ORTHOMIXOVIRUSURI-V.

GRIPALE A, B, C

GRIPA
• FEBRA
• ASTENIE
• CEFALEE
• MIALGII
• TUSE NEPRODUCTIVA
• FARINGITA
• SEMNE OCULARE
• RINITA
Diagnostic virusologic obligatoriu cu identificarea
subtipului viral (hemaglutinoinhibare)!

OMS- infectii gripale-anual pe glob:

5-15% din totalul populatiei
3-5 milioane cazuri de infectii severe,
250.000 - 500.000 decese
 ORTHOMYXOVIRIDAE
ARNss(-) segmentat -8minigene+ transcriptaza

tip A, B, C : NP, M
subtipuri: HA si NA –16 tipuri HA si 9 NA
tip/subtip/ loc, an izolare/nr. pasaje- A/H5N1/Guangdong/1996/1
 HEMAGLUTININA
Virusul gripal tip A Receptorul

Uman SA-2-6-beta Gal

Aviar; ecvin SA-2-3-beta Gal

Suin SA-2-3- beta Gal si

SA-2-6-beta Gal
REASORTANTI

determinanti antigenici implicati in virus neutralizare- evidentierea

izolarii virale- hemaglutinare/ hemadsorbtie si identificarea subtipului
viral- hemaglutinoinhibare cu antiseruri specifice

hemadsorbtie hemaglutinare

hemaglutinoinhibare
 endocitoza mediata de
Proteaze celulare - clivarea HA si activarea
receptor– complex
infectivitãtii -schimbari conformationale -
ribonucleoproteic
expunere peptid N-terminal HA2 transportat in nucleu

complex ribonucleoproteic
transportat in nucleu

Decapsidare- Proteina virala M- rol de canal ionic

INHIBITORII DECAPSIDARII- AMANTADINA SI RIMANTADINA

blocarea canalul ionic al proteinei virale M2, reducerea efectul acesteia asupra
decapsidãrii si modificãrii pH-ului din celulele infectate
Neuraminidaza- faciliteaza eliberarea virionilor progeni si previne agregarea acestora
la nivelul membranei celulare, favorizeaza diseminarea infectiei

INHIBITORII DE NEURAMINIDAZA -analogi de acid N-acetil neuraminic

(receptorul pentru virusurile gripale), blocheazã situl activ al neuraminidazei
OSELTAMIVIR (Tamiflu) –administrat pr os, 75 mg x 2/zi
ZANAMIVIR(Relenza) -10 mg (2 inhalatii de 5 mg/zi)
 V. GRIPALE A: VARIABILITATE
DRIFT (alunecare) ANTIGENIC- mutatii punctiforme la nivelul genelor pt HA si NA- EPIDEMII
 VARIABILITATEA VIRUSURILOR GRIPALE tip A
• SHIFT ANTIGENIC (comutare)-aparitia unor noi subtipuri virale- PANDEMII
1. reasortarea genicã între tulpini gripale de la specii diferite
2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificãri conformationale in
structura hemaglutininei pentru traversarea barierei de specie:
Toate virusurile gripale umane au singur reziduu bazic de argininã la nivelul sitului de clivare a
hemaglutininei. Achizitia unor aminoacizi bazici suplimentari (situri de clivare multiple) - permite
si altor proteaze sã cliveze hemaglutinina - alterarea tropismului tisular (afectarea tesutului
cerebral, miocardic si vaselor de sânge) si cresterea virulentei
3.re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

La pãsãrile domestice gripa poate evolua în douã forme:

-minorã (LPAI) sau asimptomaticã, - afecteazã productia ouã in crescãtorii
- majora (HPAI), înalt contagioasã, mortalitate 50-100% (aa bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

Pãsãri acvatice sãlbatice

(rate, gâste, pescãrusi)-
rezervorul natural al
virusurilor gripale A
 SHIFT ANTIGENIC
reasortarea genicã între tulpini
gripale de la specii diferite

Epiteliul traheal al suinelor are ambele tipuri de receptori SA-2,3Gal beta si SA-2,6Gal
beta
Porcii sunt infectati in vivo si in vitro cu virusuri aviare
Replicarea continua a unui virus aviar la suine duce la selectia unor tulpini ce recunosc
preferential receptorii umani
Reasortanti virusuri suine si aviare pot infecta omul si determina infectii severe
Transferul interspecii si reasortarea - stabilirea a 2 noi linii de tulpini suine din 1979
 A/H1N1/ 2009 pandemic

414,000 cazuri confirmate de

laborator

cca 5000 decese raportate OMS

Influenza A H1N1/2009 –
6 Minigene de la tulpinile
porcine Nord America
(reasortant 1998
suin/aviar/uman) si
2 de la tulpinile porcine izolate
in Europa/Asia

Aceste tulpini au coexistat

pentru mai mult de 10 ani -
Reasortarea actuala
probabil la porc- gazda
ramane totusi necunoscuta
(supraveghere insuficienta;
infectie asimptomatica la
porc, reasortare recenta?)
 Pandemii gripale
1918-H1N1 “gripa spaniola” -20-50 milioane decese
Virus aviar

1957- H2N2 “gripa asiatica”-1-2 milioane decese

reasortant

1968- H3N2 “gripa Hong Kong ”-700,000 decese-

reasortant

1977- H1N1 “gripa ruseasca”-re-emergenta

 SHIFT ANTIGENIC –V GRIPALE A
• transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om

La pãsãrile domestice gripa poate evolua în douã forme:

-minorã (LPAI) sau asimptomaticã, - afecteazã productia ouã in crescãtorii
- majora (HPAI), foarte severã, înalt contagioasã, cu mortalitate 50-100%
(aminoacizi bazici suplimentari la nivelul situs de clivare HA)

Pãsãri acvatice sãlbatice

(rate, gâste, pescãrusi)-
rezervorul natural al
virusurilor gripale A
 SHIFT ANTIGENIC-
Pandemii gripale
1918-H1N1 “gripa spaniola” -20-50 milioane decese
Virus aviar

1957- H2N2 “gripa asiatica”-1-2 milioane decese

reasortant

1968- H3N2 “gripa Hong Kong ”-700,000 decese-

reasortant

1977- H1N1 “gripa ruseasca”-re-emergenta

Conditii necesare izbucnirii unor pandemii
• noutatea antigenica a virusului
1. reasortarea genicã între tulpini gripale de la specii diferite
2. transferul direct al unor tulpini gripale de la animal la om- modificãri
conformationale in structura hemaglutininei.
3. Re-emergenta unui virus ce a determinat epidemii cu ani inainte

• lipsa imunitãtii în populatia umanã

• facilitatea transmiterii interumane a

noilor tulpini.
 VACCINURI ANTIGRIPALE
• VACCIN INACTIVAT CU VIRUS INTREG
SAU SUBUNITAR -HA(1931-izolare in OGE,
1940- vaccin inactivat)
- Virus izolat in OGE- lichid alantoidian imbogatit,
particule virale centrifugate in gradient de densitate
pentru concentrare si purificare- inactivare cu
formaldehida sau ß-propiolactona +/_ tratare cu
detergent si purificare HA si NA- vaccin trivalent (3
subtipuri circulante prevalente)
- Petrescu si colab., 1980 - NIVGRIP- administrarea
intranazalã a vaccinului inactivat preparat cu virusul
întreg –prioritate româneascã.

Fiecare dozã de vaccin contine

• VACCIN VIU ATENUAT CU TULPINI
“RECI”
-Tulpina master atenuata, adaptata pentru crestere
la 250 C (A /H2N2 /Ann Arbor/6/60 si B/Ann
Arbor/1/66) in care se insera genele pentru HA/NA-
mutatii stabile in genele complexului polimerazic
PA, PB1, and PB2, propagate în pasaje seriate la
temperaturi din ce în ce mai scãzute pe celule renale
de pui de gãinã SPF (specific pathogen free)
hemaglutinina corespunzãtoare a 10
miliarde de virioni în cazul cultivãrii
virusului pe OGE (15 ug per 0.5 ml) .
Cantitatea de neuraminidazã nu este
standardizatã -proteinã labilã în cursul
procesului de preparare si stocare a
vaccinului.
 VACCINURI ANTIGRIPALE
REACTUALIZATE ANUAL

PB2 PB2
PB1
PA X PB1
PA
HA
HA
NA NA
NP NP
M M
NS NS
PB2
PB1
TULPINA MATCA – PA TULPINA NOUA
PR8 (H1N1 A/PR/8/34) – HA ANTIGENIC
atenuata, nonpatogena, NA
incapabila de replicare la om
NP
M
REASORTANT NS
virus cu 6 gene PR8, dar HA
si NA tulpinii circulante
 Criteriu Vaccinuri vii Vaccinuri inactivate
Cale de administrare Intra-nazal, bucal Intra-muscular

Vârsta recomandatã 5-49 ani Peste 6 luni

Replicarea virusului la vaccinati Da Nu
Imunizarea contactilor Da Nu
Risc aparitie recombinanti Da Nu
Administrarea altor vaccinuri simultan* Da Da

Administrare la imunosupresati** Nu Da
 GRUPE DE RISC pentru care se recomanda vaccinare anuala

Persoane cu risc înalt de complicatii

 copii < 2 ani (rate de spitalizare de 2.3 ori > ca cei 2- 4 ani, complicatii mai frecvente)
adulti > 65 ani
femeile gravide în trimestrele II si III de sarcinã, 2 saptamani postpartum, inclusiv
dupa pierdere sarcina
pacienti institutionalizati
adulti si copii cu boli cardiace (cu exceptia HTA) si pulmonare cronice (inclusiv astm),
boli metabolice (inclusiv diabet zaharat), disfunctii hepatice, renale, hematologice
imunosupresie (inclusiv cei HIV pozitivi)
Obezitate (BMI 30-35), mai ales obezitate morbida (BMI )>40- virusul A/H1N1 2009

Persoane care pot transmite infectia gripalã celor cu risc de complicatii

personalul medico-sanitar
angajatii institutiilor psihiatrice si cei ce îngrijesc bolnavi cronici
membrii familiilor persoanelor la risc

Persoane la care vaccinarea poate fi recomandatã

persoane care cãlãtoresc în zone cu epidemii de gripã
persoane implicate în servicii comunitare esentiale
copiii din gradinite si scoli, studentii, militarii
 GENETICA INVERSA

Vaccin impotriva H5N1 (virus aviar ce a fost transmis la om, doar prin contact direct cu pasarie
bolnave, fara cazuri secundare interumane) - reasortant H5N1/PR8- in plasmide cu cDNA pentru
6 gene din tulpina de referinta H1N1 se insera cDNA al genelor HA, NA din izolate din Asia, dupa
deletie sit de clivare polibazic pentru generare tulpina nonvirulenta
 UP TO DATE
• http://ec.europa.eu/health/ph_threats/com/Influenza/h1n1_en.htm
• http://ec.europa.eu/health-eu/newsletter/influenza/m
• http://www.emea.europa.eu/influenza/vaccines/home.htm
• http://www.euro.who.int/surveillance
• http:// www.cdc.gov/flu/weekly
• http://www.ecdc.eu.int/
• http://www.oie.int Organizatia Mondiala Pentru Sanatatea Animala
• www.who.int/csr/disease/avian-influenza
• http://www.efsa.eu.int/science/- The European Food Safety Authority
• http://europa.eu.int/comm/food/animal/diseases/controlmeasures/avian/
avain_influenza_22092005.pdf

• Taubenberger et al in Nature ( VOL. 437 October 6th 2005 )

http://www.nature.com/news/2005/051003/full/437794a.html
http://www.nature.com/news/2005/051003/full/nature04230.html
• Tumpey et al in Science (2005; 310: 77-80).