8.

TEHNOLOGII DE BIOSINTEZ A AMINOACIZILOR n prezent, prin tehnologii de biosintez, se obine un mare numr de aminoacizi (n general forma levo cu excepia alaninei), iar elucidarea mecanismului de biosintez a permis ridicarea randamentelor n fazele de fermentaie i optimizarea lor. entru producia la scar industrial a aminoacizilor au fost cercetate urmtoarele tipuri de microorganisme! B. cetoglutaricum, B. megaterium E. freundii, K. citrophila, E. coli, S. marcescens, M. glutamicum; dintre acestea, numai ultimele trei sunt folosite n practic. 8.1. Biotehnologia de o !ine"e a a#id$l$i l % gl$ta&i# "cidul l#glutamic este primul aminoacid obinut prin biosintez, a crui producie se ridic la peste $%%.%%% tone anual. &olosit iniial numai n industria alimentar, acidul glutamic este astzi i un valoros medicament utilizat n tratamentul unor afeciuni ale sistemului nervos central. n stare pur, acidul glutamic se prezint sub forma unei pulberi albe, cristaline, cu gust acru i fr miros, av'nd urmtoarea structur chimic! "cidul glutamic, ca toi aminoacizii, este o substan amfoter care dizolvat n ap poate forma anioni i cationi alturi de ioni ( ) i *(# eliberai simultan. 8.1.1. Metoda de obinere a acidului l - glutamic "cidul l # glutamic a fost obinut prin hidroliza glutanului, iar n anul $+,% -olff realizeaz sinteza acidului, d-, l#glutamic din acid levulinic. n prezent, pentru obinerea acidului l#glutamic se folosesc trei grupe de metode! $) extracia din surse naturale. /) sinteze chimice. 0) biosintez. n prima metod se folosesc leiile de la fabricile de zahr, deeurile de la fabricile de amidon din gr'u sau porumb i deeurile de origine animal (cazeina), care se supun hidrolizei n vederea eliberrii acidului glutamic i apoi separarea lui. (idroliza poate fi realizat prin metode chimice (n mediu acid sau bazic) i prin metode enzimatice.

1xist un alt procedeu de fabricare a acidului glutamic care folosete, ca materie prim deeurile de la fabricile de zahr. acestea prin hidroliza alcalin conduc la acid l 2glutamic. n metodele de sintez rezult totdeauna un racemic, iar separarea izomerilor ridic multe probleme tehnologice care au ca efect scumpirea produsului sintetizat. 3el mai economic procedeu de obinere a acidului l#glutamic este procedeul de biosintez care permite obinerea produsului la un pre de cost mult mai mic, comparativ cu celelalte procedee i prin urmare este deosebit de rentabil. rocedeul de biosintez folosete ca surse de carbon glucoza, zahr, amidon, hidrolizate de amidon, la care se adaug surse de azot (sub form de uree sau sruri de amoniu) i microelemente. e aceste medii se cultiv microorganismul Micrococcus glutamicus, principalul productor de acid l#glutamic, urmrindu#se foarte exact coninutul de biotin i tiamin din biomas. "cidul glutamic este unul din cei mai importani donori de grupe aminice n procesul de transaminare la nivelul celular, favoriz'nd apariia altor aminoacizi. n mecanismul de biosintez rolul biotinei este stabilit i const n orientarea metabolismului microorganismelor M. glutamicus pe calea acumulrii anormale a acidului glutamic, favoriz'nd deci creterea randamentului n faza de biosintez. lec'nd de la mecanismul de biosintez au fost propuse dou procedee de biosintez! $) procedeul ntr#un singur stadiu, n care acidul glutamic este produs direct n biomas de ctre un singur tip de microorganisme. /) procedeul n dou stadii, n care se obine nt'i acidul 4#ceto# glutaric care este apoi transformat n acid glutamic, fie cu a5utorul unui alt microorganism, fie prin metode enzimatice. 6intre aceste dou procedee, fermentaia direct este aplicat la scar industrial, iar mediul de cultur utilizat trebuie s conin surse de carbon, surse de azot, sruri minerale, factori de cretere. 7andamentele obinute n procesele de fermentaie direct variaz ntre /8 i 98: fa de coninutul de zahr, iar concentraia final a acidului l#glutamic n biomas este cuprins ntre 9 i +% g;l, funcie de compoziia mediului de cultur utilizat i parametrii procesului de biosintez. 8.1.3. Tehnologia procesului de obinere a acidului l-glutamic

rocesul tehnologic de obinere a acidului l#glutamic cuprinde urm# toarele etape! pregtirea i sterilizarea mediului, sterilizarea aerului, fermentaia, filtrarea i separarea acidului biosintetizat. 1tapele de pregtire i sterilizarea mediului de cultur, sterilizarea aerului i fermentaia se realizeaz prin tehnologii asemntoare celor prezentate n capitolele precedente, iar diferenele care apar se refer numai la condiiile de realizare a fermentaiei n cele trei trepte (inoculator, intermediar, regim). <iteza procesului de cretere a masei celulare i de acumulare a produsului n procesul de biosintez a acidului glutamic depinde de compoziia mediului de cultur, de p(, temperatur, aeraie, agitare i durata fermentaiei. =ediul nutritiv conine glucoz, extract de porumb, fosfat mono i dipotasic, sulfat de magneziu, de fier, de mangan, uree, sulfat de amoniu i clorur de zinc. =ediul de cultur trebuie s asigure sursa de carbon (glucoza) at't n faza de cretere a masei celulare, c't i n faza de elaborare a acidului l#glutamic. >ursele de azot necesare n procesul de fermentaie sunt asigurate prin adugarea de uree i sulfat de amoniu. ?tilizarea numai a sulfatului de amoniu are un efect nefavorabil i se manifest prin productivitate mic n acid. entru separarea acidului l#glutamic, din lichidul obinut de la fer# mentaie, au fost propuse urmtoarele metode! $) concentrarea soluiei i apoi cristalizarea acidului. /) separarea sub forma unor sruri i apoi eliberarea acidului i cristalizarea sa. 0) separarea cu schimbtori de ioni slab bazici, eluia cu (3l, concentrarea i cristalizarea acidului l#glutamic. 6intre aceste metode industrial se aplic concentrarea la vid urmat de cristalizare.