Membrana celular

i
formaiuni specializate de
la nivelul membranei

dr. Luciana Pavelescu

1
 Microscopie
La MO membrana celular nu este
vizibil deoarece grosimea sa, de ordinul
zecilor de nm, este sub limita de rezoluie
a acestuia.
Examinat la ME, cu o mrire de ordinul
103, celula apare delimitat de o linie
ntunecat subire, continu.

2
Membrana celular n MET

3
 Membrana celular n MET
La mriri de peste 20000 de ori, membrana
celular se prezint ca o structur trilaminar,
fiind alcatuit din dou benzi ntunecate i una
median, mai clar definind ceea ce numim
PLASMALEM
substrat molecular: bistratul lipidic i
proteinele asociate acestuia.
Cele 2 benzi electronodense ale plasmalemei
se evideniaz datorit contrastrii cu plumbul
din CITRATUL DE PLUMB, care se leag, n
principal, de gruprile fosfat ale fosfolipidelor.4
Membrana celular n MET
 Ultrastructur

Plasmalem
Glicocalix
Citoschelet asociat membranei

6
 GLICOCALIX

Pe faa extern a plasmalemei exist o

reea de structuri oligo/poli-zaharidice cu
aspectul unor filamente fine, ramificate ce
alctuiesc GLICOCALIXUL sau
GLICOLEMA
substrat molecular: lanuri de oligo/poli-
zaharide purtate de lipide sau proteine.

7
 CITOSCHELETUL ASOCIAT
MEMBRANEI

reea alcatuit din proteine filamentare

anastomozate ntre ele, formnd ochiuri i
noduri
ancorat att la plasmalem (proteine
transmembranare) ct i la
CITOSCHELET CELULAR

8
9
 MODALITI DE STUDIU
AL MEMBRANELOR
1. STUDIUL ULTRASTRUCTURAL
a. Microscopie electronic de transmisie (TEM)
i. Pe seciuni
ii. Pe preparate de ngheare - fracturare
b. Microscopie electronic de scanning (SEM)

10
 TEHNICA DE
NGHEARE FRACTURARE
Fracturare la nivelul poriunii hidrofobe a
bistratului lipidic
Se pot studia feele interne ale celor dou
straturi lipidice ale membranei: faa
extern E i cea intern protoplasmatic P
Proteinele membranare sunt mai bogate
pe faa P, fiind ancorate de citoschelet.

11
 ngheare C u tit

- fracturare
Fa ta P

Fa ta E

Fa ta P Fa ra E

Se re a lize a za o
re p lic a in C si Pt Fa ta e xte rn a

Fe te d e
fra c tu ra

Fa ta
c ito p la sm a tic a
 Membrana n MET
prin ngheare-fracturare
 STUDII SPECIFICE
Citochimie ultrastructural

trasori electronodeni cu
i. Feritin
ii. Peroxidaz de hrean
iii. Citocrom c (hempeptizi)
iv. Aur coloidal

14
Feritin cationizat
(ncrctura negativ a
suprafeei celulare)

Hemundecapeptid
cationizat

Feritin-hidrazid (acid
sialic dup oxidare cu
acid periodic)
 STUDIUL CITOCHIMIC AL
LIPIDELOR
a. FILIPINA pentru colesterol (agregate care
dezorganizeaz membrana, vizibile la M.E.)
b. POLIMIXINA B pentru fosfolipidele anionice -
PS i PI
se poate evidenia distribuia asimetric a
lipidelor

16
 Complexe filipin-colesterol
la infundibulele stomatale ale
caveolelor
(ngheare-fracturare;
evideniate pentru prima dat
de Dr. Florea Lupu)

Din: Simionescu M, Gafencu A, Antohe F. Microsc Res Tech. 57, 269288 (2002)
SPECIALIZARI MEMBRANARE
De pol apical:
Cili
Microvili
Stereocili
De pol laterobazal:
Jonciuni celulare
Labirint bazal

18
 Cilii
structuri membranare de pol apical,
organizate pe microtubuli

Localizare: epiteliu respirator, tromp uterin

19
Cilii
un dublet central,
nconjurat de o teac
central
9 dublete periferice
conectate prin nexin
dou brae de dinein
(fiecare dublet periferic),
proteinele motor ce
asigur micarea activ a
cilului
corpul bazal, similar ca
organizare centriolilor, cu
rol n organizarea cilului
20
 Cilii
TEM SEM

21
Microvilii
structuri membranare
de pol apical,
organizate pe filamente
de actin
Localizare: enterocite,
nefrocite

22
 Stereocilii
Specializri ale
membranei apicale,
organizate pe
filamente de actin
Localizare: urechea
intern, ci genitale
masculine

23
Stereocili - MO Stereocili MES

24
 JONCIUNI CELULARE
Structuri membranare cu rol n adezivitatea
celulelor n cadrul unui esut
Observabile doar la MET

Jonctiuni speciale:
strnse (ocluzive)
de ataare (aderente)
de comunicare (comunicante)

25
 Zonula occludens
Jonciunea strns =
zonula occludens
ME: nchiderea
spaiului intercelular, prin
apoziia membranelor a
2 celule adiacente

26
Jonciuni de adeziune celul-celul

Zonula adherens Macula adherens

 Jonciuni speciale - Desmozomii
2 tipuri:
Desmozomi n band (zonula
adherens)
Desmozomi n spot (macula
adherens)

ME: condensare membranar

care prezint pe versantul
citoplasmatic placa
desmozomal

28
Jonciuni de adeziune celul-
matrice extracelular
Hemidesmozom Contact focal
Hemidesmozomii
ME: componenta celular
are acelai aspect ca
desmozomii, dar
localizarea difer la
polul bazal al celulei

30
 Complexul joncional

Succesiunea de la polul
apical spre cel bazal a
urmtoarelor tipuri de
jonciuni:
Zonula occludens
Zonula adherens
Macula adherens

31
 Jonciuni de comunicare
= jonciuni gap
2 membrane alturate strbatute de canale
hidrofile = conexoni

32
Jonciuni gap

33
Jonciuni gap

34
 Labirintul bazal
Falduri de membran bazal, bogat n Na+-
K+ ATPaz, ntre care se regsesc
numeroase mitocondrii
- l regsim n celule din ductele secretorii ale
glandelor salivare, glandele sudoripare,
nefron

35
Duct striat
(H&E)

http://www.lab.anhb.uwa.edu.au

36
Duct striat (MET)

37