SEPARAŢIA ÎN CHIMIA

ANALITICĂ

Succesului in orice determinare

de control a alimentelor !!!!
1
Scopul metodelor de separaţie:

 împărţirea unui amestec eterogen sau omogen în unităţi

individuale

PRETRATAMENT DE TIP PURIFICARE

AL PROBEI !!!!

2
Criterii pentru alegerea metodei de
separatie:

 mediul in care are loc separatia

 speciile pe care dorim să le separăm

 cunoaşterea caracteristicilor speciilor pe care dorim

să le separăm

3
Metode de separare - Clasificare

4
Separare prin extracţie
 Principiu - o substanţă A, solubilă în doi solvenţi (faze)
nemiscibili, S1 şi S2 se va distribui între două faze
nemiscibile astfel incât, la echilibru, raportul între
concentraţiile solutului în cele două faze, la o temperatură
dată, va fi constantă, cu condiţia ca solutul să aibă
aceeaşi masă moleculară în fiecare fază.

K = [S2] / [S1]

K este coeficientul de repartiţie (de distribuţie)

5
Tipuri de separaţii prin extracţie la alimente

 Substanţe anorganice

 Substanţe organice

6
Exemple
 Substanţe anorganice
 Extractia in mediu apos a NaCl (determinarea
sarii)
 Extractia in mediu apos a nitritilor

7
 Substanţe organice

1. Substanţe organice volatile

2. Substanţe organice solubile
 2.1 Extracţie în fază lichidă
• 2.1.1.o faza - procedeu diacontinuu
- procedeu continuu (extracţie Soxhlet)
• 2.1.2 două faze
 2.2 Extracţie în fază solidă
• EFS (SPF)
• MEFS (MSPF)
• EABM (SBSE)
8
1. Substanţe organice volatile

 Pe fază solidă → toxicii volatili din aer

Cei mai utilizaţi adsorbanţi sunt:

 polimeri poroşi: spumă poliuretanică, Tenax
(2,6 –difenil-p-fenilen oxid)
 diferite varietăţi de cărbune

 adsorbanţi anorganici cum sunt silicagelul şi

alumina

9
2. Substanţe organice solubile
 2.1Extracţie în fază lichidă - discontinuu
• 2.1.1 - o faza - procedeu discontinuu (agitare cu solvent)
 Simpla
 Asistata de micrunde sau ultrasunete
 Extracţia cu fluide în stare supercritică

• Se foloseste: apa, solventi organici

Aplicatii – separarea acizilor organici, a compusilor fenolici
Extractie cu microunde

Extractie cu ultrasunete
10
Extracţia cu fluide în stare supercritică

 punctul critic (punctul triplu) corespunde

valorii de temperatură şi presiune de
vapori la care substanţa este în
echilibru între stările de agregare,

 pot fi utilizate următoarele fluide: CO2,

NH3, N2O, pentan.

 Se folosesc cantităţi de 1 g probă de

medicamente, polimeri, probe biologice
sau de mediu.

 Aplicatii:
 separarea pesticidelor din grăsimea de
pui sau sol şi sedimente
 separarea aromelor din coaja de lămâie.

11
2.1 Procedeu continuu (extracţie Soxhlet)

Extracţia Soxhlet clasică

1 – baghetă de agitare
2 – balon cu solvent
3 – tub(cale) pentru distilare
4 – extractor
5 - cartuş cu probă
6 – robinet de sifonare
7 – ieşire de sifonare
8 – adaptor
9 – refrigerent
10 – intrare apă de răcire
11 – ieşire apă de răcire

Aplicatii: extragerea grasimii pentru:

- Continut grasime, %
- Izolare contaminanti lipofili: PCB, dioxine, POC 12
Extractor Soxhlet automat

13
 2.1.2 Extracţie în fază lichidă - două faze

 Extracţia lichid-lichid
- separarea prin repartizarea probei între două faze lichide
nemiscibile

apa [caracter hidrofil (polar)] + solvent organic [caracter lipofil (nepolar)]

Cei mai utilizaţi solvenţi în extracţia lichid – lichid sunt:

•solvenţi apoşi: apă pură, soluţie acidă, soluţie bazică;
•solvenţi organici nemiscibili cu apa: hidrocarburi alifatice
(hexan, izooctan, eter de petrol), dietil eter, clorură de
metilen, cloroform, acetat de etil, cetone şi alcooli alifatici
>C6, toluen, xilen;
14
Caracteristici pt solvenţii organici utilizaţi în
extracţie :
 să aibă solubilitate mică în apă (<10%);
 să fie volatil pentru a se îndepărta uşor;
 să fie compatibil cu metoda de analiză la care se va
supune compusul separat;
 să fie selectiv în raport cu specia separată;
 să fie de puritate înaltă, în concordanţă cu metoda de
analiză ce se va aplica ulterior.

Inconveniente (aplicarea clasică):

 laborioasă, consumatoare de timp ;
 cantităţi mari de solvenţi organici (recuperare);
 dificil de automatizat
15
 EXTRACŢIE LICHID-LICHID –palnii de separare

Extracţie lichid-lichid în pâlnii

16
succesive
SCHEMA EXTRACŢIEI LICHID-LICHID

17
Aplicatii – constituenti majori si minori ai
alimentelor
 Extracţia acizilor graşi cu heptan, izopropanol, acetonitril, hexan sau
alţi solvenţi nepolari;

 Extracţia unor coloranţi sintetici şi naturali din alimente; cei

hidrosolubili au fost extraşi cu apă iar cei liposolubili cu diclormetan;

 Extracţia unor conservanţi alimentari cu metanol sau dietil eter;

 Extracţia antioxidanţilor fenolici tip BHA şi BHT din alimente cu

acetonitril/propanol;

 Extracţia unor vitamine şi carotenoide din alimente cu eter etilic şi

metanol.

18
Aplicatii – contaminanti chimici
 extracţia compuşilor fenolici din apă cu diclormetan iniţial
în mediu bazic, apoi în mediu acid
 extracţia ierbicidelor ureice şi triazinice cu diclormetan
 extracţia pesticidelor organofosforice în principal cu
diclormetan dar şi cu alţi solvenţi mai puţin polari: n-
hexan, n-heptan sau cu cloroform, benzen, eter de
petrol/acetat de etil, etc.
 Extracţia pesticidelor carbamice cu diclormetan,
cloroform, eter etilic, acetat de etil;
 Extracţia pesticidelor organoclorurate si a
policlorbifenililor cu solvenţi nepolari: n-hexan,
diclormetan, heptan, eter de petrol;
 Extracţia hidrocarburilor aromatice policiclice cu hexan
sau diclormetan; 19
 2.2 Extracţie în fază solidă

 mai noua decât extractia lichid-lichid

 se bazează pe adsorbţia componenţilor

organici pe o fază staţionară solidă (similar cu
procesele descrise la cromatografia de lichide)

20
Extracţia în fază solidă se practică atunci
când se urmăreşte:

 concentrarea sau îmbogăţirea urmelor de compus

analizat;
 fracţionarea diferitelor clase de compuşi;
 îndepărtarea componenţilor care pot “otrăvi” faza
staţionară a aparaturii analitice utilizate în
determinare (cromatografele);
 desalifierea probei;
 schimbarea mediului de dispersie;
 derivatizare in situ;
 stocarea şi transportul probei.
21
Avantaje
 poate fi aplicată oricărui tip de probă care poate fi adusă în soluţie

 extracţia se bazează pe selectivitatea sorbentului

 fazele care asigură separaţia nu sunt miscibile

 o singură etapă de extractie poate asigura retenţia totală

(2-4 extrageri succesive pentru randamente de extracţie > 90% la
extractia liq/liq)

 eliminarea inconvenientului datorat formării emulsiilor

 volumele de solvent utilizate pentru eluare sunt incomparabil mai

mici decat la liq/liq
 eliminarea etapei de recuperare a acestuia
 scăderea posibilităţilor de impurificare prin intermediul solventului.
22
Tipuri de faze solide
 pe bază de silicagel şi cărbune, (40 şi
60 μm) acelaşi tip de faze solide ca şi
cele de la LC

 Cel mai utilizat material este Si-C18

 adsorbanţi hidrofili pe bază de oxizi

metalici
 bazici (MgO), Florisilul (pe bază de silicat
de magneziu)
 neutri (Al2O3) Alumina (oxid de aluminiu
hidratat
 acizi (TiO2).

 polimerii sintetici de tip acrilic,

polipropilenici, PTFE sau poliuretanici
23
Fisa tehnica Florisil
 Florisil® 100-200 Mesh

 CAS Number: 1343-88-0

 MW: 100.39
Linear Formula: MgO3Si
Particle Size: 100-200 mesh
Synonym: Magnesium Silicate

 Unique, highly selective adsorbent for Chromatography. Frequently referred to as a

magnesium silicate. Florisil® has become widely accepted in the analytical
chromatography field for the separation and isolation of a variety of compounds.

 Principal Applications
 General Column Chromatography
 Isolation of Steroids, Sex Hormones and Related Compounds
 Cleanup of Pesticide Residues
 Isolation of Antibiotics
 Separation of Lipids
24
Variante de extractie:

1. Extracţie în fază solidă (EFS) pe cartuş sau

discuri – Solid phase extraction (SPE);

2. Microextracţie pe fază solidă (MEFS) - solid

phase microextraction (SPME);

3. Extracţie prin adsorbţie pe bară magnetică

(EABM) – twister or stir bar sorbtive extraction
(SBSE).
25
Solid phase extraction SPE

26
Solid phase microextraction (SPME)

27
•uses coated fibers to extract and adsorb chemical compounds.
•After extraction, the fiber is inserted in the injection port of a GC/MS
where desorption and analysis occurs.
•SPME is fast and simple, with detection capabilities of parts per trillion
(ppt).

28
Twister / Stir Bar Sorptive Extraction SBSE
www.gerstel.com/images/tbe
•for the determination of organic analytes from aqueous samples; e.g.
PAH, pesticides, herbicides or phenols.
•The process was developed by UFZ Leipzig-Halle GmbH in close
cooperation with GERSTEL.

29
Sisteme de extracţie continuă pe fază solidă
Sursa: http://www.buchi.in/ şi www.gc-lc.ca/

30
Aplicaţiile extracţiei în fază solidă

 Mai ales în cazul probelor complexe ca şi conţinut şi matrice

(alimente si probele biologice)
 separarea barbituricelor
 reziduuri de pesticide şi dioxine
 cofeina
 diferiţi coloranţi şi conservanţi din băuturi nealcoolice,
 pesticide organofosforice şi organoclorurate din alimente de origine
vegetală şi animală.

 Determinări în domeniul analizei factorilor de mediu vizează

concentrarea probelor, în special de ape şi sol, pentru dozarea
ulterioară a eventualilor poluanţi urmăriţi.
 pesticide
 compuşi aromatici policondensaţi
 fenoli

 Microextracţia în fază solidă este mult utilizată în controlul

medicamentelor şi a poluanţilor din alimente. 31
Intrebari de verificare
1. Care este scopul metodelor de separație?
2. Ce criterii avem pentru alegerea metodei de separatie?
3. Dați cel puțin trei exemple de utilizare a tehnicilor cromatografice ȋn
separǎri la control alimente
4. Care este principiul separației prin extracţie?
5. Dați exemple de separație prin extracție a unor compuși anorganici din
alimente
6. Care sunt tehnicile de extracție a substanțelor organice ?
7. Cum se practicǎ extracția lichid-lichid a substanțelor organice?
8. Enumerați cel puțin trei aplicații ale extracției lichid-lichid ȋn controlul
alimentelor
9. Care sunt variantele de lucru la separația prin extracție ȋn fazǎ solidǎ?
10. Care sunt ajantajele extracției ȋn fazǎ solidǎ fața de extracția lichid-lichid
a substanțelor organice?
11. Enumerați cel puțin trei aplicații ale extracției ȋn fazǎ solidǎ ȋn controlul
alimentelor

32