USAMVB: Facultatea de Biotehnologii

Student:Puiu Mihai George

Cadru didactic îndrumător: Asist. Univ. Dr. Camelia Diguţă

Diversitatea bacteriană în
mediile sărăturoase

Bacteriile sunt organisme unicelulare, asexuate (au celulă somatică

care este si celulă reproducătoare), procariote (cu nucleul alcatuit
dintr-un singur cromozom alcătuit din acid dezoxiribonucleic (ADN),
care este localizat în nucleoid, fară membrană nucleară şi fară
nucleoli,dar in schimb prezintă perete celular, localizat în afara
membranei citoplasmatice, ce conține de obicei peptidoglican,iar la
exteriorul peretelui celular pot avea capsule şi flageli),sunt
haploide,iar diviziunea celulară se realizează prin simplă fisiune
binară,acestea sunt foarte numeroase si sunt raspandite in natura, in
sol, in apă, in aer, in corpul plantelor,al animalelor si al omului. Sunt
de dimensiuni microscopice şi sunt considerate cele mai vechi forme
de viaţa de pe pământ,primele organisme cu structura celulara.
Bacteriile au celula de tip procariot fiind mai simpla decat celula
eucariota. Bacteriile se caracterizeaza prin metabolismul pe care il
deţin si prin adaptarea la conditiile de viaţă.
Archaebacteriile sunt cele mai vechi si cele mai rezistente forme de
viaţă de pe pământ,au un metabolism adaptat condţiilor extreme şi
stravechi,acestea traiesc in grup in medii extreme (halofile, care
traiesc in medii bogate in saruri,termofile adaptate la temperaturi
ridicate şi metanofile-producatoare de metan).
În mediile saraturoase bacteriile sunt expuse unei presiuni osmotice
ridicate cauzate de concentrațiile mari de sare din jur.
Microorganismele halofile au strategii specifice pentru echilibrarea
presiunii osmotice și supraviețuirea în aceste condiții extreme.
Bacteriile fermentative halofile formează un grup aparținând în
principal ordinului Halanaerobiales(Universitatea de Tehnologie din
Tampere, Departamentul de Chimie și Bioinginerie, Tampere,
Finlanda Primit 12 martie 2010, revizuit la 17 august 2010, Acceptat
23 august 2010, disponibil online 30 august 2010.Sursa:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165610003950
).
Pe data de 8 martie 2017 sa facut un studiu de catre NCMR şi NCCS
(Centrul National pentru Resurse Microbiene şi Centrul National
pentru Stiinta Celulara) din Pune, India pe
morfotipurile și profilele de pigmentare ale bacteriilor halofile.În
acest studiu s-au prelevat 19 specii de bacterii halotolerante de pe
solurile cu pământ împăturite și sare de mlaștină din zona coastei de
vest din Goa(India) şi mai exact din plaja Arambol,plaja Calanguate,
plaja Candolim și Colva.

Eșantion de sol colectat din plaja Arambol, North Goa.

Bacteriile selectate au fost subcultivate și culturile pure sunt păstrate

în frigider la 4 ° C pe ciclu continuu. Halofilii izolați au o temperatură
optimă de 22 ± 2 ° C. Toate izolatele cresc luxuriant în prezența
concentrației de sare de 20%. Caracteristicile morfologice au fost
înregistrate conform Manualului Bergey de Bacteriologie Sistemică și
Codului Internațional de Nomenclatură a Bacteriilor (ICNB).
Nouăsprezece specii bacteriene au fost izolate pe agar marin Zobell
răspândit separat, agar R2A, agar de sare de manitol și agar de sânge
cu și fără fenantren 1% în triplicate la temperatura de 22 ° C
Izolarea bacteriilor halofile a fost efectuată din probele A, A7, CSM,
CB și CM (aproximativ 100 g fiecare) - colectate din soluri
împrăștiate cu ulei, mlaștină sare și în larg de-a lungul coastei de vest
din Goa (India), respectiv plaja Arambol, plaja Calanguate , Plaja
Candolim și plaja Colva (figura 1). Nouăsprezece specii bacteriene au
fost izolate pe agar marin Zobell răspândit separat, agar R2A, agar de
sare de manitol și agar de sânge cu și fără fenantren 1% în triplicate la
temperatura de 22 ° C
Fenantrenul (1%) a fost dizolvat în acetonă (HiMedia, gradul AR), în
timp ce bitumul (2%) a fost dizolvat în cloroform (HiMedia, gradul
AR). Soluțiile de fenantren și de bitum s-au răspândit separat pe plăci
în trei exemplare. Solvenții dizolvați au fost lăsați să se evapore la 40
° C aseptic. Toate bacteriile halofile au fost lăsate să crească pe agar
Marine Zobell pentru confirmarea creșterii în prezența hidrocarburilor
- 1% fenantren și 2% bitum - în experimentele separate. Agarul marin
Zobell 2216 (M384) și agar R2A (M1743) au fost utilizate ca mediu
de criptare pentru cultivarea și conservarea microorganismelor în
experimente ulterioare
Mediile M384 și M1743 au fost ușor modificate și glicerol (4%)
pentru conservarea bacteriilor la 4 ° C. Mediul M384 a fost utilizat
pentru studii asupra caracteristicilor morfologice și a capacității /
testelor de producere a pigmentului. Aceste plăci care conțin
hidrocarburi au fost utilizate pentru izolarea și cultivarea
microorganismelor în experimente ulterioare. Specii selectate au fost,
de asemenea, verificate pentru producerea de pigmenți în bulion
Zobell Marine. Toate izolatele au fost incubate la 22 ° C timp de 24-
96 ore. Rezultatele au fost înregistrate în laboratorul pentru
experimente (trăsături morfologice, teste biochimice, toleranță /
rezistență la hidrocarburi și capacitatea de producere a pigmentului
bacteriilor izolate).
 Figura 1: Fenotip de halofili pe mediu M384 în prezența a 1%
fenantren
Sursa:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352340917302834
 Figura 2: Fenotip de halofili pe mediu M1743 în prezența a 1%
fenantren.
Sursa:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352340917302834
Figura 3: Fenotip de halofili pe mediu M384 în prezența a 2% Bitum
(1 mL).
Sursa:http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S23523409173
02834
 Figura 3: Pigment galben produs de bacterii în bulionul Zobell
Marine (M384).
Sursa:http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S23523409173
02834

Izolații au prezentat o creștere în prezența hidrocarburilor (1%

fenantren și 2% bitum). S-au observat diferite profiluri de pigmenți pe
un mediu diferit. Culoarea pigmenților produse pe agar media
înregistrată conform diagramei de culori standard(de la pagina 8) a
fost albul antic, trandafirul de culoare albă, papaya alb, Ghost alb,
Gainsboro, lumina de aur roșu, mocasina, chiffonul de lămâie, cremă,
cremă de menta, fum alb, Floral alb, dantelă veche, roz, etc. Toate
izolatele au prezentat un model de creștere diferit. Izolarea nr. 11
(GOACSMMS-11) a arătat trei modele diferite de creștere
morfologică pe agarul marin Zobell și mediu R2A în absența și
prezența hidrocarburilor. Izolați nr. 19 a indicat culoarea roz pe Mediu
M384.
Aceste date fenotipice vor folosi în viitor pentru a distinge grupuri
bacteriene similare genetic, cum ar fi bacteriile de tip Bacillus și
pentru a descrie speciile noi și taxele noi conform Codului
internațional de nomenclatură a bacteriilor (ICNB) sau a codului
bacteriologic (BC).( Centrul National pentru Resurse Microbiene
(NCMR) ŞI Centrul National pentru Stiinta Celulara (NCCS) din
Pune,India.Primit pe 8 martie 2017, revizuit 2 mai 2017, acceptat 21
iunie 2017, disponibil online 30 iunie 2017.Autor Bhagwan N.
Rekadwad.Sursa:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352340917302834
 Codul Denumirea Denumire Culoarea Culoarea Creștere pe Creștere pe
izolatului tulpinilor pentru o tulpină pigmentului pigmentului placă agar 2% bitum
de pe identitate corectă pentru produs pe agar produs pe agar conținând (1 ml) care
placă confort marin Zobell (nr. R2A fenantren conține
Mediu M384) 1% placă de
agar
1 GOAAR2-1 BNR1 Alb antic 1 Gainsboro DA DA

2 GOAAR2A-2 BNR-2 Roz mistic 1 Lumină de aur roșie DA DA

/ Moccasin
3 GOAAR2A-3 BNR-3 Papaya / Grâu Portocaliu deschis DA DA

4 GOAAMS-4 BNR4 Oțel de aur galben / Dantelă veche DA DA

Oțel de aur ușor 1
5 GOAAMS-5 BNR-5 Alb fantomă Alb fantomă DA DA

6 GOAA7MS-6 BNR-6 Alb fantomă Alb fantomă DA DA

7 GOAARR2A-7 BNR-7 Alb floral Alb fantomă DA DA

8 GOAA7R2A-8 BNR-8 Aur luminos 1 Grâu DA DA

9 GOACSMR2A-9 BNR-9 Alb fantomă Fum alb DA DA

10 COACSMMS-10 BNR-10 Alb fantomă Alb fantomă/Fum DA DA

alb
11 GOACSMMS-11 BNR-11 Crema de mentă Dantelă veche DA DA

12 GOACBR2A-12 BNR-12 Fildeş 2 Dantelă veche DA DA

13 GOAAR2A-13 BNR-13 Fildeş 2 Dantelă veche DA DA

14 GOAA7MS-14 BNR-14 Aur luminos 1 Dantelă veche DA DA

15 GOAA7R2A-15 BNR-15 Lămaie Fum alb DA DA

16 GOACSMMS-16 BNR-16 Alb fantomă Alb fantomă/Fum DA DA

alb
17 GOAA7R2A-17 BNR-17 Alb floral Fum alb DA DA

18 GOAA7R2A-18 BNR-18 Grâu 1/Portocaliu Portocaliu deschis DA DA

deschis
19 GOABTMNBNR- BNR-19 Roz Roz DA DA
19

Bibliografie:
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0168165610003950
http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352340917302834