BIOFIZICA MEMBRANELOR

Organizarea materiei vii

Elementele constitutive ale materiei vii sunt aceleai cu cele care alctuiesc materia nevie Gradul de structurare (ordine) a materiei este caracteristica esenial care deosebete sistemele materiale vii de cele nevii Elementele primelor trei perioade din sistemul periodic, cu atomi mici, reprezint aproximativ 98% din materia vie, dintre care H, C, O, N reprezint 96%; acestea pot fi metale (Ca, K, Na, Mg etc) sau metaloizi (C, Cl, S etc) Elemente aflate n cantiti mai mici i al cror rol nu este pe deplin elucidat: Cd, Cr, As, Se, Pd, Mo, numite oligoelemente

Biofizica molecular

Caracterizarea componenilor macromoleculari ai materiei vii (biomolecule) Stabilirea mecanismul de interaciune n cadrul proceselor celulare Presupune metode de separare i purificare determinarea structurii chimice (tertiare si cuaternare) Diversitate foarte mare: 1012 proteine i 1010 acizi nucleici Prin izolare se pierd aspectele funcionale legate de coexistena n mediul biologic Avantaj l au tehnicile biofizice de studiu in vivo

Apa componentul majoritar

Organismul uman cuprinde ~ 70% ap i 30% componeni de alt natur Apa total este repartizat :

~33% extracelular (plasma si sp. Interstitial); ~66% intracelular.

Apa total se rennoiete la fiecare 16 zile. Organismul prelucreaz zilnic aproximativ 2,5 l de ap ingestie eliminare (excreie, transpiraie, respiraie)

Fore intermoleculare
Legtura
( i n t e r a c i u n e a ) E x e m p l u E n e r g i a i n t e r a c i u n i i ( k J / m o l )

1. Covalent

l e

t u

r i

r e

t e

r m

i n

t r u

t u

r a

r i m

l e

t u

r i

i s

l f i d

r i c

- S

I o

i c

3. Ion dipol 4. Dipol-dipol

5 . D e h i d r o g e n

-COO2+ - Ca -COO Na+ClNa+ (H2O)n Interaciuni ale dipolilor

p e r m a n e n i s a u i n d u i C = O - - - - H - N -

40 - 400 4 40
4 4 0

- H

- - - - N

- H

- - - - O

- H

- - - - N

6. Hidrofobe

N-H----O2 Formeaz bistratul lipidic i

g r u p r i l e n e p o l a r e a l e p r o t e i n e l o r

8 25 25 25 15 10
4 8 , 5

Interaciuni dipol dipol

Structura membranei
FOSFOLIPIDELE constituent structural principal
1 mm2 5106 molecule lipidice, ntreaga membran a unei celule
animale aproximativ 109 molecule lipidice

Formarea stratului dublu fosfolipidic este un proces rapid i spontan in ap = proces de autoasamblare

miceliu

bistrat lipidic

Fore ce contribuie la stabilizarea structurilor membranare

interaciile hidrofobe forele de atracie Van der Waals:

dintre lanurile de acizi grai dintre gruprile polare ale fosfolipidelor

punile de H dintre gruprile polare ale fosfolipidelor i moleculele de ap

Bistratul lipidic = cristal lichid
structur mezomorf

Modelul mozaic fluid

Singer i Nicolson (1972)

Structura membranei
Proteinele rol funcional (mediator al schimburilor de substan,
energie i informaie dintre exterior i mediul intracelular)

Proteine extrinseci pot fi deplasate din membrane prin metode blnde cu solveni hipotoni, soluii saline concentrate sau cationi bivaleni.

exoplasmatice: receptorii membranari, proteine cu rol n imunitate citoplasmatice: spectrina, ankirina ancorare la citoschelet

Proteine intrinseci:
nu pot fi extrase din membran dect cu ajutorul detergenilor, care dezasambleaz complet membrana celular traverseaz membrana celular o dat (glicoforina) sau de mai multe ori (proteinele transportoare, pompe ionice, enzime etc)

Proteine interacioneaz cu fosfolipidele membranare prin legturi hidrofobe sau tip dipol-dipol.
Majoritatea proteinelor care traverseaz membrana prezint gruparea NH2 terminal la exterior, iar COOH terminal este situat spre citoplasm.

Dinamica componentelor membranelor biologice

flexie flip-flop (rar)

difuzie lateral (frecvent)

rotaie

Celul de oarece Timp Celul uman

Dinamica lipidelor

Dinamica proteinelor

Model de membrana

Funciile membranelor biologice

compartimenteaz materia vie (bariere selective);

intervin n desfurarea proceselor metabolice (interaciunile lipoproteice sunt eseniale pentru funcia enzimelor din membran), dou din procesele majore de conversie a energiei n natur se petrec n membran: fotosinteza i fosforilarea oxidativ;
controleaz fluxul de informaie dintre celule i mediul nconjurtor, conin receptori specifici pentru stimuli exteriori i legarea hormonilor de membran. Genereaz semnale chimice i electrice; sufer modificri funcionale adaptative (inducia enzimelor din reticulul endoplasmic sub aciunea medicamentelor); au rol n procesele imunitare, n reaciile de aprare ale celulelor i organismului.

MEMBRANELE = BARIERE ENTROPICE

Scopul = asigurarea delimitrii dintre dezordinea entropic a mediului i ordinea antientropic specific proceselor metabolice Trei nivele de separare majore:

membrane bazale epiteliale asigur prima bariera dintre mediul extern i mediul intern (interstiial) al organismului,
membrane plasmatice bariera de ordin II, separ spaiul interstiial de cel intracelular,

membrane intracitoplasmatice (endomembranele) i ale organitelor celulare bariera de ordinul III, asigur segregarea funcional metabolic n cadrul celulei. Membrana nuclear este ultima barier care izoleaz materialul genetic (cel mai nalt grad de structurare) de mediul extern

Fenomene de transport membranar

Fenomene de microtransfer (molecul cu molecul): I. Transport pasiv conform gradientului de concentraie

Difuziune simpl Difuziune facilitat

prin transportori prin proteine-canal

II. Transport activ cu consum energetic

Transport activ primar prin pompe ionice Transport activ secundar:

cotransport (simport) contratransport (antiport)

Fenomene de macrotransfer (numr mare de molecule simultan): I. Fagocitoz transport de material solid II. Pinocitoz transport de material lichid

Endocitoz Exocitoz Transcitoza

Transportul pasiv

Difuzia simpl
In sensul gradientului electrochimic
Legea Fick:

dm P S p c dt
Membrana = barier energetic pentru molecule polare

Difuzie simpl

Canalele ionice

Sunt proteine integrale care traverseaz bistratul lipidic i au n centrul lor un canal trecere de diametru de ordinul angstromilor. Din punct de vedere termodinamic, canalele ionice sunt disipatori de energie liber, stochat sub form de gradient de concentraie i de potenial electric. sunt bidirecionale se caracerizeaz prin conductana ionic i permeabilitatea specific

neselective cu conductan fix au permeabilitate diferit funcie de diametrul particulei selective cu conductan variabil aceste canale prezint dou conformaii posibile caracterizate prin dou stri diferite de conductan: conformaia de repaus (nchis), sau ntr-o conformaie de activitate (deschis).

Se clasific dup natura agentului care le activeaz: Canalele comandate electric sunt implicate n propagarea potenialului de aciune n celulele excitabile (axoni, fibre musculare), Canale comandate chimic sunt implicate n transmiterea intercelular a excitaiei precum i n funcionarea unor celule receptoare specializate. Eficacitatea transportului prin canale ionice este foarte mare, printr-un singur canal putnd trece 106-108 ioni pe secund.

Canal de Na+ comandat electric

Difuzia facilitat

modificare de conformaie de tip flip-flop asigur trecerea particulelor polare prin stratul hidrofob. fora care determin transportul este tot gradientul de concentraie se desfoar cu viteze mult mai mici comparativ cu difuzia prin canale ionice (ex. transportorul de glucoz din membrana eritrocitar ~ 300 molecule/sec Specificitate ridicat pentru molecula transportat (selecie 3D)

Difuzie facilitat

Transportul activ

Pompa de Na+- K+
peste 1/3 din ATP-ul sintetizat ntr-un organism animal n repaus este hidrolizat de (Na+,K+)-ATP-az.
peste 1/3 din intensitatea MB asigur gradientului electrochimic dintre spaiul intra i extra celular.

+ 3Na i+ 2K e ATPi 3Na e 2K i+ ADPi Pi

Simportul - Antiportul
Simport: - transportul glucozei la nivelul celulelor intestinale - transportul cuplat al apei cu Na+ n esuturile epiteliale (i.e. nefron, vezica biliar, intestin) Antiport - transportul de Ca2+ la nivelul sarcolemei fibrei musculare. Ca2+ este scos din celul prin cuplaj cu intrarea pasiv a Na+ prin transportori specifici

Fenomene de macrotransport
Pinocitoza

independent de receptori = endocitoz n faz lichid sau constitutiv mediat de receptori = clatrinic

Exocitoza
Vezicule secretoare din corp. Golgi fuzioneaz cu MP i vars coninutul n exterior Se observ c interiorul veziculei se dispune la exteriorul MP

Membrana biologic transportorul de ap