante pentru glicoliza
anaerob. Rezult acid lactic care se acumuleaz rapid n muchi, determin scderea pH-ului pn la o valoare cuprins ntre 5,3-5,4 (valoare la
care majoritatea enzimelor glicolizei anaerobe devin inactive) i permite
instalarea strii anormale PSE.
Cu ct viteza de desfurare a glicolizei anaerobe n muchiul aflat
n rigiditate va fi mai mare, cu att se va instala mai rapid aceast stare
anormal.
II - GLICOLIZA AEROB sau procesul de metabolizare a piruvatului pe cale aerob (cu participarea oxigenului) este un proces enzimatic care se realizeaz n mitocondrie.
Acidul piruvic obinut prin metabolizarea anaerob a glucozei
este decarboxilat oxidativ n prezena coenzimei A i transformat n
acetilCoA:
COOH

piruvatC = O + NAD+ + CoASH

decarboxilaz

CH3
acid piruvic

CH3COSCoA + CO2 + NADH(H+)

acetilCoA

n mecanismul de reacie intervin i coenzimele NAD+ care sunt

reduse la NADH(H+), tiaminpirofosfatul i ionii de magneziu.
AcetilCoA intr apoi ntr-un proces enzimatic ciclic de degradare din care rezult CO2, coenzime reduse i ATP, denumit ciclul
acizilor tricarboxilici (ciclul acidului citric) sau ciclul Krebs.
Ciclul Krebs este o cale oxidativ major, comun, de degradare
a glucidelor, lipidelor, proteinelor care furnizeaz n acelai timp i o serie
de precursori implicai n procese de biosintez a aminoacizilor, a bazelor
azotate purinice sau pirimidinice sau a nucleului porfirinic din structura
hemului.
Etapele ciclului Krebs:
1. Formarea acidului citric
154

Iniierea ciclului este datorat acidului oxalilacetic. Printr-o reacie

de transacetilare, sub aciunea enzimei citratsintaza, are loc condensarea
acetilcoenzimei A cu acidul oxalilacetic, rezultnd acid citric, primul acid
tricarboxilic format n acest proces.
COOH

C=O

CH2

COOH

CoASH

+ CH3 CO SCoA
Acetil coenzim A

H2O
Citrat-sintaz

Acid oxalilacetic

COOH

CH2

HO C COOH

CH2

COOH
Acid citric

2. Izomerizarea acidului citric n acid izocitric n prezena aconitazei.

COOH

CH2

HO C COOH

CH2

COOH

COOH

CH2

HC COOH

HO CH

COOH

aconitaz

Acid citric

Acid izocitric

3. Oxidarea i decarboxilarea acidului izocitric

Sub aciunea izocitrat dehidrogenazei i a coenzimei NAD + are loc
oxidarea gruprii hidroxil la gruparea ceto. n acelai timp enzima determin decarboxilarea cu eliberarea primei molecule de dioxid de carbon.
Rezult acid -cetoglutaric.
COOH

CH2

HC COOH

HO CH

COOH
Acid izocitric

NAD+

NADH + H+

CO2

Izocitrat dehidrogenaz

155

COOH

CH2

CH2

C=O

COOH

Acid -cetoglutaric

4. Decarboxilarea oxidativ a acidului -cetoglutaric

Sub aciunea unui complex enzimatic (-cetoglutarat decarboxilaza) are loc eliminarea celei de a doua molecule de dioxid de carbon, iar
gruparea ceto este oxidat cu ajutorul NAD + la grupare carboxil. Radicalul succinil astfel format este fixat de ctre coenzima A sub form de
succinil-coenzima A.
COOH

CH2

CH2

C=O

COOH

NADH + H+

CoASH NAD+

CO2

-cetoglutarat dehidrogenaz

Acid -cetoglutaric

COOH

CH2

CH2

CO SCoA
Succinil - CoA

Legtura tioester din structura succinil-coenzimei A este foarte

bogat n energie. Aceasta este transferat, n prezena succinil-coenzima
A - sintazei, unei molecule de GDP, care fixeaz ionul fosfat i se transform n GTP. n acelai timp rezult i acidul succinic liber.
COOH

CH2

CH2

CO SCoA

+ GDP

GTP

Succinil-CoA sintaz

CoASH

COOH

CH2

CH2

COOH

Acid succinic

Succinil - CoA

Ulterior, ionul fosfat i energia din GTP pot fi transferate pe ADP.

GTP + ADP

GDP + ATP

156

Aceasta este singura reacie a ciclului Krebs n care se elibereaz

energie sub form de ATP direct de pe substrat.
5. Oxidarea acidului succinic la acid malic
Acest proces are loc prin dou reacii. Prima o reprezint dehidrogenarea acidului succinic sub aciunea succinat dehidrogenazei i a FAD,
rezultnd acidul fumaric. n cea de a doua reacie el este hidratat n
prezena fumarazei, cu formare de acid malic.
COOH

CH2

CH2

COOH

FAD

COOH

CH

HC

COOH

FADH2

Succinat dehidrogenaz

Acid succinic

Acid fumaric

H2O
Fumaraz

COOH

HO CH

CH2

COOH
Acid malic

6. Oxidarea acidului malic n prezena malat dehidrogenazei cu

NAD+ conduce la formarea acidului oxalilacetic. Acesta nchide, astfel,
ciclul i poate relua, n continuare, procesul de fixare i degradare a
acetilcoenzimei A.
COOH

HO CH

CH2

COOH

NAD+

NADH + H

Malat dehidrogena
Acid malic

Aa cum rezult din schema urmtoare, degradarea unui rest de CH3CO sub form de acetilcoenzima A prin ciclu
reacie.

157

Schema general a ciclului Krebs:

Ecuaia general, sintetic, a acestui proces ce se desfoar n

cadrul ciclului Krebs poate fi redat astfel:
CH3COSCoA

2CO2 + 3NADH + FADH2 + ATP

3NAD+ FAD ADP +

Coenzimele reduse NADH i FADH2 intr apoi n lanul respirator, unde sunt oxidate de ctre oxigenul molecular, cu formare de ap,
iar energia eliberat este stocat prin fosforilare oxidativ n molecule de
ATP.
LANUL RESPIRATOR

Coenzimele reduse NADH i FADH2 rezultate n etapele anterioare de degradare i n principal n ciclul Krebs sunt reoxidate de ctre
oxigenul molecular n lanul respirator cuplat cu fosforilarea oxidativ.
158

De fapt aceasta este efectiv etapa aerob a ntregului metabolism

aerob. Aceast oxidare a NADH i FADH2 este cuplat cu reacia de
fosforilare a ADP la ATP i de aceea ea poart numele de fosforilare
oxidativ.
Schematic, reaciile de oxidare a coenzimelor cuplate cu fosforilarea oxidativ pot fi redate astfel:
NADH + H+ + O2 NAD+ + H2O
FADH2 + O2 FAD + H2O
ADP + HPO 24 ATP

G0 = 218,8 kJ/mol
G0 = 181,6 kJ/mol
G0 = + 31,5 kJ/mol

Dup cum se vede, oxidarea coenzimelor reduse are loc cu o mare

scdere a energiei libere, aceasta fiind utilizat n reaia de fosforilare
oxidativ.
Mecanismul reaciei de oxidare a coenzimelor implic, de fapt,
dou etape intermediare i anume:
oxidarea coenzimelor, cu eliberare de electroni i protoni

NADH NAD+ + H+ + 2e
FADH2 FAD + 2H+ + 2e
transportul electronilor pe moleculele de oxigen i oxidarea lor
la ap
O2 + 4H+ + 4e

2H2O

n mitocondrii, sediul respiraiei celulare, electronii eliberai de

coenzime nu ajung direct pe moleculele de oxigen. Ei sunt transferai
intermediar de pe un acceptor pe altul i abia n final pe moleculele de
oxigen. Aceasta poart numele de lanul transportor de electroni sau lanul respirator. El este constituit dintr-o flavoprotein ca prim acceptor de
electroni, coenzima Q i patru citocromi b, cl, c i a (citocromoxidaza).
Coenzima Q sau ubichinona are o structur asemntoare cu cea a
vitaminelor K i poate exista n form oxidat i redus. Pe aceast
proprietate se bazeaz mecanismul prin care ea preia atomii de hidrogen
de la flavoproteine.
CoQ
oxidat

+ 2H
2H

CoQH2
redus

159

Oxidarea coenzimei Q de ctre citocromul b are loc prin transferul

electronilor pe ionul de fier din structura hemului.
Cit b (Fe3+)
oxidat

+ e
e

Cit b (Fe2+)

redus

Mecanismul transferului atomilor de hidrogen, respectiv al electronilor, de pe coenzima Q pe citocromul b poate fi redat prin reacia:
CoQH2 + 2Cit b (Fe3+)

CoQ + 2Cit b (Fe2+) + 2H+

Toate enzimele ce alctuiesc lanul respirator transportor de electroni sunt localizate n interiorul membranei mitocondriale, ntr-o succesiune strict ce permite transferul direct al electronilor. n acelai timp
aceste enzime se caracterizeaz prin poteniale de oxidoreducere a cror
valoare scade succesiv. De aceea transferul electronilor este nsoit de o
scdere treptat a energiei libere G0.
Transportul atomilor de hidrogen i al electronilor n cadrul lanului respirator poate fi reprezentat prin urmtoarea schem:
NADH + H+

2H

NAD+

G0 = 38,5 kJ/mol

Flavoprotein
FADH2
FAD

2H

2H

CoQ
2H+

2e

Cit b

2e
G0 = 34,7 kJ/mol

Cit c1

2e

Cit c

2e

Cit a + a3
H2O

2e
G0 = 102,1 kJ/mol

O2
160

Din aceast schem se observ c NADH i FADH2 sunt donorii

iniiali de electroni, n timp ce oxigenul este acceptorul final.
Transferul electronilor de pe citocromul a pe molecula de oxigen,
cu formarea moleculei de ap, are loc conform ecuaiei:
2Cit a (Fe2+) + O2 + 2H+

2Cit a (Fe3+) + H2O

form redus

form oxidat

Celulele au capacitatea i mecanismul necesar pentru a cupla acest

proces de oxidare nsoit de o scdere a energiei libere cu procesul de
fosforilare a ADP, prin care energia este stocat n molecule de ATP. Dup
cum rezult din schem, oxidarea fiecrui mol de NADH determin
formarea a trei moli de ATP; un mol de NADH este echivalent din punct
de vedere energetic cu trei moli de ATP:
3ADP + 3

NADH + H+ + O2

NAD+ + H2O + 3ATP

Oxidarea unui mol de FADH2 este cuplat cu fosforilarea a doi

moli de ADP i este echivalent din punct de vedere energetic cu doi moli
de ATP :
3ADP + 3

FADH2 + O2

FAD + H2O + 2ATP

Mecanismul cuplrii transportului de electroni cu reacia de fosforilare a ADP implic transferul de protoni din matricea mitocondriei spre
spaiul intermembranal al acesteia. Fosforilarea ADP i sinteza de ATP
sunt catalizate de ATP-sintaza. Pentru formarea ATP este necesar o
cantitate de energie, condiie care este ndeplinit numai de trei segmente
din lanul respirator:

NADH + H+

CoQH2
ATP

Cit b

Cit c
ATP

161

 Cit a + a3
O 22
Reglarea respiraiei celulare
Desfurarea lanului
ATP respirator cuplat cu fosforilarea oxidativ
este direct determinat de concentraia n acetilcoenzima A i n oxigen,
dar n realitate reglarea sa are loc prin valoarea raportului ATP/ADP din
celul. Producerea de ATP prin fosforilare oxidativ este direct comandat de necesitile energetice ale celulei, respectiv de consumul de ATP
n reaciile endergonice sau pentru alte scopuri. Datorit acestei cuplri,
degradarea aerob reprezint un mod eficient i economic de furnizare de
energie ce se stocheaz sub form de ATP. Aceast energie este utilizat
de celul n primul rnd n biosinteza diferitelor componente necesare.
Schema general a glicolizei aerobe:

Din aceast schem se observ c dintr-un mol de glucoz se

formeaz:
- 6 CO2
- 10 NADH echivalent cu 10 3 = 30 ATP
- 2 FADH2 echivalent cu 2 2 = 4 ATP
- 4 ATP direct n reacii
= 4 ATP
162

Total
= 38 ATP
Reacia general de oxidare a glucozei n procesul respiraiei
celulare va fi:
C6H12O6 + 6O2 + 38(ADP + HPO 24 )

6CO2 + 38ATP + 44H2O

glucoz

sau
C6H12O6 + 6O2

6CO2 + 6H2O

H = 2870 kJ/mol

Degradarea aerob a glucozei este, deci, deosebit de eficient,

genernd 38 moli ATP/1 mol glucoz, ceea ce nseamn c 38% din energia eliberat prin degradare este conservat sub form de ATP (1 ATP
8000 calorii).
7.2.1.4. Calea pentozofosfailor
(untul hexoz-monofosfailor)
Este o cale alternativ oxidativ de degradare a glucozei (circa
8 - 30% din glucoz este degradat pe aceast cale). Este calea de degradare ce rspunde unor cerine specifice ale celulei, asigurnd necesarul de
pentoze (pentru sinteza nucleotidelor i a acizilor nucleici), asigur necesarul de coenzime NADPH(H+) pentru sinteza acizilor grai (lipide) i
pentru alte procese de biosintez.
Sediul procesului este n ficat, cristalin, glanda mamar, rinichi i
este alctuit din dou etape:
a) etapele oxidative (ireversibile)
b) etapele nonoxidative (reversibile)
a. Etapele oxidative
Glucozo-6-fosfatul este transformat n ribozo-5-fosfat i CO2,
concomitent cu oxidarea NADP+ la NADPH(H+):

163

b. Etapele nonoxidative
Nevoile tisulare pentru cei 2 produi ai etapei oxidative,
NADPH(H+) i ribozo-5-fosfatul, variaz foarte mult. Celulele adipoase i
hepatice posed cantiti mari din enzimele cii pentozofosfailor spre
deosebire de celulele musculare la care aceste enzime lipsesc. Pe de alt
parte, cererea pentru unul dintre cei doi produi ai cii metabolice este
mai mare dect pentru cellalt (la celulele n diviziune nu este necesar
NADPH(H+), cci nu se sintetizeaz lipide, n schimb cererea de ribozo-5fosfat este foarte mare).
164

Pentru a echilibra producerea i excesul de compui rezultai n

prima etap, intervin reaciile celei de-a doua etape.
Etapa nonoxidativ este rezultatul aciunii n echip a dou enzime, transcetolaza i transaldolaza, care realizeaz interconversia glucidelor n concordan cu nevoile metabolice ale celulelor.
Aceste enzime detaeaz de la o cetoz fosforilat uniti de 2 i
de 3 atomi de carbon i le ataeaz la aldoze:

ribozo-5-fosfat
aldoza (R-5-P)

ribulozo-5-fosfat
cetoza

xilulozo-5-fosfat
cetoza (X-5-P)

Doar o parte din ribozo-5-fosfat parcurge aceast reacie, restul

intr n urmtoarea:

165

R1

2C5

C3 + C7 transcetolaza

R2

C7 + C3

C4 + C6 transaldolaza

R3

C5 + C4

C3 + C6 transcetolaza

Cele dou molecule de gliceraldehid-3-fosfat vor fi transformate

n glucoz prin reaciile inverse glicolizei.
166

Calea pentozofosfailor este extrem de flexibil, corelnd producerea de metabolii cu consumul acestora:

Calea pentozofosfailor este ntlnit i la plante. n perioada de

cretere a tulpinilor predomin calea oxidativ, iar n cea de formare i
coacere a seminelor i boabelor cea de-a doua.
7.2.2. BIOSINTEZA GLUCIDELOR
7.2.2.1. Glicogenogeneza
Glicogenogeneza este procesul prin care se sintetizeaz glicogen
din glucoz. Sediul biosintezei glicogenului este n principal celula hepatic i ntr-o msur mai mic celula muscular. Formarea glicogenului
este un proces endergonic (consumator de energie), are loc prin adugarea succesiv de uniti de glucoz activat (fosforilat) la molecule de
glicogen preexistent (glicogen primer).
Sinteza moleculei de glicogen folosete ca primer iniial o protein, glicogenina, care transfer opt radicali glucidici pe gruparea OH a
tirozinei din structura proprie. Proteina rmne n interiorul moleculei de
glicogen. Adugarea noilor uniti de glucoz se face la captul nereductor al lanului poliglucidic:

167

ETAPE

1. Activarea glucozei
a.

b.

c.

168

2. Transferul glucozei activate pe molecula primer:

3. Ramificarea
Cnd lanul glucidic ajunge la o lungime de opt uniti de glucoz,
intervine enzima de ramificare care permite stabilirea legturilor C1C6
(formarea fragmentelor de izomaltoz).
*

intervenia compusului macroergic UTP n activarea ozelor are

loc ori de cte ori este vorba despre biosinteza unor structuri glucidice
mai complexe, att n regnul vegetal, ct i animal. Biosinteza diglucidelor, biosinteza amidonului la plante, au loc ntr-o manier similar
(inclusiv prezena enzimei de ramificare n sinteza amilopectinei).

169

Schema sintezei glicogenului din glucoz

7.2.2.2. Gluconeogeneza
Gluconeogeneza este procesul de biosintez a glucozei din precursori neglucidici, care pot fi transformai n acid piruvic. Acest proces
exclude acizii grai i acetilCoA, dar include acidul lactic, unii aminoacizi, glicerol. Importana procesului rezid n faptul c permite conversia
la glicogen a altor molecule, meninnd n acest fel glicemia la valori
relativ constante. Aceasta este important pentru c o serie de esuturi i
celule (creierul, eritrocitele, retina, celulele parenchimului renal) folosesc
exclusiv glucoza ca resurs energetic. Rezerva de glicogen a ficatului
este mic i se epuizeaz dup 24 de ore de nfometare. Dar tot ficatul
este cel care face ca viaa s poat continua pentru c el este singurul
capabil s biosintetizeze glucoza. Punctul de plecare l constituie acidul
piruvic. Examinnd calea glicolitic observm c doar 3 dintre reacii sunt
ireversibile:
(1) fosforilarea glucozei de ctre hexokinaza (glucokinaza) cu
consum de ATP;
(2) fosforilarea fructozo-6-P cu consum de ATP;
170

(3) transformarea fosfoenolpiruvatului n acid piruvic;

Biosinteza glucozei pe calea invers este posibil cu condiia
gsirii unor modaliti de trecere peste aceste puncte cheie (ireversibile).
a) Calea gluconeogenetic pornind de la acid piruvic:

Enzimele din chenar sunt diferite de cele care apar n glicoliz.

171

b) Sinteza glucozei din glicerol (provenit din esutul adipos prin

hidroliza gliceridelor)

Plantele i bacteriile sunt capabile s transforme i acetilCoA n

glucoz prin intermediul unei succesiuni de reacii numit ciclu glioxilat.
7.2.2.3. Biosinteza lactozei
Lactoza este un diglucid reductor sintetizat n glanda mamar,
format prin condensarea unei molecule de -galactoz cu o molecul de
-glucoz, condensare n urma creia apare o legtur de tip eter C1C4.
Biosinteza ei pornete de la -glucoz, care este activat mai nti
n prezen de UTP (uridintrifosfat).
Etapele biosintezei lactozei sunt:
glucokinaz
glucoza
+
ATP
G 6 P + ADP
sanguin
G 6P

G1P

1. G 1 P + UTP
2. UDP G

pirofosforilaza

4epimeraza

UDP G + H4P2O7 (PPi)

UDP galactoz
glicoziltransferaza

3. UDP galactoz + G 1 P

H2O

172

lactoz

URIDINDIFOSFAT GLUCOZ (UDP G)

7.2.3. REGLAREA METABOLISMULUI GLUCIDIC

Acest mecanism de reglare implic stabilirea unui echilibru
ntre glicogenogenez (biosintez de glicogen din glucoz) i glicogenoliz (degradare de glicogen cu formare de glucoz), echilibru care se
afl sub control hormonal. Hormonii implicai n reglarea metabolismului glucidic sunt : insulina, cu rol hipoglicemiant i glucagonul, adrenalina, hormonii corticoizi i cei tiroidieni, cu rol hiperglicemiant.
Din jocul antagonist al celor dou tipuri de hormoni se asigur
meninerea glicemiei (a nivelului fiziologic de glucoz n snge) n limite
constante.
Reglarea glicemiei se poate face i pe cale nervoas, prin activarea sau inhibarea unor enzime care particip la metabolismul glucidic.
Principala dereglare biochimic care are drept urmare creterea
nivelului de glucoz din snge poart numele de diabet zaharat i se
datoreaz unei secreii insuficiente de insulin de ctre pancreas.

173

7.3. ASPECTE DE METABOLISM LIPIDIC

7.3.1. CONSIDERAII GENERALE
Principala clas de compui biochimici cu rol energetic, att
pentru celul, ct i pentru organism ca ntreg, o reprezint lipidele.
Cea mai mare parte din rezerva energetic a organismului animal
este reprezentat de esutul adipos. Aici au loc procese de hidroliz a
trigliceridelor cu eliberare de acizi grai, utilizai apoi pentru necesitile
energetice ale altor organe i esuturi.
7.3.2. DEGRADAREA LIPIDELOR
7.3.2.1. Digestia lipidelor
La monogastrice, sediul digestiei totale este intestinul subire
unde, n prezena sucului intestinal i pancreatic (ce conine enzime de tip
esterazic), precum i a srurilor biliare, are loc un proces de emulsionare a
lipidelor i apoi de scindare hidrolitic.
Emulsionarea lipidelor simple, adic transformarea lor n picturi
foarte fine, favorizeaz atacul enzimelor din clasa hidrolazelor, respectiv
lipazelor, proces n urma cruia rezult glicerol i acizi grai.
Scindarea hidrolitic a lipidelor complexe are loc n duoden sub
aciunea fosfolipazelor prezente acolo.
La poligastrice, lipidele simple i complexe ajung n rumen,
unde acioneaz microorganismele rumenale ce secret enzime capabile
s hidrolizeze aceste lipide.
7.3.2.2. Absorbia lipidelor
Acizii grai cu mas molecular mai mic (10-12 atomi de
carbon) rezultai n urma digestiei lipidelor se absorb direct prin mucoasa
intestinal i prin vena port ajung n ficat.

174

 Acizii grai cu mas molecular mare (peste 12 atomi de

carbon) se esterific n mucoasa intestinal, rezultnd mono-, di i
trigliceridele.
Aceste trigliceride nou sintetizate formeaz complexe lipoproteice
ce ajung pe cale sanguin la ficat.
La poligastrice, acizii grai nesaturai se transform n acizi
grai saturai sub aciunea hidrogenazelor rumenale, rezultnd, n special,
acid stearic.
Colesterolul se absoarbe fie direct prin peretele intestinal, fie
sub form esterificat i vehiculat tot n complexele lipoproteice.
7.3.2.3. Degradarea trigliceridelor
Catabolismul trigliceridelor ncepe printr-un proces de hidroliz
enzimatic sub aciunea lipazelor specifice i se desfoar n citoplasm.
CH2OCOR1

R1COOH

HCOCOR2
lipaze

CH2OCOR3
triglicerid

CH2OH

R3COOH

HCOCOR2
lipaze

CH2OCOR3
diglicerid

CH2OH

R2COOH

HCOCOR2
lipaze

CH2OH
monoglicerid

CH2OH

HCOH

CH2OH
glicerol

Glicerolul format poate intra n diferite ci metabolice n

funcie de necesitile energetice ale celulei:
- se transform n aldehid gliceric parcurgnd etapele glicolizei;
- se transform n glucoz pe calea gluconeogenezei;
- este utilizat la sinteza altor trigliceride i lipide complexe.
Acizii grai rezultai n urma catabolismului trigliceridelor
intr ntr-un proces de degradare enzimatic localizat n mitocondrie,
format dintr-o succesiune de reacii care poart numele de -oxidare.

175

Schema metabolizrii glicerolului este:

resintez de trigliceride
i lipide complexe

GLICEROL
ATP
ADP
-Glicerofosfat
NAD+
NADH(H+)
Gliceraldehid-3 fosfat

Dihidroxiacetonfosfat

Fructozo-1,6 difosfat

Piruvat

Fructozo-6 fosfat

AcetilCoA

Glucozo-6 fosfat
C.K.

CO2

Glucoz
Respiraie celular

Glicogen

ATP

7.3.2.4. Degradarea acizilor grai

176

H2O

 Pentru a putea fi transportai din citosol n mitocondrie, unde

are loc procesul -oxidrii, acizii grai trebuie activai n prezen de
coenzima A (HSCoA) i de aciltiokinaz, cu formare de acid gras
activat, singura form sub care acizii grai pot strbate membrana mitocondrial. Aceast reacie necesit un consum de ATP care este hidrolizat
la AMP i acid pirofosforic.
RCOOH + ATP + CoASH
acid gras

RCOSCoA + AMP + H4P2O7

pirofosfataz

acid gras activat

(acil gras CoA)

2H3PO4
Transferul acidului gras activat prin membrana mitocondrial este posibil numai dup cuplarea acestuia cu carnitina, cnd
rezult acilgras-carnitina, ce este preluat de tranzlocaz (o protein
specific) i adus n mitocondrie:
RCH2COSCoA + CARNITINA

carnitinaciltransferaza

RCH2COCARNITINA

CITOSOL
MEMBRAN
MITOCONDRIAL
MATRIX
MITOCONDRIAL

RCH2COCARNITINA

CARNITINA

RCH2COSCoA
acilgras CoA
intr n procesul
-oxidrii

-oxidarea reprezint o succesiune de patru reacii enzimatice

n urma crora se elibereaz cte o molecul de acetilCoA i rezult un
acid gras activat cu doi atomi de carbon mai puin dect cel iniial. Acest
acid gras intr din nou n secvena celor patru reacii i procesul se repet
177

pn cnd tot acidul gras activat s-a transformat numai n molecule de

acetilCoA. Procesul complet de degradare are aspectul unei spirale
(spirala Lynen), pe fiecare tur eliberndu-se o molecul de acetilCoA, un
NADH(H+) i un FADH2.
Spirala Lynen:
acid gras cu
n atomi C
CH3COSCoA
NADH(H+)
FADH2

acid gras cu
n-2 atomi C

CH3COSCoA
NADH(H+)
FADH2
acid gras cu
n-4 atomi C

Etapele -oxidrii sunt:

178

acid gras cu 2 atomi

mai puin

acetil CoA

Bilanul energetic al -oxidrii:

nr. de ture din nr. de atomi de C ai acidului

1
spirala Lynen
2

pentru fiecare tur rezult : 1 NADH(H+) = 3 ATP

1 FADH2 =
2 ATP
Total 5 ATP

nr. moleculelor de nr. de atomi de C ai acidului

acetilCoA eliberate
2
179

 fiecare molecul de acetilCoA intr n ciclul Krebs

12 ATP pe 1 ciclu Krebs.
Exemplu: pentru acidul palmitic (C16) bilanul energetic al -oxidrii se calculeaz astfel:
nr. ture Lynen

16
1 7
2

7 5ATP / tur = 35 ATP spiral Lynen

nr. molecule CH3COSCoA =

16
= 8 molecule
2

8 12ATP / C.K. = 96 ATP

96 ATP + 35 ATP = 131 ATP
131 ATP 1 ATP (consumat la activare) = 130 ATP
*

1 ATP 7000 calorii

Oxidarea acizilor grai nesaturai decurge la fel ca la cei

saturai pn se ajunge n vecintatea dublelor legturi, care sunt n poziie cis, ceea ce mpiedic recunoaterea de ctre acil grasCoAdehidrogenaza. n acest moment este necesar intervenia unei izomeraze care
transform izomerul cis n cel trans, n continuare fiind parcurse aceleai
etape. La acizii polinesaturai, cum ar fi acidul linoleic, cu dou duble
legturi, n cazul primei se procedeaz ca mai sus, iar n cazul celei de-a
doua intervine o hidrogenaz care-l aduce n starea saturat normal
pentru -oxidare.
Oxidarea acizilor grai cu numr impar de atomi de carbon. Procesul apare n special la plante, dar ntr-o mic proporie i la
animale, unde acizii grai cu numr impar de atomi de carbon provin din
hrana de origine vegetal. Degradarea are loc pe calea -oxidrii pn
cnd se ajunge la un fragment final de -cetoacil cu 5 atomi de carbon, n
loc de acetoacetilCoA cu 4 atomi de carbon. Prin ruperea acestuia rezult
acetil-CoA i propionilCoA:
CH3-CH2-CO-CH2-CO-S-CoA + CoA-SH CH3-CH2-CO-S-CoA + CH3-CO-S-CoA
propionilCoA

180

PropionilCoA este transformat n succionilCoA care intr n

ciclul acizilor tricarboxilici.
CH3-CH2-CO-S-CoA + + ATP

propionilCoAcarboxilaza
AMP + PPi

COOH
CH3-CH-CO-S-CoA
metilmalonilCoA

metilmalonilCoA
epimeraza

HOOC-CH2-CH2-CO-S-CoA

metilmalonilCoAmutaza

succinilCoA

CH3-CH-CO-S-CoA
COOH

Ultima enzim necesit prezena celei mai complexe coenzime,

deoxiadenozilcobalamina, un derivat al vitaminei B12.
Aceast cale de metabolizare a propionatului este important
ntruct el poate proveni i din degradarea a patru aminoacizi, valina,
izoleucina, metionina i treonina, ca i din carena lateral a colesterolului.
Deficiena n enzima metilmalonilCoAmutaza sau incapacitatea
organismului de a sintetiza cofactorul necesar pornind de la vitamina B12
conduce la o stare patologic numit acidoza metilmalonic, care este
fatal n prima perioad de via.
Oxidarea acizilor grai la nivelul peroxizomilor. Peroxizomii
sunt vezicule mici, ataate de membrana multor celule animale. -oxidarea acizilor grai la nivelul peroxizomilor difer de cea mitocondrial prin
aceea c FADH2 este direct oxidat de O2, producnd H2O2. Funcia peroxizomilor este mai puin neleas dect a altor organite, dar se crede c au
un rol important n preluarea i degradarea acizilor grai cu mai mult de
18 atomi de carbon, pe care sistemul mitocondrial nu-i oxideaz.
7.3.2.5. Formarea corpilor cetonici
Dup cum s-a menionat, organismul poate fi n situaia de a folosi
catabolismul acizilor grai ca principal surs de energie. Aceasta se
ntmpl n perioadele de nfometare, cnd rezerva de glicogen s-a consumat, sau la diabetici, care nu pot reine glucoza. n aceste situaii celulele adipoase pun n circulaie cantiti mari de acizi grai liberi care sunt
preluai de ficat i acesta produce cantiti excesive de acetilCoA, excesiv n sensul c se depete capacitatea de alimentare a ciclului Krebs.
Procesul prin care, n ficat, mai exact n mitocondriile hepatocitelor, excesul de acetilCoA este convertit n aceton, acid acetilacetic i
181

acid -hidroxibutiric se numete cetogenez, iar aceti produi se numesc

corpi cetonici.
2CH3-CO-S-CoA
CH3-CO-CH2-CO-S-CoA + CoA-SH
acetoacetilCoA

Aceast reacie este inversa celei catalizate de -cetotiolaza (etapa

d din -oxidare).

Acidul acetilacetic i acidul -hidroxibutiric pot fi folosii de

unele celule (inclusiv cele din creier) pentru obinerea de energie, dup o
transformare enzimatic n acetilCoA. Totui, atunci cnd producerea
corpilor cetonici depete capacitatea de eliminare urinar i utilizare, se
instaleaz o stare patologic numit acidoza metabolic sau cetoza.
7.3.3. BIOSINTEZA LIPIDELOR

182

Biosinteza lipidelor apare mai ales ca urmare a excesului de

glucide, nlocuind glicogenul cu o form de depozitare mai convenabil,
lipidele neutre. Alcoolul i unii aminoacizi pot de asemenea genera lipide.
Biosinteza lipidelor apare la animale ca urmare a unui exces de hran i
mai puin pentru necesitile reparatorii ale membranelor celulare. La
plante, cu excepia celor la care lipidele reprezint forma de rezerv a
combustibilului metabolic (oleaginoase), are loc numai pentru a asigura
creterea i repararea structurilor membranare.
7.3.3.1. Biosinteza acizilor grai
Att n regnul vegetal, ct i n cel animal, precursorul este
acetilCoA, care poate proveni din glucide (prin decarboxilarea acidului
piruvic rezultat n glicoliz), din lipide (din -oxidarea acizilor grai), din
aminoacizii glucoformatori care se transform n acid piruvic.
n funcie de localizarea procesului de biosintez exist dou ci:
- calea citoplasmatic (calea malonilCoA)
- calea mitocondrial (calea elongaiei).
Principiul general respectat n ambele ci de biosintez, att n
regnul vegetal, ct i animal, este acela c spre deosebire de cile metabolice, n care gruparea acil este vehiculat sub form de acetilCoA, n biosintez intervine un sistem multienzimatic complex, acilgras sintetaza.
Una dintre componentele acesteia este proteina purttoare de
grupri acil (Acyl Carrier Protein-ACP). Aceasta prezint asemnri cu
coenzima A, inclusiv n modul de legare a gruprii acil:
P -Riboza-Adenina
CoA-SH
P -Pantotenat-Cisteamina-SH
ACP

P -Pantotenat-Cisteamina-SH

CH3-CO-S-CoA + HS-ACP

CH3-CO-S-ACP
CoA-SH

R-CO-S-CoA + HS-ACP

R-CO-S-ACP

CoA-SH

183

 Biosinteza acizilor grai pe calea malonilCoA are loc n citoplasm. Prima etap const n formarea malonilCoA prin carboxilarea
acetilCoA sub aciunea unei carboxilaze care are drept coenzim biotina i
necesit ATP i Mg:
CH3-CO-S-CoA + CO2 + ATP

HOOC-CH2-CO-S-CoA + ADP + H3PO4

malonilCoA

Mecanismul biosintezei const n transferul succesiv al cte unei

uniti de malonilCoA pe acetilCoA-ACP (iniial pe acetil-ACP), eliberndu-se cte un CO2:
CH3-CO-S-ACP + HOOC-CH2-CO-S-CoA

malonilCoA-ACP-aciltransferaza
-cetoacilCoAsintaza

CH3-CO-CH2-CO-S-ACP + CO2 + CoA-SH

Urmeaz patru reacii care au ca scop reducerea la acil grasCoA

activat:
CH3-CO-CH2-CO-S-ACP
reducere

NADPH(H+)

OH
NADP+

CH3-CH-CH2-CO-S-ACP
deshidratare

-cetoacil-ACP reductaza
(-hidroxibutiril-ACP)

HOH

(crotonil-ACP sau -enoil-ACP)

CH3-CH=CH-CO-S-ACP
reducere

(-cetoacil-ACP)

NADPH(H )
NADP+

CH3-CH2-CH2-CO-S-ACP

(butiril-ACP sau acil-ACP)

Ciclul se poate relua avnd n loc de acetil-ACP, butiril-ACP, pn

la acidul palmitic. n aceast cale rolul central revine malonil-CoA. Totui
implicarea acetilCoA este nemijlocit n acest proces. AcetilCoA este
transferat din mitocondrie (locul de producere) n citosol (locul de
utilizare) printr-un proces enzimatic complex, avnd n vedere impermeabilitatea membranei mitocondriale interne:

184

Succesiunea oxaloacetat malat piruvat este destinat transferului electronilor de la NADH(H+) la NADPH(H+). O alt surs pentru
coenzima NADPH(H+) este i untul pentozofosfailor prezentat anterior.
Cea de-a doua cale este numit i calea elongaiei deoarece are
ca precursor acidul palmitic sintetizat n citoplasm.
Reaciile sunt ca i cele prezentate la calea malonilCoA, cu excepia faptului c unitatea adugat este acetilCoA. La sfritul parcurgerii
celor patru reacii (acilare, reducere, deshidratare, reducere) se obine un
acid saturat cu 2 atomi de carbon n plus.
7.3.3.2. Biosinteza glicerolului
Biosinteza glicerolului are ca precursori triozele fosforilate din
glicoliz:
NADP+

C-HO

CH2OH

CH2-O- P

NADPH(H )

185

NADP+

CH2-OH

C=O

CH2-OH

NADPH(H )

ATP

CH2-OH

CHOH

CH2-O- P

ADP

CH2-OH

CHOH

CH2OH

7.3.3.3. Biosinteza gliceridelor

Biosinteza gliceridelor folosete ca precursori glicerolul activat
sub form de glicerofosfat i acizii grai activai sub form de acil grasCoA:
ADP

CH2HO

CHOH

CH2OH
glicerol

CH2OH

CHOH
-glicerokinaza

-glicerofosfat
CH2-O- P
ATP

R1-CO-S-CoA
R2-CO-S-CoA
-2CoA-SH
aciltransferaza

CH2-O-CO-R1

CH-O-CO-R2

CH2-O- P
acid fosfatidic

HOH

fosfataza

H3PO4

CH2-O-CO-R1

CH-O-CO-R2

CH2-O-CO-R3are
colesterolului

R3-CO-S-CoA
-CoA-SH
aciltransferaza

CH2-O-CO-R1

CH-O-CO-R2

-OH
tot CH
molecula
de
2

Biosinteza
ca precursor
acetilCoA.
7.3.4. REGLAREA METABOLISMULUI LIPIDIC

Acest mecanism de reglare implic un echilibru ntre lipoliz

(degradarea lipidelor) i lipogenez (biosinteza lipidelor).
n metabolismul lipidelor se pot produce diferite dereglri, cunoscute sub numele de lipidoze, care constau n tulburri de digestie i ad186

sorbie, tulburri ale mecanismului de mobilizare a lipidelor depozitate,

tul-burri de transport sau ale etapelor chimice de catabolizare sau
anabolizare.
Hiperlipemia este o stare patologic caracterizat prin creterea anormal a gliceridelor n snge, ceea ce confer acestuia un aspect
lactescent.
Tulburrile cauzate de depozitarea lipidelor pot fi:
- sfingomielinozele (acumularea sfingomielinei n reticulul
endotelial, n celulele nervoase sau n alte esuturi);
- cerebrozidoze (formare de cerebrozide anormale care se
depoziteaz n ficat i mduva osoas);
- steatoza sau infiltraia gras a ficatului.

7.4. ASPECTE DE METABOLISM PROTIDIC

Protidele (n spe proteinele i acizii nucleici) sunt biomolecule
fundamentale pentru organizarea i funcionarea organismului animal.
Proteinele din hran sunt preluate i transformate n aminoacizi care sunt
folosii ulterior la sinteza de proteine proprii organismului.
7.4.1. DIGESTIA PROTEINELOR
Schema digestiei proteinelor la monogastrice este:
PROTEINE
ALIMENTARE

N STOMAC
LA pH=1,5-2,5
SUB ACIUNEA
PEPSINEI
(ENZIM
PROTEOLITIC)

OLIGOPEPTIDE CU
6-8 AMINOACIZI

FRAGMENTE MOLECULARE PROTEICE CU

MAS MOLECULAR
MAI MIC (POLIPEPTIDE, PROTEOZE I
PEPTONE)

SUB ACIUNEA
CARBOXIPEPTIDAZEI
I AMINOPEPTIDAZEI

DIPEPTIDE

N DUODEN
LA pH=7,5-8,7
SUB ACIUNEA
TRIPSINEI I
CHIMOTRIPSINEI

DIPEPTIDAZE

AMINOACIZI

Trebuie menionat faptul c n stomac exist pepsinogenul (form

inactiv) care, sub aciunea acidului clorhidric, trece n pepsin (forma
activ a acestei peptidaze), iar n duoden tripsina (care este forma activ)
187

i se obine n pancreasul exocrin din tripsinogen (forma inactiv) sub

aciunea enterochinazei.
De altfel, toate enzimele proteolitice care acioneaz asupra
macromoleculelor proteice, pe tot parcursul tractului digestiv, se clasific
n dou categorii:
- endopeptidaze - enzime hidrolitice care acioneaz n interiorul
lanului polipeptidic i scindeaz legturile peptidice (CO-NH), cum ar fi:
pepsina, tripsina i chimotripsina;
- exopeptidaze, care scindeaz lanul polipeptidic la capete i pot
fi carboxipeptidaze (scindeaz hidrolitic gruparea carboxil) sau aminopeptidaze (care scindeaz hidrolitic gruparea NH2 de la captul lanului).
La poligastrice, digestia proteinelor ingerate ncepe n
prestomace, sub aciunea unor microorganisme rumenale care secret
enzime proteolitice i care scindeaz aproximativ 50% din totalul proteinelor ingerate. Rezult polipeptide mici a cror hidroliz final are loc n
duoden cu formare de aminoacizi.
n sucul gastric la animalele sugare exist renina, enzim care
precipit cazeina din lapte pentru ca astfel precipitat s staioneze mai
mult n stomac pentru a fi hidrolizat.
7.4.2. ABSORBIA PROTEINELOR
Absorbia proteinelor se poate realiza numai sub form de
aminoacizi la nivelul intestinului subire, printr-un fenomen de competiie, sub aciunea unor proteine specifice dependente de ionii de Na,
numite translocaze. S-au identificat n epiteliul intestinal nu mai puin de
7 sisteme transportoare specifice care acioneaz pe tipuri de aminoacizi.
O dat absorbii, aminoacizii ajung prin vena port la ficat, unde o
parte sunt catabolizai, iar alt parte sunt preluai de snge i dui la toate
celulele pentru utilizarea lor n biosinteza proteinelor hepatice, tisulare,
plasmatice i enzimatice.
Fetusul i nou-nscuii pot absorbi i proteine intacte prin procesul
de endocitoz (pinocitoz), care const n internalizarea unor fragmente
din membrana plasmatic de care sunt legate proteinele strine i care
prezint importan pentru transferul anticorpilor materni n special la
mamifere.
188

7.4.3. CATABOLISMUL AMINOACIZILOR

Catabolismul aminoacizilor este procesul de degradare a acestora, la nivel celular, printr-una din urmtoarele ci generale de catabolizare:
I. deaminarea;
II. decarboxilarea;
III. transaminarea.
I - Deaminarea este procesul enzimatic de degradare a aminoacizilor prin care acetia pierd gruparea amino (NH2), rezultnd amoniac
i un alt compus. n acest proces acioneaz aminoacid deaminazele
(AAD), enzime din clasa liazelor.
n funcie de mecanismul de deaminare, exist patru posibiliti de
desfurare a acestui proces:
a. Deaminarea oxidativ:
R

CH-NH2

COOH

aminoacidoxidaza
H2O2

FMN

O2

FMNH2

R
+ HOH

C=NH

COOH

C=O
+ NH3

COOH
-cetoacid

Aceiai produi se obin i n prezena altei dehidrogenaze dependente de NADP+.

R

CH-NH2

COOH

HOH

NADP+
NADPH(H+)

C=O
+ NH3

COOH
-cetoacid

b. Deaminarea hidrolitic
R

CH-NH2 + HOH

COOH

NAD+

189

NADH(H+)

CH-OH + NH3

COOH
-hidroxiacid

c. Deaminarea reductiv caracteristic bacteriilor

R

CH-NH2 + H2

COOH

CH2
+ NH3

COOH

acid carboxilic

d. Deaminarea intramolecular
COOH

CH2

H-C-NH2

AAD

COOH

CH

CH

COOH

+ NH3

acid fumaric

acid aspartic

COOH

II - Decarboxilarea aminoacizilor este procesul enzimatic care

are loc sub aciunea aminoacildecarboxilazelor i prin care aminoacizii
pierd gruparea carboxil sub form de dioxid de carbon. Rezult produi
numii amine biogene.
R

CH-NH2

COOH

CO2

CH2

NH2

Aminele biogene au funcii specifice. De exemplu, histamina,

provenit din decarboxilarea histidinei, este localizat mai ales n granulele mastocitelor, n plachetele sanguine, n leucocitele bazofile. Induce
creterea permeabilitii capilarelor, este vasodilatator, produce contracia
muchilor netezi, crete secreia nazal, lacrimal i bronic. Tiramina
190

provine din tirozin i este prezent n brnzeturile fermentate. Exercit

aciuni antagoniste histaminei.
Prin decarboxilarea aminoacizilor cu mai multe grupri amino
(poliaminici, de exemplu lisina sau arginina) rezult poliamine, substane
cu rol esenial n controlul biosintezei acizilor nucleici i a proteinelor. La
plante aminele biogene intervin nu numai n reglarea biosintezei proteinelor i acizilor nucleici, dar constituie precursori pentru biosinteza unor
alcaloizi (ornitina pentru cocain, cadaverina pentru spartein).
III - Transaminarea este reacia reversibil prin care gruparea
amino este transferat de pe un aminoacid pe un -cetoacid, cu formarea
unui alt aminoacid i a unui alt -cetoacid, transferul fiind realizat de
enzimele numite transaminaze. Toate transaminazele au drept cofactor
un derivat al vitaminei B6, piridoxalfosfatul, care funcioneaz ca acceptor intermediar al gruprii amino:
CHO
HO

CH2O

H3C
piridoxalfosfatul

Transaminarea este cea mai comun reacie care implic aminoacizii liberi i numai treonina i lisina nu particip la astfel de reacii. Un
cuplu obligatoriu prezent este acidul glutamic - acid -cetoglutaric:
COOH

CH3
CH2

CH2
+ C=O

COOH
CH-NH2

COOH

ac. glutamic
(Glu)

ac. oxalilacetic

ac. -cetoglutaric

ac. piruvic

COOH
COOH

CH2
C=O

CH2
+
CH2

CH-NH2
COOH

COOH
Glu

glutamat-piruvat transaminaza
(GPT)

COOH

CH2

CH2

C=O

COOH

glutamat-oxalilacetat transaminaza
(GOT)

191

COOH

CH2

CH2

C=O

COOH

CH3

CH-NH2

COOH
alanina
(Ala)

COOH

CH-NH2
+
CH2

COOH

ac. -cetoglutaric ac. aspartic

(Asp)

Distribuia unora dintre transaminaze n anumite esuturi animale

este utilizat ca diagnostic prin determinarea cantitii de enzim eliberat
datorit lezrii esutului hepatic.
Trebuie menionat c transaminarea este un proces complex de
degradare i sintez a aminoacizilor, ntruct permite biosinteza altor
aminoacizi pe baza cetoacizilor provenii din hran sau din alte procese
metabolice.
7.4.4. METABOLISMUL AMONIACULUI
Amoniacul, care se formeaz la nivel celular prin deaminarea
aminoacizilor, din diferite amine biogene sau din catabolizarea bazelor azotate (componente structurale ale acizilor nucleici), este un compus
toxic pentru organismul viu (mai ales pentru sistemul nervos central). De
aceea organismul viu posed mecanisme eficiente i rapide de blocare i
eliminare a amoniacului toxic, de fapt mecanisme de detoxifiere, care pot
fi de dou feluri:
a) transformarea amoniacului toxic n uree netoxic (ciclul
ureogenetic) i eliminarea acesteia pe cale renal;
b) transformarea amoniacului toxic n glutamin, substan
netoxic.
a) Transformarea amoniacului n uree se realizeaz prin procesul de ureogenez, la nivel hepatic.
Ciclul ureogenezei, ca i cel al acizilor tricarboxilici, a fost
descoperit de Sir Hans Krebs; ciclul ncepe i se termin cu ornitina
ntr-o succesiune de doar patru reacii enzimatice ce se desfoar n
mitocondrie.

192

Mai nti amoniacul intr n ciclu dup condensare cu bicarbonatul HCO 3 (forma de vehiculare a CO2), cnd rezult carbamoilfosfatul. Acesta reacioneaz cu ornitina, formnd citrulina. Citrulina reacioneaz cu aspartatul i rezult argininosuccinatul care va fi scindat n
arginin i acid fumaric. Prin hidroliza argininei se elibereaz ureea i se
reface ornitina.
Schema general a ciclului ureogenetic este:

b) Transformarea amoniacului n glutamin este procesul de

detoxifiere al organismului viu prin care amoniacul este blocat de acidul
glutamic i rezult glutamina, compus netoxic:
COOH

CH2

CH2

HC-NH2

COOH

ATP

+ NH3
H2O

acid glutamic

O
C
NH2

CH2

CH2

HC-NH2

COOH
glutamina

193

Glutamina intervine n meninerea echilibrului acido-bazic la nivelul rinichiului i furnizeaz atomii de azot necesari biosintezei bazelor
azotate adenin i guanin.
La unele specii de psri, reptile, nevertebrate, amoniacul se
elimin sub form de acid uric:

7.4.5. CATABOLISMUL ACIZILOR NUCLEICI

Acizii nucleici sunt polinucleotide, nucleotidele fiind componente
structurale ale compuilor macroergici (ATP, GTP,CTT, TTP i UTP) i
totodat unitile monomere constituente ale acizilor nucleici.
Schema general a catabolismului acizilor nucleici este urmtoarea:
ACIZI NUCLEICI
DIN HRAN
(POLINUCLEOTIDE)

N DUODEN
SUB ACIUNEA
DEOXIRIBONUCLEAZELOR,
RIBONUCLEAZELOR I A APEI
H2O

NUCLEOZIDE

SUB ACIUNEA
NUCLEOZIDAZELOR

H3PO4

MONONUCLEOTIDE
(BAZ AZOTAT +
PENTOZ + H3PO4)

BAZE AZOTATE
PENTOZE

SUB ACIUNEA
NUCLEOTIDAZELOR

PURINICE (A i G)

PIRIMIDINICE (U,T,C)
RIBOZ
DEOXIRIBOZ

Pentozele rezultate din catabolismul acizilor nucleici se absorb la

nivelul intestinului subire.
Bazele azotate insolubile n mediul apos din intestin se absorb
foarte greu. Degradarea bazelor azotate se face pe urmtoarele ci:
a) degradarea bazelor azotate purinice - la om, maimu, psri,
reptile, cine dalmaian degradarea acestora este calea metabolic de formare a acidului uric. Acidul uric se biosintetizeaz n ficat, funcia res194

pectiv denumindu-se uricopoez i se elimin pe cale renal. La marea

majoritate a mamiferelor produsul final l constituie alantoina care provine din transformarea enzimatic a acidului uric sub aciunea uricazei.
Schema general de biosintez a acidului uric este:

La om concentraia fiziologic de acid uric din snge este de

2-5 mg/100 ml snge, valorile mrite (hiperuricemia) nregistrndu-se n
afeciunea numit gut, care se manifest prin depuneri de urat monosodic n cartilaje i tendoane.
b) degradarea (catabolismul) bazelor pirimidinice:
Citozina sufer un proces de deaminare i trece n uracil, iar din
metil-citozin rezult timina.
Att uracilul, ct i timina se degradeaz printr-o secven de
reacii cu formare n final de -alanin, respectiv +
aminobutirat
H3N CH2 CH COO

.
CH3

195

7.4.6. BIOSINTEZA ACIZILOR NUCLEICI

Precursorii imediai n biosinteza ADN i ARN sunt nucleozid-5'
fosfaii, prezeni n stare liber n nucleul celular, iar enzimele implicate
sunt ADN i ARN-nucleotidil-transferazele.
7.4.6.1. Biosinteza ADN
Este procesul care se realizeaz nainte de fiecare diviziune
celular, asigurnd transmiterea informaiei genetice din generaie n
generaie i necesit existena unei molecule de ADN ce funcioneaz ca
tipar (model), purtnd numele de ADN primer.
Procesul de biosintez a ADN const n dou etape principale:
- despiralizarea moleculei de ADN primer la un capt prin
ruperea legturilor de hidrogen dintre bazele azotate complementare,
rezultnd dou catene (lanuri) polinucleotidice care nu se desprind din
macromolecula de ADN primer (se formeaz furca replicativ);
- pe fiecare caten polinucleotidic despiralizat, ce servete
ca matri, se sintetizeaz o caten nou, replic, care copiaz
succesiunea de baze azotate ntr-o manier complementar (adenintimin, guanin-citozin). Rezult astfel dou molecule de ADN hibrid,
nou sintetizate, care conin fiecare cte un lan polinucleotidic vechi, din
molecula de ADN-mam i cte un lan nou - fiica, complementar i
antiparalel, replic a mamei.
caten fiic

caten mam
furca replicativ
ADN
primer

caten fiic

caten mam

196

lan nou
lan vechi

Figura 7.1 - Schema replicrii semiconservative a ADN

1 - ADN primer
2 - DESPIRALIZAREA CATENEI MAM
3 - FORMAREA CATENELOR FIICE PRIN COPIEREA SUCCESIUNII
DE BAZE AZOTATE NTR-O MANIER COMPLEMENTAR
4 - MOLECULE DE ADN HIBRID

Procesul acesta se mai numete replicare, deoarece catena nou

format nu este identic cu matria, ci este o replic a acesteia care
conine bazele azotate complementare. Totodat biosinteza ADN este
semiconservativ, deoarece molecula de ADN primer se conserv, ea
regsindu-se n moleculele noi de ADN sub forma cte unui lan polinucleotidic.
Dup ncetarea biosintezei, fiecare molecul de ADN hibrid sufer
o rotaie n jurul axei proprii, rezultnd astfel structura dublu elicoidal,
specific moleculei de ADN bicatenar.
Tot procesul replicativ al biosintezei ADN se afl sub controlul
unor enzime specifice ca: topoizomeraza, helicaza, ADN-polimeraza,
ct i a ionilor de Mg2+.
Energia necesar acestei biosinteze este furnizat de scindarea
legturilor macroergice ale fiecrui nucleotid trifosforilat ce particip la
biosintez i care trece n deoxiribonucleotid monofosforilat:
ndATP
ndGTP
ndCTP
ndTTP

ADN-polimeraza
Mg2+
ADN primer

dAMP
dGMP
dCMP + 4nH4P2O7 + E
dTMP n ADN primer
197

7.4.6.2. Biosinteza ARN

Deoarece moleculele de ARN nu se pot autoreplica, pentru biosinteza lor este nevoie tot de ADN primer ca matri i de enzima specific
ADN-polimeraza.
Dup despiralizarea lanului de ADN primer, pe fiecare caten
polinucleotidic se sintetizeaz o molecul monocatenar de ARN, respectnd principiul complementaritii bazelor azotate, cu excepia faptului
c timina din ADN este nlocuit cu uracil. Dup o scurt coexisten,
acidul nucleic hibrid ADN-ARN se desface, ARN este translocat n
citoplasm unde i exercit rolul.
Biosinteza macromoleculelor de ARN i n mod special a celor de
ARNm are loc prin transcripie, proces n care are loc transferul informaiei genetice din ADN la molecula de ARNm nou sintetizat prin
copierea secvenei de nucleotide corespunztoare. Enzima care recunoate
pe una din catenele de ADN-activ punctul de iniiere (promotorul) biosintezei ARNm este ARN-polimeraza. Aceast enzim determin despiralizarea i desfacerea parial a celor dou catene de ADN din unitatea de
transcriere, adic din regiunea n care este nscris informaia genetic
rspunztoare de sinteza proteinei specifice. O dat rupte legturile de
hidrogen, enzima poate realiza biosinteza noului lan poliribonucleotidic,
utiliznd ribonucleotidele trifosforilate existente n nucleu. Acestea stabilesc legturi de hidrogen cu bazele complementare de pe catena matri,
iar enzima realizeaz stabilirea legturilor 3' - 5' fosfodiesterice, cu punerea n libertate a pirofosfatului, energia eliberat fiind utilizat n formarea noului lan nucleotidic. Biosinteza are loc n sensul 5' - 3'.

n momentul n care ARN-polimeraza a parcurs ntreaga unitate de

transcriere, lanul poliribonucleotidic nou sintetizat, respectiv molecula
ARNm, se desprinde de pe catena matri a ADN-activ care l-a codificat,
198

iar cele dou catene ale ADN i refac legturile de hidrogen. Molecula de
ARNm trece n citoplasm sub form de complex ribonucleoproteic, denumit i informozom.
Mecanismele de biosintez a celorlalte dou tipuri de ARN (ribozomal i de transfer) sunt aceleai ca pentru ARN m, dar fiecare tip este
codificat de regiuni bine determinate de pe una din catenele ADN, diferite
de cele care codific ARNm. Biosinteza ARNr are loc n nucleol, transcrierea lui fiind realizat de ADN nucleolar. Imediat ce este sintetizat, ARN r
se asociaz cu proteine, constituind fibrilele nucleolare.
7.4.7. BIOSINTEZA PROTEINELOR
7.4.7.1. Codul genetic
Macromoleculele de ADN din cromozomi reprezint suportul
material al informaiei genetice, al transmiterii caracterelor ereditare din
generaie n generaie. O serie de constatri dovedesc acest lucru:
- La organismele superioare exist o corelaie ntre cantitatea de
ADN din celul i cantitatea de informaii genetice. Astfel, cantitatea de
ADN coninut n nucleii celulelor somatice, diploide (cu 2n cromozomi)
este de dou ori mai mare fa de cea coninut n nucleii gameilor,
haploizi (cu n cromozomi).
- Agenii fizici sau chimici care pot s produc mutaii sunt capabili s altereze structura ADN.
- S-a constatat c prin transferul unor fragmente de ADN de la un
organism la altul se transmit i caracterele ereditare corespunztoare.
- Infecia viral.
Genele sunt purttoarele fiecrei informaii genetice, a fiecrui
caracter ereditar. Fiecare gen reprezint un fragment de ADN n care
informaia genetic este codificat printr-o secven caracteristic a
nucleotidelor. Ea este cea care permite celulei biosinteza unei proteine
specifice. Aa se explic de ce o mutaie la nivelul unei gene se traduce
printr-o protein modificat, urmat de dispariia sau alterarea activitii
biologice a acesteia. Dar o mutaie poate avea i un efect favorabil, conferind organismului un caracter benefic. Evoluia speciilor are la baz
tocmai selecia natural a mutaiilor favorabile.
199

Biosinteza proteinelor specifice i, deci, transferul de informaii,

conform regulei o gen o enzim sau mai corect o gen un lan
polipeptidic, se realizeaz cu participarea direct a celor trei tipuri de
ARN. Au loc, astfel, urmtoarele transferuri de informaii:
- Transfer ADN ADN. Prin replicare, n procesul de biosintez a ADN, are loc conservarea informaiei genetice.
- Transfer ADN ARN. Prin transcripie are loc transmiterea
informaiei de la ADN la diversele tipuri de ARN i n primul rnd la
ARNm.
- Transfer ARN protein. Prin translaie are loc biosinteza
proteinei specifice, conform informaiei coninute n ARNm.
n afar de acestea, la virusuri cu ARN mai exist dou posibiliti:
- Transfer ARN ARN. n acest fel are loc replicarea genomului ribonucleic.
- Transfer ARN ADN. Un genom ribonucleic poate fi astfel
integrat n genomul deoxiribonucleic al celulei gazd, parazitate.
Toate aceste transferuri de informaii de la ADN la protein prin
intermediul ARN au loc conform codului genetic. Acesta este constituit
din codoni. Un codon reprezint o succesiune de trei nucleotide care
codific un aminoacid. n biosinteza unei proteine, aminoacizii se succed
exact n ordinea n care se succed codonii n ARNm.
Exist 64 de codoni (4 nucleotide luate cte 3 reprezint 43 = 64 de
posibiliti). Din totalul lor doar 61 de codoni codific aminoacizi. Cum
nu exist dect 21 de aminoacizi, nseamn c sunt mai muli codoni care
pot codifica acelai aminoacid. Acetia poart numele de codoni sinonimi.
n structura codonilor sinonimi primele dou nucleotide sunt aceleai,
numai al treilea nucleotid difer. Aceast structur reprezint factorul de
stabilitate genetic ce permite ca nlocuirea unei singure baze azotate cu
alta la nivelul celui de al treilea nucleotid s nu aib repercusiuni asupra
naturii aminoacidului codificat, deci s nu induc o mutaie. Exist i trei
codoni non-sens, care nu codific nici un aminoacid. Ei indic sfritul
mesajului, al informaiei genetice. Un codon non-sens dicteaz ncetarea
transferului de aminoacizi, sfritul biosintezei proteinei.
Codul genetic este universal, de la virusuri i bacterii pn la
plante i animale superioare, inclusiv om.
Mecanismul codificrii se realizeaz prin transcripie i translaie.
200

7.4.7.2. Etapele biosintezei proteinelor

Proteinele sunt modul de expresie a informaiei genetice i, ca
atare, rolul major n biosinteza lor l joac acizii nucleici. Este necesar
transferul de informaie de la ADN prin intermediul ARNm pn la
molecula proteic. Biosinteza unei proteine implic, deci, cele dou procese ale codificrii, transcripia i translaia.
Transcripie

ADN

Translaie

ARNm

Protein

Aa cum s-a artat, prin transcripie are loc biosinteza ARNm, cu

transcrierea exact a succesiunii de codoni (de nucleotide) ai genei din
ADN n molecula monocatenar a ARNm. Aceasta conine exact aceeai
succesiune de codoni care permite biosinteza unei proteine specifice genei
respective. Uneori, moleculele de ARNm sunt policistronice, rezultnd
prin transcrierea mai multor gene (cistroni) i includ informaia necesar
pentru biosinteza mai multor proteine. Acesta este cazul enzimelor care
particip ntr-o secven de reacii metabolice, iar genele lor corespunztoare sunt grupate ntr-un operon.
Biosinteza propriu-zis a proteinelor, asamblarea aminoacizilor n
lanul polipeptidic n ordinea dictat de ARNm au loc n procesul de
translaie.
Prin translaie are loc descifrarea codului genetic, transformarea
succesiunii de codoni (nucleotide) n succesiune de aminoacizi. Cu alte
cuvinte, are loc traducerea limbajului codonilor n limbaj al aminoacizilor.
Translaia are la baz acelai principiu fundamental al replicrii
ADN sau al transcripiei ARNm i anume complementaritatea bazelor
azotate. Decodificarea sau recunoaterea codonilor din ARNm i asamblarea aminoacizilor n succesiunea dictat de acesta sunt realizate de
ctre ARN de transfer. Fiecare ARNt se caracterizeaz printr-un anumit
anticodon specific. Prin acest anticodon ARNt respectiv, care poart legat
aminoacidul specific, va recunoate codonul corespunztor din structura
ARNm. n felul acesta, pe baza complementaritii specifice ntre codonii
succesivi ai ARNm i anticodonii ARNt se asigur ncorporarea ordonat,
corect, conform informaiei genetice, a aminoacizilor n proteina ce se
sintetizeaz. ARN de transfer joac rolul unui adaptor molecular: pe de o
201

parte recunoate i leag aminoacidul specific corespunztor anticodonului caracteristic, iar pe de alt parte transport acest aminoacid la
nivelul lanului polipeptidic unde este ncorporat n locul corect, specificat
de codonul complementar din ARN mesager.
Acest mecanism de translaie, respectiv de biosintez a proteinelor
implic urmtoarele etape principale:
- activarea aminoacizilor
- iniierea lanului polipeptidic
- elongaia (alungirea lanului polipeptidic)
- terminarea biosintezei lanului polipeptidic i eliberarea
protei-nei native.
n desfurarea acestor etape sunt implicai o serie de componeni
specifici, factori absolut necesari:
- aminoacizi
- ARN de transfer, ATP, Mg2+, aminoacil-sintetaz
- ARN mesager
- uniti ribozomale 30S i 50S asamblate sub form de ribozomi
funcionali 80S sau 70S, care la rndul lor se ataeaz pe ARN m i
formeaz agregate numite poliribozomi sau polizomi; fiecare ribozom
funcional are dou situsuri: unul denumit situs A (acceptor), pentru
fixarea aminoacil-ARNt, iar cellalt denumit situs P (peptidil sau donator)
pentru fixarea peptidil-ARNt
- GTP ca furnizor al energiei necesare diferitelor reacii de iniiere, alungire, de eliberare a lanului polipeptidic
- o serie de ali factori ce intervin n procesele de iniiere, alungire i eliberare a lanului polipeptidic, ei nii fiind de natur proteic.
Activarea aminoacizilor
Prima etap n biosinteza proteinelor este reprezentat de o succesiune de dou reacii catalizate de aceeai enzim numit aminoacil-ARN t
-sintetaz, caracteristic pentru fiecare aminoacid n parte ce urmeaz s
participe n structura proteinei.
ntr-o prim reacie, aminoacidul este activat cu ATP i transformat n aminoacil-AMP legat de enzim. n felul acesta are loc ridicarea
aminoacizilor la un potenial energetic foarte nalt, necesar pentru a
asigura stabilirea legturilor peptidice ntre ei. n continuare, aminoacidul
astfel activat este legat la molecula de ARN t specific, la captul la care
succesiunea de nucleotide este CCA. Paralel are loc eliberarea AMP. Se
202

formeaz, astfel, complexul aminoacil-ARNt, cu participarea aceleiai

enzime, aminoacil-ARNt-sintetaza.
aa1 + ATP

aminoacil-ARNt-sintetaz (E1)
Mg2+

ARNt1

aa1 AMP E1

PPa

aa1 ARNt1
AMP

E1

Aminoacil - ARNt - sintetaza este enzima care recunoate pe de o

parte aminoacidul corespunztor, ea neputnd cataliza dect activarea
acestuia. Pe de alt parte, ea recunoate i ARNt corespunztor, de care
poate lega numai aminoacidul pe care l-a activat i nu altul. Aceast
enzim confer o nalt specificitate absolut necesar pentru evitarea erorilor n biosinteza proteinelor. Celula nu dispune de un alt mecanism de
control prin care s verifice natura aminoacidului i s evite ncorporarea
unui aminoacid eventual incorect fixat. n fiecare celul exist cel puin
20 de tipuri de enzim aminoacil - ARNt - sintetaz, cte un tip pentru
fiecare aminoacid pe care l recunoate i l activeaz ca aminoacil-ARNt.
Sub aceast form, fiecare aminoacid este transportat la polizomi, locul de
biosintez, de ncorporare n lanul proteic.
Iniierea biosintezei lanului polipeptidic
n aceast etap particip ribozomii, ARN mesager, o serie de
factori de iniiere care asambleaz ribozomii pe ARN m formnd polizomii, concomitent cu recunoaterea codonului de iniiere a biosintezei de
ctre metionin - ARNt, la captul 5' al ARNm.
Elongaia lanului polipeptidic
n aceast etap are loc formarea treptat a legturilor peptidice
ntre aminoacizi, care conduc la biosinteza lanului polipeptidic.
O dat cu fixarea primului aminoacil-ARNt pe ribozomi la situsul
P (peptidil) are loc selectarea urmtorului aminoacil-ARNt i fixarea sa la
situsul A cu anticodonul corespunztor cu codonul de pe ARNm. Aceast
fixare necesit energie furnizat de GTP, precum i o serie de factori de
elongaie.
Formarea legturilor peptidice, catalizat de o peptidil-transferaz
sau peptid-sintetaz, are loc ntre gruparea amino - NH 2 a aminoacidului
nou adus i gruparea carboxil - COOH a celui legat deja n lanul peptidic
iniiat. Lanul peptidic se sintetizeaz de la captul su -NH 2 terminal spre
cel -COOH terminal. Noul lan peptidic format rmne legat de ARN t
specific ultimului aminoacid, n situsul P.
203

n continuare are loc translocarea peptidil-ARNt pe situsul P pe

seama energiei furnizate prin hidroliza GTP. n acelai timp, ribozomul se
deplaseaz fa de ARNm pentru a permite codonului urmtor s fixeze n
situsul A un aminoacil-ARNt cu anticodonul complementar. Urmeaz
aceeai succesiune de reacii care conduc la stabilirea unei noi legturi
peptidice. Procesul continu pn la traducerea ntregului mesaj nscris n
molecula de ARNm. Citirea acestui mesaj se face de la captul 5' spre cel
3' al ARNm. Moleculele de ARN de transfer eliberate trec n citoplasm i
particip la legarea i transportul altor molecule de aminoacizi la locul de
biosintez a proteinei respective.
ncetarea biosintezei proteice
ntreruperea procesului de elongaie este determinat de apariia
codonilor non-sens din molecula ARNm pe ribozomul funcional. Aceti
codoni pun punct mesajului, biosinteza lanului polipeptidic este sistat i,
n acelai timp, se rupe legtura acestuia cu ARN t care a transportat ultimul aminoacid. Proteina astfel sintetizat este pus n libertate cu configuraia tridimensional caracteristic. Se consider c mai ales distribuia
resturilor de cistein, precum i a aminoacizilor hidrofobi sunt factori ce
determin configuraia spaial care se stabilete chiar n timpul procesului de elongaie.
204

O dat cu eliberarea proteinei native are loc i eliberarea ribozomilor de pe ARNm, precum i a ARNt, acetia putnd relua procesul de
biosintez al unei alte proteine.

7.5. INTERCONEXIUNI METABOLICE

7.5.1. CONSIDERAII GENERALE
Metabolismul, respectiv totalitatea reaciilor enzimatice de
degradare i sintez care se petrec n organismul viu, se caracterizeaz
printr-o mare diversitate biochimic.
Transformrile metabolice implic o interconexiune a diferitelor reacii biochimice exprimat pe baza unor corelaii care au caracter unitar i integrativ. Corelaiile metabolice se stabilesc prin apariia
unor metabolii comuni i prin ci metabolice comune ntre catabolismul i anabolismul biomoleculelor ce aparin diferitelor clase de
compui biochimici.
Anumii metabolii comuni, ca de exemplu acetilcoenzima A,
rezultat din metabolismele intermediare, constituie puncte de interferen (de rscruce) ale acestor ci.
De asemenea, unele ci metabolice reprezint ci comune pentru diferite secvene de reacii biochimice, ca de exemplu Ciclul Krebs,
care este definit n acest context ca fiind calea comun major de
metabolizare a glucidelor, lipidelor, protidelor.

205

7.5.2. EXEMPLE DE CORELATII (INTERCONEXIUNI)

METABOLICE

CORELAIA NTRE METABOLISMUL GLUCIDICLIPIDIC-PROTIDIC ( SCHEM)

GLUCIDE

LIPIDE

PROTIDE

OZE (Glucoz)

ACIZI GRAI

deaminare

AMINOACIZI

-oxidare
Glicoliza

ACETIL-CoA

BIOSINTEZ

CORPI
CETONICI

transaminare

-CETOACIZI
(ACID PIRUVIC)
(ACID -CETOGLUTARIC)
ACID OXALILACETIC

COLESTEROL

BIOSINTEZ

deaminare

CICLUL
KREBS

ACID
FUMARIC
RESPIRAIA
CELULAR

CICLUL
UREOGENETIC

ACID
OXALILACETIC

+
FOSFORILAREA
OXIDATIV

ACID
ASPARTIC
BIOSINTEZ

BAZE AZOTATE
PURINICE I
PIRIMIDINICE

206

BIBLIOGRAFIE SELECTIV
1. ALBERTS B., BRAY D., LEWIS J., RAFF M. - Molecular Biology
of the Cell, Garland, New York, 1999.
2. CHAMPBELL P., SMITH A. - Biochemistry Illustrated, Churchill
Livingstone, London, 2000.
3. CHEFTEL J.C. et CHEFTEL H. - Introduction a la biochimie et a la
technologie des alimentes, Technique et Documentation, Paris, 1992.
4. CHIRIL R. - Biochimie vegetal, Ed. Printech, Bucureti, 2000.
5. DAVIDSON V., SITTMAN D. - Biochemistry, Harwal Publ.,
Philadelphia, 1994.
6. GRBAN Z. - Noiuni de biologie molecular, Ed. Eurobit,
Timioara, 1997.
7. IONESCU E., ERBAN M. - Biochimie animal, Ed. Fundaiei
Romnia de Mine, Bucureti, 2001.
8. LEHNINGER A., NELSON D., COY M. - Principles of
Biochemistry, Worth Publ., New York, 2000.
9. PAPUC C., ERBAN M. - Biochimie structural, Ed. Printech,
Bucureti, 2003.
10. POP A., ERBAN M. Elemente de biochimie veterinar, Ed.
Printech, Bucureti, 1999.
11. ROOIU N., ERBAN M. - Biochimie medical, Ed. Muntenia,
Constana, 2003.
12. STREYER L., BERG J., TIMOCZOKO J. - Biochemistry, W.
Freeman Comp., New York, 2002.
13. ERBAN M. - Biochimie medical veterinar, Ed. Didactic i
Pedagogic, Bucureti, 1982.
207