SPECTROMETRIE de masa (MS)

Determinarea masei moleculare si a formulei moleculare Nu presupune interactia cu radiatia electromagnetica => spectrometrie O cantitate mica de proba e introdusa intr-un aparat numit spectrometru de masa unde e vaporizata si apoi ionizata in urma indepartarii unui electron din fiecare molecula. Cea mai comuna metoda de ionizare consta in bombardarea moleculelor vaporizate cu un flux de electroni de inalta energie = ionizare prin impact electronic (EI - Electron Impact) De obicei se foloseste un flux de aprox. 70 eV (electron volts, 1 eV = 23.05 kcal/mol) Daca un electron care are energie de 10eV se ciocneste cu o molecula organica, energia transferata ca rezultat al ciocnirii e suficienta pentru a indeparta un electron al moleculei, producand un ion molecular Ionul molecular e un radical cation, avand un electron neimperecheat si sarcina pozitiva

A B + ecurs 5

A B + 2 eradical cation (ion molecular)

1

filament flux de electroni

molecule si fragmente neutre, ioni negativi

spre pompa de vid magnet analizor magnetic

proba tub analizor molecule frita neutre incarcata camera de pozitiv vaporizare fante de focalizare si accelerare

magnet

ioni incarcati pozitiv (in functie de m/z: usor->greu) fanta de iesire ioni colector

camera de ionizare

spectrometru de masa

curs 5

inregistrator

 Pierderea unui electron dintr-o molecula slabeste legaturile din molecula, astfel ca multi dintre ionii moleculari se disociaza (fragmenteaza) in cationi, radicali, molecule neutre si alti cationi radical.
e entar m g a r f

A + B A + B

A B

fragm enta re

Se rup cel mai probabil legaturile cele mai slabe si cele care duc la formarea celor mai stabili produsi. Colectorul va inregistra numarul relativ de fragmente cu un anume m/z care trec prin fanta. Taria campului magnetic este crescuta treptat astfel incat fragmentele cu valori m/z tot mai mari sa treaca prin tub si sa iasa prin fanta. Spectrometrul de masa inregistreaza spectrul de masa, un grafic al abundentei relative a fiecarui fragment in functie de valoarea sa m/z. Pentru ca sarcina (z) a majoritatii fragmentelor care ajung la colector e +1, valoarea m/z coincide cu masa moleculara a fragmentului.

!! Doar speciile incarcate pozitiv sunt detectate si separate la colector !!

curs 5 3

Spectre de masa si fragmentari

pic de baza

abundenta relativa

abundenta relativa

ion molecular (M)

reprezentare grafica sau tabelara ion molecular da masa moleculara pic de baza 100% picuri de fragmentare
curs 5 4

Impact electronic

ion molecular

Spectrul de masa da informatii structurale despre un compus pentru ca valorile m/z si abundenta relativa a fragmentelor depind de taria legaturilor din ionul molecular si de stabilitatea fragmentelor.

ion molecular

curs 5

M-29 M-15

abundenta relativa

M M+1

ion molecular

picul M+1 datorat izotopilor de 13C (98.89% 12C, 1.11% 13C) in consecinta, putem determina numarul de atomi de C din molecula din abundenta picului M+1 Nr. atomi C = (abundenta relativa a picului M+1)/(0.011 * abundenta relativa a picului M)
curs 5 6

Izotopi in MS
Element Carbon Hidrogen Azot Oxigen Sulf Fluor Clor Brom Iod Valoarea m/z se calculeaz cu masele izotopice i nu cu masele atomice relative ale elementelor. picul M+2 devine semnificativ in cazul compusilor cu clor si brom
curs 5 7

Abundenta relativa a izotopului

M : M+2 3:1 1:1

Determinarea masei moleculare si a formulei moleculare

Prin folosirea unor spectrometre de inalta rezolutie se poate determina masa moleculara exacta a unui fragment/ion molecular cu o precizie de 0.0001 uam (unitati atomice de masa) => putem determina masa moleculara a compusului exemplu pentru compusi cu masa nominala 122 uam:
Formula moleculara Masa moleculara exacta (uam) C9H14 122.1096 C7H10N2 122.0845 C8H10O 122.0732 C7H6O2 122.0368 C4H10O4 122.0579 C4H10S2 122.0225

Izotop
1H 12C 14N 16O

Masa 1.007825 uam 12.00000 uam 14.0031 uam 15.9949 uam

Izotop
32S 35Cl 79Br

Masa 31.9721 uam 34.9689 uam 78.9183 uam

curs 5

Fragmentarea gruparilor functionale

Halogenuri de alchil picuri egale la 2 unitati m/z diferenta atom de brom prezent

abundenta relativa

curs 5

 picuri in raport M : M+2 = 3 : 1 atom de clor prezent

abundenta relativa

scindare heterolitica

scindare homolitica (scindare )

curs 5

10

 Eteri abundenta relativa Sec-butil-izopropileter scindare

scindare

scindare
curs 5 11

carbon

 Alcooli abundenta relativa

M-18

scindare

scindare
carbon

Fragmentare oniu

R CH2 CH2OH

R CH2

CH2 OH

H2C

OH

curs 5

m/z=31

12

 Cetone
O H3C CH2 CH2 C CH3 -e
-

O H3C CH2 CH2 C CH3

m/z = 86

H3C CH2 CH2

H3C C O
m/z = 43

2-pentanona

H3C CH2 CH2 C O

m/z = 71

CH3

Transpozitia McLafferty ioni de rearanjare

Transpozitia McLafferty alte fragmentari specifice

clorobenzen

cation fenil m/z = 77

curs 5 13

 alte fragmentari specifice

abundenta relativa

cation tropiliu

curs 5

14

 alte tehnici in spectrometria de masa a. IONIZAREA CHIMICA (C.I. Chemical Ionisation) Bombardarea moleculei de analizat cu ionii rezultati la impactul electronic al unui gaz pur (metan, izobutan) energii inferioare impactului electronic, ionii moleculari sunt mai rezistenti. b. IONIZAREA CU SPRAY DE ELECTRONI (E.S.I. Electrospray Ionisation) Solutia compusului e trecuta (la presiune atmosferica si debit mic) printr-o capilara aflata in camp electric puternic (3 6 kV), transformandu-se in picaturi foarte fine (spray) incarcate electric. Pentru molecule polare, proteine, polimeri. c. F.A.B. (Fast Atom Bombardment) Solutia compusului intr-o matrice (ex. glicerina) e bombardata cu un fascicul de atomi neutri sau ioni pozitivi de argon de energie inalta. d. M.A.L.D.I. (Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionisation) Compusul e depus intr-o matrice ca solid cocristalin pe o suprafata metalica. Aceasta e iradiata in vid cu laser. Absorbtia de energie de catre moleculele matricei produce sublimarea cristalelor si ionizarea compusului. Pentru compusi cu molecule (si mase) mari

curs 5

15