INTRODUCERE N STUDIUL MICROBIOLOGIEI

Microbiologia = ramura biologiei care studiaz

caracterele generale ale microbilor, forma, structura,
activitatea fiziologic i biologia acestora.
Microbii = organisme foarte mici, dimensiunea lor
fiind exprimat n microni.
1 micron = 1000 mm
1 milimicron = 1 000 000 000 mm (nm)
Microbii sunt:
patogeni - produc mbolnviri
nepatogeni (saprofii) nu produc boala dect
ocazional
Rol pozitiv al microbilor:
floarea microbian normal din intestin sintetizeaz
vitamine din grupul B.
Ramurile microbiologiei:
Virusologia studiaz virusurile
Bacteriologia studiaz bacteriile
Micologia studiaz ciupercile microscopice parazite
Parazitologia studiaz paraziii microscopici
Scurt istoric al microbiologiei

tiin relativ tnr a aprut n strns legtur cu

dezvoltarea tiinelelor naturii, a fizicii, chimiei.
Microbiologia a contribuit la dezvoltarea biologiei n
general i n special a geneticii.
Contribuia microbiologiei la fabricarea de vaccinuri
i antibiotice care au dus la diminuarea unor
epidemii: cium, holer, febr tifoid, etc.

nceputurile microbiologiei inventarea

microscopului - olandezul Antonie Van Leeuwenhock
ntre 1632-1732.
Microscopul mrea de 300 de ori i a observat
organisme vii denumite animalicule.
ntemeietorul microbiologiei trebuie considerat
chimistul francez Louis Pasteur 1822-1895, care a
demonstrat rolul microorganismelor n fermentaia
alcoolic i lactic.
A introdus n practic vaccinul antirabic,
anticrbunos i tehnica de sterilizare prin
pasteutizare.
Robert Koch 1843-1910, medic german, a descoperit
agenii etiologici ai tuberculozei, antraxului i
holerei.
A utilizat pentru prima data medii de cultur solide.

Ilia Mecinikov 1845-1916 printele imunologi-ei a

deminstrat existena fagocitelor.
Victor Babe 1854-1926 a scris primul tratat de
microbiologie din lume.
A contribuit la studiul turbrii, al leprei, TBC-ului,
holerei, difteriei.
A descoperit peste 50 de microbi. A anticipat prin
cercetrile sale descoperirea antibioticelor
Ioan Cantacuzino 1863-1934, creatorul colii
romneti de microbiologie i de medicin
experimental.
A fondat n 1921 Institutul Cantacuzino.
Virusologie general
Definiie: Virusologia (inframicrobiologia) tiina
care studiaz virusurile (inframicrobii) i afeciunile
provocate de acetia.
Primul virus 1982 Ivanovski virusul
mozaicului tutunului
Urmtoarele decenii: variola, rabia,
poliomielita, hepatita viral, gripa, HIV
2. Caractere generale ale virusurilor

Virusurile germeni extrem de mici, foarte puini

evoluai cu organizare rudimentar
Lipsite de enzime proprii
Multiplicarea lor este legat de parazitarea obligatorie
a celulelor vii.

Particulariti:
Particule de dimensiuni foarte mici (18-400nm),
vizibile doar cu microscopul electronic.
Posed un singur tip de acid nucleic: ADN, ARN
Sunt parazii intracelulari obligatorii
nmulirea virusurilor replicare
Sunt specifice, fiecare virus provoac o anumit
boal
Fiecare virus prezint o structur anitigenic specific
(omul i animalele infectate cu un virus produc
anticopri specifici iar imunitatea dobndit este
solid i de lung durat)
Virusurile sunt insensibile la antibioticile uzuale
Definiie

 Virion = virus = corpuscul elementar = corpuscul

viral
unitatea viral, morfofuncional, complet,
intact, infecioas, cu diametrul cuprins ntre
18-400 nm, capabil s infecteze bacterii, plante,
animale, omul
Se gsesc extracelular:
nainte de a infecta celula gazd
dup ce s-au asamblat i au fost eliberai din
celula n care s-au multiplicat
Dimensiune
Extrem de mici:
18 30 nm (Parvoviridae, Picornaviridae)
18 30 nm (Parvoviridae,
Picornaviridae)
40 80 nm
rotavirus, v. rubeolos, v. hepatitei B, v.
hepatitei C
90 200 nm
V. herpetic, v. rujeolos, v. respirator
sinciial, v. rabic
300 - 450 nm (Poxviridae)
v. Variolic
peste 900 nm lungime, diametru 80 nm
(Filoviridae)

VIRUS VEGETATIV particula viral aflat n

celul, deficitar n unele aspecte ale replicrii,lipsit
de capsid.
PROVIRUS genom viral integrat n cromozomul
celulei gazd, multiplicndu-se sincron cu acesta.
Morfologia virusurilor
sferic
v.gripal, v.herpetic, adenovirus, v. polio
cilindric, bastona
v. mozaicului tutunului, fagi
paralelipiped
v. variolic, v. vaccinia
Cartu
v. rabic
filamentos
v. Ebola
sferic cu coad
bacteriofag

GENOMUL VIRAL
este alctuit dintr-o molecul de acid nucleic viral
Fie ARN RIBOVIRUSURI

Fie ADN DEZOXIRIBOVIRUSURI

poart informaia genetic necesar replicrii
determin capacitatea infectiv a virusului.
Funciile genomului
Conine ntreaga informaie genetic necesar
replicrii
Asigur infectivitatea viral
Este capabil de autoreplicare n absena celorlali
constitueni virali
Excepie ARN viral izolat, m.c., sens negativ
(virusuri cu genom divizat orthomyxovirus)
CAPSIDA
complex de structuri proteice care mbrac acidul
nucleic viral
are arhitectur i compoziie specifice fiecrui tip
viral
Funciile capsidei virale
protejeaz genomul de aciunea factorilor externi, de
nucleazele celulare;
asigur forma virionului;
fixeaz virionii nuzi de receptorii celulari specifici;

subunitile structurale ale capsidei sunt antigene care

induc formarea i
reacioneaz cu anticorpii neutralizani.
nveliul viral
peplos, anvelop
deriv din membranele celulei gazd:
din membrana plasmatic
v. gripal,
v. paragripal,
retrovirusuri
din membrana nuclear
herpesvirus
Rolul nveliului viral
protejeaz nucleocapsida;
intervine n iniierea ciclului infectant prin
recunoaterea i ataarea v. de receptorii celulari;
intervine n procesul de asamblare a noilor particule
virale;
intervine n activiti specific virale (hemaglutinare,
hemadsorbie, hemoliz, fuziunea membranelor
celulare);
Structura inveliului extern
Structuri proprii virale:
Proteina M (matrix)

Spiculi:
Hemaglutinine
Neuraminidaze
Profactori de fuziune
Spiculii
Hemaglutininele
Prezente la virusurile invelite
Form de bastonae prismatice cu baza triunighiular
Funcii:
Recunoate receptori celulari, ataarea i penetrarea
virusului n celul
Induc rspuns imun
Rol n hemaglutinarea hematiilor
Spiculii
Neuraminidazele
Prezente la orthomyxovirus i paramyxovirus
Sunt glicoproteine ancoarte n dublu strat lipidic
Funcii:
Faciliteaz ptrunderea virusului n celula gazd prin
scindarea acidului sialic din glicoproteinele suprafeei
celulare
Intervin n procesul de ieire a noilor particule din
celul
Spiculii

Profactorul de fuziune
Poate fi situat pe nveliul viral
Prezent la herpes virus, paramyxovirus
Este glicoprotein
Funcii:
Fuzionarea nveliului viral cu membrana celular
favoriznd penetrarea virusului n celula gazd
Diseminarea infeciei
Producerea hemolizei
Alte componente asociate virionului
Enzimele virale
Sinteza de proteine-enzime codificate de virus este
restrns (nr. mic de gene din genomul v.)
Sunt proteine
Structurale - n nveliul viral
rol interrelae cu celula gazd
Nestructurale - asociate nucleocapsidei
rol
replicarea genomului viral
sinteza de proteine virale
Bacteriofagii
Compozitia chimica a virusurilor
Elementele de baz
Proteine
Glucide

Lipide
Ac. Nucleici
Virusuri simple: protein + ac. nucleic (v. polio, Pr+
ARN); bacteriofagi- Pr. + ADN
Virusuri complexe: - genom viral, ptura pr. intern,
ptura externa lipoproteic. (v. gripal)
Proteinele virale
- parte comp. a capsidei
- proteine cu rol enzimatic

5. Cultivarea i modul de multiplicare al virusurilor

Pt. stabilirea dg. unei viroze sunt necesare izolarea i
identificarea ag. patogen n prod. patologice recoltate
de la bolnav, cadavru. Cultivarea lor e posibil prin
inoculare n o gazd receptiv:
Animale de laborator
Ou embrionate
Culturi de celule
Multiplicarea virusurilor se autoreproduc folosind
mecanismele celulare din interiorul celulelor vii, de
unde iau: hrana,enzimele,energia necesar
multiplicrii.

Multiplicarea virusurilor-replicare

Etape:
Adsorbia - faza de adeziune i fixare la celula- gazd
Ptrunderea v. n celula-gazd
Faza de eclips - v. ptruns n cel. se dezintegreaz
n ac. nucleic i proteine i nu mai poate fi pus n
eviden.
Faza de multiplicare activ ac. nucleic separat i
capsida separat se multiplic pt. ca n final s se
asambleze - formnd particule virale complete.
Faza de eliberare .v. formate prsesc celula treptat
pe msura formrii sau se acumuleaz - explozia
celulei -gazd, eliberndu-se - infectnd alte celule.

AGENI FIZICI TEMPERATURA

Cldura
factori: tip de virus, prezena substane
protectoare
18-25C
sensibile: v.rujeolos, v.gripal etc.
moderat sensibile: v.Ebola, v.Marburg,
v.Epstein-Barr etc.
rezistente: v.coxsackie, v.variolic etc

 56-100C
30 minute inactivarea majoritii
virusurilor
AGENI FIZICI - TEMPERATURA
Cldura
cldura umed:
fierberea (100C)
cteva minute VHA, v.rabic
30 minute VHB
autoclavarea:
121C, 1 atm, 30 minute toate virusurile
AGENI FIZICI - TEMPERATURA
Frigul
conserv virusurile
4C (refrigerare)
cteva sptmni enterovirusuri
doi ani v.rabic n fragmente de nevrax
-20C (congelare)
insuficient pt pstrarea v.gripale, v.respirator siciial
-70C (congelare) / pstrare n azot lichid la -190C
prezervarea infectivitii pt ani de zile
AGENI FIZICI pH-ul
pH
sub 5
deterioreaz infectivitatea
peste 9

stabile la pH extrem
acid 3 enterovirusuri
alcalin 9 v.gripal B
AGENI FIZICI - RADIAIILE
IONIZANTE
aciune
direct: pe acizi nucleici i proteine virale
indirect: ionizarea mediului nconjurtor
producere de compui toxici
radiaii electromagnetice (X, gamma)
radiaii corpusculare ( i )
inactiveaz virusurile
AGENI FIZICI - ULTRASUNETELE
vibraii peste 20 kHz/sec
folosite pt:
eliberarea virusurilor din celule
obinerea unor substructuri virale
omogenizarea suspensiilor virale etc.
AGENI CHIMICI AGENI VIRULICIZI
ageni oxidani
1%, oxidri n proteinele virale
peroxid de hidrogen (H2O2(

3-6%, inactivare virus, agent antiseptizant

ozon
dezinfecia apei, f.scump, puin utilizat
permanganat de potasiu
1%
AGENI CHIMICI AGENI VIRULICIZI
aldehide
formaldehida (formol)
1-8%, atac acizii nucleici i proteinele virale
agent decontaminant
aerosoli pt decontaminarea aerului
glutaraldehida
2% tamponat cu bicarbonat de Na, la pH 7,5-8,5
sterilizarea la rece: instrumentar medical delicat
HIV, HBV
AGENI CHIMICI AGENI VIRULICIZI
halogeni/compui halogenai
clorul
tratarea apei potabile
hipoclorit de calciu / hipoclorit de sodiu
10%, deterioreaz acizii nucleici virali, dezinfectani
antivirali universali
cloramina
2-5%, 20%

AGENI CHIMICI AGENI VIRULICIZI

detergeni
sintetici
afecteaz virusuri cu peplos
dezoxicolat de Na
dodecilsulfat de Na
Tween 80
cationici
aciune virulicid + aciune spumant
sruri de amoniu cuaternar 20%
clorura de benzolcarmin pt.
tegumente mucturi de
animale 1% inactivare v.rabic
AGENI CHIMICI AGENI
CONSERVANI/STABILIZANI
glicerol
soluie tamponat 50%
conserv infectivitatea
v.polio 6 ani
v.herpetic 5 ani
v.rabic 9 luni
v.urlian 7 spt.
sruri de Mg, Na
soluii molare de MgCl,NaCl
AGENI BIOLOGICI

lizozim
n secreiile nazale, lacrimale, salivare
efect virulicid v.gripal
suc gastric
aciune virulicid prin
pH-ul acid
enzime proteolitice: tripsin, pepsin
bil
inactiveaz virusurile cu pelos
PATOGENEZA INFECIEI
VIRALE
RELAII VIRUS-CELUL GAZD
Definiii
Aderen (ataare, adeziune)
procesul prin care microorganismul se leag de
suprafaa celulei int
principalul pas n iniierea procesului infecios.
Diseminare (invazie)
procesul prin care microorganismul se rspndete de
la poarta de intrare n tot organismul
Infecie
multiplicarea unui agent infecios patogen n
interiorul organismului, chiar dac este nensoit de
manifestri clinice de boal.
Microorganism nepatogen
face parte din flora normal; nu produce mbolnvire

Microorganism patogen
microorganism care ntotdeauna cauzeaz boal.
Microorganism potenial patogen (oportunist)
microorganism capabil s cauzeze mbolnvire doar
atunci cnd este afectat sistemul de aprare al
macroorganismului
Microorganism saprofit
care triete n natur
se stabilesc rar n organism
au importan redus ca factori patogeni
Patogenitate
capacitatea unui microorganism de a cauza boal prin
virulen sau toxigenitate
Purttor asimptomatic
persoan care adpostete microorganismul fr a
prezenta semne clinice de boal care poate transmite
microorganismul celor din jur
Patogeneza infeciei
include
iniierea procesului infecios
mecanismele care duc la instalarea semnelor i
simptomelor bolii infecioase
interaciunea microorganism - gazd depinde de:
capacitatea microorganismului de a se stabili n
macroorganism i de a cauza leziuni
mecanismele de aprare ale macroorganismului