Definiii

Parazitologia medical
ramura tiinei medicale care se ocup de studiul paraziilor de natur animal care triesc pe seama organismului uman i l mbolnvesc

Parazitul
fiin de natur vegetal (de care se ocup bacteriologia) sau animal care triete pe suprafaa unei fiine (ectoparazii) sau n interiorul unei alte fiine (endoparazii)

Organismul gazd
fiin de natur vegetal, animal sau uman pe seama cruia se dezvolt parazitul omul poate fi: o gazd definitiv: parazitul i atinge maturitatea n acesta o gazd intermediar: parazitul se gsete doar trector n organismul uman, nu i atinge maturitatea sexual n acesta

Produse patologice
snge: n malarie, boala somnului, leishmanioz sput: n pneumocistoz LCR: n meningoencefalit primar amibian urin: n strongiloidoz, tihomoniaz, amibiaz puncii sternale, limfatice, splenice, hepatice materii fecale (m.f.): n parazitoze intestinale forme vegetative sau chisturi de parazii unicelulari, ou de helmini

Condiiile unui examen coproparazitologic bine condus

1. Pregtirea bolnavului - nu este necesar n mod special - se vor evita: o alimentele bogate n celuloz sau smburi (fragi, cpuni, mure) o fructe i legume care produc lambouri epiteliale ntinse (varz, banane) o administrarea de medicamente colorate, pansamente digestive, purgativ uleios, substane opace (bariu) cu cel puin 4-5 zile nainte de recoltare 2. S ne asigurm c proba vine de la bolnav (recoltare n spital) 3. Examinare ct mai rapid 4. Repetarea examenului - de cel puin 3 ori - la interval de 5-10 zile (eliminare discontinu de ou, larve, chiti)

Recoltarea probelor
Materiale necesare
pentru helmini sau elemente suspecte o cutii Petri, cristalizoare, borcan nalt cu capac pentru proba de m.f. o suport pentru defecare (vas de plastic sau carton cerat, vas de noapte) o baghete sau lopele de plastic, lemn, sticl o cutii Petri o sond Nelaton

Tehnica de recoltare
recoltarea helminilor sau a elementelor suspecte o n cutii Petri sau borcan cu capac (la domiciliu) o se adaug ap sau alcool pentru a preveni uscarea viermelui o pentru evaluarea ncrcturii parazitare sau examenul helminilor dup tratament, se recolteaz tot scaunul n cristalizor de 1-2 L recoltarea m.f. o scaun emis spontan, fr purgativ n recipient special cu linguri de plastic, nchis cca 50g m.f. (ct o alun/nuc) necontaminate cu urin (pH nefavorabil) se preleveaz din mai multe pri ale bolului fecal, din zonele care au modificri patologice (snge, scaun, puroi, elemente parazitare) se recolteaz scaun proaspt, se examineaz la cald n amibiaz (formele vegetative se distrug n 1 h) o dup purgativ salin n suspiciune de strongiloidoz, teniaz sau depistarea protozoarelor o cu sonda Nelaton pentru depistarea protozoarelor din rect

Transportul
Se face n recipiente nchise ermetic, previnindu-se astfel contaminarea probei, a persoanei care transport proba i a mediului extern. Recipientele de transport se introduc n cutii de lemn paralelipipedice cu capac fixat cu sfoar i sigilat cu cear roie

Metode de examinare
variaz n funcie de felul produsului prelevat

1. Sngele
se ntinde sub forma unui frotiu se coloreaz MGG se pot evidenia plasmodii (agentul malariei) se pot numra celulele eozinofile (n cazul trichinelozei eozinofilia poate ajunge la 80%) 2. Examenul coproparazitologic -

Examenul coproparazitologic
1. Examen macroscopic
o o o se caut helmini, fragmente de parazii i elemente suspecte se noteaz prezena de mucus, puroi, snge culoarea scaunului: cu snge rou, nedigerat = rectoragie (din colon-rect) cu snge negru, digerat = melen (din tractul digestiv superior) scaun deschis = acolic (n obstrucie biliar) consistena: format, semiformat, moale, diareic formelele vegetative ale paraziilor unicelulari nu se evideniaz din scaun format, doar din scaun diareic mirosul: putred, fetid, de varz acr depinde de flora bacterian intestinal pH-ul: se studiaz cu hrtie indicator elemente parazitare: oxiuri, proglote de viermi plai

o o

2. Examen microscopic
o o reprezint partea principal a examenului metode: metode directe metode de examinare n strat gros metode de concentrare metode larvoscopice

a. Metode directe
Preparat nativ, n ser fiziologic
o principiu: suspensia de m.f. se face n ser fiziologic, care pstreaz viabilitatea protozoarelor i a larvelor de helmini, precum i culoarea natural a elementelor parazitare pe o lam se pune o pictur de ser fiziologic n care se emulsionaz proba de examinat cu ajutorul unei baghete se acoper cu o lamel de sticl preparatul trebuie examinat ct mai repede, pentru a se preveni uscarea (elementele nu se mai pot citi) examinarea se face cu obiectiv 10x iar analiza elementelor parazitare cu obiectiv 40x se evideniaz toate formele de parazii, micarea paraziilor sau a larvelor din ou. Chitii de protozoare sunt foarte refringeni

o o o o o

Preparat n soluie lugol

o o o o principiu: soluia Lugol coloreaz membrana chitilor i detaliile de structur intern tehnica: similar cu a preparatului nativ chitii se coloreaz n galben-brun i prezint detalii de structur detaliate (membrana chistic, nuclei, vacuole, flageli, corpuscul parabazal) oule de helmini: brun-rocat

Frotiu colorat
o o o o frotiul uscat se fixeaz cu alcool etilic 1-2 min., se coloreaz MGG 30-60 min. examinarea se face cu obiectiv 10x, 40x i O.I. se poate observa morfologia paraziilor unicelulari, trofozoii sau chiti nucleul apare rou, citoplasma violet-albastr

b. Metode de examinare n strat gros

Preparatul Kato i Miura
principiu: o cantitate de m.f. ct un bob de gru (50 mg) clarificat cu un amestec de ap-glicerin, las s se vad prin transparen oule de helmini. materiale necesare: o soluia Kato-Miura: 50 ml glicerina, 50 ml ap distilat, 0,5 ml verde malachit soluie apoas 3%. o dreptunghiuri de celofan 3/4 cm o lame de sticl mari 5/10 cm metod de lucru: o dreptunghiurile de celofan se cufund i se menin n soluia KM cel puin 24h o se ia cu o baghet o cantitate mic de m.f. i se aeaz pe lam

o o o o -

cu o pens se aeaz un dreptunghi de celofan din soluia KM se preseaz celofanul cu un corp tare i plat pn cnd preparatul devine plat, cu un diametru de aproximativ 2,5 cm. se las preparatul 30 min. pe mas se examineaz cu obiectiv 10x i 40x, condensator ridicat

toate oule i embrioforii de helmini sunt decelabiliprin metoda KM oule sunt de 5-20 ori mai frecvente dect n metoda direct se pot examina 2-3 preparate KM din aceai prob de scaun preparatul se poate pstra mai multe zile, chiar cteva luni preparatul se poate transporta uor, fr risc de infeciozitate

c. Metode de concentrare
principii: o ridicarea elementelor parazitare dintr-un mediu lichid hiperton (flotaie) o coborrea elementelor parazitare ntr-un mediu lichid hipoton cu un anumit pH (principiul centrifugrii)

Metoda de flotaie Willis-Hung

principiu: ntr-o soluie saturat de clorur de sodiu, oule unor helmini sunt ridicate spontan la suprafa materiale necesare: o capac de pahar Borel de 4 cm nlime o soluie saturat de NaCl (densitate de aprox. 1200) tehnica de lucru: o se amestec aprox. 2g m.f. n 20 ml soluie saturat de NaCl n capac de pahar Borel o coloana de lichid trebuie s aib o nlime de 2-2,5 cm. o dac la suprafa se ridic detritusuri, se nltur cu ans metalic o pe suprafa se aeaz o lamel de sticl care se las s pluteasc 30 min., timp n care oule uoare se ridic la suprafa i ader pe faa inferioar a lamelei o lamela se ridic cu o pens n poziie orizontal, fr a se scurge pelicula de pe faa inferioar, i se depune pe o lam de sticl. se concentreaz ou de Hymenolepis nana, Ankilostoma duodenale, Necator americanus, Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura, etc. de rutin: n himenolepidoz i ankilostomiaz dup tratament

d. Metode larvoscopice
utilizate n suspiciunea unor helmintiaze care se transmit prin sol sub form de larve pun n eviden larve din scaun sau larvele rezultate din oule eliminate odat cu scaunul la noi n ar: diagnosticul strongiloidozei (Strongyloides stercoralis), trichostrongiloidozei 5

n ri exotice: Ankilostoma duodenale, Necator anericanus

Metoda Dncescu
principiu: larvele se concentreaz lent, n decurs de cteva zile, ntr-un amestec de m.f. cu crbune, ridicndu-se spontan n sus ctre picturile de ap de condensare de sub capacul cutiei cu cultura. materiale necesare: o cutii de material plastic transparent cu capac o pulbere de crbune activat tehnica de lucru: o se face o past din 5 lingurie de crbune i 45 ml ap distilat o se amestec cu 7 g m.f. cu aceeai cantitate de past de crbune o amestecul se aeaz n cutie sub forma unui con, astfel nct capacul s turteasc vrful conului o peste capac se aeaz o hrtie umed sau vat umed care va duce la formarea picturilor de condens n interiorul cutiei o larvele migreaz spre capac, fiind atrase de picturile de condens o citirea se face cu lupa binocular, cu surs de lumin lateral lumina produce agitaia larvelor de helmini din picturi se poate face determinare microscopic a speciei, prin preparat ntre lam i lamel. Deschiderea cutiei se face numai cu mnui de cauciuc (larvele ptrund prin tegumente intacte!) dup examinare, cutia se incinereaz fr a se deschide

Amprenta anal
n diagnosticul oxiuriazei principiu: examenul amprentei anale pune n eviden oule de oxiuri (Enterobius vermicularis) depuse de parazit n pliurile anale recoltarea: o se face dimineaa, nainte de defecaie i de toaleta perianal o poziia bolnavului: n picioare, aplecat nainte, i deprteaz fesele cu minile o se deruleaz o band de scotch de 10 cm i se aeaz pe o baghet de sticl cu partea lipicioas n afar o se aplic celofanul cu bagheta n jurul anusului i se apas n lateral, banda lipindu-se de pliurile anale o dup recoltare, celofanul se lipete pe o lam de sticl examinarea: o se face cu obiectiv 10x i 40x o oule se observ izolate sau n grupuri o examenul se poate repeta de 3-4 ori la interval de 7-10 zile n caz de rezultat negativ 6

Cultivarea paraziilor
se aplic n cazul n care nu putem pune un diagnostic cert pe baza examenului direct, datorit prezenei n numr redus a paraziilor n produsul de examinat se aplic la paraziii unicelulari: Giardia, Trichomonas, amibe nsmnarea se face pe mediu Loffler nclzit la 37C, 1 sau mai multe zile

Reacii serologice
au rol n parazitozele tisulare, care se abordeaz mai greu prin metode directe (cisticercoz, truchineloz, chist hidatic) metode: o reacii de aglutinare o reacii de precipitare o RFC o ELISA o IDR

Boala experimental
inocularea produsului la animale de experien sensibile (oarece alb, obolan, hamster, etc.)