MICROBIOLOGIE

MICROORGANISME IN CEREALE

Datorit cantitilor foarte mari ce se recolteaz, manipuleaz, transport i nmagazineaz, datorit pstrrii lor mai indelungate ca i extinderii mecanizrii operaiilor enumerate, cerealele pioase ridic uneori probleme serioase i variate dup recoltare i pn la valorificare. Cerealele pioase se stocheaz, de regul, la un coninut n umiditate de 1314,5 % ntr-un echilibru de 70-75 % umiditate relativ a aerului. Sunt ns ani i cazuri cnd depozitarea cerealelor se face la o umiditate relativ a atmosferei mai ridicat (peste 80%) sau cnd recoltarea cerealelor se face la un coninut n umiditate de 16-18 % si se depoziteaz fr o prealabil uscare. Aceste cereale creeaz mari dificulti deoarece favorizeaz dezvoltarea microorganismelor i nmulirea duntorilor. Cu toat atenia acordat culturilor de cereale , porumb i sorg pentru a se obine recolte bogate si de calitate superioar exist ani i cazuri n care pierderile provocate de diferii factori post-recoltare sunt deosebit de mari. Desi greu de apreciat, aceste pierderi, n unele ri se ridic n medie ntre 2-5 % din producia global, iar n anii nefavorabili se pot ridica i pn la 10 %. Cele mai multe pierderi sunt atribuite microorganismelor i duntorilor la care trebuie adugate i pagubele provocate de factorii abiotici. Microorganismele ajung pe seminele depozitate pe diferite ci : - unele provin din cmp i se gsesc n sau pe semine, multe din ele fiind patogene, adic se transmit prin intermediul seminelor n culturile viitoare. Aceste microorganisme sunt deci periculoase n primul rnd pentru cerealele destinate nsmnrilor, dar i pentru cele de consum pentru om i animale. Altele sunt saprofite i se instaleaz pe i n semine, cu diferite ocazii. n condiii favorabile aceste microorganisme fructific la suprafaa seminelor de unde se rspndesc n masa de semine. Ele fac parte din microflora de cmp; - alte microorganisme contamineaz seminele n timpul treieratului, al manipulrii, condiionrii i transportului, fie prin intermediul prafului ce se creeaz deasupra cmpului n urma acestor operaii, fie din combine, platforme de transport, de pe uneltele utilizate la manipulare, de la ambalajele vechi. Aceste

microorgansime pot fi patogene sau saprofite i alctuiesc grupa microflorei intermediare; - a treia categorie de microorganisme se dezvolt de regul n timpul stocrii i este constituit numai din specii de bacterii si ciuperci saprofite, cele mai multe aparinnd genurilor Aspergillus, Penicillium, Mucor, Bacillus, Psudomonas. Dezvoltarea i nmulirea lor este strns legat de coninutul n umiditate al seminelor, de umiditatea relativ i temperatura mediului nconjurtor, de prezena duntorilor. Aceas ultim categorie constituie aa numita microflor de depozit. Microflora patogen i saprofit de cmp i intermediar Este foarte bogat i este constituit, aa cum s-a artat, din bacterii i ciuperci care colonizeaz seminelor nainte de recoltare. Acestea pot afecta aspectul, calitatea i germinaia seminelor, dar numai unle produc pierderi n timpul pstrrii. Dintre bacterii, cea mai pgubitoare este Xanthomonas translucens var. cerealis. Seminele infectate de aceast bacterie sunt mai mici ca cele nenfectate, sunt zbrcite i cu dungi longitudinale sau punctioare niruite n form de dungi, de culoare brun-negricioas. La ovz a fost identficat arsura bacterian, produs de Pseudomonas coronafaciens care se transmite prin smn, n care supravieuiete pn la 2 ani. Este periculoas numai pentru ovzul de semnat. Dintre ciuperci se regsesc n depozite speciile de Tilletia, care produc mlura comun a grului (T.foelida i T. Tritici), mlura orzului (Tilletia pancicii), mlura secarei (Tilletia secalis). Toate aceste ciuperci triesc n boabele cerealelor menionate, sub form de teliospori bruni care alctuiesc pulberea de mlur. La treierat aceste boabe se sparg i pulberea de mlur se mprtie n toata masa de gru, orz, secar, fiind dus n depozite unde rezistunul sau mai muli, pn la rensmnare. Importan deosebit pentru semnat au boabele parial mlurate, care nu se sparg la treierat, au aceeai mrime cu boabele sntoase, dar la nsmnare transmit bola n cmp.

Fig 1. Boabe de gru sntoase (stnga) i infectate de Tilletia foetida (dreapta) (sursa www.agric.gov.ab.ca)

Fig 2. Spic infectat cu Tilletia controversa (sursa www.tolweb.org)

Specia cea mai pgubitoare pentru gru este ns Tilletia controversa care produce piticirea grului. Importana acestei boli const nu numai n intensificarea ei n zonele contaminate, dar i n faptul c se extinde n zonele necontaminate; de aceea trebuie luate msuri chiar de la depozitare, de a nu se amesteca loturile de gru infectat cu cele de gru neinfectat. Loturile de gru infectate cu Ustilago tritici, care produce tciunele zburtor al grului, i cele de orz infectate cu Ustilago nuda, care provoac tciunele zburtor al orzului prezint, de asemenea, inconveniente pentru materialul depozitat, destinat nsmnrii. Aceste dou boli se transmit n cmp prin intermediul seminei infectate cu miceliul ciupercilor. Tciunele mbrcat (Ustilago hordei) i tciunele zburtor negru (Ustilago nigra) ale orzului au acelai mod de infecie ca i speciile de Tilletia. Toate aceste ciuperci care produc mlura i tciunii cerealelor sunt periculoase. Cerealele contaminate cu spori de Tilletia i Ustilago n cantitate mare sunt periculoase pentru animale cnd le consum, deoarece elaboreaz toxine puternice. Cele mai rspndite i mai periculoase pentru cerealele pioase sunt speciile de Fusarium. Aceste ciuperci contribuie la scderea germinaiei seminelor, att nainte ct i dup depozitare. n anii cu primveri reci i prelungite, n care zpada stagneaz mai mult dect obinuit pe cmp, apare frecvent Fusarium nivale. Loturile de cereale infectate cu aceste ciuperci trebuie bine condiionate imediat dup recoltare, pentru a elimina ct mai multe din seminele infectate. Acestea se recunosc fiindc sunt mai mici, mai subiri i mai uoare dect boabele neinfectate, iar culoare lor este albicioas din cauza ciupercilor ce se dezvolt n interiorul i pe suprafaa boabelor. n condiii favorabile, aceste conidii germineaz i dezvolt un miceliu care se intinde pe suprafaa seminelor mai ales a celor sparte, fisurate i chiar pe cele ntregi, comportndu-se ca nite ciuperci de depozit.

Fig. 3. Boabe sntoase (stnga) i infectate cu Fusarium graminearum (dreapta) (sursa www.scarab.msu.montana )

Fig .4. Boabe de gru infectate cu Ustilago tritici (sursa www.probstdorfer.ro)

Loturile de cereale cu procente mari de boabe infectate su specii de Fusarium nu se vor depozita n amestec cu loturile neinfectate, nici n cazul cerealelor destinate nsmnrii i nici a celor destinate consumului, deoarece aceste ciuperci provoac micotoxine grave la om i animale. n general, cerealele infectate puternic cu specii de Fusarium trebuie stocate separat i vor fi dirijate spre alte scopuri. n depozitele de cereale i ndeosebi n cele de gru se mai pot ntlnii alte ciuperci patogene, periculoase pentru smn, ntre care cele de Septoria nodorum care se recunoate prin aceea c boabele infectate sunt mai mici, itave i au pe partea bombat o pat mai decolorat, uor zbrcit, adncit, iar pe suprafaa ei se dezvolt fructificaiile ciupercii sub form de punctioare negre (picnidiile). Ciuperca este periculoas pentru grul de smn. Pe seminele de orz depoziate se ntlnesc, n unii ani, ciupercile Helminthosporium gramineum i H. Sativum, iar pe cele de ovz Helminthosporium avenae. Seminele infectate sunt mai subiri i mai uoare dect cele sntoase, au n general o culoare brun-nchis. n general, boabele infectate sunt lipsite de germinaie. Helminthosporium victoriae este periculoas si pentru ovzul de consum, fiindc in anumite condiii elaboreaz o micotoxin, victorina, toxic pentru animale. Pe orez in afar de speciile de Fusarium se mai pot ntlni n depozite ciupercile Helminthosporium oryzae i Piricularia oryzae. Infecia cu prima ciuperc provoac formarea de semine mici, itave i ptate n brun. Conidiile ei ader i pe suprafaa seminelor sntoase transmind odat cu ele boala, n cmp. Ciuperca Piricularia oryzae determin formarea de semine de semine mici, itave, deformate si cu pete glbui, mrginite de o dung brun. La secar, cele mai importante ciuperci patogene provenite din cmp sunt : Claviceps purpurea care produce cornul secarei i Phialea temulenta.

Fig. 5. Spice infectate cu Claviceps purpurea; (sursa www.britanica.com)

Scleroii de Claviceps se amestec la treierat cu seminele i sunt dui n depozit. Se recunosc dup forma lor alungit-cilindric, sunt lungi de 1-2 cm, de culoare brun-vineie, tari si putin ncovoiai. Datorit alcaloizilor toxici pe care i conin aceti scleroi, amestecai n hrana animalelor le provoac acestora o boal grav a sistemului nervos. Transportati i semnai n cmp odat cu seminele, scleroii transmit boala. Gleotinia temulenta infecteaz seminele nainte de recoltare. Pe suprafaa acestora se dezvolt un miceliu alb, abundent i conidioforii cu conidii sub forma unor pustule albe. Microflora saprofit a cerealelor pioase contamineaz seminele de la formare i pn la recoltare, localizndu-se n tegumente sau chiar n esuturile mai profunde ale embrionului. n timpul treieratului, manipulrii i transportului, aceast microflor, constituit dintr-un mare numr de genuri i specii de bacterii si ciuperci, ader de semine, de fragmentele acestora ca i de cele care prezint fisuri. Dintre bacterii se ntlnesc mai frecvent speciile Erwinia herbicola aurea i Erwinia herbicola rubra, care se deosebesc ntre ele prin cularea galben-aurie sau chair rubinie a coloniilor obinute pe medii nutritive artficiale. Ambele bacterii sunt tipic epifite; ele continu s triasc si s se nmuleasc n timpul pstrrii dac umiditatea atmosferic relativ le permite. Prin respiraia lor se degaj umiditate i cldur care contribuie la apariia procesului de nclzire a cerealelor. ntruct se dezvolt ndeosebi pe seminele proaspt recoltate, prezena lor indic gradul de vechime al unui lot de semine. Alte specii de bacterii saprofite ce se pot gsii pe cereale post-recoltare sunt: Bacterium prodigiosum, ale crei colonii sunt de culoare roie pe semine i roz pe alte substraturi, apoi Bacterium fluorescens, Bacterium mesenthericus. Aceasta din urm este foarte activ n degradarea amidonului, zahrului i dextrinei. n

cantitate mare, aceast specie modific gustul i mirosul finii i deci al pinii. Este o bacterie termofil dezvoltndu-se bine ntre 35-50C, contribuid astfel la ncingerea cerealeor n depozite. Dintre Actinomycete se izoleaz destul de frecvent de pe seminele de cereale, dup recoltare i n primele zile dup depozitare, Streptomyces albus si Streptomyces griseus care nu prezint importan practic. Cele mai numeroase genuri i specii sunt cele de ciuperci. Dintre cele care provin din culturi, infectnd boabele de la formare si pn la coacerea n lapte, sunt speciile de Cladosporium, Alternaria i Helminthosporium. Ele se localizeaz de regul n zona embrionar, brunificnd esuturile. Procentul ridicat de astfel de boabe altereaz calitatea finii datorit particulelor de esuturi nnegrite. Dintre seminele de cereale recoltate, se mai pot izola numeroase alte genuri si specii de ciuperci saprofite intre care amintim : Aternaria alternata, Curvularia spp., Helminthosporium spp., Botrytis cinerea, Mucor spp. Compoziia microflorei de cmp i cea intermediar variaz n funcie de condiiile climatice ale anului i zonei respective ct i n funcie de coninutul n umiditatea al boabelor.n perioada recoltrii, apoi de soiul de cereal si de sensibilitatea lui. Dac continutul de umiditate al seminei se menine ridicat i dup nmagazinare, aceste ciuperci persist i chiar continu s se dezvolte i s acioneze, un timp mai mult sau mai puin ndelungat, nfluennd negativ calitatea seminelor. Condiiile din spaii nchise fiind diferite de cele din are liber, microflora se modific dup un anumit timp, locul ciupercilor fiind preluat trepata de drojdii sau de ciuperci asemenea drojdiilor ( Candida sp., Pullularia sp., Monascus purpurens). Aceste ciuperci nu sunt n general vtmtoare pentru semine , totui prin respiraia lor produc umiditate i cldur suficient pentru dezvoltarea mucegaiurilor de depozit. Microflora de depozit Cerealele pioase se pstraz pentru diferite scopuri (cosum, export, nsmnare, industrializare), n diferite tipuri de depozite. Este cunoscut c, la bazele de recepionare sunt aduse loturi de cereale cu umiditi i grad de impuriti diferite, cu procente mai mici sau mai mari de semine crpate, fragmentate sau infectate, provenite din cmp dup recoltare. Prin amestecarea la ntmplare a loturilor calitativ bune cu cele necorespunztoare se favorizeaz dezvoltarea i nmulirea insectelor i mucegaiurilor de depozit care produc mari pagube produciilor. Dup uscarea cerealelor i aducerea lor la un coninut de umiditate coerspunztor (13-14,5%), microflora de cmp i mai ales cea internediar se reduc

treptat. Dac ns umiditatea crete din nou, aceast microflor este nlocuit de speciile de ciuperci de depozit, din care fac parte genurile de : Aspergillus, Penicillium, Mucor, Absidia, Paecilomyces, primele dou fiind foarte bogate n specii. Numrul speciilor de Aspergillus indentificate pe gru, orz, secar, ovz este de aproximativ 30, ntre cale cele mai frecvente sunt : membrii ai grupurilor Aspergillus flavus oryzae, A. glaucus, A. candidus, A. niger. Dintre speciile de Penicillium s-au izolat aproximativ 60 de specii printre care : P. frequentans, P. spinulosum, P. purpurogenum, care produc mucegaiuri verzi, albastre, cenuii de diferite nuane i intensiti. Dintre Mucoraceae sunt frecvente pe seminele de cereale : Mucor racemosus, M. pusillus, M. spinulosum, apoi Absidia corymbifera, Rhizophus stolonifer. Aceste ultime specii apar mai trziu, ctre o faz de degradre mai accentuat a seminelor. Ele fac parte din microflora termofil, care provoac ncingerea cerealelor umede. Porumbul este o cultur de o importan deosebit, el constituie hrana de baz a animalelor, este consumat mult i de om sub diferite forme i este utilizat n industria alimentar. Ca i celelalte cereale, porumbul i sorgul aduc din cmp un mare numr de ciuperci patogene i saprofite care contribuie ntr-o msur mai mare sau mai mic la degradarea lor dup recoltare, n funcie de coninutul n umiditate al boabelor. Se pot regsi pe tiuleii sau boabele de porumb depozitate teliospori de Ustilago maydis, care provoac tciunele comun al porumbului, i de Sorosporium holci-sorghi, care produce tciunele prfos sau tciunele paniculelor i tiuleilor de porumb. Desi nu provoac daune n timpul pstrrii, aceti doi tciuni prezint importan pentru porumbul de smn, deoarece se transmit n culturi. Prezint importan i pentru porumbul de consum, deoarece n cantiti mari cele dou ciuperci pot provoca tulburri n sntatea animalelor. Mult mai periculoas este fuzarioza tiuleilor de porumb i a paniculelor de sorg provocat de mai multe specii de Fusarium, i anume : F. moniliforme, F. Roseum f.graminearum, F. Roseum f. avenaceum. La porumb F. moniliforme infecteaz tiuleii sub forma de insule (de diferite mrimi) risipite pe oricare parte a tiuleilor i produce crparea boabelor. Acestea sunt de culoare albicioas, rozdeschis sau violet-deschis, rmn mici i itave, cu aspect uscat i sunt lipsite total de germinaie.

Fig.6.Boabe de porumb infectate cu Fusarium moniliforme. (sursa www.apsnet.ro)

Fig.7. tiulete de porumb infectat cu Fusarium graminearum (sursa www.up.ac)

Fusarium roseum f. graminearum i f. avenaceum ca i F. tricinctum f. poae produc putrezirea aproape total a tiuleilor, ncepnd de la vrf sper baz, iar miceliul ciupercii i boabele au o culoare roie-viinie-deschis sau rubinie-nchis. Boabele acoperite de miceliu brune, seci i putrezite uscat. Dac infecia a fost puternic i s-a produs de timpuriu, pnuile care nvelesc tiuleii rmn lipite de boabe i prezint pete negre de diferite mrimi. Boabele infectate sunt lipsite de germinaie, iar valoarea lor nutritiv este foarte sczut. Porumbul provenit din loturi infectate cu specii de Fusarium trebuie foarte bine sortat, chiar de la recoltare sau nainte de uscare si mai ales nainte de a fi introdus n magazii. De foarte multe ori, conidiile i miceliul de Fusarium se gsesc i pe boabele cu aspect sntos, dar care au provenit dintr-un lan infectat.sau care s-au contaminat dup recoltare. n timpul pstrrii, aceste conodii i miceliul contribuie la mucegirea sau ncingerea porumbului, ca i la pierderea germinaiei. n anii secetoi, se poate constata pe porumbul din magazii, hambare ciuperca Nigrospora oryzae, care produce putrezirea uscat a tiuleilor i boabelor. Adus din cmp, aceast ciuperc se poate extinde n timpul

manipulrii, transportului i nmagazinrii, datorit conidiilor sale mici, negre i aproape sferice, dezvolate la baza baobelor i n alveloe. tiuleii infectai au boabele itave care joac n alveloe, se rup uor, din cauz ca rahisul este putred, iar pe suprafaa de ruptur se observ o pulbere fin, neagr de conidii.. Dou dintre cele mai pgubitoare ciuperci ale tiuleilor i seminelor de porumb sunt : Helminthosporium maydis i Helminthosporium carbonum. Ele infecteaz porumbul n cmp, provocnd uscarea frunzelor i putrezirea tiuleilor, transmindu-se prin smna infectat sau contaminat n timpul manipulrii.

Fig. 8. tiulei infectati de Helminthosporium maydis (sursa www.forestryimages.org)

Fig.9.tiulei infectai de elminthosporium carbonum (sursa www.aces.uiuc.edu)

Cele mai practice msuri de prevenire sunt neamestecarea loturilor de porum infectate cu cele neinfectate, precum i sortarea atent a tiuleilor ncepnd de la recoltare i n tot timpul operaiilor. tiuleii infectai- ndeosebi de Helminthosporium carbonum- prezint pete negre cu aspect prfos de diferite dimensiuni. Boabele de pe tiuleii infectai sunt lipsite de germinaie i nici nu se pot consuma. Diferenierea dintre cele dou specii se poate face numai la microscop, dup mrimea, culoarea i forma conidiilor. Alte dou specii de ciuperci semnalate pe tiuleii de porumb provin din cmp i se regsesc n depozite. Ele sunt : Curvularia inaequalis i Curvularia intermedia, care produc pete negre pe tiulei. Miceliul lor se dezvolt n i pe boabe izolate sau grupate ocupnd portiuni destul de mari din tiulei. Boabele infectate itvesc, pierd facultatea germinativ, tranformndu-i coninutul ntr-o mas prfoas. La un atac puternic, ntregul tiulete putrezete uscat i devine crbunos. Cele dou specii se deosebesc de asemenea sub microscop. tiuleii cu atac de Curvularia trebuie eliminai de la recoltare sau nmagazinare, deoarece, pe lng c determin pierderi cantitative i calitative n timpul pstrrii, influeneaz germinaia seminelor i modific gustul porumbului.

La sorg se ntlnesc mai frecvent n depozite specii de Fusarium, aceleai ca la porumb, precum i teliospori de Sorosporium sorghi care produce tciunele. Este pgubitoare numai pentru sorgul de smn, deoarece transfer boala n viitoarele culturi. Ciuperci de depozit. Ca si la celelalte pioase, porumbul i sorgul cu coninut ridicat de umiditate (peste 14%) i netratat sunt frecvent invadate de mucegaiuri diverse, din categoria mocroflorei intermediare, care polueaz seminele dup recoltare, si din aceea a mucegaiurilor de depozit, care se dezvolt pe porumb la ctva timp dup recoltare. Ciupercile se clasificat n 4 categorii n funcie de frecvena cu care apar : foarte frecvente, frecvente, rare i ocazionale. Din prima categorie - foarte frecvente fac parte numeroase specii de Aspergillus (A. terreus, A. restrictus, A. flavus, A. candidus ) i de Penicillium apoi specii de Fusarium (F. moniliforme, Candida sp., ). Din grupa a doua frecvente au fcut parte alte specii de Aspergillus (A. glaucus, A. ochraceus) i Penicillium (P.purpurogenum, P. frequentans), drojdii diverse, diferite specii de bacterii i de Actinomycete. n grupa a treia cu frecven redusa s-au identificat Neurospora sitophila, Epicoccum purpurascens, Veticillium tenerum, Cladosporium herbarum . Cu totul ocazional s-au izolat ciupercile Monascus purpureus, Botrytis cinerea i Aspergillus vesicolor. Ca i n cazurile cerealelor pioase, cipercile de depozit, sunt cele mai vtmtoare. Ele, degradnd boabele de porumb pn la putrezire , infleneaz negativ germinaia, altereaz gustul i mirosul porumbului, l ncinge i l mucegiete. n concluzie, pstrarea porumbului i sorgului cu un coninut n umiditate mai mare de 14% la o umiditate relativ a aerului mai ridicat de 70 % i la o temperatur mai mare de 2-3 C, ca i lipsa de aerisire duc n mod inevitabil la dezvoltarea mucegaiurilor. n afar de ciupercile patogene i de mucegaiurile de depozit, n masa de porumb depozitat se ntlnesc i unele tulburri (boli) neparazitare care depreciaz caliatea porumbului de consum sau de nsmnat expunndu-l totodat invaziei mai rapide a mucegaiurilor de depozit. Printre acestea amintim de Popped-Kernel (sau boabe nflorite) i de silk-cut sau crparea transversal a boabelor. La porumbul depozitat n tiulei, crparea transversal nu se observ dect dup ruperea tiuletilor, deoarece fisurarea transversal a tegumentului se petrece la nivelul ieirii bobului din alveol. Un mare neajuns al boabelor crpate transversal, de altefel ca i a celor nflorite, este c permit mucegaiurilor s se dezvolte mai bine i mai rapid, provocnd putrezirea endospermului n timp foarte scurt.

Apariia crpturii transversale a cariopselor de porumb este cauzat de presiunea intern ce se creeaz n endosperm ca urmare a unei absorbii brute i n cantitate mare de ap cnd, dup o perioad mai lung de secet, survine o ploaie sau o irigaie abundent. Aceat boal este dup prerea celor mai muli cercettori de natur genetic, fiind frecvent numai la unii hibrizi sau linii. Smna ce prezint boabe cu fisuri nu trebuie pstrat n depozite dect pe timp scurt.