Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
1
impact economic mai mic, cum sunt papaia, broccoli, pepenele galben sau cicoarea
— (AGBIOS, 2009a; Bruderer şi Leitner, 2003).
6
Culturile biotehnologice au crescut de 110 ori față de 1996,
── fiind cea mai rapidă tehnologie a plantelor cultivate în lume;
7
8
Soia transgenică a atins 50% din suprafața globală a culturilor
biotehnologice (transgenice)
9
Caracteristicile combinate ale OGM au ocupat 41% din
culturile global cultivate, iar al doilea caracter al OGM a fost toleranța la
erbicide la 47%
10
Suprafața cultivată cu culturi tolerante la erbicide a fost de 86,5
milioane de hectare în 2016, ocupând 47% din suprafaţa globală de OGM, de
185,1 milioane de hectare.
11
Din primele cinci țări care cultivă 91% din culturile
biotehnologice, trei sunt țări în curs de dezvoltare (Brazilia, Argentina și
India), iar două sunt industrializate (SUA și Canada).
12
13
Fig. 1b. Situaţia globală a culturilor transgenice la nivelul anului 2016.
Sursă: Clive James (2016).
14
Fig. 1a. Situaţia globală a culturilor transgenice la nivelul anului 2009.
Sursă: James (2009b).
15
Aceste aspecte au fost evidenţiate de rapoartele Serviciului Extern de
Agricultură din cadrul Departamentului de Agricultură al Statelor Unite (USDA
Foreign Agricultural Service), precum şi de publicaţii de diverse tipuri.
17
Cele mai utilizate protocoale de cuantificare sunt bazate pe tehnica
real-time PCR.
În laboratoarele de testare, aceste etape se desfăşoară secvenţial, fiind
integrate în cadrul unor metodologii specifice.
18
CAPITOLUL I.
STADIUL ACTUAL ÎN DOMENIUL OMG-URILOR
20
Evenimentele de transformare pot avea un caracter temporar
(tranzitoriu) sau permanent (integrativ), pentru această lucrare prezentând interes
doar cele din a doua categorie.
Tehnologia care s-a dezvoltat rapid în ultimii ani, oferă aplicaţii
pentru studierea structurii şi funcţionării genelor, dar mai important, pentru
experimentele de inginerie genetică la bacterii, drojdii, animale şi plante superioare
── (Bruderer şi Leitner, 2003).
21
1.1.2. Metode de obţinere a PMG-urilor
23
Insertul va fi integrat doar pe unul dintre cromozomii prezenţi în
genomul di- sau poliploid (inserare neomoloagă) al organismului transformat care
este astfel heterozigot (hemizigot). De aceea, transformarea este deseori urmată de
backcrossing, în vederea obţinerii unei linii transgenice homozigote.
24
Casetele genice sunt inserate într-o singură copie sau repetate în
tandem, în forme trunchiate sau rearanjate, în unul sau mai mulţi loci.
Inserţia aleatorie în genomul receptor ── poate cauza efecte
pleiotrope şi de poziţie, neprevăzute.
26
Cercetările din ultimii ani au determinat însă perfectarea unor
protocoale de transformare şi pentru speciile considerate recalcitrante ─ (ex.
Păcurar et al., 2008).
Sistemul a fost intens utilizat pentru trasformarea câtorva specii
importante de cultură ca ── tomate, canola, bumbac şi cartofi, obţinându-se peste
40 de linii MG ─ (Bruderer şi Leitner, 2003).
28
Metoda constă în expunerea protoplaştilor la impulsuri electrice care
determină permeabilizarea reversibilă a membranei plasmatice, facilitând
transferul ADN-ului ─ (Zafar et al., 2004).
Principalele avantaje ale acestei metode, comparativ cu tratamentele
chimice, sunt simplitatea şi frecvenţa mai mare de intregrare a ADN-ului ─
(Zafar et al., 2004).
30
1.1.3. Generaţiile de PMG-uri
33
1.1.4. Elementele genetice introduse în OMG-uri
34
Unul dintre cei mai importanţi factori pentru atingerea nivelelor dorite
de expresiea transgenelor, ── este reprezentat de promotorul ales pentru a
controla transcripţia.
Datele prezentate în Figura 3 ── indică prezenţa a câte unei copii a
promotorului constitutiv 35S (P-35S) de la CaMV, ── sau a unui promotor
derivat din acesta, într-un număr ridicat de plante transgenice comerciale.
Din acest motiv, P-35S este des utilizat ca ţintă pentru screeningul
OMG-urilor.
Compararea secvenţelor promotorului P-35S prezent în diferite OMG-
uri a evidenţiat faptul că acestea nu sunt perfect identice ── (ex. Morisset et al.,
2009).
Trebuie menţionat de asemenea că dintre cei 29 de promotori utilizaţi
în transgeneză, 20 erau prezenţi doar în câte un eveniment de transformare.
35
Peste 40 de gene distincte au fost utilizate pentru obţinerea
evenimentelor de transformare ── (Figura 4).
Transgena cea mai frecvent utilizată este npt II, provenită de la specia
E. coli.
Aceasta conferă rezistenţă la anumite antibiotice aminoglicozidice,
fiind prezentă în 1996, în 61% din plantele MG analizate. Conform sursei
menţionate anterior, doar 44% din plantele transgenice conţineau această genă.
După npt II, cele mai frecvente transgene sunt cele denumite generic
„Cry”.
Această categorie include foarte multe variante optimizate ale genelor
native de la Bacillus thuringiensis, ── care produc forme diferite ale endotoxinei
delta.
Dintre genele Cry, cele utilizate sunt formele Cry 1A(b) şi Cry 3A.
După nptI I şi Cry urmează genele CP 4 EPSPS şi bar, prezente fiecare în peste
zece evenimente de transformare.
În Figura 5 ── sunt prezentaţi terminatorii utilizaţi, menţionându-se
originea şi numărul OMG-urilor în care au fost utilizaţi.
36
Fig. 4. Frecvenţa utilizării transgenelor în plantele de cultură
transgenice autorizate pentru comercializare înainte de 2003.
37
Biotehnologiile moderne reprezintă sectorul asociat şi stemului
medical şi agroalimentar cu cea mai rapidă dezvoltare, ── iar transgeneza are
potenţialul de a revoluţiona în continuare aceste segmente, dar şi de a produce
efecte negative asupra mediului şi sănătăţii ─ (Pretty, 2000).
Există aproximativ 2.000 de companii în SUA şi peste 700 în UE ──
care îşi desfăşoară activitatea în domeniul biotehnologiilor, majoritatea aplicaţiilor
fiind însă destinate sistemului sanitar.
În sectorul agro-alimentar piaţa este dominată doar de câteva
companii multinaţionale ── (ex. Monsanto, Syngenta Seeds, Aventis
CropSciences, DuPont, DOW AgroSciences, Bayer Crop Science sau Pioneer Hi-
Bred), unele fiind lideri şi pe piaţa de material semincer şi pesticide ─ (Pretty,
2000).
Majoritatea plantelor transgenice comercializate în momentul de faţă
prezintă cel puţin una dintre următoarele caracteristici ── (James, 2007; James,
2005; Ponti et al., 2005; James, 2003; Querci et al., 2004a; Pretty, 2000):
rezistenţa la un ierbicid total ── (ex. soia, sfecla de zahăr şi
bumbacul Roundup Ready sau rapiţa Liberty Link); permite utilizarea
ierbicidului pentru combaterea buruienilor fară a afecta cultura; ──
reprezintă cea mai răspândită caracteristică a PMG-urilor;
rezistenţa la insecte, ── în special în cazul porumbului şi a
bumbacului, prin expresia unei gene de la Bacillus thuringiensis (rezistenţă
de tip Bt); ── toxina Bt cu acţiune insecticidă este exprimată în toate
tesuturile plantei, eliminând insectele erbivore şi reducând necesitatea
aplicării pesticidelor convenţionale.
39
sfeclă de zahăr, două la cartof şi unul la orez) ─ (Comisia Europeană, 2009;
GMO Compass, 2009).
Date actualizate referitoare la situaţia procesului de autorizare,
compania notificatoare şi modul de utilizare pot fi accesate pe site-ul Comisiei
Europene ── (vezi Comisia Europeană, 2009) şi pe site-ul GMO Compass (vezi
GMO Compass, 2009).
40
Fig. 7. Situaţia principalelor culturi transgenice.
(a) Evoluţia suprafeţelor (milioane ha) cultivate cu principalele plante transgenice;
(b). Rata de introducere în cultură a culturilor transgenice. ── Sursă: James
(2016).
41
Conform datelor prezentate, în 2005, ── culturile de soia Roundup
Ready ocupau o suprafaţă de circa 86.000 ha, preconizându-se că suprafaţa va
ajunge la 126.000 ha spre sfârşitul anului 2006, ceea ce reprezenta aproximativ
10% din suprafaţa agricolă totală a ţării.
În perioada respectivă, existau peste 1.100 de cultivatori de soia
transgenică, răspândiţi în 31 de judeţe ale ţării, ── cele mai importante suprafeţe
fiind localizate în Brăila (~31.000 ha), Călăraşi (~24.000ha), Ialomiţa (~20.000
ha), Timiş (~17.000 ha) şi Iaşi (~6.000 ha).
Au fost de asemenea identificate peste 4.000 ha de culturi neautorizate
de soia MG. Pentru acelaşi an, recoltade soia transgenică a fost estimată la
aproximativ 200.000 t.
42
1.1.6. Impactul potenţial al PMG-urilor
Nici una dintre aceste opinii nu poate fi însă corectă ── din simplul
considerent că PMG-urile nu reprezintă o categorie omogenă, punerea în balanţă a
beneficiilor şi riscurilor trebuind făcută pentru fiecare caz în parte ── (Pretty,
2000).
Este de asemenea foarte important ca utilizarea la scară largă a PMG-
urilor să se facă după o evaluare judicioasă, ── existând numeroase exemple ce
evidenţiază oportunitatea acestei abordări: ── introducerea iepurilor în Australia,
introducerea albinei africane în America de Sud, introducerea zambilei de apă
43
(Eichhornia spp.) în America de Nord şi Africa de Vest, introducerea răchitanului
(Lythrum salicaria) în Noua Zeelandă şi America de Nord.
44
Implicaţii tehnice pentru practica agricolă
45
Totuşi, pentru ca fermierii să poată beneficia de pe urma culturilor
transgenice, ── este necesară existenţa unui sistem instituţional capabil să
asigure şi să favorizeze accesul acestora la resursele şi inovaţiile potrivite.
Fluxul de gene
Dintre toate riscurile asociate PMG-urilor, acesta este probabil cel mai
important deoarece urmările sale sunt ireversibile şi dificil de controlat ──
(Duke şi Cerdeira, 2005).
În procesul de modificare genetică se utilizează ca markeri pentru
selecţie ── gene de rezistenţă la antibiotice.
47
Odată introduse în mediu şi alimentaţie, genele pot fi preluate de
bacterii, ── ducând la apariţia microorganismelor rezistente la antibiotice
(“superbugs”) care nu vor mai fi controlate eficient de sistemul medical ─
(AgResearch, 2000b; Pretty, 2000; MAF,1996).
48
prezenţa lor în acelaşi ecosistem ── existând un număr foarte mare de factori
care influenţează introgresia.
49
Această valoare reprezintă 22% din piața mondială a produselor de
protecție a culturilor în valoare de 73,5 miliarde USD în 2016, ── și 35% din
piața mondială a semințelor comerciale de 45 de miliarde USD.
Veniturile globale estimate la poarta fermei a produsului comercial
"recoltat" (biotehnologice și alte tipuri de produse recoltate), ─ sunt mai mult de
zece ori mai mari decât valoarea singulară a semințelor biotehnologice utilizate în
fermă.
De aceea, ultimii ani, în special după anul 2008, s-au remarcat printr-o
creştere semnificativă a utilizării PMG-urilor în ţări sărace sau în curs de
dezvoltare ── (James 2009a; James 2009b; James, 2008).
În cazul ţărilor în curs de dezvoltare se remarcă o activitate intensă din
partea sistemelor naţionale de cercetare în domeniul biotehnologiilor agricole ──
(FAO, 2002).
52
Se doreşte însă tot mai mult dezvoltarea aplicaţiilor în sectorul public,
atât în cazul statelor dezvoltate ── (ex. SUA, Australia, Rusiasau UE), ─ cât
şi al celor în curs de dezvoltare ── (ex. China, India, Brazilia, Argentina, Mexic
sau Africa de Sud şi alte ţări din Africa), ─ ca o măsură de contracarare a
influenţei şi controlului companiilor multinaţionale şi în vederea favorizării
agricultorilor săraci.
Ca mulţi alţi autori, Duke şi Cerdeira (2005) ── subliniază
variabilitatea în timp şi spaţiu a riscurilor şi beneficiilor asociate utilizării PMG-
urilor.
De asemenea numeroase studii au arătat că biotehnologiile agricole
generează o serie de efecte negative, fără însă a aduce beneficii substanţiale.
Biodiversitatea
53
Oponenţii biotehnologiilor ── promovează însă ideea că
introducerea OMG-urilor în mediu va afecta biodiversitatea şi astfel
sustenabilitatea vieţii.
54
Avantaje pentru sistemul sanitar
Vaccinarea clasică reprezintă o strategie foarte scumpă pentru ţările
sărace.
O alternativă mult mai ieftină şi uşor de aplicat o constituie
producerea vaccinurilor în plante ── (Checkbiotech, 2005).
55
Aceste riscuri sunt discutate pe larg în numeroase articole sau rapoarte
oficiale ── (ex. Deisingh şi Badrie, 2005, SOT, 2003, Pretty, 2000, Altieri şi
Rosset, 1999, sau Pretty, 1998).
57
Inovaţiile tehnologice din ultimii ani, bazate sau nu pe transgeneză,
── nu reprezintă însă soluţia cea mai eficientă pentru această problemă datorită
preţului ridicat de achiziţie ─ (Pretty, 2000).
Cele mai potrivite tehnologii sunt cele simple, ieftine şi bazate pe
principii agro-ecologice cu impact redus asupra mediul înconjurător ─ (Pretty,
2000; Altieri şi Rossett, 1999).
Nu se sugerează prin aceasta că agricultura ecologică reprezintă o
soluţie mai bună, ── aceasta fiind deja utilizată în regiuni din Africa, Asia şi
America Latină, dar fără a reuşi însă să acopere necesarul de hrană.
Unul dintre cele mai evidente exemple de acest fel este termenul
„Frankenfood”, inventat de Paul Lewis încă din 1992 (Wikipedia, 2009i), ──
care a devenit un laitmotiv al opoziţiei faţă de PMG-uri şi de alimentele derivate
din acestea.
60
Concluzie
61
1.2. MONITORIZAREA OMG-URILOR
Acestea sunt:
Regulamentul 1829/2003 al Parlamentului European şi al
Consiliului din 22septembrie 2003 ── privind produsele alimentare şi
furajele MG;
Regulamentul 1830/2003 al Parlamentului European şi al
Consiliului din 22septembrie 2003 ── privind trasabilitatea şi etichetarea
OMG-urilor şi trasabilitatea alimentelor destinate alimentaţiei umane sau
animale, produsedin OMG-uri, şi de modificare a Directivei 2001/18/CE.
64
Cele două regulamente, intrate în vigoare din 18 aprilie 2004,
introduc, ca elemente principale, ── reglementări referitoare la 1.etichetare,
2.trasabilitate şi 3.autorizarea evenimentelor de transformare pentru
comercializare.
65
Tot aici, precum şi Anexa I a Regulamentului 641/2004, ── se
stipulează obligativitatea aplicantului de a pune la dispoziţie, în cadrul dosarului
pentru obţinerea autorizaţiei, o metodologie validată de detecţie şi cuantificare a
evenimentului de transformare, precum şi materiale de referinţă corespunzătoare.
71
Acest tip de strategie este aplicat şi în cazul laboratorului CERT-OMG
al USAMV Cluj-Napoca, ── de aceea etapele analitice, metodele şi procedurile
implementate în cadrul acestuia şi descrise în prezenta lucrare, urmează
recomandările şi liniile directoare stabilite sau acceptate la nivelul spaţiului
comunitar.
72
73
Fig. 8. Succesiunea etapelor analitice în cadul metodologiei integrate de testare
OMG. ─ După Querci (2004), modificat.
75
Acest aspect este important deoarece majoritatea bunurilor alimentare
de larg consum sunt caracterizate printr-un grad mediu sau înalt de procesare.
Cel mai ridicat grad de specificitate îl conferă cea de-a doua categorie
care constituie astfel secvenţele ţintă ideale pentru protocoalele de identificare a
unui eveniment de transformare.
76
Necesitatea cuantificării conţinutului MG dintr-o probă a determinat
introducerea metodelor ce permit obţinerea unor informaţii cantitative, ── cea
mai utilizată tehnică în acest scop fiind amplificarea real-time PCR ─ (Reiting et
al., 2007; Kubista et al., 2006).
77
1.2.3. Decizia de etichetare pe baza rezultatelor testării OMG
78
Fig. 9. Etichetarea nu este necesară deoarece conţinutul materialului transgenic,
la nivel de ingredient (soia, respectiv porumb),
este sub pragul de 0,9%. ─ După Weighardt (2004).
79
În cazul în care un produs conţine mai multe evenimente de
transformare derivate din acelaşi taxon, pentru compararea cu pragul de 0,9%
proporţiile acestora sunt luate în considerate împreună ── (Figura 10).
80
81