1

Analiza proteinelor din vaccinul antigripal

Vaccinul antigripal. Vaxigrip
Vaccinurile antigripale sezoniere, inactivate, pot conine virion fragmentat sau antigene de
suprafa (hemaglutinin i neuraminidaz). Vaxigrip este o suspensie injectabil de fragmente
virionice, fiind condiionat n seringi preumplute de 0,5mL
Compoziia antigenic a vaccinului se modific n fiecare an i urmeaz recomandrile
Organizaiei Mondiale a Sntii i a Comisiei Comunitii Europene.

Tabel I.
Compoziia general a unui vaccin antigripal
Compus Cantitate
Hemaglutinin tulpin A 15g
Hemaglutinin tulpin A 15g
Hemaglutinin tulpin B 15g
Neuraminidaz
Clorur de sodiu
Dihidrogenofosfat de potasiu
-tocoferil hidrogenosuccinat
Clorur de magneziu hexahidrat
Ap pentru preparate injectabile q.s.ad 500L

Analiza proteinelor presupune parcurgerea unor etape:
1. Determinarea concentraiei proteinelor metoda Bradford
2. Analiza electroforetic n gel de poliacrilamid cu dodecilsulfat de sodiu
a. Prepararea gelului de poliacrilamid
b. Prepararea probelor
c. Aplicarea pe gel
d. Migrarea electroforetic
e. Colorarea gelurilor
f. Interpretarea rezultatelor.


Interpretarea rezultatelor
Vaccinul antigripal contine proteinele de suprafata hemaglutinina (HA) si
neuraminidaza (NA) in forma monomerica.
Hemaglutinina este proteina majoritar si se gaseste la suprafaa nveliului lipidic sub
forma de homotrimer.

2

Trimerul are o greutate molecular de 220 kDa, cu o form cilindrica, cu captul
globular format din subunitile HA1 (care sunt foarte variabile) i o tulpin format din
subunitile HA2, cu o structur relativ conservat la toate subtipurile filogenetice.
Hemaglutinina monomer este exprimat sub forma unui precursor polipeptidic de 75-
80 kDa care in organism va fi clivat proteolitic n cele dou subuniti, HA1 (50-55 kDa) i
HA2 (25 kDa), ambele glicozilate, legate printr-o punte disulfidic.
Ca urmare a utilizarii in cadrul prepararii probelor a 2-mercaptoetanolului, vom regasi
preferential pe gelul de PA subunitatile HA : HA1 si HA2.

Neuraminidaza este a doua cea mai abundent protein transmembranar i este
organizat sub forma unui homotetramer cu form de ciuperc. Tetramerul are o greutate
molecular de aprox. 240 kDa, iar monomerii aprox. 60 kDa.


Pe gelul de separarea SDS-PAGE pot fi identificate benzile corespunzatoare : HA
monomer, HA1, HA2, NA.

Pe baza modelulului, calculati GM a proteinelor identificate pe gelul obtinut de grupa dvs.