116

CAPITOLUL 7

Extracia n fluide supercritice (SFE)

7.1. Noiuni despre fluide supercritice

Diagrama de faze a unei substane arat dependena strii sale de agregare
funcie de temperatur i presiune. Punctul critic este definit de temperatura critic (T
C
) i
presiunea critic (p
C
), deasupra cruia o substan nu este nici gaz, nici lichid, dar
posed proprietile ambelor stri (v. Fig. 7.1). Fluidul supercritic poate fi definit din punct
de vedere practic ca un gaz avnd o temperatur deasupra temperaturii critice i care
este comprimat la acea presiune pentru care interaciile care intervin n lichide devin
semnificative. Proprietile fizice ale unui fluid supercritic se situeaz ntre cele ale unui
gaz i un lichid, putnd fi controlate prin presiune i temperatur. De regul, fluidele
supercritice sunt utilizate la densiti situate ntre 10% i 80% din densitatea lichidului
corespunztor, iar presiunile utilizate se situeaz ntre 50 i 500 atm.





















Fig. 7.1. Diagrama de faze a unui gaz.


In Tabelul 7.1 sunt prezentate principalele fluide supercritice cu parametrii
corespunztori, posibili a fi utilizai n aplicaiile analitice. Cu toate acestea, majoritatea
dintre acetia nu corespund cerinelor practice, datorit proprietilor fizice nefavorabile n
multe aplicaii, costurilor mari sau reactivitii ridicate. De exemplu, etena are o
temperatur critic sub cea a mediului ambiant, dar proprietatea sa de inflamabilitate
Fluid
Supercritic

Punct
supercritic
Temp. (C) tC
P
r
e
s
i
u
n
e

(
a
t
m
)

pC
Lichid
Solid
Gaz

117
limiteaz utilizarea acesteia n cele mai multe dintre aplicaiile analitice. Protoxidul de
azot (N
2
O) s-a dovedit a fi un bun fluid supercritic cu proprieti extractante, dar
reactivitatea sa chimic fa de cei mai muli compui chimici, precum i efectele
fiziologice nocive limiteaz mult utilizarea lui n scopuri analitice. De asemenea, fluide
supercritice precum fluoroformul (CHF
3
) au o mare capacitate de a solubiliza acei analii
avnd tendina de a forma legturi de hidrogen, dar preul acestuia foarte ridicat
constituie un mare dezavantaj n aplicaiile analitice.


Tabel 7.1. Parametrii fizici ai unor fluide supercritice.
[81]

Fluid TC(C)
PC
(atm)
C
(g/mL)
VC
(mL/mol)
CO2 31,1 72,8 0,468 94
N2O 36,4 71,5 0,452 97
SF6 45,5 37,0 0,738 198
SO2 158 78 0,525 122
CS2 279 78 0,448 170
H2O 374,1 217,6 0,322 56
CH3OH 239,4 79,9 0,272 118
C2H5OH 243,0 63,0 0,276 167
CH3OCH3 127 52,6 0,259 178
NH3 132,3 111,3 0,235 72
C2H6 32,4 48,3 0,203 140
C2H4 10,0 51,2 0,227 124
C3H8 96,8 42,0 0,220 203
n-C4H10 152,0 37,5 0,228 255
n-C5H12 196,6 41,7 0,554 304
C6H6 288,9 48,3 0,302 259
CHF3 25,9 47,7 0,516 136
CF4 -45,7 41,4 0,628 140
CClF3 28,8 38,7 0,580 180
CHClF2 96,0 49,1 0,524 165
CCl2F2 111,7 39,4 0,557 217


7.2. Principiul metodei

In principiu, extracia n fluide supercritice (SFE supercritical fluid extraction)
este o variant a extraciei solid-lichid, n care solventul de extracie este nlocuit cu un
fluid supercritic. SFE este o metod relativ nou de prelucrare a probelor solide i semi-
solide, care ulterior a devenit o tehnic cuplat on-line cu cromatografia de fluide n stare
supercritic (SFC supercritical fluid chromatography). Aceasta ofer analistului multe
avantaje n comparaie cu alte tehnici analitice de prelucrare a probelor, cum ar fi
distilarea, sau extracia cu solveni. Proprietatea cea mai important a fluidelor
supercritice n procesele de extracie este dat de capacitatea de ajustare a puterii de
solubilizare prin parametrii fizici - temperatur i presiune, astfel nct un fluid n stare
supercritic s aib posibilitatea de a extrage un grup de analii de polariti i dimensiuni
moleculare, mai mult sau mai puin restrnse. In plus, coeficienii de difuzie solut - fluid
sunt mult mai mari pentru fluide supercritice dect pentru sisteme lichid-lichid, facilitnd

118
astfel o vitez mare de extracie pentru o varietate mare de matrici complexe de analizat.


Tabel 7.2. Compararea proprietilor fizice ale CO2 supercritic (55C i 200 atm)
cu solveni lichizi la 25C.
Proprietate fizic CO2 n-Hexan CH2Cl2 CH3OH
Densitate (g/mL) 0,746 0,660 1,326 0,791
Viscozitate (m
2
s
-1
10
7
) 1,00 4,45 3,09 6,91
Coeficient de difuzie al acidului
benzoic (m
2
s
-1
10
9
)
6,00 4,0 2,9 1,8
*
sat , v
sat , v
)
) fenol ( P
) solvent ( P
(
1,410
5
4,210
2
1,2 10
3
3,610
2

* Pv,sat = presiunea de saturare a vaporilor.


Alegerea corespunztoare a fluidului supercritic poate aduce unele avantaje
concrete n cadrul unei proceduri de prelucrare a probelor complexe apriori procesului de
analiz. De exemplu, un fluid supercritic de CO
2
cu temperatura critic joas este o
alegere foarte bun pentru extracia compuilor labili termic, n condiii de temperatur
uor peste cea a mediului ambiant. In plus, CO
2
supercritic nu extrage oxigenul
molecular, limitnd astfel posibilitatea de oxidare a speciilor extrase. Spre deosebire de
solvenii organici utilizai n procedee de extracie lichid-lichid, CO
2
supercritic nu este
toxic, nlturndu-se astfel problemele legate de expunerea personalului de laborator, cu
costuri i riscuri ridicate n cazul utilizrii solvenilor clasici.
Din aceste motive, cel mai utilizat fluid supercritic n aplicaiile analitice este
bioxidul de carbon. In general, compuii foarte polari nu prezint solubilitate n CO
2

supercritic (CO
2
este o molecul nepolar), putndu-se astfel separa de cei nepolari sau
moderat polari care se extrag uor din diverse matrici complexe n CO
2
supercritic.
Totui, aceast solubilitate poate fi mrit prin adugarea n fluidul supercritic de co-
solveni, sau modificatori, n diverse proporii.
Densitatea CO
2
n condiiile de mai sus este superioar celei a n-hexanului, dar
inferioar densitilor metanolului sau clorurii de metilen. Dei valoarea densitii este un
indicator aproximativ al forelor de atracie intermoleculare, n cazul CO
2
aceasta este
apropiat de a lichidelor. In schimb, proprietile cinetice, precum viscozitatea i
coeficientul de difuzie al acidului benzoic (luat ca analit-etalon) l apropie pe CO
2

supercritic mai mult de gaze dect de lichide. Aceasta contribuie la viteze mari de
transfer de mas a solutului n fluidul supercritic, determinnd un timp scurt de extracie.
In schimb, raportul presiunilor de vapori CO
2
/fenol este de 2-3 ordine de mrime mai
mare dect n cazul celorlali solveni, avnd ca urmare posibilitatea de separare a
solutului dizolvat (n acest caz - fenolul) de CO
2
utilizat, n urma procesului de
decompresie a fluidului supercritic.
Utilizarea efectiv a extraciei cu fluide supercritice necesit o bun cunoatere a
parametrilor termodinamici i cinetici care caracterizeaz procesul de distribuie. Patru
proprieti fizice sunt cruciale n planificarea i executarea efectiv n scopuri analitice a
SFE: densitate de prag (sau minim), creia i corespunde o presiune pentru o anumit

119
temperatur utilizat, la care analiii de interes ncep s se distribuie n fluidul supercritic
(parametru menionat pentru prima dat de Giddings); intervalul de fracionare al analiilor
din prob; maximul de solubilitate al analiilor n fluid; cunoaterea unor proprieti fizice
ale analiilor.
Densitatea de prag creia i corespunde o presiune de prag este important n
special atunci cnd se urmrete o extracie selectiv a anumitor analii dintr-o prob din
care unii componeni ai probei, coextractibili n fluidul supercritic, au valori ale acestui
parametru suficient de diferite de cele ale analiilor de interes. Acest parametru nu trebuie
confundat cu valoarea presiunii la care are loc o cretere semnificativ a solubilitii
analitului n fluid. Aceasta se poate observa din exemplul dat n Fig. 7.2, unde se red
dependena solubilitii naftalinei n CO
2
supercritic, funcie de presiune. In general,
pentru CO
2
supercritic valoarea presiunii de prag este de 75 atm, iar valoarea presiunii la
care solubilitatea este maxim se situeaz dincolo de 90 atm.



















Fig. 7.2. Dependena solubilitii naftalinei (g/L) n CO2 supercritic.


Nu exist nc o explicaie a multor aspecte privind extracia analiilor ntr-un fluid
supercritic. Observaii dintr-un numr foarte mare de experimente au permis formularea
anumitor reguli de extracie (Stahl), dup cum urmeaz n urmtoarele exemple:
a) hidrocarburile i ali compui organici hidrofobi, compui avnd o polaritate
mic (ex. esteri, eteri, lactone sau epoxizi) pot fi extrai ntr-un interval de presiuni joase
(70 - 100 atm);
b) introducerea unor grupri funcionale puternic polare i hidrofile (-OH, -COOH)
face ca extracia s devin dificil. Dintre derivaii funcionali ai benzenului cei cu pn la
trei grupri hidroxil, sau o grupare carboxil i dou grupri hidroxil, pot fi extrai n CO
2

supercritic. In schimb, compuii fenolici cu trei sau mai multe grupri hidroxil alturi de cel
puin o grupare carboxil nu pot fi extrai n CO
2
supercritic.
c) compui puternic polari (aminoacizi, peptide, zaharide) nu pot fi extrai n CO
2

supercritic pn la o presiune de 400 atm.
0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 2.0
0
1
2
3
4
5
6
7
8
g
/
L
Densitate redusa, CO
2

120
d) extracia unor compui polari i hidrofili este posibil doar prin adugarea unui
modificator polar (n proporii mici, situate ntre 1 i 10%); cel mai utilizat este CH
3
OH. In
acest fel, compui polari, precum fenoli sau acizi carboxilici, pot fi extrai cu randamente
mari din matrici solide sau semi-solide. Ali modificatori organici pentru extracii n CO
2

supercritic pot fi: etanol, aceton, acetonitril, sulfur de carbon, dioxid de sulf,
hexafluorur de sulf, hexan, toluen, diclormetan, cloroform, triclorfluormetan, sau chiar
acidul formic.


7.3. Etapele unei proceduri SFE

Etapele unei proceduri SFE sunt urmtoarele:
1) ncrcarea probei ntr-un cartu de extracie, plasat ntr-o incint termostatat.
Fluidului supercritic de extracie (CO
2
cu sau fr modificator organic) este adus la
parametrii fizici optimi pentru procedura SFE.
2) Extracia propriu-zis, efectuat ntr-un cartu de extracie cu volum definit, n
care se introduce proba. In mod simplist, n timpul extraciei cu fluid supercritic au loc un
proces de transport al analiilor din matricea probei n volumul de fluid supercritic, n
acord cu solubilitatea acestora fa de fluid. Modelul pentru descrierea acestui proces se
bazeaz pe difuzia substanelor conform primei legi a lui Fick. Astfel c, viteza de
difuziune a moleculelor (dat de masa de analit per unitate de timp, -dm/dt) de-a lungul
unui strat de grosime notat cu d este dat de ecuaia:

) C C (
d
A
dt
dm
b s

= (7.1)

n care A reprezint suprafaa probei solide, este coeficientul de difuziune al analitului,
C
s
este solubilitatea analitului n fluidul supercritic, iar C
b
este concentraia analitului la
momentul t.
3) Colectarea fluidului supercritic coninnd analiii extrai, care se face ntr-un
dispozitiv numit restrictor, cu o anumit geometrie, care permite destinderea fluidului pe
un spaiu ngust. Prin destinderea fluidului supercritic acesta devine gaz, iar analiii
extrai (de natura solid sau lichid) vor fi antrenai de gaz i vor condensa pe pereii
unei trape plasat imediat dup restrictor. Analiii gazoi extrai pot fi pierdui n urma
destinderii, dac nu se aplic la ieire un adsorbant pentru reinerea lor.
4) Reluarea analiilor condensai ntr-un volum mic de solvent, ales astfel nct s
dizolve analiii de interes. Proba rezultat este analizat fie prin cromatografie de gaze,
cromatografie de fluide supercritice sau cromatografie de lichide, n funcie de natura
analiilor din prob.


7.4. Aplicaii analitice

Tehnicile de extracie n fluide supercritice se pot realiza n dou variante: off-line
i on-line cu sistemul cromatografic. Varianta off-line se efectueaz automat, dar nu este
cuplat cu cromatograful, proba fiind preluat de analist i injectat n coloana
cromatografic. Varianta off-line se poate realiza n dou moduri: dinamic (n care fluidul
supercritic trece continuu prin celula de extracie) i static (n care celula coninnd proba

121
Cilindru cu
CO2 lichid
Modificator
polar
Pomp (LC)
pentru modificator
polar
Pomp pentru
CO2 lichid
Prenclzire
Cartu de
extracie
Camer
termostatat
Prob
Restrictor
Trap
Solvent
pentru
splare
Prob
final
este presurizat cu fluid supercritic ce nu prsete incinta pn la terminarea
extraciei).
[82]
Metoda dinamic are avantajul c nu se utilizeaz nici o valv ntre celula
de extracie i modulul de colectare al analiilor, ceea ce elimin posibilitatea oricror
pierderi de analii sau contaminri, aspecte extrem de importante n cazul componenilor
n urme ce urmeaz a fi determinai. Metoda static permite un control mai riguros al
raportului CO
2
/modificator, consumul de fluid fiind redus n special n cazul probelor mari
(mai mari de 10 g). In figura urmtoare este redat diagrama unui proces bazat pe
extracie cu fluid supercritic i componentele de baz ale unui instrument SFE.



























Fig. 7.3. Componentele unui proces de prelucrare a probelor bazat pe SFE.


Presiunea fluidului supercritic este controlat prin restrictor. Cartuul de extracie
este confecionat din hotel inoxidabil, PEEK (polieter eter ceton) sau alt material ce
rezist la presiuni mari (pn la 10.000 psi). Pompele utilizate n aceste extracii au
capacitatea de a distribui fluidul supercritic n cartuul de extracie la debite constante
(cel puin 2 mL/min), la presiuni situate ntre 3.500 i 10.000 psi.
Avantajele acestei extracii fa de extracia clasic cu solveni sunt timpul de
extracie mai mic (penetrarea probei este mai eficient de ctre moleculele fluidului) i
eliminarea etapei de concentrare, care se face prin simpla destindere a fluidului
supercritic i reluarea analiilor ntr-un volum mic de solvent. Astfel, o procedur SFE
dureaz n mod curent ntre 10 i 60 minute. Extractul obinut nu necesit operaii de

122
filtrare, eventualele particule solide desprinse din prob reinndu-se n porii fritei
cartuului de extracie.
Extracia n fluide supercritice a devenit o practic curent n laboratoarele de
control analitic. Datorit avantajelor, aceast tehnic de extracie s-a impus ca o variant
acceptat n prelucrarea probelor de mediu, fiind recomandat de EPA n cazul izolrii i
concentrrii unor poluani organici, cum ar fi: hidrocarburi policiclice aromatice (PAHs),
pesticide organo-clorurate, bifenili policlorurai (PCBs). Cteva exemple importante
privind utilizarea SFE n proceduri de izolare i concentrare a unor compui din matrici
complexe sunt redate n Tabelul 7.3.


Tabel 7.3. Exemple de aplicaii analitice ale extraciei cu fluide supercritice.
Analii extrai Matricea probei
Fluid
supercritic
Timp de extracie
(min)
Probe biologice
Grsimi, pesticide Carne i preparate CO2 30 - 60
Vitamina K1 Lapte praf CO2 15
Vitamina K3 Hran animal CO2 20
Terpene, aldehide, esteri,
alcooli
Coaj de lmie CO2 20 - 30
Probe de mediu i alte probe solide
Pesticide: diuron, linuron Sol CO2/CH3OH 35 - 50
Pesticide triazinice Sol, vegetaie CH3OH 120
PAHs, PCBs Soluri, cenua,
sedimente,
particule n suspensie n
aer
CO2, N2O
CO2/CH3OH
N2O/CH3OH
C2H6
1 - 60
Dioxine Sedimente CO2/CH3OH
Antrachinon Hrtie, rumegu CO2 20
Hidrocarburi superioare Roci sedimentare CO2 15 - 30
Polimeri i rini
PAHs, PCBs, alcani Spum poliuretanic CO2
CO2/CH3OH
10 - 30
PAHs, HO-PAHs,
NO2-PAHs
XAD-2 Izobutan
CO2/CH3OH
30 - 45
Pesticide, PAHs Tenax CO2 15
Aditivi de polimeri Polieten CO2 120
Ageni tensioactivi ionici Sol, nmoluri CO2/CH3OH 30