TESTE PENTRU

DETERMINAREA
MICROBIOLOGIC A APEI
- TEHNICA IDEXX
DETERMINAREA
BACTERIILOR COLIFORME,
ESCHERICHIA COLI i
ENTEROCOCILOR

APA POTABIL
Ageni economici persoane juridice:
consum uman: coli, grdinie, aziluri, etc.;
industria alimentar brutrii, fabrici de conserve legumefructe, mixte (carne-legume, pete-legume, etc.,);
Ferme vegetale sau animale;
Persoane fizice:
gospodrii individuale;

 DOMENIU DE APLICARE
Analizarea bacteriologic a apei se aplic pentru controlul
apei potabile provenit din industria alimentar care se
utilizeaz n procesul tehnologic al produselor de origine
animal i nonanimal, precum i din gospodriile
populaiei.

 PRINCIPIUL METODEI

Analiza se bazeaz pe utilizarea metodei - metodei

clasice pe medii specifice sau
- metodei rapide cu ajutorul kit-urilor rapide.
utilizarea kit-urilor ENTEROLERT- E i COLILERT- 18, care
au
ca
principiu
de
reacie
teste
colorimetrice/fluorimetrice rapide pentru determinarea
microbiologic a calitii apei.
Nu necesita reconfirmare.

TERMENI UTILIZAI
B. coliforme i E. coli
sunt bacili Gram negativi,
oxidaz negativi,
aerobi sau facultativi aerobi,
se dezvolt n prezena srurilor biliare,
fermenteaz lactoza cu producere de gaze i acid,
cresc n 24-48 ore, la temperatura de 350-37oC.

 Bacteriile coliforme
sintetizeaz galactozidaza,
E. coli
sintetizeaz glucuronidaza,
Enterococii fecali
sunt coci Gram pozitivi,
formeaz lanuri scurte, catalaz negative.
prezena Enterococilor demonstreaz o contaminare veche
a apei.

TESTUL IDEXX
usor i rapid de utilizat;
nu se fac teste suplimentare de confirmare,
nu se prepara medii de cultur;
nu se repet testarea, rezultatele ntr-un interval scurt de
timp 18-24 ore;
metoda fiind colorimetric prin numrare de godeuri ( i
nu de colonii) nu las loc la interpretri;
nu necesit echipamente adiionale.

Probele de ap clorinate se vor recolta n recipiente sterile, de

capacitate adecvat, ce vor conine cte 0,1 ml dintr-o soluie de
tiosulfat de sodiu 1,8% (m/m) pentru fiecare 100 ml capacitate.
Pregatirea probei de analizat pentru determinarea
calitativ - Determinare Bacteriilor coliforme si E. coli
se introduce proba n recipient,
se adaug reactivul, se agit prin rsturnarea recipientului de
cteva ori, se incubeaz la 35-38oC pentru 18 -24ore,
se scoate de la incubat i se studiaz culoarea.

 Citirea Escherichia coli

este necesar utilizarea unei lampe UV pentru a pune n
eviden fluorescena.
n funcie de tenta coloristic se poate spune ce tip de
cultur bacterian exist:
galben pentru B. coliforme i
fluorescent pentru E. coli.
Acest test este de tipul 2 n 1, adic cu un singur test se
pot verifica att B. coliforme ct si E. coli.
Testul este definitiv, nu necesit reconfirmare.

 Determinarea Enterococilor
se introduce proba n recipient;
se adaug reactivul;
se agit prin rsturnarea recipientului de cteva ori, se
incubeaz la 41oC pentru 24 ore;
se scoate de la incubat i se studiaz culoarea;
citirea enterococilor necesit utilizarea unei lampe UV
pentru a pune n eviden fluorescena.

 Pregatirea probei de analizat pentru determinarea

cantitativ
cuantificarea numrului de colonii se utilizeaz o metod
foarte simpl Qunanti-Tray .
Determinare Bacteriilor coliforme si E. coli
O fiol cu pulbere Colilert -18 se pune n 100 ml prelevat, apoi
vasul se agit bine pentru dizolvarea pulberii i omogenizarea
cu prelevatul de testat.
Dup omogenizare prelevatul se pune n galerii Qunanti-Tray
i apoi se sigileaz n partea superioar cu ajutorul aparatului
IDEXX Quanti-Tray Sealer.

 se incubeaz 18 ore la 35-38oC;

dup incubare se introduc la UV i se numr godeurile
colorate n galben;
n funcie de tenta coloristic, se poate spune ce tip
de cultur microbian exist:
galben pentru coliformi i
fluorescen pentru E. coli.
Se face o coresponden pe baza unui tabel ntre
numrul de godeuri colorate i numrul de colonii.
Se pot cuantifica pn la 2000 de colonii.

 Determinare enterococilor Enterococcus

faecalis
o fiol cu pulbere Enterolert -E se pune n 100 ml
prelevat;
vasul se agit bine pentru dizolvarea pulberii i
omogenizarea cu prelevatul de testat;
dup omogenizare prelevatul se pune n galerii
Qunanti-Tray i apoi se sigileaz n partea superioar
cu ajutorul dispozitivului IDEXX Quanti-Tray Sealer.

 se incubeaz 24 ore la 41oC;

dup incubare se introduc la UV i se numr
godeurile
care prezinta fluorescen pentru
Enterococi;
se face o coresponden pe baza unui tabel ntre
numrul de godeuri cu fluorescenta i numrul de
colonii.
Se pot cuantifica pn la 2000 de colonii.

 Exprimarea rezultatelor
BULETINUL DE ANALIZ indic PREZENT/ABSENT
germeni din genul:
B. coliforme/100 ml,
E. coli /100 ml si
Enterococilor /100 ml proba de testat.
n cazul probelor pozitive rezultatele se citesc i prin
numrare i se interpreteaz conform
tabelului MPN IDEXX 51-Well Quanti-Tray .
Dac se lucreaz pe alte cantiti de prob (250ml, .a.)
acestea vor fi specificate n BA.