DETERMINAREA BACTERIILOR SPORULATE AEROBE IANAEROBE DEFINI II Bacteriile sporulate aerobe sunt bacterii care apar in genului Bacillus

lus . Sunt bacteriiGram+, mobile, cu celule de forma cilindrica, cu dimensiuni diferite, cu capeteledrepte sau rotunjite, singulare sau asociate in unghiuri ( Bacillus subtilis ) sau lan uri.Sporii nu se coloreaz prin colorare Gram, sunt sferici sau ovali, cu diametru mai micsau egal dect al celulei, fiind pozi iona i central sau terminal. Bacteriile sporulate anaerobe sunt bacterii care apar in genului Clostridium. Suntbacterii Gram+, mobile, cu celule de forma cilindrica cu dimensiuni mai mari dectcele din genul Bacillus , singure sau in lan uri, care formeaz endospori dispu icentral sau terminal, care dau celulelor forma de suveic sau paleta. Tipurile de produse alimentare pentru care se recomand analiza sunt prezentate nAnexa 1.PRINCIPIUL METODEI Determinarea microorganismelor sporulate aerobe

i anaerobe estimeaz num rulmicroorganisme in stare sporulata prezente per g sau ml de produs.Proba de analizat sau dilu ii succesive se supun pasteuriz rii la 80C timp de 10minute, pentru a distruge toate formele vegetative , apoi se r ce te si se inoculeaz in medii specifice, cultivarea realizndu-se in condi ii particulare in condi ii aerobesau anaerobe. MATERIALE I ECHIPAMENTE SPECIALE 1. Baie de ap reglabil la 45C i la 80C2. Stomacher pH-metru.3. Pl ci Petri.4. Termostat reglabil la 37C5. Anaerostat sau Recipient pentru cultivare in anaerobioza6. Num r tor de colonii7. Reactivi si medii de cultura: mediu de diluare (ap peptonat ), medii decultur : (Anexa 2),. DESCRIEREA MODULUI DE LUCRU Testul se efectueaz

n conformitate cu instruc iunile de mai josManipularea e antioanelor n laborator, nainte de analiz , cu excep ia produselor alimentare care nu necesit condi ii speciale de depozitare, probele se p streaz fie la frigider la temperatura de0-5C, fie congelate, n func ie de natura produsului. Prepararea mediilor de cultur Se preg te te mediul Trypticase Soy Agar n cantit i corespunz toare i sesterilizeaz .Se tempereaz mediul de cultur ntr-o baie de ap la temperatura de 45C,asigurndu-se c nivelul apei este de 1 cm peste nivelul de mediu din eprubete.Se cur

 zona de lucru cu un dezinfectant adecvat.Se marcheaz n mod clar pl cile Petri cu num rul probei, dilu ia i datatermostat rii. Preg tirea dilu iilor Se prepar un raport de dilu ie de 1:10 a produsului alimentar, prin suspensionare ade 10g (ml) produs n 90 ml ap peptonat . Probele se omogenizeaz :- timpul de amestecare nu trebuie s dep easc 2.5 min, n scopul preveniriisupranc lzirii.- n cazul produsele alimentare care au tendin a de a spuma, este indicat agitarea moderata.- dilu iile se omogenizeaz prin men

 inere pe vortex ( de 25 de ori, printr-un arcde 30 cm, n aproximativ 7 sec).Pentru fiecare prob de analizat, se pipeteaz 20-25 ml din dilu ia 10 -1 ntr-oeprubet steril . Se plaseaz eprubetele n baia de ap la 80 C. si se men in timp de20 de minute. Dup r cire se prepar dilu ii (dilu ii recomandate sunt de 10 -1 ,10 -2 , i10 -3 ). Inocularea si termostatarea probelor Cu o pipet steril

se transfer n fiecare plac Petri steril , cte 1 ml prob deanalizat.Se toarn n fiecare plac Petri cte cca. 15 ml mediu de cultur cu temperatura de455C.Mediile se uniformizeaz rapid, prin rotirea pl cilor n plan orizontal, apoi sunt l sate n repaus pn se produce solidificarea.Dup solidificarea mediului pl cile se termostateaz cu capacul n jos.Pentru bacteriile aerobe sporulate , pl cile se termostateaz la 35 o C 0.5 o C timpde 48 2 orePentru bacteriile anaerobe sporulate , pl cile se termostateaz 35 o

C 0.5 o C timpde 48 2 ore. ntr-un sistem anaerob de cultivare cum ar fi sistemul BBL Gaspack(Anexa 3). Num rarea coloniilor Coloniile se num r imediat dup perioada de termostatare.Dac este posibil, se selecteaz pl cile cu 20-200 colonii. REZULTATE Num rul de bacterii formatoare de spori per ml sau gram de produs se calculeaz cuurm toarea formula:Pl cile din dou dilu ii succesive con in 25 250 colonii pe plac : () d nnC mlgufc += )1,0( / 21

n care: C = suma coloniilor num rate n toate pl cile re inute;n1 = num rul de pl ci re inute din prima dilu ie;n2 = num rul de pl ci re inute din a doua dilu ie succesiv ;d = factor de dilu ie corespunz tor primei dilu iiRezultatele se exprim printr-un num r de forma (1,0 9,9)10x, unde x este putereaatribuit num rului 10

GHIDUL DE BUNE PRACTICI DE PRODUCIE LAPROCESA REA PRIN

DESHIDRAT ARE A LEGUMELO R I FRUCTELOR

a fost elaborat de:

Compania de Cercetri Aplicativei Investiii

(partener 2) n colaborare cu

S.C. I.C.P.E. Bistria S.A.

(partener 6).Ghidul cuprinde

71 de pagini, a fost tiprit n format A5 ( ISBN978-606521-066-0) i

este structurat n 5 capitole