2.3.

Definirea unor termeni

Aplicaii ale biotehnologiei medicale
moderne

Definirea unor termeni

Marker molecular:

Fragmente specifice de ADN care pot fi

identificate in cadrul genomului i care
sunt utilizate pentru a marca poziia unei
gene sau transmiterea unui caracter
Dictionarul de biotehnologie 2007

Aplicatii ale biotehnologiilor medicale

Aplicatii in tratamentul:
- bolilor cardiovasculare
- cancer
- scleroz multipl
- HIV/AIDS, TB, malarie
- boli rare
- medicina regenerativa etc.

Vaccinuri

Tipuri de vaccinuri dup coninutul biologic:

Vaccinuri care conin microorganisme vii atenuate
Vaccinuri care conin microorganisme inactivate
Vaccinuri care conin componente microbiene purificate,
proteice sau polizaharidice conjugate proteic
Vaccinuri care conin proteine recombinate
Vaccinuri care conin anatoxine

De la
Organisme vii atenuate

La
Subunit vaccines
Vaccinuri genetice

Vaccinuri

Vaccinuri recombinante

tuberculoz

malarie

HIV

rBCG30 - primul vaccin recombinant testat clinic;

combinat cu chimioterapia
MVA85A - bazat pe modificarea genetic a virusului
Vaccinia
Hybrid-1, HyVac4 sau M72 - subunit vaccine molecule obinute prin fuziunea a dou proteine
recombinante injectate mpreun cu adjuvani
Ad35 - adenovirui recombinai
Unele pot fi administrate fr injectare
RTS,S/AS02A -

molecul obinut prin fuziunea

a dou proteine recombinante, injectat
mpreun cu adjuvantul AS02A
Utilizarea recombinazei Cre sau Tre, enzime
capabile s ndeprteze informaia genetic pe care
HIV o transfer n celulele infectate; tratamentul
presupune utilizarea celulelor stem, care sunt
extrase, tratate i apoi reinjectate n corp pentru a
rspndi enzimele.

Terapie genica

Inserarea de gene n celulele i esuturile unui individ pentru a

trata diferite afeciuni
Poate fi aplicat att celulelor somatice, ct i celor sexuate
Vectori utilizai n terapia genic:
1. Virusuri (retro-, adenovirusuri etc.)
2. Vectori nevirali:
ADN-ul denudat (gol)
oligonucleotide
complex ADN-lipozom
3. Vectori hibrizi
Tratamentul se poate face n dou feluri:
Ex vivo - celule din sngele sau mduva pacientului sunt recoltate i
cultivate n laborator, iar apoi sunt infectate cu virusul care transport
gena de interes; celulele transformate sunt apoi injectate intravenos
pacientului.
In vivo - vectorul este utilizat pentru introducerea informaiei genetice
dorite direct n celule aflate n corpul pacientului

Terapie genica

N utraceutice

Extracte din alimente cu efecte medicinale asupra sntii

umane (efecte fiziologice benefice demonstrate)

Exemple:
resveratrolul din strugurii roii
(antioxidant)
fibrele solubile
sulforaphanul din broccoli
(previne cancerul)
isoflavonoide pentru
mbuntirea sntii arteriale
flavonoide
antociani
acid alfa-linolenic

Medicina regenerativ
Acest domeniu se refer la tratamente prin care se pot nlocui pri
ale corpului adult.
Trei strategii prezint potenial n acest domeniu:
utilizarea celulelor stem (injectare)
inducerea regenerrii cu ajutorul unor substane specifice
transplantarea organelor/esuturilor obinute in vitro

Celule stem
Celulele stem reprezint un tip aparte de celule, care se regsesc n
orice organism multicelular, fiind caracterizate prin abilitatea de a se
nmuli continuu (mitoz) i de a diferenia apoi ntr-o gam larg de
celule specializate.
La mamifere exist dou mari categorii de celule stem:
embrionare, izolate din blastociti
adulte, izolate din esuturi somatice

Medicina regenerativ

Tratamente poteniale:
cancer
leziuni ale sistemului
nervos
afeciuni cardiace
hematopoiez
calviie ()
afecini ale ochilior
ortopedie etc.

Testarea genetic

Implic analizarea direct a moleculei de ADN n vederea

depistrii mutaiilor.
Dou metode:
1. Utilizarea sondelor care prezint mutaii i hibridizarea
lor cu ADN-ul de interes
2. Compararea secvenei ADN-ului de interes cu secvene
specifice indivizilor sntoi
Aplicaii:
1. Screeningul purttorilor de alele recesive
2. Confirmarea diagnosticului pentru indivizii simptomatici
3. Determinarea sexului
4. Testarea identitii
5. Screeningul nou-nscuilor
6. Testarea presimptomatic pentru estimarea riscului
dezvoltrii diferitelor afeciuni, inclusiv a neoplaziei
maligne la aduli

Testarea genetic
Teste genetice existente:
Pentru depistarea

fibrozei chistice
anemiei falciforme
bolii lui Huntington
depistarea mutaiilor asociate cu cancerul

- mamar
- ovarian
- de colon
Gena

Tipul de cancer

Disponibilitatea
testului

BRCA1,
BRCA2

Mamar, ovarian,
pancreatic

comercializat

MLH1, MSH2,
MSH6, PMS1,
PMS2

De colon, uterin, al
intestinului subire,
gastric, al tractului
urinar

comercializat

Proiectul genomului uman

The Human Genome Project (HGP) a avut ca scop identificarea secvenei ADNului uman, precum i identificarea i cartarea din punct de vedere fizic i
funcional a celor aproximativ 20.000-25.000 de gene.

Centrul Naional al Statelor Unite pentru Informaii Biotehnologice (NCBINational Center for Biotechnology Information) i organizaiile surori din Europa
i Japonia gzduiesc secvena genomului uman n baza de date GenBank,
mpreun cu secvenele genelor cunoscute, ct i ipotetice, i a unor proteine.
Organizaii precum ENSEMBL prezint date adiionale i unelte pentru
vizualizarea i cercetarea lor.
Cel mai mare efort n identificarea diferenelor dintre indivizi include detectarea
SNP-urilor i HapMap.
Proiectul internaional HapMap reprezint o organizaie al crui scop este
crearea unei hri a haplotipului genomului uman, care va descrie tiparele
comune ale variaiei genetice umane.
Secvena ADN-ului uman este stocat n baze de date disponibile gratuit pe Internet
- National Institute of Health (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)

- EMBL nucleotide database (http://www.ebi.ac.uk/)

- DNA Database of Japan (http://www.ddbj.nig.ac.jp/)
- UCSC Genome Browser (http://genome.ucsc.edu/)
- HGP in the Web
(http://cmbi.bjmu.edu.cn/cmbidata/hgp/Resource/index.htm#01)

Obinerea produselor farmaceutice

Produsele biofarmaceutice biopharmaceuticals

Ci de obinere a produselor farmaceutice utiliznd
biotehnologiile moderne:
Transformarea genetic aplicat la:
Bacterii (ex. E. coli)
Drojdii
Plante

Culturi de celule

Cultura de fibroblati de oarece

Cultura de E.coli

Diversitatea produselor farmaceutice obinute cu ajutorul

biotehnologiilor

Factori de coagulare sanguini (Factorul VIII i

Factorul IX)
Ageni trombolitici (activator tisular de plasminogen )
Hormoni (insulin, glucagon, hormon de cretere,
gonadotropine)
Factori de cretere hematopoietici (eritropoietin,
factori de stimulare ai coloniilor)
Interferoni (Interferoni-, -, -)
Produse bazate pe interleukin (Interleukina-2)
Vaccinuri (antigen de suprafa al virusului hepatitei
B)
Anticorpi monoclonali (diveri)
Alte produse (factor de necroz tumoral, enzime
terapeutice)

Diversitatea produselor farmaceutice obinute cu ajutorul

biotehnologiilor
Proteine recombinante umane
Hormonul uman de cretere (rhGH) - Humatrope (compania Lilly),
Serostim (Serono) au nlocuit hGH obinut de la cadavre
Insulina uman (rhI) Humulin (Lilly), Novolin (Novo Nordisk) - au
nlocuit insulina pentru terapia uman obinut de la bovine i porcine
Factorul VIII de coagulare Kogenate (Bayer) - l-a nlocuit pe cel
izolat din snge
Eritropoietin Epogen (Amgen)
Factorul uman recombinant de stimulare a coloniilor de granulocite
(G-CSF) filgrastim, comercializat sub denumirea Neupogen
(Amgen), pegfilgrastim comercializat sub denumirea Neulasta
Alfa-galactozidaz A Fabrazime (Genzime)
Interferon (IF) - Interferon-beta-1a comercializat sub denumirea
Avonex (Biogen Idec), Rebif (Serono), Interferon beta-1b
comercializat sub denumirea Betaseron (Schering)
Factor de cretere asemntor insulinei 1 (IGF-1)

Utilizri ale proteinelor recombinante umane

Eritropoietin
Interferon-
Interferon-
Anticorpi monoclonali
Factori de stimulare ai coloniilor
Glucocerebrozidaz

Tratamentul

Anemiei
Leucemiei
Sclerozei multiple
Artritei reumatoide
Neutropeniei
Bolii lui Gaucher
Vector Backbone: pAcGP67B

Farmacogenomica
Farmacogenomica studiul modului n
care genotipul influeneaz reacia la
tratament.
face legtura ntre farmacologie i
genetic
n viitor se preconizeaz crearea de
medicamente personalizate, specifice
genotipului
Aplicaii:
Crearea medicamentelor de comand (tailor-made), bazate pe informaia genetic
obinut de genomica funcional. Aceste medicamente vor avea un efect
terapeutic superior i efecte negative sczute asupra celulelor sntoase
adiacente.
Metode mai exacte de dozare a medicamentelor bazate pe genotipul pacientului,
mrind astfel valoarea terapiei, concomitent cu scderea posibilitii unei
supradozri.
mbuntirea crerii medicamentelor i a procesului aprobrii lor. n urma asocierii
a numeroase gene cu diferite afeciuni, acestea pot reprezenta inta pentru noile
terapii, scurtnd astfel procesul crerii medicamentelor.
Vaccinuri mbuntite pot fi produse prin intermediul ingineriei genetice, eliminnd
riscul infectrii cu patogenul, de asemenea vor fi mai ieftin de produs, mai
stabile i vor putea conine mai multe tulpini concomitent.

NTREBRI,
COMENTARII,
PROPUNERI?!