Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
HIV Curs
HIV Curs
HIV Curs
Retrovirusuri
1911 - Peyton Rous descoper virusul
sarcomului la psri (ulterior denumit
virusul sarcomului Rous); premiul Nobel 60
de ani mai trziu.
Ulterior este descoperit RT: Temin i
Mizutani, n 1970, simultan cu Baltimore.
Clasificare
Dup implicaii clinice:
Oncovirinae (grupeaz virusuri oncogene dar i
neoncogene); HTLV I i HTLV II; mai fac parte:
Bovine Lukemia Viruses (BLV) i Simian T
cells leukemia viruses (STLV);
Lentivirinae: grupeaz ageni ai unor afeciuni
lent degenerative ale SNC (aici este inclus
HIV1 i HIV2 dar i SIV simian
immunodeficiency virus);
Spumavirinae: produc infecii persistente
asimptomatice
Clasificare
Dup particularitile de replicare: v.
oncogene rapide i lente;
Dup prezena receptorilor membranari la
suprafaa celulei inta:
Ecotrope: se replic numai n celule speciei de
la care au fost izolate
Xenotrope: se replic numai n celule altei
specii dect cea originar
Amfotrope: se replic n celulele speciilor
homo- i heterologe.
Istoric
Primele cazuri de SIDA au fost descrise n 1981 n
SUA fiind asociate cu infeciile severe cu
oportuniti, i anume pneumonia cu Pneumocystis
carinii, infecii care indicau alterarea profund a
imunitii celulare n absena altor cauze.
Cnd sindromul a fost asociat cu virusul
imunodeficienei umane (HIV: Human
Immunodeficiency Virus) a devenit clar c
infeciile severe cu oportuniti i neoplasmele rare
reprezint stadii terminale ale bolii.
Pandemia HIV/SIDA
dec 1996: 22.6 mil (HIV + SIDA) (42% femei i
830.000 copii)
36.1 mil infectai (la finele 2000, dintre care 5.3
mil infectai n acest an);
la 25.11. 2000: 2.312.860 persoane cu SIDA
decese de la nceputul pandemiei: 21.8 mil (3 mil
doar n 2000)
Romania: peste 9000 de infectai (dintre care
doar 1000 sunt aduli, restul copii!!!).
Pandemia HIV/SIDA
Decembrie 2002 : 42 mil
- 38.6 mil adulti (19.2 femei)
- 3.2 copii < 15 ani.
- In 2002 - 5 mil cazuri noi.
- Numar decese in 2002: 3.1 mil
- Nov. 2002: cazuri SIDA - 2.822.111
Pandemia HIV/SIDA
Decembrie 2003 40 mil cazuri
3 mil decese in 2003 (dintre care 250.000
copii)
2/3 dintre decese Africa sub-Sahariana.
Romania
Martie 2000: 6089 SIDA
Iunie 2003:
- 5722 HIV infectati (4414 copii)
- 8250 cazuri SIDA
- TOTAL: 13972 cazuri
- Tratament: 5232
HIV - ME
HIV - ME (detaliu)
Taxonomie
Familia Retroviridae
Genul Lentivirinae.
Retrovirusurile sunt virusuri ARN cu
polaritate pozitiv, nvelite, care prezint o
RT (sintetizeaz ADN pe matri ARN).
Revestranscripia este un fenomen unic n
biologie (ADN este de regul decriptat prin
transcriere enzimatic n ARN).
Structura
Virion sferic, de 80 - 130 nm cu un
miez sub form de con.
Are simetrie icosaedric i 72 de spicului externi
formai din proteinele majore ale nveliului viral:
gp 120 i gp transmembranar 41 (cu g.m. de
41000 Da)
Virionul are un strat bilipidic presrat cu proteine
ale gazdei (ex: antigene MHC de clasa I i II)
obinute prin nmugurirea virusului.
Structura
Matricea proteic, aezat ntre nveli i
miez (core) este alctuit din proteina de
membran (p 17) dar conine i proteaz
viral.
HIV - schematic
Structura
Miezul central este format din 2 molecule
ARN i proteine:
proteina major intern (p 24);
proteina intern asociat ARN-ului (p 15)
care este disociat n cele dou subuniti:
p9 i p 7.
Miezul mai conine i enzimele virale: RT i
integraza.
Structura
Mantaua nucleocapsidei este format n cea
mai mare parte din polipeptidul fosforilat
p24 (proteina intern major);
proteina intern p17 este asociat cu
suprafaa intern a stratului bilipidic,
servind la stabilizarea componentelor
externe i interne a miezului.
Tipuri
HIV exist sub forma a 2 tipuri: HIV1 i
HIV2, care difer prin secvenele genomice
(peste 50% diferene).
HIV - schematic
Genomul i funciile genelor
structurale i nestructurale
HIV conine un genom diploid alctuit din 2
molecule de ARN identice cu polaritate (+),
asamblate printr-o legtur de hidrogen
(70S).
Genomul (de aprox 9.7 kbaze) este flancat
de 2 secvene repetitive LTR (Long
Terminal Repeats) cu rol n integrarea HIV
i transcripie.
HIV 1 genomul schematic
Organizarea genomului
Genomul conine gene care codific proteinele
structurale (gag, pol i env n acest ordine
dinspre captul 5) comune pentru toate
retrovirusurile.
Gena gag (grup antigenic) codific sinteza
proteinelor de miez (p24, p17, p7);
gena pol (polimeraza): sinteza enzimelor (p66/51,
p32, p11;
gena env (envelope) codific sinteza proteinelor
de nvelis (precursorul gp120 i gp41 este gp160).
Gene reglatorii
tat: important activator transcripional;
rev: regulator al expresiei genelor
structurale deci activator al produciei de
virus;
nef: factor de reglare negativ a produciei
de virus
Gene de maturare
Neeseniale in vitro n culturi de celule dar
importante in vivo:
vif: promotor al infectivitii virusului;
vpr: slab activator transcripional ; unii
autori nu confirm acest rol
vpu: crete proporia particulelor virale
extracelulare.
HIV schematic
HIV1 genomul i virionul matur
HIV 1 genomul schematic
Clasificare:
HIV1 este mprit n trei grupuri:
M (major) cu 10 subtipuri (de la A la J); n
Romania predomin tipul F (probabil
importat din Brazilia); n Europa de Vest i
SUA, tipul B, iar n Asia tipul E.
O (outlier - deviat) doar 300 de pacieni
n lume; iniial izolat n Camerun;
N (non-M- non-O)
HIV1 i HIV2 genom
(comparativ)
HIV2
HIV2 , asemntor n proporie de 80% cu
SIV (Simian Immunodeficiency Virus);
izolat mai trziu (1986) din Africa de Vest,
prezint omologii genetice cu HIV1 de 50%
(seamn mai mult cu SIV dect cu HIV1).
Diferene ntre HIV1 i HIV2:
Diagnostic direct:
- Izolarea HIV (prin cocultivare)
- PCR (detectare de ADN proviral in limfocite sau
evidentierea de ARN plasmatic).
- Ag p 24 (ELISA)
Produse patologice
Sange integral (ser sau plasma)
Altele: LCR, saliva, secretii vaginale, probe
biopsice, lapte, urina, etc.
Congelarea probelor: - 30 70 C
Izolarea de virus impune conservarea in
azot lichid.
Diagnostic serologic
Teste rapide tip screening efectuate prin
aglutinare: teste de latex aglutinare: bile de
latex coafate cu antigene obinute sintetic.
Se testeaz snge integral sau ser pe un
suport al trusei.
Dup cteva minute rezultatul testului este
evaluat, comparativ cu martorul (-) al trusei.
Teste pe membrana (principiu asemanator
ELISA)
Teste rapide
Avantaje: uor de realizat i fr echipament
electric;
Dezavantaj: sensibilitatea metodei variaz n
limite foarte largi: ntre 71 i 99% , iar
specificitatea sa variaz ntre 93 i 99%.
In plus, rezultatele (+) sau (-) difer n medie cu
20%, diferena explicat prin dificulatea de
interpretare a probelor slab pozitive.
De aici rezult si obligativitatea confirmrii prin
ELISA.
HIV diagnostic (teste rapide)
Teste pe membrana: in paralel, HIV
si VHC
ELISA
Indirect sau competitiv
Rez. fals (-) se obin
cnd testul se efectueaz naintea
seroconversiei
la pacieni imunosupresai;
i uneori, tardiv n stadiul de SIDA.
In plus, unele teste imaginate ptr a detecta
anti-HIV1 nu pot detecta i anti-HIV2.
ELISA
Rezultate eronate care ridica probleme
clinicienilor snt generate de unele grupe de
pacieni: hemodializai, boli autoimune,
mielom multiplu, hemofilicii.
Se mai adaug surse de eroare ce in de cel
ce execut testul sau variaii n sensibilitatea
i specificitatea truselor.
ELISA - schematic
ELISA
ELISA - Ag p 24
Western Blot
Proteinele virale (antigenele) snt separate prin
electroforez n gel de poliacrilamid i apoi
transferate pe benzi de nitroceluloz ce vor
reprezenta faza fix la care vor adera anticorpii
eventual prezeni n prob.
Astfel obinem profilul serologic complet , pe
categorii de anticorpi fat de structuri antigenice
diferite (ale genelor : gag, env i pol) scznd
riscul rezultatelor fals pozitive (care se reduce la
0.05%).
HIV - Western Blot
HIV -WB
HIV WB
HIV -WB
HIV - WB
WB - criterii de interpretare
HIV - criterii interpretare
Criterii de interpretare WB
EX: 2 categorii de Ac (env) +/- gag +/- pol
O singura categorie de Ac
indeterminat
Se apeleaza la o noua testare sau /si IF
Daca IF nu clarifica rezultatul se
apeleaza la PCR.
HIV- WB
HIV - IF
Polymerase chain reaction (PCR)
Calitativ: initial (mai sensibil decit testul
cantitativ)
Cantitativ: monitorizarea terapiei
HIV - PCR
HIV - PCR
Markeri pentru aprecierea
prognosticului
Viremia (incarcatura plasmatica)
Valoarea CD4
Prezenta Ag p 24 sau Ac anti-p24
Alti markeri utili
2 microglobulina
neopterina
Nivel CD 4, comparatativ viremia
Terapie
Analogi nucleozidici (inhibitori de RT):
- Zidovudina (AZT)
- Didanozina (ddI)
- Zalcitabina (ddc)
- Stavudina (d4T)
- Intarzie dezvoltarea infectiilor cu
oportunisti si prelungesc supravietuirea.
Analogi nucleozidici
Eficienta relativ scazuta; se adminstreaza
asociat pentru a creste eficienta si, mai ales,
pentru a preveni selectia de tulpini
rezistente.
Toxice (neutropenie, anemie, mielopatie
zidovudina; pancreatita didanozina;
neutropenie periferica: zalcitabina,
stavudina).
Alte antiretrovirale
Inhibitori noncompetitivi de RT:
nevirapina, delavirdina (activi pe HIV1 dar
nu si asupra HIV2)
Inhibitori de proteaza: saquinavir,
indinavir, ritonavir (peptide sintetice,
inhibititori competitivi pentru proteaza HIV,
inhibnd procesarea poliproteinelor; astfel
celula gazd acumuleaz precursori
neclivai de poliprotein gag, care sunt
toxici).
Replicarea HIV inte terapeutice
Tratament - inte
Principiile terapiei
Se incepe cnd CD4 sunt 500 /L
Eficienta terapiei: functie de numarul CD4,
absenta Ag p24, nivelul scazut al viremiei.
Rezistenta la antiretrovirale: scad CD4,
scaderea in greutate, semnele constitutive
caracteristice SIDA, infectiile cu
oportunisti.
Principiile terapiei
Adminstrarea zidovudinei la gravide (sapt
14 34) scade riscul transmiterii
transplacentare.
Pandemia HIV
Epidemiologie
Transmitere: ca la VHB (parenteral, sexual,
mam-ft).
Risc crescut: de la barbat la femeie
(prezenta unor co-infectii ce determina
leziuni ale colului); contact anal
Risc prin ace contaminate: 1/250
Mam ft: 30 50%.
Grupe de risc
Femei: 1985: 7%; 1994: 13%; 2002: 49.7%
Creste in acest fel si numarul de cazuri la
copii!!!
Femeile se prezinta mai tarziu la medic (ar
rezulta evolutia mai rapida la femei spre
SIDA; fals)
Complicatii ginecologice (prin infectii
asociate).
Profilaxia
Nu exista vaccin
Nu exista chimioprofilaxie eficienta
Masuri nespecifice: sex protejat, obiecte
personale de toaleta, controlul serologic
anterior sarcinii, etc.
Educatie sanitara