ncapsularea folosind micromulajele

Particulele ce pot ncapsula celule pot fi generate prin replicarea dintr-

un micromulaj. Aceast metod a fost folosit pentru fabricarea
modelelor complexe ale celulelor ncrcate cu hidrogel la scar mare
folosind echipament specializat de litografiere. Cteva studii au relatat
folosirea micromulajelor din hidrogel pentru a obine ncapsularea. O
masca foto a fost folosit pentru fabricarea unei sumedenii de
microstucturi modelate.
Expunerea la razele UV prin masca foto indus o gelatinare tanzitorie n
regiuni specifice, n timp ce zonele care nu au fost expuse au fost
splate rmnnd doar zonele destinate.
O metoda asemanatoare a fost folosita pentru fabrica structuri mai
complicate. Datorita efectului hidrofobic s-a permis asamblarea de tipul
lacat-cheie a unitatilor de microgel ce contin celule.
O alta metoda pentru incapsulare a fost folosirea de mulaje sub froma
de micromatrite.Kha-demhosseini et al. A reusit sa incapsuleze celule
folosind microsabloane din acid hialuronic metaacrilat.
Shepard et al. a creat canale modelate pentru a mentine cresterea
celulelor nervoase.McGuiga si Brzewicz au descris ca metodele de
incapsulare implica folosirea de sabloane din membrana PDMS. O
membrana PDMS este fabricata prin turnarea de prepolimer peste o
forma de silicon ce contine bari SU-8 preparate litografic. O solutie de
hidrogel continand celule a fost introdusa in gaurile membranei, iar
dupa gelatinare, particulele au fost eliberate in mediul celular printr-o
miscare de scuturare.
Metodele de micromulaje permite formarea de sfere celulare, iar in
situ, incapsularea sferelor pe aceeasi platforma. Celulele agregate tind
sa fie mult mai stabile, viabile, si functionale decat culturi cu celule
singura. Efectele sunt datorate jonctiunilor intercelulare.
Incapsularea microfluida a celulelor in microfibre
Incapsulare celulelor in microfibre are cateva avantaje fata de celelalte
metode. Microfibrele sunt usor de manevrat, in timp ce margelele
sunt manevrate mai dficil si incapsularea sub forma de coala necesita
manevrare atenta si are dificultati in implantare datorita marimii.
Diverse celule pto fi incapsulate in microfibre, iar fabricarea unei schele
3D poate fi simultana. Formele fibroase pot fi folosite pentru
constructia structurilor tisulare 3D ce faciliteaza difuzia nutrientelor si a
oxigenului.
Microfibre folosite in ingineria tisulara
Particulele pentru incapsularea celulara a fost folosita mult mai mult in
ingineria tisulara sau in regenerara functionalitatii organelor decat
fibrele pentru incapsulare celulara.Descoperiri noi in domeniul permit
incapsularea stabila a cvelulelor in microfibre.
Aplicatii in ingineria tisulara:
Sistemul nervos. Majoritatea eforturilor depuse in ingineria tisula a fost
in incercarea de a regenera si reconecta nervii centrali si periferici
deteriorati . In sistemul nervos semnalul este transmis de la celulele
presinaptice de la nivelul axonilor catre dendrite la nivelul celulelor
postsipantice. Daca un sablon pentru celulele nervoase este extinsa de-
a lungul mai multor directii, transmiterea semnalului poate fi incorrect
redirectionata.De aceea aliniare sabloanelor neurale este foarte
importanta in ingineria tisulara neurala cu scopul de a regenera tesutul
nervos si de a reda functionalitatea normala.
Pancreas.Scopul pentru incapsularea insulelor pancreatice este de a
reduce raspunsul imun al gazdei. Incapsularea celulelor folosind o
membrane artiiciala protejeaza tesutul transplantat de actiunea
sistemului imun al gazdei.Incapsularea poate fi o solutie pentru lipsa de
donator datorita faptului ca penrmite folosirea insulelor pancreatice de
la alte specii pentru fabricarea de insulina.
Ficat. Ficatul joaca un rol important in corp prin detoxifierea sangelui si
prin secretarea unor proteine plasmatice.Hepatocitele furnizeaza o
portiune enorma din functionalitatea ficatului. Prin studiul
hepatocitelor s-a incercat descoperirea unei alternative pentru
transplantul de ficat. Desi hepatocitele prezinta o rata inalta de
regenerare in vivo, viabilitatea majoritatii hepatocitelor primare dupa
izolare tinde sa fie scazuta.Mentinearea si imbunatatirea functiei
hepatocitelor in vitro pentru transplantarea clinica a acestora ramane
provocator. Cultra 3D a hepatocitelor a fost examinata c o posibila
solutie. S-au folosit metode de fabricare de fibre cu rasucire in mediu
umed bazate pe citosa-alginat pentru incapsularea hepatocitelor. Alta
metoda folosita este fabricarea de schele fibroase copmusse din fible
de hepatocyte imbibate microfluide.
Vase sanguine la scala microscopica.Boala cardiovasculara ramane
cauza numarul 1 la numarul de decese pe intreaga planeta. Pacile
aterosclerotice pot rezulta din ocluzii severe ale arterelor periferice si
coronare. De aceea, perfectionarea unui vas de sange artificial este in
domeniul de studiu. O mare provocare este de a construe vase de
sange la scala microscopica evitand cheagele de sange. Datorita faptului
ca vasele de sange sunt structure tubulare, cercetatorii au folosit
micrfibre pentru formarea de vase sanguine artificiale.
Provocarile si viitorul incapsularii celulare folosind
microsisteme
In acest material am cercetat cateva metode bazate pe microtehnologie
si potential aplicare in ingineria tisulara. Diferite tipuri celulare de la
xeno la allo sau celulele stem pot fi folosite ca surse de celule, si sunt
folosite pentru a inlocui sau a sprijinii functionarea normal a organului.
In final ele sunt implantate in corp pentru a regenera functiile
organului. Desi incapsularea la scala microscopica permite un control
prcis asupra marimii si formei celulelor, spre deosebire de bioreactorii
conventionali, producerea in masa via metodelor cost-efectivitate si
munca-eficienta ramane o mare provocare.
Noile metode de incapsulare pot proteja celulele, pot mari viabilitatea
si performanta celulara prin controlul prcis al grosimii si porozitatii
membrane de incapsulare, ceea ce mareste aria de aplicatie la un
numar mai mare de organe.
Concluzia
Celule de la alte specii sau indivizi pot induce un raspuns imun al gazdei
cand acestea sunt implantate rezultand pierderea functionalitatii si
esecul transplantului.In efortul de a preveni un raspuns imun, un numar
de metode de incapsulare celulara au fost dezvoltate in ultimi ani.
Incapsularea conventionala nu permite de obicei un control signifiat
asupra marimii si grosimii capsule, iar obtinerea unei grosimi celulare
ramane o provocare. Avansarea recenta in metodele de incapsulare
celulara pot merge mai aproape de rezolvarea acestor problem. In
pofida acestor avantaje, raman cateva impedimente pentru
aplicabilitatea clinica. Biocompatibilitatea,biodegradarea, mentenanta
implanturilor de lunga durata, controlul gorsimii si porozitatii capsulelor
pentru obtinerea unei difuzii marite, si productia in masa via cost-
eficacitate si munca-eficienta, continua sa reprezinte o provocare
majora. Progresul rapid in tehnologia folosita in fabricarea de
biomaterialelor pot rezolva aceste problem si promit sa continue
avansarea in tehnologiile de incapsulare celulara.







Ciceu Octavian
Emil Tihan