Introducere Introducerea microorganismelor n corpul uman prin intermediul unui produs farmaceutic contaminat, parenteral sau prin rni

ale pielii poate avea ca rezultat boli grave sau chiar moartea. Produsele farmaceutice ca injecii, preparate oftalmologice, fluide de irigare, soluii de dializ i dispozitive medicale implantate n corp, trebuie sfie i s rmn sterile. Prin urmare, sterilizarea este o etap esenial n procesul defabricare al oricrui produs ce ar putea fi injectat sau care vizeaz suprafee mucoase, rniale pielii sau organele interne. Sterilizarea poate fi definit ca un proces ce ndeprteaz i distruge toatemicroorganismele cu ajutorul unui agent chimic sau un proces fizic. Cteva dintre cele mai comune proceduri recomandate pentru sterilizarea unui produs sunt urmtoarele: 1. 2. 3. 4. 5. Filtrarea Sterilizarea cu abur Sterilizarea uscat Radiaii ionizante Sterilizarea cu etilen oxid.

Alegerea metodei potrivite depinde de tipul de formulare i de capacitatea acesteia de a rezista la tratametul aplicat prin procedura de sterilizare selectat. Deexemplu o formulare lichid poate fi sterilizat folosind autoclava sau filtrarea aseptic, ntruct dispozitivele medicale sunt tratate radiaii ionizante. Uneori ns, lichidul este un produs biologic, cum ar fi interferonul sau o mic peptid ce nu pot fi sterilizate, prin urmare filtrarea pe cale aseptic este singura soluie. Eficacitatea tratamentului depinde de timpul cat a fost aplicat i de gradul iniial de contaminare. Aadar cu ct sunt mai puime microorganisme prezente ntr-o mostr cu att durata procesului de sterilizareva fi mai mic. Totui majoritatea medicamentelor sterile sunt fabricate pe cale aseptic, deoarece sterilizarea degradeaz stabilitatea chimic a produsului. Principalul obiectiv al procesului de sterilizare este distrugerea tuturor microorganismelor prezente ntr-o mostr dat. Metabolismul microbian se bazeaz pe utilizarea de compui anorganici i organici pentru a stimula creterea c elulelor, diviziune i ntreinere. Reaciile enzimatice sunt eseniale pentru creterea microbian, reproducere, supravieuire i rspndirea n mediu. Toate procesele de sterilizare inactiveaz sau interfereaz cu aceste reacii enzimatice care susin metabolismul microbian. Cnd se expune o cultur microbian la un agent de sterilizare inactivarea microorganismelor urmeaz o curb exponenial a morii acestora. Probabilitatea ca o populaie de microorganisme sa supravieuiasc unui proces de sterilizare estedeterminat de numrul lor, tipul, i rezistena la procesul de
1

sterilizare. n plus,supravieuirea microorganismelor este influenat i de ali factori cum ar fi umiditatea, energia termic i timpul expunerii. Sterilizarea cu abur Cnd un eantion este amplasat ntr-o autoclav ce utilizeaz abur saturat i presiune, este sterilizat prin procedeul numit sterilizare cu abur. Principiul de baz al acestei operaii este ca aerul din camer s fie nlocuit cu abur. Pentru a nltura mai eficient aerul din camer i din interiorul probelor, ciclul de sterilizare poate include mai multe etape de evacuare a aerului i aburului. Ciclurile pentru diferite produse sunt n funcie de penetrarea cldurii, distribuie, i rezistena probelor testate, n general folosindu-se temperaturi n jur de 121C i presiuni de 1-1.5 bari. Totui, timpul necesar pentru o sterilizare complet trebuie determinat n timpul procesului de validare a diferitelor configuraii de ncrcare. Aceste configuraii sunt bazate pe diferite tipuri i numrul de materiale tratate de orice proces particular de sterilizare. n timpul validrii se urmaresc doi parametri importani, i anume: Primul l reprezint distribuia cldurii n interiorul camerei, pentru a determina punctele reci. Acesta urmrete uniformitatea i variabilitatea cldurii n interiorul camerei. Al doilea parametru este penetrarea cldurii folosind configuraii cu sarcin real. Aceste sarcini reprezint tipuri materiale sterilizate zi de zi cum ar fi medii de cultur, instrumente de laborator, sticlrie, recipiente din plastic, i a deeurilor biologice. Amplasarea de indicatori biologici n autoclava, lng sau n interiorul sarcinilor va permite determinarea temperaturii i presiunii n fiecare mostr. Este important c temperatura i presiunea corect s fie distribuite uniform n toate materialele aflata n camer pentru o distrugere complet a microorganismelor. Dup incubarea diferiilor indicatori biologici, absena creterii indic sterilizarea complet a tuturor materialelor. Sterilizarea uscat Aceast metod utilizeaz un cuptor de uscare cu aer filtrat i nclzit. Aerul este distribuit n camer prin convecie sau radiaie, printr -un sistem de suflante cu dispozitive pentru detecie, monitorizare i control a parametrilor fizici. Intervalul acceptabil de temperatur n camera goal este de +15C atunci cnd aceasta opereaz la nu mai puin de 250C. Pentru sterilizarea i depirogenarea sticlriei se folosete un proces continuu. Deoarece cldura uscat este frecvent folosit pentru a elimina substanele pirogene de pe sticlrie i recipiente, pentru validarea metodei trebuie fcute ncercri cu
2

anumite concentraii cunoscut de pirogene. Pirogenii sunt bacterii care cauzeaz febr i alte stri patogene la om, de aceea este foarte important ca acestea s fie complet eliminate de pe materiale i echipamente. Sterilizarea gazoas cu etilen oxid Cel mai frecvent agent folosit n sterilizarea gazoas este etilen oxidul. Acest tip de sterilizare se folosete cnd proba nu poate rezista la temperatura ridicat utilizat n procedurile de sterilizare cu abur i cea uscat. Oxidul de etilen este foarte inflamabil, mutagenic i crete posibilitatea de a rmne reziduuri toxice n materialele tratate. Procesul se desfoar ntr-o camer presurizat, similar sterilizrii cu abur dar cu modificri unice sterilizatoarelor cu gaz. Dup ce procesul se ncheie, camera trebuie degazat pentru a permite monitorizarea microbian. Parametri ca difuziunea gazului, concentraia i coninutul de umiditate al materialului, timpul i temperatura sunt factori foarte importani pentru validarea procesului de sterilizare. De asemenea factori critici sunt umiditatea i concentraia gazului. Distribuia probelor n camer trebuie fcut astfel n cat sa maximizeze difuzia gazului i sa optimizeze penetrarea acestuia i moartea microbian. Sterilizarea cu radiaii ionizante Sterilizarea cu radiaii ionizante const n expunerea produsului ce se dorete a fi sterilizat ntr-un cmp de radiaii ionizante (radiaii gamma sau electroni accelerai), pentru o perioad de timp bine determinat. Efectele radiaiei ionizante (n particular efectul biocid) pot fi caracterizate prin mrimea fizic denumit doza absorbit (D), care exprim cantitatea de energie absorbit n unitatea de msur a materialului iradiat. Este important de contientizat faptul c expunerea la un proces de sterilizare validat nu este singurul factor implicat n asigurarea atingerii strii de sterilitate potrivite utilizrii produsului respectiv. O mare atenie trebuie acordat: 1. coninutului microbiologic a materialelor prime i componentelor; 2. proprietilor de barier microbiologic ale ambalajelor; 3. controlului mediului n care produsul este manufacturat, asamblat , mpachetat i depozitat. Sterilizarea este un exemplu de proces a crui eficacitate nu poate fi verificat prin inspectarea retrospectiv i testarea produsului finit. Din acest motiv procedurile de alegere a dozelor de iradiere i control a calitii au constituit i constituie o tem predicat standardelor internaionale dedicate acestui domeniu de activitate.

nainte de utilizarea sterilizrii prin iradiere pentru un produs dat, se urmrete efectul iradierii asupra materialul din care este confecionat acesta. Se stabilete o doz maxim acceptabil pentru fiecare tip de produs i de ambalaj. Pentru determinarea dozei de sterilizare este necesar cunoaterea numrului i rezistenei la radiaie a populaiei naturale microbiene de pe produsele manufacturate. n urmtoarea etap se face selectarea dozei de iradiere capabil s asigure nivelul de sterilizare impus produsului respectiv. Cele mai noi standarde intenionale recomand dou metode pentru aceast selecie: (1) metoda care presupune cunoaterea contaminrii microbiene iniiale i (2) metoda creterii treptate a dozei.Ambele metode au ca prim etap important stabilirea dozei pentru care etapa este definit ca doz de verificare. O dat doza de sterilizare stabilit, la intervale de aproximativ trei luni se practic reverificarea ei prin detectarea eventualelor modificri ale masei microbiene iniiale. Fabricantul produsului etichetat steril are responsabilitatea ultim pentru corectitudinea i adecvarea operaiunilor de sterilizare i a controlului de asigurare a calitii. Proprietarul iradiatorului este responsabil pentru furnizarea dozei necesare conform specificailor unui proces valid i pentru un produs definit. Avantajele sterilizrii prin iradiere Sterilizarea prin iradiere s-a impus n ultimele decenii pe piaa produselor medicale sterile datorit avantajelor pe care le ofer. Acestea sunt nu numai de ordin comercial, care atrag pe productori n primul rnd, ct i din punct de vedere alsiguranei i fiabilitii procesului de sterilizare. Avantajul utilizrii sterilizrii cu radiaii ionizante este dat de certitudinea efectului biocid al acestora. Efectul letal al radiailor este bine cunoscut n acest moment. Reproductibilitatea procesului este asigurat prin simplitatea construciei iradiatoarelor industriale destinate sterilizrii i numrul mic de parametri ce trebuie controlai (practic unul singur - timpul). Din acest punct de vedere, sterilizarea cu radiaii se poate defini ca un proces sigur i perfect reproductibil. Unul dintre primele avantaje tehnologice sesizate de fabricanii de produse sterile a fost cel al posibilitii de sterilizare de volume mari de materiale ntr -o perioad scurt de timp. Acest lucru este posibil datorit puterii de penetrare a radiaiei gamma, respectiv cantitii mari de energie cedat materialului iradiat de fascicolul de electroni accelerai. Timpul afectat procesului de sterilizare este scurtat i prin eliminarea necesitii folosirii de indicatori biologici. Avantajul comercial care decurge de aici
4

este evident: un timp de punere pe pia a produsului mai scurt fa de alte metode de sterilizare. Sterilizarea n ambalajul final reduce considerabil posibilitatea contaminri poststerilizare a produsului. Sterilizarea cu radiaii este eficace pe toate suprafeele obiectului iradiat indiferent de forma acestuia i chiar de volumul materialului de constituie. Libertatea deplin n ceea ce privete design -ul produsului permite dezvoltarea de produse mai bune, cu o construcie mai simpl i costuri de fabricaie mai mici. Sterilizarea n ambalajul final reduce considerabil posibilitatea contaminrii poststerilizare a produsului. Spre deosebire de sterilizarea termic sau cu oxid de etilena, nu mai este necesar ca cel puin o poriune a ambalajului s fie permeabila la agentul sterilizant. Este de menionat n acest caz avantajul comercial al creterii suprafeei de inscripional.Una dintre cele mai severe limitri n cazul sterilizrii cu oxid de etilen este cedat de concentraia maxim de oxid de etilen (EtO) rezidual n materialul obiectuluisterilizat, tiut fiind c acesta este un produs cancerigen. Sterilizarea cu radiaii ionizantenu produce radioactivitate n materialul iradiat i nici reziduuri chimice, care s necesiteoperaii suplimentare (aerare) nainte de punerea pe pia a produsului. De asemenea sunt evitate problemele legate de manipularea, utilizarea,depozitarea i nu n ultimul rnd tratarea i eliminarea unui gaz toxic, inflamabil iexploziv. Un motiv serios pentru care productorii renun la sterilizarea cu oxid de etilen sunt reglementrile din ce n ce mai drastice promovate de rile dezvoltate referitoare la eliminarea n mediul nconjurtor a oxidului de etilen, respectiv amestecurile n care acesta este utilizat pentru sterilizare. rile semnatare ale protocolului de la Montreal (dintre care face parte iRomnia) referitor la substanele ce conduc la reducerea stratului de ozon, au decisinterzicerea utilizrii amestecului EtO-CFC, cu toate c alte amestecuri sau folosirea EtO pur prezint riscuri sporite. n plus, rile dezvoltate au impus deja limitri drastice privind cantitatea de EtO eliminat n atmosfer. Utilizatorii sterilizrii cu EtO sunt obligai s achiziioneze instalaiile necesare pentru neutralizarea gazului nainte de deversarea lui n mediul nconjurtor, cu cheltuieli financiare deloc de neglijat care se reflect n preul final al produsului. Filtrarea Filtrarea prin materiale ce rein microorganisme este frecvent folosit pentru sterilizarea soluiilor instabile la cldur, prin ndeprtarea fizic a bacteriilor. Structural,un filtru este compus n general dintr-o membran poroas sigilat sau prins ntr-ocarcas impermeabil. Eficacitatea unui mediu de filtrare sau a unui
5

substrat depinde de mrimea porilor i poate depinde de adsorbia bacteriilor pe suprafaa sau n interiorul filtrului. Parametri importani n validarea procesului de filtrare sunt: 1. compatibilitatea produsului 2. sorbia 3. conservanii 4. coninutul de endotoxin Determinarea gradului de contaminare al soluiei ce urmeaz a fi filtrat este un parametru foarte important pentru determinarea eficacitii procesului de filtrare.Cunoaterea numrului de microorganisme din mostr, nainte i dup filtrare va putea stabilili eficiena procesului. De asemenea, presiunea, i caracteristicile filtrului sunt foarte importante. Filtrele de tip membran sunt bazate pe materiale cum ar fi: 1. Acetat de celuloz 2. Esteri de celuloz 3. Nitrat de celuloz 4. Fluorocarbonat 5. Polimeri acrilici 6. Policarbonat 7. Poliester 8. Nailon 9. Metal Integritatea unui filtru trebuie testat nainte i dup ncheierea procesului, pentru a demonstra integritatea sistemului. Cteva dintre aceste teste sunt urmtoarele: 1. punctul iniial de fierbere 2. testul de difuzie 3. testul de presiune Pentru ca procesul s fie validat ar trebui s existe o corelaie ntre aceste teste i retenia microorganismelor. Scopul unui proces de sterilizare este distrugerea complet a tuturor microorganismelor prezente ntr-o proba de testare. Pentru ca procesul s fie reproductibil, consecvent i fiabil, acesta trebuie validat. Validarea unui proces de sterilizare Const n a demonstra absena dezvoltrii bacteriilor i cunoaterea parametrilor pentru a ajunge la distrugerea masei microbiene. Pentru a determina eficacitatea unui proces de sterilizare se folosesc bioindicatori. Acetia furnizeaz dovezi directe c s-au atins condiiile letale necesare sterilizrii n timpul tratamentului. Ali indicatori ai procesului cum ar fi temperatura, concentraia
6

gazului, umiditatea, presiunea, etc. pot fi nregistrai de ctre instrumente i sunt parametri critici n timpul studiilor de validare. Bioindicatorii sunt folosii n timpul procesului de validare pentru a determina ceamai mic probabilitate de a detecta o unitate nesteril ntr-un grup steril. Bioindicatorii sunt preparate standard de spori bacterieni specifice diferitelor tipuri de sterilizri. Bioindicatorii sunt uilizai pentru a reda o scar logaritmic reproductibil a inactivrii microorganismelor datorit rezistenei lor la anumite procese de sterilizare. Sporii bacterieni sunt mai rezisteni la aceste procese dect bacteriile vegetative. Prin aseptic este mai complex dect validarea sterilizrii. n plus, controlul procesului aseptic implic monitorizarea constant a mediului i personalului pentru a minimize ansele de contaminare. Practic, procesul trebuie s fie permanent n control pentru a se dovedi a fi eficient, fiabil, reproductibil i continuu. Monitorizarea mediului const n analizarea de mostre din instalaii, echipament, materie prim, aer, ap i personal. De asemenea, produsul final este testat nainte de a fi livrat. Contaminarea microbian a produselor sterile fabricate pe cale aseptic este cauzat n principal de interveniile umane. De exemplu, acestea includ manevrarea neglijent a etanrilor din cauciuc, cderea recipientelor goale pe jos, folosire a recipientelor defecte, etc. Lipsa unui control al procesului duce la eec n siguran i eficacitate, uneori produsele contaminate putnd genera infecii i chiar moarte. Spre exemplu, cea mai mare parte a unui produs este sterilizat prin filtrare, iar recipientele finale cu ajutorul cldurii. ntregul proces implic diferii pai de sterilizare pentru componente i produse, care sunt combinate ntr -o etap extrem de riguroas, ntr-un mediu controlat, avnd drept rezultat un produs steril. Principala preocupare o reprezint mediile microbiene unde aceste componente presterilizate sunt expuse n timpul asamblrii pentru obinerea produsului final. Elementele critice n prelucrarea aseptic a unui produs farmaceutic sunt aerul, echipamentele libere de microorganisme, personalul instruit i echipat corespunztor, i procesele validate. Pentru a valida si certifica un proces aseptic, personal i unitate operaional,eficiena sistemului se stabilete prin utilizarea unor proceduri de monitorizare a mediului, i prin prelucrarea unor medii de cultur sterile ca i produs simulat. Cel mai des mediu utilizat este soluia de cazeina din soia. nainte de a fi utilizat, soluia trebuie sa se verifice daca este propice pentru dezvoltarea microbian. Acest lucru se realizeaz prin inocularea de diferite tipuri de microorganisme n mediu, urmrind dezvoltarea microbian. Dup ce recipientele sunt umplute, sunt incubate la 25 sau 32C pentru minim 14 zile. Dac se observ creterea microbian, trebuie s se identifice tipul microorganismelor pentru a determina sursa lor. Aceast simulare se realizeaz cu scopulde a demonstra c unitatea, personalul, procesul, i mediul sunt capabile s obin un produs pe cale aseptic pe linia de fabricaie n acel moment. Civa parametri de luat n considerare sunt:
7

procedurile timpul de incubare temperatura documentarea interpretarea rezultatelor msuri corective Procesele de simulare se efectuez de obicei de dou ori pe an, n timpuldiferitelor schimburi de tur. Scopul este de a determina posibilele cauze ale contaminrii microbiene i implementarea de msuri corective pentru a evita aceast contaminare. Simulri noi se organizeaz n momentul cnd urmtorii parametri se schimb: noi recipiente produs nou o nou linie de fabricaie proces nou personal nou Combinnd supravegherea video i simulrile este considerat a fi una din cele mai bune metode pentru monitorizarea, evaluarea procesului i interpretarea rezultatelor. Monitorizarea mediului i simulrile sunt capabile de a detecta toate evenimentele n procesarea aseptic care ar putea compromite calitatea microbiologic a mediului. Explicaie Mostr- Parte dintr-un material sau dintr-o substan dup care se poate stabili calitatea ntregului; prob; eantion. 2) Obiect care servete drept orientare pentru o reproducere sau o imitaie; exemplu; model. Convecie- Orice micare de aer cu direcie vertical Fiabil-Care prezint siguran n funcionare

Profesor: Hadrca Vasilisa

Colegiul Naional de Medicin i Farmacie Catedra Discipline Farmaceutice

Tema : Sterilizarea produselor medicale i farmaceutice

Profesor: Hadrca Vasilisa