Determinarea activitii colinesterazei n ser

Denumirea de colinesteraz (ChE) se refer la dou enzime nrudite:

Acetilcolinesteraza (AChE sau ChE I) se gsete la nivelul sinapselor colinergice
(care utilizeaz acetilcolina ca neurotransmitor), existente n sistemul nervos vegetativ
parasimpatic, la nivelul jonciunilor neuro-musculare i n unele zone din creier. Are rolul de
a hidroliza acetilcolina dup ce aceasta a transmis impulsul nervos, permind revenirea
sinapsei la starea de repaus.
Pseudocolinesteraza (ChE II) este sintetizat n special de ctre ficat, de unde este
eliberat n plasm, activitatea sa putnd fi msurat n laborator. ChE II poate hidroliza att
acetilcolina, precum i ali esteri ai colinei: benzoilcolina, butirilcolina, etc. Rolul su
biologic este necunoscut.
Principiul determinrii
Colinesteraza II catalizeaz hidroliza butiril-tiocolinei n acid butiric i tiocolin.
Tiocolina reacioneaz cu DTNB (acidul 5,5-ditio-bis-2-nitrobenzoic), ducnd la formarea
acidului 5-tio-2-nitrobenzoic, compus colorat n galben care are maximum de absorbie la
405 nm. Absorbana compusului colorat format este direct proporional cu activitatea ChE
din proba de ser.

Mod de lucru
Reactivi (l)
Prob
Martor
Soluie substrat
200
200
Ser (diluat 1/11)
20
Incubare 10 min la 25C
Reactiv de culoare (DTNB)
2000
2000
Repaus 10 min
Ser (diluat 1/11)
20
Citirea imediat a absorbanei la 405 nm
Calcul:
Activitatea colinesterazei (U/l) = AProb x 8978
8978 = factor de corecie calculat n funcie de cantitatea de ser luat n lucru (raportat
la volumul total al probei), timpul de incubare i coeficientul de absorbie molar al
compusului colorat format.

Valori normale: 3000-8000 U/l

Semnificaie clinic
Colinesteraza II face parte din categoria enzimelor plasmatice funcionale, avnd
valori apreciabile n ser. Semnificaie clinic au valorile sczute fa de normal.
1. ntruct ChE este sintetizat n ficat i apoi secretat activ n plasm, determinarea
valorii sale serice este util pentru aprecierea funciei de sintez proteic a ficatului.
Activitatea ChE este sczut n boli hepatice asociate cu grade variabile de insuficien
hepatic (n contextul creia apare i reducerea funciei de sintez proteic). Asemenea boli
sunt hepatita acut fulminant (care determin necroza unei mari pri a ficatului) i ciroza
hepatic n stadiile finale. Determinarea activitii ChE are i valoare prognostic n bolile
hepatice: scderea la mai puin de 10% din valorile normale atrage atenia asupra pericolului
instalrii comei hepatice.
2. Intoxicaia cu insecticide organofosforice. Aceste insecticide sunt larg utilizate n
agricultur i intoxicaia poate aprea prin ingestia lor accidental sau n scop suicidar.
Organofosforicele cauzeaz inhibiia ambelor colinesteraze prin legare covalent la gruparea
hidroxil a unui rest de serin din centrul activ al enzimelor. Ca urmare, la nivelul sinapselor
colinergice are loc acumularea de acetilcolin i transmiterea necontrolat a impulsului
nervos. Simptomele intoxicaiei cu insecticide organofosforice sunt datorate stimulrii
excesive a sistemului nervos parasimpatic, a musculaturii striate i a unor zone din sistemul
nervos central.
3. Deficiena genetic de pseudocolinesteraz se manifest atunci cnd individul
avnd acest deficit este supus unei intervenii chirurgicale i i se administreaz ca miorelaxant
succinilcolina (care ar trebui s fie degradat de ctre colinesteraz). Deficitul colinesterazei
determin degradarea ineficient a succinilcolinei, cu acumularea acesteia i riscul de
producere a apneei prelungite prin relaxarea excesiv a muchilor respiratori.