Metabolismul bacteriilor

Metabolismul reprezint totalitatea reaciilor biochimice prin intermediul crora microorganismele preiau din mediu energie i nutrieni, pe care i folosesc n activitile lor fundamentale. Aceti nutrieni reprezint elemente eseniale pentru viaa celulei i se numesc elemente biogene. Substanele din mediu sunt folosite n 4 scopuri fundamentale:

producerea de energie; sinteza de constitueni celulari; creterea celulei i desfurarea normal a activitilor ei fiziologice; producerea de metabolii , unii dintre ei utili pentru om.

Metabolismul bacterian se realizeaz printr-o serie de ci metabolice, reprezentate de secvene de reacii chimice catalizate de enzime. Sunt dou direcii fundamentale de evoluie a acestor ci:

degradarea substanelor nutritive preluate din mediu, cu eliberare treptat de energie; folosirea energiei eliberate n procesele de biosintez a constituenilor celulari (cale diametral opus celei dinti)

Se cunosc 4 tipuri de ci metabolice: cile catabolice (catabolismul), cile anabolice (anabolismul), cile amfibolice i cile anaplerotice. a) Cile catabolice reprezint ansamblul cilor biochimice prin care se realizeaz degradarea nutrienilor preluai din mediu, cu eliberare de energie. Reaciile catabolice se desfoar n trei faze succesive: 1) macromoleculele nutrienilor sunt degradate pn la subunitile lor de construcie (ex. proteinele pn la aminoacizi), cu eliberarea aproximativ a 1% din energia nutrienilor, care se pierde sub form de cldur; 2) moleculele rezultate n prima faz sunt degradate n continuare, cu formarea unui numr limitat de molecule mai mici, ce reprezint compui intermediari ai cii centrale; numrul acestor compui intermediari este diferit n funcie de bacterie, putnd ajunge la maxim 12; n aceast etap se elibereaz aproximativ 1/3 din energia existent n compuii respectivi; 3) cea de a treia faz este diferit n funcie de natura reaciilor metabolice; n aerobioz reaciile evolueaz cu metabolizarea complet a compuilor intermediari pn la CO2 i H2O, cu eliberare masiv de energie, care este apoi nmagazinat n ATP; n anaerobioz reaciile evolueaz dup modelul reaciilor fermentative , caz n care eliberarea de energie este redus. b) Cile anabolice se desfoar n sensul utilizrii compuilor intermediari ai cii centrale n vederea sintezei de constitueni proprii celulei bacteriene, proces care evolueaz n faze succesive. n cursul proceselor de anabolism se sintetizeaz macromolecule de depozit, adic polimeri uniformi, formai prin legarea unor monomeri n lanuri de diferite dimensiuni ( ntr-o prim faz monomeri, ntr-o a doua faz, numit diataxie, subunitile constituite n prima faz fiind aezate ntr-o ordine riguroas, dictat exact de informaia genetic din genom). c) Cile amfibolice sunt reprezentate de cile metabolice centrale, care ndeplinesc n acelai timp dou funcii: de eliberare de energie i de furnizare a unor precursori necesari biosintezei. Cile anaplerotice sunt cunoscute sub denumirea de ci auxiliare sau de reaprovizionare, deoarece compuii intermediari ai cilor centrale sunt n permanen ndeprtai din celul, pe de o parte n cursul degradrii progresive enzimatice, cu eliberare de energie, n catabolism, iar pe

de alt parte prin utilizarea lor n diferite biosinteze ce au loc n celul. Cile metabolice auxiliare asigur astfel completarea deficitului cilor metabolice principale, prin aprovizionarea cu diveri compui i permit funcionarea ndelungat a acestora.

Particulariti ale metabolismului bacterian Microorganismele i realizeaz activitile metabolice prin mecanisme similare cu cele implicate n metabolismul organismelor superioare. Microorganismele prezint o capacitate unic de degradare a unor substane complexe din mediu i de a sintetiza anumii metabolii, unii folositori omului. Luate ca grup, bacteriile sunt cele mai omnivore organisme din natur. i pot realiza metabolismul folosind numeroase i diverse surse de substane nutritive, ncepnd cu azotul molecular i sulful, pn la cele mai complexe substane organice (se pot dezvolta pe diferite soluii de acizi: oxalic, formic, sulfuric, pe substraturi cu fenoli, proteine, iei; pot degrada asfaltul, masele plastice, cauciucul, lemnul, parafinele, chiar i unele substane antibiotice). Aceste particulariti explic faptul c, dei n natur au fost depuse numeroase produse de uzur i de excreie, cadavre, reziduuri, acestea nu s-au acumulat, pentru c au fost descompuse de ctre microorganisme i reintroduse n circuitul elementelor biogene. n acelai timp, exist unele microorganisme care pot utiliza doar un numr limitat de nutrieni (microorganismele celulozolitice au nevoie absolut de prezena celulozei n mediul nutritiv; nitratbacteriile au nevoie de nitrii n mediu, iar unele bacterii patogene au nevoie de snge n mediul de cultur). Fig. 3.1 Clasificarea bacteriilor pe baza caracterelor de metabolism

Plasticitatea metabolismului microorganismelor

Bacteriile au capacitatea de a folosi alternativ diferite surse de azot i de carbon, n funcie de condiiile de mediu. Se adapteaz, deci, la tipul i cantitatea de nutrieni existeni n mediu. S-a demonstrat c multe bacterii considerate ca autotrofe (capabile s foloseasc substanele anorganice din mediu) pot utiliza uneori substanele organice cu complexitate diferit din mediu. Unele microorganisme heterotrofe (organotrofe) au capacitatea de a se adapta la utilizarea compuilor anorganici din mediu, atunci cnd substanele organice lipsesc.

Diversitatea mecanismelor enzimatice i a produilor de metabolism

Diversitatea cilor metabolice se manifest n metabolismul bacterian prin existena unor ci alternative care pot fi folosite pentru un anumit compus. n funcie de condiiile de mediu i cele intracelulare, celula bacterian poate opta pentru una dintre cile prin care un anumit substrat poate fi degradat (de exemplu glucoza poate fi degradat prin trei ci metabolice diferite).

Intensitatea deosebit a metabolismului bacterian

Metabolismul bacterian se caracterizeaz printr-o intensitate excepional n raport cu activitile omoloage de la organismele superioare. Astfel, activitatea respiratorie a unui gram de bacterii aerobe (greutate uscat) este de cteva sute de ori mai intens dect cea a omului. Potenialul metabolic al microorganismelor din cei 25 cm superficiali ai solului de pe o suprafa de un

hectar este echivalent cu acela pentru cteva zeci de mii de oameni. Un gram de bacterii lactice hidrolizeaz circa 15000 g lactoz/or. Pentru a atinge un asemenea nivel de activitate metabolic, organismul uman ar avea nevoie de mai multe mii de tone de alimente pe or. Metabolismul bacterian deosebit de intens este corelat cu o multiplicare rapid a microorganismelor, cu producerea unei mari cantiti de biomas. n acest sens, un exemplu dat de UNESCO se refer la aceast capacitate extraordinar de sintez a bacteriilor:

la bovine un organism de 500 kg fabric n condiii normale n 24 ore aproximativ 1/2 kg de proteine; n condiii de mediu favorabile, 500 kg de mas bacterian sintetizeaz n 24 ore 5 -50 tone de proteine.

Nutriia microorganismelor procariote Transportul substanelor prin membrana celulei bacteriene Membrana plasmatic reprezint o barier (osmotic de permeabilitate) care asigur transportul selectiv al substanelor de la exteriorul la interiorul celulei bacteriene i invers. Principalele mecanisme de transport prin membrana plasmatic bacterian sunt: 1) difuzia pasiv - este un tip de transport nespecific, reprezint o trecere lent a substanelor de la exteriorul la interiorul celulei bacteriene i invers, fr consum de energie. Trecerea este determinat de concentraie, se realizeaz de la o concentraie mare la o concentraie mic; difuzia se oprete cnd concentraia se egalizeaz. Prin difuzie pasiv sunt transportate: apa, O2, CO2, acizii grai, substanele liposolubile. Fig. 3.3.1 Mecanisme de transport prin membrana plasmatic bacterian http://chimiebiologie.ubm.ro

2) mecanisme de transport cu participarea unui transportor specific (carrier) - transportorul specific este situat n membrana plasmatic i este o protein, cu rolul de a fixa o anumit substan i de a o transporta, traversnd membrana plasmatic. Sunt 3 tipuri de astfel de mecanisme: a) difuzia facilitat se desfoar fr consum de energie i este determinat de gradientul de concentraie, dar se realizeaz cu ajutorul unei proteine transportor (carrier). Trecerea se realizeaz de la o concentraie mare la o concentraie mic, pn se produce un echilibr u al concentraiilor de o parte i de cealalt a membranei. Proteina transportor are rolul de a mri viteza de difuzie a substanei n raport cu difuzia pasiv. b) transportul activ se realizeaz cu consum de energie. Se poate realiza mpotriva gradientul ui de concentraie, de la o concentraie mic la o concentraie mare. Astfel se produce o acumulare de substan n celula bacterian, care poate depi de cteva mii de ori cantitatea din mediul extern. Proteina transportor prezint un situs de legare specific pentru substanele respective. c) translocarea n grup se realizeaz cu consum de energie i cu participarea sistemului enzimatic fosfo-transferazic; substana transportat sufer o modificare chimic la trecerea prin membran, astfel c substana din interiorul celulei difer de cea iniial ce exista n mediu.

Tipuri de nutriie la microorganisme Microorganismele procariote i dobndesc monomerii pe dou ci: prin sintez proprie sau din mediul extern. Capacitatea biosintetic a microbilor este apreciat n funcie de numrul de monomeri care pot fi sintetizai autonom. Astfel cu ct diversitatea monomerilor sintetizai autonom de bacterii este mai mare cu att capacitatea biosintetic este mai avansat. Carbonul, azotul, oxigenul i hidrogenul constituie grupa elementelor chimice biogene. Pentru microorganismele procariote este caracteristic o mare diversitate de substane chimice care prezint surse de substane biogene. n funcie de natura sursei de carbon microorganismele procariote sunt clasificate n: autotrofe i heterotrofe. Prin definiie autotrofii reprezint microorganismele capabile s-i sintetizeze autonom componeni organici ai carbonului din compuii anorganici ai carbonului. Heterotrofi sunt numite microorganismele care utilizeaz substratul organic ca surs de carbon. Noiunile de autotrofi i heterotrofi caracterizeaz tipul anabolismului (metabolismului constructiv). Noiunile de autotrof i heterotrof au fost utilizate pentru prima dat pentru specificarea modului de nutriie a animalelor i plantelor. Mai trziu ei au fost utilizai i pentru microorganismele procariote. n funcie de sursa de energie utilizat de procariote pentru biosintez i activitate vital sunt clasificate n fototrofi i chimiotrofi. Organismele care utilizeaz n calitate de donori de electroni n procesele energetice substanele anorganice se numesc litotrofe, iar cele la care donori de electroni sunt substanele organice sunt numite organitrofe. n funcie de sursa de carbon, sursa de energie i natura donorului de electroni procariotele se caracterizeaz prin cteva tipuri de nutriie (tabelul 1). Tipul de nutriie Sursa carbon sau sau CO2 CO2 de Donor electroni de

Sursa energetic

Autotrofi

Fotoautotrofi fotolitoautotrofii Chimioautotrofi Chimiolitoautotrofi Fotoorganoheterotrofi

Cuantele de lumin H2O, S, H2S Compuii anorganici ai H2, NH3, NO2, H2S

Heterotrofi Chimioorganoheterotrofi

Compui organici cu Cuantele de lumin C Compui organici cu Compui organici C

Procariotele fotolitotrofii Aceast grup trofic de procariote populeaz medii complect minerale i utilizeaz ca donor de electroni apa (cianobacteriile), H2S i sulful liber (sulfobacteriile purpurii i verzi). Procariotele fototrofe prezint reprezentani a dou genuri: sulfobacteriile purpurii i sulfobacteriile verzi. Fiind microorganisme anaerobe obligatoriu ele necesit prezena n mediile nutritive a H2S. Procariotele chimiolitotrofe Procariotele chimiolitotrofe sunt autotrofii care i dobndesc energia necesar pentru activitatea vital din reaciile de oxidare a substanelor de natur anorganic. Majoritatea procariotelor chimiolitoautotrofe, cu excepia bacteriilor de hidrogen n procesul biosintezei consum cantiti mari de energie din care cauz formeaz cantiti reduse de biomas. Aceast tip nutritiv de bacterii au un randament mare de oxidare a substanelor anorganice. Din aceast categorie pot fi exemplificate bacteriile care oxideaz hidrogenul, oxidul de carbon, compuii redui ai sulfului, fierul, amoniacul, nitriii etc. Bacteriile de hidrogen oxideaz hidrogenul i utilizeaz energia format pentru asimilarea carbonului. Aceste procariote sunt specifice prin i faptul c se pot dezvolta pe medii care conin substane organice adic sunt mixotrofe sau facultativ chimiolitoautotrofe. Sulfobacteriile chimioautotrofe populeaz mediile cu un coninut sporit de sulf sau de H2S (nmolurile, izvoarele sulfuroase, apele de canal, minele de sulf etc.). Aceste bacterii realizeaz oxidarea sulfului i a compuilor lui anorganici obinnd n urma acestor reacii energie. Ferobacteriile populeaz apele care conin Fe(HCO3)2. n rezultatul reaciilor de oxido-reducere se formeaz oxid de fier coloid care este depus n form de teac mucilaginoas la exteriorul celulei. Bacteriile nitrificatoare sunt bacterii autotrofe obligate care dobndesc energie din reaciile de oxidare a amoniacului pn la nitrai. Nitrificarea constituie un proces semnificativ n circuitul azotului n natur. Nitriii sunt cea mai accesibil forma a azotului pentru plante. Bacteriile metanogene sunt organisme anaerobe cere-i obin energia din reaciile de oxidoreducere ai compuilor minerali, formnd ca rezultat cantiti eseniale de metan care se ridic la suprafa sub form de bule. Procariotele fotoorganotrofe utilizeaz substanele de natur organic: acizii grai simpli, alcoolii (izopropanolul), n calitate de donori de H. Microorganismele procariote chimioorganotrofe Procariotele chimioorganotrofe n funcie de cerinele fa de sursele de carbon i azot pot fi clasificate n cteva categorii:

bacteriile heterotrofe saprofite i facultativ patogene utilizeaz carbonul i sursa energetic din compuii organici (glucoza, alcoolii, acizii organici), iar azotul din compui de natur anorganic (amoniac, nitrii, nitrai). bacterii heterotrofe patogene i unele saprofite pentru care sursa de azot, carbon i energie sunt substanele organice.

Tipuri de respiraie microbian Dup comportarea fa de oxigenul atmosferic, se pot descrie 4 tipuri de microorganisme:

microorganisme strict aerobe, care au ca tip de respiraie celular respiraia aerob; pentru a se dezvolta, aceste microorganisme au nevoie de oxigen molecular, folosindu-l ca acceptor final de electroni; microorganisme strict anaerobe, care nu se pot dezvolta n prezena oxigenului; ele au nevoie de condiii de anaerobioz i ca tip de respiraie celular au fermentaia sau respiraia anaerob; microorganisme anaerobe, facultativ aerobe, care au n general un metabolism de tip anaerob, dar pot tri i n prezena oxigenului molecular, caz n care prezint un metabolism aerob; tipul de respiraie celular este diferit, n funcie de prezena sau absena oxigenului (respiraie anaerob sau aerob); microorganisme microaerofile, care au nevoie de o cantitate de oxigen mai mic dect n atmosfer pentru a se dezvolta, concentraiile mari de oxigen fiind nocive pentru ele; tipul de respiraie celular este o respiraie cu tendin spre fermentaie.

Creterea i multiplicarea microorganismlor procariote Cretere, n sens biologic, reprezint mrirea coordonat, ireversibil a dimensiunilor unui organism. Creterea este o consecin a sintezei specifice, coordonate a compuilor celulari noi pe baza substanelor nutritive din mediu. Sinteza constituenilor celulari noi este coordonat genetic, dar n acelai timp depinde de concentraia, tipul, accesibilitatea substanelor nutritive, precum i sursei de energie. Deoarece creterea biologic a celulei bacteriilor este urmat de diviziunea ei sporirea numrului bacteriilor n cultur este rezultatul multiplicrii (diviziunii) celulare.

Multiplicarea celulelor procariote Multiplicarea bacteriilor este o urmare a creterii dimensiunii celulei. Creterea biologic a bacteriei nu este un proces infinit, dar se ntrerupe la un anumit moment n care iniiaz diviziunea celular. Mecanismul care determin finalizarea creterii i iniierea diviziunii nu este stabilit. Diviziunea bacteriilor se realizeaz prin cteva mecanisme:

diviziune direct, simpl sau binar; nmugurire i ramificare; prin spori - caracteristic doar actinomicetelor.

Multiplicarea prin diviziune direct Diviziunea direct este tipic bacteriile care se afl n condiii optime de dezvoltare. n urma acestui mod de diviziune rezult dou celule noi care pot fi aproximativ egale - izomorfe, sau de dimensiuni diferite - heteromorfe. Diviziunea are loc n corespundere cu unul sau cteva plane de diviziune.

Diviziunea binar la celulele procariote, se produce conform aceluiai mecanism n trei etape succesive:

diviziunea n dou pri aproximativ egale a citoplasmei prin intermediul unui sept membranar perpendicular sau paralel cu axul mare a celulei; creterea peretelui celular prin invaginare centripet n regiunea median a septului transversal. celulele se separ prin scindare peretelui celular comun n dou pri egale. celulei bacteriene

Fig. 3.5.1 Diviziunea binara a http://biologie.univ-mrs.fr/upload/p102/poly_etudiantsfinal.pdf Multiplicarea prin nmugurire i ramificare

Mugurii i ramificaiile se formeaz n urma apariiei unui apendice (umflturi) terminale n afara celulei. Apendicele crete devenind o celul ovoid care are un tub de conexiune cu celula mam. La finele diviziunii n partea median a tubului apare un sept transversal. Multiplicarea prin spori a actinomicetelor La anumite stadii de dezvoltare la extremitile miceliului aerian are loc sporogeneza prin fragmentare sau segmentare. n cazul sporogenezei, prin fragmentare, se produce concentrarea citoplasmei sporofitului astfel nct apar formaiuni interne sferice care apoi sunt "mbrcate" n membrane. Dup maturizare sporii sunt pui n libertate n urma ruperii membranei sporofitului. Sporogeneza prin segmentare are loc prin apariia septelor transversale la extremitile hifelor aeriene. Celulele nou formate se transform n spori. Dinamica creterii numerice a procariotelor n culturi statice Dinamica acumulrii bacteriilor poate fi cu precizie stabilit pentru populaiile aflate n condiii stabile de laborator. n condiii de laborator culturile bacteriene pot fi de dou tipuri:

statice (discontiui) care prezint sisteme de tip nchis: culturi care prezint un volum limitat de mediu, care nu primesc i nu cedeaz materie i energie mediului extern. continui (de tip deschis): culturi care cedeaz mediului extern i adiioneaz din mediul extern materie i energie.

Acumularea bacteriilor n culturi statice are loc n cteva faze succesive: I. Faza de laten (eng. lag, a ntrzia, a rmne n urm) Aceast faz ncepe n momentul introducerii bacteriilor n mediul de cultur (nsmnrii) i momentul iniierii multiplicrii lor. Pe parcursul acestei faze numrul bacteriilor rmne constant sau scade din cauza incapabilitii unor bacterii de a suporta condiiile noi ale mediului. n aceast perioad au loc procese de adaptarea la condiiile noi ale mediului. Fig. 3.5.2 Curba http://umr5558-mq1.univ-lyon1.fr/ de cretere a microorganismelor

Durata fazei de lag este diferit i depinde de originea i starea fiziologic a bacteriilor nsmnate.n cursul acestei faze bacteriile sunt active din punct de vedere matabolic, cresc n dimensiuni, i utilizeaz toate substanele nutritive de rezerv din citoplasm. II. Faza iniierii i accelerrii ritmului de cretere n aceast faz ncepe multiplicarea bacteriilor cu scurtarea progresiv a timpului de generaie pn la atingerea unei valori constante tipice fazei ulterioare. III. Faza de multiplicare exponenial sau de cretere logaritmic Evoluia culturii bacteriene n aceast etap de cretere se produce n progresie geometric (se multiplic printr-un factor constant la fiecare unitate de timp). Evoluia acestei faze are loc pn n momentul cnd unul din componenii nutritivi eseniali ai mediului sunt consumai sau / i n mediu de cultivare se acumuleaz unul sau civa catabolii cu efect toxic asupra culturii. Indicii fazei exponeniale sunt timpul de generaie i rata de cretere. Ei pot fi stabilii cunoscnd concentraiile bacteriene n diferite momente. Iniial se calculeaz numrul de generaii conform ecuaiei: Xn= Xo2n sau log Xn = log Xo + n log 2 (2); unde Xo - concentraia iniial a bacteriilor; Xn - concentraia bacteriilor dup n generaii. Din ecuaia (2) se deduce n n = (log Xn - log Xo)/2 de unde timpul de generaii g (timpul ntre de dublare a numrului de celule) va fi stabilit prin: g = t/n sau g = t log2 / log Xn = log Xo Rata de cretere r este numrul de generaii ntr-o anumit unitate de timp r= n/t sau n=1/g. Rata de cretere a unei populaii de bacterii variaz n funcie de condiiile de mediu. IV. Faza de ncetenire a creterii (faza creterii negative) Factorul limitativ al mediului, (nutritiv sau /i cel cu efect toxic) determin reducerea vitezei de multiplicare a bacteriilor i a ratei de cretere. Apar celule moarte. V. Faza staionar

Rata de cretere numeric a bacteriilor devine nul. Numrul bacteriilor vii este stabil, iar raportul dintre numrul de bacterii vii i numrul total de bacterii depinde de semnificaia factorului limitativ pentru aceast cultur. Curba numrului total de celule staioneaz, iar a celor viabile scade: celulele nu se mai divid, dar mor fr autoliz. n faza staionar bacteriile au forma tipic speciei, n citoplasma lor se acumuleaz substane de rezerv i ea capt un aspect granular. VI. Faza de declin Reducerea logaritmic a numrului de celule viabile din populaie ca urmare a morii lor cauzat de lipsa nutrienilor i acumularea n mediu a substanelor toxice. La aceast etap celulele prezint abateri de la forma lor specific, n culturile populaiilor sporogene apar sporii sau alte forme de supravieuire. Aciunea factorilor mediului extern asupra creterii i multiplicrii microorganismelor Activitatea vital a microbilor este dependent de factorii mediului extern. Influena factorilor mediului extern asupra activitii biologice a bacteriilor poate avea efect:

stimulator: factorii mediului sunt la nivel optim n raport cu necesitile speciei; bacteriostat: unul sau mai muli factori ai mediului se afl la nivel minim n raport cu necesitile speciei sau cnd factorii mediului frneaz procesele metabolice celulare; bactericid: factorii mediului (de regul n concentraii sporite) provoac moartea bacteriilor; mutagen: induc modificri n structura genomului.

Efectul provocat de factori mediului asupra microbilor depinde n special de natura, intensitatea i durata aciunii lor, precum i de particularitile biologice ale microbilor. Factori i mediului extern, ce au divers aciune asupra activitii vitale a microbilor, convenional pot fi categorizai n trei grupe:

fizici (temperatura, undele elctromagnetice, presiunea osmotic, presiunea hidrostatic). chimici biologici

Aciunea factorilor fizici Temperatura Temperatura are o aciune major asupra tuturor formelor vitale. n funcie de intensitatea i timpul de expoziie temperatura poate provoca efect stimulator - temperatura de dezvoltare, efect nociv - temperaturile extreme. Temperatura de dezvoltare Temperatura de dezvoltare este acea temperatur care asigur creterea unei populaii bacteriene ca rezultat a desfurrii normale a proceselor metabolice. Microbii, n funcie de limitele de variaie a temperaturii de dezvoltare se clasific n:

stenotermi: limite restrnse (35-40 oC); euritermi: limite largi (6-50 oC).

Temperatura de dezvoltare a microbilor euritermi poate fi exprimat prin trei puncte de baz: min, optim i max. Temperatura minim de dezvoltare - valoarea termic minim la care microorganismele se mai multiplic nc. Temperatura optim de dezvoltare - temperatura la care viteza de dezvoltare i multiplicare a microorganismelor este cea mai intens (maximal). Temperatura maxim de dezvoltare - temperatura maximal la care metabolismul i multiplicarea microbilor este posibil. n corespundere cu limitele temperaturii de dezvoltare microbii sunt clasificate n trei grupe: psihrofile, mezofile, termofile. Microbii psihrofili - (de la grec. psichros - frig), pentru reprezentanii acestei grupe temperatura optimal de dezvoltare este 15-200C. La mezofili se refer microorganismele ce au temperatura optim 28-370C. Termofilii -au optimul de temperatur 50-600C. n ultimul timp au fost evideniate un ir de microorganisme noi cu un optim nalt al creterii 80-900C. Ele snt incluse ntr-o grup aparte - bacterii extrem-termofile. Energia radiant Radiaiile sau undele electromagnetice sunt clasificate n funcie de lungimea de und n cteva categorii: heriene, infraroii, vizibile, ultraviolete, radiaii X i g. Efectul biologic a undelor electromagnetice depinde de:

lungimea lor de und doza de iradiere capacitatea de absorbie a materialului biologic.

n funcie de aceti parametri iradierea poate avea urmtoarele efecte biologice:

Fotosensibilizare. Fotoprotecie. Fotoreactivarea. Reaciile fotochimice Efectul mutagen Efectul letal.

Presiunea osmotic n cazul cnd au loc abateri lente de la izotonie a soluiilor n care se afl bacteriile, membrana lor citoplasmatic reuete" s se adapteze la noile condiii. Dac, ns modificrile presiunii osmotice a soluiilor survin brusc, are loc distrugerea mecanic a peretelui celular i ca urmare celula este expus la condiii nefavorabile. n medii hipertonice cum sun soluiile saline concentrate celulele procariote sufer fenomenul plasmolizei.

n medii hipotonice de exemplu n ap distilat are loc fenomenul de deplasmoliz: apa ptrunde n interiorul celulei, turgescena celulei crete pn n momentul cnd elasticitatea i rigiditatea peretelui celular nu mai face fa i ca urmare peretele plesnete. Mediile izotonice sunt preferate de majoritatea microorganismelor procariote cu excepia procariotelor osmofile care se pot dezvolta doar n medii hipertonice. Procariotele osmofile sunt clasificate n halofile, cele care prefer medii cu salinitate mare i zaharofile - care prefer medii cu concentraii mari de zahr. Presiunea hidrostatic Majoritatea celulele procariote acomodate la presiunea atmosferic normal au o sensibilitatea slab la variaiile presiunii hidrostatice. Rezistena la acest factor fizic depinde de habitatul natural al microorganismelor i de capacitatea lor de a forma spori. Printre microorganismele procariote marine izolate de la mari adncimi cu ajutorul sondelor au fost identificate bacterii barotolerante care pot fi cultivate att la presiunea normal, atmosferic, ct i la presiuni mari, 500 - 600 atm. Bacteriile care populeaz mrile la adncimi de 3000 - 6000 m unde presiunea hidrostatic atinge 300 - 600 atm sunt numite barofile. Organismele procariote care se dezvolt la presiuni ce depesc valoarea de 600 atm. formeaz grupul barofililor extremali. Aciunea ultrasunetului Vibraiile sonore cu lungime de und mare care nu sunt percepute de urechea omului (infrasunetele) i cele percepute de urechea omului nu influeneaz asupra creterii i dezvoltrii microorganismelor procariote. Vibraiile ultrasonore i cele supersonice cu lungime de und mic provoac moartea microorganismelor prin dezintegrarea membranei citoplasmatice i a peretelui celular. Aciunea laserului Laserul emite un fascicul de lumin sub forma unui unde aproape echivalente ca lungime de und i frecven. Datorit acestor particulariti el acioneaz intens, concentrnd o mare cantitate de energie ntr-un singur punct. Laserul are efect letal instantaneu asupra procariotelor. Aciunea factorilor chimici Microorganismele se dezvolt n medii constituite din substane chimice care exercit influen direct sau indirect asupra lor. Substanele chimice cauzeaz trei tipuri de efecte biologice:

favorizeaz dezvoltarea i multiplicarea celulelor efect chimotaxic blocheaz reversibil procesele de dezvoltare i multiplicare, efect microbiostatic blocheaz ireversibil procesele de dezvoltare i multiplicare efect microbicid

Aciunea substanelor chimice asupra microorganismelor este diferit i este condiionat de:

natura substanei chimice (organic sau anorganic) concentraia substanelor chimice timpul de aciune a substanelor chimice

condiiile mediului extern ( n special temperatura) particularitile fiziologice ale celulelor microbiene( de exemplu sporul este inaccesibil pentru majoritatea substanelor chimice)

Adaptrile structurale ale bacteriilor la condiiile nefavorabile ale mediului Marea majoritate a bacteriilor pot suporta un timp ndelungat condiiile nefavorabile ale mediului (lipsa substratului nutritiv, uscciunea, etc.), prin modificri structurale: chimice sau anatomice. Modificrile adaptive ale structurii chimice bacteriene sunt procesele de "nchidere" a cilor metabolice i procesele de biosintez a proteinelor noi cu rol de protecie n condiii nefavorabile. Modificrile structurale anatomice constau n geneza structurilor inactive, dorminde: endospori, exospori, citi care pot exista un timp ndelungat n condiii nefavorabile. Sporogeneza dureaz in mediu 15 ore si initiaz in momentul cnd mediul nutritive, precum si condiiile de cretere devin deficiente, si decurge in apte etape definite, succesive. Iniial are loc replicarea cromozomului, apoi urmeaz formarea compartimentului sporal in interiorul celulei materne, etapa care este urmata inevitabil de geneza sporului. Etapele ulterioare se caracterizeaz prin formarea invelisurilor sporului. In aceste procese pa rticipa active att sporul cit si celula materna. La etapele finale sporul pierde apa si are loc sinteza dipicolinatului de calciu. Fig. 3.7.1 Formarea endosporilor bacterieni 1. replicare AND-ului, formare a doi nucleoizi; 2. apariia septului membranar la una din extremitile celulei; 3. septul concrete si astfel nucleoidul sporal este nconjurat de membrana citoplasmatica. Iniiaz formarea prosporului. 4. este sintetizata cea de-a doua membrane citoplasmatica si se costituie prosporul. Al doilea nucleoid se dezintegreaz. 5. formarea prosporului: AND-ul nou format este nconjurat de a doua membrane citoplasmatica, enzimele membranelor prosporale catalizeaz sinteza stratului peptidoglican, care ocupa spaiul dintre aceste membrane; 6. maturizarea sporului: in interiorul prosporului se produce sinteza dipicolinatului de calciu, are loc constituirea cortexului format din cele doua membrane citoplasmatice si stratul peptidoglican sintetizat de ele. 7. sinteza stratului membranar din invelisul sporului. 8. degradare restului celulei. Sporii o perioada ndelungata de timp se pot gasi in stare de repaus, dar nimerind in condiii favorabile de dezvoltare (umiditate satisfctoare, prezenta substanelor nutritive), are loc germinarea lor: invelisurile sporale sunt dezintegrate enzimatic, coninutul de apa "libera" in spor creste. In spor ncepe o accelerare vdita a proceselor enzimatice biochimice. Procesul de germinare a sporului are loc mai repede comparative cu sporogeneza si dureaz cca 4-5 ore.