Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
VIRUSOLOGIC
1.
2.
3.
4.
5.
6.
1.Recoltarea si prelucrarea
produselor patologice
Produsele patologice variaza in functie de patogenia infectiei
virale:
in cazul afectiunilor cailor respiratorii superioare:secretii
nazale,tampon faringian,spalatura nazo-faringiana
(v.gripale,paragripale,adenovirusuri,enterovirusuri);
afectiuni ale cailor respiratorii inferioare:sputa,aspirat
bronsic ;
afectiuni eruptive:lichid vezicular,tampon
faringian,fecale,sange
(v.variolic,herpetic,enterovirusuri,rujeolic,rubeolic);
afectiuni ale sistemului nervos central:LCR,sange
,fecale,tampon faringian,saliva (enterovirusuri,v.herpetic,v.
rabic) ;
hepatite :sange,materii fecale.
3.Izolarea virala
Izolarea se face pe sisteme celulare vii(culturi
celulare,ou embrionat de gaina,animale de
laborator),urmarindu-se efectele virus-specifice
1.CULTURILE CELULARE-reprezinta substrate de
celule eucariote intretinute in vitro in conditii
adecvate de nutritie,temperatura,ph.
Culturile celulare
-in functie de tesutul sursa,culturile celulare se
impart in:
culturi primare provenite din tesuturi de animale
adulte normale ;
culturi diploide ,tesutul de origine fiind embrionul
sau fatul uman ;
linii celulare continue sau tumorale,tesutul de
origine fiind o tumora.
Inocularea
2.Oua embrionate-inocularea se face
intraamniotic si intraalantoidian .
3.Animale de laborator-inocularea se face
subcutanat(soarecii nounascuti),intracerebral(soarecii
adulti),intranazal(dihori sau
soareci),intraperitoneal .
5.Identificarea secventelor
genomice specifice
Tehnica Southern-blot compara
fragmentele AND rezultate dint-o secventa
lunga,clivata cu enzime de restrictie
(endonucleaze care scindeaza dublul
helix) ;
Tehnica Spot hybridization poate
determina si prezenta unei secvente
genomice virale specifice in situ,in probe
recoltate direct din organismul infectat ;
6.CONFIRMAREA SEROLOGICA
In cadrul diagnosticului serologic se pun in
evidenta Ac din serul de testat in prezenta Ag
viral standard ;
Reactiile Ag-Ac utilizate sunt :
a) reactia de seroneutralizare-consta in incubarea
amestecurilor dintre dilutii binare din serul de
testat si antigenul viral standard si apoi
inocularea la gazda sensibila ; reactia pozitiva
consta in absenta efectului virus specifica
asupra gazdei ;