09/05/2017 Electroforeza proteinelor serice | Synevo

30 Lei

Informatii generale
Proteinele serice indeplinesc functii variate in organism:
• sursa de nutritie;
• componente ale sistemelor tampon;
• agenti imunologici (imunoglobulinele);
• rol de carrier, asigurand transportul anumitor ioni si molecule (haptoglobina, prealbumina, transferina);
• rol de reglare a activitatii diverselor enzime proteolitice (antiproteaze: alfa1-antitripsina, alfa2-
macroglobulina);

• rol in reglarea presiunii oncotice2.

Metoda curenta pentru separarea proteinelor serice utilizata in laboratoarele de biochimie medicala este
electroforeza. Se utilizeaza suporturi solide si pH alcalin, la care toate componentele proteice sunt incarcate
negativ si migreaza spre polul pozitiv. Pe electroforegrama, dupa colorare, proteinele apar sub forma de benzi
carora li se masoara densitatea optica, ⎤ecare banda avand un maxim de absorbtie. Prin electroforeza, in
conditiile amintite mai sus, se obtin cinci fractiuni: albumina serica, a1, a2, b, g – globuline3. Unele sisteme de
electroforeza pot diferentia zona b in doua benzi distincte b1 si b2 rezultand astfel 6 fractiuni proteice in total.

Albumina, a1 si b apar sub forma unor benzi omogene, bine de⎤nite. a2, si g  apar ca benzi difuze, iar fractiunea
g prezinta in partea sa centrala o zona mai intens colorata2.
Recomandari pentru efectuarea electroforezei proteinelor serice – detectarea gamapatiilor  monoclonale;
evaluarea proteinelor serice si a statusului nutritional3.

Pregatire pacient – à jeun (pe nemancate) sau postprandial1.

Specimen recoltat – sange1.

Recipient de recoltare – vacutainer fara anticoagulant cu/fara gel separator1.

Prelucrare necesara dupa recoltare – se separa serul prin centrifugare1.

Volum proba – minim 0.5 mL ser1.

Cauze de respingere a probei – ser hemolizat1.

Stabilitate proba – serul separat este stabil 4 zile la temperatura camerei sau o saptamana  la  2-8°C1.

Metoda – electroforetica (in gel agar) urmata de scanarea densitometrica a fractiunilor obtinute1.

Valori de referinta – sunt dependente de varsta2

Varsta Albumina (%) a1(%) a2(%) b(%) g(%) A/G

< 1 an 40-65 2-5 6.6-13.5 8.5-14 10-21 1.16-2.23

https://www.synevo.ro/electroforeza­proteinelor­serice/ 1/5
09/05/2017 Electroforeza proteinelor serice | Synevo

1 – 16 ani 50-65 2-5 6-15 8.5-15 10-22 1.06-2.48

> 16 ani 52 – 68 2-5 6,6-13,5 8,5 -14 11 – 21 1.39-2.23

In cazul sistemului care separa 6 fractiuni se utilizeaza urmatoarele valori de referinta:

Albumina: 52-65.1%
a1 globuline: 1-3%

a2 globuline:  9.5-14.4%

b1  globuline:  6-9.8%

b2  globuline:  2.6-5.8%

g   globuline:  10.7-20.3%2.

Interpretarea rezultatelor3
Pentru a facilita interpretarea rezultatelor va ⎤ descrisa ⎤ecare din cele 5 fractiuni cu proteinele componente:
(vezi 韛�gura 8.1.2)2
 

  Fig.8.1.2

 Albumina
Scaderea albuminei serice (hipoalbuminemie) survine in stari patologice variate si are semni⎤catii diferite
(malnutritie, malabsorbtie, sindrom nefrotic, neoplazii). Cresteri ale albuminei apar in urma deshidratarilor. In
cazuri speciale, in zona de migrare a albuminei se constata o banda suplimentara, datorata unor variatii
genetice fara relevanta clinica (aloalbuminemie si bisalbuminemie).
Zona a1  re⑸ecta in special concentratia serica de alfa1-antitripsina, astfel ca reducerea acestei fractiuni se
intalneste in de⎤citul de alfa1-antitripsina asociat cu anumite boli pulmonare (em⎤zem cu debut precoce) si
hepatice (hepatita neonatala). Cresteri se inregistreaza in toate reactiile in⑸amatorii („reactant de faza acuta”).
In cazuri rare, obtinerea unei benzi suplimentare largi in aceasta zona poate sugera prezenta alfa-fetoproteinei.
Zona a2    este constituita din 2 componente proteice: alfa2 macroglobulina si haptoglobina.

Crestere de a2 apare in infectii acute, reumatism articular acut, arterita, sindrom nefrotic, diabet zaharat,
neoplazii; scaderea acestei fractiuni se poate intalni in pancreatite acute severe, leziuni hepatocelulare,
sindroame de coagulare intravasculara diseminata, anemii hemolitice, anemii megaloblastice.
Zona b  este alcatuita din 2 benzi distincte: b1 corespunzatoare transferinei si b2 care include fractiunile
complementului C3 si C4. Al treilea component al acestei zone este beta-lipoproteina, a carei banda se poate
suprapune pe cea a transferinei sau C3 sau poate ⎤ situata in zona beta-gamma.

https://www.synevo.ro/electroforeza­proteinelor­serice/ 2/5
09/05/2017 Electroforeza proteinelor serice | Synevo

Nivelul seric de b globuline creste in anemia feripriva si ciroza biliara si scade in boli autoimune a⑸ate in puseu
activ (LES), nefroza, afectiuni hepatice, neoplazii, infectii acute si cronice. In unele cazuri de mielom multiplu de
tip IgA se poate constata prezenta unui component monoclonal in aceasta zona.
Zona g  Gamma-globulinele sunt globulinele cele mai importante. Din aceasta categorie fac parte
imunoglobulinele (IgG, IgA, IgM, IgD si IgE). Anomaliile suferite de acestea se traduc ⎤e prin diverse de⎤cite, ⎤e
prin hipergamaglobulinemii policlonale sau monoclonale.
Procentul de g globuline scade in agamaglobulinemie, hipogamaglobulinemii si sindroame nefrotice.
Hipogamaglobulinemia poate ⎤ congenitala sau dobandita si poate ⎤ usor detectata la electroforeza
proteinelor serice atunci cand concentratiile principalelor 3 clase de imunoglobuline sunt scazute (IgG, IgA si
IgM). Prezenta hipogamaglobulinemiei la adult impune continuarea investigatiilor in vederea depistarii unei
posibile boli limfoproliferative (mielom cu lanturi usoare, leucemie limfatica cronica, limfoame).
Cresterile policlonale de gamaglobuline indica un proces imunologic cronic asociat cu afectiuni hepatice
(hepatita cronica activa, ciroza), boli de colagen (LES, poliartrita reumatoida), neoplazii (ex. boala Hodgkin),
leucemie mielo-monocitara cronica. In aceste cazuri, hipergamaglobulinemia se datoreaza activarii unui numar
mare de clone plasmocitare care elibereaza imunoglobuline. Trebuie mentionat aspectul caracteristic cirozei
alcoolice de „punte” beta-gama, vizualizat pe gel ca o zona intens colorata intre zonele beta si gamma.
Uneori, in zona gamma se pot observa cateva benzi mici, inguste, denumite oligoclonale, intalnite la pacienti cu
hepatita,  boli ale complexelor imune, sindromul imunode⎤cientei dobandite, limfomul angioimunoblastic.
Gamapatiile monoclonale includ un numar mare de conditii clinice si biologice asociate de obicei cu afectiuni
maligne (mielom multiplu, boala Waldenström, amiloidoza, limfoame) dar si cu unele afectiuni benigne sau
chiar cu absenta unei modi⎤cari patologice (gamapatii monoclonale cu semni⎤catie nedeterminata). In aceste
cazuri, se depisteaza la electroforeza proteinelor un component monoclonal (banda M), rezultat ca urmare a
proliferararii unei singure clone plasmocitare. Pe gel, componentele monoclonale apar sub forma unor benzi
inguste, net de⎤nite, iar dupa scanarea densitometrica, se obtin „varfuri” (peak-uri) caracteristice, ce pot ⎤
intalnite oriunde intre zonele alfa si gamma, datorita mobilitatii electroforetice variabile, cel mai frecvent insa in
zona gamma.
Imunoglobulinele monoclonale sunt omogene din punct de vedere structural si biochimic, ⎤ind alcatuite dintr-
un singur tip de lant usor (kappa sau lambda). In circulatie pot ⎤ eliberate imunoglobuline complete sau numai
subunitati ale acestora (ex. lanturi usoare monoclonale, denumite proteine Bence-Jones). Prezenta
componentului monoclonal va ⎤ precizata pe buletinul ⎤nal de analize al pacientului, cu recomandarea de a se
efectua electroforeza proteinelor serice cu imuno⎤xare1-3.
In tabelul de mai jos sunt sintetizate informatiile prezentate:

Zone electroforetice

Descriere aspect Albumina % Alfa – 1 Alfa – 2 Beta Gamma

% % % %

N
Normal N N N N

Enteropatie cu pierdere de proteine – N+ N+  N- -N+

Sindrom nefrotic – N +++ N N-

Hipogamaglobulinemie N- N N N –

Agamaglobulinemie N- N N N Absenta

Gamopatie policlonala N- N N N +

https://www.synevo.ro/electroforeza­proteinelor­serice/ 3/5
09/05/2017 Electroforeza proteinelor serice | Synevo

Raspuns inퟢ�amator cronic N- N+ + N +

Raspuns inퟢ�amator acut N- + + N N-

Raspuns inퟢ�amator subacut N- N + N N

Ciroza hepatica – N N- „Punte” beta-gamma

Hipoalfa-1 globulinemie N – N N N

Gamopatie monoclonala (tip γ) N- N N N Banda M

Gamopatie monoclonala (tip β) N- N N Banda M N-

Gamopatie biclonala N- N N Banda M Banda M

Benzi oliglonale N- N+ N+ N Benzi oligl.

   
Bisalbuminemie Varf dublu

–
Hipoalbuminemie N N N N

 
 Legenda

+ =nivel crescut
N = nivel normal – =nivel scazut

N+ =nivel normal/crescut N- =nivel -N+ =nivel scazut/normal/crescut

normal/scazut                          

 Limite si interferente
• Variatii ⎤ziologice: in sarcina scade albumina si cresc alfa2, beta- si gamaglobulinele (IgG); valori mai scazute
ale gamaglobulinelor pot ⎤ intalnite la varstnici3.
• Medicamente
Albumina (scaderi): acid valproic, allopurinol, asparaginaza, azatioprina, clorpropamid, cisplatin,
contraceptive orale, dapsona, dextran, estrogeni, fenitoin, ibuprofen, izoniazida, nitrofurantoin, prednison
(doze mari), sargramostim.
Alfa1-globuline (cresteri): testosteron.
Alfa2-globuline: estrogeni, contraceptive orale, fenitoin (cresteri), asparaginaza (scaderi).
Beta-globuline:  estrogeni, contraceptive orale (cresteri);  asparaginaza (scaderi).

Gamma-globuline: tratament citostatic sau imunosupresor (scaderi)4.

• Interferente analitice:

https://www.synevo.ro/electroforeza­proteinelor­serice/ 4/5
09/05/2017 Electroforeza proteinelor serice | Synevo

-o crestere usoara a largimii benzii de albumina poate ⎤ datorata legarii unor medicamente (penicilina) sau
a bilirubinei (pacienti cu icter);
-bisalbuminemia tranzitorie (non-ereditara) poate ⎤ intalnita ca rezultat al unui tratament medicamentos
sau unei perturbari metabolice severe (ex. pancreatita)
-benzi monoclonale false pot ⎤ date de: hemoglobina libera, in cazul unui ser hemolizat sau a unei
hemolize intravasculare (banda in zona alfa2 – beta); proteina C reactiva in cantitate mare; lizozim crescut,
⎤brinogen (la pacientii tratati cu anticoagulante; in coagulopatii, daca sangele a fost centrifugat inainte de
a coagula complet); alfa-fetoproteina in concentratii mari, seruri vechi.
-vizualizarea este di⎤cila in cazul in care banda monoclonala se suprapune peste o banda normala (ex.
banda monoclonala in zona beta1 va migra in aceeasi pozitie ca si transferina)2;4.
 
Bibliogra⎤e
1. Frances Fischbach. Immunodiagnostic Studies. In A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests. Lippincott Williams
& Wilkins, USA, 7 ed. 2004, 575-578.
2. Laborator Synevo. Referintele speci⎤ce tehnologiei de lucru utilizate 2010. Ref Type: Catalog
3. Laboratory Corporation of America.Directory of Services and Interpretive Guide. Protein Electrophoresis, Serum.
www.labcorp.com 2010. Ref Type: Internet Communication
4. Norbert Tietz.General Clinical Tests. In Clinical Guide to Laboratory Tests. W.B.SAUNDERS, USA, 3 ed. 1995, 524-526.

Like Share 4 people like this. Be the first of your friends.

https://www.synevo.ro/electroforeza­proteinelor­serice/ 5/5