Grupa cocilor

Fam. Staphylococcaceae Genul Staphylococcus

Genul Staphylococcus
Stafilococii sunt bacterii de form rotund, dispui n grmezi neregulate cu aspect de chiorchine (staphylos gr.), Gram-pozitivi; Prezint tropism ridicat pentru esutul dermic i anexele pielii, cu posibilitatea de a invada orice alt esut; Au o larg rspndire n mediul ambiant.

Istoric
Billroth (1874) observ germenii n colecii purulente umane; Pasteur (1880) izoleaz germenele n cultur pur; Rosenbach (1884) introduce teremnul de stafilococ i descrie specia tip.

Taxonomie
Specia tip : Staphylococcus aureus subsp. aureus i susbsp. anaerobius (abcese, mamite, dermatite) Alte specii potenial patogene : S. hycus (S. epidermitis, epidermita exudativ a porcului), S. schleiferi (otite, piodermite la cini), S. felis (otite, abcese, cistite, conjuctivite) Specii considerate nepatogene : S. virulus, S. carnosus, S. equorum, S. sciuri

 Diferite infecii purulente la om i animale Infeciile cutanate (dermatitele) sunt cele mai frecvente Factori favorizani : plgi traumatice, arsuri, incizii chirurgicale, infecii virale, administrarea imunosupresoarelor La animale : mamita gangrenoas a oilor i caprelor (rsfugul negru), mamita stafilococic a vacilor, epidermita exudativ a porcului, botriomicoza la cal. La alte specii: dermatite, peritonite, otite, mamite, rareori septicemii. La om : toxinfecii alimentare, furunculoza, abcese, flegmoane, foliculite, piodermite, otite, cistite, sinuzite, sau chiar septicemie (piemie)

Infecia natural

Ecologie
Germeni foarte rspndii n mediul ambiant, izolndu-se frecvent din sol, aer, ap Sunt comensali ai pielii i mucoaselor, la om i animale Se izoleaz uneori i din diferite produse alimentare (lactate, produse din carne)

Rezisten la factorii de mediu

Germeni foarte rezisteni comparativ cu alte specii nesporulate; Pot supravieui luni de zile pe diferite substraturi din adposturi; Majoritatea tulpinilor sunt distruse la 60C n 30 min., la 70C n 15 min., iar unele celule rezist pn la 80C; Sunt sensibili la dezinfectante puternice : fenolul, crezolul sau sublimat coroziv.

Sensibilitate la antibiotice
Tulpinile slbatice sunt sensibile fa de numeroase antibiotice : penicilin, eritromicin, neomicin, tetraciclin; Se constat frecvent apariia de variante antibiorezistente; La ora actual peste 90% din tulpinile de stafilococi sunt rezistente la penicilin, iar unele manifest rezisten la meticilin (MRSA) i vancomicin (antibiotice de rezerv); Se recomand efectuarea de antibiograme, mai ales cnd se fac tratamente n mas, ndelungate sau repetate.

Conduita diagnosticului etiologic

I. Recoltarea produselor patologice : secreii purulente, lapte, organele cadavrelor, urin, alimente, etc; II. Examenul bacterioscopic direct : efectuarea de frotiuri din materialul patologic prin coloraia Gram sau cu albastru de metilen. Se pot observa coci grupai n grmezi caracteristice, aspect cu valoare orientativ asupra etiologiei stafilococice; III. nsmnarea produsului patologic recoltat n vederea izolrii i identificrii germenilor.

Condiii de cultivare
Germeni aerobi, facultativ anaerobi, care se dezvolt bine pe medii uzuale; Germeni halofili, se dezvolt bine pe medii hiperclorurate (7-10% NaCl); Pentru izolarea din materiale patologice i alimente se utilizeaz medii selective : Chapmann (fermentarea manitolului), BayrdParker, Vogel-Johnson (activitatea coagulazic), care permit multiplicarea stafilococilor datorit halofiliei,care inhib restul florei bacteriene;

Caractere culturale
Pe medii lichide : turbiditate intens, depozit uor omogenizabil; Pe medii solide : colonii rotunde, n general mari, cu diametru de 1-6 mm, opace cu suprafaa neted i lucioas, pigmentate; Pigmenii sunt de natur carotenoid, nedifuzibili n mediu i au diferite culori : galben-auriu, galben-citrin, alb-gri, alb-cretaceu; Exist aproximative corelaii ntre felul pigmentului i patogenitatea tulpinilor.

Caractere morfologice
Coci cu de 0,8-1 m, nesporulai, neciliai, majoritatea necapsulai, Gram-pozitivi grupai n grmezi cu aspect de ciorchine de strugure, datorit separrii incomplete a celulelor fiice de cele parentale; Aglomerrile constituite sunt mai mari i mai caracteristice n frotiurile de pe medii solide; n frotiurile din materiale patologice i din culturi lichide, cocii .apar izolai cte 2-3 sau n grmezi mici

Stafilococ imagine microscop electronic

Caractere biochimice
Majoritatea stafilococilor fermenteaz fr producere de gaz, glucoza, lactoza, zaharoza, manitolul.Practic se examineaz activitatea enzimatic fa de manitol, ca factor de patogenitate(pe mediul Chapmann), dar cu o valoare aproximativ; Ca teste de patogenitate se mai determin capacitatea de a produce hemolizine (activitatea hemolitic) i producerea de coagulaz (activitatea coagulazic); Stafilococii produc catalaz, o enzim caracteristic, care permite diferenierea de ali coci patogeni, ca streptococul i pneomococul

Determinarea prezenei de stafilococi coagulaz-pozitivi

Medii de mbogire: bulion hipersalin cu manit i indicator, bulion hipersalin dublu concentrat cu lactoz, bulion cu telurit-piruvat-glicocol-manit i bulion cu tripton soia i 10% clorur de sodiu. Medii selective de izolare i identificare: mediile Chapman, Baird Parker, VogelJohnson i geloz-snge

Manitol Salt agar (7,5% NaCl, manitol i indicator de pH rou fenol)

Agar cu snge

Caractere antigenice
O component antigenic major a peretelui celular este polizaharidul A, derivat al acidului teichoic, ce confer o specificitate de specie, fiind prezent la tulpinile de S. aureus i absent la celelalte specii

Factori de patogenitate
Prin virulen i toxicitate; Virulena este dat de factori de natur enzimatic (agresine), ce faciliteaz difuzarea germenilor n esuturi sau neutralizeaz mecanismele defensive ale organismului;

Factori de agresivitate
Coagulaza enzim extracelular care induce formarea unui manon de plasm coagulat, n jurul celulelor bacteriene, cu rol antifagocitar. Este prezent preponderent la tulpinile patogene de S. aureus; Se pune n eviden prin testul coagulrii plasmei citratate de iepure (test de patogenitate)

Factori de agresivitate
Hialuronidaza enzim complex care difuzeaz extracelular i acioneaz prin descompunerea acidului hialuronic din substana fundamental a esutului conjunctiv, favoriznd difuzarea germenilor n esuturi; Stafilococii patogeni sunt productori de hialuronidaz n proporie de peste 90%.

Factori de agresivitate
Fibrinolizina (stafilochinaza) enzim proteolitic care acioneaz prin liza coagulilor de fibrin, permind astfel progresia stafilococilor n esuturi; Favorizez producerea emboliilor n formele septicemice de boal

Factori de agresivitate
Deoxiribonucleaza produce leziuni tisulare acionnd asupra ADN-ului din celulele diferitelor esuturi; Fosfataza enzim care se evideniaz n special pentru testarea stafilococilor din alimente; Lipazele sunt active asupra lipidelor plasmatice i a grsimilor de pe suprafaa tegumentelor, ceea ce explic tropismul germenilor pentru zonele tegumentare unde glandele sebacee sunt mai active

Factori de agresivitate
Hemolizinele acionez prin liza globulelor roii. Sunt descrise 4 tipuri de hemolizine : -hemolizina alfa, prezent de obicei la tulpinile umane, este activ fa de hematiile de iepure i oaie. Are i o aciune dermonecrotic, letal pentri iepure; - hemolizina beta are o activitate litic mai pronunat fa de hematiile de oaie. Procesul de hemoliz se accentueaz la 4C; - hemolizina gama, activ fa de hematiile de oaie i iepure, dar hemoliza nu poate fi evideniat, datorit diametrului foarte mic; -hemolizina delta, elaborat numai dac incubarea se face n atmosfer de CO2.

Factori de toxicitate
Enterotoxinele exotoxine difuzibile, cu tropism pentru mucoasa intestinal, fiind prezente numai la tulpinile capabile s produc toxinfecii alimentare; Acioneaz asupra centrilor nervoi declannd contracii peristaltice i antiperistaltice, responsabile de producerea sindromului diareic i a vomei; Sunt de natur proteic, rezistente la aciunea enzimelor digestive i la temperaturi de 117C; Cele mai sensibile specii sunt omul, maimua i pisica; Evidenierea lor se face prin testul Dolman

Teste de patogenitate
Este important de demonstrat dac tulpinile izolate sunt patogene.Pentru a demonstra aceast proprietate, n practica curent de laborator se efectueaz : - testul de coagulare a plasmei citratate; - testul de hemoliz; - infecia experimental (bioproba). Aceasta se realizeaz pe iepure care n urma inocularii iv. face o infecie septicemic mortal.

Imunoprofilaxie
Imunoprofilaxia specific (prin vaccinare) nu are o extindere prea larg. La ovine, n cazul mamitei gangrenoase se poate face vaccinarea cu o anacultur, n perioada de gestaie.