vitale ale bacteriilor nutriia, respiraia, creterea
i multiplicarea, condiiile de cultivare a bacteriilor. Metabolismul bacterian reprezint ansamblul de reacii biochimice care au loc n celula vie. - Catabolism reacii chimice de descompunere a substanelor complexe n elemente simple, nsoit de degajarea energiei (metabolism energetic) - Anabolism reacii chimice de sintez a substanelor complexe din elemente simple, necesit energie (metabolism constructiv, de sintez) Particularitile metabolismului bacterian: 1. Este un metabolism unicelular, necompartimentat (toate procesele metabolice se desfoar intr-o singur celul) 2. Este foarte flexibil, realizndu-se prin diverse ci metabolice (bacteriile se adapteaz rapid la condiiile mediului) 3. Este foarte intens (viteza reaciilor este mare) 4. Produsele intermediare din procesele catabolice pot fi utilizate direct n calitate de precursori pentru reaciile anabolice (amfibolism)
n toate reaciile metabolice intervin catalizatori proteici specifici - enzimele
Decurg n 4 etape: 1. Descompunerea extracelular a substanelor organice n uniti mai mici 2. Absorbia substanelor din mediul extern: prin mecanism pasiv sau activ (fosforilarea glucozei - glucoza -6 fosfat) 3. Pregtirea substanelor pentru oxidare prin reacii de decarboxilare 4. Oxidarea substanelor cu eliberare de energie -respiraia bacterian. La bacterii se ntlnesc 3 tipuri de oxidare: Respiraia aerob-acceptor final de H este O atmosferic Fermentaia -acceptor final este o substan organic Respiraia anaerob -acceptor final este O prezent ntr -o sare anorganic.
Bacterii strict aerobe se dezvolt numai n prezena O atmosferic - respiraia aerob (Pseudomonas aeruginosa, M.tuberculosis, Bacillus) Bacterii strict anaerobe nu se dezvolt n prezena O atmosferic - fermentaia n condiii anaerobe (Clostridium, Bacteroides, Prevotella) Bacterii facultativ anaerobe -se dezvolt n prezena sau absena O atmosferic - enterobacteriile Bacterii anaerobe aerotolerante folosesc numai fermentaia n prezena aerului atmosferic, fr participarea oxigenului (Streptococcus pyogenes) Bacterii microaerofile - n prezena CO 2 , 6-10% (Neisseria) Component chimic % din masa total Numrul aproximativ de molecule Diversitat ea (tipuri) Apa 70 % 40,000,000,000 1 ADN 1 % 1-4 1 ARN 6 % 500,000 3000 Proteine 15 % 1,000,000 3000 Nucleotide i precursori 0.4 % 12,000,000 200 Aminoacizi i precursori 0.4 % 30,000,000 50 Hidrai de carbon i precursori 3 % 250,000,000 200 Lipide 2 % 25,000,000 50 Ioni 1 % 250,000,000 20 Deeuri i intermediari 0.2 % 15,000,000 200 E.coli conine ntre 3000 i 6000 de tipuri de diferite molecule dintre care: reprezint molecule mici (cu masa molecular mic) din care fac parte i aa molecule simple ca CO 2 i H 2 O; molecule complexe care formeaz rezerva de metabolii necesari pentru utilizare n scopuri vitale (zaharurile, aminoacizii proteinogeni, acizii organici, nucleotidele, coenzimele etc); macromelecule aa ca cca 200 tipuri de polizaharide i precursori, 50 tipuri de lipide, 10 6 polipeptide; ADN, ARN etc. Ioni Funcia K + Menine echilibrul ionic, cofactor NH 4 + Sursa de baz a N mineral Ca ++ Cofactor Fe ++ Component al citocromilor i cofactor Mg ++
Cofactor, component al membranei externe a bacteriilor Gram- Mn ++ Cofactor Co ++ Component la vitaminei B 12 , cofactor Cu ++ Cofactor Mo ++ Cofactor Ni ++ Cofactor Zn ++ Cofactor SO 4 -- Sursa de baz de S anorganic PO 4 --- Sursa de baz de P anorganic Enzimele bacteriene. Caractere generale: - Substane proteice - Active n limite largi de temperaturi (0-65C) i de pH (2-9) - Specificitate de substrat i de aciune (reacioneaz cu un substrat cataliznd un tip de reacie) - Specificitatea este determinat de centrul activ al enzimei, complementar cu receptorul de pe substrat - Nu se modific n cursul reaciei Sunt clasificate n simple i complexe; Enzimele complexe sunt constituite din sectorul proteic numit apoenzim i sectorul nonproteic numit cofactor. Rolul de cofactor n componena enzimelor l joac ionii metalelor, coenzimele i grupele prostetice.
Apoenzim Apoenzim Apoenzim Coenzim Grup prostetic Ioni n funcie de condiiile care determin prezena enzimelor n celula bacterian ele se clasific n enzime constitutive i inductive.
Enzimele constitutive sunt prezente indiferent de compoziia chimic calitativ a mediului nutritiv. Enzimele inductive apar doar n prezena n mediul extern a substratului specific lor.
n corespundere cu locul (n raport cu celula) unde enzimele i realizeaz funciile ele se clasific n endoenzime i exoenzime.
Endoenzimele activeaz n interiorul celulelor.
Exoenzimele sunt sintetizate intracelular i sunt eliminate n mediul extracelular unde funcioneaz. Dup tipul reaciei catalizate oxidoreductaze: catalizeaz reaciile de oxido-reducere ( A - + B A + B - ) transferaze: catalizeaz transferul atomilor de la o molecul al alta (A B + C A + B C) hidrolaze catalizeaz reaciile de scindare a substanelor organice prin adiionarea moleculei de ap A B +H 2 O A H + B OH liaze: catalizeaz disocierea grupelor chimice n lipsa apei;
A B X Y A B+X Y ENZIME Dup tipul reaciei catalizate izomeraze: catalizeaz reaciile de izomerizare a moleculelor
ligaze: catalizeaz reaciile de biosintez. A + B A B
A B X Y A B Y X
Dup impactul asupra ma/o - Enzime metabolice - Enzime de patogenitate, responsabile de modificri patologice ale esuturilor, celulelor ma/o : hialuronidaza, colagenaza, plasmocoagulaza, hemolizina, fibrinolizina, lecitinaza, proteaze, etc. Importana practic a studierii enzimelor 1. Rol n identificarea i clasificarea bacteriilor (enzimele determin activitatea biochimic specific a bacteriilor) 2. Rol n stabilirea tratamentului maladiilor provocate de bacteriile patogene. Unele substane chimice, antibiotice interfereaz cu activitatea unor enzime, inhibnd creterea bacteriilor 3. Determinarea mecanismelor patogenezei infeciilor (unele enzime sunt responsabile de producerea leziunilor n esutul gazdei) 4. Enzimele au multiple aplicri industriale
Nutriia bacterian reprezint totalitatea proceselor prin care bacteriile i obin din mediul nconjurtor substanele necesare supravieuirii, creterii i reproducerii. Nutrieni substane, soluiile crora pot traversa MCP pentru a fi antrenate n metabolismul celulei. Se obin din alimente prin solubilizare (sruri minerale, CO 2 , O 2 ) sau dup o digestie prealabil (proteine, polizaharide, lipide). La bacterii digestia (prima etap a catabolismului) este extracelular (la bacteriile G- n spaiul periplasmic) Nutrienii servesc n calitate de material de construcie i surs de energie pentru sinteza compuilor i meninerea vieii bacteriei. Transportul transmembranar 1. Difuzie simpl (conform gradientului de concentraie, fr utilizarea energiei): O 2 , CO 2 , acizi grai, nutrieni liposolubili 2. Difuzie facilitat (conform gradientului de concentraie) permite transportul transmembranar al moleculelor mari prin intermediul proteinelor de transport specifice - permeaze. 3. Transport activ (contra gradientului de concentraie, necesit energie). Particip permeazele i alte proteine de transport specifice. Nutrienii nu suport modificri. 4. Translocaie substratul este modificat (ex.: fosforilat) n timpul transportului membranar; necesit energie Substanele care au ptruns n citoplasm sunt descompuse de ctre enzimele bacteriene conform cilor metabolice proprii fiecrei specii bacteriene (ex.: Embden-Meyerhof, Entner-Doudoroff, ciclul pentozelor, ciclul Krebs, etc). Celula obine energie i precursori care vor fi antrenai n biosintez (anabolism).
Excreia metaboliilor are loc prin implicarea mecanismelor de difuzie, cu ajutorul proteinelor de transport, n rezultatul lizei bacteriei. Necesitile nutritive ale bacteriilor - Necesiti elementare, de baz: C, H, O, N n cantiti importante, S, P, Fe, Ca, Mg, K n cantiti mici i urme de Co, Cu, Zn, Mo - Necesiti specifice. Bacteriile prototrofe sunt capabile a- i realiza integral sinteza metaboliilor eseniali. Unele bacterii auxotrofe - solicit suplimentar compui organici preformai (factori de cretere), care nu pot fi sintetizai de bacterie (ex.: AA, baze purinice, pirimidinice, vitamine). Prezena lor n mediul de cultur este indispensabil creterii acestor bacterii. Clasificarea bacteriilor dup sursa de carbon utilizat
Bacterii autotrofe utilizeaz CO 2 ca unic surs de carbon (nepatogene) Bacterii heterotrofe utilizeaz carbonul din compuii organici (glucide, acizi grai, alcooli, etc) Bacterii mixotrofe utilizeaz att substane organice ct i CO
Surse de azot - AA sau acizi nucleici - Sruri de amoniu, nitrii, azot atmosferic
Surse de substane minerale: - S - din AA, sulfuri, sulfai; - P - din fosfai; - K, Mg, Ca, Na - din sruri minerale; - Zn, Cu, Mn, Mo din ap Clasificarea bacteriilor dup sursa de energie Bacterii fototrofe utilizeaz energia solar (fotosinteza) Bacterii chemotrofe folosesc energia degajat din reaciile chimice de oxido-reducere. Ele necesit un substrat donor de hidrogen (e - i H + ) i un substrat acceptor de hidrogen. n transfer particip transportori intermediari de electroni (lanul respirator, NAD, NADH, FAD, etc.) - Bacteriile chemolitotrofe donorul de H este o substan anorganic - Bacteriile chemoorganotrofe donorul de H este o substan organic (glucoza, lipide...) Bacteriile patogene sunt chemoorganotrofe Tipul de nutriie Sursa de carbon Sursa energetic Donor de electroni Autotrofi Fotolitoautotrofi (fotolitotrofi) CO 2
Cuantele de lumin H 2 O S, H 2 S Chimiolitoautotrofi (chimiolitotrofi) CO 2
Compuii anorganici (H 2 , NH 3 , NO 2 , H 2 S) Substane anorganice Heterotrofi Fotoorganoheterotrofi Compui organici Cuantele de lumin Substane organice Chimioorganoheterotrofi Compui organici Compui organici Substane organice Tipuri de nutriie la bacterii Aceast grup trofic de procariote populeaz medii complect minerale i utilizeaz ca donor de electroni: apa (cianobacteriile); H 2 S; sulful liber (sulfobacteriile purpurii i verzi). Ecuaia: 2H 2 S + CO 2 (CH 2 O)n + H 2 O + 2S n cazul cnd H 2 S din mediu este epuizat bacteriile utilizeaz S ca donor de electroni: 3CO 2 + 2S + H 2 O 3(CH 2 O) + 2H 2 SO 4
TOATE REACIILE AU LOC N PREZENA LUMINII Din aceast categorie pot fi exemplificate bacteriile care oxideaz hidrogenul, oxidul de carbon, compuii redui ai sulfului, fierul, amoniacul, nitriii etc. Bacteriile de hidrogen oxideaz hidrogenul i utilizeaz energia format pentru asimilarea carbonului. 6H 2 + 2O 2 + CO 2 = (CH 2 O)n + 5H 2 O
Carboxidobacteriile oxideaz monoxidul de carbon i utilizeaz energia degajat pentru sinteza substanelor organice.
25CO + 12O 2 + H 2 O 24CO 2 + (CH 2 O).
Ferobacteriile (Callionella sp., Crenothrix polispora) populeaz apele care conin Fe(HCO 3 ) 2 . n rezultatul reaciilor de oxido- reducere se formeaz oxid de fier coloidal care este depus n form de teac mucilaginoas la exteriorul celulei.
2Fe(HCO 3 ) + 1/2 O 2 + H 2 O 2Fe(OH) 3 + CO 2
+Q
Bacteriile nitrificatoare sunt bacterii autotrofe care dobndesc energie din reaciile de oxidare a amoniacului pn la nitrai. 1. La prima tap se desfoar oxidarea amoniacului pn la nitrii (Nitrosomonas, Nitrococcus, Nitrosocystis): NH 3 + O 2 HNO 2 + H 2 O + 79 Kcal. 2. Cea dea doua etap a procesului de nitrificare este realizat de reprezentanii nitrat bacteriilor (Nitrobacter, Nitrocystis) care oxideaz nitriii pn la nitrai HNO 2 + O2 HNO 3 + 21,6 kcal
Bacteriile metanogene (Methanobacterium omlianskii, Methanococcus, Methanosarcina) populeaz straturile profunde ale nmolurilor din mlatini i apele de canal.
4H 2 + CO 2 CH 4 + 2H 2 O
Utilizeaz substanele de natur organic: acizii grai simpli, alcoolii (izopropanolul), n calitate de donori de H. Reacia sumar a biosintezei substanelor organice este:
2CH 3 CHOH CH 2 + CO 2 2CH 3 CO CH 3 + (CH 2 O) + H 2 O. izopropanol acetona
Reacia utilizeaz energia cuantelor de lumin
- Bacteriile care utilizeaz materia organic moart sunt saprofite (reciclarea materiei organice) - Bacteriile parazite (obligate, facultative) triesc pe contul organismelor vii, aducndu-le prejudicii - Bacteriile patogene reprezint parazite care afecteaz grav gazda, provocnd maladie sau moarte.