Structura cursului:

Capitolul 1 Elemente introductive

Capitolul 2
Capitolul 3 Materii prime în biotehnologii
Capitolul 4
Capitolul 5 Procedee de sterilizare în biotehnologie
Capitolul 6
Capitolul 7 Reactoare biochimice
Capitolul 8
Capitolul 9
- procesul de cre tere a microorganismelor pe medii de
cu scopul unor produse de ,
:

- primari - intermediari sau finali ai unor cicluri

metabolice care, de în biomacromoleculelor
sau ai coenzimelor, sunt elemente constitutive ale
celulare;

- secundari care nu au rol în dezvoltarea biomasei, în

schimb au o în în starea de
.
- microorganismelor este rezultatul dintre celula
mediul de ;
- poate fi în regim discontinuu (batch), semi-continuu (fed-batch)
sau continuu (continuous):

Biomass Now - Sustainable Growth and Use", book edited by Miodrag Darko Matovic, ISBN 978-953-51-1105-
4, Published: April 30, 2013 under CC BY, Chapter 8.
 se pot realiza în sisteme:

- omogene, când masa din interiorul fermentatorului are o

(amestecare ;

- eterogene când mediului în lungimea

fermentatorului (cazul bioreactoarelor tubulare, considerate cu
deplasare ;

- deschise când microorganismele zona de în

mod continuu, cu efluentul;

- închise, când masa este în zona de ,

efluentul fiind lipsit de .
(batch fermentation)
Caracteristici:
- masa celular (inoculul) este

-
zvoltare.
Avantaje:
- la nivel industrial;
-
-
-
-
Dezavantaje:
- cost de operare crescut;
- a
-
- culturi în sisteme închise, care o cantitate de
(substrat).

timp
I de lag, sau de , ca
de acomodare a microorganismelor la din
fermentator;
II faza de de
:

cx - 3;

- timpul, s;
- -1;

pentru = 0 si cx=cx0 se ob ine:

cx
ln
c x0
- panta segmentului de viteza
de pentru date, max;
- valoarea vitezei maxime de depinde de natura
microorganismului:

Microorganismul max, h-1

Methylomonas methanolytica 0.53

Aspergillus nidulans 0.36

Penicillium crysogenum 0.12

- vitezei de poate fi rezultatul:

-s ii de din mediu,
- unor cu inhibitoare.
III faza de (retardare) substratului, care poate fi
printr-o dintre de :

cS - 3;

max -
, s-1;
KS - constanta de utilizare a substratului, kmol substrat/m3.

Concentratia de biomas va fi descris de ecua ia Monod:

KS constanta de utilizare a substratului:

- este numeric este cu valoarea substratului pentru care

= ½ max;
- o a microorganismului pentru substrat.

KS are valoare :
- microorganismul are o afinitate foarte mare pentru substratul limitativ;
- viteza de nu va fi când substratului nu
va la valori foarte mici; acest lucru o pentru
faza de retardare;

KS are valoare mare:

- microorganismul are o afinitate pentru substrat;
- viteza de va fi chiar la valori relativ ridicate ale
substratului limitativ, iar perioada de (retardare) a
vitezei va fi .
 Microorganism Substrat limitativ KS, mg/l

Escherichia coli 6.8·10-2

Saccharomyces cerevisiae 25.0

Pseudomonas sp. metanol 0.7

primari, care se în faza de

, este de viteza de poate fi
de :

qp - viteza de formare metabolit, s-1;

- randamentul de formare a produsului raportat la substratul
consumat.
 IV faza , care, în culturile discontinue, corespunde punctului
în care viteza de devine .

În din punct de vedere fiziologic, microorganismele

au metabolismul activ.
este cea în care se produc secundari.

Culturile discontinue se folosesc pentru

de:
biomase, caz în care de trebuie
astfel alese încât asigure o
. (ex. drojdiei de
a drojdiei de bere, a biomaselor

ln
proteice);

(
primari, pentru care etapa de
trebuie (ex. de
acizi organici citric, lactic, de aminoacizi);
secundari în acest caz de timp
trebuie la o de
o
.
(continuous fermentation)
Caracteristici:
- ce mediul din
fermentator este evacuat continuu cu un debit mediu egal cu cel de
alimentare;
- microorganismele optime ;
- popula ia mi
Avantaje:
- reducerea timpilor necesari pentru , umplere, golire, sterilizare,
;
- reducerea volumului fermentatoarelor;
- posibilitatea ;
- utilizarea mai a substratului;
- unor randamente mai mari de formare a produsului;
- cost de operare redus.
Dezavantaje:
-
 continue se pot realiza în sisteme:
- omogene sau eterogene;
- deschise sau închise;

microorganismelor.
Se de de , D, pentru cazul în care debitele de
evacuare, respectiv de alimentare sunt astfel reglate încât se ajunge la o
de celule (se atinge starea - formarea de
celulele evacuate din reactor):

F debit volumetric de alimentare, respectiv evacuare, m3/s;

V volumul bioreactorului, m3.

Modificarea a de celule în timp (acumularea) poate fi ca:

În de celule este dcx/ = 0 deci

.c = D .cx =D, ceea ce faptul , în , viteza
x
de este de viteza de .
În condi ii sta ionare, concentra ia medie de biomas , respectiv de substrat limitativ
pot fi descrise de rela iile:

care mecanismul prin care viteza de , D, viteza de

, . Pentru , max = Dcrit.
o a substratului limitativ la o valoare la
care substratului va favoriza o de cu cea de
.
substratului scade sub valoare, celulele vor fi evacuate cu
o mai mare decât sunt produse (D > ), determinând o a
celulare; ca urmare de substrat limitativ va
(neavând cine -l consume), determinând o a vitezei de generare de
celule (echilibrul) se va restabili.
Acest tip de sistem continuu se ca un sistem chemostat, deoarece viteza de
este de mediul chimic, de substratului
limitativ.
 sistem turbidostat: este prin reglarea debitelor,
turbiditatea mediului între anumite limite

sistem biostat: monitorizarea de se poate realiza prin

controlul de dioxid de carbon

http://2012.igem.org/Team:Washington/Plastics http://www.sigmahellas.gr/
Caracteristicile cinetice ale unui microorganism sunt descrise de valorile
numerice ale constantelor Y, max KS. Valoarea lui Y
de max care este egal cu Dcrit
viteza de care poate fi în iar KS
a substratului (indirect de
viteza de ce poate fi .

A, A* - microorganism cu KS mare; B, B* - microorganism cu KS mic;

Pentru valori mici ale KS (afinitate mare fa de substrat) c

max = Dcrit

S)
într-
Viteza de la care devine (celulele au fost evacuate în totalitate)
denumirea de de Dcrit poate fi de
:

Valoarea vitezei critice de Dcrit este de valoarea vitezei

maxime de max , a valorii KS a variabilei cS0 , cu cât aceasta are
o valoare mai mare Dcrit se apropie de max.

Într-o chemostat max nu se atinge, deoarece întotdeauna

de substrat limitativ.
În cazul unei bacterii cu afinitate pentru substrat (valoare mare KS),
conduce la o a concen i
substratului limitativ.

Comportarea unei bacterii cu afinitate mare KS)

într-
Productivitatea culturilor poate fi ca raport dintre cantitatea de
timpul de .

Productivitatea unei culturi discontinue se poate scrie ca fiind:

P - productivitatea, ;
cxmax - în stare , kmol / m3;
cx0 - , kmol / m3;
1 - timpul în care are loc cu , h;
2 - timpul de cu o de cea care include
faza de lag, faza de retardare, respectiv fazele de amestecare,
sterilizare, golire, h.
Productivitatea culturilor poate fi ca raport dintre cantitatea de
timpul de .

Pentru o productivitatea se cu :

3 - timpul necesar atingerii include

fermentatorului, sterilizarea fazele discontinue care preced
operarea h;
T - timpul de a , h;
D - viteza de dilu h-1;
- de în stare kmol / m3.

Productivitatea de se pentru o care conduce la o

valoare a produsului D·cx.