SNGELE

COMPOZIIE CHIMIC PROTEINE PLASMATICE

22 May 2013

Obiectivele:
Funciile fiziologice ale sngelui. Componena chimic a sngelui (noiuni generale). Compoziia chimic a eritrocitelor: hemoglobina, enzimele, componentele organice nehemoglobinice i componentele minerale.

22 May 2013

Sngele
Sngele esut lichid heterogen, ce asigur conexiunea umoral a esuturilor i organelor. Cantitatea total a sngelui din organism constituie volumul sanguin total, care la un om adult este de 4,5 -5 l. reprezint 5-7,5% din greutatea corpului 2/3 circul prin patul vascular, 1/3 depozitat (splin, ficat i alte organe)

22 May 2013 3

1. Scderea V plasmatic hipovolemie (n sindromul nefrotic, ocul traumatic i posthemoragic, arsuri extinse, deshidratri profunde: vom, diaree). Creterile V plasmatic hipervolemie (se atest n retenii hidrosaline, inclusiv n graviditate; posttransfuzional).

22 May 2013

Componena:
Se compune din 2 faze:
lichid

apoas de protide i sruri minerale), PH= 7,35.

plasma 55%-60% ( soluie

Solid

elementele

(eritrocite, leucocite, trombocite)

reprezentat de figurate 40-45%

22 May 2013

Plasma:
1. 91-95% H2O 2. 5-9% - reziduu uscat: - Substane minerale (anioni i cationi) - Substane organice:

a) azotate (enzime, proteine, neproteice) b) neazotate (glucide, lipide, a. organici)

22 May 2013 6

Hematocritul raportul elementelor figurate la volumul total de snge: la femei - 41-43%. la brbai - 44-48%, la noi nscui hematocritul este cu 10% mai mare, la sugari cu 7% mai mic.

22 May 2013

Proprietile fizico- chimice

1.PH sngelui este uor alcalin, n condiiile fiziologice fiind de 7,35-7,4.

Dereglarea pH-ului: < 7,3 se numete acidoz (pH=7 com, 6,8

moartea)

> 7,4 se numete alcaloz (pH=7,8 com, 8

moartea)
22 May 2013 8

2. greutatea specific a sngelui, 1,057-1,067 la brbai i 1,056-1,061 la femei. E dependent de: 1. procentul elementelor figurate 2. cantitatea de Hb 3. C% proteinelor n snge Greutatea specific a plasmei (norm 1,025- 1,035) corelat direct cu c% proteinelor plasmatice (variaz n stri patologice) Greutatea specific a eritrocitelor

este de 1,090

22 May 2013

3. Viscozitatea
Sngele lichid vscos, viscozitatea sngelui integral - e de 5,0 (depinde de proporia eritrocitelor), Viscozitatea total a sngelui crete n: 1. policitemii i leucemii (datorit creterii numrului elementelor figurate) 2. sferocitoz i anemie falciform (graie sporirii rezistenei eritrocitelor) viscozitatea plasmei e de 1,6-2,1 poises (depinde de c% proteinelor). Viscozitatea plasmei se majoreaz n hiperproteinemii i e sczut n anemii.

22 May 2013 10

4. Presiunea osmotic

Posm a sngelui = Posm a plasmei i e dependent exclusiv de sruri, 80% din valoarea ei revine NaCl; Posm se exprim n miliosmoli, Posm a palsmei este -290 mosm (7,6-8,0 Atm) Posm sanguine duce la ptrunderea H2O n interiorul eritrocitului tumifierea i hemoliza lui P osm plasmatice duce la ieirea H2O din celul i retatinarea (zbrcirea) celulei

22 May 2013 11

5. Presiunea coloid-osmotic 21-31 mm Hg (1/200 parte din valoarea Posm 0,02-0,03 Atm), datorit creia este meninut faza lichid a sngelui n patul vascular este cauzat de proteinele plasmei 80%albumine i 20% de globuline Micorarea P oncotice hipoalbuminemiile renale sau hepatice edeme (lichidul prsete patul vascular)
22 May 2013 12

Funciile sngelui: 2 funcii fundamantale:

de transport: respiratorie, nutritiv, de aprare. reglatoare homeostatic: izoionie, izotonie, izotermie.

22 May 2013

13

Funcia de transport

1. 2.

3.
1. 2. 3.

Funcia respiratorie a sngelui: transportul oxigenului de la plmni la esuturi i CO2 de la esuturi spre plmni. Funcia nutritiv: transportul: substanelor nutritive din tractul digestiv (aminoacizi, acizi grai, oze, vitamine); produselor finale ale metabolismului intermediar (uree, acid uric) pentru eliminarea prin rinichi, plmni, piele, intestin; hormonilor transferai de la glandele endocrine la esuturile int. Funcia de aprare transportul: - proteinelor plasmatice de tipul imunoglobulinelor (Ig): Ig G, IgM, IgA, IgD, Ig E); - limfocitelor T i B - macrofagelor i limfocitelor.
14

22 May 2013

F-ia reglatoare homeostatic

Izoionie: -pstrarea constant a c% anionilor i cationilor (Na+; K+; Ca 2+, Mg 2+, Cl-, H2PO4-, HCO3- ) - pstrarea EAB i meninerea c% ionilor de H+ la PH=7,35. Izotonie: meninerea la nivel constant a presiunii osmotice a sngelui (proporional cu compuii nedisociai i ioni ai electroliilor). Este corelat cu meninerea constant a volumului sanguin sau volemia. Izotermia: - meninerea constant a temperaturii corpului

22 May 2013

15

Elementele figurate ale sngelui

I. Eritrocitele 1 ml de snge conine 4-6 mln de globule roii. Sunt celule anucleate (nu posed capacitatea de a sintetiza proteine noi), de forma unui disc biconcav T1/2 a eritrocitelor = 120 zile. Eritrocitele se produc n urma eritrocitopoiezei medulare din celula de origine, sub influena eritropoietinei, sintetizate n rinichi.

22 May 2013

16

Componena chimic:
1. 2. 1. 2. 3. 4. 5. 6.

65%- H20 (liber-70%; legat -30%) 35% - substane solide (Hb-92%; strom-3,3%; alte substane -4,7%). Componeni minerali: K 125 mEq/L sau 4,8 g/L Na 20mEq/L sau 0,46 g/L Ca -1,2 mEq/L sau 0,025 g/L Cl 50-60 mEq/L sau 1,8-2,4 g/L Bicarbonat (HCO3) -15mEq/l Fosfai anorganici -1,1 mEq/L sau 0,035 g/L
17

22 May 2013

 1) 2)

Componena organic: Hb - 120-150 g/l Proteine nehemoglobinice

Membranare: AEP (Anion Exchange Protein) strbat membrana de 10 ori i asigur schimbul ionilor de Cl i bicarbonat Glicoforinele A, B, C strbat membrana doar o singur dat Citoscheletul: spectrinele, ankirina, adducina, actina, tropomiozina contribuie la meninerea formei i flexibilitii eritrocitare 3). Compui organici neproteici: urea, glucoza, colesterolul liber, glutationul redus

22 May 2013

18

Enzimele:
glicolitice (aciune slab: hexokinaza, aldolaza, fosfofructokinaza; aciune puternic: 1,3 bifosfogliceratkinaza piruvatkinaza; LDH); 2, 3 difosfogliceratmutaza ciclul Rapoport Luiebering produce 2,3 diP-gliceratul E untului pentozofosfat E ciclului glutationic: glutation peroxidaza, glutation transferaza, glutation reductaza NADH- DH I i II; NADPH DH A i B asigur reducerea la Hb a cantitilor mici de metHb Carbanhidrazele A,B, C transportul lui CO2 n form de bicarbonai 22 May 2013 19

Trsturile caracteristice eritrocitului:

consum slab de oxigen absena sistemului citocromic absena n cursul maturitii a E ciclului Krebs (ex: fumarazei, aconitazei, malatDH, izocitratDH) degradarea glucozei pe 2 ci: anaerob -92%, untului pentozofosfat 8-11% -acumularea de NADPH (reducerea glutationului,metHb) Acumularea n cantiti mari a 2,3 difosfogliceratului (ciclul Rapoport Luebering) i glucozei 1,6 22difosfatului May 2013 20

1.
2.

Trsturile caracteristice eritrocitului:

1. 2.

consum slab de oxigen absena sistemului citocromic absena n cursul maturitii a E ciclului Krebs (ex: fumarazei, aconitazei, malatDH, izocitratDH) degradarea glucozei pe 2 ci: anaerob -92%, untului pentozofosfat 8-11% -acumularea de NADPH (reducerea glutationului,metHb) Acumularea n cantiti mari a 2,3 difosfogliceratului (ciclul Rapoport Luebering) i glucozei 1,6 difosfatului
22 May 2013 21

Leucocitele

3,2-9,8 X 109/L Creterea numrului de leucocite se numete leucocitoz- infecii, inflamaii Micorarea numrului de leucocite leucopenie - iradierea copului cu raze gama, administrarea de citostatice sunt divizate n: granulocite (neutrofile- 58-70% , eozinofile- 1-5%, , bazofile - 0,5-1% ); limfocite - 18-40% monocite - 2-10 %

1.
2.

3.

22 May 2013

22

 1. 2.

specific: profilul energetic e pe baza glicolizei anaerobe existena FO (prezena MC; aciunea inhibitorilor LR i decuplanilor. Metabolismul granulocitelor n cursul maturitii: I faz: predomin procesele energetice (oxidative i glicolitice, asupra celor hidrolazice); lipsesc peroxidazele II faz (odat cu apariia granulaiilor) se produce mieloperoxidaza; hidrolazele prevaleaz E energetice; dispariia E mitocondriale, cresc depozitele de glicogen; predomin glicoliza anaerob; untul pentozofosfat este activ.
22 May 2013 23

Granulocitele:

Monocitul:

se formeaz n mduva osoas i organele limfopoietce, se difereniaz n macrofag. Monocitele-macrofage sunt localizate n ganglionii limfatici, splin, mduva osoas, pleur, pericard, piele, pulmoni, ficat, SNC Sunt energetic dependente de glicoliza anaerob (excep. macrofagele pulmonare - aerobe) Secret substane cu activitate bactericid - lizozim; antiviral interferon; stimulatori ai activrii i diferenierii limfocitelor n plasmocite interleukina 1 sunt capabile la fagocitoz, avnd rol antimicrobian.

22 May 2013

24

Limfocitele
T (timus) i B (medula osoas) Se formeaz n sistemul limforeticular i pe cale limfatic agung n circulaie Limfocitele T realizeaz imunitatea celular prin 2 mecanisme: producerea limfokinelor i activitatea citotoxic eliberarea organismului de microorganisme, virusuri, celule tumorale B limfocitele imunitatea umoral mediat de anticorpi. Se divid n multe familii, fiecare avnd specificitate de interaciune cu un anumit antigen. Dup interaciune ele se transform n plasmocite ce produc imunoglobuline specifice

22 May 2013 25

 elemente anucleate, formate n mduva osoas din megacariocite. 130-400X109 T1/2 -8-10 zile Compoziia chimic: 1. Proteinele: integrinele membranare asigur aderarea trombocitelor la suprafaa lezat a vasului (GPI;GPII;GPV;GPIX) Proteinele citoplasmatice: plecstrina, calmodulina, lanurile uoare ale miozinei intervin n activarea plachetelot i n coagularea sngelui 2. E- adenilatkinaza, Na-K-ATP-aza, fosfolipaza A2, ciclooxigenaza, tromboxan sintetaza sunt active E glicolizei, untului pentozo-fosfat, ciclului Krebs, LR

22 May 2013 26

Trombocitele

Funciile trombocitului:
homeostaz (att n faza celular ,ct i n cea plasmatic. Aciunea se desfoar n 4 timpi: 1. timpul 1 (parietal) exercit aciune vasculotonic, prin serotonina pe care o elibereaz; 2. timpul 2 (plachetar) realizeaz adevizitatea la sediul leziunii, peretelui vascular i agregarea cu formarea trombului; 3. timpul 3 (plasmatic) intervin n coagulare prin intermediul factorului 3 i transport factorii de coagulare n atmosfera periplachetar; 4. timpul 4 (trombodinamic) contracia trombosteninei i retracia cheagului. Funcii secundare: - n procesele imune; - fagocitoza complexelor imune i particulelor virale; - funcia de protecie a peretelui vascular. 22 May 2013 27

Obiectivele

Compoziia sngelui. Substanele organice azotate proteice ale plasmei sanguine: Proteinele plasmatice. Albuminele, globulinele (fibrinogenul, transferina, ceruloplasmina, haptoglobinele, imunoglobulinele, glico- i lipoproteinele etc). Rolul, metodele de dozare i separare a proteinelor. Variaiile fraciilor proteice n patologie.
28

22 May 2013

Proteinele plasmatice

C% P n plasm 60-80 g/L

Menin presiunea coloid-osmotic (oncotic) De transport (vitamine, metale, hormoni) Particip la meninerea EAB Determin viscozitatea Hemostatic (fibrinogenul) protecie (prin intermediul anticorpilor) Reprezint o rezerv proteic

Funciile proteinelor:

22 May 2013

29

Principalele proteine ale plasmei sunt: Albuminele - 4050g/L Globulinele - 2030 g/L Fibrinogenul 2-4 g/L

Plasma lipsit de fibrinogen se numete ser sanguin.

30

22 May 2013

Metode de separare a proteinelor

electroforeza: liber, de zon, pe hrtie, n gel de agar, imunoelectroforeza; metode cromotografice: precipitarea cu soluii saline, separarea prin solveni organici; Ultracentrifugarea Cea mai rspndit n clinic este separarea acestora prin metoda electroforezei pe hrtie. Aceast metoda permite separarea proteinelor serului n 5 fraciuni: albumine; 1-, 2-, - i globuline.

22 May 2013 31

22 May 2013

32

Fibrinogen
protein plasmatic - masa 340kDa - 2496 AA - rol n hemostaz
-

22 May 2013

33

Albuminele
1. 2.

se sintetizeaz n ficat (n jur de 20 g/zi); bine se dizolv n ap; sunt proteine simple,acide; constituie 50-65% din coninutul total al proteinelor serului; greutatea molecular de 69 kDa; Funcia: meninerea presiunii coloidosmotice (oncotice); particip la transportul unor substane (Ca2+, bilirubina, a. uric, a.grai, vitamine, unii hormoni).
34

22 May 2013

 1.

2. 3. 4.

Hipoalbuminemia : scderea aportului de a/a din malnutriie i malabsorbie constituie o cauz de reducere a sintezei hepatice de albumin n reaciile de faz acut mediat de citochine de cauz hepatic la nivel renal (sd nefrotic) sau intestinal. La scderea coninutului acestora n snge apar edeme.

Analbuminemia este o boal genetic transmis autosomal recesiv, ce se manifest doar la homozigozi. 1. lipsa albuminei la electrofareza proteinelor serice 2. Edeme 3. hipotensiune arterial 4. uneori steatoree Bisalbuminemia tulburare genetic a sintezei albuminelor, caracterizat prin prezena n ser a dou fraciuni albuminice distincte

22 May 2013 35

Globulinele

sunt proteine cu caracter slab acid sau neutru (PI se afl n limitele PH=7,3). Conin 3-30% glucide (hezoze, hexozamine, acid sialic, fucoze). Funcia principal a: - i -globulinelor - transportul diferitor substane (hormoni, glucide, lipide, medicamente etc). - globulinele (imunoglobuline) -ele prezint anticorpi, ce asigur imunitatea.
36

22 May 2013

22 May 2013

37

Exemple de 1globuline:
- fraciunea sero mucoizilor reprezentantul orosomucoidul Winzler se mrete n reumatismul poliarticular; - 1 antitripsina inhibitor al proteazelor (inhib tripsina, chimotripsina). Mrirea c% inflamaii; micorarea - n infecii bronhopulmonare. - 1fetoproteina se sintetizeaz n ficat i tractul gastro-intestinal.

22 May 2013 38

2 globuline
2 macroglobulina inhibitor natural al proteazelor. Mrirea c% nefroza lipoidic, micorarea artrita reumatoid. haptoglobinele pot forma complexe cu Hb (1mol leag 2 moli de Hb). Stabilizarea acestei legturi duce la pierderea sigmoidal a curbei de disociere a oxihemoglobinei. Mrirea c%- inflamaii acute, procese neoplazice, micorarea boli hepatice, anemii hemolitice. Ceruloplasmina este o metaloglicoprotein. F-ia : transport Cu2+, intervine n oxidarea Fe 2+-- Fe 3+ fiind implicat n metabolismul transferinei; sunt implicate n metabolismul aminelor biogene (oxidarea hidroxitriptaminei); intervin n procesele de sintez a citocromoxidazei; rol antioxidant. Micorarea c% - boala Wilson (degenerescena hepato lenticular- ficatul i nucleul lenticular din creier conin 22 May 2013 39 cantiti mari de Cu).

-globuline
1 transferina se sintetizeaz n ficat, splin, ganglioni limfatici, ileon. F-ia: transportul de Fe plasmatic ( fixeaz 2 atomi de Fe/molec. Stabil la PH=7,5-10; disociaz la PH=4. Capacitatea de legare a Fe n transferin: la brbai: 53,7 -71,9 mM Fe/l; la femei: 44,77 62,96 mM Fe/l.

22 May 2013 40

Hiperproteinemia mrirea c% P totale n plasm Hiperproteinemie relativ diaree, vom n ocluzie intestinal , combustii (pierderea de H2O, plasm conduce la creterea c% de P n snge) Hiperproteinemie absolut creterea globulinelor (boala mielomatoas, macroglobulinemia Valdenstrem - 100160 g/L)

22 May 2013

41

Hipoproteinemia micorarea c% de P n plasm (albuminelor)

Sd nefrotic - 3040 g/L. Atrofia ficatului Hepatite toxice Carcinoma TGI Disproteinemia c% total a P este n norm, dar se modific raportul procentual al fraciilor proteice..

22 May 2013

42

Enzimele organospecifice ale ficatului

1. 2. 3. 4. 5. 6.
7. 8. 9. 10. 11.

Histidaza Urocanaza Ceto 1 fosfat aldolaza Sorbitoldehidrogenaza Ornitincarbomoiltransferaza Arginaza

GlutamatDH e mai puin specific (localizat n mitocondriile ficatului) indicator al afeciunilor mitocondriilor. AlAt (citoplasma ficatului) servete la diagnosticul precoce al formelor anicterice ale hepatitelor cronice; LactatDH (LDH): LDH 5 necroza ficatului. Leucinaminopeptidaza icterele obstructive: IzocitratDH hepatopatii evolutive.
43

22 May 2013

Enzimele organospecifice ale miocardului

Beta- hidroxibutiratdehidrogenaza LDH1 Aspartataminotransferaza Creatinkinaza (KK) - (ea este de 3 tipuri: MM muchiul scheletic i miocard; BB creier i muchiul scheletic; MB miocard) La infarctul miocardic crete valoarea KK/MB, pe cnd n miopatii crete KK, fr modificarea izoenzimei MB. n infarctul miocardic acut: crete 3gliceraldehidfosfatDH; fosforilaza b.

22 May 2013

44

Enzimele organospecifice ale creirului

Creatinkinaza total i izoenzima BB Acetilcholinesteraza monoaminoxidaza

22 May 2013

45

E organospecifice ale rinichilor

Glicinamidinotransferaza Glutaminaza rinichiului Alaninaminopeptidaza (3 izoemzime:AAP1n ficat; AAP2- n pancreas; AAP3-n rinichi

22 May 2013

46

E organospecifice ale muchilor scheletici

Kreatinkinaza total + MM izoenzima Fr 1,6difosfataldolaza LDH (LDH1)

Fosfataza alcalin: 3 izoforme:

hepatobiliar, osoas i intestinal Fosfataza acid prostat, oase, ficat carcinomul metastazat al prostatei
22 May 2013 47

Azotul neproteic
Substanele azotate neproteice reprezint produi intermediari sau finali ai proceselor metabolice. Anume ele alctuiesc azotul neproteic i cuprind: uree (50%), aminoacizi (25%), acid uric (4%), creatina (5%), creatinina (2,5%), amoniac, indican, nucleotide, polipeptide. Determinarea azotului neproteic se face n filtratul obinut prin precipitarea proteinelor din plasm.

22 May 2013

48

Azotul rezidual
1.

2.

Diferena ntre azotul neproteic i azotul ureic azotul rezidual Creterea c% azotului neproteic azotemie Deosebim: Azotemie de retenie micorarea eliminrii prin urin a produselor azotate (renal: pe baza creterii n snge a ureei; extrarenal: apare n insuficiena cardiovascular, micorarea TA, scderea fluxului sanguin renal) Azotemie de producie - - consecin a lizei proteinelor tisulare n arsuri, traume, inflamaii
49

22 May 2013

 1. 2. 3. 4.

1.

2. 3. 1. 2. 1. 2. 3.

22 May 2013

Ureea Concentraia normal 3-6 mMol/l. este produsul final al metabolismului proteic, se sintetizeaz n ficat. Creterea c% -n insuficiena renal, degradarea excesiv de proteine, tumori, iradieri, aport excesiv de proteine n alimentaie. Acidul uric produsul final al catabolismului bazelor purinice. concentraia normal-0,24-0,29 mMol/l. Creterea c%- gut i hiperuricemiile secundare. Creatina 25-35 mol/L, se localizeaz principal n eritrocit Creatinina corelat cu metabolismul muscular, indicator sensibil al funciei renale; c% -62-97mol/L la brbai i 44-88 mol/L la femei

50

Substanele organice neazotate

sunt prezentate prin glucoz, lipide, unii hormoni etc. Toate se supun diverselor transformri n metabolismul celular.

22 May 2013

51

Componentele minerale
sunt prezentate prin ap i srurile minerale. Substanele minerale ndeplinesc numeroase funcii: structural (ntr n componena oaselor, dinilor etc), reglatorie (regleaz presiunea osmotic, pH-ul). intr n componena substanelor biologic active, de exemplu: Fe este component al hemoglobinei, citocromilor; P - ntr n componena AN, nucleotidelor, Co; Co- n componena vitaminei B12; Zn - n componena carbanhidrazei. 22 May 2013 52

 1.

C% plasmatic este 133-147 mmol/L i este de 8 ori mai nalt ca n eritrocite. 2. Rol:regleaz presiunea osmotic i echilibrul acido-bazic 3. Hipernatriemia este nsoit de retenia apei n patul sanguin i n esuturi, mrirea presiunii arteriale. Se ntlnete n nefrite, hiperaldosteronism, insufucien cardio-vascular. 4. Hiponatriemia se manifest prin dehidratarea organismului
1.

Natriul

Cationii:

C% n plasm este de 3,4-4,5 mmol/L, n eritrocite este de 20 ori mai nalt. 2. Hipercaliemie se ntlnete n insuficiena renal, hipofuncia suprarenalelor, pot duce la paralizie i oprirea inimii n diastol. 3. Hipocalemie apare n hiperaldosteronism, tulburri neuromusculare i cardiace asociate cu alcaloza metabolic
22 May 2013 53

Kaliul sau Potsiul


1.

Calciul

Concentraia plasmatice este de 2,25-2,8 mmol/l. 2. Ca2+ plasmatic este: a. neionizat b. legat cu proteinele plasmatice Particip la procesele de excitabilitate neuro-muscular, n procesul de coagulare a sngelui, ntr n matricea structural a esutului osos. Hipercalciemia se ntlnete n tumorile esutului osos, hiperplazie sau adenomul paratiroidelor Hipocalciemia se dezvolt n strile de hipoparatireoidie. Se manifest prin convulsii musculare. Scderea concentraie Ca2+ se ntlnete n rahit, icter mecanic, nefroze, glomerulonefrite.

22 May 2013

54

1,5 mmol/L, n eritrocite 2,4-2,8 mmol/L. n muchi se conine de 10 ori mai mult Mg2+ dect n plasm, deaceea c% Mg2+ n plasm este meninut de rezervele musculare. Fierul - Concentraia fierului din snge e de 18,5 mmol/L n plasma constituie doar 0,02 mmol/L. Rol: transportul O2 n componena Hb. Insuficiena Fe provoac anemie din cauza limitrii vitezei de transformare a protoporfirinei IX n hem. Este important ca c% anionilor i cationilor din plasm s fie echilibrat.
22 May 2013 55

Magneziul - Concentraia plasmatice este de 0,8-

Ionograma sngelui

22 May 2013

56

Noiuni generale de EAB

1.

2.
3.

Echilibrul acido-bazic reprezint meninerea constant a pH-ului mediilor lichide ale organismului. pH ul sngelui n norm este 7,35-7,45. Pstrarea acestei constante este important pentru desfurarea normal a tuturor proceselor vitale. Meninerea pH-ului n limitele date o realizeaz urmtoarele mecanisme funcionale: Eliminarea renal a acizilor i bazelor; Eliminarea pulmonar a dioxidului de carbon; Neutralizarea acizilor i bazelor de ctre sistemele tampon;
57

22 May 2013

Sistemul tampon
Amestecul a 2 substane tampon: 1. acid slab + sarea sa alcalin sau 2. baz slab + sarea sa acid const dintr-un donor i dintr-un acceptor de protoni care se opun scderii i creterii pH-ului mediului la adugarea unei cantiti mici de acid sau baz. Componenta care neutralizeaz acizii componenta bazic; iar cea care neutralizeaz bazele componenta acid. n snge deosebim urmtoarele sisteme tampon: plasmatice (hidrocarbonat, proteine, fosfat); eritrocitare (al hemoglobinei, hidrocarbonat, fosfat)

22 May 2013

58

Reglarea pH este asigurat de: - factorii plasmatici = sistemele tampon 1. intra-celulare : proteine (hemoglobin), fosfat, HCO32. extra-celulare : HCO3-, proteine (albumine) defect imediat
albumine H+ K+ H+
22 May 2013

hemoglobin

HCO3-

H2CO3

H2O + CO2
59

Sistemul tampon acid carbonic bicarbonat.

Cota lui e de 10% H2CO3 donator de protoni H2CO3 H+ + HCO3 HCO3- - acceptor de protoni Bicarbonaii din lichidul extracelular se prezint sub form de NaHCO3-, iar n eritrocite KHCO3
La PH =7,4 raportul bicarbonat/acid este de 20/1
22 May 2013 60

Sistemul tampon acid carbonic bicarbonat.

Bazele tari sunt neutralizate de componenta acid H2CO3: NaOH + H2CO3 NaHCO3 + H2O Pentru neutralizarea acizilor intervine componenta bazic i are loc reacia de tipul: HCl + NaHCO3 NaCl + H2CO3 H2CO3 format sub aciunea anhidrazei carbonice: H2CO3 H2O + CO2 ( este eliminat prin plmni).
61

22 May 2013

La o hipoventilaie pulmonar CO2 se reine n plasm - crete aciditatea sngelui La o hiperventilaie CO2 se elimin prin alveolele pulmonare

22 May 2013

62

Sistemul tampon al fosfaiilor

este constituit din: NaH2PO4 ( donator) Na2HPO4 ( acceptor). Procesul tamponrii are loc potrivit reaciilor: HCl + Na2HPO4 NaCl + NaH2PO4 NaOH + NaH2PO4 Na2HPO4 + H2O

La PH =7,4 raportul HPO4 2-/H2PO4 - este de 5/1 Este activ n hematii i celulele tubilor renali 22 63 May 2013 Cota lui e de 1% din ntregul sistem

Sistemul tampon al proteinelor.

La pH-ul slab alcalin al mediului proteinele plasmatice sunt anioni (-). n combinaie cu protoni anionii proteici constiuie componenta acid (H-protein) i tamponeaz bazele: NaOH + H-protein H2O + Na proteina Anionii proteici n combinaie cu cationii (Na+, K+), formeaz componenta bazic i tamponeaz acizii: HCl + Na-protein NaCl + H proteina

22 May 2013

64

Sistemul tampon al hemoglobinei

Hb ntr n componena a 2 sisteme tampon: HHb KHb HHbO2 KHbO2 i exercit aciunea tampon datorit resturilor de histidin din partea sa proteic. Inelul imidiazolic al histidinei posed capacitatea de a accepta i a ceda protoni. KOH+HHb KHb +H2O HCl + KHb HHb + KCl NaOH +HHbO2 NaHbO2 +H2O HCl + NaHbO2 HHb O2 +NaCl Cota acestui sistem e de 75%
65

22 May 2013

- dou organe excretoare de acizi :

volatili plmnul: CO2, protoni

aprare semi-tardiv

rinichii : H+, HCO3- aprare tardiv.

reabsoarbe bicarbonaii filtrai la nivelul glomerulului i regenereaz noi ioni de HCO3-. Ei pot egal excreta ioni de H+
22 May 2013

Rinichiul joac un rol esenial :

66

ROLUL RINICHILOR
TUBUL PROXIMAL Reabsoarbe HCO3filtrat : rolul anhidrazei Carbonice (CA) TUBUL DISTAL i CANALUL COLECTOR Elimin H+ Regenereaz noi molecile de 22 May 2013 HCO 3-

67

Principalii indici ai EAB (echilibru acido-bazic)

pH = 7.40 0,02 HCO3- = 24 2 mmol/l pCO2 = 40 4 mmHg

22 May 2013

68

Perturbrile EAB
Acidoza - mrirea c% de H+ i micorarea pH (metabolic i respiratorie) Alcaloza - micorarea c% de H+ i mrirea pH (metabolic i respiratorie)

22 May 2013

69

Obiectivele

Hemoglobina model ideal de protein alosteric. Oxigenarea deoxigenarea hemoglobinei. Modificrile conformaionale ale hemoglobinei n aceste procese. Curba de oxigenare. Efectul Bohr. Transportul O2 i CO2 de ctre snge. Mecanismul biochimic. Importana hemoglobinei n aceste procese i n meninerea constant a pH-ului sangvin. Noiune de hipoxemie i hipoxie. Cauzele apariiei lor. Hemoglobinopatiile. Hemostaza. Rolul trombocitelor, substanelor biologic active, vitaminei K, ATP ului, ADP-ului, prostaglandinelor, kininelor, kalikreinelor conform mecanismelor de desfurare a hemostazei n urmtorii timpi: timpul parietal- caracteristica general; timpul plasmatic factorii principali ai coagulrii, mecanismele intrinsec i extrinsec de coagulare a sngelui; timpul fibrinolitic sistemul anticoagulant, fibrinoliza. Reglarea strii fluide a sngelui. Indicii fundamentali de definire a fazelor coagulrii. Coagulograma. Coagulopatiile. Noiuni generale. Exemple.
22 May 2013 70

Hemoglobina model ideal de protein alosteric.

Hb- cromoprotein (din partea proteic-globin i partea neproteic-hemul). Hb are o structur cuaternar, ce const din patru catene polipeptidice (dou i dou ), fiecare caten mai conine i hemul.

Hemul prezint un ciclu porfirinic ce conine fierul cu gradul de oxidare (II). Fierul st n planul porfirinic nconjurat cu 4 atomi de azot de la ciclurile pirolice, i doi atomi de azot de la ciclurile imidazolice a histidinei distale i proximale.
71

22 May 2013

22 May 2013

72

Funcia respiratorie a sngelui. Transportul O2

n plmni are loc saturaia sngelui cu oxigen. Difuziunea O2 din alveolele pulmonare n snge decurge datorit diferenei alveolaro-capilar a presiunilor oxigenului: 13,85 (pO2 n alveole) / 5,98 (pO2 n calpilarele plmnilor) =7,8 kKPa. Oxigenul ptrunde n plasma sanguin prin peretele capilarului, unde se dizolv, iar apoi trece prin membrana eritrocitului i se leag cu hemoglobina.

22 May 2013 73

O molecul de Hb accept 4 molecule de O2 dup mecanismul cooperativ (ce nseamn c alipirea primei molecule de O2 este mai lent dect a celorlalte i adiionarea ei mrete gradul de fixare a celorlalte molecule de O2. Locul fixrii este fierul hemoglobinei (n locul histidinei distale); fierul n oxihemoglobin rmne cu gradul de oxidare +2.

22 May 2013

74

Adiionnd oxigenul, hemoglobina trece n oxihemoglobin: HHb + 4O2 HHb(O2)4 Hemoglobina transport O2 la esuturi n form de oxihemoglobin (HHbO2) i mai puin n form dizolvat n plasm.

22 May 2013

75

Curba saturrii Hb cu O2
Saturaia Hb cu O2 e dependent de presiunea parial a O2 i se exprim prin curba disociaiei oxiHb (saturrii Hb cu O2) form sigmoidal - S Mg hiperbolic

22 May 2013 76

1.

2.

Afinitatea se caracterizeaz prin mrimea P50, egal cu presiunea parial a O2 la saturarea a 50% din locusurile de fixare (pH 7,4; t=37 C) Deplasarea curbei saturrii Hb cu O2: spre dreapta micorarea afinitii (saturrii) Hb la O2, P50- mrete spre stnga mrirea afinitii Hb la O2; p50 -micorat
77

22 May 2013

Saturarea Hb cu oxigen depinde de:

PH odat cu mrirea PH are loc i creterea saturrii Hb cu O2, crete afinitatea O2 ctre Hb (n plmni PH este mai mare ca n esuturi) temperatur (t plm.<t esuturi) odat cu creterea t se micoreaz saturarea Hb cu O2, dar se mrete disocierea HHbO2

Este reglat de C% 2,3 difosfogliceratului -la mrirea c% lui scade afinitatea O2 fa de Hb, ea mai uor cedeaz O2 (c% 2,3 difosfogliceratului n plm < n esuturi).
22 May 2013

78

22 May 2013

79

Transportul de CO2:
Are loc pe 3 ci: 1. dizolvat n plasm -6-7% 2. sub form de carbhemoglobin -3-10% R NH2 + HO C = O R NH C = O + H2O

OH

OH

3. sub form de bicarbonai 80% de CO2 este transportat n form de KHCO3 (bicarbonat de potasiu sau sodiu). Mai exist formele patologice a hemoglobinei: carboxihemoglobina (n locul O2 se fixeaz CO); i methemoglobin (fierul este trivalent).

22 May 2013

Carbhemoglobina

80

22 May 2013

81

22 May 2013

82

Coagularea sngelui

22 May 2013

83

Fazele i factorii principali ai coagulrii

Fenomenul coagulrii sngelui const n transformarea fibrinogenului n fibrin insolubil. Caracteristic: Numr mare de activatori i inhibitori Majoritatea factorilor coagulrii sunt n form neactiv (proteoliz limitat i autocatalitic) Procesul se desfoar n cascad i implic participarea a 13 factori plasmatici i a factorilor trombocitari. Factorii plasmatici sunt nsemnai prin cifre romane, iar cei trombocitari prin cifre arabe. 22 May 2013

84

n procesul coagulrii se deosebesc 2 faze distincte care se divizeaz n 2 timpi: 1. timpul parietal se produce vasoconstricia capilarelor n esutul lezat, controlat prin serotonin, catecolamine, elaborate de trombocite. (la interaciunea fibrelor de colagen a vasului lezat cu trombocite are loc agregarea trombocitelor i eliminarea de catecolamine, serotonin, ATP, ADP, ultimul amplific agregarea trombocitelor i accelereaz obturarea vaselor lezate. Este o agregare reversibil. 2. timpul plasmatic faza adevrat a coagulrii, o agregare ireversibil a trombocitelor, asigurat de aciunea trombinei, care conduce la formarea cheagului rezistent. Sunt 2 mecanisme: calea extrinsec i calea intrinsec

22 May 2013

85

Factorii plasmatici:

Factorul I fibrinogenul este o glicoprotein, sintetizat n ficat, alctuite din 6 lanuri peptidice grupate cte 2 (222) Factorul II protrombina natur glicoproteic, 2 globulin, coninut ridicat de Asp, Glu, Arg, Liz. Este sintetizat n ficat n prezena vitaminei K. Factorul III tromboplastina tisular este de natur lipoproteic (fosfolipid) i catalizeaz transformarea protrombinei n trombin. Factorul IV ionii de Ca++ - catalizeaz mai multe trepte ale formrii trombinei. Factorul V proaccelerina - - este o globulin. Se activeaz cu ajutorul factorului X. Factorul VI anulat
86

22 May 2013

Factorul VII proconvertina- este o globulin, sintetizat n ficat cu participarea vitaminei K. Factorul VIII antihemofilic A este o macroglobulin, sintetizat n ficat, activat de trombin Factorul IX antihemofilic B (Christmas) sintetizat n ficat cu participarea vitaminei K. Factorul X- Stuart-Prower sintetizat n ficat cu participarea vitaminei K. Factorul XI Rozenthal este o beta globulin, are activitate esterazic. Factorul XII Hageman factor de contact, este o alfa 2 globulin. Factorul XIII fibrinostabilizator este o transglutaminaz plasmatic. Factorul XIV Wilebrand sau factorul Nilsson e socotit ca factor de antisngerare.

22 May 2013 87

Factorii trombocitari (plachetari) Cei 9 factori plachetari sunt: Factorul 1 ia parte la conversia protrombinei n trombin; Factorul 2 este implicat n transformarea fibrinogenului n fibrin; Factorul 3 este un fosfolipid implicat n formarea f X; Factorul 4 antiheparina; Factorul 5 serotonina; Factorul 6- fibrinogenul plachetar; Factorul 7 trombostenina; Factorul 8- antifibrinolizina plachetar; Factorul 9 factorul stabilizant al fibrinei.

22 May 2013

88

22 May 2013

89

Calea intrinsec: dureaz minute.

Lezarea vasului: calicreina precalicreinei activat de kininogen

Factorul XII a Factorul XIn Factorul XIa F IXn F {IXa + VIIIa +f.3 +Ca2+ } Factorul Xn factorul Xa { Va +Xa+ PL +Ca2+} Trombin IIa Protrombina IIn Fibrinogenul In Fibrin monomer Ca2+ ,XIIIa FXIIIn Fibrin polimer f 8, ATP 22 May 2013 90 Polimer fibrin stabil (cheag) Factorul XII n

Calea extrinsec dureaz secunde: esut lezat, eliberarea F.III (tromboplastinei tisulare) Factorul VIIn factorul {VIIa +F.3, F.III, Ca2+} Factorul Xn factorul Xa Vn { Va +Xa+ PL +Ca2+} complex protrombinazic Protrombina IIn Trombin IIa Fibrinogenul In Fibrin monomer Ca2+, XIIIa factorul XIIIn Fibrin polimer f 8, ATP Polimer fibrin stabil (cheag)
22 May 2013 91

Coagularea sngelui

22 May 2013

92

Anticoagulanii
Anticoagulanii Antitrombinele - I, II , III, IV,V, VI. Antitrombina III- unicul inhibitor specific al trombinei i necesit ptrezena unui Co- heparina. Inhib deasemenea activitatea f X i VII Trombomodulina glicoproteid ce formeaz un complex cu trombina, unde crete afinitatea ei fa de proteina C Proteina C serinproteaz globulinic, dependent de vitamina K, care n prezena Co-proteina S descompune f Va, VIIIa Anticoagulantele cu aplicare terapeutic mai folosite sunt heparina i antagonitii vitaminei K. Heparina - mucopolizaharid, ce conine glucozaminglican, acid glucuronic i o cantitate de esteri sulfurici. Inhib direct activitatea factorului X, ct i aciunea enzimatic a trombinei deja formate. Aciunea sa depinde de gradul de sulfatere: un mg corespunde la circa 100-300 UI i poate inhiba coagularea la 100-130 ml snge. Heparina are i efect lipolitic prin lipoproteinlipaza care o conine. Este distrus n ficat, prin heparinaze. Antagonitii vitaminei K (dicumarin, neodicumarin, pelentan, sincumar, varfarina(otrav pentru obolani)) sunt derivai ai 4hidroxi-cumarin i inden-1,3-dion- ei inhib biosinteza factorilor de coagulare II,V,VII, X, provoac hemoragii. 22 May 2013 93

Fibrinoliza
Fibrinoliza ultima faz a hemostazei i are ca efect eliminarea fragmentelor de cheag i a depozitelor de fibrin sub aciunea plasminei. Plasmina scindeaz fibrina n fragmente polipeptidice mici, solubile, ce nu pot forma reele coerente. Plasmina se formeaz din plasminogen. Plasminogenul poate fi activat sau inhibat. Activatori: streptokinaza, lizokinaza, proteina streptococic neenzimatic (factori tisulari), urokinaza (urin), activator al plasminogenului (snge i esuturi). Inhibitori: 2 macroglobulina; 2- antitripsina i antitrombina III. Fibrinoliza patologic crescut se ntlnete n leucoze, intervenii chirurgicale pe organe bogate n activatori ai fibrinolizei (uter, prostat, plmn). Fibrinoliza poate fi inhibat prin antifibrinolitice cu acidul e-aminocapronic, acid-p-aminometilbenzoic sau trasilol.

22 May 2013 94

22 May 2013

95

Mecanismul general al coagulrii sngelui

Procesul de coagulare include trei etape:
1. 2. 3.

Formarea complexului activator al protrombinei Conversia protrombinei n trombin Transformarea fibrinogenului n filamente de fibrin
96

22 May 2013

Mecanismul extrinsec de iniiere a coagulrii

22 May 2013

97

Mecanismul intrinsec de iniiere a coagulrii

22 May 2013

98

Patologii
Hemoragii: carena Vit. K hemofilia trombocitopenia

Coagulri spontane: ateroscleroza infecii traumatisme deplasarea lent a sngelui prin vasele sangvine mici
99

22 May 2013

Hemofilia boal ereditar

Hemophilia C Hemophilia B Hemophilia A

22 May 2013

100