Sunteți pe pagina 1din 9

Translated from English to Romanian - www.onlinedoctranslator.

com

Hindawi Publishing Corporation BioMed


Research International Volumul 2016, ID
articol 4290506, 8 pagini http://dx.doi.org/
10.1155/2016/4290506

articol de cercetare
Prevalența și rezistența antimicrobiană a Salmonella Izolat din
alimente de origine animală din Gondar, Etiopia

Mebrat Ejo,1 Legesse Garedew,2 Zabishwork Alebachew,3,4 și Walelgn Worku4

1Departamentul de Științe Biomedicale, Facultatea de Medicină Veterinară, Universitatea din Gondar, Gondar, Etiopia
2Departamentul de Microbiologie, Spitalul St. Paul Millennium Medical College, Addis Abeba, Etiopia
3Departamentul de Epidemiologie Veterinară și Sănătate Publică, Facultatea de Medicină Veterinară, Universitatea din Gondar, Gondar, Etiopia
4Institutul de Sănătate Publică, Colegiul de Medicină și Științe ale Sănătății, Universitatea din Gondar, Gondar, Etiopia

Corespondența trebuie adresată lui Mebrat Ejo; drmebrat@yahoo.com

Primit 12 iulie 2016; Revizuit la 18 noiembrie 2016; Acceptat la 23 noiembrie 2016

Editor academic: Ernesto S. Nakayasu

Copyright © 2016 Mebrat Ejo et al. Acesta este un articol cu acces deschis distribuit sub Licența de Atribuire Creative Commons, care
permite utilizarea, distribuirea și reproducerea fără restricții pe orice mediu, cu condiția ca lucrarea originală să fie citată corespunzător.

Salmonella s-a dovedit a fi cauza majoră a bolilor transmise prin alimente și o problemă gravă de sănătate publică în lume, cu o preocupare
tot mai mare pentru apariția și răspândirea tulpinilor rezistente la antimicrobiene. Un studiu transversal a fost realizat între februarie 2014 și
decembrie 2015 pe produse alimentare de origine animală pentru a evalua profilurile prevalenței și rezistenței antimicrobiene aleSalmonella
izolate folosind metode bacteriologice standard. Rata generală de prevalență de 5,5% a fost înregistrată din totalul alimentelor de origine
animală analizate.Salmonella au fost detectate izolate din 12% din carne crudă, 8% din carne tocată, 2,9% din probele de burgeri, 18% din
ouă crude și 6% din lapte crud. În plus, testul de susceptibilitate antimicrobiană a identificat 47,6% rezistențiSalmonellaizolate, 28,6% izolate
sensibile intermediar și 23,8% izolate sensibile. PrintreSalmonella izolatele testate, 42,6%, 28,6% și 14,3% s-au dovedit a fi relativ rezistente la
tetraciclină, sulfametoxazol-trimetoprim și, respectiv, ampicilină, în timp ce 9,5%-19% au fost rezistente intermediar la tetraciclină,
amoxicilină, ampicilină, nitrofurantocilină și nitrofurantocilină. . Prin urmare, constatările noastre oferă prevalența și rezistența la
medicamenteSalmonella din alimente de origine animală și să contribuie cu informații oamenilor de știință, precum și cercetătorilor în
domeniul sănătății publice, pentru a minimiza răspândirea și rezistența transmisă prin alimente. Salmonella specie din Etiopia.

1. Fundal Depozitarea necorespunzătoare a alimentelor, practicile


necorespunzătoare de igienă personală, răcirea și reîncălzirea inadecvate
Bolile alimentare sunt printre cele mai răspândite probleme de sănătate a alimentelor și un interval de timp prelungit între prepararea și
publică la nivel mondial din ultima vreme, iar implicația lor pentru consumul alimentelor au fost menționate ca factori care contribuie la
sănătate și economie este din ce în ce mai recunoscută [1, 2]. Potrivit apariția unui focar de salmoneloză la om [3, 5]. Ubicuitatea luiSalmonella
rapoartelor, în fiecare an, un număr mare de oameni suferă de boli izolatele creează un pericol persistent de contaminare în toate alimentele
transmise prin alimente în întreaga lume din cauza consumului de crude [5] și, de asemenea, în produsele alimentare de origine animală,
alimente și apă contaminate [2, 3]. O gamă largă de agenți patogeni care sunt adesea implicate în cazuri sporadice și focare de salmoneloză
joacă un rol în bolile de origine animală, dintre care majoritatea au o umană [2, 6]. Transmiterea alimentară este recunoscută drept cauza
origine zoonotică și au purtători la animalele alimentare sănătoase, de la majoră aSalmonella infecții, cu multe surse de alimente și provizii
care se răspândesc la o varietate tot mai mare de alimente de origine implicate în aceste infecții [2].
animală și sunt considerate vehicule majore ale infecțiilor transmise prin Rezistent la antibiotice Salmonella infecțiile atât la oameni, cât și
alimente [4] ]. Dintre agenții patogeni,Salmonellaeste considerat cel mai la animale sunt preocupări universale, în special în țările în curs de
răspândit agent patogen alimentar la nivel mondial [4, 5] și a fost dezvoltare, unde riscul de infecție este ridicat din cauza condițiilor
recunoscut de mult timp ca un microorganism zoonotic important cu de viață neigienice, a contactului strâns și a împărțirii caselor între
semnificație economică la animale și la oameni [5], predominant în țările animale și oameni [7] și tradițiile consumului de crudități sau
în curs de dezvoltare. Consumul de alimente crude sau nesigure, insuficient gătite. produse alimentare de origine animală. Există o
contaminare încrucișată, preocupare tot mai mare cu acest agent patogen din cauza
2 BioMed Research International

apariția și răspândirea tulpinilor rezistente la antibiotice și potențial Gondar. Eșantionarea aleatorie stratificată din unitățile de
mai patogene. Rezistent la antimicrobieneSalmonellaspp. au fost alimentație publică și un cadru de listă a locurilor publice au fost
izolate din diferite alimente de origine animală din întreaga lume, utilizate ca sursă de probă în funcție de accesibilitatea produselor
ceea ce se atribuie utilizării inadecvate a antimicrobienelor ca agenți alimentare de origine animală. În primul rând, am căutat unitățile de
terapeutici sau profilactici în medicina umană și veterinară, precum alimentație funcționale înregistrate în oraș, apoi am stratificat
și utilizării promotorilor de creștere în producția animală [8]. locurile publice în straturi (cafeteria, hoteluri, restaurante, patiserie
Salmonella tulpinile rezistente la diverși agenți antimicrobieni, în și magazine) și le-am folosit ca un cadru de eșantionare. Alimentele
special rezistente la fluorochinolone și cefalosporine de generația a studiate de origine animală au fost selectate în timpul mesei
treia, sunt considerate o problemă emergentă la nivel mondial [9], folosind o metodă simplă de eșantionare aleatorie în fiecare loc
având ca rezultat rate mai mari de morbiditate și mortalitate și public pe baze proporționale.
costuri generale mai mari ale tratamentului. Acest lucru poate
reprezenta un risc pentru sănătatea publică prin transferul de 2.3. Produse alimentare de origine animală.Un total de 384 de mostre de
rezistenteSalmonella tulpini la om prin consumul de alimente și alimente de origine animală au fost achiziționate de la restaurante,
produse alimentare contaminate. Cu toate acestea, sursele și căile hoteluri, cantine și magazine de patiserie și de vânzare cu amănuntul,
de transmisie aleSalmonellaîn țările în curs de dezvoltare sunt puțin inclusiv sandvișuri cu ouă, carne tocată și crudă, chifle de burgeri, brânză
înțelese din cauza lipsei sistemelor naționale coordonate de de vaci, tort cu cremă și pizza de vită. În plus, ouă crude și lapte
supraveghere epidemiologică [3]. pasteurizat și crud au fost cumpărate din supermarketuri și magazine cu
amănuntul. Unele dintre alimentele de origine animală ar putea să nu fie
Incidența transmisiei alimentare Salmonella infecțiile a considerate „gata pentru consum” în toate țările, deoarece ar defini „gata
crescut dramatic în Etiopia în ultimii ani. Studiile efectuate în pentru consum” ca fiind procesate, cum ar fi prin gătire la o anumită
diferite părți ale țării au demonstrat prezențaSalmonella la temperatură pentru siguranța alimentelor. Cu toate acestea, în Etiopia,
oameni [6, 10, 11] și la diferite animale și produse alimentare consumul de alimente crude de origine animală, cum ar fi carnea de vită
[10, 12–14]. În ciuda acestor încercări de a raporta prevalența și tocată și crudă, precum și laptele, este o practică comună. Ora prelevării
distribuțiaSalmonella spp. în unele produse alimentare, oameni probei a fost programată la începutul perioadei de servire (mic dejun,
și animale alimentare din Etiopia [10–12], problema acestui prânz sau cină). Pensele și lingurile sterile au fost folosite pentru a
agent patogen în alimentele de origine animală nu este încă transfera alimentele de pe farfuria de mâncare în recipientele de
bine cunoscută. Cu toate acestea, studiile efectuate în altă parte prelevare de probe. Probele colectate au fost identificate corespunzător
au indicat că alimentele de origine animală sunt surse după tipul probei, data recoltării și surse și transportate imediat la
importante deSalmonella, în special printre acei consumatori de laborator într-o cutie de gheață cu pachete de congelare în condiții
alimente crude. În Gondar, cel mai turistic oraș din Etiopia, nu complet sterile pentru analiza microbiologică [16].
există suficiente informații despre alimentația alimentară
Salmonella prevalență în diferite produse alimentare, cum ar fi 2.4. Izolarea și identificarea Salmonella.Metoda standard de
alimente de origine animală sau altele. Prin urmare, acest studiu cultivare recomandată de Organizația Internațională pentru
raportează prezențaSalmonella inclusiv profilurile sale Standardizare [16] a fost efectuată pentru izolarea și
rezistente la antimicrobiene în alimentele de origine animală din identificarea Salmonella. Pe scurt, 25 g din fiecare probă de
Gondar. alimente au fost cântărite și omogenizate într-o pungă sterilă
pentru stomacher (Stomacher 400R, Seward, Anglia) cu 225 ml
2. Materiale și metode de apă cu peptonă tamponată cu preîmbogățire timp de 2
minute. Proba neselectivă preîmbogățită, din fiecare probă de
2.1. Locația studiului.Studiul a fost realizat în Gondar, care aliment solid sau lichid, a fost amestecată bine și incubată peste
este situat în nord-vestul Etiopiei, la 740 km distanță de noapte la 37°C.∘C. După incubare, 1 mL de bulion de pre-
capitală, Addis Abeba. Orașul este unul dintre centrele îmbogățire a fost transferat la fiecare 10 mL de bulion de
istorice și turistice din Etiopia. Altitudinea orașului variază de tetrationat (Müller-Kaufmann, Oxoid, Anglia), pentru prima
la 1800 la 2200 de metri deasupra nivelului mării. Are îmbogățire selectivă a Salmonella creștere în timp ce inhibă alte
precipitații medii de 1000 de milimetri pe an. Temperatura microorganisme și incubat la 37∘C timp de 18-24 ore. În plus, s-
medie anuală maximă și minimă a orașului este de 30,7∘C și au adăugat 0,1 ml de bulion de pre-îmbogățire la 10 ml de
22∘C, respectiv, cu o medie generală de 26∘C. Orașul are bulion Rappaport-Vassiliadis (Oxoid, Anglia) pentru a doua
umiditate relativă variind de la 60% la 70% în timpul îmbogățire selectivă și s-a incubat la 41°C.∘C timp de 18-24 ore.
sezonului ploios și de la 30% la 40% în timpul sezonului Pentru izolareaSalmonella specii, fiecare colonie suspectată din
uscat. Populația umană a orașului este estimată la 214 000 mediu îmbogățit selectiv a fost întinsă pe plăci de agar cu xiloză
de locuitori [15]. În oraș, o serie de oameni sunt implicați în lizină deoxicolat (XLD) selectivă și incubată la 37°C.∘C timp de
afacerile de servicii publice, inclusiv micii fermieri care 18-24 ore. Salmonella coloniile suspectate din mediu de agar
furnizează animale de hrană și produse de origine animală XLD au fost placate pe plăci cu agar nutritiv (Oxoid, Anglia)
comunităților și abatorului. pentru a fi utilizate pentru confirmarea biochimică.

2.2. Proiectarea studiului și eșantionarea.Un studiu transversal a 2.5. Confirmarea biochimică a izolatelor.Fiecare colonie
fost realizat între februarie 2014 și decembrie 2015 pentru a identificată cu tipic Salmonella morfologia a fost confirmată
evalua prevalența Salmonella izolate și profilurile lor rezistente biochimic prin inoculare în agar cu trei zahăr fier (TSI),
la antibiotice din alimente de origine animală în bulion roșu de metil-Voges-Proskauer (MR-VP), indol
BioMed Research International 3

Tabelul 1: Salmonella prevalența produselor alimentare de origine animală.

Tipul eșantionului Numărul de probe testate Numărul de probe care au fost testate pozitiv (%)

Burger 35 1 (2,9)
Brânză de vacă 20 0 (0)
Tort cu crema 50 0 (0)
Sandviș cu ou 35 0 (0)
Carne tocată 25 2 (8)
Lapte pasteurizat 45 0 (0)
Pizza 24 0 (0)
Ou crud 50 9 (18)
Carne crudă 50 6 (12)
Lapte crud 50 3 (6)
Total 384 21 (5,5)

test, agar citrat Simmons, agar uree, agar lizină fier (LIA) și 3. Rezultat
mediu SIM și incubat la 37°C∘C timp de 18–48 de ore și
interpretat cu liniile directoare ale Organizației Internaționale 3.1. Prevalența.În acest studiu, 21 (5,5%) din 384 de eșantioane
pentru Standardizare [16]. s-au dovedit a fi pozitive pentru Salmonella spp. (Tabelul 1) prin
tehnica standard de cultură. Toate aceste izolate obținute din
2.6. Testarea sensibilității antimicrobiene.Testarea de probe pozitive au fost confirmate în primul rând cu ajutorul lui
susceptibilitate antimicrobiană fenotipică pe agar Mueller- Salmonella spp. creșterea și caracteristicile morfologice pe
Hinton (Oxoid) folosind metoda difuziei pe disc de agar [17] a medii selective și apoi cu teste biochimice (Tabelul S1 din
fost efectuată pentru a determina profilurile rezistente la Material suplimentar disponibil online la http://dx.doi.org/
antibiotice ale fiecărui izolat. Pe scurt, izolatele au fost crescute 10.1155/2016/4290506).Salmonella izolate au fost detectate din
într-o baie de apă agitată la 37°C∘C până la obținerea unui 6 (12%) din probele de carne crudă, 2 (8%) din probele de carne
standard de turbiditate McFarland de 0,5. Suspensia bacteriană tocată, 1 (2,9%) din probele de burgeri, 9 (18%) din ouăle crude
a fost apoi răspândită pe întreaga suprafață a plăcilor de agar și 3 (6). %) din probele de lapte crud. Cu toate acestea, brânză de
Mueller-Hinton și discuri cu antibiotice, inclusiv amoxicilină (20 vaci, prăjitură cu smântână, sandviș cu ou, lapte pasteurizat și
mg), ampicilină (10 mg), cefalotină (30 mg), ceftriaxonă (30 mg), probe de testare pentru pizza au fostSalmonellanegativ.
gentamicina (10 mg), acid nalidixic (30 mg). ), nitrofurantoină (30 Salmonella a fost recuperat mai frecvent din carnea crudă și
mg), sulfametoxazoltrimetoprim (30 mg) și tetraciclină (30 mg) ouăle crude decât din carnea tocată și/sau laptele crud. Dintre
au fost aplicate pe suprafața mediului și incubate la 37°C.∘C timp sursele de eșantionare, probele examinate din măcelărie și
de 18-24 ore. După incubare, diametrele zonei de inhibiție au magazine cu amănuntul cu o prevalență de 13%, respectiv
fost măsurate în milimetri și interpretate în conformitate cu 13,3%, au fost cele mai contaminate comparativ cu celelalte
ghidurile CLSI [17]. Tulpinile au fost evaluate ca susceptibile, (date neprezentate).
intermediare și rezistente. Un izolat a fost definit ca rezistent
dacă a fost rezistent la unul sau mai multe dintre 3.2. Profil de rezistență antimicrobiană.Proporția globală a
antimicrobiene.Escherichia coli ATCC 25922 a fost folosit ca testului de susceptibilitate la antimicrobiene și rezultatele
control al calității și tulpină standard. rezistenței antimicrobiene ale Salmonella spp. izolate din carnea
crudă, carnea tocată, ouăle crude și laptele crud sunt date în
2.7. Analize statistice.Analiza statistică a fost efectuată utilizând tabelele 2 și, respectiv, 3. Din totalul 21Salmonellaizolate supuse
SPSS Statistics 17 (SPSS Inc., SUA). Au fost aplicate statistici testului de susceptibilitate antimicrobiană folosind nouă
descriptive, cum ar fi frecvența, procentul și/sau proporția, antimicrobiene diferite, un total de 10 (47,6%) Salmonella
pentru a calcula datele colectate de la diferite alimente de Izolatele s-au dovedit a fi rezistente la unul sau mai multe
origine animală și rezultatele testelor de susceptibilitate (multimedicamente) dintre antimicrobiene, iar 6 (28,6%) izolate
antimicrobiană. au prezentat o sensibilitate intermediară la unul sau mai multe
antimicrobiene, iar 5 (23,8%) izolate au fost susceptibile la toate
2.8. Considerații etice.Permisiunea instituțională de a efectua antimicrobienele testate. TheSalmonella izolatul din proba de
acest studiu a fost obținută de la cercetare și de la comitetul de burger a fost susceptibil la toți agenții antimicrobieni testați. În
evaluare etică al Universității din Gondar, Etiopia. În plus, raport cu totalulSalmonella izolatele testate, 42,6%, 28,6% și
scrisoarea de susținere a cercetării a fost obținută de la 14,3% s-au dovedit a fi relativ rezistente la tetraciclină,
administrația orașului Gondar și biroul de sănătate, Etiopia. sulfametoxazol-trimetoprim și, respectiv, ampicilină, în timp ce
Confidențialitatea a fost asigurată prin utilizarea codurilor în 9,5%-19% au fost rezistenți intermediar la tetraciclină,
înregistrări. amoxicilină, ampicilină și cefalotinină.
4 BioMed Research International

Tabelul 2: Proporția generală a testului de susceptibilitate antimicrobiană între Salmonella izolate.

Test de sensibilitate antimicrobiană


Antimicrobiene
Susceptibil (%) Intermediar (%) Rezistent (%)
Amoxicilină (AML) 16 (76,2) 3 (14,3) 2 (9,5)
Ampicilină (AMP) 15 (71,4) 3 (14,3) 3 (14,3)
Cefalotina (KF) 16 (76,2) 4 (19) 1 (4,8)
Ceftriaxonă (CRO) 21 (100) 0 0
Gentamicină (CN) 19 (90,5) 0 2 (9,5)
Acid nalidixic (NA) 19 (90,5) 0 2 (9,5)
Nitrofurantoina (F) 15 (71,4) 4 (19) 2 (9,5)
Sulfametoxazol-trimetoprim (SXT) 15 (71,4) 0 6 (28,6)
Tetraciclină (TE) 10 (47,6) 2 (9,5) 9 (42,6)

Tabelul 3: Profilurile rezistenței antimicrobiene ale Salmonella izolate recuperate din alimente de origine animală.

Numărul de izolate rezistente din probele alimentare


Testat antimicrobian Total ( =10)
Carne tocată ( =1) Carne crudă ( =3) Ou crud ( =5) lapte crud ( =1)
Amoxicilină (AML) 1 (100) 0 1 (20) 1 (100) 3 (30)
Ampicilină (AMP) 0 0 1 (20) 1 (100) 2 (20)
Cefalotina (KF) 1 (100) 1 (33,3) 0 0 2 (20)
Ceftriaxonă (CRO) 0 0 0 0 0
Gentamicină (CN) 0 1 (33,3) 0 0 1 (10)
Acid nalidixic (NA) 0 0 2 (40) 0 2 (20)
Nitrofurantoina (F) 1 (100) 1 (33,3) 2 (40) 0 4 (40)
sulfametoxazol-
trimetoprim 1 (100) 1 (33,3) 2 (40) 0 4 (40)
(SXT)
Tetraciclină (TE) 1 (100) 3 (100) 4 (80) 1 (100) 9 (90)

nitrofurantoina. Analizând antimicrobienele individuale, a fost diferite studii. După cum au descris Padungtod și Kaneene [20] mai
observată frecvent rezistența la tetraciclină și sulfametoxazol- devreme, rata prevalenței poate varia, de asemenea, de la
trimetoprim, urmată de ampicilină, amoxicilină, gentamicină, experiment la experiment, de la țară la țară sau de la o zonă la alta
acid nalidixic și nitrofurantoină. Două izolate (20%) au prezentat dintr-o țară. Există multe surse potențiale prin care alimentele de
rezistență la un antimicrobian, în timp ce opt (80%) au fost origine animală pot fi contaminate; unii sunt în faza de preparare a
rezistente la două sau mai multe antimicrobiene testate (Tabelul alimentelor, iar alții sunt în mediul de preparare a alimentelor.
4). În general, testul de susceptibilitate antimicrobiană a arătat Câteva exemple de contaminare în timpul procesării și preparării
că ceftriaxona, gentamicina și acidul nalidixic erau produselor alimentare sunt depozitarea, spălarea și tăierea. Din
antimicrobienele indicate ca active împotrivaSalmonella spp. punct de vedere al sănătății publice, majoritatea sunt de origine
izolat de acest studiu. alimentarăSalmonella infecțiile sunt asociate cu alimente de origine
animală; cu toate acestea, investigațiile recente au identificat
4. Discutie fructele și legumele ca sursă de contaminare pentru alimente
Salmonella focare [21]. Vehiculele de transport și echipamentele de
În studiul de față, prevalența și modelele de rezistență procesare sunt, de asemenea, alte exemple de contaminare. Mediul
antimicrobiană ale Salmonella spp. au fost evaluate izolate din necurat, practicile neigienice de manipulare a alimentelor și sursele
alimente de origine animală. Studiul a relevat o rată generală de de apă din locurile publice sunt dovezi sugestiveSalmonella
prevalență de 5,5% (21 din 384) în produsele alimentare studiate. contaminarea postpreparare în acest studiu. Apa de calitate
Chiar dacă au existat câteva studii despreSalmonellaizolarea microbiologică necunoscută poate fi, de asemenea, un pericol
produselor alimentare în Etiopia [10, 12, 13], nu a existat o important pentru produsele alimentare [21].
uniformitate în ceea ce privește tipul de eșantion examinat; ca In prezent studiez, Salmonella contaminarea în probele de carne
urmare, prevalența globală aSalmonella în alimentele de origine crudă a fost de 12%, ceea ce a fost în strâns acord cu cea a lui Ejeta și
animală ar putea să nu fie comparabile. În analiza combinată, colab. [13], care a raportat 12% din mostre de carne crudă de vânzare cu
prevalența generală aSalmonella în acest studiu a fost mai mică amănuntul din Addis Abeba, Etiopia. În Etiopia, aproximativ 15% din
decât cea raportată în Thailanda [18], dar mai mare decât rapoartele probele de carne s-au dovedit a fi pozitive la nivel de vânzare cu
din Maroc [19]. Diferența ar putea fi tipul eșantionului și procedurile amănuntul. Dar descoperirea noastră a fost mai mică în comparație cu
de eșantionare și metodele de detectare utilizate pentru studiile efectuate în Senegal [22] și în Iran [23]. Însă
BioMed Research International 5

Tabelul 4: Distribuția rezistenței antimicrobiene între Salmonella spp. izolate de produsele alimentare.

Model rezistent Profiluri antimicrobiene Izolate rezistente Sursa de produse alimentare

Multirezistent la medicamente AMP, F, SXT, TE 1 Carne tocată


Multirezistent la medicamente AML, AMP, NA, TE 1 Ou crud
Multirezistent la medicamente KF, CN, SXT, TE 1 Carne crudă

Multirezistent la medicamente AML, AMP, TE 1 Lapte crud

Multirezistent la medicamente CN, SXT, TE 1 Ou crud


Multirezistent la medicamente F, TE 1 Carne crudă

Multirezistent la medicamente NA, SXT 1 Ou crud


Multirezistent la medicamente SXT, TE 1 Ou crud
Monorezistent la medicamente SXT 1 Ou crud
Monorezistent la medicamente TE 1 Carne crudă

Notă. AML: amoxicilină; AMP: ampicilină; KF: cefalotina; CRO: ceftriaxonă; CN: gentamicina; NA: acid nalidixic; F: nitrofurantoină; SXT:
sulfametoxazoltrimetoprim; TE: tetraciclină.

prevalenta a Salmonella în acest studiu este mai mare de 5% în Thailanda și echipamente sau contaminare încrucișată cu alte produse
[24]. Variațiile în prevalență s-ar putea datora probabil manipulării precum legume și fructe. Roșiile au fost indicate ca un
necorespunzătoare a cărnii, igienei personale a manipulatorilor de produs alimentar comun implicat în multeSalmonellafocare
alimente, curățării necorespunzătoare a ustensilelor de tăiat și posibilei [27]. Pe de altă parte, o alimentare neregulată cu apă a
contaminări încrucișate în măcelarii. Lucrătorii pot juca un rol majorității unităților de alimentație publică din această zonă
semnificativ în răspândirea contaminării în timpul vânzării cu amănuntul de studiu a îngreunat practicile de spălare și, în consecință,
și al pregătirii [14, 25]. Recent, Garedew et al. [25] a demonstrat că spălatul ustensilelor și cuțitelor a fost practicat rar [25].
igienizarea spațiilor de măcelărie și ustensilele și igiena personalului au La categoria ouălor crude am înregistrat o rată de contaminare
fost slabe în această zonă de studiu. Există riscul deSalmonella infecție de 18%. Diverse niveluri de contaminare au fost raportate de
dacă carnea este gătită necorespunzător și consumată crudă sau dacă numeroase studii la nivel mondial: 8% din ouă de găină în orașul
există contaminare încrucișată a Salmonella cu alte alimente care se Dhaka [28] și 24% în Nigeria [29]. În schimb, prezenta constatare a
consumă crude [21]. Studiul a sugerat, de asemenea, că contaminarea fost mai mare de 0,3% în Dhaka [30].Salmonellaprevalența de la ouă
încrucișată generală, contaminarea mediului și contaminarea în acest studiu ar putea fi explicată prin contaminarea mediului în
manipulatorului de alimente ar putea fi considerate o sursă comună de timpul depozitării și transportului și curățarea ineficientă a ouălor.
Salmonella de-a lungul pregătirii alimentelor. Salmonella infecția poate Mai mult, sistemul de management în practică ar putea fi și motivul
apărea prin contaminarea încrucișată a cărnii în abatoare, măcelării și probabil al variației prevalenței. Contaminarea cu ouă poate apărea
bucătărie în timpul preparării alimentelor. Carnea roșie crudă sau în ovarul infectat al găinii și, de asemenea, prin contactul ouălor cu
insuficient gătită contaminată poate servi ca principal vehicul de materialul fecal sau poate fi din cauza contaminării ouălor în timpul
transmitere pentruSalmonella [11, 25]. furnizării acestora de la proprietarii de pui către piețele angro și cu
amănuntul.Salmonella detectarea din laptele crud din prezentul
În studiul nostru, izolat Salmonella spp. în carnea tocată au fost studiu a fost comparabilă cu un studiu realizat în Nigeria [31] și o
de 8%, ceea ce a fost comparabil cu studiile anterioare realizate de prevalență mai mică de 20% în Etiopia [32]. Această diferență ar
Nyeleti et al. [10] (7,9%) și Zewdu și Cornelius [26] (8%) în Etiopia. Cu putea apărea din contaminarea mulsului, echipamentul necurat și
toate acestea, a fost mai mică decât cea raportată de Molla și colab. igiena precară a femeilor de serviciu și a manipulatorilor. Cu toate
[12] (12,1%) și Ejeta și colab. [13] (14,4%). Această diferență de acestea, este mai mare decât prevalența de 2,1%, care se găsește în
prevalență s-ar putea datora variațiilor metodelor utilizate pentru Etiopia [33]. După cum indică Garedew și colab. [14], condițiile de
prepararea tradițională a cărnii tocate pentru consum uman în mediu necurate și pregătirea slabă a ugerului ar putea expune
diferitele locații geografice ale țării. Acest lucru se datorează, laptele crud la contaminarea bacteriană.
probabil, faptului că carnea tocată este o combinație de părți de
carne roșie din diferite surse care sunt în cele din urmă măcinate Nu Salmonella a fost izolat din lapte pasteurizat, brânză de vaci,
împreună [13], ceea ce ar putea mări și mai mult.Salmonella prăjitură cu smântână, sandwich cu ou și mostre de pizza. Chiar
contaminare. Această observație poate fi corelată cu contaminarea dacă unele studii au raportatSalmonella izolarea din laptele
încrucișată în timpul manipulării și măcinarii cărnii tocate. În Etiopia, pasteurizat în Etiopia [26], pasteurizarea adecvată a laptelui, starea
carnea tocată preparată în mod tradițional este adesea consumată sanitară bună a instalației de procesare și absența contaminării
crudă sau după o gătire minimă și poate fi o sursă potențială de după pasteurizarea laptelui ar putea fi factori posibili pentru probele
Salmonellainfecție pentru publicul din țară. În acest studiu, doar o negative. Această constatare este susținută și de Garedew și colab.
probă de burger a fost contaminată cuSalmonella spp. Motivul s-ar [14], care a explicat că prin eficacitatea pasteurizării la instalația de
putea datora cărnii gătite necorespunzător sau igienei personale procesare putem minimiza contaminarea laptelui la un nivel mai
proaste a manipulatorilor de alimente sau curățării inadecvate a scăzut de-a lungul traseului de la vacă la instalația de pasteurizare,
ustensilelor precum și
6 BioMed Research International

în timpul procesării postpasteurizare. În plus, utilizarea temperaturii cu eșecuri ale tratamentului și rezultate slabe în infecțiile
potrivite pentru depozitarea produselor alimentare și a ingredientelor umane.
utilizate pentru prepararea alimentelor, a mediului și a echipamentelor Acest studiu are limitări. Nu am identificat serotipulSalmonella
de gătit curate, precum și o bună igienă a depozitării și a manipulatorilor izolate pentru identificarea și caracterizarea tulpinilor din cauza
sunt esențiale pentru a reduceSalmonella contaminare. Cantitatea de constrângerilor financiare și de laborator. În plus, nu am văzut
Salmonella ar fi putut fi prea scăzut pentru a fi detectabil prin metode factorii de risc care ar putea promova contaminarea și/sau asocierile
culturale în acest studiu. Salmonella cu alimente de origine animală și profiluri de rezistență
În studiul de față, rezistenta la antimicrobiene Salmonella s-au la medicamente. Prin urmare, rezultatele acestui studiu ar trebui să
dovedit a fi 47,6% din totalul de 21 Salmonella izolate testate, ceea ce fie considerate ca punct de referință pentru evaluarea bacteriologică
este mai mic decât cel din studiile anterioare efectuate în altă parte în aSalmonella izolate din alimente de origine animală, care vor fi
Etiopia [25]. Acest profil de rezistență observat a fost mai mare decât ulterior serotipate și confirmate ca agenți patogeni alimentari prin
ceea ce au raportat alte studii în Etiopia (23,5%) [26] și în Senegal (17%) studii viitoare în același cadru, inclusiv produse alimentare de
[22]. Cu toate acestea, constatările noastre au fost mai mici decât 83% origine animală și vegetală.
raportate în Thailanda [24]. Chiar dacă are nevoie de o mai bună
înțelegere a utilizării antibioticelor în Etiopia, această variație a rezistenței 5. Concluzie
s-ar putea datora utilizării fără discernământ a antimicrobienelor în
producția animală fără prescripție medicală în sectorul sănătății animale, Acest studiu a arătat că Salmonella Izolatele au fost identificate printre

ceea ce ar putea favoriza presiunea de selecție care a sporit avantajul produsele alimentare de origine animală, în special pentru carne și produsul

menținerii genelor de rezistență în bacterii. [34]. Acest lucru este susținut său tocat, ouă crude și lapte crud.Salmonella Rezistența la medicamente a fost,

și de o prevalență ridicată aSalmonella raportate de la oameni și diferite de asemenea, observată pentru aproape toate antibioticele testate care sunt

animale alimentare, tulpinile având niveluri ridicate de rezistență la utilizate în mod obișnuit atât în sectorul veterinar, cât și în cel al sănătății

medicamente [35, 36]. Recent, meta-analiza animalelorSalmonella umane, în această zonă de studiu și în alte părți ale Etiopiei. Această evaluare

Izolatele rezistente la medicamentele utilizate împotriva salmonelozei bacteriologică aSalmonellaizolatele din alimente de origine animală pot fi

umane în Etiopia au arătat, de asemenea, că animalele de hrană sunt folosite ca punct de plecare pentru a îmbunătăți sistemul de supraveghere a

surse de expunere umană rezistente la antibiotice. Salmonella agenților patogeni de origine alimentară din oraș, precum și pentru a sprijini
birourile de igienă și salubritate pentru a evalua și îmbunătăți programele de

[35]. sănătate publică și de control al bolilor. Prin urmare, constatările noastre oferă

În studiul nostru, majoritatea izolatelor identificate sunt prevalența și rezistența la medicamenteSalmonella din alimente de origine

rezistente la două sau mai multe antimicrobiene, în special la animală și să contribuie cu informații oamenilor de știință, precum și

tetraciclină (90%), sulfametoxazol-trimetoprim (40%), cercetătorilor în domeniul sănătății publice pentru elaborarea de linii

nitrofurantoină (40%) și amoxicilină (30%). Salmonella rezistența în directoare, precum și de reglementări privind siguranța alimentară, pentru a

această constatare a fost mai mare decât în studiile anterioare minimiza răspândirea și rezistența alimentară. Salmonella specii.

efectuate în Etiopia [26, 32] și alte țări [22, 24]. Creșterea


remarcabilă a apariției rezistenței antimicrobiene înSalmonella căci
antibioticele menționate a fost probabil un indiciu al utilizării lor Dezvăluire
frecvente atât la animale, cât și în sectoarele de sănătate publică din
Autorii sunt profesioniști veterinari și de sănătate publică și membri ai
Etiopia. Studiile efectuate în altă parte în Etiopia [35] au indicat, de
temei de sănătate publică veterinară în subgrupul echipei de cercetare în
asemenea, că creșterea proporției de rezistenți la medicamente
zoonoze și siguranța alimentelor de la Universitatea din Gondar. Aceștia
Salmonella izolatele s-ar putea datora utilizării iraționale a
sunt implicați și interesați în studiile privind tuberculoza și zoonozele
antimicrobienelor și inadecvării metodelor de prescripție și eliberare
transmise prin alimente și siguranța alimentelor.
atât în instituțiile sanitare publice, cât și în cele private ale țării.
Datorită accesului relativ limitat și prețului ridicat pentru obținerea
medicamentelor nou dezvoltate cu cefalosporină și chinolonă,
Interese concurente
rapoartele privind prevalența rezistenței la antimicrobiene
Autorii declară că nu au interese concurente.
Salmonella antibioticele cu preț relativ scăzut și disponibile în mod
regulat sunt alarmante pentru o societate cu venituri mici care
Contribuțiile autorilor
trăiește în majoritatea țărilor în curs de dezvoltare, cum ar fi Etiopia.
Cu toate acestea, este important de reținut că aceste antibiotice sunt Mebrat Ejo și Legesse Garedew au conceput și conceput
utilizate în mod obișnuit în medicina veterinară, iar infecțiile cu experimentele. Zabishwork Alebachew, Walelgn Worku și
aceste antibiotice rezistente.Salmonella izolatele ar putea reduce Legesse Garedew au efectuat experimentele. Mebrat Ejo,
eficiența tratamentului cu antibiotice. Constatarea acestui studiu Zabishwork Alebachew și Legesse Garedew au analizat
arată o rezistență puțin mai mică decât studiul raportat în Nigeria datele. Legesse Garedew și Walelgn Worku au contribuit cu
(93,1%) [29]. În ultima vreme, frecvența rezistenței la medicamentele reactivi/materiale/instrumente de analiză. Mebrat Ejo și
antimicrobiene înSalmonella iar numărul de medicamente la care Legesse Garedew au scris lucrarea.
tulpinile sunt rezistente a crescut la nivel mondial, în primul rând ca
urmare a utilizării antimicrobiene în producția de alimente. Mulțumiri
Rapoartele recente au evidențiat, de asemenea, aparițiaSalmonella
cu sensibilitate redusă la fluorochinolone și alte medicamente [9], Autorii ar dori să mulțumească Universității din Gondar,
care este asociată Etiopia, pentru sprijinul financiar acordat acestui studiu.
BioMed Research International 7

De asemenea, sunt recunoscători membrilor personalului [14] L. Garedew, A. Berhanu, D. Mengesha și G. Tsegay, „Identificarea
Facultății de Medicină Veterinară și Institutului de Sănătate bacteriilor gram-negative din punctele critice de control ale laptelui
Publică, Universitatea din Gondar și Biroul Administrativ de vacă crud și pasteurizat consumat în orașul Gondar și suburbiile
Gondar. În plus, ar dori să aprecieze proprietarii unităților sale, Etiopia,” BMC Sănătate Publică, vol. 12, nr. 1, articolul 950,
2012.
de alimentație publică și personalul pentru cooperarea și
participarea lor la acest studiu. [15] CSA (Autoritatea statistică centrală), „Republica democratică
federală a Etiopiei, investigație statistică centrală”, Raport
statistic, 2007.
Referințe
[16] Organizația Internațională pentru Standardizare (ISO) 6579,
[1] RS Hendriksen, AR Vieira, S. Karlsmose et al., „Monitorizarea globală a Microbiologia alimentelor și a hranei pentru animale - Metodă
Salmonella Distribuția serovarelor de la organizația mondială a sănătății, orizontală pentru detectarea Salmonella, Organizația
rețeaua globală de infecții transmise de alimente, banca de date din țară: Internațională pentru Standardizare (ISO), Geneva, Elveția,
rezultate ale laboratoarelor de calitate asigurată din 2001 până în 2007,” ediția a IV-a, 2002.
Agenții patogeni de origine alimentară și boli, vol. 8, nr. 8, p. 887–900, [17] CLSI (Institutul de standarde clinice și de laborator), Performanță
2011. pentru testele de sensibilitate a discurilor antimicrobiene; Aprobat
[2] SE Majowicz, J. Musto, E. Scallan et al., „The global burden of Standardul, Documentul CLSI M02-A11, CLSI, Wayne, Pa, SUA, ediția
nontyphoidal Salmonella gastroenterită” Boli Infecțioase a 11-a, vol. 32, nr. 1, p. 1–76, 2012.
clinice, vol. 50, nr. 6, p. 882–889, 2010. [18] SM Vindigni, A. Srijan, B. Wongstitwilairoong et al., „Prevalența
[3] F. Käferstein, „Boalele transmise prin alimente în țările în curs de microorganismelor de origine alimentară în produsele alimentare cu
dezvoltare: etiologie, epidemiologie și strategii de prevenire”, amănuntul în Thailanda,”Agenții patogeni de origine alimentară și boli, vol. 4,
Jurnalul Internațional de Cercetare în Sănătatea Mediului, vol. 13, nr. nr. 2, p. 208–215, 2007.
1, p. S161–S168, 2003. [19] B. Bouchrif, B. Paglietti, M. Murgia et al., „Prevalence and
[4] FM Sánchez-Vargas, MA Abu-El-Haija și OG Gómez-Duarte, „ antibiotic-resistance of Salmonella izolat de alimente în Maroc”,
Salmonella infecții: o actualizare a epidemiologiei, Jurnalul de infecție în țările în curs de dezvoltare, vol. 3, nr. 1, p.
managementului și prevenirii,” Medicina de călătorie și boli 35–40, 2009.
infecțioase, vol. 9, nr. 6, p. 263–277, 2011. [20] P. Padungtod și JB Kaneene, „Salmonella la animalele alimentare și la
[5] E. Carrasco, A. Morales-Rueda și RM Garcı́a-Gimeno, „Cross- oameni din nordul Thailandei”, Jurnalul Internațional de
contamination and recontamination by Salmonella în alimente: Microbiologie Alimentară, vol. 108, nr. 3, p. 346–354, 2006.
o recenzie,” Food Research International, vol. 45, nr. 2, p. 545– [21] MA Gallegos-Robles, A. Morales-Loredo, G. Álvarez-Ojeda și colab.,
556, 2012. „PCR detection and microbiological isolation of Salmonellaspp. din
[6] G. Tadesse, „Prevalența salmonelozei umane în Etiopia: o carne proaspătă de vită și pepene galben”,Journal of Food Science,
revizuire sistematică și meta-analiză,” BMC Boli Infecțioase, vol. vol. 74, nr. 1, p. M37–M40, 2009.
14, articolul nr. 88, 2014. [22] A. Stevens, Y. Kaboré, J.-D. Perrier-Gros-Claude și colab., „Prevalența și
[7] NA Feasey, G. Dougan, RA Kingsley, RS Heyderman și rezistența la antibiotice aSalmonella izolat din carne de vită
MA Gordon, „Boala salmonelă non-tifoidă invazivă: o boală prelevată de la abator și de la comercianții cu amănuntul din Dakar
tropicală emergentă și neglijată în Africa”, The Lancet, vol. (Senegal)” Jurnalul Internațional de Microbiologie Alimentară, vol.
379, nr. 9835, p. 2489–2499, 2012. 110, nr. 2, p. 178–186, 2006.
[8] OMS (Organizația Mondială a Sănătății), Amenințarea în evoluție [23] MMS Dallal, MP Doyle, M. Rezadehbashi și colab., „Prevalența și
a rezistenței antimicrobiene: opțiuni de acțiune, OMS, Geneva, profilurile de rezistență antimicrobiană ale Salmonella serotipuri,
Elveția, 2012. Campylobacter și Yersinia spp. izolat de pui și carne de vită, Teheran,
[9] OMS (Organizația Mondială a Sănătății), Rezistența la Iran,”Controlul alimentelor, vol. 21, nr. 4, p. 388–392, 2010.
antimicrobiene: Raport global de supraveghere, OMS, Geneva,
Elveția, 2014. [24] BA Gebre, „Screenizarea calitativă a reziduurilor de antibiotice și
[10] C. Nyeleti, B. Molla, G. Hildebrandt și J. Kleer, „The prevalence identificarea rezistenței la antibiotice Salmonella din carne crudă și
and distribution of Salmonellae in slaughter bovine, gata de consumat în Thailanda,” Jurnalul Internațional de Științe
slaughterhouse personnel and minced beef in Addis Abeba Avansate a Vieții, vol. 5, p. 51–64, 2012.
(Etiopia)” Buletin de Sănătate și Producție Animală în Africa, vol. [25] L. Garedew, Z. Hagos, Z. Addis, R. Tesfaye și B. Zegeye, „Prevalența și
48, p. 19–24, 2000. modelele de susceptibilitate antimicrobiană ale Salmonella izolează
[11] L. Garedew-Kifelew, N. Wondafrash și A. Feleke, „Identificarea rezistenței la în asociere cu statutul igienic din măcelăriile din orașul Gondar,
medicamente Salmonella de la manipulatorii de alimente de la Etiopia”, Rezistența antimicrobiană și controlul infecțiilor, vol. 4, nr.
Universitatea din Gondar, Etiopia,” Note de cercetare BMC, vol. 7, articolul 1, articolul 21, 2015.
nr. 545, 2014. [26] E. Zewdu și P. Cornelius, „Antimicrobian resistance pattern of
[12] B. Molla, D. Alemayehu și W. Salah, „Sursele și distribuția serotipurilor Salmonella serotipuri izolate din alimente și personal din Addis
Salmonella izolate din animalele alimentare, personalul abatorului și Abeba, Etiopia”, Sănătatea și producția animalelor tropicale, vol.
produsele din carne de vânzare cu amănuntul în Etiopia: 1997– 41, nr. 2, p. 241–249, 2009.
2002,” Jurnalul Etiopian de Dezvoltare a Sănătății, vol. 17, nr. 1, 2003. [27] SA Bidol, ER Daly, RE Rickert și colab., „Multistatale outbreaks of
Salmonella infecții asociate cu roșiile crude consumate în
[13] G. Ejeta, B. Molla, D. Alemayehu și A. Muckle, „Serotipurile restaurante—Statele Unite, 2005-2006,” Raport săptămânal privind
Salmonella izolate din carne tocată de vită, oaie și porc în Addis morbiditatea și mortalitatea, vol. 56, nr. 35, p. 909–911, 2007.
Abeba, Etiopia,” Revue de Medecine Veterinaire, vol. 155, nr. 11, [28] MM Ahmed, MM Rahman, KR Mahbub și M. Wahiduzzaman,
p. 547–551, 2004. „Caracterizarea rezistenței la antibiotice Salmonella
8 BioMed Research International

spp izolate din ouăle de pui din Dhaka City,” Jurnalul de


cercetare științifică, vol. 3, nr. 1, p. 191–196, 2010.
[29] EO Ekundayo și JC Ezeoke, „Prevalența și profilul de sensibilitate
la antibiotice Salmonella specii din ouă și ferme de păsări din
Umudike, statul Abia”, Journal of Animal and Veterinary
Advances, vol. 10, p. 206–209, 2011.
[30] K. Begum, TA Reza, M. Haque et al., „Izolarea, identificarea și
modelul de rezistență la antibiotice a Salmonella Spp. din ouă
de găină, probe de intestin și de mediu.”Jurnalul farmaceutic din
Bangladesh, vol. 13, nr. 1, p. 23–27, 2010.
[31] NS Karshima, VA Pam, SI Bata, PA Dung și ND Paman, „Izolarea
Salmonella specii din lapte și produse lactate procesate local
comercializate pentru consum uman și factori de risc asociați în
Kanam, Statul Plateau, Nigeria. Journal of Animal Production
Advances, vol. 3, nr. 3, p. 69–74, 2013.
[32] T. Tadesse și A. Dabassa, „Prevalența și rezistența
antimicrobiană a Salmonella izolat din probele de lapte crud
colectate din districtul Kersa, zona Jimma, sud-vestul Etiopiei.”
Revista de Științe Medicale, vol. 12, nr. 7, p. 224–228, 2012.
[33] T. Liyuwork, T. Biruhalem, A. Sefinew, A. Haile, S. Zufan și
N. Haileleul, „Profil de prevalență și rezistență antimicrobiană a
Salmonella izolate din produse lactate din Addis Abeba, Etiopia”,
Jurnalul African de Cercetare în Microbiologie, vol. 7, nr. 43, p.
5046–5050, 2013.
[34] M. Gillings, Y. Boucher, M. Labbate et al., „Evoluția integronilor
de clasă 1 și creșterea rezistenței la antibiotice”, Jurnalul de
bacteriologie, vol. 190, nr. 14, p. 5095–5100, 2008.
[35] G. Tadesse, „A meta-analysis of the proportion of animal Salmonella
izolate rezistente la medicamentele folosite împotriva salmonelozei
umane în Etiopia. BMC Boli Infecțioase, vol. 15, nr. 1, articolul 84,
2015.
[36] B. Molla, A. Berhanu, A. Muckle et al., „Multidrog resistance and
distribution of Salmonella serovari la porcii sacrificați”,Jurnalul
de Medicină Veterinară Seria B: Boli Infecțioase și Sănătate
Publică Veterinară, vol. 53, nr. 1, p. 28–33, 2006.
Inte e ti ție al s
P p de
nal de

rna J al nostru

iro
V
Adva nc es

BioMed Celule stem


log y
Jurnalul Internațional al

Cercetare Internațională Internaţional în Genomica


Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation http:// Hindawi Publishing Corporation
http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 www.hindawi.com Volum 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014

Jurnalul de

Acizi nucleici

Zo
jurnal de

o l o gy Inte rna tio nal Jo

Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation


http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014

Su
h

Jurnalul de Cel științific


Transducția semnalului Jurnalul Mondial
Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation http://
http://www.hindawi.com Volumul 2014 www.hindawi.com Volumul 2014

Genetica Anatomie Jurnalul Internațional al Avanseaza in

Cercetare Internațională Cercetare Internațională Microbiologie Cercetare Internațională Bioinformatica


Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation
http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014

Enzimă Jurnalul Internațional al Biologie moleculara Jurnalul de

Arheea Cercetare Biologie evoluționistă Internaţional Biologie marina


Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation Hindawi Publishing Corporation
http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014 http://www.hindawi.com Volumul 2014

S-ar putea să vă placă și