CITOLOGIE

Lucrarea prac)c 4 Membrana celular

Exclusiv pentru uz didac2c

Exclusiv pentru uz didac2c

Membrana celular.
Formaiuni specializate de la nivelul membranei.
Jonciuni intercelulare.

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Vizualizarea membranei celulare

MO: membrana celular nu este vizibil

deoarece grosimea sa, de ordinul zecilor
de nm, este sub limita de rezoluie a
acestuia.
ME: la o mrire de ordinul 103, celula apare
delimitat de o linie ntunecat subire,
continu.
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Membrana celular n MET

La mriri de peste 50.000x, membrana celular se
prezint ca o structur trilaminar, fiind alcatuit din
dou benzi ntunecate la exterior i una median, mai
clar definind ceea ce numim PLASMALEM
- substratul molecular: bistratul lipidic i proteinele asociate
acestuia.

Cele 2 benzi electronodense ale plasmalemei se

evideniaz datorit fixrii cu tetroxid de Os i a
contrastrii cu citratul de Pb.
- osmiul leag capetele polare ale fosfolipidelor, lanurile
glucidice exterioare iar citratul de Pb se leag de gruprile
fosfat.
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Bloom and Fawcett, A Textbook of Histology, Chapman and Hall, N.Y., 12th edition, 1994, Figure 1-2

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Ultrastructura membranei celulare

Plasmalem
Glicocalix
Citoschelet asociat membranei

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Glicocalix
Pe faa extern a plasmalemei exist o
reea de structuri oligo/poli-zaharidice cu
aspectul unor filamente fine, ramificate ce
alctuiesc GLICOCALIXUL sau
GLICOLEMA
- substrat molecular: lanuri de oligo/polizaharide purtate de lipide sau proteine.

Nathan Duthoit. The Cell Membrane, nfsdsystems.com, 2009(4)

Jeff Morris. The Glycocalyx: A New Focus for Heart Health. e-Journal of Age Management Medicine, 2012(3)

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Citoscheletul asociat membranei

- reea alcatuit din proteine filamentare

anastomozate ntre ele, formnd ochiuri i noduri
- ancorat att la plasmalem (proteine
transmembranare) ct i la citoscheletul celular

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

MODALITI DE STUDIU
AL MEMBRANELOR
1. STUDIUL ULTRASTRUCTURAL
a. Microscopie electronic de transmisie (TEM)
i. Pe seciuni

ii. Pe preparate de ngheare - fracturare

b. Microscopie electronic de scanning (SEM)

2013 Disciplina de medicin celular i molecular - medicina dezvoltrii umane, UMF Carol Davila Bucure)

Exclusiv pentru uz didac2c

TEHNICA DE
NGHEARE FRACTURARE

Fracturare la nivelul poriunii hidrofobe a

bistratului lipidic
Se pot studia feele interne ale celor dou
straturi lipidice ale membranei: faa
extern E i cea intern protoplasmatic P
Proteinele membranare sunt mai bogate
pe faa P, fiind ancorate de citoschelet.

2013 Disciplina de medicin celular i molecular - medicina dezvoltrii umane, UMF Carol Davila Bucure)

10

Exclusiv pentru uz didac2c

STUDII SPECIFICE
Citochimie ultrastructural

trasori electronodeni cu
i. Feritin
ii. Peroxidaz de hrean
iii. Citocrom c (hempeptizi)
iv. Aur coloidal

2013 Disciplina de medicin celular i molecular - medicina dezvoltrii umane, UMF Carol Davila Bucure)

11

Exclusiv pentru uz didac2c

STUDIUL CITOCHIMIC AL
LIPIDELOR

a. FILIPINA pentru colesterol (agregate care

dezorganizeaz membrana, vizibile la M.E.)
b. POLIMIXINA B pentru fosfolipidele anionice PS i PI
se poate evidenia distribuia asimetric a
lipidelor

2013 Disciplina de medicin celular i molecular - medicina dezvoltrii umane, UMF Carol Davila Bucure)

12

Exclusiv pentru uz didac2c

Complexe filipin-colesterol
la infundibulele stomatale ale
caveolelor
(ngheare-fracturare;
evideniate pentru prima dat
de Dr. Florea Lupu)

Din: Simionescu M, Gafencu A, Antohe F. Microsc Res Tech. 57, 269288 (2002)

2013 Disciplina de medicin celular i molecular - medicina dezvoltrii umane, UMF Carol Davila Bucure)

Exclusiv pentru uz didac2c

Formaiuni specializate
la nivelul membranei
De pol apical:
Cili
- pentru a mica particule
Microvili
- pentru a crete suprafaa
Stereocili
De pol laterobazal:
Jonciuni celulare
Labirint bazal

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Cili
- structuri membranare de pol apical, organizate pe
microtubuli
- localizare: epiteliu respirator, tromp uterin
un dublet central, nconjurat de
o teac central
9 dublete periferice conectate
prin nexin
dou brae de dinein (fiecare
dublet periferic), proteinele
motor ce asigur micarea
activ a cilului
corpul bazal, similar ca
organizare centriolilor, cu rol n
organizarea cilului

http://www.cytochemistry.net/cell-biology/cilia1.jpg

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Microvili
- structuri membranare de pol apical, organizate pe filamente de actin
- localizare (aprox. 3000/celul, cresc Sabsorbant):
- enterocite (platou striat) microvili scuri (1 m)
- nefrocite (margine n perie) microvili mai lungi (2-6 m), inegali
- sunt imobili

h6p://www.cytochemistry.net/microanatomy/epithelia/membr23.jpg

http://course1.winona.edu/sberg/IMAGES/microvl1.gif

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Stereocili
- structuri membranare de pol apical, organizate pe filamente de actin
- mai lungi dect microvilii (5-7m)
- localizare:
- urechea intern (rol n percepia senzorial),
- epididim (rol n absorbie)
- sunt imobili

h6p://www.cytochemistry.net/microanatomy/epithelia/membr23.jpg

http://course1.winona.edu/sberg/IMAGES/microvl1.gif

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Jonciuni celulare
structuri membranare de pol
latero-bazal
rol n adezivitatea celulelor n
cadrul unui esut
observabile doar la MET
Jonciuni speciale:
strnse (ocluzive)
de ataare (aderente)
de comunicare (comunicante,
gap)
2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/problem_sets/membranes/junctions.html

Exclusiv pentru uz didac2c

Zonula occludens
Jonciunea strns = zonula occludens
ME: nchiderea spaiului intercelular, prin apoziia membranelor a dou celule
adiacente
- funcii:
- barier (izoleaz coninutul lumenului fa de spaiul intracelular,
stabilete gradiente de concentraie)
- contribuie la meninerea polaritii celulelor

Fawcett DW, The Cell: An Atlas of Fine Structure, WB Saunders, Philadelphia, 1966, p. 367.

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Desmozomi
2 tipuri:
- Desmozomi n band (zonula adherens)
- Desmozomi n spot (macula adherens)
ME: condensare membranar care
prezint pe versantul citoplasmatic placa
desmozomal
Hemidesmozomi
ME: componenta celular are acelai
aspect ca desmozomii, dar localizarea
difer la polul bazal al celulei

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

http://www.histology.leeds.ac.uk/cell/assets/desmosome2.jpg

Exclusiv pentru uz didac2c

Fawcett DW, The Cell: An Atlas of Fine Structure, WB Saunders, Philadelphia, 1966, p. 371.

http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/problem_sets/membranes/13t.html

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Complexul joncional
Succesiunea de la polul apical spre cel bazal a urmtoarelor
tipuri de jonciuni:
Zonula occludens
Zonula adherens
Macula adherens (desmozom n spot)

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Jonciuni de comunicare
= jonciuni gap
2 membrane alturate strbatute de canale hidrofile = conexoni

http://www.biology.arizona.edu/cell_bio/problem_sets/membranes/13t.html

DA Goodenough and DL Paul. Gap Junctions. Cold Spring Harb Perspect Biol 2009;1:a002576

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti

Exclusiv pentru uz didac2c

Labirintul bazal
Falduri de membran bazal, bogat n Na+-K+ ATPaz,
ntre care se gsesc numeroase mitocondrii
- localizare: celule din ductele secretorii ale glandelor
salivare, glandele sudoripare, nefron

Duct striat, H&E

http://ahmedkelhy75.arabblogs.com/melsowar/archive/2011/3/1324235.html

http://www.lab.anhb.uwa.edu.au

2013 Dr. M.I. Nicolescu, Disciplina de citologie i histologie, UMF Carol Davila Bucureti