Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
AA monozaharide Glicerol + AG
c. Krebs CO2
L.R
III
H2O
FO
ADP + Pi ATP
Fats Glycogen Protein
Metodele de studiu a
căilor metabolice
1. pe organismele intacte
- aport-eliminare:se aplică pe:organisme
sănătoase, stresate,infectate,bolnave.-
marcarea cu izotopi a diferitor metaboliţi.
2. studiul experimental prin perfuzia
organelor intacte.
3. studiul secţiunilor tisulare.
REGLAREA METABOLISMULUI
Se realizează la diferite nivele:
- la nivelul proprietăţilor specifice enzimelor (cantitatea de E şi S,
prezenţa coenzimelor, pH, t,);
- la nivelul E reglatoare alosterice. Multe E sunt inhibate de produsul
final al secvenţei la care ele participă.
- Majoritatea reacţiilor sunt reglate de starea energetică a celulei.
Indicii ce caracterizează starea energetică a celulei
Ec = [ATP]+1/2[ADP]
[ATP]+[ADP]+[AMP]
ADP
H3PO4 AMP PP
2H3PO4
7,3
kcal/mol
14,6 kcal/mol
Sinteza ATP din ADP şi Pi
Complexul PDH:
S
E1-TPP, E2-AL S
E3-FAD HS-CoA, NAD
CH3-CO-COOH CH3-CO - S CoA + CO2 +NADH+H
LR =3 ATP
Ciclul Krebs
Reglarea Procesului:
Reglarea Procesului:
Inhibiţia :- prin retroinhibiţie, unde ca inhibitori
servesc acetil CoA şi NADH+H+
- acizii graşi macromoleculari
- prin GTP şi ATP
fosforilarea PDH (de către kinaza PDH),
Activarea :
AMP şi GMP
defosforilarea PDH (de către fosfataza PDH)
NADH I OA I
CH2
Cit I
CH2
CH2 I
I
COOH NAD+ MDHI COOH H-C-COOH
I
C =O AC I
I CH- OH
CH2
Mal COOH I
I
HC-OH
3NADH+H+ => LR ICit COOH
I COOH
COOH FR NAD+
COOH FADH2 => LR I
ICDH
CH2
I
I
CH
II
Fum COOH
I COOH CH2 NADH
CH2 I I
CH
I FADH2 SDHICH2
CH2
I
-KG
C=O
I
COOH
I CH2 COOH
I KGDH NAD+
FAD+ Suc
COOH
C=O
7. Hidratarea Fumaratului la Malat SCoAS
I NADH
8. Oxidarea Malatului la OA SCoA
SCoA
E- MDH
GTP
GDP
CO2
CH3 CoA
C O C O
COOH CH3
NADH + H+
Pyruvic NAD
+
Acetyl
acid coenzyme A
To electron
transport chain
Oxaloacetic acid
CoA
COOH
NADH + H+ C O
CH2 H2C COOH
NAD+ COOH 1 HOC COOH
H2O
H2C COOH Citric acid
COOH
HCOH 8
CH2 2
To electron
transport Malic acid COOH
chain
H2O 7 H2C COOH
COOH HC COOH
Fumaric acid
CH
HC
KREBS HOC COOH
H Isocitric acid
COOH CYCLE 3
FADH2
6
FAD
H2C COOH NAD+
CO2
H2C COOH CoA
NADH + H+
Succinic acid 5
H2C COOH
GTP CO2
H2C COOH 4 HCH
ADP GDP CH2 O C COOH
O C S CoA Alpha-ketoglutaric acid
ATP Succinyl CoA
NAD+
To electron
NADH + H+ transport chain
Reglarea Ciclului Krebs
NAD+ -dependente:
piruvat DH;
izocitrat DH;
α CG DH;
malat DH;
FAD-dependente:
succinat DH
acil CoA DH
NADH+H+ şi FADH2 rezultaţi în reacţiile de oxidare a
acestor substrate transferă p şi ē în lanţul respirator.
Lanţul respirator (LR). Rolul.
Structura.
LR - un ansamblu (complex) de
enzime şi sisteme de oxido-reducere,
ce participă la transferul H+ şi ē de la
coenzimele reduse (NADH, FADH2) la
O2 cu formarea H2O.
Este ultima etapă a degradării
aerobe.
Este localizat în membrana internă a
MC
Funcţia LR
este dubla:
- prin transferul hidrogenului pe oxigen, cu
formarea apei, coenzimele se reoxidează
putînd astfel asigura în continuare
dehidrogenările în căile degradative
specifice şi în special în ciclul acizilor
tricarboxilici
- la această reoxidate a coenzimelor se
elibereaza energie şi aceasta serveste la
sinteza de ATP.
Schema LR
Reacţiile de Oxido-reducere
(numite reacţii redox)
sunt acele reactii în care are loc un transfer de electroni de la
un donor de electroni (agentul reducător) la un acceptor de
electroni (agent oxidant).
În unele reactii de oxido-reducere transferul unuia sau al mai
multor electroni este făcut prin intermediul transferului de
hidrogen:
Dehidrogenarea este deci echivalentă cu oxidarea.
Agenţii de oxidare sau de reducere acţionează ca perechi
conjugate redox formată dintr-un donor de electroni şi
acceptorul sau de lectroni conjugat.
Donor de electron - electron +acceptor de electron
coenzima Q
coenzima QH2
Structura componentelor
LR CH3
N
H3 C CH3
N Fe N
protein
OOC CH2 CH2 CH S CH2
N
CH3
CH2 CH3
CH2
COO Heme c
Organizarea enzimelor de oxido-
reducere din lantul respirator
- este mixtă; structural -
functională şi functională
- sau evidentiat 4 complexe
structural-functionale şi doi factori
care asigură legătura dintre
complexe CoQ şi cit c.
Complexul I- NADH-CoQ-
reductaza
Complexul II - Succinat- CoQ-
reductaza
Complexul III - CoQ-Citocrom c
reductaza Complexul IV -
Citocromoxidaza
Complexul I
- NADH-CoQ-reductaza
transferă ionii de H+ şi electronii de la NADH+H+ la CoQ.
Căderea de potenţial este de 0,42V sau (GO=-19,4 kcal/mol,
suficientă pentru sinteza a 2 molecule de ATP.
În procesul fosforilării oxidative se va sintetiza doar o moleculă de
ATP. Cealaltă energie se degajă sub forma de caldura.
Complexul constă din NAD DH, FPn şi heteroproteine
FeS1,FeS2, FeS3, FeS4.
- Este inhibat de Rotenonă (insecticid de origine vegetală), Amital
(barbituric) şi Pericidină (antibiotic)
Complexul II - Succinat- CoQ-reductaza
transferă echivalenţii de reducere de la
Succinat la CoQ.
Căderea de potenţial este de 0,07V sau
( GO=-3,kcal/mol, insuficientă pentru sinteză
de ATP. Se va degaja sub forma de caldura.
- Complexul constă din Succinat DH, FPs şi 3
heteroproteine FeS.
Complexul III - CoQ-Citocrom c
reductaza
transferă electronii de la CoQ la cit c. Căderea de potential este
de0,18V sau (GO=-7,75 kcal/mol, suficientă pentru sinteză de
ATP.
- Complexul constă din mai multe tipuri de citocromi b,bk,bt,c1 şi
o heteroproteină FeS.
- - Este inhibat de Antimicina A
Complexul IV - Citocromoxidaza
- transferă electronii de la cit c la Oxigenul
molecular. Căderea de potentialeste de
0,54V sau (GO=-24,8 kcal/mol, suficientă
pentru sinteza de ATP.- Complexul constă
din mai multe tipuri de citocromi ce contin
Fe sau Cu.
- - Este inhibat de Cianuri, Oxid de Carbon
Cit de fosforilare (P/O)-
- raportul între număru de moli de ATP
produşi şi oxigenul consumat în lantul
respirator.
- Pentru ramura lungă este - 3/1,
- pentru ramura scurtă 2/1.
Funcţionarea celor 4 complexe, a CoQ şi
cit c a LR, sunt cuplate cu funcţionarea
ATP-sintetazei –complexul 5
Complexul V – ATP-sintetază
spaţiul 2H
+ 3H+
intermembranar 2H+ 2H+
10H+ims/4H+m = 2.5H+ per ATP
Controlul respirator
Organismele vii sintetizează ATP în raport cu
necesit.org. – de aceea FO cuplată cu LR este riguros
controlată.
Deoarece LR şi FO – etapa finală a degradării G, L, P
controlul respirator se poate efectua atît prin compuşi
direct implicaţi în LR şi FO, cît şi prin intermediarii
degradării celor 3 clase.
Rolul primordial îi revine ADP.
F1 din ATP sintetază rămîne blocat în lipsă de ADP.
Intensitatea transferului de protoni prin F0 al ATP
sintetazei deasemenea e determinată de nivelul ADP.
ADP – reglator alosteric (+) pentru mai multe enzime
ce sunt implicate în degradarea G α P.
Ipoteze principale cu privire la
procesele de FO. Ipoteza lui Mitchell
La FO contribue:
Integritatea membranei interne a mitocondriilor → orice
leziune duce la perderea capacităţii de FO (în timp ce
transferul de ē poate continua.
Impermeabilitatea mitocondriei interne pentru ionii H+
OH- K+ Cl-.
FO poate fi decuplată cu ajutorul unor substanţe
chimice, ce inhibă sinteza ATP dar neafectînd decuplanţi.
La acţiunea lor respiraţia creşte, iar FO este inhibată.
protonofori
AD
ionofori
Protonofori → permeab.membranei pentru
protoni, lichidînd potenţialul transmembranar.
a.g. liberi
2,4 dinitrofenol
salicilaţii (antiinflamatoare)
dicumarol (anticoagulant)
T3 şi T4 (h.gl.tiroide)
______________________________
Ionoforii – ei leagă şi transferă ionii prin
membrană.
Ex.: - valinomicina (↑ K+) (dar nu completă a
respir. şi FO), nigericina (↑ K+), gramicidina A
→ Na+, K+; H+.
Inhibitorii ai fosforilării acţionează asupra
ATP-sintetazei. Oligomicina blochează
pătrunderea H+ prin FO (închide canalul) cu
încetul slăbeşte respiraţia → întrerupere.
Inhibitorii
Transportului
de electroni X
CO
-
CN
-
N3
Rotenone ş.a X
Decuplanţii
H+
2,4-
Dinitrophenol
OH
NO2 NO2
H+
H+
X
-
O
+ H+
NO2 NO2
Inhibitorii
Fosorilării de
ADP X
Oligomycin
Atractyloside
X
Respiraţia liberă –
are loc decuplarea FO de LR şi toată energia este
convertită în căldură, care nu se utilizează la
executarea funcţiilor celulare. Astfel mitocondriile
devin o sobă, ce produc căldură. E necesar în
situaţii, cînd necesitatea căldurii este mai mare
decît ATP. Pentru mitocondrii musculare
producerea căldurii nu e funcţia de bază. În
grăsimea brună – mitocondriile sunt specializate
la producerea căldurii (nou-născuţi, animale în
hibernare).
Oxidarea microsomală
Un alt tip de reacţii de oxidare biologică este cel oxigenazic.
Acestea sunt catalizate de monooxigenaze şi dioxigenaze.
Dioxigenazele - includ în molecula substratului ambii atomi ai O2
Monooxigenazele - includ în molecula substratului un atom de O2 ,
celălalt fiind redus la H2O.
Lanţurile monooxigenazice de oxidare sunt lanţuri scurte de
transport al H+ şi ē. Enzimele necesită două S:
1. acceptă un atom de O2
2. este donor de protoni de H la H2O
SH + O2 +NADPH + H+ S-OH + H2O + NADP+
O2 H2O
RH Cit.P450 ROH
NADPH+H+ NADP+
Rolul: plastic şi dezintoxicare.
Asp GT Asp
KG KG
AST AST
Glu Glu
OAA OAA
NADH NADH LR
MDH MDH
NAD+ NAD+
Mal MT Mal
Sistemul navete
Glicerol-3-Fosfat
(muşchii schiletali, SN)
SIM Matrix
NAD+ G3P
FAD
G3PDH
FADH2 Q CIII
NADH DHAP
Producere de Energie
Glucoza
Glicogen Glicoliza AG
Glicogenoliza
G6P Corpi cetonici
-Oxidarea
Piruvat Acetil-CoA
Ciclul LR
AA Krebs
Ile, Val S-CoA
Producere de ATP
Oh my!
Now what?
Alcohol Metabolism
EtOH
Peroxisome Cytosol
H2 O2 O2 ER NAD+
CAT NADPH MEOS ADH
H2O P450 Pyrazole
Aminotriazole NADP+ NADH
Acetaldehyde
NAD+ Mitochondrion
AlDH
NADH Disulfiram Chlorpropamide
(antabuse) (diabetes)
Acetate
Extra-hepatic tissue
Pathway Perturbations
Glc
G6Pase GK
G6P
n
Cytosol
ei
ot
F6P
Pr
F16BPase PFK
F16BP Ala
Asp
PEPCK
OAA PEP ALT AST
NAD+ NAD+ PK
MDH LDH MDH OAA
NADH Lactate Pyr Malate
NADH NADH
PDH
PC NADH
Malate NAD+ Acetyl CoA
MDH OAA
NADH Cit
Malate
ICit
Mitochondrion
Fum NAD+ IDH
NAD +
NADH
Suc KGDH
KG
S CoA
NADH
Review Questions
How is ethanol detoxified (enzymes, cofactors,
products, location)?
Which metabolic pathways are affected by
alcohol-derived NADH (enzymes, metabolites)?
How does the cell process NADH?