OperonulTRP

Operonul TRP este prezent la practic toate bacteriile, permind celulelor sinteza de triptofan
porninddelaacidchorismic.nceluleledeEscherichiacolioperonulTRPcuprinde:
5 gene structurale trp E, trp D, trp C, trp B, trp A, transcrise policistronic pornind de la
promotorulPtrp
1 gen reglatoare trp R, situat mult n amonte (la peste 1000 pb distan de genele
structurale), transcrismonocistronic delapromotorulPtrpR;aceastgen
codific proteina Trp R, ce are rol de represor pentru transcrierea celor 5
genestructurale
Secvenereglatoaredetipoperator:
Otrp,situatnpromotorulgenelorstructurale(Ptrp),lacareseataeazrepresorulTrpR(dup
cenprealabilacuplatomoleculdetriptofan)
OtrpR,situatnpromotorulgeneireglatoare(PtrpR),lacareseataeaztotrepresorulTrpR

VeziFig.1pentruschemastructuriioperonuluiTRP

Cele5genestructuralecodificpentru3enzime:
antranilatsintetaza: este codificat de genele trp E i trp D, i catalizeaz reaciile de
transformareaaciduluichorismicpnlaacidantranilic
indolglicerofosfat sintetaza: este codificat de gena trp C i catalizeaz reaciile urmtoare
aleciimetabolicepnlaindolglicerofosfat
triptofansintetaza: este codificat de genele trp B i trp A, i catalizeaz reacia final ce
conducelasintezadetriptofan

Proteina Trp R face parte din represorii multipli, atanduse la mai multe secvene operator i
controlndastfelexprimareaa3seturidegene:
Denumireoperator

Otrp
OtrpR
OaroH

Poziieoperator
23...3

Gencontrolat
trpE...trpA

12...+9

trpR

49...29

aroH*

*GenaaroHcodificunadinprimele3enzimeimplicaten
biosintezaaminoaciziloraromatici


trpE
Ptrp

La

Otrp

TrpR

trpC

trpB

trpA

250pb

secv.
necodif.

Transcrierepolicistronica
Transcrierepolicistronica

Traducere

Trp

TrpRactivat
detriptofan

trpD

secv.codificatoare

antranilat
antranilat
sintetaza

indol
indolglicero
gliceroP
sintetaza

Trp
Trp
sintetaza

Trp

TrpR

acid
chorismic

acid
antranilic

indol
indol
glicero
gliceroP

Traducere

Trp
Triptofan

Transcriere
monocistronica

trpR
trpR
t

PtrpR
OtrpR

Fig.1SchemastructuriioperonuluiTRP
Notaii

Ptrp

Otrp

PtrpR

OtrpR

t'

promotorulcentralaloperonuluiTRP,promotordelacaresunttranscrisecele5gene
structuraletrpE...trpA

secvenareglatoaredetipoperatorlacareseataeazproteinarepresorTrpRdupceacuplat
omoleculdetriptofan(TrpR+TRP)

promotorulgenetrpR

secvenareglatoaredetipoperatorlacareseataeazproteinarepresorTrpR(fracupla
triptofan)

terminatordetranscriereRhoindependent

terminatordetranscriereRhodependent

Pentrutipuriledeterminatorintranscrierealaprocariote,vezifiierulNoiunigeneralereglajPK
iTranscrieregenetic_BchII

ModalitidereglajgeneticlaoperonulTRP
Caurmareafaptuluicacestoperoncuprindegeneimplicatensintezaunuiaminoacid(deci,gene
eseniale oricrei celule, gene de tip housekeeping), el face parte din clasa operonilor
constitutivi, fiind exprimat cu o rat suficient de ridicat fr intervena vreunor procese de
activare.nconsecin,principalelemodalitidereglajsuntdetipnegativdescderearatei
detranscriereacelor5genestructurale.
Reglajul ratei de transcriere de la promotorul central Ptrp se realizeaz prin dou mecanisme: unul
bazatpeproteinarepresorTrpR,iarcellaltbazatpeatenuaretranscripional.

1. ReglajuloperonuluiTRPcuajutorulrepresoruluiTrpR(Fig.1)
Regiunea promotorului central Ptrp include o secven operator (Otrp) recunoscut specific de
proteina Trp R activat n prealabil prin ataarea unei molecule de triptofan (Trp R + TRP). Cnd
aceast protein n forma sa activat se ataeaz la secvena operator, este blocat iniierea
transcrieriidelapromotorulcentral.
(a)Cndncelulexistsuficienttriptofan,acestasecupleazcuproteinarepresorTrpRimpreun
seataeazlaoperatorulOtrp,blocndastfeliniiereatranscrieriicelor5genestructuraletrpE
...trpA.nacestmod,operonulTRPesterepresat.
(b) Cnd n celul nu exist suficient triptofan, proteina Trp R nu este cuplat cu triptopfan i, ca
atare,nuesteactivatpentruaseputeaataalaoperatorulOtrp.nconsecin,ARNpolimeraza
sepoateataalapromotorulcentralaloperonuluiTRPiesteiniiattranscriereacelor5gene
structurale.
EstensdereinutifaptulcoperonulTRP,camajoritateaoperonilorbacterieni,estetranscrisi
atuncicndesterepresat,darlaunnivelbazal(cuoratfoartesczut).

2. ReglajuloperonuluiTRPprinatenuaretranscripional
PrimagentranscristrpEconinenregiuneadenceputosecvennecodificatoare(cenuare
corespundentnsecvenadeaminoaciziaprimeienzimeantranilatsintetaza),denumitisecven
Leader(notatprescurtatLaLeaderatenuator);nARNtranscriptaceastsecvenareaproximativ
160 de ribonucleotide i este bogat n codoni UGG, deci n codoni pentru triptofan. Analizele de
nivelmolecularauidentificat4regiuninsecvenaLeader,regiuninotate1...4(Fig.2).

5'

ARNtranscriptalsecventeinecodificatoareageneitrpE
regiunea 1

regiunea 2

regiunea 3

regiunea 4

3'

Fig.2SchemastructuriiARNtranscriptalsecveneinecodificatoare(La)dingenatrpE
3

Totodat,datoritunorcomplementaritiintracatenare,sepotforma,alternativ,doustructurin
acdepr(hairpin)(Fig.3).

Structur n
acdepr

ARNtranscript

3'

3
ARN transcript

5'

5'

Structurn
ac
acdepr

3'

Fig.3CeledoustructurinacdeprcesepotformansecvenaLeader

Procesul de reglaj prin atenuare transcripional se bazeaz pe faptul c la procariote traducerea

informaiei genetice din ARN mesager ncepe nainte ca sinteza acestuia prin transcriere s se
termine (deci, traducerea este aproape simultan cu transcrierea). n cazul operonului TRP, ncepe
procesuldetranscrieredelapromotorulcentralPtrp iesteastfeltranscrisregiuneaLeader.ncepe
itraducereaacesteiregiunintimpceARNpolimerazacontinustranscrie.Unribozomseataeaz
la capul 5' al transcriptului Leader i ncepe traducerea informaiei genetice cu sintez de peptid.
Datorit faptului c Leaderul este bogat n codoni UGG pentru triptofan, pentru traducere sunt
trp

necesaremoleculedeARNtcuplatcutriptofan(ARNt TRP).Caurmare,vitezadetraducerei,deci,
viteza de avansare a ribozomului pe secvena Leader depinde direct de concentraia celular a
triptofanului.

(a)Cndncelulnuexistsuficienttriptofan,caurmare,concentraiadeARNtcuplatcutriptofan
trp

(ARNt TRP) este sczut. n aceast situaie, ribozomul se deplaseaz cu vitez mai sczut pe
transcriptul Leader, iar acesta formeaz o structur n acdepr ntre regiunile 2 i 3 (Fig.4). Ca
urmare,ARNpolimerazacontinustranscrietoatecele5genestructuralealeoperonuluiTRP,fiind
deciotranscrierecomplet.PeptidulrezultatdintraducereasecveneiLeader(peptidceestebogat
ntriptofan)esteapoiscindatidegradatdeprincipalaproteazbacterian(proteazaLon)inuse
regsetensecvenadeaminoaciziaprimeienzime(antranilatsintetaza).

acdepr
Structur n a
2

Fig.4Conformaiadetranscrierecomplet
Formareastructuriinacdeprntre
regiunile2i3dinLa

ribo zom 1

5'

ARNpolimeraza

4
ARNtranscript

3'

(b) Cnd n celul exist suficient triptofan, ca urmare, concentraia de ARNt cuplat cu triptofan
trp

(ARNt TRP) este crescut. n aceast situaie, ribozomul se deplaseaz mai rapid pe transcriptul
Leader, iar acesta formeaz o structur n acdepr ntre regiunile 3 i 4 (Fig.5). Ca urmare, ARN
polimerazaestempiedicatscontinuetranscriereisedesprindedepemoleculadeADN.nacest
mod,deitranscriereaafostiniiat,procesulesteopritnaintedeafitranscrisetoatecele5gene
structurale ale operonului TRP. Este deci o transcriere abortiv la care se ajunge prin reglaj de
atenuaretranscripional.

ARNtranscript
5''

ribozom

3
Structurnacdepr
cufunciedeatenuator
altranscrieriigenetice

Fig.5Conformaiadeatenuare
transcripional
Fomareastructuriinacdeprntre
regiunile3i4,cufunciedeatenuator
detranscriere

3'
ARN polimeraza

Comparnd cele dou modaliti de reglaj, experimentele au dovedit c mecanismul bazat pe

represorul Trp R simte variaiile mari ale concentraiei celulare de triptofan, n timp ce
mecanismul bazat pe atenuare transcripional simte chiar i variaiile minore ale acestei
concentraii.

nansamblu,estedereinutifaptulcmecanismeledereglajgeneticprinatenuaretranscripional
sunt foarte rspndite la operonii de biosintez a aminoacizilor (la fiecare operon, secvena
Leaderfiindconstituitdincodonipentruaminoacidulrespectiv).
5