Pesticidele

Pesticidele se aplic pe larg n agricultur ca preparate eficace mpotriv dunforilor i bolilor plantelor, ca protectori ai animalelor de parazii. n traducere din latin pestis infecie i cido ucidere. Un ir de pesticide se aplic n lupta cu roztoarelor, purttori de boli infecioase. Aceti toxici acioneaz negativ nu numai asupra duntorilor, dar produc i intoxicaii asupra oamenilor, animalelor i plantelor folositoare. Izvor de intoxicaii pot fi nu numai pesticidele, dar i apa, produsele alimentare, afectate de pesticide. n deosebi sunt foarte duntoare pentru om acele pesticide, care se pstreaz timp ndelungat n sol, ap, plante i n alte obiecte. Pesticidele sunt compui sintetici de structur diferit. Din cauza numrului imens este dificil clasificarea lor. De aceea exist cteva clasificaii. Conform clasificrii chimice pesticidele se mpart n grupe dup structura chimic: - derivaii ureei - compuii organici ai mercurului ori fosforului, halogenoderivaii. n dependen de domeniul aplicrii pesticidele se clasific : - insecticide (lupta cu insectele) - erbicide (lupta cu plantele impuriti) - funghicide pentru bolile plantelor - acaricide n lupta cu diferii duntori. n dependen de calea de ptrundere n organismul insectelor, insecticidele se mpart n cteva grupe: - de contactare - intestinale - sistemice (ptrund n organism insect prin plantele otrvite) - fumigante (prin cile respiratorii) Dup natura chimic toate pesticidele pot fi mprite n neorganice i organice. Din timpurile strvechi din grupul celor neorganice se utilizeaz i pn n prezent: - sulfatul de cupru - verdele de Paris - Cu(CH3COO)2 Cu(AsO2)2 - sulful - clorur de mercur (II) HgCl2 - arsenit de calciu. Neajunsurile pesticidelor de natur neorganic este doz nalt, lipsa aciunii dirijate, stabilitate n mediul i potenialul periculos de intoxicare a mediului i a oamenilor i animalelor i insectelor duntoare.

ncepnd cu anii 40-50 ai secolului XX au nceput s apar pesticide de natur organic, care posed o aciune mai dirijat i repede se descompun n organismul omului i n mediul nconjurtor. Dup toxicitate pesticidele se clasific n 4 grupe: I de toxicitate nalt LD50 pn la 50 mg/kg II cu aciune puternic LD50 50-200 mg/kg III toxicitate medie LD50 200-1000 mg/kg IV toxicitate mic LD50 mai mult de 1000 mg/kg Cauzele intoxicaiilor acute cu pesticide sunt: - pstrarea incorect - transportul (nerespectarea regulilor de transport) - administrarea incorect - nerespectarea termenilor de prelucrare a plantelor. Pesticudele organice sunt compui chimici de natur diferit i de aceea nu exist o metodic unic de izolare a lor din obiectele biologice. Metoda mai des aplicat este extragerea cu diferii solveni organici nepolari: pentan, hexan, heptan, eter, petrolier, CCl4 .a. Pentru fiecare tip de pesticide i selectiv se aleg solveni corespunztori, iar pentru extragerea din diferite obiecte biologice (muchi, snge, urine) se prelucreaz metodici diferite. Pentru pesticidele clororganice e posibil distilatrea cu valori de ap, unde pentru acidulare se propune acizii mineali. Eficacitatea izolrii se micoreaz n urmtoarea consecutivitoare: HCl > H2SO4 > acid fosforic. Purificarea extractelor de proteine se efectueaz cu clorura de natriu, acid ortofosforic 85 %, grsimile i ceara se precipit cu acetat la t0 minimal (700C). n scopul purificrii extractelor se aplic pe larg cromatografia n strat subire (SiO2, AL2O3). Analiza calitativ i cantitativ a pesticidelor nu totdeauna se petrece dup compuii nativi, deoarece pesticidele n organismul uman se descompun activ. Deeaceea analiza chimico-toxicologic a pesticidelor se petrece dup compuii nativi i dup metabolii.

Pesticidele fosfororganice i metodele de analiz.

Pesticidele fosfororganice se refer la compuii care se aplic pe larg n diferite domenii ale gospodriilor populare. Ele se aplic n agricultur. n gospodria silvic. n uz casnic, zootehnie cu scopul distrugerii diferitor duntori, provocri de boal a plantelor, paraziilor de animale pentru distrugerea impuritilor vegetale. Se folosesc pesticidele fosfororganice n calitate de stabilizatori n producerea uleiurilor sintetice pentru a le da stabilitate antiinflamabil i n calitate de catalizatori ai reaciior. Specificul metodelor de aplicare a pesticidelor fosfor organice reflect o posibilitate de aciune direct asupra organismului uman n cele mai dese cazuri
2

ducnd la intoxicaii cu sfrit letal. Cu privire la acesta compui n obiectele de origine biologic. Determinarea cantitativ mici de pesticide n obiectele din mediul nconjurtor (ap, sol, aer) i obiecte biologice (snge, urin, organe) este una din cele mai stringete probleme ale chimiei toxicologice. Complicaiile analizelor sunt legate cu necesitatea identificrii i determinrii cantitative a compuilor toxici la nivel de microgram (10-5g) i mai puin n prob. Probele de analizat constituie amestecuri multicomponente cu coninut schimbtor, coninnd substane asemntoare n cantiti , care depesc concentraia pesticidelor, ceea ce duce la erorizarea rezultatelor. Determinarea pesticidelor la alegerea incorect a metodei de analiz duc la transformri chimice i descompunere. Dup structura chimic pesticidele fosfororganice se mpart n cinci grupe: - derivai de acid fosforic - derivai de acid fosforic, ditiofosforic - derivai de acid pirofosforic - derivai de acid fosfonic HO P OH
OH

OH HO P OH O

OH HO P OH S

OH HO P SH S HO P OH OH

OH HO P O

OH O P OH OH

Compuii fosfororganici aplicai n calitate de pesticide se prezint ca compui cristaline de culoare galben-cafenie, uneori lichide uleioase, deseori cu miros specific neplcut. Mai grele ca ap. Majoritatea pesticidelor bine solubile n solveni organici aceton, cloroform, toluol, benzen, eter .a. i ru solubile n ap. Clorofosul i octametilul este solubil n ap.

Aciunea asupra organismului

Administrarea pe larg n practica agricol a compuilor organici cu coninut de fosfor se datorete faptului, c aceste compui posed aciune nalt acaricid i insecticid. Destul de repede se descompun n organismul uman. Deaceea ei nu se cumuleaz n organele i esuturile organismelor vii. n soluri i plante pesticidele cu coninut de fosfor se descompun timp de cteva sptmni. Deoarece, dac pesticidele cu coninut de atom de fosfor sunt foarte toxice, atunci produsele biotransformrii sunt puin toxice ori netoxice. Compuii, n care fosforul este legat cu carbonul se numete compui fosfororganici (CFO) de exemplu clorofosul. Compuii n care fosforul e legat cu carbonul prin atomul de sulf, oxigen ori alt element se numesc compui organofosforici.
3

Coeficientul mare de repartiie la majoritate compuilor organici ai fosforului ntre lipide i ap provoac ptrunderea lor prin diferite membrane biologice, prin pielea nevtmat, prin bariera hematoencefal, disfuncia sistemului fermentativ intra i extrocelular. Majoritatea pesticidelor cu coninut de fosfor repede hidrolizeaz n mediul bazic, dar sunt destul de stabil n mediul acid i neutru. Deaceea n mediile acide ori n mediul slab acid n plante unii din aceti compui se pot pstra mult timp la temperatura 30-400C timp de cteva luni. Unele pesticide cu aciune puternic, nectnd la aciunea lor acaricid i insecticid nu sunt admii n folosin n agricultur. Acestea sunt: - Tiofos (C2H5O)2P(=S) OC6H4NO2; - Mercaptofos (C2H5O)2P(=S) OCH2CH2SC2H5. Este limitat metafosul n form de 2,5 % dust i 30 % pulbere pentru prelucrarea grdinilor, viilor. - Octametil produs n form de emulsie concentrat 50 %. Reacia principal, care st la baza aciunii toxice a pesticidelor fosfororganice este fosforilarea sistemelor fermentative la oameni i animale. n deosebi pesticidele distrug acetilcolinesteraza (ACE), care joac un rol important n reglarea proceselor fiziologice ale oeganismului. ACE descompune acetilcolin n colin i acid acetic. Compuii fosfororganici au structura identic cu substratul Colinesteraza Acetilcolina (CE AC) i substituie acetilcolina, legndu-se cu oxigrupa serinei, care intr n componena ACE (acetilcolinesteraza). n rezultatul blocrii ACE de ctre pesticidele fosfororganice se petrece acumularea acetilcolinei n doze toxice i intervine intoxicarea. Aa compui ca clorofos, diclofos, cu coninut de p=O se consider ca analogi incomplei de acetilcolin, care pot reaciona cu colinesteraza dup centru esterazei. n afar de mecanismul colinergic de aciune aceti compui sunt capabili s interaqcioneze cu structurile biologice, nefiind colinoreceptori. Caracterul acestei aciuni se determin de particularitile structurii preparatului, produselor metabolismului. De exemplu metafosul i tiofosul schimb tabloul periferic al albiei sanguine. Pesticidele cu coninut de clor (diclofos, clorofos) acioneaz toxic asupra ficatului. Ftalofos cu coninut de ftalimid posed aciune embriotoxic. Aceste efecte depind nu de mecanismele anticolinesterazei, ci de particularitile structurei moleculare, care s-a format n procesul de metabolizare.

Dependena toxicitii derivailor fosfororganici de structura chimic

Una din problemele toxicologiei const din determinarea legitilor, care stau la baza dependenei activitii biologice de structura lor. Explicarea legitilor care stau la baza structur aciune, e posibil doar dup

mecanismele primare ale efectului toxic i etapele de baz a procesului toxicologic. Mecanismul primar poate fi descifrat numai la nivelul molecular, Formula de baz a pesticidelor cu coninut de fosfor poate fi n felul urmtor ca : (RO)2 p = O(S), unde R radical alchil, dar x restul acid. Pentru paraziii animalelor cu snge cald se administreaz ca pesticide eterurile dimetilice. Dup gradul de toxicitate eterului dimetilice sunt mai puin toxice, dect cele dimetilice i diazopropilice. Aceasta se explic prin prin aceea, c la trecerea de la CH3 la C3H7 se mrete efectul inductiv de-a lungul catenei laterale, ceea ce duce la micorarea nourului electronic a atomului de fosfor ce duce la fosforilarea stabil a colinesterazei hidroxilul serinei. Atomii electrofili, mresc de flor, clor, brom, oxigen, nitrogrupa, mresc proprietile acide ale moleculei, iar eterii derivailor fosfor organici provenii din acizi puternici, vor fi mai toxicim, dect eterii formai din acizii slabi. Polaritatea legturilor fosforului cu oxigenul p=O i sulful p=S este diferit. Atomul de sulf este mai puin electronic, dect oxigenul. n rezultat n compuii cu legtur (p=O) gradul pozitiv al fosforului e mai mare dect n compuii cu legtur (p=S). De aceea eterii tiolici formeaz un ferment fosforilat mai stabil dect eterii tionici i totodat sunt mai puternici inhibitori ai colinesterazei. Aciunea toxic a diferitor fosfororganici asupra sistemului nervos se apreciaz similar cu muscarinele, nicotinele i curare. Aciunea toxic a muscarinelor se explic prin spasmele musculaturii netezi a bronilor, intensinelor, musculaturii, oculare cu rezultate de mioz, secreie a gland sudoritare, tahicardie. Aciunea nicotinei este axat pe n-colinoreceptorii centrali i periferici ce duce la polarizia centrului respirator, tahicardie, dereglri auditive, vizuale, vertijuri. Aciunea curarelor se prezint sub form de paralizie periferic slbirea musculaturii limbii, muchilor faciali, membrelor superioare i posterioare. Complicaiile dup intoxicaiile este pneumonia, psihozele cu dereglri ale contiinei, halucinaii cu semne neurologice, edeme cerebrale. La bolnavii cu intoxicaii cronice se observ schimbri ale sistemului cardiovascular (dereglri cardiovasculare), hipotonie arterial, dereglri ale funciei ficatului i cilor biliare.

Absorbia, repartiia, eliminarea pesticidelor fosfororganice

n organismul uman derivaii pesticidelor fosfororganice ptrund prin diferite ci: inhalare oral, cutanat. Majoritatea pesticidelor fosfororganice sunt compui lipidosolubili i deaceea foarte repede ptrund prin membranele biologice. Organismul, care este primul n calea ptrunderii pesticidelor este inta aciunii toxice. n cazul ptrunderii pesticidelor pe cale oral concentraia maxim se stabilete n urmtoare consecutivitate: stomac > ficat > plmni > snge. La ptrundere prin plmni concentraia maxim se stabilete imediat n circulaia mare sanguin i se repartizeaz repede prin toate organele. Destul de repede ptrund compuii fosfororganici n organism prin piele i repede se
5

repartizeaz n organism datorit solubilitii n lipide i se dizolv n snge datorit proprietilor hidrofile. Datorit acestor proprieti unele pesticide fosfororganice la ptrunderea pe cale oral se absorb n snge direct din cavitatea bucal, evitnd ficatul i nimerind imediat n circuitul mare sanguin. Uor ptrund prin bariera hematoencefalic i hematoparenhimatoz, ajung la sinapsuri centrale i neutromusculare dereglnd funciile fiziologice respiratorii i sanguine. Repartizarea octametilului cu coninut de azot i sulf se prezint altfel. Aceti compui ptrund ru prin membranele biologice polarizate. n special nu trec prin bariera hematoencefalic, deci nu atac colinesteraza creierului. Majoritatea derivailor fosfororganici n organismul uman se supun transformilor metabolice. Deaceea compuii iniiali ptruni nu sunt depistai n snge i urin. n experiene pe obolani s-a constatat, c la aplicarea pesticidelor pe piele peste 24 ore n urin se determin 3 % din doza aplicat. Dup aplicarea subcutanat 11 %, iar per os 40 %.

Metabolismul pesticidelor fosfororganice n organismul uman

Biotransfoemarea derivailor fosfororganic n organismul uman se reflect prin dou direcii reciproce. Pe de o parte ei se descompun n compui mult mai simpli i mai puin toxici, care devin mai polari i hidrosolubili, dect cei iniiali se elimin din organism prin rinichi. Pe de alt parte cu detoxicarea se petrece procesul de transformare a compuilor fosfororganice n compui mai toxici. Acest proces de biotransformarea se numete sintez letal. Metoda principal de detoxicare a compuilor fosfororganici n organismele vii i vegetale este hidroliz sunt ionizate antiholinesteraz. Acest proces se produce prin participarea fermenilor, numii prin termen comun hidrolizaFermentul principal, care i-a parte n hidroliz derivailor fosfororganice se hidrolizeaz pe locul legturilor eterice ori anhidridice. Hidroliza n prezena atomului de fosfor se petrece dup: - legtura fosfor eteric - legtura fosfotioeteric - legtura fosfoamid - legtura galoidanhidid
P O P O Cl N P O P O S O

Esterii acidului tiofosforic se hidrolizeaz mai ncet dect eterii acidului fosforic.
CH3O CH3O P C2H5O O NO2 CH3O
NO2 C2H5OO P CO 5O 2H

S C2H5O S Metafos (I) Fosfacol (II)

CH3O

P O

NO2

NO2

HOC6H4NO2

HOC6H4NO2

Pentru compuii fosfororganici ce conin grupa carboxilamid (fosfamid) calea de detoxicaie este hidroliza carboxilamidaz
CH3O CH3O P S S CH2 - C - NH - CH3 O CH3O CH3O P S S CH2 - CH2 - C - OH O

CH3NH2

Carbofosul se supune hidrolizei carboxiesteraze.

CH3O CH3O P S S CHCOOC2H5 CH2COOC2H5 CH3O CH3O P S S CHCOOC2H5 CH2COOC2H5

Biotransformarea pesticidelor fosfororganice n mare msur se petrece i prin reaciile de oxidare. n cadrul acestor procese joac rol sistemele fermentative oxidazele, care se gsesc n fraciile microsomale celulare. Reaciile de oxidare a compuilor fosfororganici n organism se petrec dup mecanismul desulfurrii, N-dealchilare, o-dealchilare, dearilare, oxidarea tiofosfailor i grupelor laterale. Pentru eterii tionici i ditiofosforici, scindarea sulfului depinde de atomul de fosfor i nlocuirea lui cu oxigenul are mare importan. Metafosul, fosfamida, carbofosul, metilnitrofosul se supune desulfiraiei oxidative. Datorit electrofilitii oxigenului n comparaie cu sulful aceast, reacie duce la formarea compuilor mai mult toxici.
CH3O CH3O P S O NO2 CH3O CH3O P O O NO2

Octametilul i fosfamida se supune N-dezalchilrii oxidative. Reacia o-dezalchilare, adic scindarea alchilului legat cu fosfor prin oxigen duce de obicei la formarea compuilor cu activitate i toxicitate anticolinesterazic redus dect compuii iniiali. Aceast reacie este studiat pe cloramfenifos.
C2H5O C2H5O P O - C - C6H3Cl2 O CHCl HO P O - C - C6H3Cl2 O CHCl

CH3 - C = O H

S-a constatat, c reducere legturilor radicalului aril cu fosforul se poate cataliza ca oxidazele amestecat. Aceste reacii au loc n organismul mamifecare

i pentru derivaii o-aril acizi ai fosforului este una din reaciile de baz de detoxicare. Sub aciunea oxidazei poate avea loc oxidarea radicalilor n lanul lateral al compuilor fosfororganici.
CH3O CH3O P S O NO2 CH3O CH3O P OC6H3(NO2)(COOH) O

Tratamentul cu antidote n intoxicaiile cu pesticide fosfororganice

Administrarea m-colinoblocatorilor atropina i derivaii si: tropacina, scopolamina, aprofena. Aceste preparate interacioneaz cu sistemul mcolinoreactive sinaptice, le blocheaz i blocheaz cumularea surplusului de acetilcolin. Astfel se micoreaz aciunea muscarin a compuilor fosfororganici. Alt grup de antidote sunt reactivatorii colinesterazei. Ei reacioneaz cu resturile compuilor fosfororganici, legai cu colinesteraz, elibernd fermenii i reducnd activitatea lor fiziologic. Aceste compui cu coninutul de grupa oxim-pralidoxim (toxidim, diproxim).

CH =N - OH CH3 pralidoxim

+ AchE - serin - O P
O

OR OR

Acetilcolinesteraza fosforilat

OR CH = N - O CH3 P O OR

AchE - serin - OH Acetilcolinesteraza reactivat

Reactivatorii reduc numai o parte acetilcolinsterazei i acioneaz ncet. De aceea se administreaz ncet. De aceea se administreaz n combinaie i colinoblocatori i reactivatori ai colinesterazei.

Proba colinesterazei
Proprietatea compuilor fosfororganici de a micora activitatea acetilcolinesterazei se folosete n analiza chimico-toxicologic pentru determinarea particularitilor compuilor fosfororganici. Sub aciunea colinesterazei n procesule biochimice normale acetilcoline se descompune n colin i acid acetic. Aceste schimbri ale pH pot fi fixate cu
8

indicatorul albastru de bromtimol. La trecerea pH-ului de la neutru la acid, culoarea albastr trece n galben. La amestecul soluiilor albastru de bromtimol, acetilcolinesteraz (plasma sanguin) se adaug extract organic din biomaterial i peste 10 minute 1 pic soluie acetilcolin.
O (H3C)3 N+ - CH2 - CH2 - O - C CH3 (H3C)3N+ - CH2 - CH2 - OH

+ CH3COOH

Dac extractul organic conine compui fosfororganici, atunciacetilcolinesteraz i culoarea indicatorului nu se schimb.

Lucrul practic al studenilor n cadrul lucrrii de laborator Studenii ndeplinesc urmtoarele indicaii: Problema 1. Analiza chimico-toxicologic asupra carbarilului. Reacia microcristralic : o pictur soluie etanolic de carbaril se depune pe o lamel de sticl, se evapor la temperatura camerei. La microscop se privesc cristale conice ncruciate. Sensibilitatea reaciei 5 mcg. 2. Reacia cu acidul picric: la reziduul dup evaporarea etanolului se adaug o pictur acid picric 1 %. Peste 10-15 min. se formeaz cristale aciforme concrescute sub form de mnunchi de culoare galben nchis. Sensibilitatea reaciei 5 mcg. 3. Reacia de culoare cu nitrit de sodiu: Pe o lamela de sticl 2-3 picturi de extras alcoolic se evapor, iar pe reziduu se aplic 1-2 picturi soluie proaspt preparat de NaNO2 i H2SO4 conc. Se formeaz culoare verde.
1.

Problema 2. Reacia de identificare a -naftolului, produsului de descompunere a carbarilului. 1. Reacia cu cuprobromura de sodiu. La 1 ml soluie alcoolic cu coninut -naftol, se adaug 1 ml soluie proaspt pregtit de cuprobromur de sodiu (4 g NaBr, 0,1 g CuCl2 n 10 ml ap). La nclzirea pe baia de ap la temperatura de 400C apare culoare roie ori albastruviolet. La adugarea amestecului reactiv 1 ml cloroform ori toluol i agitare energic stratul organic se coloreaz n albastru-violet, iar stratul apos se decoloreaz. Fenilul i naftolul n acaleai condiii formeaz culoare galben. 2. Reacia cu nitrit de sodiu n acid sulfuric. La 1 ml soluie de cercetat se adaug 9-10 picturi soluie nitrit de sodiu 0,5 %. Apare culoarea galben care dup alcalinizare cu soluie NaOH 20 % trece n oranj. 3. Reacia cu amidopirin. La 1 ml soluie de cercetat se adaug 2 ml ap, 1 pic soluie tampon amoniacal, amidopirin i 5-6 picturi soluie ferocianur de potasiu 30 %. Apare culoare oranj ori roie-oranj. La adugarea 1 ml cloroform i agitarea amestecului se coloreaz cloroformul, iar stratul apos se decoloreaz. Sensibilitatea reaciei 0,3 mcg/ml.
9

Fenolul formeaz aceeai culoare, la aciune cu -naftolul nu apare culoare. 4. Reacia cu clorur feric (III) La o parte din soluia de cercetat se adaug 1-2 picturi soluie FeCl 3 (III). Apare culoare roz-violet. Sensibilitatea reaciei 10 mcg n prob. Fernolul formeaz culoare albastr violet, -naftolul verde. Problema 3. Reacia de identificare a clorofosului. 1. Reacia Fudjivara. La 1 ml soluie de analizat se adaug 1 ml piridin i 1 ml sol NaOH 30 %. Amestecul se nclzete 5 minute pe baia de ap. La prezena cloroformului apare culoare roie ori roz. Sensibilitatea reaciei 10 mcg n prob. 2. Reacia cu rezorcin. La 1 ml soluie de analizat se adaug 2 picturi soluie rezorcin 1 % n 20 % soluie carbonat de sodiu ori soluie hidroxid de sodiu 1 %. Peste 15-20 minute se observa fluorescen galben-verzuie, care peste 1-2 ore atinge maximum, pH=9,0-11,0. Sensibilitatea 40 mcg n prob. 3. Reacia de formare a izonitrilului. La 0,01-0,03 g clorofos ntr-un ml alcool se adaug 2 ml soluie alcoolic de hidroxid de sodiu i 1 pictur anilin. La nclzirea amestecului se simte miros de izonitril. 4. Reacia cu orto-tolidin. La 0,5 ml soluie apoas ori alcoolic de clorofos se adaug 1 ml soluie o-tolidin 0,5 % i 1 ml amestec soluie peroxid de hidrogen 3 % i hidroxid de sodiu 0,5 %. La pezena clorofosului apare culoarea galben ori oranj. 5. Reacia cu aceton. O parte din extrasul cloroformic se evapor la temperatura camerei i reziduul se dizolv n 0,5+1 ml alcool. Apoi se adaug 1 ml aceton i 0,5 ml soluie alcoolic hidroxid de sodiu 0,5 M. Peste 10-15 minute apare culoare roz, care trece n mlinie apoi n oranj. 6. Reacia cu 2,4-dinitrofenilhidrazin. n eprubet se ntroduc 1-10 pic soluie de analizat i 2 pic soluie hidroxid de sodiu 1,2 M. Se agit, Peste 10-20 minute se adaug 1 pictur soluie 2,4-dinitrofenilhidrazin 0,1 % n acid sulfuric 4 M i amestecul se nclzete pe baia de ap timp de 30 min. Apoi se rcete, se adaug 2 pic soluie hidroxid de sodiu 4 M i 0,5 ml alcool etilic. La prezena clorofosului n prob apare culoarea albastr ori albastru violet. Problema 4. Reacia de identificare 2,4-dinitro-orto-crezolului. La reziduu se adaug 2 ml H2SO4 20 % i zinc metalic. Peste 15 minute soluia se filtreaz. Filtratul se prelucreaz cu 1-2 picturi de bicromat de potasiu 3 5 (ori peroxid de hidrogen, cloramin 4 %). Apare culoarea roie n prezena DNOC-lui, analogic cu ali dinitrofenoli. 2. Reziduul se prelucreaz cu 2 ml soluie HCl 10 %, se adaug pulbere de zinc, se nclzete 5 minute pe baia de ap, apoi se rcete i se filtreaz. Filtratul se prelucreaz cu 0,1 ml soluie nitrit de sodiu 0,1 %. Peste 5 minute se nltur nitritul de sodiu prin adugarea 1 ml uree 10 % i peste 5 minute 1 ml N--naftiletilendiamin. Apare culoare violet.
1.

Cromatografia pe strat subire a DNOC-ului Sistema de solveni: cloroform aceton (9 : 1) Developarea cu soluie hidroxid de potasiu 1 % i etanol n raport (1 : 1 ) Determinarea maximelor de absorbie n UV: n sol HCl 0,1 M - 288 nm n sol NaOH 0,1 M - 265, 370, 409 nm Conclizie: S-a studiat analiza chimico-toxicologic a pesticidelor cu coninut de clor i a derivailor acidului carbaminic.

10

Lucrul practic al studenilor n cadrul lucrrii de laborator Problema 1. Identificarea preventiv a pesticidelor FO prin metoda CSS. Identificarea preventiv a pesticidelor FO n lichidele biologice i materialul biologic prin metoda CSS se efectueaz dup extragerea lor din materialul biologic. Pentru acest lucru se folosesc extrasele organice. Identificarea preventiv a pesticidelor FO prin metoda CSS se efectueaz le dou plci N1 i N2. Cercetrile pe placa N1 se efectueaz cu scopul identificrii prezenei fosforului organic n extrasul dat. Pe plac se depune 1/25 parte din extractul cloroformic cercetat ntr-un punct i n altul martorii (ftalofos, fosfamid ori alii). Sistema de solveni hexan_ aceton 2:1. Identificarea pe plac dip separarea cromatografic se petrece cu reactivul Stenerson, care const din reactivul N1 i N2. Reactivul N1: La 95 ml sol molibdat de amoniu 1 % n sol HCl 0,1 M se adaug 5 ml HClO4 57 %. Reactivul N2 const din sol A i sol B. Soluia A 2 g verde de briliant se dizolv n 350 ml ap. Soluia B 4 g molibdat de amoniu la nclzire se dizolv n 45 ml H2O ntr-o colb cotat cu volumul de 100 ml. La rcirea soluiei se adaug 50 ml sol HCl 10 M. Volumul se aduce la cot. Soluiile A i B se amestec i dup 3 ore se filtreaz. Developarea plcilor: - Placa, dup uscarea solventului se developeaz cu reactivul N1. - Placa umed se acoper cu o sticl curat i se depune n dulapul de uscare pe o or la temperatura de 2000C. - Dup rcire placa se expune n lumina UV timp de 30 min, apoi plac se prelucreaz cu reactivul N2. n prezena pesticidelor FO pe fonul galben se deosebesc spoturi de culoare verde. Problema N2. Metoda general de identificare a pesticidelor FO prin metoda CSS. Pentru identificarea n grup a pesticidelor FO se efectueaz cromatografierea pe o alt plac cu strat de silicagel. n punctul 1 se depune un spot (un reprezentant din compuii fosfororganici), iar n punctul 2-6-cte 1/25 din extractul de cercetat. Cromatografierea se efectueaz n sistema hexan-aceton 2:1. Developarea plcilor dup uscare - Regiunea p.1 i 2, acoperind cealalt parte a plcii se prelucreaz cu albastru de bromfenol, iar peste 5 minute cu soluie acid acetic 5 %. - Regiunea p.3. Se prelucreaz cu cupru bromur de sodiu (picurnd) - Regiunea p.4. Se prelucreaz cu r-v Buchardat (picurnd) - Regiunea p.5. Se prelucreaz cu soluie rezorcin 1 % n soluie hidroxid de sodiu 10 %. - Regiunea p.6. Se prelucreaz cu soluie alcoolic hidroxid de sodiu 20 %, dup care plac se pune n etuva de uscare la to 110oC timp de 20 min. Dup developare se conchide prezena unei grupe anumite de pesticide organice. Prepararea reactivului bromfenol: Se amestec soluie apoas nitrat de argint 2 % i soluie bromfenol albastru n aceton 1 : 1. Problema N3. Identificarea clorofosului i metaboliilor prin metoda CSS. Pe plac cu strat de silicagel se depune n p.1 clorofos, iar n p.2,3,4 extractul cloroformic de cercetat. Sistema pentru cromatografiere : Cloroform eter ulei de vazelin 17:2:1. - Regiunea p.1 i p.2 cu sol rezorcin 1 %n soluie hidroxid de sodiu 10 %.
11

Regiunea p.3 cu sol fenilhidrazin 1 % n HCl 12 %. Regiunea p.4 cu amestec (1:1) de soluie orto-tolidin ori benzidin n aceton, sol alcoolic 0,5 % NaOH 2 % i sol peroxid de hidrogen 10 %. Peste 5-20 minute se observ formarea spoturilor colorate. Se msoar distana parcurs de solventul organic i substana cercetat i se calculeaz Rf. Rezultatele se includ n tabel: Rezorcin Reactivii Fenilhidrazin n HCl Orto-tolidin NaOH, H2On
Rf

Pesticidele i metaboliii

I. II.

Control final Aprecierea rezultatelor obinute n efectuarea lucrului practic. Controlul proceselor verbale.

Bibliografie 1. .. , : , 1989.c.393-410 2. .. . -M:M. 1975, 246-250, 255-277. 3. .. ., , 2003. 4. Brodicico T.M., Valica V. Curs de chimie toxicologic, Chiinu, 2003. 5. .. . 1976, . 196 198, 201 203, 20. 6. . . , 1978

12