Definitie

Cuvântul de tanin este foarte veche și reflectă o tehnologie traditionala."Bronzarea"

(impermeabilizare și conservarea) a fost cuvântul folosit pentru a descrie procesul de
transformare a pieilor de animale în piele cu ajutorul extractelor de plante din părți diferite de
plante din diferite specii de plante.
o Piese plantelor care conțin taninuri includ coaja, lemn, fructe, fruitpods, frunze,
rădăcini, și de plante galei.
o Exemple de specii de plante folosite pentru a obține tanini pentru bronzare scopuri
sunt nuiele (sp salcam.), Stejar (Quercus sp.), Eucalipt (Eucalyptus sp.), Mesteacan
(Betula sp.), Salcia (Salix caprea), pin (Pinus sp .), quebracho (Scinopsis balansae).
Tanini sunt compuși fenolici, care precipita proteinele . Ele sunt compuse dintr-un grup foarte
divers de oligomeri și polimeri. Există o oarecare confuzie cu privire la terminologia utilizată
pentru a identifica sau clasifica o substanță ca un tanin, fapt,
o nu numai tanini leagă și de proteine precipitat (polifenoli, cum ar fi pirogalolului și
rezorcinol au, de asemenea, această proprietate),
o Nu toate polifenoli precipita proteinele sau complexe cu polizaharide.
Una dintre cele mai satisfăcătoare definiția de taninuri a fost dat de Horvath (1981):
" Orice compus fenolic cu greutate moleculară suficient de ridicat conținut de hidroxili
suficiente și a altor grupuri adecvate (de exemplu, carboxyls) pentru a forma complecși eficient
puternice cu proteine si alte macromolecule în anumite condiții de mediu fiind studiate "
Tanini pot complex cu:
 Proteine
 Amidon
 Celuloză
 Minerale
Aparitie
Tanini sunt larg distribuite în regnul vegetal. Ele sunt comune atât în gimnosperme și
angiosperme. În cadrul Angiosperme, taninuri sunt mai frecvente la Dicotyledons decât în
Monocotyledons.
Exemple de familii de Dicotyledons bogate în tanin, sunt:
  Leguminosae: Acacia sp. (Nuiele); Sesbania sp;. Lotus sp. (Trifoi); Onobrychis sp. (S
parcetă);
 Anacardiaceae: Scinopsis balansae (quebracho)
 Combretaceae : mirobalan
 Rhizophoraceae : Mangrove
 Myrtaceae: Eucalyptus sp,. Mirtus sp. (Myrtle)
 Polinaceae : canaigre.
Alte importante de tanin care conțin plante
sunt Quercus sp. (Stejar), Acer sp. (Artar), Betula sp.(Mesteacan), Salix
caprea (salcie), Pinus sp. (Pin), Sorg sp.
Tanini sunt situate in principal in vacuole sau ceară de suprafață de plante. În aceste site-uri în
care nu interferează cu metabolismul plantelor. Numai după defalcare de celule moarte si pot ei
să acționeze și să aibă efecte metabolice.
Locul de amplasare a taninuri din țesuturi vegetale diferite:
 Bud țesuturi - cele mai frecvente în partea exterioară a mugurilor, probabil, ca protecție
împotriva înghețului
 Leaf țesuturi - cele mai comune în epiderma superioară. Cu toate acestea, în plante
perene, taninuri sunt distribuite uniform în toate țesuturile frunze. Ele servesc pentru a
reduce gustul și, prin urmare, protecția împotriva prădătorilor.
 Rădăcină țesuturi - cele mai comune în hipoderm (chiar sub epiderma suberized). Ele
acționează, probabil, ca o barieră chimică la pătrunderea și colonizarea rădăcinilor
plantelor de către agenți patogeni.
 De semințe țesuturi - situat în principal într-un strat între tegumentului exterior și stratul
de aleuron.Acestea au fost asociate cu mentinerea hibernare plantelor, și au proprietăți
bactericide și allelopathic.
 Stem țesuturi - de multe ori găsite în zonele de creștere active ale copacilor, cum ar fi
floem secundar și xylem și stratul de epiderma și între cortexul. Tanini pot avea un rol in
reglementarea de creștere a acestor țesuturi. Ele sunt, de asemenea, găsite? în duramen de
conifere și poate fi un contribui la durabilitatea naturala a lemnului de activitatea
microbiană inhibarea.
Biosinteza
Există trei clase mari de metaboliți secundari din plante:
1. Care conțin azot compuși
2. Terpenoide
3. Phenolics
Taninuri aparțin clasei fenoli. Toți compușii fenolici (primar și secundar) sunt, într-un fel sau
altul, au format prin calea de acid shikimic , de asemenea, cunoscut sub numele de cale
phenylpropanoid.
Aceeași cale duce la formarea de polifenoli, cum ar
fiizoflavone , cumarine , lignine și aminoacizi aromatice (triptofan, fenilalanină și tirozină).
Cele două categorii principale de taninuri care hrana animalelor, impactul sunt taninuri
hidrolizabile (HTS) și taninuri condensate identificate mai corect ca proanthocyyanidins (PAS),
care sunt rezistente la degragation hidrolitică. Un exemplu al modului în taninuri mai multe
comune sunt formate este după cum urmează:
o Acid galic este derivat din acidul quinic.
o Ellagotannins sunt formate din esteri ai acidului hexahydroxydiphenic de cuplare
oxidativă a unităților vecine de acid galic atașate la un nucleu de D-glucoză.
o Cuplare în continuare oxidativ face de hidrolizabile tanin (HT) polimeri.
o Proanthocyanidin (PA), precursorii biosintetice sunt leucocyanidins (flavan-3 ,4-diol
și flavan-4-ol)
o La autoxidation, în absența căldurii, ele formează anthocyanidin și 3-
deoxyanthocianidin, care, la rândul său, pentru a forma polimerizarea AP.
Structura chimica
Tanini sunt una dintre cele mai multe tipuri de compuși secundari găsite în plante
Caracteristici de taninuri:
 Compuși oligomerice cu unități multiple cu structura grupurilor fenolice libere ,
 greutate moleculară variind de la 500 la> 20.000,
 solubil în apă, cu excepția unor structuri cu masă moleculară mare,
 capacitatea de a lega proteine și formează insolubile sau solubile tanin-proteine complexe.
Tanini sunt de obicei împărțite în două grupe:
 Hidrolizabil tanini (HT)
 Proantocianidine (AP) (adesea numit Tanini Condensed)
Taninuri hidrolizabile
HTS sunt molecule cu un poliol (în general, D-glucoză), ca un nucleu central. Grupurile de
hidroxil de acesti carbohidrati sunt total sau parțial esterificat cu grupurile de fenolici, cum ar fi
acidul galic (-> gallotannins) sau acid elagic (-> ellagitannins). HT sunt de obicei prezente în
cantități mici în plante.
Unii autori definesc două clase suplimentare de taninuri hidrolizabile: taragallotannins (acid
galic și acid quinic ca bază) și caffetannins (acid cafeic și acidul quinic)
. 1 Gallotannins:
 Grupurile de fenolici, care esterify cu miez sunt uneori constituite de dimeri sau
oligomeri mai mari de acid galic (fiecare monomer este numit galloyl)
 Fiecare molecula HT este, de obicei, compus dintr-un miez de D-glucoză și 6 și 9 grupe
galloyl
 În natură, există o abundență de esteri mono și di-galloyl de glucoză (MW aproximativ
900).Acestea nu sunt considerate a fi taninuri. Cel puțin 3 grupe hidroxil de glucoză
trebuie să fie esterificat pentru a expune o capacitate suficient de puternic caracter
obligatoriu pentru a fi clasificat ca un tanin.
 Sursa cea mai faimoasa gallotannins este acidul tanic obținute din galei crenguță de Rhus
semialata . Ea are o penta galloyl-D-glucoză core și cinci de unități mai mult de galloyl
legate de una dintre galloyl de bază.
2. Ellagitannins:
 Grupurile de fenolici constau acidului hexahydroxydiphenic , care deshidratează
spontan la forma lactonei, acid elagic .
 Gama de greutate moleculară: 2000-5000.
HT proprietăți:
 hidrolizat de acizi sau baze ușoare ușoare pentru a produce acizi fenolici si carbohidrati
 În aceleași condiții, proantocianidine (condensat taninuri) nu hidroliza.
 HTS sunt, de asemenea, hidrolizat de apă caldă sau enzime (de exemplu tannase).
Proantocianidine(taninuri condensate)
AP sunt mai larg distribuite decât HTS. Ele sunt oligomeri sau polimeri de unități de flavonoide
(adică flavan-3-ol), legate de carbon-carbon obligațiuni nu receptive la clivaj prin hidroliză.
o AP sunt mai adesea numite taninuri condensate din cauza structurii lor chimice
condensat. Cu toate acestea, de asemenea, și HTS reacția de condensare. Termenul,
condensat taninuri, este, prin urmare, potențial confuz.
o Termenul, proantocianidine, este derivat din reacția de oxidare catalizată de acid, care
produce antocianidine roșii asupra încălzirii AP în soluții acide de alcool.
o Cele mai frecvente Antocianidinele produse sunt cyanidin (flavan-3-ol, din
Procyanidin) si delfinidina (de la prodelphinidin)
o AP poate conține 2-50 sau mai mare de unități flavonoidici; polimeri PA au structuri
complexe, deoarece unitățile de flavonoizi poate diferi pentru unele substituenți și din cauza
site-uri variabile de obligațiuni interflavan.
o Pigmenți Anthocyanidin sunt responsabile pentru gamă largă de roz, stacojiu, rosu, violet
mov, și culorile albastru în flori, frunze, fructe, sucuri de fructe, și vinuri. Ele sunt, de
asemenea, responsabile pentru gustul astringent al fructelor și vinuri.
o PA carbon-carbon obligațiuni nu sunt despicat prin hidroliză.
o În funcție de structura lor chimică și gradul de polimerizare, PAS poate sau nu poate fi
solubile în solvenți organici apoase.
Analiza chimică
Cantitatea și tipul de taninuri sintetizati de catre plante variază considerabil în funcție de specii
de plante, soiuri, țesuturi, stadiul de dezvoltare, precum și condițiile de mediu. Prin urmare,
studiul efectelor nutriționale de taninuri pe animale necesită cuantificare a taninuri
prezente intr-o dieta special . . Datorită complexității de taninuri, mai multe metode au fost
dezvoltate pentru cuantificarea lor. Nici unul dintre ei, cu toate acestea, este complet
satisfăcătoare.
Pregătirea probei
Primul factor să ia în considerare este modul în furaje sau hrana pentru animale este consumată
de animal - feed-uri ar trebui să fie analizate în forma mâncat de animale
În cazul în care probele sunt colectate proaspete și acestea trebuie să fie depozitate, congela-
uscare este blândă metoda de conservare și este recomandată în loc
de congelare , aer saucuptor de uscare .
  Dacă uscarea înghețarea este prea scump sau echipament nu este disponibil, înghețarea
fără dezghețarea eșantion înainte de extracție este sugerat.
 Dacă uscare este singurul mijloc disponibil pentru conservarea materialului, de uscare
temperatura trebuie să fie mai mare de 40 ° C (pentru a evita oxidarea de către enzimele
încă active) și mai mică de 60 ° C (pentru a evita deteriorarea căldură și de polimerizare).
Exemplu de manipulare
După tăierea proba ar trebui să fie -
 Stocat într-un recipient rece, întuneric,
 Se taie în bucăți mici și se congela cu azot lichid,
 Pulverizat cu un mojar și un pistil, și
 Imediat extrase sau congela uscate și depozitate la -4 ° C.
Exemplu de extracție
Tanini sunt extrase cu un solvent organic apoasă.
 Acetonă 70% și 30% apă este un extractant, mai eficace decât solvenți alcoolice.
o Acetonă inhibă tanin-proteine interacțiune. Aceasta este o limitare în testele de
precipitatii proteine.
 În multe plante, există o mare parte (uneori> 50%) din taninuri care nu pot fi extrase
(taninuri insolubile).
o Această fracțiune unextractable nu poate fi ignorat din cauza efectelor sale
nutritive.
Purificare probă și izolarea
Tanini trebuie să fie purificat de polifenoli cu greutate moleculară mică și pigmenți care sunt
prezente în extractele de plante brute.
 Purificare este esențială pentru elaborarea unor standarde adecvate.
 Purificarea cantități mari de taninuri se poate face prin profitând de absorbție a acestora
de către Sephadex LH-20. Referință: Hagerman AE, Klucher KM, 1986 - Tanin-proteine
interacțiune. În: flavanina de plante în biologie și medicină: biochimice, farmacologice,
și relațiilor structură-activitate.Ed. Cody V., E. Middleton Jr., Harborne J. - Alan R.
Liss, New York, pp. 67-76.
 O metodă alternativă de izolare și mai rapid a fost dezvoltat de către Giner-Chavez, 1996
(a se vedea "teste mixte").
Chimice teste
Teste de tanin pot fi împărțite în Cantitatea Colorimetrie, Gravimetic proteine,, și mixte.
A. colorimetrice teste
Folin-Dennis metoda și modificările sale (Folin-Ciocalteau metoda)
o Reacția se bazează pe reducerea de acid fosfomolibdic de fenoli din alcaline apoase.
o Metoda determină totalul grupărilor fenolice libere și, prin urmare, este o metodă de a
determina phenolics totale solubile (fie HT și PA).
o Problemă: nu face diferența între taninuri și fenolice multe care nu sunt
taninuri. Compuși de interferență, cum ar fi acidul ascorbic, tirozină și eventual
glucoza sunt, de asemenea, măsurate.
Vanilină-HCl testul
o Specific pentru taninurile Pas sau condensat.
o Exo-tip de reacție - vanilie reacționează cu meta-substituit Un inel-de flavanols pentru a
forma un cromofor, numărul de flavanols este proporțională cu absorbanța soluției.
o Probleme:

o Low flavanols masă moleculară exagerat de mari dimensiuni și polimeri

underreact,
o Catechine este folosit ca standard. Acest monomer dă densitatea maximă optică
care să conducă la subestimarea de polimeri mari.
Butanol-HCl testul
o Specific pentru AP sau taninuri condensate
o Endo-tip de reacție - metoda implica depolimerization HCl catalizată de taninuri
condensate în butanol pentru a obține un produs roșu anthocyanidin care poate fi
detectat spectrofotometric.
o Problemă: polimeri de tanin sunt despicat în dimerilor sau trimeri loc de monomeri și
acest lucru duce la subestimarea.
o Gradul de polimerizare a PAS poate fi estimată prin combinarea testul de butanol-HCl
cu testul de vanilină
o Testul măsoară butanol de acid numărul total de reziduuri flavanoid prezenta și
analiza vanilină măsoară numărul de molecule.
 o Testul butanol-HCl este, de asemenea, folosit pentru a estima cantitatea de taninuri
insolubile din reziduuri de extracție sau de la FND.
o Problemă: Nu toate pigmenti rosii se dizolvă, rezultând în subestimarea tanin.
Rhodanine test
o Specific pentru gallotannins (un singur tip de HT)
o Eșantionul este supus hidrolizei de a elibera acid galic. Reacția dintre acidul galic și
rhodanine vopseaua produce o culoare intensă, care este măsurată spectrofotometric.
Wilson si Hagerman test
o Specific pentru ellagitannins (un alt HT)
o Eșantionul este supus hidrolizei de a elibera acid elagic. Reacția dintre acidul elagic și
nitrit de sodiu produce o soluție de culoare, care se măsoară spectrofotometric.
Toate metodele menționate mai sus colorimetrice sunt descrise în: PG Waterman, Mole S.
(1994) - Analiza de metaboliți de plante fenolici. Blackwell Scientific Publications, Oxford,
Marea Britanie
B. gravimetrice teste
Metoda gravimetrică cu Ytterbium (Reed et al., 1985)
o Stabilește doar taninuri solubile prezente în extracte de plante; tanini insolubile nu sunt
măsurate.
o Bazat pe capacitatea de a precipita ytterbium trivalent selectiv polifenoli din extracte de
plante.
o Avantaje:

o Standarde nu sunt necesare,

o Precipitatul poate fi ușor dizolvat cu acid oxalic pentru a obține o soluție de
polyphenolics și insolubile Yb-oxalat. Soluția poate fi folosită pentru analize
ulterioare (analiza colorimetrica, cromatografie, studiile de inhibiție).
o Probleme:

o Nu toate polifenoli se precipită.

o Repetabilitate Minima în instalații cu un nivel scazut de taninuri.
De referință: Reed JD, Horvath PJ, Allen MS, Van Soest PJ (1985) - Determinarea gravimetrică
a phenolics solubile, inclusiv taninuri din frunze prin precipitare cu ytterbium trivalent. J.
Sci. Agric alimente,. 36 :255-261
Metoda gravimetrică cu PVP (Makkar et al., 1995)
o Stabilește doar taninuri solubile prezente în extracte de plante; tanini insolubile nu sunt
măsurate.
o PVP se leagă ireversibil taninuri.
o Această metodă nu este foarte sensibil și tinde să subestimeze taninuri.
De referință: Makkar HPS, Blümmel M., Becker K. (1995) - Formarea de complexe între
pirolidone polyvinil sau polietilen-glicoli și taninuri și implicarea lor în producția de gaze și
digestibilitate adevărată în în tehnici in vitro. Br. J. Nutritie, 73 :897-913
Metoda gravimetrică bazată pe sistemul de detergent (Horvarth et al., 1981)
o Include tanini solubile și insolubile.
o Pași -
o Măsurarea reziduurilor acide-detergent a FND (DNA) și reziduu de detergent
neutru-a ADF (AND),
o Diferența DNA-și este utilizat pentru a estima taninuri. Această valoare a fost
folosit cu succes în ecuația sumară Van Soest pentru a estima fracțiunea de
feed-uri, care este indigest, datorită acțiunii de taninuri.
o Probleme: taninuri multe solubile nu sunt măsurate.
De referință: Horvath, PJ (1981) - Semnificația nutrițional și ecologic al Acer-tanini si polifenoli
conexe. MS tezei de doctorat. Universitatea Cornell, Ithaca, NY, Statele Unite ale Americii
C. precipitatii proteine teste
Aceste metode sunt mai strâns legate de efectele biologice ale taninuri.
Testul de difuzie Radial (Hagerman, 1987)
 Această metodă depinde de formarea de complexe între taninuri și albumină din ser
bovin încorporate în agar.
 Extracte de plante sunt plasate într-o bine în agar. Ei difuzează în agar și
precipitarea albuminei în cazul în care sunt prezente taninuri. În acest caz, se
formează un cerc opac.
o Diametrul cercului este proporțională cu cantitatea de taninuri din extractul
o Standarde adecvate sunt necesare pentru a estima cantitatea de taninuri.
o Standardul cel mai des utilizat este acidul tanic, iar rezultatele sunt
exprimate în echivalent acid tanic.
 o Această metodă permite determinarea unui număr mare de probe cu
facilități de laborator limitate.
o Problemă: mai puțin utilă pentru cuantificarea decât procedurile
colorimetrice.
De referință: Hagerman AE (1987) - Metoda de difuzie pentru determinarea Radial taninuri din
extracte de plante. J. Chem. Ecol,. 13 : 437-449
D. teste mixte
Metoda de Giner-Chavez, 1996
Această metodă de condensat taninuri sau PAS ., care combină unele metode anterioare într-o
încercare de a elimina problemele lor majore și pentru a reduce timpul necesar pentru analiza
metodei constă din -
 Extracția de taninuri din probele de plante folosind acetona 70% soluție apoasă
(metoda tradițională).
 Izolarea taninuri condensate folosind plante ytterbium trivalent pentru a pregăti
standard.
 Analiza taninuri condensate folosind metoda de butanol-HCl (metoda tradițională).
Principala inovație în această metodă este că în loc de a folosi un standard extern ca quebracho
(așa cum se sugerează în testul butanol), standarde interne (taninuri din aceeasi planta sub
analiză) sunt utilizate.
 Standarde externe au limitare serioasă că coeficienții de extincție pentru
chromophores produse cu ele, de obicei, sunt diferite de cele obținute din extracte
de plante
o Cu alte cuvinte, fiecare gram de standard extern (de exemplu cyanidin sau
quebracho) are o absorbție diferită de fiecare gram de tanin din extract de
plante.Mai mult decât atât, de absorbție variază în funcție de specii de
plante, din cauza varietate de tipuri de tanin prezente în natură.
 În metoda Giner-lui Chavez, standard intern se obține prin precipitarea cu tanini
trivalent ytterbium, cum ar fi în metoda lui Reed.
o În acest fel, chiar dacă nu toate taninuri prezente în extractele de plante sunt
precipitate de Yb, este posibil să se izoleze și să cuantifice tanini pentru
fiecare plantă, care pot fi apoi folosite pentru curba standard.
  Același obiectiv ar fi putut fi realizat prin izolarea taninuri cu Sephadex (a se vedea
"purificare Sample"), dar este nevoie de două ori mai mult timp (4 zile fata de 2
zile).
 Utilizarea de standarde interne oferă o estimare mai realistă decât cu standardele
externe.
o Folosind quebracho, conținutul de tanin din Desmodium ovalifolium sa
dovedit a fi de peste 200%! Cu toate acestea, valoarea a fost de aproximativ
zece ori mai mic atunci când un etalon intern a fost folosit.
Referință: Giner-Chavez BI (1996) - taninuri condensate în tropicale furaje - Doctor tezei de
doctorat. Universitatea Cornell, Ithaca, NY, Statele Unite ale Americii
Referinte
Aceste pagini au fost scrise de Antonello Cannas , un doctorat student în Zootehnie,
Universitatea Cornell. Sunt din Sardinia, Italia. Lucrez ca un cercetator la Universitatea din
Sassari, Sardinia.Cercetarea mea se concentreaza pe hrana oilor de lapte. Am fost educați să
iubească taninuri , mai ales atunci când este diluat cu o soluție apoasă 14% de alcool și potrivite
cu brânză de oaie în vârstă din Sardinia și unele pâine.
O mare parte din text, imagini și structurile chimice ale taninuri au fost luate de la doctorat Teza
deBertha Iliana Giner-Chavez , care, apropo, a fost minunat și mi serviciu si prieten. Teza ei de
doctorat are o introducere foarte frumos și literatura de specialitate privind tanini în hrana
animalelor.Acesta este cel mai clar comentariu pe această temă, am avut o șansă de a citi. Mai
mult decât atât, în teza ea descrie metoda, ea a dezvoltat pentru a analiza taninuri. Ea este din
Mexic, o țară în care tanini în hrana animalelor, sunt la fel de comune ca ardei jalapeno în
nutriția umană.
Un alt comentariu este foarte bun la care am pescuit un lot este unul de Jess Reed .
O sursă de mare și completă asupra taninuri este capitolul 13 din "biblia" de hrana animalelor,
scrise de Peter J. Van Soest , care, apropo, a fost consilierul meu în timpul Maestrul meu și este
co-președinte pentru Ph D.
Referinte
Giner-Chavez BI (1996) - taninuri condensate în tropicale furaje - Doctor tezei de
doctorat.Universitatea Cornell, Ithaca,
NY, Statele Unite ale Americii.
Haslam E. (1989) - polifenoli din plante . Cambridge University Press, Cambridge, Marea
Britanie. Chimie și semnificația de condensat taninuri (1989). Ed. de Hemingway RW și JJ
Karchesy. Plenul presă, New York. Reed, JD (1995) - . toxicologie nutrițional de taninuri și
polifenoli conexe în leguminoasele furajere J. Anim. Sci. . 73:1516-1528 Van Soest PJ (1994) -
Ecologie nutritivă a rumegătoarelor (2 -a ed.). Cornell University Press, Ithaca, NY, Statele
Unite ale Americii. Waterman PG, Mole S. (1994) - Analiza de metaboliți de plante fenolici
. Blackwell Scientific Publications, Oxford, Marea Britanie.