Curatirea enzimtica ( numita si “ biocuratire “ de la englezescul “ bioscouring “) prezinta
numeroase avantaje ,cum ar fi : -consumul redus de apa ; -nu degradeaza fibra de bumbac ; -genereaza o hidrofilie buna ; -nu polueaza apele reziduale; -enzimele sunt biodegradabile; -procesele sunt usor de condus si controlat ; -tuseul mai bun Tipurile de enzime ce se pot utiliza in curatirea enzimatica (bioscouring) sunt : enzime ce hidrolizeaza oxizii si polizaharidele : Pectinaze – care actioneaza asupra pectinelor din fibra de bumbac . Pectinele sunt polizaharide homo sau heteropolzaharide linare sau ramificate ce au la baza in special , acid galacturonic . Lantul principal este compus din resturi de acid galacturonic liniar legate impreuna prin legaturi -1,4 ( acid poligalacturonic sau acid pectic). Pectina are un acid pectic estereficat cu alcool metilic . De asemenea , grupele hidroxil libere din lantul acidului pectic pot fi acetilate si apoi pot fi puncte de ramificare pentru lanturile altor zaharuri . De aceea , degradarea pectinei din bumbac necesita o mare varietate de enzime care hidrolizeaza legaturile - 1,4; -1,3; si - 1,6 ale pectinelor si de asemenea legaturile esterice di ramificatiile acesteia . Fie ca sunt de origine vegetala sau de origine bacteriala , pectinazele au mai multe denumiri si anume : - pectinaze ; - pectin liaze , pectin metil esteraze ,pectin esteraze , poligalacturonazele . In functie de modul lor de actiune , pectinazele poarta urmatoarele denumri chimice : poli ( 1,4- -D-galacturonid) glcohidrolaze ; poli( 1,4 - -D-galacturoid)liaza pectilhidrolaze Comsia de Enzimologie a incadrat pectinzele in urmatoarele clase : pectin metilesteraze – actioneaza asupra metil esterului din acidul poligalacturonic ; pectin liaze – taie acidul pectic si pectina prin -eliminare, despicand legatura glicozidica fara aditia apei . liazele sunt de tipul ando respectiv exo-liaze. Pectin poligalacturonaze – care hidrolizeaza acidul poligalacturnic producand oligomeri ; Celulaze – actioneaza asupra ligninei dar si asupra celulozuzei .Ele mai poarta si denumirea de Cytose sau Lichinase . Celuloza catalizeza endohidroliza legaturilor 1,4- - glicozidice din celuloza si din alte polizaharide cu legaturi Aceasta enzima se obtine in general din surse bacteriale .
enzime ce hidrolizeaza esteri
Pectaze –actioneaza asupra pectinelor . Se mai numesc si Lipaze , Steapsina, Tributiraza sau Triacilglicerol acil-hidrolaza .Lipaza efectuiaza hidroliza legaturilor esterice din trigliceride , care sunt componente ale grasimilor ( trigliceridelor) . Actioneaza numai la interfata apa-lipda , ceea ce scoate in evidenta importanta emulsionarii prealabile a acestora di urma . Ataca preferential legaturile de la capatul catenei propanice ale glicerinei . Preparatele comerciale pot avea origine animala ( cele provenite din extrase pancreatice ) origine vegetala ( extrase din boabe de ricin ) sau origine mcotica (culturi din miceli). Principala particularitate a acestei enzime este aceea ca actioneaza asupra unor substante emulsinate ( esteri ai glicogenului sau ai altor acizi grasi cu catena lunga ) , viteza initiala de reactie fiind in functie de numarul de molecule de enzima adsorbita la interfaza . Se observa ca enzimele folosite pentru curatirea enzimatica a bumbacului sunt de fapt niste hidrolaze . Clasa hidrolazelor reuneste enzimele care catalizeaza reactiile de hdroliza , adca de scindare a substratelor cu formare de compusi mult mai simpli si cu aditionarea elementelor apei. Reactia catalizata presupune ruperea unei legaturi covalente C-O , C-N , C-C ,etc din cadrul structurii substratului ,in prezenta apei: C-X + H 2 O =C-OH + X-H Reactiile catalizate de hidrolaze sunt teoretic reversibile , dar in cele mai multe cazuri echilibrul este deplasat in sensul scindarii hidrolitice. Reactiile inverse , de sinteza , sunt realizate prin secvente metabolice . Enzimele folosite in operatia de curatire enzmatica catalizeaza nu numai scindarea hidrolitica a unui substrat ci si tranferul gruparii clivate la o molecula acceptor. Aceste hidrolaze ( ce actioneaza asupra legaturilor esterice , gliciilice , peptidice , amidice ) , pot fi considerate a cataliza reactii de transfer , in care molecula acceptor este apa . 1. Procedee de biocuratire cu pectinaze Firma Novo Nordisk sugereaza pentru biocuratirea materialelor din bumbac urmatoarele tipuri de enzime: - Pectinaze; - Glucanaze; - Esteraza; - Proteaze Dintre acestea , pectinazele confera efecte de curatire comparabile cu cele ale curatirii alcaline , o buna hidrofilie si o distructie minima a suportului textil . Tratamentele cu pectinaze se pot efectua fie la pH neutru fie la pH alcalin , ifunctie de tipul enzimei folosite . Mecanismul biocuratirii fibrei de bumbac cu ajutorul pectinazelor ( indiferent de pH-ul la care se lucreaza ) este prezentat I fig. de mai jos .
Fig. 1.
Se observa ca pectinaza ataca pectinele situate I peretele primar alcelulozei si catalizeaza
hidroliza acestora . Produsele de hidroliza si alte substante rezultate din acelasi perete sunt eliberate iar enzima devine libera si apta de a participa la un nou atac . Acest proces se repeta pana cand cantitatea de pectine din peretele bumbacului se epuizeaza . Eficienta pectinazelor nu tine cont de forma de prezentare a materialului textil ( fibre , tricot , tesatura ) ca fiind la fel de buna pentru toate trei . Biocuratirea fibrelor de bumbac cu pectinaze Tratarea fibrelor de bumbac cu trei pectinaze diferite a condus la o pierdere in greutate , ceea ce reprezinta cantitatea de pectina eliminata tab .1
Nr. crit. Denumirea enzimei Reteta Pierderea in greutate
Multifect Pectinase PL Masa probei=0,2 g; 1 (sau Aspergillus niger) Conentratia=0,025% 2,6 Durta = 2ore
2 Pectinase P3026 Masa probei=0,2g;
( Aspergillus Japonicus) Concentratia=0,0067% 1,64 Cu o activitate de 4IU Durata =10 min 3 Pectinase P9179 Masa =0,2g; ( Aspergilus niger) Concentratia=0,00175 1,9 Cu o activitate de 4IU Durata=10 minute Tabelul1. Eficienta pectinelor in biocuratirea fibrelor de bumbac.
Din tabel se observa ca activitatea enzimelor este exprimata in IU ori 1 IU pectineaza
reprezinta ca o unitate de enzima va elibera 1 mol acid galacturonic si acizi poligalacturonici pe minut , la pH=4 ( pentru Pectinase P9179) sau la pH=5,5 ( pentru Pectinase P3026). Acest lucru nu este valabil si pentru Multifect Pectinase PL.
2 Biocuratirea cu pectinaze a tricotului din bumbac
Biocuratirea cu pectinaze intr-un mediu neapos, bazat pe un sistem micelar reversibil are ca rezultat indepartarea pectinelor intr-o proportie aproximativ egala cu a unui tratament de curatire alcalina clasica. Eficienta tratamntului cu pectinaze este ilustrata si de imaginile realizate cu ajutorul microscopului electronic .
Fig .2 Aspectul de suprafta al fibrelor de bumbac curatite cu sau fara pectinaze
In fig . de,ai sus se observa ca in stadiul netratat , intreaga suprafata a fibrei de bumbac este acoperita pe peretele primar ( cazul a) . Tratamentul in sistem micelar reversibil fara enzima ( cazul b) inlatura cva din perete primar dar nu se expune evident peretele secundar spiralat insa, tratamentul efectuat in acelasi sistem neapos ( sistem micelar revrsibil ) dar in prezenta unei cantitati mici de pectinaza (cazul c) inlatura complet peretele secunda. Acelasi lucru se observa si in cazul curatirii alcaline clasice ( cazuld) ceea ce conduce la concluzia ca acest sistem de lucru (sistem micelar reversibil + pectinaze) conduce la o completa curatire , cu rezultate similare cu cele obtinute in curatirea alcalin conventionala . Masurarea cantitativa a eficientei biocuratirii este posibila prin analizarea cantitatii de substante pectice reziduale care este echivalenta cu cantitatea de albastru de metilen adsorbita la echilibru, de catre substrat , la temperatura de 70 0 C . Aceasta metoda se bazeaza pe conceptul ca adsorbtia cationului colorantului albastru de metil de catre anionul carboxil al pectinei ( din proba de bumbac ) ar descreste in fuctie de concntratia acidului D- galacturonic , datorita hidrolizei enzimtice. Compararea performantelor tratamentelor enzimatice cu cel ale tratamntelor alcaline conventionale este prezentata in fig. 5.8 care ilustreaza o descrestere a canitati de colorant . Albastru de metil , sorbit de probele curatite , pe masura ce creste timpul. Desi procesul de biocuratire ajuge intr-un timp mai mare la o valoare constanta , ambele procese ating , in cele din urma , o valore in jur de 0,5 . Acest lucru demonstreza ca substantele pectice din probele de bumbac au fost indepartate in ambele procese .
3 Biocuratirea tesaturilor din bumbac
Pentru biocuratirea tesaturilor cele mai indicate sunt pectinazele acaline. Aceste enzime au avantajul ca sunt rezistente in conditii puternic alcaine , chiar si in prezenta surfactantilor sau a sechestrantior. Cercetari efectuate pe tesatura demonstreaza nu numai un procent mare de pectina eliminata dar si o poluare mai mica a apelor uzate , datorita unor valori COD (Chemical Oxygen Demand=consumul chimic de oxigen ) mai mici decat cele ce corespund unei curatiri alcaline clasice . Evidentierea pectinelor ramase in bumbac dupa curatirea acestuia este posibila cu ajutorul testelor de colorare ( testul cu Ruthenium Red sau cu Rosu Congo – ce indica schimbarile aparute la nivelul structurii celulozei adica indica cantitatea de pectine si proteine reziduale in functie de intensitatea culorii sau patarii ) sau a testului de adsorbtie ( atat testul determinarii adsorbtiei prin scufundare cat si testul cu picatura de apa adsorbita – indica prezenta unor cantitati mici de ceruri si pectine ramase in tesatura dupa un tratament de curatire ). In anul 1999 firma Novo Nordisk a produs o pectinaza alcalina numita Bioprep TM 3000L . Aceasta enzima actioneaza in mod optim la pH=9,2 , temperatura =60 0 C . Este compatibila cu surfactantii neionici ( 0,4 g/l) si cu substantele folosite pentru mentinerea constanta a ph-ului de genul fosfatului de sodiu de concentratie 0,02 M.Dupa un tratament cu Bioprep TM 3000L de 1000 APSU / ml activitate (o unitate APSU este o masura a capacitatii enzimei de a descreste vascozitatea solutiei de pectat de sodiu , la pH=10), timp de 5-10 minute se obtine o reducere substantiala a continutului rezidual de pectina dar si o completa udare , intr-un timp foarte mic. Fig . 5,9 . indica dependenta continutului de pectina reziduals [%] de concentratia enzimei si de tipul de tratare .
conduce la o scadere a continutului de pectine ramase in fibra de bumbac . Cresterea duratei de biocuratire determina de asemenea o indepartare cat mai mare a pectinelor . In urma tratamntelor cu Bioprep TM 3000L se modifica considerabil si capacitatea de adsorbtie a materialului in sensul imbunatatirii ei . Acest lucru este reliefat in fig 5.10 . Se observa ca odata cu cresterea concentratiei pectinazei si a duratei de tratare areloc scaderea timpului necesar udarii si adsorbtiei apei de catre aterialul textil. Timp mic de udare semnifica o capacitate de udare buna , deci un procent important de ceara a fost indepartata.