Parazitologie LP III 30.10.

2013

Trypanosoma si Toxoplasma
Diagnosticul parazitologic in boala somnului
Este cel mai folosit. Produsele patologice ce pot fi utilizate sunt:

In faza acuta sange (cel mai folosit produs patologic), aspirat ganglionar
In faza cronica LCR

Metode de diagnosticare utilizand sangele ca produs patologic:

Examenul unei picaturi de sange proaspat intre lama si lamela se vad parazitii extracelulari,
mobili, care deplaseaza elementele sangvine
Frotiu de sange colorat Giemsa se vede structura formelor trypomastigote
Leucoconcentrat Este o metoda prin care se concentreaza parazitii in sange, ceea ce ii face mai
usor evidentiabili. Intr-un tub se pune o cantitate de sange bine determinat, apoi o cantitate
dubla de ser fiziologic, iar pentru fiecare mL de sange pus in eprubeta se adauga trei picaturi de
saponina in concentratie de 2%. Saponina are efect hemolitic. Pe urma se centrifugheaza, iar
rezultatul este ca pe fundul tubului se depun leucocitele si parazitii. Din sediment se face frotiu
colorat Giemsa.

Din aspiratul ganglionar se face doar frotiu colorat Giemsa.

LCR se centrifugheaza si se examineaza sedimentul fie direct, fie pe frotiu colorat Giemsa.

Diagnosticul de circumstanta in boala somnului

Reprezinta alte analize care pot fi facute pacientului, care indreapta diagnosticul spre cel de boala
somnului. Pe imunograma se observa niveluri mari (varfuri) de IgM. In produsele patologice se pot
identifica celule Mott (plasmocite hiperactivate se observa vacuole in citoplasma acestora). De
asemenea, se observa proteinorahie crescuta (reactia Pandy cu acid acetic).

Diagnosticul imunologic in boala somnului

Este mai putin folosit. In zonele endemice (Africa) se foloseste reactia Trypcatt, o reactie de
hemaglutinare directa.

Diagnosticul parazitologic in Boala Chagas

Este cel mai folosit. Ca produse patologice se folosesc:

In faza acuta sange

In faza cronica punctie si biopsie din portiunile de tub digestiv dilatate, examen necrotic
1

Parazitologie LP III 30.10.2013

Daca produsul patologic este sangele, metodele utilizate sunt aceleasi ca la boala somnului. Deosebirea
este ca in faza acuta a bolii Chagas se pot evidentia concomitent formele extracelulare trypomastigote si
formele intracelulare amastigote (in prima faza monocite si macrofage). In faza cronica, se gasesc doar
forme intracelulare amastigote in fibrele musculare ale portiunii de organ recoltata.

Diagnosticul imunologic
Utilizeaza tehnici de tip ELISA sau Western Blot pentru identificarea in serul pacientului a anticorpilor
anti-Trypanosoma Cruzii.

Xenodiagnostic
Este utilizat atat in boala somnului cat si in boala Chagas. Este o metoda de diagnostic care se foloseste
de ciclul evolutiv al parazitilor. Principiul este urmatorul pe tegumentele pacientului se lasa sa se
hraneasca cu sange o insecta vector sterila. Insecta se sacrifica, in suspiciunea de boala somnului la o
saptamana, iar in cea de boala Chagas, la o luna, doua luni si trei luni (3 plosnite). Se diseca insecta si in
intestin se cauta prezenta Trepanosomelor in forma epymastigota, xenodiagnosticul este pozitiv.

Diagnosticul imunologic in toxoplasmoza

Este cel mai folosit, data fiind omniprezenta parazitului in organism in faza acuta a infectiei. Exista truse
de diagnostic ELISA si Western Blot, care pun in evidenta in serul pacientului toate clasele de anticorpi
anti-Toxoplasma. Se poate realiza daca este vorba despre o infectie recenta (IgE, IgA, IgM) sau una veche
(IgG anticorpii de faza cronica). Faptul ca un pacient are anticorpi anti-Toxoplasma inseamna ca e in
stare de infectie, nu neaparat ca e si bolnav. Acest diagnostic este util mai ales la gravide si la
imunodeprimati.
La gravide se mai utilizeaza testul de aviditate al IgG anti-toxoplasma. Este un test care indica vechimea
primoinfectiei cu Toxoplasma. Cu cat o infectie este mai veche, cu atat anticorpii IgG anti-Toxoplasma
sunt mai specializati pentru antigenul respectiv, iar complexul imun Ag-Ac se desface mai greu.
La gravide, este bine ca inainte de momentul conceptiei sa se investigheze serologic pentru Toxoplasma:

Daca nu are anticorpi anti-Toxoplasma, este neinfectata Se repeta lunar, pe tot parcursul
sarcinii, analizele, pentru a surprinde o pozitivare. In cazul unei pozitivari, se informeaza
pacienta, care alege avort sau terapie.
Daca are anticorpi anti-Toxoplasma de faza acuta si cronica, se recomanda un tratament
antiparazitar pana dispar anticorpii de faza acuta.

Daca o mama neinvestigata da nastere unui nou-nascut malformat:

Daca isi permite, la nastere se recolteaza sange din cordonul ombilical si se face din acesta
reactie imunologica de tip WB. Daca se identifica anticorpi de faza acuta, inseamna ca acel copil
este infectat.
2

Parazitologie LP III 30.10.2013

Daca nu isi permite, se poate face doar test ELISA pentru IgG anti-toxoplasma, astfel:
o Prima determinare la nastere, din sange venos matern si sange de cordon ombilical
o A doua determinare la varsta de 3 luni a copilului
Daca la a doua determinare anticorpii sunt mai scazuti, copilul nu a fost infectat. Daca anticorpii
sunt crescuti la a doua determinare fata de prima, copilul este infectat.

Diagnosticul parazitologic in toxoplasmoza

Este mai putin folosit, avand doar doua indicatii:

La gravida la care s-a dovedit prin reactii imunologice ca primoinfectia a avut loc in timpul acelei
sarcini, pentru a vedea daca parazitul chiar a trecut de la mama la fat se recolteaza lichid
amniotic dupa a 20-a saptamana (exista riscuri la amniocenteza)
La pacientul bolnav de SIDA, la care se stie ca este infectat cu toxoplasma, pentru a vedea daca sau reactivat chistii din creier se recolteaza LCR

Metodele utilizate sunt:

Frotiu din sedimentul rezultat dupa centrifugare, colorat Giemsa

Culturi pe medii cu fibroblasti
Inoculare intraperitoneala la soareci (fac ascita in 72h), care se sacrifica ulterior si din care se
face amprenta de organ a ficatului si splinei

Diagnosticul molecular
Este scump si are aceleasi indicatii ca si diagnosticul parazitologic. In produsele patologice se identifica
ADN-ul de Toxoplasma.