Disciplina de Microbiologie UMF Tg.

Mure LP7

Genul Staphylococcus
Stafilococi coagulazo-pozitivi: S. aureus Stafilococi coagulazo-negativi (SCN) cu importan clinic: S. lugdunensis, S. schleiferi, S. hyicus, S. epidermidis, S. haemolyticus, S. saprophyticus

Produs patologic portaj: secreie din cavitatea nazal anterioar, secreie faringean, probe de pe tegumente (zona axilar, perianal) plgi, otite, infecii tegumentare puroiul (S. aureus) infecii urinare urin (S. saprophyticus, S. aureus) infecii gastro-intestinale, toxiinfecii alimentare materii fecale, vomismente, alimente. meningite LCR septicemie, febr puerperal snge (S. aureus, SCN) pneumonie sput. infecii nosocomiale - S. aureus meticilino-rezistent (MRSA, SARM), SCN meticilinorezistent 1. Examenul direct al pp: macroscopic: puroi cremos, filamentos, glbui. microscopic: coloraia Gram: coci gram (+), dispui n grmezi asemntoare

ciorchinilor de strugure 2. Izolare: mediul de mbogire: mediul hiperclorurat lichid Chapman (Ch) nepretenios, poate fi cultivat pe geloz simpl sau geloz snge Incubare aerob la 37C, 18 24 ore. 3. Identificarea bacteriei: - Caractere morfotinctoriale: frotiu din cultur pur coci Gram (+), n grmezi. Caractere de cultur: col S cu pigment galben-auriu pn la citrin Caractere biochimice: catalaz + oxidaz coagulaza liber +: S. aureus; -1-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

coagulaza liber -: stafilococi coagulazo-negativi (SCN) coagulaza legat + (clumping factor - CF): S.aureus, S. lugdunesis, S. schleiferi producerea de DN-az: S. aureus, S. schleiferi, S. hyicus descompunerea manitolului pe mediul Chapman Ma(+); tulpini patogene; producere de pigment: de la auriu la portocaliu, galben citrin (S. aureus, S. lugdunensis, S. chromogenes, .a.)

producerea de hemolizine pe geloz-snge hemoliza (S. aureus, S. haemolyticus, .a.) nu prezint hemoliz (majoritatea tulpinilor SCN)

Identificare pe baza rezistenei la novobiocin a S. saprophyticus R. ag-ac: determinarea enterotoxinei produs de stafilococ

4. Determinarea patogenitii: in vitro: producerea de coagulaz, hemolizine, descompunerea manitolului in vivo: inoculare la animale de laborator (cobai, iepure)

5. Tipizarea bacteriilor: pentru identificarea sursei de infecie - prin lizotipie (determinarea sensibilitii stafilococului fa de bactreiofagi; este o sensibilitate stabil a stafilococului) - prin metode de biologie molecular 6. Antibiograma

-2-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

Genul Streptococcus
S. pyogenes S. agalactiae S. grup viridans S. pneumoniae (Pneumococ) Podus patologic: S. pyogenes: secreie faringian, secreie din leziuni tegumentare, snge pentru serologie S. agalactiae: secreie vaginal, secreia canalului cervical la mam LCR, snge, aspirat bronic la nou-nscut S. grup viridans: se gsesc n mod normal n secreia faringian; prin leziuni ale mucoasei bucale pot ptrunde n snge, cauznd endocardit subacut la pacieni cu leziuni ale endocardului valvular Pneumococ: sput, LCR, snge 1. Examen direct a. Exam. macroscopic: S. pyogenes, S. de grup viridans, enterococii - nu este necesar exam macroscopic a produsului patologic Pneumococ sput ruginie

b. Exam. microscopic: col GRAM: coci gram(+) o S. pyogenes: coci rotunzi, dispui n lanuri o S. de grup viridans: coci rotunzi sau ovalari dispui n lanuri o Pneumococii: coci lanceolai, dispui diplo cu capetele ascuite spre exterior i nconjurai de o capsul proprie. 2. Izolarea bacteriei: mediul de mbogire: PIKE Geloz-snge Bulion-snge; Bulion ser; Bulion glucozat; Geloz ser

-3-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

3. Identificare: Cmt: (vezi anterior) Caractere de cultur: o col S cu hemoliz (clar, transparent) Streptococi -hemolitici

sensibilitate fa de BACITRACIN identificare grup A

Determinarea hidrocarbonatului C din peretele bacterian prin reacii de precipitare i aglutinare stabilirea grupelor Lancefield

Testul CAMP pentru identificarea S. de grup B o col S cu hemoliz (incomplet, de culoare verde datorit reducerii Hb la MetHb)

Bil S. de grup viridans Pneumococi Rezistent Sensibil

Optochin Rezistent Sensibil

Inulin +

Esculin -

Rafinoz + -

Descompunerea Inulinei, Esculinei, Rafinozei se realizeaz pe mediulcu indicator Andrade.

4. Antibiograma Streptococul de grup A: i-a pstrat sensibilitatea fa de penicilin nu se efectueaz ABG (numai n situaii speciale, de ex. alergie la penicilin sau monitorizarea rezistenei la penicilin i alte antibiotice, fr comunicarea rezultatului) Pentru ceilali streptococi se efectueaz ABG

-4-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

5. Evidenierea Ac Streptolizina O = SLO= Ag determin formarea de Ac anti-SLO = ASLO ASLO crete n primele 7 zile pn n sptmnile 3-4 cnd se menine n platou i apoi scade titrul pn la valori normale pn la 6 luni, dac s-a intervenit cu un tratament corespunztor (vindecare); sau poate s creasc titrul Ac dac nu a fost tratat bolnavul sau sa produs o complicaie (RAA, afectare cardiac, glomerulonefrit renal acut, coreea minor etc.). Tehnica de lucru: o diluii succesive ale serului bolnavului (AC anti-SLO) i SLO (timp de reacie) + hematii o dac exist Ac acetia se leag de SLO, SLO se neutralizeaz: eritrocitele nu se lizeaz reacie (+). o dac nu exist Ac SLO lizeaz eritrocitele hemoliz reacie (-). o Se caut ultima eprubet n care exist hematii nelizate este titrul de Ac cutat. Dg (+) la titrul de 1/200 UI/ml Val < 1/200 UI/ml nu exist infecie streptococic Val > 1/200 UI/ml este infecie streptococic n evoluie.

- Ac anti-streptokinaz = ASK - Ac anti-streptodornaz = ASD

-5-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

Genul Enterococcus
enterococii au fost inclusi iniial n grupa D Lancefield a genului Streptococcus n 1984, pe baza diferenelor genetice, genul Enterococcus s-a separat din genul Streptococcus Enterococcus faecalis Enterococcus faecium

Podus patologic:
urin secreie uretral, secreie prostatic, secreia canalului cervical puroi din plgi bil materii fecale snge

1. Examen direct Exam. microscopic: se face doar pentru produsele patologice n mod normal sterile coci Gram +, ovalari, mari, dispui n lanuri scurte sau n diplo, imobili, necapsulai, nesporulai 2. Izolarea bacteriei: geloz snge ABE (agar-bil-esculin) incubare la 37C, 18 24 ore 3. Identificare: Cmt: (vezi anterior) Caractere de cultur: o colonii S, hemolitice sau nehemolitice C. biochimice: o catalaz o oxidaz o rezistent la bil o hidrolizeaz esculina n prezena a 40% bil sau sruri biliare pe mediul ABE coloraie neagr -6-

Disciplina de Microbiologie UMF Tg.Mure LP7

o pe baza fermentrii zaharurilor se pot mpri n 5 grupe, n cadrul crora se pot diferenia speciile tot pe baza fermentrii zaharurilor Esculin Enterococcus spp. E. faecium E. faecalis + + + Xiloz + Arabinoz + + -

4. Identificare antigenic latexaglutinare

5. Antibiograma sunt germeni cu rezisten crescut la antibiotice antibiograma se efectueaz obligatoriu

-7-