Examenul de laborator al puroiului. Identificarea S .aureus Obiective: 1.Definirea termenilor :puroi, supuraie. 2.

Precizarea agenilor etiologici implicai n producerea supuraiilor. 3. Explicarea modalitilor corecte de prelevare i transport al puroiului. 4. Enumerarea etapelor diagnosticului de laborator al puroiului. 5. Descrierea testelor de identificare ale stafilococilor. 1. Puroi=exudat fibrinos care conine leucocite i microorganismul implicat. Supuraie =formarea puroiului. 2. Etiologie ( cteva exemple) Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes Escherichia coli Klebsiella spp. Enterobacter spp. Pseudomonas aeruginosa 3. Prelevarea din colecii purulente. -se recolteaz prin puncie aspiraie cu un ac suficient de gros adaptat unei seringi etane. - seringa anaerob- pentru anaerobi- asigur supravieuirea ~30 minute. -puroiul se transport la laborator n maxim 1-2 ore ( nu i pentru anaerobi) -se utilizeaz medii de transport permite supravieuirea cteva ore. 4 .A. Examenul macroscopic : -consistena (cremos, cazeos) -culoare ( galben, albastru verzui) - miros B. Examen microscopic: - coloraie Gram i/sau Ziehl Neelsen Examenul citologic :- prezena leucocitelor Examnul bacterioscopic : -se apreciaz semicantitativ prezena bacteriilor Foarte rare : 1/50-100 cmpuri Rare 1/10-20 cmpuri Numeroase 1-10/cmp - categoria microscopic C. Cultivarea probelor Izolri calitative din puroi i probe biopsice Medii utilizate : geloz snge. MaConkey, bulion tioglicolat Incubare : 37 grade, 5-10% CO2, 24-48 ore.

D. Identificarea agentului etiologic E. Antibiograma.

Identificarea S. aureus Caractere microscopice : coci gram pozitivi, dispui izolat, n perechi, scurte lanuri, grmezi, imobili, nesporulai. Caractere de cultivare : colonii S mari, rotunde, bombate, pigmenate diferit (portocaliu, galben, alb). -pe geloz snge sunt frecvent hemolitice, - cresc pe medii cu sare ceea ce permite izolarea din produse patologice contaminate . Testul catalazei Principiu: Catalaza este o hemoprotein care descompune peroxidul de hidrogen n ap i oxigen. Bacteriile care o produc se protejeaz astfel de efectele letale ale peroxidului de hidrogen aprut ca metabolit final n metabolismul aerob al carbohidrailor. Interpretare: pozitiv :apariia bulelor de gaz pn la efervescen negativ: absena bulelor Pentru S aureus -testul catalazei pozitiv Testul coagulazei Principiu peste 96% din tulpinile de S aureus coaguleaz plasma prin: -activarea unui factor plasmatic similar trombinei: coagulaza liber -aciunea direct asupra fibrinogenului: coagulaza legat de peretele celular. Interpretare: pentru testul pe lam pentru coagulaza legat : pozitiv- aglutinare n 15-20 sec negativ : absena aglutinrii n 2-3 minute ( necesit confirmare) pentru testul n tub pentru coagulaza liber: pozitiv : coagulare , indiferent de gradul ei ( n mas, vl de fibrin) negativ :absena cheagului Lizotiparea Principiu:are la baz fenomenele de lizogenie i de specificitate a receptorilor fa de anumii bacteriofagi. Utilitate- n studiile epidemiologice

Coci gram pozitivi Testul catalazei (+) Genul Staphylococcus Testul coagulazei (+) S. aureus (-) Stafilococi coagulaz negativi Sensibilitatea la Novobiocin S- S.epidermides R- S .saprophyticus Genul Streptococcus (-)

n sal se gasesc: Cultur S.aureus Frotiuri stafilococ puroi Testul catalazei :apa oxigenat, pipet, beioare, lame Testul coagulazei : martor pozitiv, martor negativ, tulpina de testat Antibiograma, tabel de interpretare, rigle.