UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul

de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

MTCM II L1 Caracterizarea compuilor chimici prin tehnici de spectroscopie de fluorescen Interaciunea radiaiei electromagnetice cu materia Ca rezultat al absorbiei unei radiaii electromagnetice de lungime de und (potrivit) electronii sufer aa numitul fenomen de excitare, apar aa numitele tranziii electronice (S0-S1). Relaxarea sau revenirea din starea de excitare S1 la S0 poate avea loc prin mai multe ci. Cele mai importante ar fi: Conversia extern sau dezactivarea colizional (durat de via de aproximativ 10-9); Fluorescen (durat de via de aproximativ 10-8); Fosforescenta (durat de via de aproximativ 10-2 pn la 100 s); Conversie intern 10-12s

Orbitali moleculari. Tranziii electronice

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

Tipuri de tranziii electronice

1. Tranziii de tip * sunt tranziiile ce necesit cea mai mare cantitate de energie, <150 nm; 2. Tranziii de tip n * sunt caracteristice sistemelor molecularea care conin heteroatomi n molecul (N;O;S etc.) 180 nm <<370nm; 3. Tranziii de tip n * Stri energetice fundamentale Ef 4. Tranziii de tip * 5. aromatic aromatic *

Orbitali de tip * Orbitali de tip * Orbitali de tip n

Stri energetice excitate Ef

Orbitali de tip Orbitali de tip

Fenomene de luminiscen Luminiscena este fenomenul de emisie a fotonilor (Radiaie electromagnetic, REM) ca urmare a fenomenului de tranziie (revenire) dintr-o stare excitat ntr-o stare fundamental, de echilibru. Fenomenul de luminiscen Fotoluminscen(fluorescen, fosforescen, fosforescen ntrziata) Radioluminiscen Luminiscen catodic Termoluminscen Chemoluminiscen Bioluminiscen Triboluminiscen Sonoluminiscen Modul de realizare a excitrii Absorbia luminii Radiaii ionizante(raze X, ,,) Fluxuri electronice Iradiere termic Proces chimic Procese biochimice Energie mecanic : procese de frecare i procese electrostatice Ultrasunete

Bilanul energetic al fenomenului de fluorescen

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

Randamentul cuantic:

Unde k sunt constantele de vitez pentru procesele care au loc la interaciunea radiaiei electromagnetice cu materia.

Diagrama energetic a tranziiilor electronice. Factori care afecteaz fenomenul de fluorescen 1. Tipul compusului chimic- structura chimic: prezena sau absena nucleului aromatic din structura; potenialul de conjugare prezena unor grupe funcionale electron donoare OH, -NH2

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

Structurile ce prezint heterociclu nu prezint fluorescena semnificativ. Condensarea cu alte structuri aromatice creeaz o rigiditate la nivel molecular. Structura aa numit rigid reduce oportunitatea de relaxare vibraional. Piridina furan, thyofen; Quinoline isoquinoline, indole, fluorene, bifenil 2. Fotostabilitatea chimic

3. Concentraia i lungimea drumului optic

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

4. Randamentul cuantic

5. pH-ul afecteaz prin promovarea fenomenelor de disociere. Fluoresceina

Forma cationic (ph acid< 2)

Forma dianionic (ph bazic, 0,1 N NaOH)

forme anionice , pH =5

Formele neutre, pH = 3.1, nu prezint fenomene de fluorescen. Forma p-chinoid are culoare roie; forma lactonic este incolor; Forma zwiteronic are culoare galben.
5

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

6. Fenomenul de stingere sau reducere a fluorescenei - prin prezena unei concentraii mari sau a unui anume ion ex chinina prezinta fluorescen n soluie de acid sulfuric 0,05 M dar nu i n acid clorhidric 0.1. Prezena ionilor de clor reduce pana la total fenomenul de fluorescen. 7. Prezena oxigenului. Oxigenul poate conduce la fenomene de oxidare si distrugere a structurilor chimice care produc fluorescen. Mai mult, oxigenul este un agent de stingere a fluorescenei. 8. Temperatura si vscozitatea. Creterea temperaturii i reducerea vscozitii favorizeaz negativ fenomenul de fluorescen. Astfel, odat cu creterea temperaturii are loc creterea agitaiei termice i dezactivarea moleculelor excitate ca rezultat al coliziunilor intermoleculare. La reducerea temperaturii unele substane pot prezenta fenomene de fluorescen.
Aparatur

Schema bloc a unui spectrometru de fluorescen Spectrometru de luminiscen perkin elmer LS 50 B Partea practic Se prepar o soluie stoc de fluorescein n etanol cu concentraia 1000 ppm. Din aceast soluie de execut diluii. Pentru nregistrarea spectrelor de emisie i excitaie se utilizeaz o soluie de concentraie 10 ppm sau mai mic. Se utilizeaz soluii tampon pH 3, 4,5 i 12. nregistrarea spectrelor de emisie Setri aparat: Domeniu: 350670 nm; lungime de und excitaie 498 nm, vitez de scanare medie; fant monocromator excitaie i respectiv emisie 3,5. Se noteaz valoarea maximului de emisie la diferite valori ale pH-ului nregistrarea spectrelor de excitaie Lugime de und emisie .512 nm conform determinrii anterioare; domeniu: 350670 nm vitez de scanare medie; fant monocromator excitaie i respectiv emisie 3,5. Se noteaz valoarea maximului de excitaie. Determinarea concentraiei fluoresceinei n domeniul 0,1.1000 ppm prin msurarea intesitii fluorescenei (la 512 nm)fluoresceinei n etanol 95%. Se construiete o dreapt de etalonare C=f(I). Prin interpolare se poate gsi valoarea concentraiei fluoresceinei dintr-o prob cu concentraie necunoscut.
6

UNIVERSITATEA TEHNIC GHEORGHE ASACHI IAI Facultatea Inginerie chimic i protecia mediului Domeniul de licen: Inginerie Chimic Programul de studii universitare de masterat METODE DE CARACTERIZARE SI TESTARE II Aplicaiii practice 2012-2013, .L. PUITEL A.C.

Fluorescein forma acid